老鼠眼眶取血
大、小鼠摘眼球采血标准操作规程
大、小鼠摘眼球采血标准操作规程一、目的本规程规定了实验室大、小鼠摘眼球采血的操作步骤、注意事项和安全要求，以确保实验结果的准确性和动物福利的考虑。
二、适用范围本规程适用于实验室进行大、小鼠摘眼球采血的操作。
三、操作步骤1.准备工具和材料：眼科剪、眼科镊、止血棉球、生理盐水或肝素抗凝剂。
2.操作前准备：确保实验动物处于深度麻醉状态，以减少动物的痛苦和应激。
3.保定动物：将动物固定在实验台上，保持头部和身体稳定。
4.剪毛消毒：用剪刀轻轻剪去眼睑周围的毛发，然后使用消毒液对眼部进行消毒。
5.暴露眼球：用眼科镊轻轻分开眼睑，暴露出眼球。
6.采血：用眼科剪在眼球根部剪断血管，然后用止血棉球压迫止血。
如果需要采集较多血液，可以在剪断血管后轻轻挤出血液。
7.抗凝处理：将采集的血液样本放入含有肝素抗凝剂的试管中，轻轻摇匀，防止血液凝固。
8.清理动物：在采血完成后，用生理盐水清洁眼部，避免感染。
9.观察动物：密切观察动物的恢复情况，确保无并发症发生。
四、注意事项1.操作过程中要轻柔、迅速，减少动物的痛苦和应激。
2.采血时要注意血管的选择和剪断，避免破坏其他组织。
3.使用抗凝剂时要注意与血液的比例，防止影响实验结果。
4.在操作过程中要保持实验台和工具的清洁消毒，避免交叉感染。
5.如果动物出现并发症或死亡，应立即停止操作并向上级报告。
五、安全要求1.操作人员必须经过专业培训，熟悉操作步骤和注意事项。
2.实验动物必须处于深度麻醉状态，以减少动物的痛苦和应激。
3.在操作过程中要注意自我防护，避免受伤或感染。
4.对于使用过的工具和材料要进行妥善处理，防止交叉感染或环境污染。
5.在实验结束后要做好记录和分析，以便于数据的追溯和总结。
大小鼠眼眶取血方法(附图)
精选版课件ppt 1
交流提纲
实验环境 实验材料
具体操作
动物处理
大鼠 PK 取血
血样处理
.
取血容量 时间安排
问题讨论
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环境 材料
A 通风台面 B 毛细管 C 抗凝EP管 D 计时工具
长时间操作，透气通风 宽敞台面，便于多组多步骤同时操作
0.9mm × 100mm，看个人习惯使用， 经常一管三断，30mm/管，弃去中间段。
Step3 A 针头斜面先向眼球，刺入后再转 一定角度使斜面对着眼眶后界； B 刺入深度，小鼠约2-3mm，大鼠 约4-5mm。当感到有阻力时即停止推 进，同时，管退出约0.1-0.5mm，边 退边旋转； C 不要使用管的尖锐锋利端插入， 易留玻璃碎片在眼内，造成持续伤害， 使得下次反抗增加； D 拿管的手要保持干净，带血渍的 手指不要接触管的两端，易造成凝血， 可用醇水擦洗。
1左手保定
Step1.将大鼠按压 在鼠笼上，拇+中 +食指固定住头部
Step 1 A 建议笼子内放置重物 防止摇晃； B 一定要带手套； C 开始必须牢牢固定住头部 头部乱 动，扎位置容易得偏离，且易被咬伤；
D 可在此时将大鼠取血侧的胡须剪 掉，防止接触凝血。
PagPeage7 7
大鼠眼眶取血流程
取血容量取血容量时间安排选点一般原则选点一般原则预实验建立预实验建立药物性质药物性质给药途径给药途径分布相34个点分布相34个点吸收相34个点吸收相34个点吸收相34个点吸收相34个点一般12h内取血不超过动物质量20每次02505mlpage大鼠眼眶取血流程6样品摇匀1
大小鼠眼眶取血方法交流（附 图）
PagPeage9 9大鼠眼眶取血流程Fra bibliotek4固定采血
小鼠眼球取血技巧 根据需要捻动拇指与食指的方向,使血液从眼眶内以不同速度垂直流
小鼠眼球取血技巧小鼠摘除眼球采血及分离血清一．器材离心管，弯头镊子，离心机，移液器二．步骤1. 摘除眼球采血（1）左手拇、食指抓取小鼠双耳及颈后皮肤，小指固定尾部；（2）中指将小鼠左侧前肢轻压在胸骨心脏部位，无名指按在腹部，捻动拇指，轻压取血侧眼部皮肤，使眼球充血突出；（3）用弯头镊夹取眼球；（4）根据需要捻动拇指与食指的方向，使血液从眼眶内以不同速度垂直流入离心管；（5）同时用左手中指轻按小鼠心脏部位，以加快心脏泵血速度；（6）当血液流尽时，用脱臼法处死小鼠。
2. 分离血清（1）将离心管中的血置37℃温箱或水浴1小时，也可室温2小时；（2）再置4℃冰箱内3～4小时或过夜；（3）待血液凝固血块收缩后，4000rpm离心10分钟；（4）取上清于干净的离心管中，保存于-20℃，或加入防腐剂(0.01％硫柳汞或0.02％叠氮钠)，置4℃冰箱中保存备用。
三．注意：1. 采血前，可给小鼠喂点水；2. 摘眼球采血取血量能达0.8～1.2ml，但老年和疾病小鼠血量会降低；3. 采血场所有充足的光线；室温夏季保持在25～28℃，冬季，15～20℃为宜；4. 防止血液浸入眼部周围毛发，否则会造成污染和溶血；5. 按压心脏时，用力一定要适度，若用力过度，一是会造成动物采血中途死亡，使采血不完全，二是有可能引起溶血现象发生，影响实验结果；6. 采血用的器材和试管必须保持清洁干燥；7. 采血时要防止小鼠挣扎，否则会损失比较多的血样；8. 血液凝固后不宜在4℃放置过久，否则会溶血。
另附其他几种采血方法1）尾尖取血：当所需血量很少时采用本法。
固定动物并历出鼠尾，将鼠尾在45℃温水中浸泡数分钟，也可用二甲苯等化学药物涂擦，使局新血管扩张。
将鼠尾擦干，剪去尾尖，血自尾尖流出，让血液滴入盛器或直接用移液器吸取。
如需间隔一定时间，多次采取鼠尾尖部血液，每次采血时，将鼠尾剪去很小一段，取血后，先用棉球压迫止血并立即用6％液体火棉胶涂于尾巴伤口处，使伤口外结一层火棉胶薄膜，保护伤口。
小鼠取血方法
小鼠取血方法
主要有三类方法：
1、少量取血：鼠尾采血法——固定动物并露出鼠尾，将尾部侵入45-50度温水中数分钟，使静脉充血，擦干，再用酒精棉球擦拭消毒。
剪掉尾尖约0.2-0.3cm。
拭去第一滴血。
然后用毛细管定量吸取尾血。
采血完毕用棉球压迫止血
2、中等量取血：眼眶静脉丛采血——左手拇指及食指紧紧握住小鼠颈部，压迫颈部两侧使
眶后静脉丛充血，但用力要恰当，防止动物窒息死亡。
右手持玻璃毛细管从右眼或左眼内眦部以45度角刺入，刺入深度为2-3mm。
若遇阻力稍后调整角度后再刺入，如穿刺恰当，血
液能自然流入毛细管内。
得到血厚，即除去颈部压力，拔出毛细管，用干棉球压迫止血
3、大量采血：断头采血——用于动物实验结束后。
左手握住小鼠，右手持剪刀，快速剪掉
头颈部，倒立动物让血液滴入容器。
注意防止断毛落入。
大鼠眼眶采血标准操作规程
大鼠眼眶采血标准操作规程
目的：本标准描述实验人员进行大鼠眼眶采血的操作规程。
规程
1.按大鼠乙醚麻醉标准操作规程将大鼠浅麻醉。
2.采用侧眼向上固定大鼠体位，左手拇食指从背部较紧地握住大鼠的颈部（应防止动物窒息）。
3.取血时，左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧，使头部静脉血液回流困难，眼球充分外突，眶静脉丛充血。
右手持长颈(3～4cm)硬质毛细玻璃管（内径0.5mm～1.0mm），将采血管与鼠成45°角，在泪腺区域内，用采血管由眼内角在眼睑和眼球之间向喉头方向刺入。
4.刺入深度约为4mm～5mm，当达到蝶骨感到有阻力时，再稍后退0.1mm～0.5mm，边退边抽。
5.然后将采血管保持水平位，稍加旋转并后退吸引，由于血压的关系，血液即自动流入玻璃管中。
6.得到所需的血量后，即除去加于颈部的压力，同时拔出采血管。
为防止术后穿刺孔出血，用消毒纱布压迫眼球30秒。
体重200g～300g大鼠每次可采1ml～2ml血；间隔3d～7d采血部位大致修复。
大小鼠眼眶取血方法(附图)
• 介绍 • 眼眶取血方法 • 眼眶取血的优点与局限性 • 眼眶取血的实际应用 • 结论
01
介绍
眼眶取血的目的
01
眼眶取血是一种常用的动物实验 取血方法，主要用于获取鼠类的 血液样本。
02
通过眼眶取血可以检测和分析动 物血液中的各种成分，用于评估 药物效果、生理和病理状态等研 究。
对大小鼠眼眶取血的总结
眼眶取血是一种方便、快捷、对 动物损伤较小的采血方法，适用
于大小鼠等小型哺乳动物。
在进行眼眶取血时，应掌握正确 的操作技巧和注意事项，以确保
采血过程的安全和有效性。
眼眶取血可用于多种实验研究领 域，如药理学、毒理学、生理学
等，具有广泛的应用价值。
对未来研究的建议
进一步研究眼眶取血方法的最佳操作流程和注意 事项，以提高采血效率和动物福利。
优化实验设计 根据实验需求合理设计实验方案， 尽量减少对动物的损伤和实验误 差。
提高操作技巧 为提高取血的准确性和动物舒适 度，操作者应熟练掌握操作技巧， 尽量减少对动物的损伤和实验误 差。
注意动物凝血状况 对于凝血功能异常的动物，应避 免使用眼眶取血方法，以防止出 血不止或形成血肿。
04
眼眶取血的实际应用
适用于需要反复或连 续采血的实验场景。
02
眼眶取血方法
大小鼠眼眶取血步骤
固定动物
将大小鼠固定在装 置中，确保其舒适 且稳定。
采血
使用采血针从大小 鼠的眼眶静脉丛中 采集血液。
准备工具
准备大小鼠固定装 置、酒精棉球、采 血针等工具。
消毒
用酒精棉球对大小 鼠眼部周围进行消 毒。
注意事项
采血过程中要轻柔， 避免对动物造成伤 害。
小鼠眼眶静脉丛采血方法经验总结
小鼠眼眶静脉丛采血1、器材碘伏、1ml注射器或长颈(3～4cm)硬质玻璃管(毛细管内径0.5-1.0mm×100mm，对半折断)、5%葡萄糖注射液或生理盐水。
2、步骤先麻醉小鼠。
（可在采血前给予相应量5%葡萄糖注射液或生理盐水腹腔注射，这样可提高穿刺失血后小鼠的存活率）碘伏消毒眼周皮毛。
（必须等碘伏干后才可穿刺，否则会溶血）采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套)，应防止动物窒息。
当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧，使眶后静脉丛充血。
右手持注射器或玻璃管。
玻璃管平端先沿着鼻侧眼角慢慢滑动至眼球正下方的眼皮内，此时左手微微顺时针旋转，使小鼠头部相对位置微向右下偏转，即相当于玻璃管刺入时是对着口腔方向的（这样做可避免小鼠失明）。
从眼眶下端中间垂直于鼠面略斜向内眦方刺入，针头斜面先向眼球，当感到有阻力时即停止推进，刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。
（刺入深度，小鼠约2～3mm，大鼠约4～5mm，不能插过深！）这个动作应稳且迅速。
一般情况下，即会有血液流出，若不行，则将针退出约0.1-0.5mm，若还不行，可快速拧搓毛细管，进一步破坏内眦静脉丛，加快出血速度。
（若血量还是不足或要不惜处死小鼠以尽可能多取血，可使臀部高于头部）如出血速度满意，最好计数出血小滴数目，一般25g左右的小鼠28小滴血（0.4毫升）的出血量不会危及小鼠生命。
当得到所需的血量后，即除去加于颈部的压力，同时，将采血器拔出，清洁棉球压迫眼部片刻，碘伏消毒眼部。
若要重复采血，可左右两眼轮换，同一动物可反复交替穿刺双眼多次。
（每次采血后需要3到4周才可采下一次）。
大小鼠眼眶取血方法(附图)课件
在实际操作中，需要注意压迫的力度和时间，以 免对动物造成不必要的损伤或影响实验结果。
采血后需要对动物进行适当的护理和观察，以确 保其健康和生存。
结论应用
眼眶取血方法适用于需要反复采血的 实验，如药物筛选、毒理学研究等。
需要注意的是，眼眶取血方法不适用 于需要大量采血的实验，如血液生理 研究等。
由于该方法对动物损伤小，因此在需 要长时间观察的实验中具有优势。
尽量快速地完成采血过程，以减少动物的不适感 。
观察动物状态
在采血过程中，要密切观察动物的状态，如出现 异常反应应及时停止操作。
操作注意事项
01
02
03
04
消毒措施
在操作前应确保所有工具和材 料都已经消毒，以减少感染的
风险。
动物福利
在采血过程中，要确保动物的 福利，避免对其造成不必要的
பைடு நூலகம்痛苦和应激。
避免损伤其他组织
眼眶取血针
专用的眼眶取血针，确保取血 准确、快速、方便。
试管
用于存放采集的血液样本，根 据需要选择不同规格的试管。
实验台和实验器具
实验台应保持清洁，准备好其 他必要的实验器具，如手术刀 、棉球等。
实验环境
清洁度
实验环境应保持清洁，定期进行消毒，确保无菌操 作。
温度和湿度
控制实验环境的温度和湿度，保持适宜的温湿度， 以减少对实验结果的影响。
光照
实验环境的光照应适度，避免过强或过弱的光照对 实验结果产生影响。
03
方法
操作步骤
准备工具与材料
准备大小鼠固定装置、消毒棉球、 眼科剪、眼科镊、试管、抗凝剂等 。
固定动物
将大小鼠置于固定装置中，确保其 舒适且稳定。
小鼠眼眶采血的正确方法
小鼠眼眶采血的正确方法
小鼠眼眶采血是一种常用的实验动物采血方法，以下是正确的小鼠眼眶采血方法：
1. 术前准备：在采血前，要先给小鼠适当的麻醉，通常使用合适的麻醉剂，如异氟醚，在充分麻醉后，将小鼠放在一个舒适的采血台上。
2. 术中操作：用一只手轻轻地按住小鼠头部，小鼠的眼眶区域会突出一些，用另一只手用消过毒的棉签或纱布在眼眶区域上轻轻搽拭，以保持清洁。
3. 采血：使用专业的眼眶采血针或毛细管，将其插入到小鼠眼眶下方的眶隔内，稍微向后侧运动并慢慢吸取血液。
注意要控制好采血的力度和速度，以免对小鼠产生过多伤害。
4. 采血后处理：完成采血后，用消毒纱布或棉签在小鼠的采血点轻轻按压几秒钟，以避免出血。
然后将小鼠放回适当的饲养环境，等待其从麻醉中恢复。
需要注意的是，小鼠眼眶采血是一项技术要求较高的操作，需要经过专业培训并遵循相关的实验动物使用和操作规范，以确保采血的成功率和对小鼠的伤害最小化。
小白鼠采血三种方法的优缺点
小白鼠采血三种方法的优缺点(1)眼眶后血管丛采血(2)摘除眼球采血(3)心脏采血1.采血部位：眼眶采血采血方法：将鼠固定在实验台边缘，左手抓紧鼠颈部皮肤固定头部，并轻轻向下压迫颈两侧，使眼球充血。
用事先准备好的10号金属针头顶端(针尖斜面朝内)垂直插入内眦并向眼底方向转动以便切开静脉丛，血液便会连续不断地滴入采血管。
用此法大约可取3~5mL 血液。
取血完毕，立刻用脱脂棉压迫止血。
优点：眼眶后静脉丛采血法方法简单，便于掌握。
血流较快，采血量多，能在较短时间内采到3~5mL血。
伤口较小，愈合较快。
成功率高，死亡率低。
缺点：不能避免组织液的混入，对于血样要求较高的研究应谨慎使用。
另外，多次使用易引起大鼠的感染。
对后续试验结果存在一定影响。
2.摘眼采血：鼠可以眼球取血，需要多多练习。
一般来说，可以三人配合取血。
取血前不需麻醉，用眼科剪剪掉大鼠的胡须（胡须过长，血液滴下的时候容易沾在胡须上，既浪费，又造成溶血，故应剪掉）。
所需器械：眼科小剪、眼科弯镊、止血钳。
一人抓大鼠并用眼科弯镊摘眼球，一人用止血钳夹住大鼠的嘴部以固定大鼠头部，另一个人拿试管接血。
大鼠在挣扎过程中，很容易导致血液丢失，因此固定头部很重要，否则只有眼看着血液乱飞，却不入试管。
摘眼球也需要技巧，否则眼球摘下来了，而血液却不流出来，应多多练习优缺点不太清楚啊，只知道我一个学长摘眼球的时候被咬了一口，挺残忍的3.采血部位：心脏取血（其实这个一般用在家兔）采血方法：将实验动物做仰卧有助手固定，术者在其左前肢腋下处剪毛及消毒。
在胸部心脏跳动最明显处，用一寸长的12好针头直刺心脏，感到以针头跳动或有血液内流动时。
即可抽血。
一次可采血15-20ml优点：抽血快，血液不易凝集，心区面积大, 进针准确性较高, 易一针见血, 且采血量能满足大量试验需要缺点：心脏损伤较大，难以迅速愈合，不利于短期连续采血。
3‘.采血部位：心脏采血（剪开皮肤）采血方法：从胸部正中剪开皮肤2.0~2.5cm。
大小鼠眼眶取血方法附图
Step 1 A 提议笼子内放置重物 预防摇晃； B 一定要带手套； C 开始必须牢牢固定住头部 头部乱 动，扎位置轻易得偏离，且易被咬伤； D 可在此时将大鼠取血侧旳胡须剪 掉，预防接触凝血。
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大鼠眼眶取血流程
2压迫颈部
Step2.紧握颈部，压 迫颈两侧，使眼突出， 眶后静脉丛充血
5去管止血
Step5.取血完毕，立即 除去颈部压力，将采血 器拔出，按压止血
Step 5 A 当得到所需旳血量后，即 除去加于颈部旳压力，同步，将 采血器拔出，以预防术后穿刺孔 出血。 B 尽量把眼睛周围旳血渍搽 洁净，防止结块影响下次取血。
6样品摇匀 Step6.血样管轻轻混匀， 预防凝血、溶血
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试验期间 ，补充体液 ，目前常规为：取血后灌胃予以 等统计生理盐水/葡萄糖溶液。
试验之后，外用消炎药涂布眼部
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容量 时间
取血 容量 时间 安排
选点一般原则
吸收相 3-4个点 吸收相 3-4个点 分布相 3-4个点
一般12h内取血 不超出动物质量 2.0% （v/w）
每次0.25- 0.5 mL
大小鼠眼眶取血方法 附图
交流提要
试验环境 试验材料
详细操作
动物处理
大鼠 PK 取血
血样处理
.
取血容量 时间安排
问题讨论
环境 材料
A 通风台面 B 毛细管 C 抗凝EP管 D 计时工具
长时间操作，透气通风 宽阔台面，便于多组多环节同步操作
0.9mm × 100mm，看个人习惯使用， 经常一管三断，30mm/管，弃去中间段。
大小鼠眼眶取血方法附图演示文稿
取血时必须提前检查管的质量，标号分组， 适当多备。
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动物处理
动物 体重要求 一般 不低于250g 给药前 禁食12-24h，给药前 提前 0.5-1.0h 按 0.5-1.0%（V/W）给水
大鼠眼眶取血流程
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大鼠眼眶取血流程
4固定采血
Step4.固定身体，压住 后肢，放松手指，调整 毛细管，流畅出血。
Step 4
A 一般血流速度快，证明插破了眼眶动脉， 如果血流速度慢，证明要调整毛细管的位置， 血液都流到组织中了，没顺毛细管流出来；
B 出血过程中如遇到出血不畅 不用着急拔 毛细管 可以调整一下毛细管的扎入位置 或深或 浅的挑正一下 血会重新流出；
大小鼠眼眶取血方法附图演示文稿
交流提纲
实验环境 实验材料
具体操作
动物处理
大鼠 PK 取血
血样处理
.
取血容量 时间安排
问题讨论
环境 材料
A 通风台面 B 毛细管 C 抗凝EP管 D 计时工具
长时间操作，透气通风 宽敞台面，便于多组多步骤同时操作
大小鼠眼眶取血方法(附图)
大鼠眼眶取血流程
1左手保定
Step1.将大鼠按压 在鼠笼上，拇+中 +食指固定住头部
Step 1 A 建议笼子内放置重物 防止摇晃； B 一定要带手套； C 开始必须牢牢固定住头部 头部乱 动，扎位置容易得偏离，且易被咬伤； D 可在此时将大鼠取血侧的胡须剪 掉，防止接触凝血。
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大鼠眼眶取血流程
4固定采血
Step4.固定身体，压住 后肢，放松手指，调整 毛细管，流畅出血。
Step 4
A 一般血流速度快，证明插破了眼眶动脉， 如果血流速度慢，证明要调整毛细管的位置， 血液都流到组织中了，没顺毛细管流出来；
B 出血过程中如遇到出血不畅 不用着急拔 毛细管 可以调整一下毛细管的扎入位置 或深或 浅的挑正一下 血会重新流出；
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血样处理
血样处理
血清 不抗凝
A全血37℃ 水浴0.5~1h，
B全血 室温静置 0.5-1h，
低温冰箱 过夜）
离心，取上清液， 低温保存
短时间内 （< 30 min）
血浆 肝素钠抗凝
低速（< 4000） 离心（10min）
血浆/全血（V/V） 前五点低于40%--后续60%
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.眼眶静脉丛采血采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套)，应防止动物窒息。
当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧，使眶后静脉丛充血。
右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈(3～4cm)硬质玻璃滴管(毛细管内径0.5-1.0mm)，使采血器与鼠面成45℃的夹角，由眼内角刺入，针头斜面先向眼球，刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。
刺入浓度，小鼠约2～3mm，大鼠约4～5mm。
当感到有阻力时即停止推进，同时，将针退出约0.1-0.5mm，边退边抽。
若穿刺适当血液能自然流入毛细管中，当得到所需的血量后，即除去加于颈部的压力，同时，将采血器拔出，以防止术后穿刺孔出血。
若技术熟练，用本法短期内可重复采血均无多大困难。
左右两眼轮换更好。
体重20-25g 的小鼠每次可采血0.2-0.3ml；体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml，可适用于某些生物化学项目的检验。