第5章 致病菌的检验7——革兰氏阳性无芽孢杆菌

四、抵抗力
无芽胞菌中抵抗力最强的一种，对腐败和干燥环境有
较强的抵抗力：
腌肉中可生存5~6个月； 深埋尸体中生存7~10个月； 腐败猪粪中生活5个月； 土壤中可长久存活，甚至繁殖。
本菌对常用消毒剂抵抗力不强，0.5％甲醛数十分钟 可杀死。
五、血清型
最初被分为A、B、N型。
A型：强毒型，多分离自急性病例；
急性病例
慢性病例
二、培养特征
1、兼性厌氧或微需氧，普通琼脂生长不良，麦 康凯不生长。血平板上生长茂盛，针尖大小 露滴状菌落，圆形、灰白、透明、α溶血，生 长温度5-42℃，最适30-37℃。 2、鲜血琼脂平板培养时粗糙型菌落的菌体呈多 形性。
三、生化特性
1、糖类发酵：糖发酵能力极弱，仅葡、果、乳， ＋； 2、接触酶：－； 3、H2S：＋； 4、不分解尿素； 5、明胶穿刺：呈试管刷状生长，不液化；
5. 血清学检查 ：凝集反应。
第2节 丹毒丝菌属（Erysipelothrix）
本属只有1种，即猪丹毒丝菌（E.rhuriopathiae），
是猪丹毒病的病原体，也可引起人的“类丹毒” ，通
称猪丹毒杆菌。
一、形态与染色
1、G+细长小杆菌，0.2-0.4×0.5-2.5µ m；组织涂片或血 液涂片中，呈单在、成对或小丝状，无鞭毛，无芽胞， 无荚膜； 2、有形成长丝状的趋势（陈旧培养物和慢性病猪的心 内膜增生组织）。
三、生化特性
1、可分解多种糖 2、接触酶：＋ 3、H2S：－ 4、尿素酶：－ 5、硝酸盐还原：－
四、抵抗力
1 耐碱不耐酸，耐盐。在土壤、牛奶、青贮饲料和粪 便中长期存活； 2 对热的耐受性较多数无芽孢杆菌强，常规巴氏消毒 法不能杀死该菌，在70℃ 5-10min可被杀死； 3 对消毒剂的抵抗力不强，常用消毒药5-10min能杀死 本菌：2.5%石炭酸、70%乙醇、2.5%氢氧化钠、 2.5%福尔马林均可有效杀灭。
第13章 革兰氏阳性无芽孢杆菌 李氏杆菌属 丹毒丝菌属
第1节 李氏杆菌属（Listeria）
最初，李氏杆菌属仅有产单核细胞李氏杆菌一个种， 之后相继确认了伊氏李氏杆菌(L.ivanovii)、无害李氏杆 菌(L.innocua)、威斯梅尔氏李氏杆菌(L.Welshimeri)和西 里杰氏李氏杆菌(L.seeligeri)等5个种。该属代表种是产 单核细胞李氏杆菌(L. monocytogenes)，引致人和动物的 李氏杆菌病。 期间曾将默氏李氏杆菌(L.murrayi)和格氏李氏杆菌 (L.grayi)也划到本属中，但后来的研究结果表明它们是 一个独立的特殊属——默里亚属(Murraya) 。
李氏杆菌属（Listeria）
产单核细胞李氏杆菌
一、形态与染色
短杆状 , 革兰氏染 色阳性。不形成荚 膜、无芽胞，有鞭 毛，20-25℃培养可 产生4根周鞭毛， 37℃至少可产生1根 鞭毛。R型菌多为 长丝状。
R型
二、培养特性
1、兼性厌氧，营养不高；对食盐耐受力很强(18%)； 2、血液葡萄糖琼脂：圆形、光滑、淡蓝色、透明、露 滴状菌落，狭窄β溶血； 3、 1℃-45℃均可生长，30℃-37℃ 最适， 4 ℃需7天可 生长 ——故称“冰箱菌”； 4、麦康凯上不生长。 5、普通琼脂平板：光滑型、蓝绿色光泽菌落； 6、半固体培养基穿刺: 沿穿刺线呈云雾状生长。
（1）猪丹毒是一种急性热性传染病： ① 急性败血症：发热至42℃，皮肤发红(紫斑)，突然死亡， 病程一般3-4d，病死率达80%。 ② 亚急性疹块型：皮肤出现疹块（指压褪色）。 ③ 慢性型：A.关节炎型，关节肿大变形、纤维素性渗出， 呈胶冻样 ； B.心内膜炎，疣状赘生物。 （2）治疗： ①青霉素疗效最好，每公斤体重5000~10000单位，肌注, 每 日2~3次，连用2~3天； ②若效果不显著，可改用链霉素，每kg体重30mg，肌注。
猪丹毒病猪
七、微生物学诊断

涂片镜检：G+纤细小杆菌


分离培养：血平板
细菌鉴定：培养和生化特性
血清学诊断：凝集试验, 免 疫荧光试验
动物实验：接种鸽子后2-5d 死亡

七、微生物学诊断
八、防治
猪丹毒GC42弱毒菌株制成的冻干苗，抗猪丹毒血清 可用于紧急预防和治疗，也可用青霉素治疗病猪。
七、微生物学诊断
1. 镜检：肝、脾、脑组织等涂片、革兰氏染色镜检可见 G＋呈Ｖ字排列的小杆菌。
2. 分离培养：普通琼脂平板蓝绿光泽的菌落，接种血液 葡萄糖琼脂，露滴状菌落，β溶血。
3. 纯培养：溶血检查、运动性检查、生化鉴定。源自文库
4. 动物试验 ：病料接种家兔或豚鼠眼内，1d后发生结 膜炎，不久败血症死亡；小鼠腹腔注射，剖检肝脏坏死， 分离细菌；妊娠2w的动物接种后可发生流产。
五、血清型
具有O抗原（阿拉伯数字表示）及H抗原 （小写英文 字母表示）, 16个血清型，常见1a、2a、4b型。与多
种细菌存在共同抗原，故血清学诊断意义不大。
六、致病性
1、本菌细胞内寄生，不被宿主细胞吞噬而破坏。产生 的李斯特溶血素O（listeriolysin O, LLO）与其能在巨 噬细胞内生长有关。 2、可自然感染多种家畜：猪、马、牛、绵羊； 3、病畜神经症状，成年牛、羊往往表现为“转圈病” ； 4、妊畜流产、血液中单核细胞增多。 5、鸡可全身感染，心肌坏死。 6、成人脑膜炎，新生儿脑膜炎(10%)。
B型：弱毒型，多分离自慢性病例，免疫原性较好； N型：无毒型。
目前根据肽聚糖抗原可分为25个血清型，以阿拉伯数 字表示。其中：1a亚型—急性败血症；2型—亚急性、 慢性疾病。
六、致病性
通过消化道感染，进入血流引起动物高热，可产生透明 质酸酶和神经氨酸酶，加强血管通透性并降解宿主组织 粘蛋白。 1、毒力因子：黏附素（本质不清楚）和酶类（可能 是神经氨酸酶）。 2、感染与传播：经损伤的皮肤和消化道感染，也可 经吸血昆虫传播。 3、本菌在自然界分布十分广泛，可寄生于哺乳动物、 禽和鱼类。以猪多发，叫猪丹毒；禽也可发生，称禽丹 毒；羊也可以感染；人感染称为类丹毒。
复习思考题
1. 李氏杆菌和猪丹毒杆菌的微生物学诊断。
2. 李氏杆菌和猪丹毒杆菌鉴别诊断要点。