地被菊花粉生活力测定方法的筛选

４ 过氧化物酶测定法。染色溶液的配制 ：①将 ） ０ ０ｇ ． 联苯胺溶于 １０ｍ ２ ０ Ｌ的 ５ ％酒精溶液中：②将 ０ ０１ 一 ． ｇ 蔡酚 溶 于 １０ｍ ５ ０ Ｌ的 ５ ％酒 精 溶 液 中 ； 将 ０ ③ ０ ５ｇ ａ Ｏ 溶于 １０ｍ 蒸馏水 中。将以上① 、 、 ． ： ， ２ Ｎ Ｃ ０ Ｌ ② ③溶 液分 别放 于棕 色试 剂瓶 中备用 。 用 时将这 ３种 使 溶液等量混合配成试剂 Ｉ， 放入棕色试剂瓶 中； 再配 制 ０３ ．％的 Ｈ０ 溶 液 作 为试 剂 Ｉ 装 入 棕 色试 剂瓶 中 Ｉ， 备用 。取少 量花 粉撒 于载玻 片 上 ， 试剂 Ｉ 试剂 Ⅱ 加 和 各 １ ， 上盖 玻 片 ， 人 ３ ＝ 温箱 ，０ｍｎ后 将 滴 盖 放 ０ｃ恒 Ｉ １ ｉ 载 玻 片置 于显微 镜下 观察 。 色后呈 红 色的花 粉有 生 染 活 力 ， 黄 色或无 色 的花粉无 生 活力 。 呈 １ ． 活体 萌发 法 取授 粉 ５ｈ后 的 柱头 ．放 人卡 ．２ ２ 诺 固定 液 中 固定 １～５ｈ后 ， ４ｍ ｌＬ的 Ｎ Ｏ ０ １ 用 ｏ ／ ａ Ｈ溶 液 软 化 脱 色 １ｈ ，然 后 用 ０１ 溶 性 苯 胺 蓝 的 ２ ． ％水 ％ ＫＰ 液 浸泡 染 色 １ｈ Ｏ 溶 ，甘油 压 片后 在 荧光 显微 镜 下 观 察［。 引 １ ． 离体 萌发 法 在 １％Ｐ Ｇ ０ ．３ ２ ５ Ｅ ６０ ０条件 下 ， 定 ５ 选 个 浓 度 蔗糖 （％、０ 、５ ２ ％、５ 、 酸 （ 、０ ５ １％ １％、０ ２％）硼 ０ｌ、
（． １ 新疆农业 大学 林学院 ， 鸟鲁木 齐 ８ ０ ５ ；． ３０ ２ ２辽宁省林业科 学研 究院， 沈阳 １０３ ；． １０ ２ ３沈阳农业 大学 林 学院， 沈阳 １０ ６ ） １ １１
摘要 ： 花粉生活力是决定地 被菊杂交结实 的重要因素。采用染色法 、 活体萌发法 和离体萌发法测定地被菊花粉 活力并进行 比较试 验 。结果表明 ： 染色法不适 合地被菊花粉活力测定 ； 活体萌发法只能定性 判断花粉生活力 的大小 ， 而不能定量判断 ； 离体萌发法结
第 ４期 总第 １０期 ９
农 业科技 与装备
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地 被菊花粉 生活 力测定方法 的筛选
王 涛 ， 董玉芝 ， 高英旭 ， 李东升 。 吴春 雷 。 ，
１ 材 料 与 方 法
１１ 材 料 ．
以地 被菊 实生 选种 圃 内混合 的新鲜 花 粉为试 材 ． 试验 在沈 阳农业 大 学菊 花种质 资 源 圃进 行 。 １２ 方法 ．
１ ． 染 色法 ．１ ２
１ 碘一 碘化钾 （－ Ｉ法 。— Ｉ 液 的配制 ： ２ ） ￣Ｋ ） ＩＫ 溶 取 ｇＫ 溶于 １ Ｉ ０ｍＬ蒸馏 水 中 ，加 入 １ Ｉ ｇ ，待全 部溶 解 后 ，再加 蒸馏 水定 容 到 ３０ｍＬ ０ 。将 花 粉 置于 载玻 片 上， 滴上 １２ ＩＫ 染液 ， － 滴 —Ｉ 具较强活力的花粉呈蓝黑 色 ， 弱的为 淡蓝 色 ， 活力 的花 粉无 色 ［３ 较 无 １］ －。 ２ 醋 酸洋红 染 色法 。醋酸洋 红溶 液 的配制 ： ） 先将 ５ ０ｍＬ的 ４ ％的醋 酸水 溶液 放 人锥 形瓶 中煮沸 ， ５ 然后 徐徐 投入 ０５ｇ的洋 红粉 末 （ ． 投入 时 防止粉 末溅 出 ） ， 待 全 部 投 入后 再 煮 ｌ２ｒｎ （ 时 可悬 人 一 个 小 铁 ～ ｉ，此 ａ 钉 ， １２ｒｉ 取 出 ， 待 － ｎ后 ａ 以使染 色 剂 中略具 铁质 ， 进 增 染色 陛能 ）过滤 后保 存在 具玻璃 塞 的棕 色瓶 中待 用 。 ， 取 少量 花粉 置于 载玻 片上 ，加 １２滴醋 酸洋 红溶 液 ． ￣ 盖上盖玻片染 色 ２ ｉ， ０ ｎ 吸去多余染 液 ． ａ ｒ 置于显微镜 下 观察 。呈深 红 色的花 粉有 生活 力 ， 呈淡 红 色 的则 而 无 生活 力
果直观可靠 ； 最适 宜的培养基为 ：５ １％蔗糖＋ ０ｍ ／ ２ ｇＬ硼酸＋ ０ｍｇＬＣ Ｃ２１ ％ Ｐ Ｇ ０ 。 １ ／ ａ １ ５ Ｅ ６００ ＋
关 键 词 ： 被 菊 ； 粉 ； 活 力 ； 色法 ； 发 法 地 花 生 染 萌 中 图分 类 号 ：６ ８ ￥８ ． ４ 文 献 标 识 码 ： Ａ 文 章编 号 ：６ ４ １６ （０ ００ — ０ ５ ０ １７ — １ １ １） ０ １ — ３ ２ ４
在 杂交 育种 过程 中 ， 粉生 活力 是决定 杂 交结 实 花 的重要 因素之 一 ，特别 在解 决花期 不 遇这 一 问题 时 。 贮 存或 使 用 花粉 前 ．通常 要 对 花粉 的生 活力 进 行 测 定， 以估计 它是 否具 有保 存价 值和 萌发 能力 。 目前 ， 关 于花粉 生活力 测定 的方法 已有 大量 报道 ． 要分 为染 主 色法 、 活体 萌发 法和 离体 萌发法 。通 过对 地 被菊 花粉 生 活力 测 定方 法 的 试验 比较 ， 选 出准 确 、 便 、 筛 简 快 捷 的测 定方 法 ， 以期 为地被 菊大 规模 制种 和贮 藏 以及 花粉生 活力 鉴定 提供 可靠 的依据 。
３ 氯 化三 苯基 四氮 唑染 色 （ 法 。 Ｆ ） ａ ｃ） Ｔ Ｃ溶液 的 ｒ 配 制 ： ｐ ． ２ｍｏ Ｌ磷 酸缓 冲液 配制 成 １ 用 Ｈ７ ２的 ｌ ／ ％的 Ｔ Ｃ溶液 。取少 数花 粉置 于载玻 片上 ． １ Ｆ 加 ２滴 Ｔ Ｃ ｒ 溶液 ， 上 盖玻 片 。放置 于 ３ 盖 ５℃恒 温箱 中 １ ｎ 然 ５ｍｉ， 后在 显微 镜下 观察 。凡 是染成 红 色的花粉 ， 生 活力 其 为强 ， 红 的次 之 ， 色 的 为不 具 活力 的花 粉或 不 育 淡 无 花粉 。