1.3.11无菌室操作技术基本注意事项及要求
无菌技术操作要求
无菌技术操作要求
为确保在无菌环境中进行的操作的安全性和有效性，执行无菌技术操作时应注意以下要求：
1. 个人卫生和穿戴要求
- 操作人员应保持良好的个人卫生，包括勤洗手、戴口罩等。
- 穿戴无菌衣物、帽子和手套，确保全身覆盖。
- 严禁操作人员带有任何开放性伤口、疮疹或感染性疾病进行操作。
2. 工作区要求
- 工作区应处于洁净的环境中，如实验室或无菌室。
- 工作区表面应进行有效消毒，并保持整洁。
- 避免任何可能造成污染的因素，如食品和饮料等。
3. 实验设备和器材要求
- 使用经过验证的、有效的无菌设备和器材。
- 操作前应对设备和器材进行彻底的清洁和消毒。
- 避免接触非无菌物体，如污染的手套、工作面等。
4. 操作过程要求
- 操作过程中必须采取无菌技术操作，如灭菌、消毒等。
- 处理操作前，清洁手部并进行合适的消毒。
- 在无菌条件下打开操作器材和器皿。
- 避免操作者的呼吸、声音或其他污染物进入操作区域。
5. 废弃物处理要求
- 废弃物应立即进行正确处理，将其放入指定的无菌垃圾袋或中。
- 避免将废弃物、污染物与无菌区域接触。
在执行无菌技术操作时，请始终遵循上述要求，并根据具体操作的不同情况进行适当的调整和补充。
这些要求将有助于保障操作的质量和安全性，最大程度地减少污染的风险。
实验室安全无菌操作技巧与注意事项
实验室安全无菌操作技巧与注意事项实验室是进行科学研究和实践的重要场所，其中无菌操作是进行细菌培养和实验的基础。
本文将介绍实验室无菌操作的技巧与注意事项，以确保实验结果的准确性和实验人员的安全。
一、实验室安全无菌操作技巧1. 装备准备：在进行无菌操作之前，确保使用的设备、培养基和试剂已经通过灭菌处理或经过严格的检验。
实验人员应佩戴好实验手套、口罩和实验服等个人防护装备，以避免细菌污染。
2. 洁净台操作：洁净台是进行无菌操作的常用设备，其工作区具有无菌环境。
操作前，将洁净台表面进行消毒，并打开超净工作区。
将需要使用的实验器具放入超净工作区，避免非无菌环境的物品进入。
3. 手部消毒：在进行任何无菌操作之前，务必进行充分的手部消毒。
用流动的无菌水洗手，并在洗手过程中使用消毒剂进行手部消毒。
4. 灭菌操作：无菌操作中需要使用到的工具和试剂应进行灭菌处理，常用的灭菌方法包括高压灭菌器、紫外线灭菌器和丙酮消毒等。
选择合适的灭菌方法，可根据实验需求和操作要求来确定。
5. 操作技巧：在进行培养基的接种和分液操作时，需要掌握良好的操作技巧。
倒取试剂和培养基时，保持容器口朝下，避免空气中的细菌和灰尘进入。
高浓度细菌悬液的接种时，注意液面的稳定性，避免液体接触到容器内壁。
6. 快速操作：无菌操作需要迅速完成以减少细菌接触空气的时间。
尽量缩短培养基被外界污染的时间，快速而准确地完成各项操作。
二、实验室安全无菌操作注意事项1. 尽量减少人员流动：在实验室进行无菌操作时，尽量减少其他人员的进出。
同时，避免与其他实验室设备和培养基等接触，以避免细菌的交叉污染。
2. 注意环境卫生：实验室环境的卫生状况对无菌操作至关重要。
保持实验室处于整洁干净的状态，定期清洁工作台、试剂架等实验室设备，并保持洁净台周围无其他杂物。
3. 垃圾处理：无菌操作后，将废弃物和使用过的培养基、试剂等正确分类处理。
将具有生物危险的废弃物进行灭菌处理后再进行丢弃，以防止细菌的扩散和传播。
无菌操作规程及注意事项
无菌操作规程及注意事项一、目的和范围该操作规程的目的是保证无菌操作的安全和有效性，减少无菌操作过程中可能引入的细菌和其他微生物的污染。
本规程适用于所有需要进行无菌操作的工作场所和人员。
二、无菌操作的基本要求1. 工作场所必须保持干净整洁，防止尘埃、污染物质的积聚。
2. 所有参与无菌操作的人员必须进行相关培训，并掌握相应的操作技能和知识。
3. 操作人员在进行无菌操作前，必须正确佩戴无菌手套、口罩、帽子等个人防护用品。
4. 操作人员应该保持良好的个人卫生，包括勤洗手、保持指甲短而干净等。
5. 所有用于无菌操作的设备、仪器、器具等都必须在操作前进行彻底清洁和消毒。
三、无菌操作流程1. 操作人员在开始无菌操作前，需先准备好所需的无菌材料、介质等。
2. 操作人员应在无菌台或无菌室内进行操作，保持操作环境的无菌状态。
3. 在操作开始前，操作人员应先进行双手的无菌洗手，使用适当的消毒剂清洗双手和前臂，确保彻底消毒。
4. 操作过程中，应尽量避免对无菌区域进行直接的触碰，采取合适的工具和方法进行操作。
5. 操作人员需保持操作过程的快速和稳定，避免在操作过程中产生过多的空气搅动和颤动。
四、无菌操作的注意事项1. 遵守严格的操作规程和纪律，确保操作的标准化和一致性。
2. 当发现无菌区域受到污染时，应立即停止操作并采取相应的纠正措施。
3. 操作人员应定期进行个人健康检查，确保身体状况适宜从事无菌操作。
4. 定期检查和维护无菌设备和设施，确保其正常运行和无菌状态的保持。
以上是无菌操作规程及注意事项的主要内容，希望能对从事无菌操作的工作人员提供指导和参考。
无菌操作规程及注意事项
无菌操作规程及注意事项1. 引言无菌操作是在无菌环境下进行的一种技术操作，旨在避免微生物的污染和传播。
本文档旨在提供无菌操作的规程和注意事项，以确保操作的无菌性和安全性。
2. 规程以下是进行无菌操作时应遵循的规程：2.1 准备工作- 在无菌室内进行操作，确保环境清洁和无菌。
- 洗净双手并穿戴合适的无菌手套和个人防护装备。
2.2 准备试验器材- 所有试验器材应经过彻底清洁和消毒，包括培养皿、试管、移液器等。
- 使用已经经过高温高压灭菌处理的器材。
2.3 消毒操作区域- 对操作区域进行消毒处理，使用合适的消毒剂。
- 确保操作台面无菌，并进行适当的消毒。
2.4 打开培养皿- 对培养皿的外表进行消毒处理。
- 打开培养皿时，尽量减少周围环境和空气中的微生物进入。
2.5 液体传递- 使用无菌移液器和无菌吸管进行液体传递操作。
- 避免直接接触试管或培养皿的口部。
2.6 摇荡和混合- 使用无菌方式进行试管的摇荡和混合操作。
- 避免摇荡时造成液体溅出和微生物扩散。
3. 注意事项在进行无菌操作时，还需注意以下事项：- 避免与非无菌物体接触，如皮肤、衣物、工作台等。
- 避免喷嚏、咳嗽或大声说话，以防微生物扩散。
- 严格遵循操作顺序和规程，减少错误和污染的可能性。
- 定期检查设备和器材的清洁和状态，确保其无菌性。
- 注意药品和试剂的保存和有效期，避免使用过期或受损的物品。
4. 总结无菌操作是保证实验准确和结果可靠的重要环节，通过遵循规程和注意事项，可以有效提高实验的高质量和可重复性。
任何操作都应着重于无菌性和安全性，以避免微生物的污染和传播。
以上为无菌操作规程及注意事项，希望能对您的实验操作提供一定的指导和帮助。
无菌技术操作注意事项
无菌技术操作注意事项无菌技术是实验室中常用的一种操作技术，主要用于保持实验室环境的无菌状态，防止实验过程中的污染。
以下是无菌技术操作注意事项：1. 实验前要做好充分准备，将所需的实验器材和试剂准备齐全，并将实验台面、仪器设备等消毒清洁。
2. 需要将实验操作区域划分为无菌区和非无菌区，无菌区的台面和仪器设备要经过高温高压灭菌处理，同时注意保持无菌环境。
3. 操作者要佩戴干净的实验服、手套和口罩等防护用品，避免将自身的细菌带入操作区域。
4. 打开无菌台盖之前，要先用70%乙醇对手部进行消毒，将手消毒液彻底擦干，然后佩戴干净的手套。
5. 打开无菌台盖时要注意放慢速度，以免产生气流将空气中的细菌带入操作区域。
同时，打开无菌台盖时要保持一定的角度，避免将手臂或衣物碰到操作台面。
6. 在取用培养基、试剂和实验器材时，要使用经过高温高压灭菌处理的工具（如火棒、钳子等），并将其烧热到红色，以防止其带入细菌。
7. 多次反复插拔器械时要注意，避免引入外界细菌。
每次插拔后都要进行消毒处理，保证操作无菌。
8. 实验操作过程中，要避免将操作器材直接接触到其他非无菌的表面，以免引入细菌。
9. 操作完毕后，要及时清理操作台面和仪器设备，以保持无菌环境。
同时将用过的培养基、试剂和实验器材进行消毒处理或废弃。
10. 在不同的实验操作之间，要做好换手套和消毒操作，确保下一步操作的无菌性。
总之，无菌技术操作需要注意细节和规范，以确保实验的准确性和可靠性。
使用高温高压灭菌器材，佩戴防护用品，保持操作区域的无菌状态，以及认真执行无菌操作流程，都是保证实验无菌性的重要措施。
只有严格按照操作规范进行无菌操作，才能保证实验结果的准确和可靠。
无菌实验室操作规范及要求
无菌实验室操作规范及要求一、实验前的准备工作1.实验员应接受相关的培训并具备基本的微生物学知识。
2.进入实验室前，必须穿戴干净、合适的实验服，并戴上手套、口罩、帽子和鞋套等个人防护装备。
3.实验室必须保持整洁，定期进行消毒和清洁工作。
4.无菌实验室必须具备必要的设备和材料，如灭菌器、培养箱、无菌液体培养基等。
二、无菌操作的基本要求1.在无菌台上进行无菌操作，无菌台有玻璃罩和紫外线灯，必须保持室内无菌状态。
2.实验员在操作前，必须经过消毒处理，戴上手套，并用70%酒精消毒手部。
3.所用的培养皿、试管、移液器等实验器材，必须经过高温高压灭菌处理。
4.不同实验物品如培养基、细菌液体等必须分装于不同的容器中，杜绝交叉污染。
5.在操作过程中，要注意手部、试管等接触物品的时间要最短，以减少微生物的污染。
6.操作过程中，要保持无风状态，最好不要与他人交谈，避免口液飞溅。
三、无菌培养基的制备及使用1.无菌培养基的制备必须在无菌条件下进行，实验员在制备前必须对无菌培养基进行灭菌处理。
2.制备过程中要注意避免培养基的接触物表面，以免污染培养基。
3.无菌培养基的使用要遵循严格的操作要求，防止细菌的污染。
四、无菌实验器具的处理1.实验结束后，实验员必须清洁无菌台及其他实验设备，对使用过的器材必须进行彻底的清洗和消毒。
2.实验受污染的实验器材必须经过高温高压灭菌处理，以杀灭可能存在的细菌。
3.废弃物如细菌培养物、液体培养基等必须采取合适的处理方式，避免二次污染。
五、必要的应急措施1.实验中如发生溅洒、翻倒等意外事故，应立即进行灭菌处理，并及时向实验室管理者报告。
2.如发现个人或他人出现感染症状，应立即采取相应的医疗措施，并及时报告。
六、实验记录和数据分析1.实验过程中，应及时记录实验操作、观察结果和数据，确保实验结果的准确性。
2.实验数据的处理和分析应遵循科学与公正原则，不得随意篡改或捏造数据。
以上为无菌实验室操作规范及要求，只是基本要求，实践中可能还有更为具体和细致的操作规范，实验员应按照实验室要求进行操作，并随时学习和更新相关知识，提高无菌操作的技能和水平。
无菌技术操作注意事项
无菌技术操作注意事项1.阅读和理解相关操作指南和规程：在进行任何无菌技术操作之前，务必阅读并理解相关的操作指南和规程。
这些文件通常包括操作步骤、工具和设备的清洁方法以及可能发生的问题和应对措施。
2.工作区域的准备：确保工作区域干净整洁，并进行必要的消毒操作。
工作台和操作区域应使用消毒剂进行清洁，并予以干燥。
在工作区域完成后，不要进一步处理其他非无菌物质。
3.穿戴合适的个人防护装备：进行无菌技术操作时，应正确穿戴适合的个人防护装备，如实验室服、手套、口罩和护目镜。
这些装备可以保护自己和操作物质免受外界的污染。
4.用无菌盖物保护试样：在进行无菌技术操作时，应始终保持操作物质（如培养皿、试管等）的无菌状态。
在使用前，需先清洗并使用无菌盖物（如塑料膜、瓶塞等）覆盖物质，以防止污染。
在接触物质并进行操作时，保持盖物的无菌状态。
5.使用火焰进行灭菌：无菌技术操作时，需要频繁使用火焰进行灭菌。
在使用火焰前，确保火焰处于稳定状态，并使用金属夹持器或镊子将操作物质从盖物上取下或放置到盖物上。
同时，保持操作物质远离火焰，以防止烧伤或污染。
6.注意手的位置和动作：在进行无菌技术操作时，要注意手的位置和动作。
手应始终保持在安全区域，并尽量减少手的移动，以防止物质的污染。
手的位置应在操作区域内，避免碰触其他非无菌物质。
7.避免产生气溶胶：在进行无菌技术操作时，要避免产生气溶胶。
气溶胶是指悬浮在空气中的微小颗粒物质，可能携带有细菌和病毒。
可使用带有滤芯的器具，如滤过面具、吸管等，以减少气溶胶的产生。
8.避免交叉污染：在无菌技术操作时，要避免交叉污染。
交叉污染是指不同物质之间的污染传播。
使用每次操作都应更换的器具和设备，如刀片、注射器等，以避免交叉污染。
9.及时清洁和消毒操作区域：在无菌技术操作结束后，及时将操作区域进行清洁和消毒。
清洁可以将残留的污染物去除，而消毒可以消灭任何可能残留的微生物。
保持操作区域的清洁和消毒可以提高操作物质的无菌状态。
无菌技术操作注意事项
无菌技术操作注意事项无菌技术操作是在无菌条件下进行的一系列操作，其目的是为了防止细菌、真菌、病毒等微生物的污染。
无菌技术广泛应用于医疗、实验室、药剂制造等领域。
在进行无菌技术操作时，需要特别注意以下事项：1. 清洁与无菌室的保持：无菌技术操作通常在无菌室内进行，所以在操作前要确保无菌室处于干净整洁的状态。
操作人员应穿戴无菌衣、手套、帽子和口罩等防护装备，并注意保持操作区域的卫生。
2. 手部消毒：手是最常接触样品的部位，所以在进行无菌操作前，一定要彻底清洁和消毒双手。
可以使用洗手液和含酒精的消毒剂来清洁手部，同时也要保持双手的指甲短修整，并避免佩戴手饰物。
3. 工作区域的准备：在进行无菌操作前，需要对工作区域进行一系列准备工作。
首先，清洁工作台：用酒精或其他有效的清洁剂清洁工作台面，并用紫外线灯照射15-30分钟以消毒工作台表面。
其次，准备所需的无菌仪器和试剂，并将其放在工作台上，方便操作和取用。
4. 物品的无菌处理：在进行无菌操作时，要确保所有的物品和试剂都是经过无菌处理的。
可以通过高温炉、压力蒸汽灭菌器等设备对试剂和仪器进行灭菌处理，一般情况下，使用121摄氏度、15分钟的高温蒸汽灭菌效果较好。
5. 操作的规范与细致：无菌操作需要细心和规范，操作人员在进行操作时要注意以下几点。
首先，要避免空气的污染，操作过程中要保持操作区域的闭合，减少气流的干扰，并且在操作过程中避免说话和咳嗽，以减少微生物的扩散。
其次，要注意无菌手套的更换，避免使用时间过长导致手套磨损、破裂或污染。
此外，要注意使用无菌技术操作时的速度和力度，操作慢而稳，力度适中，以避免产生气流和震动，从而造成微生物的扩散和污染。
6. 无菌技术操作结束后的处理：在进行无菌操作结束后，要对工作区域和工具进行处理和清洁。
首先，要及时清理工作台面和仪器设备，使用酒精或其他消毒剂擦拭表面，确保无菌环境的恢复。
其次，要正确处置使用过的无菌材料和废弃物，尽量采取连续关闭式的污品处置方式，避免废弃物对周围环境的污染。
无菌操作原则及注意事项
无菌操作原则及注意事项无菌操作是一项非常重要的实验室技术，它能够有效地防止实验中的细菌、病毒、真菌等污染因子的存在，从而保证实验结果的准确性和可靠性。
本文将详细介绍无菌操作的原则和注意事项。
一、无菌操作的原则：1.空气无菌：在无菌操作的环境中，空气中的微生物应控制在最低限度。
实验室应采用特殊的手术间或实验室通风设备，以保证空气的无菌。
2.操作器材无菌：操作器材及实验用品应用无菌盖或经高温高压灭菌后使用，以保证操作器材的无菌。
二、无菌操作的注意事项：1.消毒准备：进入实验室进行无菌操作前，应对实验员和器材进行适当的消毒处理。
实验员需进行手部消毒，并穿戴实验服、手套和面具等防护设备。
2.操作台面无菌：操作台面应先用酒精或其他适当消毒剂进行彻底清洁，并用紫外线灯照射消毒20-30分钟，保证操作台面的无菌性。
3.灭菌器材准备：无菌操作中的各种器材应事先经过高压蒸汽灭菌或紫外线照射消毒。
灭菌后的器材应放在无菌条件下保存，以免再次被污染。
4.医用手套的使用：在无菌操作中，医用手套是必不可少的防护装备。
在每次操作前，应先检查手套有无损坏，确保手套完好无破损。
同时，更换手套时应注意避免手套与无菌区域以外的物体接触，以防止交叉污染。
5.减少空气污染：在无菌操作过程中，应尽量减少普通空气接触无菌物质的机会。
操作时应避免突然移动，以防止引起气流对无菌物体的污染。
同时，在操作过程中，尽量减少口述和呼吸，以减少口腔和鼻腔中的微生物进入实验区。
6.混合液体无菌操作：在制备无菌培养基或混合液体时，应在无菌台下进行操作，操作手法应快速而准确。
同时，在混合液体时，要注意不要让混合液体溅出，以免污染周围环境。
7.管子和培养器皿的打开和关闭：在打开和关闭管子和培养器皿时，应尽量轻柔，不要产生气流和震动，以防止微生物扩散。
8.反应体系封闭：在无菌操作中，要尽可能将反应体系封闭，避免静置时的气泡运动带来的气流污染。
使用无菌操作时，尽量选择常规实验室使用的无菌试剂。
无菌操作的注意事项
无菌操作的注意事项
无菌操作是在无菌环境下进行的，目的是为了防止微生物的污染和感染。
以下是无菌操作的注意事项：
1.准备工作：在进行无菌操作之前，首先需要准备好无菌器具
和无菌溶液。
无菌器具应保持干燥和密封，无菌溶液应严格按照说明书或药典的要求配制并且在使用前进行热灭菌。
2.个人卫生：在进行无菌操作时，操作人员必须穿着干净的无
菌衣物（如无菌手套、无菌帽、无菌口罩等），并应进行手部消毒。
不得搔抓、咳嗽、打喷嚏等。
3.操作环境：无菌操作室中应保持干净并且有良好的通风系统。
禁止吸烟、喷洒空气杀菌剂等破坏无菌环境的行为。
4.器具准备：无菌器具应在无菌操作室内进行包装，并且应使
用双层包装（如双层塑料袋或锡箔袋）。
在使用前应先检查包装是否有破损或被污染。
5.操作过程：无菌操作时，应避免用手直接接触无菌器具和媒介，选择合适的工具进行操作。
尽量避免产生气溶胶和液滴，并且操作尽量缓慢、轻柔，避免剧烈摇晃或震荡。
6.维持无菌状态：在无菌操作过程中，应经常检查操作区域是
否有污染。
如果发现污染，应立即停止操作并重新准备无菌器具和无菌溶液。
同时，在操作过程中应尽可能保持操作区域的清洁和干燥。
7.操作结束：无菌操作结束后，应将使用过的无菌器具和媒介全部彻底清理和灭菌处理。
污染的物品应放入指定的废物容器中，并进行适当的处置。
总的来说，无菌操作需要严格控制操作环境、个人卫生和器具准备等方面，以确保操作过程中不引入外来微生物的污染。
这样能够保证实验结果的准确性和可靠性，并降低对人体和设备的潜在感染风险。
微生物实验室无菌操作技术规范
微生物实验室无菌操作技术规范1.目的规范无菌操作流程,减少及避免发生染菌现象出现。
2.使用范围无菌室及洁净区的操作。
3.无菌操作技术原则3.1环境要清洁,在每次无菌操作结束后都需要对环境进行清理、清洗;且避免操作前进行清扫。
3.2做好个人卫生,进入无菌室前需修剪指甲、洗手,穿好无菌服,帽子需遮住所有头发,口罩遮住口鼻。
3.3在无菌操作时,不可讲话,打喷嚏,对怀疑染菌的无菌物品,不可使用。
4.内容4.1.1准备:工作人员着装整洁,洗手、戴口罩、修剪指甲;备齐用物(如:接种针、接种环、酒精灯、斜面、平皿、摇瓶、75%酒精棉、无菌水等);核对无菌用品,接种菌种的种类、型号。
4.1.2所有实验使用的物品都需要进行消毒、灭杀;进入洁净区前需要经传递窗进行紫外表面消毒30min以上;4.1.3开始实验前需要打开超净台的紫外灯,消毒半个小时以上;超净台避免放入过多的物品(一般只放入当次的实验所有的物品),所使用的试剂和耗材都需事先进行灭菌(灭菌日期超过4天的需重新消毒)。
4.1.4进入洁净区前关闭紫外灯,并打开风机,等待半个小时以上,使臭氧尽量排放干净。
4.1.5除去手腕等部位的饰品,穿好无菌服,戴好头套、口罩,做到“三不漏”:不暴漏头发,不暴漏口鼻,不暴漏躯干皮肤和衣物。
4.1.6双手要进行清洗、消毒。
4.1.7要经风淋室风淋30秒后再进入洁净室。
4.1.8在局部百级区域操作要戴一次性无菌手套。
4.1.9实验操作过程中应尽量减少进入洁净区的人员(不超过4人/间)并尽量减少人员走动。
4.1.10所有要放入超净工作台的物品都需进过消毒液喷洒擦拭消毒。
4.1.11无菌物品若取离超净台则视为已污染,不得放回再用;无菌液体在取离超净台前必须密封其开口;密封的无菌液体在放入超净台后,对其开口前须对开口在酒精灯火焰上烧烤。
4.1.12在拆开任何一次性无菌利用耗材的包装时都要在超净台内完成,并须同时包管与细菌直接接触的利用端/面不得与超净台内的任何物品产生触碰。
无菌操作基本技术
无菌操作基本技术1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 %ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。
每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。
实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。
操作间隔应让无菌操作台运转10 分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作。
2. 无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。
实验用品以70 % ethanol 擦拭后才带入无菌操作台内。
实验操作应在抬面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。
3. 小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。
勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。
容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
4. 工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。
对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级之无菌操作台(至少Class II)。
操作过程中，应避免引起aerosol 之产生，小心毒性药品，例如DMSO 及TPA 等，并避免尖锐针头之伤害等。
5. 定期检测下列项目：5.1. CO2 钢瓶之CO2 压力5.2. CO2 培养箱之CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水，每周更换)。
5.3. 无菌操作台内之airflow 压力，定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜，预滤网(300小时/预滤网，3000 小时/HEPA)。
6. 水槽可添加消毒剂(Zephrin 1:750)，定期更换水槽的水。
实验用品1. 种类︰1.1. 细胞培养实验用品均为无菌，除了玻璃容器与pasteur pipet 外，其它均为塑料无菌制品。
无菌操作方法及注意事项
无菌操作方法及注意事项无菌操作是指在无菌环境下进行的操作，旨在防止微生物的侵入和交叉污染。
无菌操作广泛应用于医药、生物、食品等领域，对保证产品质量和人身安全至关重要。
下面将详细介绍无菌操作的方法和注意事项。
无菌操作的方法：1. 准备无菌工作区：无菌操作需要在100级以上的洁净区域进行。
在操作前，确保工作区域已经进行了清洁和消毒。
使用紫外线灯进行空间消毒，同时确保无菌台能够提供合适的空气流速。
2. 清洗双手和穿戴无菌服：无菌操作前需要进行手部清洗，并保持双手干燥。
通过使用消毒剂彻底清洁双手，并戴上无菌手套。
无菌服应该是一次性的，穿戴前需注意避免污染。
3. 准备无菌器皿和物品：在无菌操作前，需要准备无菌器皿和物品。
无菌器皿可以通过高压蒸汽灭菌器或者无菌袋进行消毒。
无菌物品需要是一次性的，并且要采用合适的包装方式进行消毒保护。
4. 打开无菌台：将无菌台表面与器具、培养基等物品进行清洁，清除表面上的灰尘和杂质。
在无菌台内部，使用紫外线灯进行一段时间的照射以杀灭空气中的微生物。
5. 开始操作：在无菌台内部进行操作。
无菌操作时需要注意避免发生剧烈的动作和抖动，以防止落下的灰尘和微生物污染操作区域。
使用无菌器具进行操作，避免使用手直接接触。
6. 关闭无菌台：操作完成后需要关闭无菌台，同时进行台面的清洁和消毒。
将无菌器具进行消毒处理，清洗和包装。
无菌操作的注意事项：1. 保持严格的无菌操作规范：无菌操作需要严格遵守一系列规范和操作要求，包括手部清洗、无菌服穿戴、无菌器具消毒等。
操作人员必须了解并遵守这些规范，否则可能造成操作失误和污染。
2. 避免污染源：无菌操作时需要避免将污染源带入操作区域，包括衣物、身体和呼吸等。
操作人员应该尽量避免过于频繁的吐口水或饮水，在无菌操作期间，最好不要接触脸部和头发。
3. 防止交叉感染：无菌操作环境下，需要防止不同菌株或来源的样品和器械之间发生交叉污染。
为了避免交叉感染的发生，应该准备足够数量的无菌培养皿、管垂片等。
无菌操作原则及注意事项
无菌操纵原则及留意事项无菌操纵原则：1.情况要干净,进行无菌操纵前半小时,须停滞清扫地面等工作.防止不须要的人群流淌,防止尘埃飞扬.治疗室应天天用紫外线消毒一次.2.在履行无菌操纵时,必须明白物品的无菌区和非无菌区.3.履行无菌操纵前,先戴帽子.口罩.洗手,并将手擦干,留意空气和情况干净.4.夹取无菌物品,必须运用无菌持物钳.无菌操纵间四.进行无菌操纵时,凡未经消毒的手.臂.均不成直接接触无菌物品或超出无菌区取物.5.无菌物品必须保管在无菌包或灭菌容器内,不成吐露在空气中过久.无菌物与非无菌物应分离放置.无菌包一经打开即不克不及视为绝对无菌,应尽早运用.凡已掏出的无菌物品虽未运用也不成再放回无菌容器内.6.无菌包应按消毒日期次序放置在固定的柜橱内,并保持干净湿润,与非灭菌包离凋谢置,并经常检讨无菌包或容器是否过时,个顶用物是否适量.7.无菌盐水及酒精.新洁尔灭棉球罐每周消毒一次,容器内敷料如干棉球.纱布块等,不成装得过满,以免取用时碰在容器外面被污染.无菌操纵技巧及留意事项1.玻璃器皿的消毒和干净⑴新购玻璃器皿的处理新购玻璃器皿运用热番笕水洗刷,流水冲洗,再用1%～2%盐酸溶液浸泡,以除去游离碱,再用水冲洗.对容量较大的器皿如试剂瓶.烧瓶或量具等,经清水洗净后应注入浓盐酸少许,慢慢迁移转变,使盐酸布满容器内壁数分钟后倾出盐酸,再用水冲洗.⑵污染玻璃器皿的处理①一般试管或容器可用3%煤酚皂溶液或5%石炭酸浸泡,再煮沸30分钟,或在3%～5%漂白粉澄清液内4小时,有的亦可用番笕或合成洗涤剂洗刷使尽量产生泡沫,然后用清水冲洗至无番笕为止.最后用少量蒸馏水冲洗.②细菌造就用的试管和造就皿可先行分散,用1kg/cm2高压灭菌15～30分钟,再用热水洗涤后,用番笕洗刷,流水冲洗.③吸管运用后应分散于3%煤酚皂溶液中浸泡24小时,逐支用流水重复冲洗,再用蒸馏水冲洗.④油蜡沾污的器皿,应单独灭菌洗涤,先将沾有油污的物资弃去,倒置于吸水纸上,100℃烘干半小时,再用碱水煮沸,番笕洗涤,流水冲洗.须要时可用二甲苯或汽油去油污.⑤染料沾污的器皿,可先用水冲洗,后用干净或稀盐酸洗脱染料,再用清水冲洗.一般染色剂呈碱性,所以不宜用番笕的碱水洗涤.⑥玻片可置于3%煤酚皂溶液中浸泡,掏出后流水冲洗,再用番笕或弱碱性煮沸,天然冷却后,流水冲洗.被结核杆菌污染或不轻易洗净的玻片,可置于干净液内浸泡后再冲洗.2.无菌器材和液体的预备将玻璃器具中的造就皿.造就瓶.试管.吸管等按上述办法洗净烘干后,用一干净纸包好瓶口并把吸管尾端塞上棉花,装入干净的铝盒或铁盒中,于120℃的湿润箱中湿润灭菌2小时,掏出备用.对于手术器械.瓶塞.工作服以及新配制的PBS洗液,则采取高压蒸气灭菌法,即在15磅的前提下,加热20分钟.而对于MEM造就液.小牛血清和消化液等需用G5或G6滤器负压抽滤后运用.3.无菌操纵进程在无菌操纵进程中,最主要的是要保持工作区的无菌.干净.是以,在操纵前20～30分钟要先启动超净台和紫外灯,并卖力洗手和消毒.在操纵时,严禁鼓噪,严禁用手直接拿无菌物品,如瓶塞等,而必须用消毒的止血钳.镊子等.造就瓶应在超净台内操纵,并且在开启和加盖瓶塞时需重复用酒精灯烧.对于吸管应先用手拿后1/3处,戴上胶皮乳头,并用酒精灯烧烤之后再吸液体.4.经常运用干净液的配制法⑴重铬酸钾干净液：可依据不合须要,选用下列的任何一种浓度.先将重铬酸钾溶于水中,再慢慢参加浓硫酸.留意,此时可产生高热,应防止容器决裂.重铬酸钾干净液除污力强,腐化性大,应防止接触皮肤和衣服.为防止接收空气的水分而演变,此液应贮存于带盖的容器中.如干净效率较差,可再参加少量重铬酸钾及浓硫酸,还可持续运用.直到液体变蓝绿色,即不克不及再用.配制重铬酸钾干净液时,宜用耐高温的陶瓷缸或耐酸珐琅或塑料容器.运用玻璃器皿时,应特殊留意防止产生高热而决裂,切忌用量筒来配制.⑵磷酸三钠将其配成5%～10%水溶液,可用于洗涤玻璃器皿上的油污,但经常运用腐化玻璃,使器皿概况隐约.毛糙.⑶硝酸干净液将其配成50%水溶液,可用于干净微量滴定筒.⑷乙二胺四乙酸二钠（EDTA钠盐）将其配成5%～10%水溶液,可洗脱粘附于玻璃器皿内壁的白色沉淀物.⑸尿素溶液尿素是消融蛋白质的优越溶剂,实用于洗涤粘附有血液血清等蛋白质的吸管.试管等.。
无菌实验室规范操作
无菌实验室规范操作一、人员规范1、实验室人员必须接受无菌技术培训，并严格遵守无菌规范。
2、进入实验室的人员必须更换无菌实验室专用鞋、衣、裤、帽、口罩等，并把它们放在指定的地方。
3、未取得合格成绩的人员不得进入无菌实验室。
二、环境规范1、无菌实验室应设有消毒设备及通风设备，保证空气清新。
2、无菌实验室应保持整洁、安静，禁止在实验室内喧哗、吃零食、乱扔垃圾等。
3、无菌实验室应定期进行消毒处理，保持无菌状态。
4、无菌实验室的地面、桌面、墙壁等应光滑、无缝隙，便于清洁消毒。
5、无菌实验室应设有防尘设备，防止灰尘污染。
三、操作规范1、操作前应做好准备工作，检查实验器材是否齐全、完好，是否符合无菌要求。
2、操作时应严格遵守无菌规范，如有细菌污染等情况应立即停止操作，并向实验室负责人报告。
3、操作后应及时清理实验器材，做好清洁消毒工作。
4、在实验过程中，如需使用非无菌物品，应先进行灭菌处理后再使用。
5、在实验过程中，如需离开实验室，应将实验器材放置好，以免受到污染。
6、在实验过程中，如需使用危险物品，应先了解其性质及操作方法，并严格按照操作规程进行。
7、在实验过程中，如遇到意外情况，应立即停止操作，及时向实验室负责人报告。
8、在实验后，应将实验结果及时记录下来，以便以后查阅。
化学实验室安全操作规范在化学实验室中，安全操作规范是至关重要的。
这是因为化学实验中涉及的物质往往具有潜在的危险性，如腐蚀性、易燃性、毒性等。
因此，为了确保实验室人员的安全和实验的顺利进行，必须严格遵守安全操作规范。
一、实验室人员的基本要求1、实验室人员必须经过专业培训，掌握基本的化学知识和实验技能。
2、实验室人员必须了解并能够遵守实验室安全规章制度。
3、实验室人员应定期进行安全教育和培训，提高安全意识。
二、实验室安全制度1、进入实验室前，必须按规定穿戴实验服和防护眼镜。
2、实验室内的仪器设备不得私自拆卸、修理或改装。
3、严禁在实验室吸烟、饮食，严禁携带易燃易爆物品进入实验室。
无菌实验室操作规程
无菌实验室操作规程标题：无菌实验室操作规程引言概述：无菌实验室是进行微生物实验和培养的重要场所，严格的操作规程能够确保实验结果的准确性和可靠性。
本文将详细介绍无菌实验室操作规程，帮助实验人员正确操作，避免污染和误操作。
一、实验室准备1.1 确保实验室环境无菌：实验室内应经常进行消毒，保持空气清洁，避免微生物污染。
1.2 准备实验材料：提前准备好所需的培养基、试剂和器具，确保其无菌。
1.3 检查设备状态：检查培养箱、平台振荡器等设备是否正常运转，确保实验顺利进行。
二、个人操作规范2.1 穿戴实验服和手套：进入实验室前需穿戴干净的实验服和手套，避免外部微生物污染。
2.2 洗手消毒：进入实验室后，及时洗手并进行消毒，避免手部细菌污染实验物品。
2.3 避免交叉污染：每次操作前应更换手套，避免不同实验之间的交叉污染。
三、培养基制备3.1 精确称量：按照配方准确称量培养基成分，确保培养基质量准确。
3.2 消毒处理：将配制好的培养基装入试管或培养皿中，进行高温高压消毒处理，杀灭其中的微生物。
3.3 冷却保存：待培养基冷却后，放置在无菌条件下保存，避免污染。
四、微生物接种4.1 操作迅速：在无菌条件下，迅速将微生物接种到培养基上，避免空气中的细菌污染。
4.2 合理布局：将接种好的培养皿放置在培养箱中，合理布局，避免交叉污染。
4.3 注意观察：定期观察培养皿内微生物的生长情况，及时调整培养条件。
五、实验室清洁5.1 定期消毒：实验室设备和台面等应定期进行消毒，避免细菌滋生。
5.2 清洁整理：实验结束后，及时清洁实验台面和设备，保持整洁。
5.3 废弃物处理：实验后的培养皿、试管等废弃物应按规定进行处理，避免细菌外泄。
结论：无菌实验室操作规程对实验结果的准确性和可靠性起着至关重要的作用，实验人员应严格按照规程操作，确保实验过程的无菌性和准确性。
无菌室的正确操作方法
无菌室的正确操作方法无菌室是用于进行无菌操作的特殊实验室空间，为确保实验的无菌性，需要严格遵守以下操作方法：1. 提前准备：在进入无菌室之前，确保自己身上没有任何明显的灰尘、头发等杂质，并穿戴好实验室制定的相关防护服和手套，戴上防护面罩和鞋套。
2. 洗手消毒：进入无菌室之前，必须进行彻底的手部消毒。
使用洗手液充分洗手并冲洗干净，然后使用酒精消毒剂消毒手部和手腕，注意确保手指和指甲的清洁。
3. 消毒表面：在操作过程中，经常需要消毒台面和其他实验室设备。
使用70%乙醇或其他适合的消毒剂，将表面喷洒、擦拭干净。
确保消毒剂接触表面10-15分钟，然后用无菌棉球或纸巾擦拭干净。
4. 避免通风：无菌室通常采用垂直层流技术，空气由顶部过滤器向下垂直流动，所以在操作过程中要避免产生气流。
避免突然移动手、快速移动物品、摇晃操作台等，以防止气流扰动。
5. 无菌操作：在无菌室内进行操作时，要尽量避免直接触碰实验物品和无菌区域。
使用无菌的工具和设备，如无菌钳子、移液器等，并将它们放在无菌区域上。
尽量少开启实验室门，以减少外界空气流入。
6. 定期清洁：定期对无菌室进行彻底清洁和消毒。
将使用过的纸巾和其他废弃物放入指定的废物容器中，确保无菌室内的垃圾不会对实验环境产生污染。
7. 退出无菌室：当操作完成或需要离开无菌室时，应首先将使用过的实验器材和工具收集并清洗消毒。
然后将实验室表面和无菌室内进行再次彻底的清洁和消毒。
最后，将无菌手套反折脱下，使用酒精消毒剂再次消毒双手。
以上是无菌室的正确操作方法。
在实验过程中，要严格遵守无菌室的相关规定和操作规程，确保实验的无菌性和操作的安全性。
无菌技术操作注意事项
无菌技术操作注意事项
无菌技术是实验室和医疗领域中常用的操作技术，用于防止微生物的污染。
以下是无菌技术操作时需要注意的几点：
1. 空气质量：确保实验室或手术室的空气质量符合规定的无菌标准，减少周围环境中的微生物数量。
2. 仪器和器具的消毒和灭菌：使用前，仪器和器具必须进行适当的消毒和灭菌，以杀灭潜伏的微生物。
3. 穿戴防护设备：操作者必须穿戴适当的防护设备，例如手套、实验衣、面罩和帽子，以防止自身的微生物污染。
4. 准备无菌工作区：在进行无菌技术操作之前，需要准备一个无菌的工作区，使用经过消毒的台面、培养皿和工具。
避免在空气中敞开的情况下操作，使用无菌帷幕或罩子来建立无菌环境。
5. 加强洗手和手部消毒：在操作前和操作中，操作人员必须经常进行洗手并使用适当的消毒剂消毒双手，以减少手部的微生物数量。
6. 避免交叉污染：不同的试剂、培养物和工具必须分开使用，避免交叉污染。
使用专用的无菌吸管、移液器和培养皿，避免直接接触。
7. 快速操作：尽量在无菌条件下快速操作，减少操作时间和空气接触时间，以减少微生物的污染机会。
8. 合理运用消毒剂和灭菌方法：根据实验需求选择适当的消毒剂和灭菌方法，同时遵循正确的消毒和灭菌程序。
9. 及时弃用和处理：无菌操作完成后，立即弃用无菌器具和培养物，避免滋生和传播微生物。
10. 定期培训和监控：定期对操作人员进行无菌技术的培训和监控，以确保操作符合标准，并及时纠正操作中的不当行为。
注意以上的提醒是为了保证无菌技术操作中的样本的干净取到，同时不使产品被微生物污染。
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标准管理程序
STANDARD MANAGEMENT PROCEDURE
1目的建立无菌操作要求，保证工作人员安全
2范围无菌检测
3责任无菌检测人员
4正文内容
4.1所有操作中均不应有大幅度的快速运动、快速行走，以免搅动空气。
4.2使用玻璃器皿应轻取轻放，避免破损，以防培养基扩散。
4.3用金属接种器皿时，用前、用后均需灼烧灭菌，待次冷却后方可接种培养物。
接种石蜡、油质培养物时，不应立即在火焰上灼烧，应先在内焰里将油质培养物烘干后再烧灼灭菌，以免外溅污染环境。
4.4用吸管、注射器接种样品为菌液时用后置入消毒液缸内或消毒桶内灭菌，切勿用嘴直接吸吹吸管。
4.5注射器吸取样品、培养物时，注射器内应充空气，装卸针头时应用灭菌的钳子；从密封容器内抽取液体时切勿注入空气；带液体的针筒针头应向上倾斜，必要时用75%的酒精棉球（挤干）保护针头根部；注射时勿用力过猛，以免针头脱落流出液体污染灭菌器材或环境。
4.6开启菌瓶塞或其它供试品安瓶之前，应用碘酒或75%乙醇棉球消
毒容器，刻痕用的砂轮也应消毒，折断时要防止污染。
4.7灭菌瓶塞或试管塞掉在工作台上，禁止再用，应另换无菌塞。
4.8戒除操作中或洗手后摸口、鼻、眼、脸、头发、挖鼻孔、搔痒等
不卫生习惯，以防止自身感染和交叉感染。
4.9操作中不准在无菌室内敞开洁净工作服。
4.10按规定穿好无菌服（衣、裤、帽、鞋、口罩等）。
4.11在观察平板培养物时，一般不宜开盖观察，如取菌落或菌苔涂片、染色或做玻片凝集试验时，在离火焰三寸以内操作，平皿上下盖可适当开缝。
4.12应将所有用过的玻片置0.5 —1%新洁乐灭中浸泡24小时，再洗刷清洁，凉干备用。
4.13当无菌衣受污染，应脱下翻转包裹，使污染部分包在内部送往消
毒，经清洁灭后再用。
4.14因偶然打破盛有培养物的器皿致使病原性菌种外溢，污染了工作
室及操作者的衣服和身体，当事人应冷静，切勿乱动以免扩大污染面，对小面积污染可自行处理，较大范围时则请人协助，用浸透消毒液（5% 来苏水、石碳酸溶液）的毛巾或纱布覆盖于碎片上，在将消毒剂倒在污染区，待30分钟从外围至内逐步清理污染源，最后将衣物彻底高压灭菌；清理时应避免用手指收集玻璃碎片，以防损伤皮肤，发生病原性微生物或流行事故。
4.15凡带有活菌的物品必须消毒后才能进行冲洗，严禁污染下水道。