小鼠眼球取血
小鼠摘除眼球采血及分离血清
小鼠摘除眼球采血及分离血清
一.器材离心管,弯头镊子,离心机,移液器
二.步骤
1. 摘除眼球采血
(1)左手拇、食指抓取小鼠双耳及颈后皮肤,小指固定尾部;(2)中指将小鼠左侧前肢轻压在胸骨心脏部位,无名指按在腹部,捻动拇指,轻压取血侧眼部皮肤,使眼球充血突出;(3)用弯头镊夹取眼球;(4)根据需要捻动拇指与食指的方向,使血液从眼眶内以不同速度垂直流入离心管;(5)同时用左手中指轻按小鼠心脏部位,以加快心脏泵血速度;(6)当血液流尽时,用脱臼法处死小鼠。
2. 分离血清(1)将离心管中的血置37℃温箱或水浴1小时,也可室温2小时;(2)再置4℃冰箱内3~4小时或过夜;(3)待血液凝固血块收缩后,4000rpm离心10分钟;(4)取上清于干净的离心管中,保存于-20℃,或加入防腐剂(0.01%硫柳汞或0.02%叠氮钠),置4℃冰箱中保存备用。
三.注意: 1. 采血前,可给小鼠喂点水; 2. 摘眼球采血取血量能达0.8~1.2ml,但老年和疾病小鼠血量会降低;3. 采血场所有充足的光线;室温夏季保持在25~28℃,冬季,15~20℃为宜;4. 防止血液浸入眼部周围毛发,否则会造成污染和溶血; 5. 按压心脏时,用力一定要适度,若用力过度,一是会造成动物采血中途死亡,使采血不完全,二是有可能引起溶血现象发生,影响实验结果;6. 采血用的器材和试管必须保持清洁干燥;7. 采血时要防止小鼠挣扎,否则会损失比较多的血样;8. 血液凝固后不宜在4℃放置过久,否则会溶血。
大小鼠眼眶取血方法(附图)知识讲解
2014-5-5
交流提纲
实验环境 实验材料
具体操作
动物处理
大鼠 PK 取血
血样处理
.
取血容量 时间安排
问题讨论
动物处理
动物 体重要求 一般 不低于250g 给药前 禁食12-24h,给药前 提前 0.5-1.0h 按 0.5-1.0%(V/W)给水
实验期间 ,补充体液 ,目前常规为:取血后灌胃给予 等统计生理盐水/葡萄糖溶液。
5去管止血
Step5.取血完成,立即 除去颈部压力,将采血 器拔出,按压止血
Step 5 A 当得到所需的血量后,即 除去加于颈部的压力,同时,将 采血器拔出,以防止术后穿刺孔 出血。 B 尽量把眼睛周围的血渍搽 干净,避免结块影响下次取血。
6样品摇匀 Step6.血样管轻轻混匀, 防止凝血、溶血
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实验之后,外用消炎药涂布眼部
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容量 时间
取血 容量 时间 安排
选点一般原则
吸收相 3-4个点 吸收相 3-4个点 分布相 3-4个点
一般12h内取血 不超过动物质量 2.0% (v/w)
每次0.25- 0.5 mL
药物性质
预实验建立
给药途径
注射 一般 呈现 降低 趋势,给药后较短时间内采集的点数适当增加; 灌胃 存在Cmax-tmax,需通过考察tmax,根据一般原则,适当调整时间间隔。
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大鼠眼眶取血流程
2压迫颈部
Step2.紧握颈部,压 迫颈两侧,使眼突出, 眶后静脉丛充血
Step2 A 可用管试探性触碰眼球是否已经 突出; B 此时大鼠反抗挣扎最厉害,保证抓 紧的同时,不能太过,使其窒息死亡。
小鼠取血方法范文
小鼠取血方法范文小鼠是常用的实验动物之一,常需要从小鼠身上进行取血以获取血液样本进行分析和研究。
小鼠取血方法有多种,包括尾静脉取血、眼眶窝静脉取血、颈静脉穿刺取血等。
下面将对这些方法逐一进行详细介绍。
1.尾静脉取血方法:尾静脉取血是最常用且最方便的小鼠取血方法之一、具体步骤如下:1)麻醉小鼠:使用合适的麻醉方法麻醉小鼠,常见的方法有气体麻醉和注射麻醉剂。
2)准备工具:准备好所需的器械,如注射器、针头、72%医用酒精等。
3)清洗尾部:将小鼠放置在无菌条件下,用温水和肥皂轻轻清洗尾部,并用酒精擦拭消毒。
4)取血操作:将小鼠的尾部放置于温暖的环境恢复血流,用酒精擦拭尾部的静脉,然后用一只手控制住小鼠的尾巴,用另一只手将注射器针头的一端插入小鼠尾部的静脉中,缓慢地抽取所需的血样。
5)处理伤口:取血完成后,用棉球轻轻地按压尾部,使创口停止出血,并用消毒棉球擦拭尾部的酒精,帮助伤口愈合。
2.眼眶窝静脉取血方法:眼眶窝静脉取血适用于需要大量血样的实验。
具体步骤如下:1)麻醉小鼠:使用合适的麻醉方法麻醉小鼠,常见的方法有气体麻醉和注射麻醉剂。
2)准备工具:准备好所需的器械,如注射器、针头、72%医用酒精等。
3)定位小鼠:将小鼠的头部固定于工作台上,使眼眶窝静脉暴露。
4)消毒处理:用酒精擦拭眼眶窝上方的毛发,然后用酒精将取血点消毒。
5)取血操作:用一只手控制住小鼠的头部,用另一只手将注射器针头的一端插入眼眶窝静脉中,缓慢地抽取所需的血样。
6)处理伤口:取血完成后,用消毒棉球轻轻按压取血点,使创口停止出血,并用消毒棉球擦拭取血点的酒精,帮助伤口愈合。
3.颈静脉穿刺取血方法:颈静脉穿刺取血方法适用于表层静脉无法清晰可见或不方便取血的情况。
具体步骤如下:1)麻醉小鼠:使用合适的麻醉方法麻醉小鼠,常见的方法有气体麻醉和注射麻醉剂。
2)准备工具:准备好所需的器械,如注射器、针头、72%医用酒精等。
3)小鼠体位:将小鼠放置于工作台上,头部略微向后仰。
摘眼球采血
一、1.割(剪)尾采血当所需血量很少时采用本法。
固定动物并露出鼠尾。
将尾部毛剪去后消毒,然后浸在45℃左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。
再将尾擦干,用锐器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取,采血结束,伤口消毒并压迫止血。
也可在尾部作一横切口,割破尾动脉或静脉,收集血液的方法同上。
每鼠一般可采血10余次以上。
小鼠每次可取血0.1ml,大鼠0.3~0.5ml。
2.鼠尾刺血法大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。
先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。
用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉,拔出针头时即有血滴出,一次可采集10~50mm3。
如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。
3.眼眶静脉丛采血采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套),应防止动物窒息。
当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧,使眶后静脉丛充血。
右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈(3~4cm)硬质玻璃滴管(毛细管内径0.5-1.0mm),使采血器与鼠面成45℃的夹角,由眼内角刺入,针头斜面先向眼球,刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。
刺入浓度,小鼠约2~3mm,大鼠约4~5mm。
当感到有阻力时即停止推进,同时,将针退出约0.1-0.5mm,边退边抽。
若穿刺适当血液能自然流入毛细管中,当得到所需的血量后,即除去加于颈部的压力,同时,将采血器拔出,以防止术后穿刺孔出血。
若技术熟练,用本法短期内可重复采血均无多大困难。
左右两眼轮换更好。
体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml;体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。
4.断头取血采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿势。
右手用剪刀猛剪鼠颈,约1/2-4/5的颈部前剪断,让血自由滴入盛器。
小鼠眼眶采血的正确方法
小鼠眼眶采血的正确方法
小鼠眼眶采血是一种常用的实验动物采血方法,以下是正确的小鼠眼眶采血方法:
1. 术前准备:在采血前,要先给小鼠适当的麻醉,通常使用合适的麻醉剂,如异氟醚,在充分麻醉后,将小鼠放在一个舒适的采血台上。
2. 术中操作:用一只手轻轻地按住小鼠头部,小鼠的眼眶区域会突出一些,用另一只手用消过毒的棉签或纱布在眼眶区域上轻轻搽拭,以保持清洁。
3. 采血:使用专业的眼眶采血针或毛细管,将其插入到小鼠眼眶下方的眶隔内,稍微向后侧运动并慢慢吸取血液。
注意要控制好采血的力度和速度,以免对小鼠产生过多伤害。
4. 采血后处理:完成采血后,用消毒纱布或棉签在小鼠的采血点轻轻按压几秒钟,以避免出血。
然后将小鼠放回适当的饲养环境,等待其从麻醉中恢复。
需要注意的是,小鼠眼眶采血是一项技术要求较高的操作,需要经过专业培训并遵循相关的实验动物使用和操作规范,以确保采血的成功率和对小鼠的伤害最小化。
小鼠取血方法
小鼠取血方法主要有三类方法:1、少量取血:鼠尾采血法一一固定动物并露出鼠尾,将尾部侵入45-50度温水中数分钟,使静脉充血,擦干,再用酒精棉球擦拭消毒。
剪掉尾尖约0∙2-0.3cm。
拭去第一滴血。
然后用毛细管定量吸取尾血。
采血完毕用棉球压迫止血2、中等量取血:眼眶静脉丛采血一一左手拇指及食指紧紧握住小鼠颈部,压迫颈部两侧使眶后静脉丛充血,但用力要恰当,防止动物窒息死亡。
右手持玻璃毛细管从右眼或左眼内眦部以45度角刺入,刺入深度为2-3mm。
若遇阻力稍后调整角度后再刺入,如穿刺恰当,血液能自然流入毛细管内。
得到血厚,即除去颈部压力,拔出毛细管,用干棉球压迫止血3、大量采血:断头采血一一用于动物实验结束后。
左手握住小鼠,右手持剪刀,快速剪掉头颈部,倒立动物让血液滴入容器。
注意防止断毛落入•卜鼠利大鼠剪尾取IilL祛;将清嘔鼠袈入探顒色的布袁中,粽鼠身塩疾・用酒精涂擦或用锻水浸趟怏机管扩张,剪斷尾光已堆静肚血脚可就出,川丁轻轻地从厘根绷冋尾次挤崔,可取到一定量的血敲U UlIl 后,川柿球斥迫止血・也可采刖交誓切割壓静脉方法収血’用一糠利刀片在尾光部切破一段尾靜J⅛∙ ⅛J⅛ 血即可流曲毎⅛∏Γ⅛0.3-0. S nl・⅛-⅛lfr^⅛⅛J⅛.三根毘清關町替换册害IL ⅛J≡⅛∣5J⅛⅛C切⅛L 由丁鼠血易瓶屈要仝血时,应事先将抗旅刘直丁和IiL管中”如用ιliL⅛D∣J⅛⅛⅛HS・⅛±j½i⅛⅛⅛i⅛.恨琲同抄怵妝取血法:左于持孤脚忻与中捋抓仕现讯皮抓疲壻按托头都向下,阴瞬静膩冋流,便腹球后静肮丛范机,眼球外突.右于持俠肝素浒浸池过的FI制吸血器,从内毗部刺入,沿内卜谨咂⅛向眼球后折谜4~5血.旋转吸Mtt头,切开静脉M t IfiL液H初斑入吸Ill憎筒.轮轻拥吸M管〔防止负乐压1⅛^⅛A⅛抽血电圉恭人拔出吸Ifiith放松手床力.4⅞∣f∣ι⅛J∏⅛⅛f?止-也可用转制的披璃取血管悄长7〜10 Ui IJ前刑憧成毛MU管,内⅛0- 1 -L 5皿1 UIl l后站管悴为0«T “哮要吋可在屈S I剌?L重覆収血・it法也适用諱鼠和家兔。
小白鼠采血三种方法的优缺点
小白鼠采血三种方法的优缺点(1)眼眶后血管丛采血(2)摘除眼球采血(3)心脏采血1.采血部位:眼眶采血采血方法:将鼠固定在实验台边缘,左手抓紧鼠颈部皮肤固定头部,并轻轻向下压迫颈两侧,使眼球充血。
用事先准备好的10号金属针头顶端(针尖斜面朝内)垂直插入内眦并向眼底方向转动以便切开静脉丛,血液便会连续不断地滴入采血管。
用此法大约可取3~5mL 血液。
取血完毕,立刻用脱脂棉压迫止血。
优点:眼眶后静脉丛采血法方法简单,便于掌握。
血流较快,采血量多,能在较短时间内采到3~5mL血。
伤口较小,愈合较快。
成功率高,死亡率低。
缺点:不能避免组织液的混入,对于血样要求较高的研究应谨慎使用。
另外,多次使用易引起大鼠的感染。
对后续试验结果存在一定影响。
2.摘眼采血:鼠可以眼球取血,需要多多练习。
一般来说,可以三人配合取血。
取血前不需麻醉,用眼科剪剪掉大鼠的胡须(胡须过长,血液滴下的时候容易沾在胡须上,既浪费,又造成溶血,故应剪掉)。
所需器械:眼科小剪、眼科弯镊、止血钳。
一人抓大鼠并用眼科弯镊摘眼球,一人用止血钳夹住大鼠的嘴部以固定大鼠头部,另一个人拿试管接血。
大鼠在挣扎过程中,很容易导致血液丢失,因此固定头部很重要,否则只有眼看着血液乱飞,却不入试管。
摘眼球也需要技巧,否则眼球摘下来了,而血液却不流出来,应多多练习优缺点不太清楚啊,只知道我一个学长摘眼球的时候被咬了一口,挺残忍的3.采血部位:心脏取血(其实这个一般用在家兔)采血方法:将实验动物做仰卧有助手固定,术者在其左前肢腋下处剪毛及消毒。
在胸部心脏跳动最明显处,用一寸长的12好针头直刺心脏,感到以针头跳动或有血液内流动时。
即可抽血。
一次可采血15-20ml优点:抽血快,血液不易凝集,心区面积大, 进针准确性较高, 易一针见血, 且采血量能满足大量试验需要缺点:心脏损伤较大,难以迅速愈合,不利于短期连续采血。
3‘.采血部位:心脏采血(剪开皮肤)采血方法:从胸部正中剪开皮肤2.0~2.5cm。
小鼠眼球取血
====Word行业资料分享--可编辑版本--双击可删====小鼠摘除眼球采血及分离血清一.器材离心管,弯头镊子,离心机,移液器,剪毛剪,乙醚。
二.步骤1.取血前准备在相对封闭的空间内用棉花蘸取乙醚,对小鼠进行麻醉。
用剪毛剪剪去胡子,防止发生溶血反应。
2 摘除眼球采血(1)左手拇、食指抓取小鼠双耳及颈后皮肤,小指固定尾部;(2)中指将小鼠左侧前肢轻压在胸骨心脏部位,无名指按在腹部,捻动拇指,轻压取血侧眼部皮肤,使眼球充血突出;(3)用弯头镊夹取眼球;(4)根据需要捻动拇指与食指的方向,使血液从眼眶内以不同速度垂直流入离心管;(5)同时用左手中指轻按小鼠心脏部位,以加快心脏泵血速度;(6)当血液流尽时,用脱臼法处死小鼠。
3. 分离血清(1)将离心管中的血置37℃温箱或水浴1小时,也可室温2小时;(2)再置4℃冰箱内3~4小时或过夜;(3)待血液凝固血块收缩后,4000rpm离心10分钟;(4)取上清于干净的离心管中,保存于-20℃,或加入防腐剂(0.01%硫柳汞或0.02%叠氮钠),置4℃冰箱中保存备用。
三.注意:1. 采血前,可给小鼠喂点水;2. 摘眼球采血取血量能达0.8~1.2ml,但老年和疾病小鼠血量会降低;3. 采血场所有充足的光线;室温夏季保持在25~28℃,冬季,15~20℃为宜;4. 防止血液浸入眼部周围毛发,否则会造成污染和溶血;5. 按压心脏时,用力一定要适度,若用力过度,一是会造成动物采血中途死亡,使采血不完全,二是有可能引起溶血现象发生,影响实验结果;6. 采血用的器材和试管必须保持清洁干燥;7. 采血时要防止小鼠挣扎,否则会损失比较多的血样;8. 血液凝固后不宜在4℃放置过久,否则会溶血。
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大小鼠眼眶取血方法(附图)课件
在实际操作中,需要注意压迫的力度和时间,以 免对动物造成不必要的损伤或影响实验结果。
采血后需要对动物进行适当的护理和观察,以确 保其健康和生存。
结论应用
眼眶取血方法适用于需要反复采血的 实验,如药物筛选、毒理学研究等。
需要注意的是,眼眶取血方法不适用 于需要大量采血的实验,如血液生理 研究等。
由于该方法对动物损伤小,因此在需 要长时间观察的实验中具有优势。
尽量快速地完成采血过程,以减少动物的不适感 。
观察动物状态
在采血过程中,要密切观察动物的状态,如出现 异常反应应及时停止操作。
操作注意事项
01
02
03
04
消毒措施
在操作前应确保所有工具和材 料都已经消毒,以减少感染的
风险。
动物福利
在采血过程中,要确保动物的 福利,避免对其造成不必要的
பைடு நூலகம்痛苦和应激。
避免损伤其他组织
眼眶取血针
专用的眼眶取血针,确保取血 准确、快速、方便。
试管
用于存放采集的血液样本,根 据需要选择不同规格的试管。
实验台和实验器具
实验台应保持清洁,准备好其 他必要的实验器具,如手术刀 、棉球等。
实验环境
清洁度
实验环境应保持清洁,定期进行消毒,确保无菌操 作。
温度和湿度
控制实验环境的温度和湿度,保持适宜的温湿度, 以减少对实验结果的影响。
光照
实验环境的光照应适度,避免过强或过弱的光照对 实验结果产生影响。
03
方法
操作步骤
准备工具与材料
准备大小鼠固定装置、消毒棉球、 眼科剪、眼科镊、试管、抗凝剂等 。
固定动物
将大小鼠置于固定装置中,确保其 舒适且稳定。
大、小鼠摘眼球采血标准操作规程
大、小鼠摘眼球采血标准操作规程一、目的本规程规定了实验室大、小鼠摘眼球采血的操作步骤、注意事项和安全要求,以确保实验结果的准确性和动物福利的考虑。
二、适用范围本规程适用于实验室进行大、小鼠摘眼球采血的操作。
三、操作步骤1.准备工具和材料:眼科剪、眼科镊、止血棉球、生理盐水或肝素抗凝剂。
2.操作前准备:确保实验动物处于深度麻醉状态,以减少动物的痛苦和应激。
3.保定动物:将动物固定在实验台上,保持头部和身体稳定。
4.剪毛消毒:用剪刀轻轻剪去眼睑周围的毛发,然后使用消毒液对眼部进行消毒。
5.暴露眼球:用眼科镊轻轻分开眼睑,暴露出眼球。
6.采血:用眼科剪在眼球根部剪断血管,然后用止血棉球压迫止血。
如果需要采集较多血液,可以在剪断血管后轻轻挤出血液。
7.抗凝处理:将采集的血液样本放入含有肝素抗凝剂的试管中,轻轻摇匀,防止血液凝固。
8.清理动物:在采血完成后,用生理盐水清洁眼部,避免感染。
9.观察动物:密切观察动物的恢复情况,确保无并发症发生。
四、注意事项1.操作过程中要轻柔、迅速,减少动物的痛苦和应激。
2.采血时要注意血管的选择和剪断,避免破坏其他组织。
3.使用抗凝剂时要注意与血液的比例,防止影响实验结果。
4.在操作过程中要保持实验台和工具的清洁消毒,避免交叉感染。
5.如果动物出现并发症或死亡,应立即停止操作并向上级报告。
五、安全要求1.操作人员必须经过专业培训,熟悉操作步骤和注意事项。
2.实验动物必须处于深度麻醉状态,以减少动物的痛苦和应激。
3.在操作过程中要注意自我防护,避免受伤或感染。
4.对于使用过的工具和材料要进行妥善处理,防止交叉感染或环境污染。
5.在实验结束后要做好记录和分析,以便于数据的追溯和总结。
大小鼠眼眶取血方法(附图)
Step3
A 针头斜面先向眼球,刺入后再转
一定角度使斜面对着眼眶后界;
B 刺入深度,小鼠约2-3mm,大鼠
约4-5mm。当感到有阻力时即停止推进,
同时,管退出约0.1-0.5mm,边退边旋
转;
C 不要使用管的尖锐锋利端插入,
易留玻璃碎片在眼内,造成持续伤害,
使得下次反抗增加;
D 拿管的手要保持干净,带血渍的
手指不要接触管的两端,易造成凝血,
可用醇水擦洗。
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大鼠眼眶取血流程
4固定采血
Step4.固定身体,压住 后肢,放松手指,调整 毛细管,流畅出血。
Step 4
A 一般血流速度快,证明插破了眼眶动脉, 如果血流速度慢,证明要调整毛细管的位置, 血液都流到组织中了,没顺毛细管流出来;
B 出血过程中如遇到出血不畅 不用着急拔 毛细管 可以调整一下毛细管的扎入位置 或深 或浅的挑正一下 血会重新流出;
大小鼠眼眶取血方法交流(附 图)
2014-5-5
交流提纲
实验环境 实验材料
具体操作
动物处理
大鼠 PK 取血
血样处理
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取血容量 时间安排
问题讨论
环境 材料
A 通风台面 B 毛细管
C 抗凝EP管 D 计时工具
长时间操作,透气通风 宽敞台面,便于多组多步骤同时操作
0.9mm × 100mm,看个人习惯使用, 经常一管三断,30mm/管,弃去中间段。 EP 管 加入0.1% 肝素钠 (>150U/mg) 0.1 mL,均匀润湿, 50℃以下干燥; 适用 1mL 全血的抗凝,效果良好。
Step 5 A 当得到所需的血量后,即
除去加于颈部的压力,同时,将 采血器拔出,以防止术后穿刺孔 出血。
大小鼠眼眶取血方法(附图)
13、He who seize the right moment, is the right man.谁把握机遇,谁就心想事成 。2021/6/282021/6/282021/6/282021/6/286/28/2021
14、谁要是自己还没有发展培养和教 育好, 他就不 能发展 培养和 教育别 人。2021年6月 28日星 期一2021/6/282021/6/282021/6/28
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大鼠眼眶取血流程
4固定采血
Step4.固定身体,压住 后肢,放松手指,调整 毛细管,流畅出血。
Step 4
A 一般血流速度快,证明插破了眼眶动脉, 如果血流速度慢,证明要调整毛细管的位置, 血液都流到组织中了,没顺毛细管流出来;
B 出血过程中如遇到出血不畅 不用着急拔 毛细管 可以调整一下毛细管的扎入位置 或深或 浅的挑正一下 血会重新流出;
大鼠眼眶取血流程
1左手保定
Step1.将大鼠按压 在鼠笼上,拇+中 +食指固定住头部
Step 1 A 建议笼子内放置重物 防止摇晃; B 一定要带手套; C 开始必须牢牢固定住头部 头部乱 动,扎位置容易得偏离,且易被咬伤; D 可在此时将大鼠取血侧的胡须剪 掉,防止接触凝血。
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大鼠眼眶取血流程
15、一年之计,莫如树谷;十年之计 ,莫如 树木; 终身之 计,莫 如树人 。2021年6月2021/6/282021/6/282021/6/286/28/2021
16、提出一个问题往往比解决一个更 重要。 因为解 决问题 也许仅 是一个 数学上 或实验 上的技 能而已 ,而提 出新的 问题, 却需要 有创造 性的想 像力, 而且标 志着科 学的真 正进步 。2021/6/282021/6/28J une 28, 2021
小鼠眼眶静脉丛采血方法经验总结
小鼠眼眶静脉丛采血1、器材碘伏、1ml注射器或长颈(3~4cm)硬质玻璃管(毛细管内径0.5-1.0mm×100mm,对半折断)、5%葡萄糖注射液或生理盐水。
2、步骤先麻醉小鼠。
(可在采血前给予相应量5%葡萄糖注射液或生理盐水腹腔注射,这样可提高穿刺失血后小鼠的存活率)碘伏消毒眼周皮毛。
(必须等碘伏干后才可穿刺,否则会溶血)采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套),应防止动物窒息。
当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧,使眶后静脉丛充血。
右手持注射器或玻璃管。
玻璃管平端先沿着鼻侧眼角慢慢滑动至眼球正下方的眼皮内,此时左手微微顺时针旋转,使小鼠头部相对位置微向右下偏转,即相当于玻璃管刺入时是对着口腔方向的(这样做可避免小鼠失明)。
从眼眶下端中间垂直于鼠面略斜向内眦方刺入,针头斜面先向眼球,当感到有阻力时即停止推进,刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。
(刺入深度,小鼠约2~3mm,大鼠约4~5mm,不能插过深!)这个动作应稳且迅速。
一般情况下,即会有血液流出,若不行,则将针退出约0.1-0.5mm,若还不行,可快速拧搓毛细管,进一步破坏内眦静脉丛,加快出血速度。
(若血量还是不足或要不惜处死小鼠以尽可能多取血,可使臀部高于头部)如出血速度满意,最好计数出血小滴数目,一般25g左右的小鼠28小滴血(0.4毫升)的出血量不会危及小鼠生命。
当得到所需的血量后,即除去加于颈部的压力,同时,将采血器拔出,清洁棉球压迫眼部片刻,碘伏消毒眼部。
若要重复采血,可左右两眼轮换,同一动物可反复交替穿刺双眼多次。
(每次采血后需要3到4周才可采下一次)。
小鼠眼球取血技巧 根据需要捻动拇指与食指的方向,使血液从眼眶内以不同速度垂直流
小鼠眼球取血技巧小鼠摘除眼球采血及分离血清一.器材离心管,弯头镊子,离心机,移液器二.步骤1. 摘除眼球采血(1)左手拇、食指抓取小鼠双耳及颈后皮肤,小指固定尾部;(2)中指将小鼠左侧前肢轻压在胸骨心脏部位,无名指按在腹部,捻动拇指,轻压取血侧眼部皮肤,使眼球充血突出;(3)用弯头镊夹取眼球;(4)根据需要捻动拇指与食指的方向,使血液从眼眶内以不同速度垂直流入离心管;(5)同时用左手中指轻按小鼠心脏部位,以加快心脏泵血速度;(6)当血液流尽时,用脱臼法处死小鼠。
2. 分离血清(1)将离心管中的血置37℃温箱或水浴1小时,也可室温2小时;(2)再置4℃冰箱内3~4小时或过夜;(3)待血液凝固血块收缩后,4000rpm离心10分钟;(4)取上清于干净的离心管中,保存于-20℃,或加入防腐剂(0.01%硫柳汞或0.02%叠氮钠),置4℃冰箱中保存备用。
三.注意:1. 采血前,可给小鼠喂点水;2. 摘眼球采血取血量能达0.8~1.2ml,但老年和疾病小鼠血量会降低;3. 采血场所有充足的光线;室温夏季保持在25~28℃,冬季,15~20℃为宜;4. 防止血液浸入眼部周围毛发,否则会造成污染和溶血;5. 按压心脏时,用力一定要适度,若用力过度,一是会造成动物采血中途死亡,使采血不完全,二是有可能引起溶血现象发生,影响实验结果;6. 采血用的器材和试管必须保持清洁干燥;7. 采血时要防止小鼠挣扎,否则会损失比较多的血样;8. 血液凝固后不宜在4℃放置过久,否则会溶血。
另附其他几种采血方法1)尾尖取血:当所需血量很少时采用本法。
固定动物并历出鼠尾,将鼠尾在45℃温水中浸泡数分钟,也可用二甲苯等化学药物涂擦,使局新血管扩张。
将鼠尾擦干,剪去尾尖,血自尾尖流出,让血液滴入盛器或直接用移液器吸取。
如需间隔一定时间,多次采取鼠尾尖部血液,每次采血时,将鼠尾剪去很小一段,取血后,先用棉球压迫止血并立即用6%液体火棉胶涂于尾巴伤口处,使伤口外结一层火棉胶薄膜,保护伤口。
小鼠眼底采血实验报告
1. 掌握小鼠眼底采血的操作方法。
2. 了解眼底采血在实验研究中的应用。
3. 掌握眼底采血后样本处理的技巧。
二、实验材料1. 实验动物:健康小鼠2. 实验仪器:显微镜、载玻片、盖玻片、剪刀、镊子、眼科剪、眼科针、无菌注射器、酒精棉球、碘伏消毒液、生理盐水、EDTA抗凝剂、EP管、离心机等。
3. 实验试剂:0.9%生理盐水、1%肝素钠、2%戊巴比妥钠、眼科局部麻醉剂等。
三、实验方法1. 实验动物选择:选取健康、体重在20-30g的小鼠作为实验对象。
2. 实验动物麻醉:将小鼠置于麻醉箱中,以2%戊巴比妥钠按50mg/kg体重腹腔注射进行麻醉。
3. 眼底采血操作:a. 麻醉后,将小鼠置于载玻片上,用眼科剪剪去小鼠双眼周围的毛,暴露出眼球。
b. 用眼科针在眼球上刺一小孔,插入眼科剪,剪断玻璃体。
c. 将小鼠眼球置于显微镜下观察,找到眼底静脉丛。
d. 用眼科剪将眼底静脉丛剪断,使血液流出。
e. 将血液收集于EP管中,加入EDTA抗凝剂。
4. 样本处理:a. 将采集到的血液样本室温下放置30分钟,使红细胞自然沉降。
b. 取上清液,置于离心机中以3000r/min离心10分钟。
c. 取上清液进行实验研究。
1. 成功完成小鼠眼底采血操作,采集到所需血液样本。
2. 样本处理过程中,血液自然沉降,上清液清晰。
3. 实验结果符合预期。
五、实验讨论1. 小鼠眼底采血操作过程中,需注意动物麻醉和操作技巧,避免损伤眼球。
2. 眼底采血操作应在显微镜下进行,以便准确找到眼底静脉丛。
3. 样本处理过程中,需注意避免污染,保证实验结果的准确性。
4. 眼底采血在实验研究中具有广泛的应用,可用于研究视网膜、脉络膜等组织的病理生理变化。
六、实验结论本实验成功完成了小鼠眼底采血操作,采集到所需血液样本,为后续实验研究提供了有力支持。
实验过程中,操作人员需掌握操作技巧,注意动物福利,确保实验结果的准确性。
大鼠和小鼠的采血方法
大鼠和小鼠的采血方法1.麻醉方法:在采血前,先给大鼠或小鼠进行麻醉,以减少它们的疼痛感受。
常用的麻醉方法有以下几种:-静脉麻醉:将合适剂量的麻醉剂通过尾静脉或背静脉注射给大鼠或小鼠,使其进入麻醉状态。
-吸入麻醉:将麻醉气体或气溶胶通过麻醉箱或麻醉罩给大鼠或小鼠吸入,达到麻醉效果。
-局部麻醉:将麻醉剂涂抹在采血部位的皮肤上,使局部麻木,减少疼痛感。
2.采血部位:常用的大鼠采血部位有尾静脉、颈静脉、眼眶突静脉等,而小鼠采血部位则有尾静脉、颈静脉、眼眶突静脉、前肢静脉等。
3.采血工具和器材:-采血针:选择合适大小的采血针,不同大小的动物需要选择不同规格的针头。
-注射器:用于抽取和储存血液样本的容器。
常用的有离心管、毛细管等。
-注射器插管:将采集到的血液导入注射器中储存。
4.采血方法:-尾静脉采血:将大鼠或小鼠的尾巴用温水浸泡,使其尾部静脉扩张。
然后用酒精消毒尾巴,用手指轻轻压住尾部静脉靠近尾根的部位,使尾尖鼓胀,再用采血针针尖刺破尾尖的皮肤,顺着静脉方向将血吸入注射器中。
-颈静脉采血:将大鼠或小鼠定位于侧卧位,用酒精消毒颈部的皮肤。
手指轻轻压住颈侧的静脉,使其充血,然后用采血针针尖针插入触及到静脉,将血液吸入注射器中。
-眼眶突静脉采血:先给大鼠或小鼠进行眼眶突的局部麻醉,随后用消毒酒精将眼眶突部分消毒。
再用适当大小的针头插入眼眶突静脉,将血液抽取到注射器中。
5.采血后的处理:-停血:采血后需用无菌棉球或无菌纱布轻轻按住针刺处,让血液凝结停止流血。
-保存:将采集到的血液样本转入离心管中,用离心机离心,分离血浆和血细胞。
将血浆或血细胞储存在冷冻管中,冷冻保存。
以上就是大鼠和小鼠采血的最全方法。
在进行采血操作时,需要注意动物的麻醉和疼痛管理,操作要轻柔、快速、准确,以减少动物的痛苦和疼痛。
另外,为了确保采血的科学性和准确性,还需要遵守实验室的相关规范和伦理要求,确保实验与动物实验道德的合理性。
小鼠取血方法
固定动物并露出鼠尾,将尾部侵入 45-50度温水中数分钟,小鼠取血方法主要有三类方法: 1、少量取血:鼠尾采血法使静脉充血,擦干,再用酒精棉球擦拭消毒。
剪掉尾尖约 用毛细管定量吸取尾血。
采血完毕用棉球压迫止血2、中等量取血:眼眶静脉丛采血 一一左手拇指及食指紧紧握住小鼠颈部,压迫颈部两侧使眶后静脉丛充血,但用力要恰当,防止动物窒息死亡。
右手持玻璃毛细管从右眼或左眼内眦 部以45度角刺入,刺入深度为 2-3mm 。
若遇阻力稍后调整角度后再刺入,如穿刺恰当,血 液能自然流入毛细管内。
得到血厚,即除去颈部压力,拔出毛细管,用干棉球压迫止血 3、大量采血:断头采血 一一用于动物实验结束后。
左手握住小鼠,右手持剪刀,快速剪掉 头颈部,倒立动物让血液滴入容器。
注意防止断毛落入剪脛取耻法:将材暑鼠较入深融也0^布養中,将試身瑕塩.竊卅厘巴•川洎精涂泡址曲 管扩帐r 剪《遲?;庇蜃曲瞳血卿盯流出,皿子轻轻地从尾根郛向尾次挤捏,吋取到一疋S 的血械U UllL 后,川柿刊斥迫止血-也可采用交眷切割厘静脉方肚联血.fDF 利7J 片在屁尖部切破一fitSiSVSS”诲脉 血即可流岀.母次刃収63〜0.5 ml,供一^^^^(1帯况宾验=三狠尽欝牀可普换切剖.d 厘瓷冋椒部切別. 由卜毆恤易题 需要仝血时,慚事先将抗礙剂直P 采血管中*如用MDlfa 泡恳减 则壷即与i 理赴K 混合.狼球后前献从审血注,左千持罷* ^fi/指与中指拥忤烦用应扶.侑捋按乐%部向下■阴滞押IB:冋甌倬 谨球石前聯風充虬喂球外如 右于品1斌卩索落被^^牠过的11制吸血益.从内毗部刺、消内N 関雌, 向眼球厉推进4-5 DIDI. 切开WA. Ibl.液n 初进入吸血计简,槿抽吸啊管〔EF 止負用用 迫甜脉M 柚拥血弟ffisft},拔出吸血比 放松手床力,出血可rm 梓止.也可用特制的破璃取Ik 管(管长?〜 10 cm,前關世成孔则智*内泾0. 1・=1, Smkh 长为1血 丘端管栓为0飞cJdr 此硬时可在同一刺孔型 見取『1"此袪也适用,暉鼠和專岛-0.2-0.3cm 。
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小鼠摘除眼球采血及分离血清
一.器材
离心管,弯头镊子,离心机,移液器,剪毛剪,乙醚。
二.步骤
1.取血前准备
在相对封闭的空间内用棉花蘸取乙醚,对小鼠进行麻醉。
用剪毛剪剪去胡子,防止发生溶血反应。
2 摘除眼球采血
(1)左手拇、食指抓取小鼠双耳及颈后皮肤,小指固定尾部;
(2)中指将小鼠左侧前肢轻压在胸骨心脏部位,无名指按在腹部,捻动拇指,轻压取血侧眼部皮肤,使眼球充血突出;
(3)用弯头镊夹取眼球;
(4)根据需要捻动拇指与食指的方向,使血液从眼眶内以不同速度垂直流入离心管;(5)同时用左手中指轻按小鼠心脏部位,以加快心脏泵血速度;
(6)当血液流尽时,用脱臼法处死小鼠。
3. 分离血清
(1)将离心管中的血置37℃温箱或水浴1小时,也可室温2小时;
(2)再置4℃冰箱内3~4小时或过夜;
(3)待血液凝固血块收缩后,4000rpm离心10分钟;
(4)取上清于干净的离心管中,保存于-20℃,或加入防腐剂(0.01%硫柳汞或0.02%叠氮钠),置4℃冰箱中保存备用。
三.注意:
1. 采血前,可给小鼠喂点水;
2. 摘眼球采血取血量能达0.8~1.2ml,但老年和疾病小鼠血量会降低;
3. 采血场所有充足的光线;室温夏季保持在25~28℃,冬季,15~20℃为宜;
4. 防止血液浸入眼部周围毛发,否则会造成污染和溶血;
5. 按压心脏时,用力一定要适度,若用力过度,一是会造成动物采血中途死亡,使采血不完全,二是有可能引起溶血现象发生,影响实验结果;
6. 采血用的器材和试管必须保持清洁干燥;
7. 采血时要防止小鼠挣扎,否则会损失比较多的血样;
8. 血液凝固后不宜在4℃放置过久,否则会溶血。