基因工程考试名词解释
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3、α-互补(Alpha complementation) : 噬菌体载体的基因间隔区插入E.coli的一段调节基因及lac Z的N端146个氨基酸残基编码基因,其编码产物为 β—半乳糖苷酶的α片段。突变型lac - E.coli 可表达该酶的W片段(酶的C端)。单独存在的α及W片段均无β半乳糖苷酶活性,只有宿主细胞与克隆载体同时共表达两片段时,宿主细胞内才有β半乳糖苷酶活性,使特异性作用物变为蓝色化合物,这就是所谓的 α- 互补。
8、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase): 能去除DNA/RNA 5'端的磷酸根的一种酶。制备载体时,用碱性磷酸酶处理后,可防止载体自身连接,提高重组效率。
10、自显影(Autoradiography): 通过暴露于X-射线膜,用于观察和定量检测具有放射性活度的分子的技术。
11、噬菌体(Phage): 是感染细菌的病毒。
12、印迹(Blot): 将存在于凝胶中的生物大分子转移于固定化介质上并加以检验分析的技术。
13、蓝白斑筛选(Blue/White Cloning): 当宿主菌受到噬菌体的感染后,两者通过 α-互补作用,可以产生有活性的β-半乳糖苷酶,在诱导剂IPTG和人工底物X-gal存在时,产生蓝色噬菌斑。如果噬菌体载体上插入了外源DNA片段,破坏了lac基因的结构,不能与宿主菌中的β-半乳糖苷酶互补,在IPTG 和 X-gal存在时,则产生白色菌落。由于这种颜色标志,重组克隆和非重组克隆的区分一目了然,这种筛选方法称为蓝白斑筛选。
14、平端、钝端(Blunt Ends): 酶沿对称轴切断DNA,产生的为平端或钝端。
17、趋化性(Chemotaxis): 细胞对特异性的化学因子的反应,在该反应中,细胞要么被吸附要么被抑制。
18、克隆(Clone): 所谓克隆就是来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合。
20、密码子(Codon): mRNA上有一段编码区,在这一区段内,每3个核苷酸组成一个密码子,密码多肽链上的一个氨基酸。
21、感受态细胞(Competent cells): 大肠杆菌悬浮在Cacl2溶液中,并置于低温(0-50℃)环境下一段时间,钙离子使细胞膜的结构发生变化,通透性增加,从而具有摄取外源DNA的能力,这种细胞称为感受态细胞。
26、DNase: 将DNA降解为更小的DNA片段或脱氧核糖核酸的酶。
27、电泳(Electrophoresis): 通过蛋白质在电场中泳动而达到分离各种蛋白质的技术,称为电泳。
29、末端标记(End labeling) 在DNA或RNA的5'-或3'-加上标记性群体(放射性或非放射性)。较典型的有用激酶标记5'-末端,或用DNA聚合酶或末端转移酶标记3'-末端。
30、增强子(Enhancer): 增强子是一段DNA序列,其中含有多个能被反式作用因子识别与结合的顺式作用元件。
31、酶(Enzymes) : 酶是由活细胞合成的,对
其特异底物起高效催化作用的蛋白质,是机体内催化各种代谢反应最主要的催化剂。
32、真核细胞(Eukaryote): 单细胞或多细胞生物,具有复杂的细胞结构,可通过内部的细胞结构,多染色体和单个核而鉴定。
33、外显子(Exon): 被内含子隔开的编码序列为外显子。
34、外切酶(Exonuclease): 外切酶能辩认错配的碱基并加以切除,外切酶还有方向性。
35、表达载体(Expression Vector): 表达载体是用来在受体细胞中表达(转录和翻译)外源基因的载体。
36、足迹法(Footprinting): 用来检测DNA或RNA与蛋白结合的特定区域的化学或酶过程。足迹法主要用来检测受蛋白保护以免被剪切的碱基,参考方法检测碱基被修饰后会降低对蛋白的结合。
37、凝胶阻滞分析(Gel shift Assay): 该方法用来研究DNA与特异性蛋白的相互作用,通常是放射性标记的DNA片段与纯化蛋白,或提取物中的蛋白混合物相结合,然后在非变性凝胶中分析该产物。与游离DNA相比,蛋白:DNA复合物的迁移率将降低,因此,与游离DNA相对应,人们将观察到带中的“阻滞”。
38、基因表达(Gene Expression): 就是基因转疗和翻译的过程。
39、基因组(Genome): 一个生物体的全部基因序列称为基因组。
40、基因型(Genotype): DNA存在于细胞核和线粒体内,携带遗传信息,决定细胞和个体的基因型。
41、生长因子(Growth Factors): 生长因子是具有刺激细胞生长作用的细胞因子。
42、热灭活(Heat-Inactivation): 为了获得更长的延伸时间,通过加热到某一较高的温度(通常是60-70 ℃ )来破坏酶活性,并不是所有的酶都能热灭活。
43、辅助噬菌体(Helper Phage): 能感染细菌细胞并辅助产生的噬菌体载体的单链DNA复制的病毒颗粒,也在细菌细胞内。
44、宿主菌(Host cell): 放置克隆载体的细菌细胞。载体在宿主细胞内复制。
45、辣根过氧化物酶(HRP): 该酶可催化底物脱去过氧化物。该特征用于比色和化学发光检测试剂。
46、白介素(Interleukins): 指由白细胞或其他细胞产生的,同时在白细胞或其他细胞之间发挥作用的细胞因子。
47、内含子(Intron): 真核生物的结构基因,是由若干个编码区和非编码区互相隔开但又边疆镶嵌而成,其中的非编码序列即为内含子。
48、体外(In vitro): 不在活细胞中进行反应或实验,通常用与细胞内发现的类似条件进行。
49、体内(In vivo): 在活的生物或细胞内进行的反应或实验。
50、同裂酶、同切点酶(Isoschizomers): 来源不同的酶,但能识别和切割同一位点,这些酶称为同切点酶。
51、激酶(kinase): 是指能够将γ-磷酸
基团从磷酸供体分子上转移至底物蛋白的氨基酸受体上的一大类酶。
52、(大肠杆菌DNA聚合酶I的)Kenow片段(Klenow fragment): 用特异的蛋白酶可以把DNA-pol I水解为两个片段,从G螺旋区直至R螺旋区及C末端,共604个氨基酸残基,称为klenow片段,具有DNA聚合酶活性及3'-5'核酶外切酶活性。
53、标记(Labeling): 核酶或蛋白质被连接上具有放射性活性或非放射性活性标准物的过程。
54、文库(Library): 将所有的重组DNA分子都引入宿主细胞并进行扩增,得到分子克隆的混合体,这样一个混合体称为基因文库。
55、接头,衔接物(Linker): 所谓接头是指含有某些限制酶切点的核苷酸片段。
62、突变(mutantion): 是指一个或多个脱氧核糖核苷酸的构成,复制或表型功能的异常变化。也称为DNA损伤。
63、无义密码子(nonsense codon): 代表氨基酸链的终止的密码子。
64、无义突变(nonsense mutantion): 由于碱基的取代,使原来可翻译某种氨基酸的密码子变成了终止密码子,这被称为无义突变。
65、无义抑制基因(nonsense suppressor): mRNA转录期间,一个突变的tRNA插入了氨基酸的终止密码子,因此该tRNA“抑制”了多肽链的终止,允许加入特异性的氨基酸。
66、核酸酶(muclease): 核酸酶是指所有可以水解核酸的酶,在细胞内催化核酸和降解,以维持核酸(尤其是RNA)的水平与细胞功能相适应。
67、寡核苷酸(oligonucleotide): 一段短的(通常<50核苷酸)单链DNA或RNA分子。
68、开放阅读框(ORF): mRNA的从5'至3'方向,若有AUG开始,可以称为一个开放读码框架。
69、包装(packaging): 将DNA装入保护性蛋白外壳的过程。该蛋白外壳要求能吸附和感染细菌。
70、聚核酶链式反应(PCR): PCR的基本工作原理是以拟扩增的DNA分子为模板,以一对分别与模板5'末端和3'末端相互补的寡核酸苷片段为引物,在DNA聚合酶的作用下,按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成,重复这一过程,即可使目的DNA片段得到扩增。
71、肽(peptide): 由 许多氨基酸相互结合而成为肽链。
72、噬菌粒(phagemid): 是一种双链质粒,含噬菌体来源的复制,在细菌的细胞中出现有辅助噬菌体的情况下,可被诱导成单链DNA噬菌粒同时具有噬菌体和质粒的特征,可以像噬菌体或质粒一样复制。
73、表现型(phenotype): 生物通过表达的基因来决定它的生理特征。
74、磷酸酶(phosphatase): 具有催化已经磷酸化的蛋白质分子发生去磷酸化反应的一类酶分子。
75、质粒(plasmid): 所谓质粒是存在于细菌染色体外的小型环状双链DN
A分子,小的2-3kb,大的可达数百kb。
76、点突变(point mutation): 化学诱变剂引起的碱基在DNA链上的置换。
77、引物(Primer ): 引物是由引物酶催化合成的短链RNA分子。
78、引物延伸(Primer Extension): 为了检测某一特定信息的长度及大小,而反转录某一mRNA的方法。
79、原核细胞(Prokaryote): 一种单细胞生物,不含复杂的细胞结构,原核生物含单一染色体,没有细胞核。
80、启动子(promoter): RNA聚合酶结合并起动转录的特异DNA序列。
81、蛋白酶(protease): 能降解别的蛋白质的一种酶。蛋白酶具有共同的(非特异性)的活性,或它们可识别和剪切特异性的肽序列。
82、蛋白(protein): 由一个或多个多肽链构成的大分子,多肽链是由氨基酸按一定的顺序通过肽键而连构成的。
83、受体(receptor): 受体是细胞膜上或细胞内能特异识别生物活性分子并与之结合,进而引起生物学效应的特殊蛋白质,个别是糖脂。
84、重组(recombinant): 在接合、转化、转导或转座过程中,不同DNA分子间发生的共价连接称重组。
85、报告基因(reporter Gene): 编码某种蛋白的基因,该蛋白的出现或活性很容易被检测出,当它在细胞内非正常表达及合成时。
91、核糖体RNA(rRNA): 与蛋白质共同组成蛋白质合成的场所——核蛋白体。
92、核糖体(ribosome): rRNA与核蛋白体蛋白共同构成核蛋白体或称为核糖体。
94、RNA酶(RNase): 将RNA降解成更小的RNA片段或核糖核苷酸的一类酶。
95、第二信使(second messenger): 通常将Ca2+、DAG、IP3、Cer、cAMP、cGMP等这类在细胞内传递信息的小分子化合物称为第二信使。
96、测序(sequencing): 检测DNA、RNA或蛋白分子的特定顺序的过程。
97、信号转导(Signal Transdution): 细胞间的信息传递是跨膜的信号转导。信号转导包括以下步骤:特定的细胞释放信息物质 →信息物质经扩散或血循环到达靶细胞→与靶细胞的受体特异性结合→受体对信号进行转换并启动靶细胞内信使系统→靶细胞产生生物学效应。
98、星号活性(Star activity): 限制性酶活性的一种修饰,该修饰可导致DNA在不与酶匹配的识别的位置进行剪切。
99、粘端(sticky Ends): 有些酶能使识别序列相对两链之间的数个碱基对分开,形成5'末端突出或3'末端突出,这些突出端为粘性末端。
100、底物(substrate): 化学或酶过程的靶目标。
101、模板(tamplate): 指 解开成单链的DNA母链。
102、熔点温度(Tm): DNA在热变性过程中紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度,又称为融解温度(Tm)。