1.培养基实罐灭菌及计算

合集下载

《发酵工程实验》教案:发酵培养基的制备和实罐灭菌

《发酵工程实验》教案:发酵培养基的制备和实罐灭菌

一、教案基本信息教案名称:《发酵工程实验》教案:发酵培养基的制备和实罐灭菌课时安排:2课时(90分钟)教学目标:1. 了解发酵培养基的制备方法和步骤。

2. 掌握实罐灭菌的原理和操作技巧。

3. 能够独立完成发酵培养基的制备和实罐灭菌实验。

教学重点:1. 发酵培养基的制备方法。

2. 实罐灭菌的原理和操作技巧。

教学难点:1. 发酵培养基的配比和制备过程。

2. 实罐灭菌的注意事项。

二、教学内容和步骤第一课时:发酵培养基的制备1. 课堂导入(5分钟)介绍发酵培养基的概念和作用,引导学生了解发酵培养基的制备方法和步骤。

2. 讲解发酵培养基的制备方法(15分钟)讲解培养基的配比、称量、溶解和调节pH等步骤。

3. 学生实验操作(45分钟)学生分组,按照发酵培养基的配比和制备方法进行实验操作,教师巡回指导。

4. 实验结果讨论(20分钟)学生展示实验结果,讨论发酵培养基制备过程中的问题和解决方法。

第二课时:实罐灭菌1. 课堂导入(5分钟)介绍实罐灭菌的概念和作用,引导学生了解实罐灭菌的原理和操作技巧。

2. 讲解实罐灭菌原理和操作技巧(15分钟)讲解高压蒸汽灭菌的原理、实罐灭菌的操作步骤和注意事项。

3. 学生实验操作(45分钟)学生分组,按照实罐灭菌的操作步骤进行实验操作,教师巡回指导。

4. 实验结果讨论(20分钟)学生展示实验结果,讨论实罐灭菌过程中的问题和解决方法。

三、教学评价1. 学生实验操作的准确性和熟练度。

2. 学生对发酵培养基制备和实罐灭菌原理的理解程度。

3. 学生在实验过程中解决问题的能力。

四、教学资源1. 实验材料:发酵培养基原料、实验用具、实罐等。

2. 实验仪器:天平、量筒、PH计、高压蒸汽灭菌器等。

五、教学建议1. 提前为学生讲解实验原理和操作步骤,确保学生明白实验目的和意义。

2. 在实验过程中,教师要密切关注学生的操作,及时纠正错误,确保实验安全。

3. 实验结束后,引导学生积极讨论实验结果,提高学生的实验分析和解决问题的能力。

培养基和灭菌

培养基和灭菌

1、无机氮源(快速利用N源):铵盐(如氯化铵、
硫酸铵、硝酸铵、磷酸铵),硝酸盐(如硝酸钠、硝 酸钾)和氨水等。
特点:(1)分解快,能被微生物迅速利用;
(2)引起pH变化。
(NH4)2S04 →2NH3+H2S04
生理酸性物质
NaNO3+4H2→NH3+2H20+NaOH 生理碱性物质
2、有机氮源(慢速利用氮源,多为天然有机 物) :花生饼粉,黄豆饼粉,玉米浆,玉米蛋 白粉,蛋白胨,酵母膏。
2、原理:高温时微生物各种与温度有关的氧化 过程速率增快。
3、特点:时间长、耗热量大,应用不广。一般 用于灭菌后要求保持干燥状态的物料。
(三)湿热灭菌
1、方法: 直接用加压湿蒸汽进行物料或设备容器 的灭菌。用蒸汽将物料升温到115-140℃保持一 定时间,可杀死各种微生物。常用的灭菌条件是 120℃,20-30min。
P、S(可构成细胞物质) Mg、Fe(可作为酶的组成成分或维持酶活性) K、Na(调节细胞渗透压) Cu、Zn、Mn(作为酶的辅基和激活剂)
四、 水:
(1)构成生物体的成分; (2)培养基的组成部分; (3)参与代谢反应; (4)作为代谢反应介质; (5)作为物质传递介质; (6)良好的热导体。
染菌对抗生素生产过程的危害: (1)消耗培养基的营养成分; (2)使培养条件如溶氧、粘度发生变化; (3)有的杂菌会分泌一些对抗生素产生菌有毒或
能使抗生素降解失活的物质,从而造成抗生素产量 大幅度下降; (4)影响后道工序的正常生产、影响产品外观及 内在质量; (5)如果污染了噬菌体,不仅引起产生菌自溶, 而且还会迅速大面积蔓延,严重威胁抗生素的生产。

培养基的制备和灭菌设备

培养基的制备和灭菌设备
5-培养基出口 6-喷淋冷却 7-冷却水
②.喷射加热-真空冷却连续灭菌流程
流程:喷射加热、管道维持、真空冷却
蒸汽
喷射加热器
真空
生培养液
❖培养基用泵打入喷射加
膨胀阀
热器与蒸汽混合升温
维持管
急聚蒸发室
❖进入管道维持器保温
一定时间
❖进入真空闪急蒸发室 冷却降温
灭菌好的培养液
图2-5 加热-真空冷却连续灭菌流程
膨胀阀 急聚蒸发室
❖ 真空冷却可能造成培养 基重新污染
灭菌好的培养液
图2-5 加热-真空冷却连续灭菌流程
③.板式换热连续灭菌流程 流程:薄板换热器加热、管道维持、薄板换
热器冷却
灭菌好的培养液
蒸汽
水冷 却段
热回 收段
加热 段
冷却水
生培养液
维持段
图2-6 薄板换热器连续灭菌流程
特点
❖ 在一台薄板换热器中完成培养液的预热、加热及 冷却三个过程
(二)灭菌方法
灭菌:射线灭菌、药物灭菌、热灭菌 分离:离心沉淀、介质过滤
(三)加热灭菌方式
培养基→加热升温→维持保温→冷却降温→发酵
分批灭菌:三个过程在一个设备内完成 连续灭菌:三个过程分别在不同的设备内完成
(四)灭菌要求
❖ 达到无菌程度 ❖ 尽量减少营养成分损失 ❖ 降低能量消耗
(五)理论灭菌时间
控制
缺点:需要专门设备,投资较大 设备较多,染菌机会也相应较多
2、要求
①.加热设备:加热均匀, 144℃ 20s 2-3min 20s 快速升温到灭菌温度
(温度一致)
②.维持设备:使培养基按
温 度
顺序流动,维持灭菌
温度达到灭菌时间

生化工程第二章-培养基灭菌(1)

生化工程第二章-培养基灭菌(1)







化 工
N0 40 10 6 2 105 81012
程 N 10 3; K 1.8 min 1

二 章
t 2.303 lg N0
KN
培 养
2.303 lg(81015 ) 20.34 min

1.8


生 化 工 实际上,培养基在加热升温时(即升温阶 程 段)就有部分菌被杀灭,特别是当培养基 第 加热至 100 ℃ 以上,这个作用较为显著。 二 因此,保温灭菌时间实际上比上述计算的 章 时间要短。严格地讲,在降温阶段也有杀
基 灭
灭菌的依据。


化 工
微生物热死灭动力学方程
程 微生物热致死是指微生物受热失活直到
第 死亡,微生物受热死亡主要是由于微生物
二 章 培 养 基
细胞内酶蛋白受热凝固,丧失活力所致。
在一定温度下,微生物受热后,其死活细胞 个数的变化如化学反应的浓度变化一样, 遵循单分子反应速率理论。




工 程 第 二 章
章 表明:ln K 与 1/T 之间呈直线关系,其斜率
培 为 –ΔE/R,在不同 T 时做灭菌试验,求得
养 相应的 K 值,即可求出ΔE。 基


生 化 工 程
第 二 章
培 养 基 灭 菌
生 化 工 以上可以看出:ΔE 同 T 一起决定 K 值,即: 程
第 二
K KE,T
章 培 养
将ln K E ln A两边对T求导 RT
基 灭
d ln K dT E RT 2

《发酵工程实验》教案:发酵培养基的制备和实罐灭菌

《发酵工程实验》教案:发酵培养基的制备和实罐灭菌

发酵培养基的制备和实罐灭菌一、实验目的要求学生掌握通风发酵的基本原理及过程,掌握上罐操作技术,掌握流加补料控制技术。

(1)发酵罐及管路、空气过滤器灭菌操作及发酵罐系统管路的熟悉(2)实罐灭菌—培养基灭菌实验二、实验原理2.1 培养基组分的种类和作用:人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成各种代谢产物的营养物质。

主要包括:碳源、氮源、无机盐、生长因子、前体2.2 实罐灭菌原理保温温度(℃)加热保温冷却温度(℃)时间(min)三、实验仪器、设备和材料10升发酵罐(PH仪,培养液及酸碱液流加装置,蠕动泵),1台;淀粉水解糖液、尿素等原料。

四、实验内容与方法:酵母菌经扩大培养后,接入10升机械搅拌通风发酵罐培养,根据实际情况选用分批培养或分批补料培养,测定酵母浓度。

主要内容有:试管斜面培养基的配制、面包酵母种子扩大培养基配制、流加用培养基的配制及灭菌。

总流程:斜面培养基配制与灭菌所需仪器物品:灭菌锅、试管、棉塞、培养基原料、培养箱300毫升种子液、500ml三角瓶三只、装液100ml、培养基、培养摇瓶、纱布。

发酵培养基制备,灭菌。

面包酵母菌的培养基组成:酵母斜面培养基:10º麦芽汁固体斜面,PH5.0酵母摇瓶培养基:10º麦芽汁,PH5.0或葡萄糖10%,玉米浆1%,尿素0.2%,PH5.0酵母分批发酵培养基:玉米淀粉经液化、糖化,折合葡萄糖浓度为10%、玉米浆1%,尿素0.2%,PH5.5。

五、实验报告内容和数据处理实验设计原理;发酵系统的结构与操作方法;实罐灭菌工艺。

附:机械搅拌发酵系统介绍:1 技术指标1.1 概述具有温度、转速、氧气流量、空气流量、pH 、DO 、补料、消泡显示及控制功能,并配有机械消泡浆。

1.2指标1.2.1温度:自动控制范围:自来水温+5℃~ 50℃﹙±0.2 ℃﹚显示范围:0 ~150 ℃1.2.2搅拌转速:调速范围50 ~1000±5rpm1.2.3空气流量:显示控制范围0 ~ 10L/min1.2.4pH显示控制:2 ~12pH±0.05﹙酸碱双向﹚1.2.5溶解氧:0 ~150±2℅1.2.6补料、消泡蠕动泵各一台1.2.7 罐体总容积10L,设计压力2.0kg/c㎡、最高工作压力2.0kg/c ㎡,设计工作温度131 ℃1.2.8 灭菌方法:手动控制蒸汽消毒灭菌1.2.9 功率:主机:3kw, 单相220v1.2.10 气源:2 ~4kg/c㎡1.2.11 蒸汽: 2 ~4kg/c㎡2 管路说明该流程图中空气管路阀门的标号为“AXX”,蒸汽管路阀门的标号为“SXX”,冷却水管路阀门标号为“WXX”,冷凝水管路阀门标号为“VXX”,电磁阀标号为“CXX”,物料管路阀门标号为“PXX”,冷冻水管路标号为“CWX”,其它气体管路标号为“NXX”。

第四章 灭菌技术-第2次课(前45分钟)-改后

第四章 灭菌技术-第2次课(前45分钟)-改后
培养基先加热到80 培养基先加热到80~ 80~ 90℃, 90℃,然后再导入蒸汽 升温到120 180℃. 120~ 升温到120~180℃. 预热的目的? ①预热的目的? 预热的方法? ②预热的方法?
(2)培养基灭菌
方法: 方法: 将蒸汽从进气口, 将蒸汽从进气口,排 料口, 料口,取样口直接导入 罐内,所谓的" 罐内,所谓的"三路进 气".使罐温上升到 120~130℃, 120~130℃,罐压维持 Pa(表压 左右, 表压) 在1×l05Pa(表压)左右, 并保温30min 30min. 并保温30min.
(5)要考虑物料体积对升温过程的影响. 要考虑物料体积对升温过程的影响. 物料体积对升温过程的影响
(6)空罐的准备
① 发酵罐空罐严密度的检查 发酵罐空罐严密度 空罐严密度的检查
往往被忽略,但教训深刻. 往往被忽略, 教训深刻.
② 罐内,罐外设备的检查 罐内,罐外设备的检查
搅拌传动系统,罐内管路, 搅拌传动系统,罐内管路, 冷却设备蛇管和夹层 罐外各管路,支管路, 罐外各管路,支管路,阀门 的严密度及畅通情况 取样阀门被菌丝焦化物堵塞 倒罐的教训. 倒罐的教训.
③ 死角的清除 死角的清除
死角指的是在灭菌过程中蒸汽的高温所达不到, 死角指的是在灭菌过程中蒸汽的高温所达不到, 消不透的角落. 消不透的角落.
④ 空罐的预消
有些厂家. 有些厂家.
(7)原材料中颗粒及杂物的干扰 (8)搅拌在实罐灭菌中的作用
(9)加热和保温
间接加热升温 直接进汽
(10)假压力的形成与防止 10) 11) (11)泡沫的产生与消除
加热的主要作用?温度l26 132℃;停留时间20 l26~ 20~ 加热的主要作用?温度l26~132℃;停留时间20~30s

1培养基灭菌和空气除菌技术

1培养基灭菌和空气除菌技术
因此工业上常采用高温快速方法进行灭菌,以保 留更多的营养成分。


工业上实际使用的蒸汽灭菌方法有 两种:

(1)实罐灭菌(即分批灭菌) 将配制好的培养基放入发酵罐,连同发酵罐进行灭菌。开 始时蒸汽先通过夹套或蛇管间接加热,以免过多的冷凝水 稀释培养基。待罐温达80~90℃时,可直接将蒸汽通入 培养基直至到达灭菌温度(一般为121℃,即表压为 0.1MPa)后,维持此温度20~30分钟。此时有关排汽 阀门仍应适当开启,以使蒸汽流动通畅,并同时对附属管 道灭菌。灭菌完毕后,应及时通入无菌空气使罐内维持正 压,然后通过夹套或蛇管将培养基尽快冷却。
热灭菌法,因其中有血清、氨基酸等易受
热破坏的成分。这种培养基应采用孔径小
于0.2微米的滤膜来除菌。
2. 空气的除菌技术

在生物生产过程中,特别是在好气发酵过程和进行
无菌操作的工作室中,都需要使用大量无菌空气。

工业上大规模的无菌空气是用过滤方法获得的。用 于空气除菌的过滤器有两大类,即早期采用的深层 过滤法和后来发展起来的绝对过滤法。
全和合理的。
扩散作用是指小于1微米的颗粒所产生的布朗运动而形成的扩散,当 颗粒遇到介质后被去除。 静电作用是指当颗粒与介质间具有不同电荷时的静电吸引作用,细菌 表面常带负电荷。 介质除菌是上述四种作用的综合作用,也可说总除菌效率是这四种除 菌效率之和。


在以上四种除菌作用中,惯性和拦截作用
随气流速度增大而加强,而扩散和静电作

由于微孔很易被堵塞,因此在微孔膜的外
表应用孔径较大的过滤材料覆盖,并串联
前过滤器,以免空气中的较大颗粒尘埃或
夹带的铁锈等杂物对微孔的损害。使用一
段时间后,可反吹再生,以延长使用寿命。

1第一章 培养基灭菌

1第一章 培养基灭菌

4.工程实践要求使培养基中残存的杂菌孢子数为() A.10-1 B.10-2 C.10-3 D.10-4 5.其他条件相同的条件下,活化能△E对灭菌的影响是 △E越小,则 ( ) A.比热死亡速率值越大 B.微生物越容易死亡 C.微生 物较不容易死亡 D.灭菌所需时间越短 E.灭菌所 需温度越高 6.其他条件相同的条件下,活化能△E对灭菌的影响是 △E越大,则( ) A 比热死亡速率值越大 B 微生物越容易死亡 C 微生物 较不容易死亡 D 灭菌所需要时间越短 E 灭菌所需时间越高 7.微生物的比热死灭速率常数K受哪些因素影响? ( ) A.微生物抗热性 B.微生物数量 C.灭菌时间 D.灭菌方式 E.灭菌温度
k h t 2 t1
t3 E / RT t2
A e
dt
2、保证间歇灭 菌成功的要素
The microscopic worms infect snails, which in
turn lay infected eggs. Humans become infected when they enter fresh water where the snails live. The worms dig through skin to enter the body. They move into blood vessels that supply the intestinal and urinary systems. Then, if worm eggs in human waste enter fresh water, more snails and people become infected.
复习
1.灭菌彻底与否的标准是( ) A 是否杀灭酵母 B 能否杀灭细菌 C 能否杀灭霉菌孢子 D 能否杀灭细菌芽孢 2.在对数残留方程式中,设计上常采用( ) A.N=0.1 B. N=0.01 C.N=0.001 D.N=0.0001 3.一定温度下,微生物营养细胞的均相热死灭动力 学符合化学反应的 ( ) A.零级反应动力学 B.一级反应动力学 C.二 级反应动力学 D.多级反应动力学

药品生产技术《培养基实罐灭菌的操作》

药品生产技术《培养基实罐灭菌的操作》

培养基实罐灭菌的操作
培养基实罐消毒灭菌时,实罐灭菌操作就是用表压~的饱和蒸汽将培养基灭菌的过程,操作时,注意液面以下与培养基接触的管道都要进蒸汽;液面以上不与培养基接触的管道都要排汽。

实罐灭菌时间与温度的关系
图中,Ⅰ~Ⅳ阶段温度与时间的关系如下:
Ⅰ—夹套预热阶段,培养基由室温加热至80-90℃,夹套预热是为了防止进入罐内的水蒸气冷凝成水后改变培养基浓度。

Ⅱ—直接蒸汽加热阶段,培养基由80-90℃加热至121℃
Ⅲ—保温阶段,121℃
Ⅳ—冷却阶段,121℃冷却至培养温度。

合理的操作方法是保证实罐灭菌成功的前提,培养基实罐灭菌的操作过程如下:
1首先确认蒸汽发生器的各开关都处于正常状态,向发酵罐内参加水,将蒸汽发生器翻开,然后检查发酵罐的各个开关是否都处于关闭状态。

2 确认排料口已经关闭,将配制好的培养基泵入发酵罐内,然后旋紧加料口盖,翻开搅拌,搅拌速度为2021,关闭排污阀和排气阀,此时可以校正溶氧电极,设置为空气,即溶氧设定为100。

发酵培养基实罐灭菌怎样操作才符合要求?

发酵培养基实罐灭菌怎样操作才符合要求?
3 .潘 先桐 著 .1m 结 晶罐 搅 拌 装 置 的 机 械 设 计 ” 《 “5 ’ ,发
[】 允 许 的范 围 , 必须 按 刚 度 条件 来 重新 确 定 ‘所 P 就 d 。 是计 算所 得 的d , 和d值 但 和d 应视 为钢 管轴 危
险 截 面上 的最 小外 径 和 最小 内径 , 又考 虑 到 钢 管

轴 的横 截 面产 生局 部削 弱 , 因此 , 必须 将 计算所 得 的d 值 向上 圆整 到 市场上 有 供应 的不 锈钢规 和d
格, 增大 量控 制在 5 8 % %为宜 。
叮 T
8 0× (7 )4 一o8 ・ ・ 4 1 6 [ (・取 ,在 给 定 条件 . 09 0 0 不变 的情 况下 , 偏大 的 值 时 , 和d 也偏 大 , 造 d d
值 , 后 通 过 上述 计算 来 确 定 是 否 可 用 。 当 = 然 0 ( 0 时 , 述 d ‘ 算 式 就 可 以 用 来 计 算 实 d= ) 上 和p 计
心 短轴 的外径 和作刚 度校 核 。
凑, 占空 间小 , 传动 比较 大 , 效率 比较 高 , 用维 修 使
方 面 等优点 的JQ型圆柱 齿 轮减速 机 。 Z
和‘ 小 , p 偏 抗扭 转 变 形 的能 力 偏 大 。相 反 , 选偏 小
搅 拌 器 的其 他 附 件 如轴 承 、 轴 器 、 速 机 、 联 减 三角 皮带 等 的选 型属 于常 规设 计 , 文不 作详 述 。 本
但必 须 指 出的是 ,由于搅 拌器 所受 的轴 向载 荷 比 较小 , 转平 稳 , 以选 用 对 于长轴 既 能承受 径 向 运 可 载荷 又能 同时 承受 不大 的轴 向载荷 的3 0 型 双列 00 向心球 面 滚子 轴承 。减 速机 可 以选用 具有 结构 紧

实罐灭菌实验报告

实罐灭菌实验报告

一、实验目的1. 理解实罐灭菌的概念和原理。

2. 掌握实罐灭菌的操作步骤和注意事项。

3. 通过实验验证实罐灭菌的效果。

二、实验原理实罐灭菌是一种将培养基放入发酵罐或其他容器中,通入蒸汽将培养基和容器加热至灭菌温度后维持一定时间,再冷却到接种温度的灭菌方法。

该方法无需专门的灭菌设备,灭菌效果可靠,但温度低、时间长,对培养基成分破坏较大。

三、实验材料1. 培养基:牛肉膏蛋白胨培养基2. 发酵罐:5L通气机械搅拌发酵罐3. 蒸汽发生器4. 温度计5. 秒表6. 冷却水四、实验步骤1. 空消:将发酵罐用蒸汽进行灭菌,消除所有死角的杂菌,保证系统处于无菌状态。

具体操作如下:- 将发酵罐内加入适量的水,开启蒸汽发生器,调节蒸汽压力至0.13MPa。

- 维持蒸汽温度在121℃左右,先开排污水阀和进气阀,排空夹套水。

- 对气路、料路、种子罐、发酵罐进行灭菌,空消时间大约为30到40分钟。

- 当设备初次使用或长期不用的情况下,最好采用间歇灭菌的方法,即第一次空消结束后,间隔3到5个小时再空消一次,以便杀死芽孢。

- 蒸汽减压阀必须调整在0.13MPa,不得超过0.15MPa。

- 空消时,应将罐上的接种口、排气阀及料路阀门微微打开,使蒸汽通过这些阀门排出,同时保持罐压为0.13~0.15MPa。

- 空消结束后,应将罐内冷凝水排掉,并将排空阀门打开,防止冷却后罐内产生负压、损坏设备。

- 空消时,溶氧、pH电极取出,可以延长其使用寿命。

2. 实消:当罐内加入培养基后,用蒸汽对培养基进行灭菌。

具体操作如下:- 将配好的培养基从加料口加入罐内,此时夹套内应无冷却水。

- 开启蒸汽发生器,调节蒸汽压力至0.13MPa。

- 维持蒸汽温度在121℃左右,维持一定时间,以确保培养基和容器内所有微生物被杀灭。

- 实验过程中,应密切观察罐内压力、温度变化,确保灭菌效果。

- 灭菌结束后,关闭蒸汽发生器,将发酵罐冷却至接种温度。

五、实验结果经过实罐灭菌处理后,培养基和发酵罐内均无杂菌生长,说明实罐灭菌效果良好。

第一章 培养基的灭菌设备课件

第一章 培养基的灭菌设备课件
N 0 100 × 10 × 10 16 = = 10 N 10 − 3
6 5
ln
N0 N
= 36.8
第一节 培养基灭菌及灭菌设备
(三)分批灭菌的过程分析
升温
T
N1 保温 N2
降温
N0 0 t1 t2
N t3 t(min)
图2-5 分批灭菌过程典型的升温、保温和冷却曲线
第一节 培养基灭菌及灭菌设备
第一节 培养基灭菌及灭菌设备
一、微生物的热死灭动力学
T对比死亡速率常数 K的影响 (二)灭菌温度 灭菌温度T 对比死亡速率常数K K的影响遵循阿仑尼乌斯定律 1、温度对 、温度对K
∆E − RT
K = A⋅e
(2-4)
A:阿仑尼乌斯常数(min-1)
∆E:活化能(J/mol)
·K) R:气体常数(8.28J/mol 8.28J/mol· T:绝对温度(K)
第一节 培养基灭菌及灭菌设备
一、微生物的热死灭动力学
K的影响: 活化能∆E对比死亡速率常数 对比死亡速率常数K
K = A⋅e
∆E − RT
① 活化能∆E的大小对K的影响较大,其他条 件相同时, 活化能越高,K越小,微生物越 不容易死亡。 ② 不同微生物芽孢的热死灭活化能可能各不 相同,在相同的温度下灭菌,不能确定活化 能低的芽孢的热死灭速率一定比活化能高的 芽孢快。因为 K并不唯一决定于∆E。
N ln N0
第一节 培养基灭菌及灭菌设备
一、微生物的热死灭动力学
关于比死亡速率常数K的几个说明:
3. 不同的微生物,其K各不相同:
121℃,枯草杆菌 FS5230 ,枯草杆菌FS5230 K=0.047 ~0.063 K=0.047~ K=0.03 K=0.013 K=0.0485

药品生产技术《实罐灭菌时间计算》

药品生产技术《实罐灭菌时间计算》

培养基实罐灭菌时间的计算
实罐灭菌时间的计算
根据对数残留公式,实罐灭菌所需的理论时间可以用下式计算:
式中, 为灭菌时间,s ;K 为灭菌速度常数,
为开始灭菌时原有菌的个数,个;
为结束灭菌时残留菌的个数,个
灭菌结束后,Ns 应该为0,属于Ns=10-3个/罐来算。

在工业化发酵生产中通常不考虑培养基由室温至121℃和由121℃冷却到发酵培养温度这两个阶段的灭菌将就,只把保温维持阶段㹉做是培养基实罐灭菌的时间,这样可以利用上面公式来计算灭菌的时间。

实际上培养基在升温阶段就有局部菌被杀灭,特别是当培养基加热至100℃以上,这个作用较为显著。

因此保温灭菌时间实际比上述计算的要短,虽然在降温阶段也有杀菌作用,但降温时间较短,在计算时一般不考虑。

02.303lg S N N τ=K。

《发酵工程实验》教案:发酵培养基的制备和实罐灭菌

《发酵工程实验》教案:发酵培养基的制备和实罐灭菌

一、教案基本信息教案名称:《发酵工程实验》教案:发酵培养基的制备和实罐灭菌课时安排:2课时教学目标:1. 了解发酵培养基的制备方法和步骤。

2. 学会进行实罐灭菌的技巧和注意事项。

3. 掌握发酵培养基制备和实罐灭菌的操作技能。

教学重点:1. 发酵培养基的制备方法和步骤。

2. 实罐灭菌的技巧和注意事项。

教学难点:1. 发酵培养基的制备方法和步骤。

2. 实罐灭菌的技巧和注意事项。

二、教学准备1. 实验室设备:发酵罐、灭菌器、天平、量筒、玻璃棒等。

2. 实验材料:玉米粉、酵母、硫酸、氢氧化钠等。

3. 实验试剂:无菌水、酒精、甘油等。

三、教学过程Step 1:引入新课通过介绍发酵工程的概念和应用,引导学生了解发酵培养基的制备和实罐灭菌的重要性。

Step 2:讲解发酵培养基的制备方法和步骤1. 讲解玉米粉的配制方法和注意事项。

2. 讲解酵母的活化方法和步骤。

3. 讲解硫酸和氢氧化钠的添加方法和注意事项。

4. 讲解发酵培养基的灭菌方法和步骤。

Step 3:讲解实罐灭菌的技巧和注意事项1. 讲解实罐的清洗和消毒方法。

2. 讲解灭菌器的使用方法和注意事项。

3. 讲解实罐灭菌过程中的安全操作注意事项。

Step 4:学生实验操作1. 学生分组,每组准备一份发酵培养基。

2. 学生在老师的指导下,按照讲解的方法和步骤进行发酵培养基的制备。

3. 学生在老师的指导下,进行实罐灭菌操作。

Step 5:实验结果分析1. 学生观察实验结果,分析发酵培养基的制备和实罐灭菌的效果。

2. 学生汇报实验结果,进行交流和讨论。

四、课后作业1. 复习发酵培养基的制备方法和步骤。

2. 复习实罐灭菌的技巧和注意事项。

3. 思考发酵培养基制备和实罐灭菌在发酵工程中的应用。

五、教学反思通过本节课的教学,学生应掌握发酵培养基的制备方法和步骤,以及实罐灭菌的技巧和注意事项。

在实验操作过程中,教师应注重学生的安全操作,及时引导学生纠正错误操作。

在实验结果分析环节,教师应引导学生积极思考和交流,提高学生的实验操作技能和理论知识水平。

生物化工工艺学--第5章--培养基的灭菌

生物化工工艺学--第5章--培养基的灭菌

应用范围:空气消毒 手术室、传染病房、细菌实验室 不耐热物品的表面消毒
电离辐射
包括高速电子、X射线和 γ 射线 杀菌机理:产生游离基,破坏DNA。
应用范围: 一次性医用塑料制品的消毒
食品的消毒不破坏其营养成分
1.3 过滤除菌法
用物理阻留的方法 将液体或空气中的细菌除去,以达到除菌目的
滤菌器
含有微细小孔<0.22微米,只允许液体或气体通过,而大 于孔径的细菌等颗粒不能通过
方法二: ①求T1和T2时对应的K1和K2值; ②则有:
E ln K1 ln A RT1
两式相减有: ln
K 2 E 1 1 K1 R T1 T2
E ln K 2 ln A RT2
可计算ΔE
小结: ①ΔE一定时,T增加则K值变大;
龙胆紫
3%~5%
浅表创伤消毒
影响灭菌作用的因素
种类
菌龄
试剂
细菌
浓度
种类
作用时间
环境
有机物 温度 酸碱度
选择适当的消毒剂
有效 低毒 低破坏 方便 价廉 易贮藏
各种灭菌方法的特点及适用范围
灭菌方法
火焰灭菌法
原理及条件
火焰杀死微生物
特点
方法简单、灭菌彻底,适 用范围有限
适用范围
接种针、玻璃棒、 试管口、三角瓶口、 接种管 金属或玻璃器皿
适用范围 血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌
1.4 低温与干燥
冷冻真空干燥法: 在低温状态下真空抽去水分
用途:保存菌种
二 化学消毒灭菌法
常用消毒剂种类
类别 作用机制
蛋白变性,细胞膜损伤 蛋白凝固 氧化、蛋白沉淀 氧化、蛋白酶变性 氧化、蛋白沉淀 蛋白变性,细胞膜损伤 干扰氧化、抑制繁殖 石炭酸 75%乙醇 高锰酸钾 红汞、硫柳汞 过氧乙酸、碘酒 新洁而灭 龙胆紫

《发酵工程实验》教案:发酵培养基的制备和实罐灭菌

《发酵工程实验》教案:发酵培养基的制备和实罐灭菌

一、教案基本信息教案名称:《发酵工程实验》教案:发酵培养基的制备和实罐灭菌学科领域:生物工程、生物技术适用年级:大学本科生物技术专业课时安排:2学时教学目标:1. 了解发酵培养基的作用和组成;2. 学会制备发酵培养基的方法;3. 掌握实罐灭菌的操作步骤和注意事项。

教学重点:1. 发酵培养基的组成及制备方法;2. 实罐灭菌的操作步骤和注意事项。

教学难点:1. 发酵培养基的配比计算;2. 实罐灭菌的细节操作。

二、教学方法实验教学法、演示教学法、小组讨论法。

三、教学准备1. 实验室设备:发酵罐、灭菌锅、天平、量筒、玻璃棒等;2. 实验材料:牛肉膏、酵母提取物、葡萄糖、琼脂等;3. 实验试剂:无菌水、高压蒸汽;4. 教学课件。

四、教学内容1. 发酵培养基的作用和组成讲解发酵培养基的概念、作用以及常见的组成成分。

2. 发酵培养基的制备(1)讲解制备方法:牛肉膏蛋白胨培养基的制备过程;(2)分组讨论制备过程中的注意事项;(3)学生动手操作,教师巡回指导。

3. 实罐灭菌(1)讲解实罐灭菌的方法:高压蒸汽灭菌;(2)演示实罐灭菌的操作步骤;(3)学生分组实践,教师巡回指导。

4. 实验结果分析(1)观察并分析灭菌后的培养基是否符合要求;(2)分析实验过程中可能出现的问题及解决方法。

五、教学评价1. 学生操作技能:观察学生在制备发酵培养基和实罐灭菌过程中的操作是否规范;2. 学生理解能力:提问学生关于发酵培养基制备和实罐灭菌的相关问题,评估学生的理解程度;3. 实验报告:评估学生在实验报告中对发酵培养基制备和实罐灭菌过程的描述及结果分析。

六、教学过程1. 引入新课:通过回顾上节课的内容,引出本节课的主题——发酵培养基的制备和实罐灭菌。

2. 讲解与演示:教师讲解发酵培养基的作用和组成,演示发酵培养基的制备过程和实罐灭菌的操作步骤。

3. 学生实践:学生分组进行发酵培养基的制备和实罐灭菌的实验操作,教师巡回指导。

4. 实验结果分析:学生观察并分析灭菌后的培养基是否符合要求,讨论实验过程中可能出现的问题及解决方法。

1.培养基实罐灭菌及计算

1.培养基实罐灭菌及计算

培养基实罐灭菌及计算---例题
[例1-3]
有一个40 m3发酵罐内装培养基28 m3,不 锈钢蛇管传热面积30 m2,采用实罐灭菌。 培养基原始温度25℃,用196kPa(表压) 蒸汽通过蛇管间接加热培养基至90℃。
培养基实罐灭菌及计算---例题
[例1-3]
①求加热时间和蒸汽用量各为多少? ②若直接用蒸汽把培养基由25℃加热到90℃ 需用蒸汽量和时间? ③若用10℃冷却水冷却灭菌后的培养基,将 其从120℃冷却到30℃,求冷却水用量及 冷却时间各为多少?(实测当培养基t1为 80℃,此时冷却水出口温度为30℃)
第2节 培养基实罐灭菌及计算
1.实罐灭菌的操作 2.实罐灭菌时间计算 3.实罐灭菌的传热及操作时间的计算 4.实罐灭菌操作及阀门、管材的选择
1.实罐灭菌的操作
温 度 Ⅰ Ⅱ ⅢⅣ
τ1 τ2 τ3 τ4
τ时间
1.实罐灭菌的操作
Ⅰ——间接加热阶段,培养基由室温加热至80-90℃ Ⅱ——直接蒸汽加热阶段,培养基由80-90 121℃ Ⅲ——保温阶段,121℃ Ⅳ——冷却阶段,121℃ 培养温度
1.实罐灭菌的操作 课件演示
1.实罐灭菌的操作
培养基实罐灭菌操作的关键: • 液面以下与培养基接触的管道都要进蒸汽 • 液面以上不与培养基接触的管道都要排汽
1.实罐灭菌的操作
培养基实罐灭菌的质量评判标准: • 培养基无菌 • 营养成分破坏少 • 培养基灭菌后体积与进料体积相符 • 泡沫少。
2.实罐灭菌时间计算
2.实罐灭菌时间计算
温度
时间
2.实罐灭菌时间计算
温度
1代表连续灭菌 2代表分批灭菌(小罐) 3代表分批灭菌(大罐)
时间
2.实罐灭菌时间计算
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

培养基实罐灭菌及计算---例题
①间接加热过程的时间及蒸汽量
G ⋅ C tS − t1 τ= ln K ⋅ F t S − t2 28000 × 4.18 132.9 − 25 = ln 132.9 − 90 1674 × 30 = 2.14(h )
培养基实罐灭菌及计算---例题
G ⋅ C (t2 − t1 ) ' (1 + Q ) S= r 28000 × 4.18 × (90 − 65) = × (1 + 0.05) 2169 = 3638.3( kg )
培养基实罐灭菌及计算---例题
已知: G=28000 kg,F=30 m2 ts=132.9℃ (查196kPa表压蒸汽温度) t2s=10℃, t1s=120℃,t1f=30℃ t1=25℃,t2=90℃ K=1674 kJ/m2·h·℃ C=4.18 kJ /kg·℃,v蒸汽=0.613kg/m3 r=2169 kJ /kg, i=2728 kJ /kg ℃
3.实罐灭菌的传热操作时间的计算
• 保温阶段传热及操作时间的计算
加热蒸汽用量
S=(30-50%)·S(直接加热蒸汽用量)
保温时间的计算
N0 ⎛ 2.303 ⎞ τ =⎜ ⎟ ⋅ lg NS ⎝ K ⎠
3.实罐灭菌的传热操作时间的计算
• 冷却阶段传热及操作时间的计算
冷却时间的计算
G ⋅ C1 τ= W ⋅ C2
2.实罐灭菌时间计算
温度
时间
2.实罐灭菌时间计算
温度
1代表连续灭菌 2代表分批灭菌(小罐) 3代表分批灭菌(大罐)
时间
2.实罐灭菌时间计算
温度由 T1 至 T2,灭菌速度常数K是一变值
Km
∫ =
T2
K m ⋅τ P
NP = e
2.实罐灭菌时间计算
• 保温段灭菌时间
第2节 培养基实罐灭菌及计算
1.实罐灭菌的操作 2.实罐灭菌时间计算 3.实罐灭菌的传热及操作时间的计算 4.实罐灭菌操作及阀门、管材的选择
1.实罐灭菌的操作
温 度 Ⅰ Ⅱ ⅢⅣ
τ1 τ2 τ3 τ4
τ时间
1.实罐灭菌的操作
Ⅰ——间接加热阶段,培养基由室温加热至80-90℃ Ⅱ——直接蒸汽加热阶段,培养基由80-90 121℃ Ⅲ——保温阶段,121℃ Ⅳ——冷却阶段,121℃ 培养温度
(2)直接蒸汽加热传热及操作时间的计算 加热蒸汽用量
G ⋅ C (t2 − t1 ) ' (1 + Q ) S= i − t2 ⋅ C i − t2 ⋅ C = r
(Q′热损失为5%-15%)
3.实罐灭菌的传热操作时间的计算
(2)直接蒸汽加热传热及操作时间的计算 加热时间的计算
S ⋅ν τ= 2 2 2 0.785 d1 + d 2 + d 3 ⋅ ω S ⋅ 3600
生物工程设备
华东理工大学
生物工程系
第1章 培养基及培养基灭菌设备
本章重点: 1.热灭菌原理 2.理论灭菌时间的计算对数残留定理 3.实罐灭菌及计算 4.连续灭菌设备及流程设计
第1章 培养基及培养基灭菌设备
第1节 第2节 第3节 第4节 培养基灭菌方法 培养基实罐灭菌及计算 培养基连续灭菌的设备及计算 培养基灭菌的工程要求
t1 S − t 2 S ⎛ A ⎞ ⎟ ⋅ ln ⎜ t1 f − t 2 S ⎝ A −1⎠
A=e
K ⋅F W ⋅C 2
t1 − t 2 S = t1 − t 2
3.实罐灭菌的传热操作时间的计算
τ:冷却所需时间(h) W: 冷却水的流量(kg/h) C1:培养基比热( kJ/kg℃ or kcal/kg℃ ) C2:冷却水比热(kcal/kg℃ or kJ/kg℃ ) t1S:培养基开始冷却时的温度(℃) t1f:培养基冷却结束时的温度(℃) t2S:冷却水进口温度(℃) t1:培养基冷却过程中的任一温度(℃) t2:培养基在t1温度时冷却水的出口温度(℃)
Np ⎛ 2.303 ⎞ τ =⎜ ⎟ ⋅ lg NS ⎝ K ⎠
3.实罐灭菌的传热操作时间的计算
• 升温阶段传热及操作时间的计算
(1)间接加热传热及操作时间的计算 加热蒸汽用量
G ⋅ C (t2 − t1 ) ' (1 + Q ) S= i − t2 ⋅ C i − t2 ⋅ C = r
(Q′热损失为加热蒸汽用量的 5%-15%)
1.实罐灭菌的操作 课件演示
1.实罐灭菌的操作
培养基实罐灭菌操作的关键: • 液面以下与培养基接触的管道都要进蒸汽 • 液面以上不与培养基接触的管道都要排汽
1.实罐灭菌的操作
培养基实罐灭菌的质量评判标准: • 培养基无菌 • 营养成分破坏少 • 培养基灭菌后体积与进料体积相符 • 泡沫少。
2.实罐灭菌时间计算
培养基实罐灭菌及计算---例题
③冷却水用量及冷却时间
G ⋅ C1 ⎛ A ⎞ t1S − t2 S τ= ⎟ ⋅ ln ⎜ W ⋅ C2 ⎝ A − 1 ⎠ t1 f − t2 S 28000 × 4.18 ⎛ 1.4 ⎞ 120 − 10 = ×⎜ ⎟ × ln 35673 × 4.18 ⎝ 1.4 − 1 ⎠ 30 − 10 = 4.68( h )
培养基实罐灭菌及计算---例题
[例1-3]
有一个40 m3发酵罐内装培养基28 m3,不 锈钢蛇管传热面积30 m2,采用实罐灭菌。 培养基原始温度25℃,用196kPa(表压) 蒸汽通过蛇管间接加热培养基至90℃。
培养基实罐灭菌及计算---例题
[例1-3]
①求加热时间和蒸汽用量各为多少? ②若直接用蒸汽把培养基由25℃加热到90℃ 需用蒸汽量和时间? ③若用10℃冷却水冷却灭菌后的培养基,将 其从120℃冷却到30℃,求冷却水用量及 冷却时间各为多少?(实测当培养基t1为 80℃,此时冷却水出口温度为30℃)
[
(
)
]
d1、d2、d3:分别为各进气管直径(m) ν:加热蒸汽比容(m3/kg) ωS:蒸汽在管内的流速(m/s)
3.实罐灭菌的传热操作时间的计算
• 保温阶段传热及操作时间的计算
加热蒸汽用量
S = 1.19 F ⋅ τ
P
ν
F:蒸汽排出口的总面积(cm2) τ:蒸汽排出的时间(min) P:罐内蒸汽的绝对压力(kg/m·s2) ν:加热蒸汽比容(m3/kg)
培养基实罐灭菌及计算---例题
②直接加热过程的时间及蒸汽量 • 40m3发酵罐的出料管与进空气管108×4 由此二根管道同时引入蒸汽
4 • ω=25m/s(蒸汽管道中的流速) F = 2×
π
d 2 = 2 × 0.785 × 0.12 = 0.0157( m 2 )
培养基实罐灭菌及计算--例题
G ⋅ C (t2 − t1 ) (1 + Q ' ) S= i − t2 ⋅ C
28000 × 4.18 × (90 − 25) × (1 + 0.05) = 2728 − 4.18 × 90 = 3044.8( kg )
培养基实罐灭菌及计算--例题
S ⋅ V 3044.8 × 0.613 = τ= F ⋅ω 0.0157 × 25 = 4755.3( s ) = 1.32( h )
问题1
实罐灭菌如要缩短冷却时间,采用何 种方式比较经济合理 1、降低冷却水温度? 2、增加冷却面积? 3、增加冷却水流量?
3.实罐灭菌的传热操作时间的计算
加热时间的计算
G ⋅ C tS − t1 τ= ln K ⋅ F t S − t2
τ:加热所需的时间(h) K:加热过程中的平均传热系数 ( kJ/m2·h·℃ or kcal/m2·h·℃ ) F:夹套或盘管的传热面积(m2) tS:加热蒸汽温度(℃)
3.实罐灭菌的传热操作时间的计算
培养基实罐灭菌及计算---例题
③冷却水用量及冷却时间
A=e
K ⋅F W ⋅C2
t1 − t2 S = t1 − t2
80 − 10 = 1 .4 = 80 − 30
实测当培养基t1为80℃,此 时冷却水出口温度t2为30℃
培养基实罐灭菌及计算---例题
③冷却水用量及冷却时间
K ⋅F W= ln A ⋅ C2 1674 × 30 = ln 1.4 × 4.18 = 35673( kg / h )
3.实罐灭菌的传热操作时间的计算
G:培养基重量(kg) C:培养基比热(kJ/kg· ℃ or kcal/kg℃ ) S:蒸汽耗量(kg) i:蒸汽的热热焓量( kJ/kg or kcal/kg ) r:蒸汽的汽化潜热( kJ/kg or kcal/kg ) t1:开始加热时培养基的温度(℃) t2:加热结束时培养基的温度(℃)
N0 ⎛ 2.303 ⎞ τ =⎜ ⎟ ⋅ lg NS ⎝ K ⎠
• 在实罐灭菌中维持时间一般等于对 数残留定律计算的灭菌时间
2.实罐灭菌时间计算
N0 ⎛ 2.303 ⎞ τ =⎜ ⎟ ⋅ lg NS ⎝ K ⎠
• 严格说在预热100℃-121℃,冷却 121℃-100℃都有部分菌被杀死,当实 罐灭菌的罐越大从100℃预热到121℃ 时间越长被杀灭的菌越多,保温阶段 时间就可以减少
相关文档
最新文档