痰结核分支杆菌培养的2种前处理方法对比实验

中国防痨杂志

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经验介绍

痰结核分支杆菌培养的2种前处理方法对比实验

张帅清1

作者单位:1 河南省三门峡市预防保健中心 三门峡 472000; 收稿日期:2002-06-03。

痰结核分支杆菌培养的前处理方法直接关系到培养结果阳性率及阳性价号划分。理想的前处理方法应是既对结核杆菌损伤小,又使结核杆菌与痰中有机物彻底分离,并且对工作人员传染性小。为摸

索出较理想的前处理法,对不含防腐剂涂片 +、++!痰标本分别使用 离心前处理法!和 国际前处理法!后培养,观察效果。

一、实验方法

国际前处理法!是指按GB15987-1995∀传染性肺结核诊断标准处理原则#中规定的前处理法。碱处理(用于酸性罗氏培养基和3%小川培养基):取痰标本1mL 加2%氢氧化钠2~4mL 室温30min 其间振荡2~3次。酸处理法(用于改良罗氏培养基和丙酮酸钠培养基):取痰标本1mL 加2%硫酸2~4mL 室温30min 其间振荡2~3次。 离心前处理法!是指:取痰标本1mL 加2%硫酸或氢氧化钠2~4m l 室温15min 其间振荡2~3次,然后3000r/min 离心10min 后倾去上清液,留下离心管底沉淀物,用1mL 无菌注射器每次吸0.5m L 无菌生理盐水连续清洗沉淀3次以除去杂质及酸、碱物,使沉淀呈中性,第四次注入0.5mL 无菌生理盐水后用针头搅拌沉淀物,然后吸取0.1mL 接种于国标中任何一种结核杆菌培养基均可。

二、实验结果

对涂片 +!不含防腐剂的48份痰标本分别采用 国际前处理法!, 离心前处理法!后培养结果发现: 离心前处理法!培养阳性率为100%, 国际法前处理!培养阳性率为87.5%。2种前处理法培养

阳性率比较: 2

= 4.17,P <0.05,有显著性差异,即:48份不含防腐剂涂片 +!的痰标本用 离心前处理法!培养阳性率高于用 国际前处理法!。

对涂片2+的不含防腐剂的32份痰标本分别采用 国标前处理法!与 离心前处理法!后培养结果阳性率: 离心前处理法!为100%, 国标前处理法!为93.8%。2种前处理法培养阳性率比较: 2

=0.5,P >0.25无差异。即:涂片 ++!的不含防腐剂的32份痰标本采用 离心前处理法!培养阳性率同用 国标前处理法!无差异。

三、讨论

离心前处理法!同 国际前处理法!相比多了 离心!和 冲洗沉淀物!这两步。 离心!可使结核分支杆菌与痰液化液分离开浓缩于管底,使结核菌比国标前处理法更纯,更集中,因而对不含防腐剂涂片价号小的 +!痰标本培养阳性率高。 冲洗沉淀!可使结核杆菌接近于中性可接种任何结核杆菌培养基,不必像国际法那样按酸、碱不同处理而选择不同的培养基。

对于加有防腐剂的痰标本,1999年卫生部疾病控制司、卫生部医政司编∀全国结核病防治工作手册#已明文规定采用 离心前处理法!,后培养。

离心前处理法!需要离心机和专用的离心管,而且容易产生气溶胶,因此建议对不含防腐剂菌量少涂片为 +、∃、-!的痰标本培养时采用 离心前处理法!,而对不含防腐剂涂片 ++!及以上痰标本培养时采用 国标前处理法!。

324 2003年10月 第25卷第5期