地被菊花粉生活力测定方法的筛选
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法花粉是植物生殖过程中非常重要的一环，其生活力的测定对于植物繁殖和生长具有重要意义。
花粉生活力测定方法是通过一系列的实验和观察，来评估花粉的生长和发育能力，从而为植物的繁殖提供科学依据。
本文将介绍几种常见的花粉生活力测定方法，希望能够对相关领域的研究者和爱好者有所帮助。
首先，传统的花粉生活力测定方法是通过染色观察花粉管的生长情况。
首先，将采集到的花粉悬浮在含有营养液的培养基中，然后观察花粉管在一定时间内的生长情况，通过显微镜观察花粉管的长度和形态，从而评估花粉的生活力。
这种方法简单直观，但需要显微镜等设备，且操作较为繁琐。
其次，现代的花粉生活力测定方法中，常用的是荧光显微镜观察法。
通过将花粉与特定的荧光染料结合，使花粉在荧光显微镜下呈现出特定的荧光信号，从而可以清晰地观察花粉管的生长情况。
这种方法操作简便，观察效果明显，对于大规模的花粉生活力测定具有很大的优势。
另外，还有一种常见的花粉生活力测定方法是通过花粉萌发率来评估花粉的生活力。
这种方法是将采集到的花粉悬浮在含有营养液的培养基中，然后观察一定时间内花粉的萌发情况，通过统计萌发的花粉数量来评估花粉的生活力。
这种方法简单易行，可以在较短的时间内获取较为准确的结果。
除了上述几种方法外，还有一些新兴的花粉生活力测定方法，如分子生物学技术的应用、电子显微镜的观察等，这些方法在花粉生活力测定领域也取得了一些重要的进展。
综上所述，花粉生活力测定是植物繁殖和生长研究中的重要内容，而花粉生活力的准确测定则需要科学、准确的方法。
不同的方法各有优劣，研究者可以根据具体的实验目的和条件选择适合的方法进行花粉生活力的测定，从而为植物繁殖和生长研究提供可靠的数据支持。
希望本文介绍的几种常见的花粉生活力测定方法对相关领域的研究者和爱好者有所帮助，也希望在未来的研究中能够有更多更准确的花粉生活力测定方法被发展和应用。
花粉活力测定的3种办法
精心整理实验16?花粉活力的测定在作物杂交育种、作物结实机理和花粉生理的研究中，常涉及花粉活力的鉴定。
掌握花粉活力快速测定的方法，是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示内外因素对花粉育性和结实率影响的基础。
一、花粉萌发测定法【原理】水放???????1.用。
2.20℃条???????1.不同种类植物的花粉萌发所需温度、蔗糖和硼酸浓度不同，应依植物种类而改变培养条件。
???2.此法也可用于观察花粉管在培养基上的生长速度以及不同蔗糖浓度，离体时间，环境条件等因素对花粉活力的影响。
3.不是所有植物的花粉都能在此培养基上萌发，本法适用于易于萌发的葫芦科等植物花粉活力的测定。
二、碘-碘化钾染色测定法多数植物正常的成熟花粉粒呈球形，积累较多的淀粉，I2-KI溶液可将其染成蓝色。
发育不良的花粉常呈畸形，往往不含淀粉或积累淀粉较少，I2-KI溶液染色呈黄褐色。
因此，可用I2-KI溶液染色来测定花粉活力。
【器材与用具】???显微镜；载玻片与盖玻片；镊子；棕色试剂瓶；烧杯；量筒；天平。
???【试剂】-KI300ml。
???I2～3张片??基四氮唑）还原成红色的TTF（三苯基甲??）而使其本身着色，无活力的花粉呼吸作用较弱，TTC 的颜色变化不明显，故可根据花粉吸收TTC后的颜色变化判断花粉的生活力。
【器材与用具】显微镜；载玻片与盖玻片；镊子；恒温箱；棕色试剂瓶；烧杯；量筒；天平。
【试剂】0.5%TTC溶液：称取0.5gTTC放入烧杯中，加入少许95%酒精使其溶解，然后用蒸馏水稀释至100ml。
溶液避光保存，若发红时，则不能再用。
采集任何植物的花粉，取少许放在干洁的载玻片上，加1~2滴0.5%TTC溶液，搅匀后盖上盖玻片，置35℃恒温箱中，10~15min后镜检，凡被染为红色的花粉活力强，淡红次之，无色者为没有活力或不育花粉。
观察2~3张片子，每片取5个视野，统计花粉的染色率，以染色率表示花粉的活力百分率。
2实验二、花粉生活力测定
前 言
花粉生活力测定在育种 力 2．雄性不育系的鉴定
实验目的：
学习并初步掌握作物花粉生 活力测定的常用方法
测定方法:
（一）I-KI染色鉴定
（二）TTC染色鉴定
（三）花粉粒发芽鉴定
实验方法 I-KI染色鉴定：
正常的成熟花粉粒体积较大， 并含有大量的淀粉粒，遇I-KI 呈紫黑色，不正常的花粉粒体 系较小、有时畸形、染色浅或 不染色。
实验方法 TTC染色鉴定：
具有生活力的花粉中含有 脱氢酶，它能催化引物使脱下 的氢与TTC结合，生成红色化 合物甲替。凡有生活力的花粉 呈红色，生活力弱的呈浅红色， 无生活力的不显色或成黄色。
实验方法
花粉粒发芽鉴定：
在人工培养基上进 行发芽试验，可以比较 准确地判断花粉的生活 力。
实验步骤
I-KI染色鉴定：
2 ．准备 TTC 染色和发芽试验的材料， 置培养箱保温； 3．调试显微镜，I-KI染色鉴定； 4．TTC染色鉴定、发芽率调查。
作业
实验三、作物花粉生活力测定 1．测定方法和原理： （一）I-KI染色鉴定：正常的成熟花粉粒体积较大，并含有大量的淀粉 粒，遇I-KI呈紫黑色，不正常的花粉粒体系较小、有时畸形、染色浅或 不染色。 （二）TTC染色鉴定：具有生活力的花粉中含有脱氢酶，它能催化底物 使脱下的氢与TTC（氯化三苯基四氮唑）结合，生成红色化合物甲替。 凡有生活力的花粉呈红色，生活力弱的呈浅红色，无生活力的不显色或 成黄色。 （三）花粉粒发芽鉴定：在人工培养基上进行发芽试验，可以比较准确 地判断花粉的生活力。 2．实验结果： 材料 I-IK染色率% TTC染色率% 发芽率%
用镊子夹一个花药于载玻片 上滴上一滴1%I-KI溶液 用镊子将花药夹碎并把碎片 去干净盖上盖玻片置显微 镜下观察。
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法
花粉是植物生殖的重要组成部分，其生活力的测定对于植物繁殖和种子生产具有重要意义。
本文将介绍几种常用的花粉生活力测定方法，希望能够对相关领域的研究者和生产者有所帮助。
首先，最常见的花粉生活力测定方法是离体培养法。
这种方法首先需要收集新鲜的花药，然后在适当的培养基上进行培养，观察花粉的萌发情况来判断其生活力。
离体培养法的优点是操作简单，结果可靠，因此被广泛应用于植物育种和种子生产中。
其次，荧光显微镜法也是一种常用的花粉生活力测定方法。
这种方法利用荧光显微镜观察花粉颗粒的形态和结构，通过判断其内部结构的完整性来评估花粉的生活力。
荧光显微镜法对花粉的观察更加直观，能够提供更多的信息，但需要专业的设备和操作技能。
另外，还有一种叫做染色法的花粉生活力测定方法。
这种方法通过在花粉颗粒上涂抹特定的染料，然后观察染色情况来判断花粉的生活力。
染色法简单易行，可以快速得到结果，但对染料的选择和浓度有一定要求。
除了上述方法，还有一些新兴的花粉生活力测定方法，比如电子显微镜法、流式细胞仪法等。
这些方法在技术上更加先进，能够提供更为精细的数据，但也需要更高的成本和专业的操作技能。
综上所述，花粉生活力的测定对于植物育种和种子生产具有重要意义，而不同的方法各有优劣。
在选择具体的测定方法时，需要根据实际情况和研究目的进行综合考虑，以便选择最适合的方法。
希望本文介绍的内容能够对相关领域的研究者和生产者有所启发，推动相关领域的科研工作和生产实践取得更好的成果。
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法
花粉生活力是指花粉颗粒的活力和生长能力，是衡量植物繁殖成功的重要指标。
花粉生活力测定方法是一种用来评估花粉质量和活力的技术手段，对于植物繁殖和种子生产具有重要意义。
传统的花粉生活力测定方法主要包括花粉染色观察法、花粉萌发率测定法和花
粉活力染色法。
花粉染色观察法是将花粉染色后在显微镜下观察其形态和数量，从而评估花粉的活力和质量。
花粉萌发率测定法则是将花粉培养在适宜的培养基上，观察其萌发情况以评估花粉的活力。
花粉活力染色法则是利用染色技术来观察花粉内部的活力指标，如线粒体和细胞核的活跃程度。
随着科学技术的发展，现代的花粉生活力测定方法也在不断完善和创新。
比如，利用生物技术手段对花粉进行基因测序和分析，可以更准确地评估花粉的生活力和遗传信息。
同时，利用先进的显微镜和成像技术，可以对花粉的微观结构和形态进行更精细的观察和分析。
花粉生活力测定方法的发展不仅有助于科学家和植物育种者更好地了解植物的
繁殖机制和生长规律，也为农业生产和生态保护提供了重要的技术支持。
通过准确评估花粉的生活力，可以选择出高质量的花粉进行人工授粉或者种子生产，从而提高植物的繁殖成功率和产量。
此外，对花粉生活力的准确测定也有助于保护植物遗传资源，促进植物多样性的保护和利用。
总之，花粉生活力测定方法是一项重要的植物科学技术，它为我们深入了解植
物繁殖机制和提高农业生产效率提供了重要的技术手段和支持。
随着科学技术的不断进步，相信花粉生活力测定方法将会在未来发挥更加重要的作用。
地被菊花粉萌发及花粉活力的研究[1]
![地被菊花粉萌发及花粉活力的研究[1]](https://img.taocdn.com/s3/m/6b050a2a915f804d2b16c1cf.png)
2004年第5期辽宁林业科技Journal of Liaoning Forestry Science &Technology2004№5地被菊花粉萌发及花粉活力的研究①毛洪玉,崔文山,王亚斌(沈阳农业大学林学院,辽宁沈阳 110161)摘 要:用M E 3的盐类和维生素附加16%聚乙二醇4000(PEG 4000)和15%蔗糖对野菊及新红、塞旗红、玫瑰红的花粉进行培养。
结果表明,萌发率分别为80.2%、85.3%、61.3%和46.5%。
PEC 4000对菊花萌发有明显促进作用,但庶糖的作用不能被PEG 所取代。
菊花花粉萌发较合适的温度为10～20℃,在4～8℃时,萌发率及速度迅速降低,35℃萌发虽快,但花粉管短且破裂。
在4℃条件下花粉可贮藏4～14d ,但不宜干燥贮藏。
关键词:地被菊;培养基;花粉萌发;花粉生活力中图分类号:S944.42 文献标识码:A 文章编号:1001-1714(2004)05-0012-03Pollen germination and vitality of ground 2cover chrysanthemum groupMAO Hong 2yu ,CU I Wen 2shan ,WAN G Ya 2bin(Forestry College of Shenyang Agriculture University ,Shenyang 110161,China )Abstract :Pollens of Dendranthemum indicum and its three hybrids with chrysanthemum cultivars xinhong ,saiqihong and meiguihong were cultured on a modified liquid monitor medium ME 3supplemented with 16%PEG 4000and 15%sucrose and a germination rate of 80.2%,85.3%,61.3%and 46.5%res pectively was obtained.PEG 4000was shown to have the capacity of inducing germination of chrysanthemum pollens.It could not ,however ,re place the function of sucrose.Fur 2ther experiments on pollen vitality indicated that the optimum germination temperature ranged form 10to 20℃.At 4～8℃,germination rate and s peed decreased sharply ,while at 35℃the pollen tubes were short and prone to break though the pollens germinated quickly.At 4℃,the pollens of various genotypes remained viable in storage for 4～14days.K ey words :ground 2cover chrysanthemum group ,culture media ,pollen germination ,pollen vitality 地被菊品种很多,且花期不一致,倘若杂交的两亲本之间花期不遇,或者涉及到异地杂交的问题,要对采集的花粉进行贮藏或运输,在这些过程中花粉的生命力要受到一定程度的影响,自然也就会对杂交的成功率产生影响。
实验四、花粉生活力的测定
实验四、花粉生活力的测定一、实验目的：通过实验掌握花粉生活力测定的具体技术和方法。
二、实验原理：花粉生活力是指在正常条件下花粉在雌蕊上萌发的能力。
花粉生活力测定在杂交工作中很重要，尤其亲本花期不相同需要从外地采集花粉作父本时，花粉要经过一段较长时间的贮藏运输过程，因此在杂交前应检验花粉的生活力，以免应用无生活力的花粉而造成杂交工作的失败。
三、实验材料：苹果花粉四、实验用具与试剂：指形管、显微镜、载玻片、盖玻片、凹式载玻片、滴瓶、培养皿、天平、烧杯、玻璃棒、微波炉、滤纸、水浴锅、计数器、镊子；碘化钾（KI）、碘、蓝墨水、蒸馏水、蔗糖、琼脂、硼酸等。
五、实验步骤常用的测定花粉生活力的方法：形态观察法、碘-碘化钾染色法、蓝墨水染色法和培养基发芽法。
1. 形态观察法直接在显微镜下观察花粉的形态，根据花粉的典型性（如具有正常的大小、形状、色泽等）判断花粉的生活力，即形态正常的花粉有生活力，而一些小的、皱缩的、畸形的花粉不具有生活力。
具体方法：将花粉置于载玻片上，在显微镜下观察3个不同视野，要求被检查的花粉粒总数达到100粒以上，计算正常花粉粒占总数的比率。
此法简便易行但准确性差，一般只用于测定新鲜花粉的生活力。
2. 染色法(1) 碘-碘化钾染色法①原理：正常的花粉积累淀粉较多，而不正常的花粉则少。
据此，可用化学物质染色，根据呈色反应来间接测定花粉的正常与否和花粉生活力的差别。
通常正常花粉用I-KI染色后呈蓝色，而发育不良畸形花粉则不积累淀粉，当I-KI染色时呈黄褐色。
②I-KI溶液：取2.0 g KI溶于5～10mL蒸馏水中，然后加入1.0 g I2待全部溶解后，再加蒸馏水至200mL，贮于棕色瓶中备用。
③具体方法：取少量花粉撒于载玻片上，加一滴蒸馏水，用镊子使花粉散开，再加一滴I-KI溶液，盖上盖玻片置于显微镜下观察。
凡被染色呈蓝色表示具有生活力，呈黄褐色者为发育不良生活力弱的花粉。
为了保证实验的准确性，要求观察不同的3个视野，求其平均值，统计花粉生活力。
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法
花粉生活力是指花粉颗粒在一定条件下能够完成受精和发育的能力。
花粉生活力的测定对于植物的研究和育种具有重要意义。
下面将介绍几种常用的花粉生活力测定方法。
首先，最常用的方法是离体花粉萌发法。
这种方法是将收集到的花粉在一定的培养基上进行培养，观察花粉颗粒是否萌发。
通过观察花粉管的生长情况和数量，可以初步判断花粉的生活力。
这种方法简单易行，可以在实验室条件下进行。
其次，还有花粉染色法。
这种方法是将花粉颗粒染色后观察其形态和结构，从而判断花粉的生活力。
通过观察染色后的花粉颗粒的形态、颜色和内部结构，可以初步判断花粉的生活力。
这种方法需要借助显微镜进行观察，对实验条件要求较高。
另外，还有花粉活力染色法。
这种方法是利用活性染料对花粉颗粒进行染色，观察染色后的花粉颗粒的颜色和形态，从而判断其生活力。
这种方法对于花粉的活力有较高的敏感性，可以较准确地判断花粉的生活力。
最后，还有花粉酶活性法。
这种方法是通过检测花粉中的酶活性来判断其生活力。
通过测定花粉中的酶活性，可以间接地反映出花粉的生活力。
这种方法需要借助生化实验室进行，对实验条件和仪器设备要求较高。
综上所述，花粉生活力的测定方法有多种，每种方法都有其特点和适用范围。
在实际应用中，可以根据具体的研究目的和实验条件选择合适的方法进行花粉生活力的测定。
通过准确测定花粉的生活力，可以为植物的研究和育种提供重要的参考依据。
植物花粉生活力测定技术
1．测定花粉生活力的意义有哪些？ 2．分析在实验中出现的问题，并找出原因所在。 3．将四种方法的结果分别记载于表中，并比较结果是否一致，如不一致，分析其原因。Fra bibliotek表 1－6
供试 花粉收集 测定 第一视野
品种 日期 日期
第二视野
具有生活力 第三视野
的花粉%
备注
直接鉴定法
TTC 染色法
发芽测定法 形态鉴定法
1．外地采集来的花粉或杂交时父本花期早于母本时都要将花粉进行短暂贮藏； 2．自交或远缘杂交时，为了分析结实率或不结实原因时； 3．为了鉴定雄性不育系时； 4．了解某些杂交技术时，如测定花粉的刺激等作用，测定受精选择性等。 因此，要根据各种植物花粉的特点，采取适当的保存方法。花粉生活力的测定方法很多， 其中发芽试验手续较复杂，设备要求较高，需时也较长。为了简易而迅速的测定花粉生活力， 也常采用化学染色的方法，但是此法也有缺点，就是染上色的花粉不一定都具有生活力，因 为染上色的花粉中也包括了那些生活力弱不能正常发芽的花粉，所以一般常用而且较为可靠 的方法仍然是采用花粉发芽实验。要是要求不严格对新采集的花粉还有一个较简便的鉴定方 法——形态鉴定法。 本实验目的是学习花粉生活力测定的方法，进而研究花粉寿命长短与环境条件的关系， 以探求保存花粉的合适方法。
（2）TTC 溶液：称取 0.02～0.05 克（不同植物所用的量是不同的）的 TTC 溶解在 10ml 的磷酸缓冲液中，溶液配好后装入棕色滴瓶内，置入暗处，因氯化三苯基四唑有毒，操作时 要注意安全。
2．操作步骤： （1）取少量花粉放在载玻片上，并在花粉上滴上 1～2 滴配制液，用玻璃棒混合后盖上 盖玻片。 （2）将载玻片置于恒温箱中（35～40℃）约 15～20min。 （3）在显微镜（10×10）下观察：凡具有生活力的花粉呈红色，部分丧失生活力的呈 淡红色，无色的是死的和不育的花粉粒。 3．观察和测定结果：每片观察 3 个视野，并统计具有生活力花粉的百分率，填入表 1 －6。 （三）发芽测定法（培养基培养法） 1．培养基的配制 常用的花粉发芽培养基有液体和固体两种。以前者最为简便。本实验选用前者。其有效 成分主要有：蔗糖、硼酸、柠檬酸、赤霉素等。不同的植物所用的蔗糖培养液的浓度是不同 的，配制 3～30%的蔗糖培养液：在 100ml 水中，加糖 3～30g，加热溶解后，再加 0.1%硼 酸数滴。 2．制片 取双凹载玻片，滴 2 滴培养液于槽中，用解剖针挑少许花粉均匀撒于培养液的表面（注 意不必搅拌，以防花粉混于液体中因缺少空气而影响发芽，又因花粉深浅不一而在显微镜检 查时因光线折射而不易观察。）处理好后，放于一下部添有少量蒸馏水、内有两根玻璃棒的 培养皿中（注意不要使水没过载玻片），放到恒温为 25℃左右的恒温箱中或室内 2h。 3．镜检 将放置 2h 后的载玻片取出，放在显微镜下观察三个视野，统计总花粉数与发芽的花粉 数，然后计算比例，填入下面的表格中。 （四）形态鉴定法 对于新采集的花粉来说，还有一个更为简便的鉴定方法——形态鉴定法。将花粉用解剖 针播于一般载玻片上，然后直接放到显微镜下观察，根据形态特征，判断花粉的生活力状况， 一般来说，畸形、皱缩、小形化等均为无生活力花粉，而有光泽、饱满、具有本品种花粉典 型特征等性状的均为有生活力花粉。将观察的结果统计一下填写下表格。
10个菊花品种花粉生活力测定和贮藏方法研究
10个菊花品种花粉生活力测定和贮藏方法研究作者：李亚军黄河牛雅静李霞来源：《福建农业学报》2020年第03期摘要：[目的]筛选菊花花粉离体培养生活力测定的最佳培养基配方，探究花粉贮藏的最适温度和耐贮藏时间，并挑选出较耐贮藏的菊花品种，为菊花新品种选育和种质资源保存提供参考。
[方法]以10个菊花品种盛花期花粉为试验材料，通过离体萌发测定法筛选菊花花粉萌发最适培养基，以该培养基测定花粉在4℃、-20℃和-80℃3种温度下进行60d或120d贮藏周期的生活力变化趋势观测，每隔15d取样检测1次;对贮藏120d的花粉进行授粉，统计结实率。
[结果]培养基为ME3+200g·L-1PEG4000+6g·L-1琼脂的处理，10种花粉都能萌发，且萌发率较其他培养基有显著差异;花粉贮藏60d后，所有花粉生活力均下降，其中‘5’‘52’‘64’和‘85’4个品种花粉生活力下降较缓慢;4种花粉贮藏120d后，在-80℃贮藏的花粉生活力较高，花粉授粉后均能够结实，且品种‘5’花粉授粉结实率最高，平均每个授粉花序结实8粒。
[结论]花粉萌发培养基、植物品种基因型、贮藏温度和贮藏时间都会影响菊花花粉生活力。
本文研究表明，菊花花粉最适贮藏温度为-80℃，品种‘5’花粉可贮藏120d保持较高的授粉结实率，在杂交育种中可优先考虑。
关键词：菊花，花粉生活力，贮藏，授粉中图分类号：S682.1+1文献标志码：A 文章编号：1008-0384（2020）03-0295-080 引言（研究意义）花粉是植物遗传信息的载体和交流工具，花粉贮藏是保存种质资源最简洁、高效的途径。
在杂交育种工作中，花粉贮藏能够解决亲本花期不遇和远距离杂交问题，打破杂交亲本的空间和时间隔离。
菊花（Chrysanthemum X morifolium Ramat.）是菊科菊属植物，在世界各地园艺造景中广泛应用，杂交育种是培育菊花新品种的主要手段。
因而探讨菊花花粉最佳贮藏条件对于解决菊花近缘属间杂交以及品种间杂交所面临的花期不遇或远距离杂交等问题具有重要意义，同时在使用贮存花粉之前，选择合适的方法对花粉生活力进行测定，可确保选择了最优花粉进行人工授粉而得到性状优良的后代。
花粉生活力测定
精品资料
花粉发芽鉴定：配制一定浓度的蔗糖溶 液等作培养基，在人工控制条件下进行 花粉发芽试验，根据花粉发芽率的高低 衡量(héng liáng)花粉生活力。也可以在 授粉数小时后直接观察柱头花粉萌发伸 长情况。
染色鉴定：用不同的化学试剂如氯化三 苯基四氮唑（2，3，5-triphenyl tetrazolium chloride、C12H15N4Cl， 简称TTC或四唑）、联苯胺茶酚等快速
在显微镜下镜检计数
【注意事项】 1.不同种类植物的花粉萌发所需温度、蔗糖和硼酸浓度(nóngdù)不同，应依植物种类而改 变培养条件。 2.此法也可用于观察花粉管在培养基上的生长速度以及不同蔗糖浓度(nóngdù)，离体时间 ，环境条件等因素对花粉活力的影响。
3.不是所有植物的花粉都能在此培养基上萌发，本法适用于易于萌发的(葫芦科等)植物花粉 活力的测定。
★ 培养基法能够统计出百分率，准确度高 ，但是操作相对复杂(fùzá)，而且花粉发芽 条件与实际不完全相符易受培养基配方的 影响导致结果的偏差。
精品资料
配置培养基（ 100ml水+1g+琼脂+0.01g硼酸+ 5-20g糖 ） 煮沸溶化
用玻棒分装与凹玻片中 播撒花粉
置于培养皿中20-25℃恒温培养数小时 保持(bǎochí)湿度
同期花粉萌发(méngfā)率对比图
萌发率
花粉生活力变化图
常温
冰箱 80.00%
60.00%
40.00%
20.00%
0.00% 3 6 9 12 15 18 21 24 27 30 时间
精品资料
五 结果(jiē guǒ)与数据分析
花粉的形态观察及生活力测定.
实验一花粉贮藏及花粉生活力的测定花期不遇给杂交工作造成困难，有的园林植物可通过调整花期来解决，有的则不得不进行花粉贮藏，或者从外地寄运花粉。
为了避免杂交工作失误，在使用外地寄来的花粉或经过一段时间贮藏的花粉之前，必须对花粉的生活力进行检测，以便对杂交结果进行分析与研究。
因此我们必须掌握花粉贮藏及花粉生活力测定的原理和技术一、实验目的掌握花粉贮藏及花粉生命力鉴定的方法和原理。
二、实验材料百合、金鱼草、菊花等花粉。
三、仪器及药品显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、吸水纸、TTC（2.3.5—氯化三苯基四唑）、KI-I2、蓝墨水。
四、实验原理花粉在低温（ 0 ～ 2 ℃）、干燥、黑暗等条件下代谢强度降低，花粉贮藏的原理就是要创造这样低代谢的环境条件，从而延长花粉的寿命。
花粉的形态、花粉中酶的活性以及积累淀粉的多少（淀粉质花粉）通常与其生活力密切相关，因此可以利用花粉的形态观察、过氧化物酶、脱氢酶的活性高低、淀粉的含量以及在人工培养基上花粉管萌发的情况作为鉴定花粉生活力高低的标准。
鉴定花粉生活力的方法很多，概括起来主要有如下几种：1 ．直接测定法将待测花粉直接授粉，然后统计结实情况。
此法最准确，但需时较长，且实验结果易受气候条件的影响。
也可在授粉后隔一定时间切下柱头，在显微镜下压片检查花粉的萌发情况，根据萌发率的高低来鉴定花粉的生活力。
2 ．形态观察法直接在显微镜下观察花粉的形态，根据品种花粉的典型性（如具有正常的大小、形状、色泽等）判断花粉的生活力，即形态正常的花粉有生活力，而一些小的、皱缩的、畸形的花粉不具有生活力。
此法简便易行但准确性差，一般只用于测定新鲜花粉的生活力。
3 ．染色观察法1 ）碘－碘化钾染色法：以碘－碘化钾溶液（ 0.3g 碘＋ 1.3g 碘化钾溶于 100ml 蒸馏水）染色后于显微镜下观察，花粉被染成蓝色者表示具有生活力，花粉呈黄褐色者不具有生活力。
2 ） TTC 染色法：使用TTC测定花粉生命力的原理，主要是无色药液进入花粉遇到活组织里的脱氢酶，接受氢离子，还原成红色三苯基甲腊TTF，还原结果使有生命力的花粉染上红色，死花粉不着色；花粉生活力强弱有异，染色深浅也有不同。
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法
花粉是植物繁殖的重要媒介，其生活力的测定对于植物繁殖和生长具有重要意义。
近年来，随着科学技术的不断发展，花粉生活力测定方法也得到了不断的改进和完善。
传统的花粉生活力测定方法主要包括离体花粉萌发试验、花粉染色观察、花粉活力染色观察等。
这些方法虽然可以初步判断花粉的生活力，但存在着操作繁琐、结果不稳定、时间周期长等问题，限制了其在实际应用中的发展。
近年来，随着生物技术和显微镜技术的不断进步，新型的花粉生活力测定方法逐渐被引入。
比如，利用荧光显微镜观察花粉萌发情况，结合数字图像处理技术进行分析，可以快速、准确地测定花粉的生活力。
另外，利用生物标记技术对花粉进行标记，然后观察其在植物受精过程中的行为，也可以对花粉的生活力进行评估。
除了显微镜技术和生物标记技术，分子生物学技术在花粉生活力测定中也发挥了重要作用。
通过分析花粉中的基因表达情况、蛋白质组成等，可以更直观地了解花粉的生活力情况，为植物繁殖提供更准确的数据支持。
综上所述，随着科学技术的不断发展，花粉生活力测定方法也在不断完善和创新。
新型的测定方法不仅提高了测定的准确性和稳定性，同时也为植物繁殖和生长研究提供了更多的可能性。
相信随着科学技术的不断进步，花粉生活力测定方法将会更加完善，为植物繁殖和生长研究带来更多的突破和进展。
花粉活力测定的3种方法
实验16? 花粉活力的测定在作物杂交育种、作物结实机理和花粉生理的研究中，常涉及花粉活力的鉴定。
掌握花粉活力快速测定的方法，是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示内外因素对花粉育性和结实率影响的基础。
一、花粉萌发测定法【原理】正常的成熟花粉粒具有较强的活力，在适宜的培养条件下便能萌发和生长，在显微镜下可直接观察计算其萌发率，以确定其活力。
【器材与用具】载玻片；显微镜；玻棒；恒温箱；培养皿；滤纸。
【试剂】培养基：10%蔗糖，10mg/L硼酸，0.5%的琼脂。
称10g蔗糖、1mg硼酸、0.5g 琼脂与90ml水放入烧杯中，在100℃水浴中熔化,冷却后加水至100ml备用。
??? ?【方法】??? 1.将培养基熔化后，用玻棒蘸少许，涂布在载玻片上，放入垫有湿润试纸的培养皿中，保湿备用。
2.采集丝瓜、南瓜或其他葫芦科植物刚开放或将要开放的成熟花朵，将花粉洒落在涂有培养基的载玻片上，然后将载玻片放置于垫有湿滤纸的培养皿中，在25℃左右的恒温箱（或室温20℃条件下）中孵育，5~10min后在显微镜下检查5个视野，统计其萌发率。
??? ?【注意事项】??? 1.不同种类植物的花粉萌发所需温度、蔗糖和硼酸浓度不同，应依植物种类而改变培养条件。
??? 2.此法也可用于观察花粉管在培养基上的生长速度以及不同蔗糖浓度，离体时间，环境条件等因素对花粉活力的影响。
3.不是所有植物的花粉都能在此培养基上萌发，本法适用于易于萌发的葫芦科等植物花粉活力的测定。
二、碘- 碘化钾染色测定法【原理】多数植物正常的成熟花粉粒呈球形，积累较多的淀粉，I2-KI溶液可将其染成蓝色。
发育不良的花粉常呈畸形，往往不含淀粉或积累淀粉较少，I2-KI溶液染色呈黄褐色。
因此，可用I2-KI溶液染色来测定花粉活力。
【器材与用具】? ??显微镜；载玻片与盖玻片；镊子；棕色试剂瓶；烧杯；量筒；天平。
??? 【试剂】??? I2-KI溶液：取2g KI溶于5～10ml蒸馏水中，加入1g I2，待完全溶解后，再加蒸镏水300ml。
花粉生活力测定
不同时间萌发率图
时间 冰箱保存 3 6 65.60% 49.60%
平均萌发率
常温保存 48.90% 39.40%
9 12
15 18 21 24 27 30
47% 45.40%
37% 30.10% 26.90% 22% 16.20% 10.20%
33.20% 29.50%
29.30% 21.50% 15.20% 10.30% 9.60% 8.23%
三、实验用品
1、材料 正在开花的植株花粉（大樱桃 美早） 2、器具 盖、载玻片 凹式载玻片 培养皿 滴管 镊子 吸 水纸 恒温箱 天平 烧杯 玻棒 电炉 普通显微镜 3、药品 蒸馏水 硼酸 蔗糖 琼脂 六偏磷酸钠
四、内容与方法（花粉萌发）
（一）培养法： 1、配置培养基 取100ml蒸馏水中，加1~2g（即1%~2%）琼脂煮开， 使之溶解，然后再加入一定量的蔗糖或葡萄糖和0.01g 硼酸，制成不同浓度（5%、10%、15%、20%）的蔗 糖琼脂培养基。 2、制片 用玻棒蘸少许培养基，趁热滴入凹形载玻片，放置片 刻，待凝固后，撒上少许花粉粒。注意要均匀，不可 过多，否则，在显微镜下，不易分清数目。 3、培养 将制好的玻片放于培养皿，下面垫有滤纸，加入少量 水，以保持湿度。将培养皿盖好，置于20~25℃恒温 箱中。22 ℃
谢谢大家！
六 结论
柱状图：不同温度保存相同时间下，冰箱 保存的萌发率高于常温保存 随时间增长两者萌发率都呈下降趋势 折线图：3-6天内冰箱保存萌发率下降较快 出现平缓的趋势，可能是实验存在误差 没有达到预期的效果，冰箱保存应该生活 力时间更长
六 实验的不足之处
文献查阅检准率和检全率不够 试验方案不完备 存放花粉时存在外围环境影响 试验时散花粉太多，计数时误差太大 数据记录不规范
植物花粉的贮藏与花粉生活力测定
为保持花粉的生活力，最好将装好的花粉放入冰箱内或放入装有无水氯化钙的干燥器中，如没有以上设备，也可把装有花粉的小瓶放入盛有石灰的箱子里，保持湿度25%以下，放在阴凉、干燥黑暗处，这样可短时期内贮藏。
原理：花粉在贮藏期间的稳定性与花粉壁外层的性质和贮藏期花粉原生质的代谢有关。贮藏期内花粉可溶性糖类和有机物消耗少，则能在较长时期内保持生活力。影响花粉生活力的外界因子主要是相对湿度、温度和气体环境及花粉本身的含水量。在贮藏花粉时需要创造一个干燥、低温、低氧的环境，使得花粉处于几乎不活动或休眠的状态。
六、花粉生活力的测定
直接测定方法
1. 将花粉直接授在同种植株的雌蕊柱头上，并做好隔离工作，然后观察结实情况；如发育正常收到种子，即证明花粉有生活力。
2. 花粉在柱头上发芽 （1）将花粉直接授在清洁的同种植株的雌蕊柱头上，并做好隔离工作，隔1至3天采集已授过花粉的柱头，用FAA固定液或60℃温水中固定15分钟以上。（2）染色制片 将固定的花柱取出，用1%的苯胺兰水溶液（将1克苯胺兰溶于100毫升蒸馏水中）染色24小时，把花柱撕开，放在载玻片上，盖上盖玻片，用大拇指轻压、镜检、观察、若花粉有生活力，即可见染成蓝色的花粉管深入柱头组织，若花粉无生活力则看不到花粉管深入柱头组织现象。
间接测定法（此法是借人为创造条件使得花粉发芽来鉴别是否有生活力）
1. 培养基法 100毫升蒸馏水加入1至2克琼脂加热溶解，在加入葡萄糖或蔗糖制成5%、10%、15%、20%浓度的培养基趁热分别倒入培养皿中，冷凝后呈固体培养基，然后用解剖针粘取少量的花粉，均匀撒在培养基上。将播种好的培养基放在20~25℃恒温箱中，24小时或更长一点时间即可镜检观察其发芽情况。
菊属植物花粉生活力检测方法的比较
菊属植物花粉生活力检测方法的比较赵宏波;陈发棣;房伟民【期刊名称】《浙江农林大学学报》【年(卷),期】2006(023)004【摘要】利用碘-碘化钾法、氯化三苯基四氮唑(TTC)法及改进TTC法、无机酸法、荧光染色法、离体萌发法、活体萌发法测定了菊属Dendranthema植物菊花脑Dendranthema nankingense,南京野菊Dendranthema indicum,毛华菊Dendranthema vestitum和栽培小菊品种rm43-2,rm46-1,rm48-2的花粉生活力.结果表明:碘-碘化钾法、TTC法及改进TTC法、无机酸法和荧光染色法都不适合菊属植物花粉生活力的检测;活体萌发法检测菊属植物花粉生活力不准确,但能有效表述花粉萌发力;离体萌发法能有效快速地测定花粉生活力,适合菊属植物花粉生活力的检测.图1参11【总页数】4页(P406-409)【作者】赵宏波;陈发棣;房伟民【作者单位】南京农业大学,园艺学院,江苏,南京,210095;南京农业大学,园艺学院,江苏,南京,210095;南京农业大学,园艺学院,江苏,南京,210095【正文语种】中文【中图分类】Q944.42;S682.1+1【相关文献】1.不同培养基及贮藏条件对山梅花属植物花粉生活力的影响 [J], 刘赢男;周丹;刘玮;李长海;宋莹莹2.三种忍冬属(Lonicera)植物花粉贮藏及生活力的测定 [J], 王丽瑛;王雪莲;张洮;彭俊3.3种含笑属植物花粉生活力的测定 [J], 杨琴军;黄英平;陈龙清4.鹅掌楸属植物花粉生活力的检测 [J], 唐芸5.多种蔷薇属植物花粉生活力的探究 [J], 李卉;韩禧;陈向前;商阳;姜马兰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
菊花花粉生活力及瓶插授粉研究
菊花花粉生活力及瓶插授粉研究
杨际双;李占军;王丽霞
【期刊名称】《河南农业科学》
【年(卷),期】2007(000)012
【摘要】为研究菊花花粉的生活力及其对室内瓶插杂交结实率的影响,用1%醋酸洋红染色法检测了10个菊花品种花粉的生活力.结果显示,菊花花粉生活力为70.8%～97.6%,不同品种间有一定的差异.同一个花序,外围管状花的花粉生活力比中心的高,而同一天内的花粉生活力随取样时间的不同也发生变化.花粉在4 ℃的冰箱内贮藏15 d后,花粉生活力平均降低了16.45个百分点.选取4个菊花品种间2个正反杂交组合进行室内瓶插授粉后,不同组合间结实率有很大差异.试验结果还表明,醋酸洋红染色法可以用来检测菊花花粉的生活力,菊花花粉生活力与杂交结实率并非简单的正相关关系.
【总页数】4页(P92-95)
【作者】杨际双;李占军;王丽霞
【作者单位】河北农业大学,园艺学院,河北,保定,071001;河北农业大学,园艺学院,河北,保定,071001;河北农业大学,园艺学院,河北,保定,071001
【正文语种】中文
【中图分类】S682.1+1
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地被菊花粉生活力测定及影响因素研究
地被菊花粉生活力测定及影响因素研究吕晋慧;赵耀;任意;袁思安;刘坤;陈阳【摘要】The efficiency and success or failurehy of bridization for Ground-cover Chrysanthemum were influenced by pollens germination ability. Hence,the methods for measureing Chrysanthemum pollens germination ability which is quickly and accurate could provid references for crosscombination and pollination time, also it is the key for sucsess of bridization. Thus,the isolated culture time, the optimal culture media and the important factors influencing pollen germination in vitro of Ground-cover Chrysanthemum were studied. The liquid media of ME3 was used as the basic culture. The results showed that: The pollen germination rate was the highest 90 min later when cultured in vitro; the optimal culture media was ME3 + sugar 100 g/L + PEG4000 150 g/L or ME, + sugar 150 g/L + PEG4000 150 g/L. 150 g/L of PEG600 and 250 g/L of PEG4000 could also promote pollen germination in vitro also; The factor temperature was important affecting pollen germination in vitro and 10,15,20℃ we re the optimum temperature for pollen germination, but which was repressed at high temperature; The pollen's germination ability were different owing to pollens collected in different time during the same day and the ones collected at 13 ;00 had the highest germination ability, and then followed by the ones from 11:00 to 15:00.%花粉生活力的高低直接影响地被菊杂交育种效率的高低或成败.快速准确测定不同地被菊品种的花粉生活力,可为正确选择杂交组合和授粉时间等提供参考依据,也是保证杂交育种顺利进行的关键.采用ME3液体培养基为基本培养基,探讨了地被菊花粉离体萌发的培养时间、适宜培养基和影响花粉生活力的主要因素,结果表明:花粉离体培养后90 min,花粉萌发率达到最高值；地被菊花粉萌发的适宜培养基为ME3+蔗糖100 g/L+PEG4000 150g/L或ME3+蔗糖150 g/L+PEG4000 150 g/L,150 g/L的PEG600和250 g/L的PEG4000也对花粉萌发有一定促进作用；温度是影响地被菊花粉萌发的重要因素,其中10,15,20℃是地被菊花粉萌发的适宜温度,高温会抑制花粉萌发；同一天内不同时间段采集的花粉生活力不同,其中13:00采集的花粉生活力最高,11:00 - 15:00也有较高的生活力.【期刊名称】《华北农学报》【年(卷),期】2011(026)004【总页数】5页(P189-193)【关键词】地被菊;花粉;离体萌发;萌发率;生活力【作者】吕晋慧;赵耀;任意;袁思安;刘坤;陈阳【作者单位】山西农业大学林学院,山西太谷 030801;山西农业大学林学院,山西太谷 030801;华南农业大学林学院,广东广州 510246;山西农业大学林学院,山西太谷030801;山西农业大学林学院,山西太谷 030801;山西农业大学林学院,山西太谷030801【正文语种】中文【中图分类】S682.1+1地被菊因其极强的抗逆性和植株低矮、开花繁茂等特性而倍受关注[1]。
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４ 过氧化物酶测定法。染色溶液的配制 ：①将 ） ０ ０ｇ ． 联苯胺溶于 １０ｍ ２ ０ Ｌ的 ５ ％酒精溶液中：②将 ０ ０１ 一 ． ｇ 蔡酚 溶 于 １０ｍ ５ ０ Ｌ的 ５ ％酒 精 溶 液 中 ； 将 ０ ③ ０ ５ｇ ａ Ｏ 溶于 １０ｍ 蒸馏水 中。将以上① 、 、 ． ： ， ２ Ｎ Ｃ ０ Ｌ ② ③溶 液分 别放 于棕 色试 剂瓶 中备用 。 用 时将这 ３种 使 溶液等量混合配成试剂 Ｉ， 放入棕色试剂瓶 中； 再配 制 ０３ ．％的 Ｈ０ 溶 液 作 为试 剂 Ｉ 装 入 棕 色试 剂瓶 中 Ｉ， 备用 。取少 量花 粉撒 于载玻 片 上 ， 试剂 Ｉ 试剂 Ⅱ 加 和 各 １ ， 上盖 玻 片 ， 人 ３ ＝ 温箱 ，０ｍｎ后 将 滴 盖 放 ０ｃ恒 Ｉ １ ｉ 载 玻 片置 于显微 镜下 观察 。 色后呈 红 色的花 粉有 生 染 活 力 ， 黄 色或无 色 的花粉无 生 活力 。 呈 １ ． 活体 萌发 法 取授 粉 ５ｈ后 的 柱头 ．ห้องสมุดไป่ตู้ 人卡 ．２ ２ 诺 固定 液 中 固定 １～５ｈ后 ， ４ｍ ｌＬ的 Ｎ Ｏ ０ １ 用 ｏ ／ ａ Ｈ溶 液 软 化 脱 色 １ｈ ，然 后 用 ０１ 溶 性 苯 胺 蓝 的 ２ ． ％水 ％ ＫＰ 液 浸泡 染 色 １ｈ Ｏ 溶 ，甘油 压 片后 在 荧光 显微 镜 下 观 察［。 引 １ ． 离体 萌发 法 在 １％Ｐ Ｇ ０ ．３ ２ ５ Ｅ ６０ ０条件 下 ， 定 ５ 选 个 浓 度 蔗糖 （％、０ 、５ ２ ％、５ 、 酸 （ 、０ ５ １％ １％、０ ２％）硼 ０ｌ、
果直观可靠 ； 最适 宜的培养基为 ：５ １％蔗糖＋ ０ｍ ／ ２ ｇＬ硼酸＋ ０ｍｇＬＣ Ｃ２１ ％ Ｐ Ｇ ０ 。 １ ／ ａ １ ５ Ｅ ６００ ＋
关 键 词 ： 被 菊 ； 粉 ； 活 力 ； 色法 ； 发 法 地 花 生 染 萌 中 图分 类 号 ：６ ８ ￥８ ． ４ 文 献 标 识 码 ： Ａ 文 章编 号 ：６ ４ １６ （０ ００ — ０ ５ ０ １７ — １ １ １） ０ １ — ３ ２ ４
在 杂交 育种 过程 中 ， 粉生 活力 是决定 杂 交结 实 花 的重要 因素之 一 ，特别 在解 决花期 不 遇这 一 问题 时 。 贮 存或 使 用 花粉 前 ．通常 要 对 花粉 的生 活力 进 行 测 定， 以估计 它是 否具 有保 存价 值和 萌发 能力 。 目前 ， 关 于花粉 生活力 测定 的方法 已有 大量 报道 ． 要分 为染 主 色法 、 活体 萌发 法和 离体 萌发法 。通 过对 地 被菊 花粉 生 活力 测 定方 法 的 试验 比较 ， 选 出准 确 、 便 、 筛 简 快 捷 的测 定方 法 ， 以期 为地被 菊大 规模 制种 和贮 藏 以及 花粉生 活力 鉴定 提供 可靠 的依据 。
第 ４期 总第 １０期 ９
农 业科技 与装备
Ｎ Ｏ． Ｏ ａ Ｏ．９ ４ Ｔ ｔｌＮ １ ０
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地 被菊花粉 生活 力测定方法 的筛选
王 涛 ， 董玉芝 ， 高英旭 ， 李东升 。 吴春 雷 。 ，
（． １ 新疆农业 大学 林学院 ， 鸟鲁木 齐 ８ ０ ５ ；． ３０ ２ ２辽宁省林业科 学研 究院， 沈阳 １０３ ；． １０ ２ ３沈阳农业 大学 林 学院， 沈阳 １０ ６ ） １ １１
摘要 ： 花粉生活力是决定地 被菊杂交结实 的重要因素。采用染色法 、 活体萌发法 和离体萌发法测定地被菊花粉 活力并进行 比较试 验 。结果表明 ： 染色法不适 合地被菊花粉活力测定 ； 活体萌发法只能定性 判断花粉生活力 的大小 ， 而不能定量判断 ； 离体萌发法结
３ 氯 化三 苯基 四氮 唑染 色 （ 法 。 Ｆ ） ａ ｃ） Ｔ Ｃ溶液 的 ｒ 配 制 ： ｐ ． ２ｍｏ Ｌ磷 酸缓 冲液 配制 成 １ 用 Ｈ７ ２的 ｌ ／ ％的 Ｔ Ｃ溶液 。取少 数花 粉置 于载玻 片上 ． １ Ｆ 加 ２滴 Ｔ Ｃ ｒ 溶液 ， 上 盖玻 片 。放置 于 ３ 盖 ５℃恒 温箱 中 １ ｎ 然 ５ｍｉ， 后在 显微 镜下 观察 。凡 是染成 红 色的花粉 ， 生 活力 其 为强 ， 红 的次 之 ， 色 的 为不 具 活力 的花 粉或 不 育 淡 无 花粉 。
１ 材 料 与 方 法
１１ 材 料 ．
以地 被菊 实生 选种 圃 内混合 的新鲜 花 粉为试 材 ． 试验 在沈 阳农业 大 学菊 花种质 资 源 圃进 行 。 １２ 方法 ．
１ ． 染 色法 ．１ ２
１ 碘一 碘化钾 （－ Ｉ法 。— Ｉ 液 的配制 ： ２ ） ￣Ｋ ） ＩＫ 溶 取 ｇＫ 溶于 １ Ｉ ０ｍＬ蒸馏 水 中 ，加 入 １ Ｉ ｇ ，待全 部溶 解 后 ，再加 蒸馏 水定 容 到 ３０ｍＬ ０ 。将 花 粉 置于 载玻 片 上， 滴上 １２ ＩＫ 染液 ， － 滴 —Ｉ 具较强活力的花粉呈蓝黑 色 ， 弱的为 淡蓝 色 ， 活力 的花 粉无 色 ［３ 较 无 １］ －。 ２ 醋 酸洋红 染 色法 。醋酸洋 红溶 液 的配制 ： ） 先将 ５ ０ｍＬ的 ４ ％的醋 酸水 溶液 放 人锥 形瓶 中煮沸 ， ５ 然后 徐徐 投入 ０５ｇ的洋 红粉 末 （ ． 投入 时 防止粉 末溅 出 ） ， 待 全 部 投 入后 再 煮 ｌ２ｒｎ （ 时 可悬 人 一 个 小 铁 ～ ｉ，此 ａ 钉 ， １２ｒｉ 取 出 ， 待 － ｎ后 ａ 以使染 色 剂 中略具 铁质 ， 进 增 染色 陛能 ）过滤 后保 存在 具玻璃 塞 的棕 色瓶 中待 用 。 ， 取 少量 花粉 置于 载玻 片上 ，加 １２滴醋 酸洋 红溶 液 ． ￣ 盖上盖玻片染 色 ２ ｉ， ０ ｎ 吸去多余染 液 ． ａ ｒ 置于显微镜 下 观察 。呈深 红 色的花 粉有 生活 力 ， 呈淡 红 色 的则 而 无 生活 力