5种产地苍术提取物主要药理作用比较研究
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lancea(Thunb.)DC. 或 北 苍 术 Atractylodes chinenis 溃疡及对胃、小肠动力学的影响进行了比较研究,探讨中药材
(DC.)Koidz 的干燥根茎。
产地与药效学之间的关系。
《中国植物志》[1]将以上两种苍术并入苍术 A.lancea, 1 材料
认为是一个种,拉丁名均作 A.lancea 的异名。本文对 5 种产 1.1 受试样品(见表 1)
在于挥发油中,不同产地苍术挥发油对每种菌的 MIC 有差异。
按照每种菌的 MIC 值由小到大积分总体评价 5 种产地苍术挥
发油抑菌作用,由强到弱排序依次为陕西太白苍术、陕西黄龙
苍术、湖北罗田苍术、河北围场苍术、江苏丹徒苍术。
5 种产地苍术 70%乙醇提取物对无水乙醇、0.6mol/l HCl
地苍术提取的挥发油、去挥发油后水提取物的抑菌作用进行 1.2 菌种
表 1 5 种产地苍术样品名称来源
商品名 北苍术 北苍术 北苍术 茅苍术 南苍术
原植物拉丁学名
产地
A.lancea(Achinensis) 河北围场
A.lancea(Achinensis) 陕西黄龙
注:同种菌抑菌浓度与江苏丹徒苍术比≤2 个稀释度*P <0.05,<3 个稀释度**P <0.01
表 4 5 种产地苍术水提取物体外抑菌浓度比较
产 地
MIC(mg 生药/ml)
抑菌强度
金葡 乙链 绿脓 大肠 总排序
江苏丹徒 125 >500 62.5 250
2
河北围场
>16.67
2.08
1.04 41.67 8.33 83.33 166.67
4
青霉素 u/ml 0.49
0.12
0.25 7.80
0.49 15.60 15.60
链霉素 ìg/ml 31.25
1.95
7.80 500
250
50.0 250
东经度 117.5° 110° 107.5° 119.5° 115.5°
采样时间 1998.7 1998.11 1998.9 1998.10 1998.11
表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、甲型(A)溶血性链球菌、 乙型(B)溶血性链球菌、肺炎双球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、 肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种、浅黄奈瑟氏球菌,由本所提供。 1.3 动物 昆 明 种 小 鼠 , ♀ ♂ 兼 用, 但 每 批 实 验 用 同 一 性 别, 体 重 22g ± 2g,一 级 ,中 国 医 学 科 学 院 实 验 动 物 中 心 提 供, 合 格 证 号:医动字第 01-3001 号。 1.4 试剂 营养肉汤:北京海淀区微生物培养基制品厂,BR,批号: 980110。硫酸阿托品注射液:无锡市第四制药厂生产,批号: 970102。其他化学试剂均为分析纯,北京化工厂生产。 2 方法与结果 2.1 苍术挥发油、水提取物、70%乙醇提取物制备 2.1.1 挥发油提取方法及水提取物制备 分别取 5 种产地 苍术粗粉 500g,加入 8 倍量水,用挥发油提取器水蒸馏,直至 提尽挥发油,收集挥发油并计算得率,见表 2。取上述提取挥 发油 8h 的水液,过滤浓缩至小体积,真空干燥成粉为水提取 物,得率见表 2。 2.1.2 70%乙醇提取物制备 分别称取 5 种产地苍术粗粉各 △自然科学基金重点资助课题(№:39730500)
—
x±
s
)
组 别
剂量 源自文库g/kg)
n
溃疡面积(mm2) 溃疡抑制率(%)
对照组
-
无水乙醇造型组 -
丹徒苍术+
10
无水乙醇造型 20
10 0 12 25.83±5.73## 6 25.73±8.53 6 7.00±3.16**
- 0 0.39 72.90**
溃疡抑制率= 造型组溃疡面积-给药组溃疡面积 ×100% 造型组溃疡面积
2.3.2 对 0.6mol/l HCl 致小鼠胃溃疡的作用 动物禁食、 分组、给药与 2.3.1 方法同,于给药 60min 后 ig 0.6mol/L HCl 0.08ml/10g 体重。给 mol/l HCl 60min 后按 2.3.1 方法取胃 ,计量溃疡面积及统计处理。结果见表 6。 2.4 对正常小鼠胃排空及小肠推进功能的影响[4] 昆明种小鼠,体重 22g±2g,每批实验用同一性别,禁食 24h 后分组给药。5 种产地苍术 70%乙醇提取物给药剂量为 10g/kg,ig 阳性对照药阿托品为5mg/kg S.C,给药1h后 ig 0.1% 酚红 0.8ml/只,再 30min 后处死动物,开腹结扎贲门取出胃、 肠,并将小肠均分为 5 段,分别将胃及 5 段小肠放入装有 3ml0.1M NaOH 的试管中,消化 72h 后加入 20%三氯醋酸 1ml 沉淀蛋白,经 3 000r/min 离心 10min,取上清液 1ml,0.5 mol/l
所致胃溃疡的抑制作用,按作用由强到弱的排序抗无水乙醇
胃溃疡依次为陕西黄龙苍术、江苏丹徒苍术、湖北罗田苍术、
陕西太白苍术、河北围场苍术;抗 0.6mol/l HCl 溃疡作用排
序 10g/kg 组太白苍术抗溃疡作用优于围场苍术,其余各
表 5 5 种产地苍术 70%乙醇提取物对无水乙醇致小鼠
胃溃疡的影响(
·28· 中国中医药信息杂志 2001 年 2 月第 8 卷第 2 期
察判断结果。有细菌生长孔呈现混浊,未见混浊则为无细菌生 小抑菌浓度(MIC)。结果见表 3、表 4。
长,以无细菌生长的药物最低浓度作为该药对该试验菌的最
罗田苍术+ 无水乙醇造型 太白苍术+ 无水乙醇造型 黄龙苍术+ 无水乙醇造型
10 6 22.33±17.73 20 6 8.40±6.73** 10 6 10.83±8.82* 20 6 17.92±9.40 10 6 10.50±6.35* 20 6 4.50±2.81**
提 要 目的:比较不同产地苍术的内在质量及药效学差别。方法:对 5 种产地苍术挥发油含量、水提取物
得率、体外抑菌作用进行了比较,对 5 种产地苍术 70%乙醇提取物抗化学物质引起胃溃疡及对胃、小肠动力学的影
响进行了比较研究。结果:不同产地苍术挥发油含量及抑菌作用有明显差别;不同产地苍术 70%醇提物抗胃溃疡
A.lancea(Achinensis) 陕西太白
A.lancea
江苏丹徒
A.lancea
湖北罗田
海拨(m) 1200 1200 1500 50 800
北纬度 42° 35.5° 34° 32° 31°
NaOH 3ml,于 560nm 比色,同时制备酚红标准曲线,将所测 OD
值折算为酚红含量ìg/ml,以组间t 检验进行统计比较。结果 见表 7。
3 讨论 苍术具有健脾燥湿、祛风散寒之功,用于湿阻脾胃、泄泻、
风湿痹痛、风寒感冒、夜盲等。对 5 种产地苍术挥发油及去
挥发油后的水提取物的抑菌实验表明:苍术抑菌成分主要存
13.55 67.48** 58.07* 30.62 59.35* 82.58**
围场苍术+
10 6 24.50±9.93 5.15
无水乙醇造型 20 6 20.80±13.29△ 19.47
注:与对照组比##P <0.01,与无水乙醇造型组比*P <0.05, **P <0.01,与丹徒苍术、黄龙苍术同剂量比△P <0.05
1
湖北罗田 250 >500 250* 250
4
陕西太白 500 >500 250* 500
5
陕西黄龙 250 >500 125 250
2
河北围场 250 >500 125 250
2
注:同种菌抑菌浓度与江苏丹徒苍术比≥2 个稀释度*P <0.05
表 2 5 种产地苍术挥发油及水提取物得率(%)
产 地
江苏丹徒 湖北罗田 陕西太白 陕西黄龙 河北围场
挥发油相对含量
2.5 7.0 5.0 4.1 1.6
水提取物得率
24.6 14.8 14.4 19.0 11.0
100g,加入 70%乙醇 3 倍量,回流提取 1.5h,过滤,药渣第 2 次 加入 70%乙醇 2 倍量,再回流 1.5h,过滤。合并 2 次滤液回收 乙醇至无醇味,加水定容至 100ml,浓度为 1g 生药/ml。2.2 体外抑菌试验 2.2.1 菌液制备 每种菌以接种环挑取同类型菌落 4~5 个, 接种于营养肉汤内,35℃孵育 4~6h 后,以营养肉汤校正浓度 达 3.0 亿/ml 左右,再以营养肉汤作 104 稀释,使菌浓度为 3 000~5 000 个/ml。 2.2.2 最小抑菌浓度(MIC)测定[2] 以微量加液器将灭菌营 养肉汤加入 96 孔圆底培养板中,每孔 0.1ml。在第 1 列分别 依次加入营养肉汤、溶剂、5 种产地苍术挥发油或水提取物、 青霉素、链霉素,各 0.1ml/孔,而后用微量加液器作 2 倍递减 浓度稀释,最后 1 孔取出 0.1ml 弃去。然后接种稀释菌液,其 中留 1 列孔作为药液对照。1 列为培养基对照,1 列为菌液对 照。以微量振荡器混匀后,置 35℃温孵 20h,在黑色背景下观
2.3 抗胃溃疡作用 2.3.1 对无水乙醇致小鼠胃溃疡的影响 [3] 昆 明 种 雄 性 小 鼠,单笼禁食 24h 后,选体重在(19.0±1.5)g 动物,按体重随 机分为 13 组,每组 6~10 只动物分别灌胃(ig)给药或溶 剂,0.2ml/10g 体重,60min 后 ig 无水乙醇 0.08ml/10g 体重, 给无水乙醇 60min 后将动物脱颈椎处死,开腹,结扎贲门,自 幽门端向胃内注入 2ml 1%甲醛溶液并立即结扎幽门,取出胃, 放入 1%甲醛溶液中固定。2h 后沿胃大弯剪开胃,以卡尺测量 溃疡面积,以组间 t 检验进行统计比较,并计算出给药各组的 溃疡抑制百分率。结果见表 5。
表 3 5 种产地苍术挥发油体外最小抑菌浓度(MIC)比较
组 别
MIC(ul 挥发油/ml)
表葡
金葡
甲链 乙链
肺炎 绿脓
大肠
抑菌强度总排序
江苏丹徒
>16.67
2.08
2.08 83.33 >16.67 83.33 166.67
5
湖北罗田
16.67
2.08
4.17 0.0814** 8.33 41.67 166.67
3
陕西太白
8.33
2.08
2.08 0.0814** 4.17* 83.33 166.67
1
陕西黄龙
8.33
2.08
2.08 0.0814** 8.33 83.33 166.67
作用及对胃、小肠推进功能影响的强度有明显差别。结论:药材产地对苍术的内在质量及药效学有明显影响。
关键词 苍术 产地 挥发油 药效作用
中 药 苍 术 的 基 原 为 菊 科 植 物 茅 苍 术 Atracylodes 了比较,对 5 种产地苍术 70%乙醇提取物抗化学物质引起的胃
2001 年 2 月第 8 卷第 2 期 中国中医药信息杂志 ·27·
5 种产地苍术提取物主要药理作用比较研究△
聂淑琴 李兰芳 杨 庆 金亚宏 原桂东 李曼玲 宋红月 冯学峰 胡世林
(中国中医研究院中药研究所 北京 100700)