细菌培养 ppt课件

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1.1.3.分类： 各菌种对不同碳源的利用速率和效率不一样。按 利用的速率不同，碳源分为：速效碳和缓效碳。 •速效碳 定义：迅速利用的碳源 作用：能较快速地参与代谢、合成菌体和产生能 量,有利于菌体的生长。 种类：主要是单糖（葡萄糖） •缓效碳 定义：缓慢利用的碳源 作用：多数有利于产物形成 种类：二糖、多糖
无机盐参与细胞结构物质的组成，作为酶活性 中心的组成部分或维持酶的活性，调节渗透压、 PH值等。无机盐是微生物生命活动所不可缺少 的物质。作用各种不一样。一般在低浓度时对 微生物生长有促进作用。在高浓度时对微生物 生长有抑制作用。各种不同微生物及同种微生 物在不同的生长阶段对无机盐及微量元素的最 适浓度不同
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1.培养基的成分
微生物所需要的基本营养物质主要是碳 源、氮源、水、无机盐、生长因素和能 源。
•它们在微生物生命活动中的主要功能是： (1)供给微生物合成细胞生物和代谢产物的
物质基础。 (2)供给微生物生命活动和合成反应的能量。 (3)调节微生物的新陈代谢。
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1.1.碳源 碳源是供给微生物生命活动所需的能量 和构成菌体细胞以及代谢产物的物质基 础。 •1.1.1.作用：提供微生物菌种的生长繁 殖所需的能源和合成菌体所必需的碳成 分。 •1.1.2来源：糖类、脂质、有机酸、正 烷烃、低碳醇。在特殊情况下，蛋白质 水解产物或氨基酸等被某些菌种作为碳 源
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1.3.1无机盐的作用：
一般功能：
a.构成细胞内一般成分（P、S、K、Ca、Mg、Fe等）。
b.生理调节物质：渗透压的维持（Na+等）
c.酶的激活剂（Mg2+等），pH的稳定
特殊功能：
a.化能自养菌的能源（S、Fe2+、NO2-、NH4+）
b.无氧呼吸时的氢受体（NO3-、SO42-等）
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单糖主要有葡萄糖，果糖，半乳糖等。 二糖主要有蔗糖、乳糖、麦芽糖。 多糖主要有糊精、淀粉。 油脂霉菌和放线菌在培养基中糖类缺
乏或发酵至某一阶段
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1.2.氮源 氮源主要用于构成菌体细胞物质（氨基酸， 蛋白质、核酸等）。常用的氮源可分为两大 类：有机氮源和无机氮源。 无机氮源也叫速效氮，通常有利于机体的生 长。有机氮源也叫缓效氮，不能被微生物直 接吸收利用，必须通过微生物分泌的胞外水 解酶的消化才能被利用的物质
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液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
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固体培养基：菌落
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半固体培养基：
无动力 有动力(弥散)
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2.培养基的类型及功能 •培养基按其组成物质的来源、状态、用途、生产 目的可分类 2.1按营养来源分类 2.1.1合成培养基 : 由化学试剂配制而成，成分明 确、稳定，适合于研究菌种基本代谢过程中物质 变化规律。培养基营养单一，价格较高，不适合 用于大规模工业生产。 2.1.2天然培养基（复合培养基）: 采用天然原料配 制而成，适用于配制各种基础培养基。 2.1.3综合培养基：在合成培养基中加入某些天然 成分的物质配制而成，是实验室中常用的培养基。
项目五：细菌培养
知识目标： .学习理解微生物生长繁殖对营养、 理化条件的要求，常见微生物的 接种和培养方法。 .能力目标:能使用三区划线、试管 斜面、平板涂布、试管液体等方 法对微生物进行培养。
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一、培养基： •广义上讲培养基是指一切人工配 制的可供微生物或动植物细胞生长、 繁殖、代谢和合成人们所需产物的 一组营养物质和原料。同时培养基 也为微生物的培养提供除营养外的 其它所必须的环境条件。培养基的 作用：满足菌体的生长需要。
M是许多重要酶的激活剂，常用MgSO4，注意在 碱性溶液中会生成沉淀。
S含硫氨基酸（胱氨酸，半胱氨酸，蛋氨酸）等的 组成部分，辅酶的活性基。一般添加MgSO4
Fe细胞色素，细胞色素氧化酶，过氧化氢酶的成 分。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
Cl氯离子不具营养作用，维持渗透压。
K、Na、Ca虽不参与细胞的组成，却是培养基中的 重要成分。Na、 K与维持细胞的渗透压有关，Ca2+11
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注意事项：碳氮比（C/N)。碳氮比是指培 养基中碳元素总量与氮元素总量之比。 C/N影响菌体的生长和产物的代谢，还能 调节pH。最适C/N还与最适pH有关。不同 菌种，不同时期（生长阶段），甚至不 同培养方式，对C/N的要求不同。所以碳 源与氮源的应用应有一个合适的比例。
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1.3.无机盐及微量元素
1.4.生长因子：
生长因子是提供微生物细胞所需要的化学 物 ★ 质、辅助因子的组分和参与代谢的物质。 从广义上讲，凡是微生物生长不可缺少的 微量的有机物质，如氨基酸、嘌呤、嘧啶、 维生素等均称生长因子。从狭义上讲，仅 指维生素。 缺乏合成生长因子能力的微生物称为生长 因子异养型微生物、生物素营养缺陷型。
微量元素的功能：
a.酶的激活剂（Cu2+、Mn2+、Zn2+）
b.特殊分子结构成分（Co、Mn等）
天然培养基一般不另加微量元素。
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P是培养基中特别重要的元素，是构成核酸，磷脂 的成分，并参与ATP,GTP的能量转移反应。
Ca2+常用CaCO3,CaCl2提供钙，一般不与K2HPO4一 起加入使。用。CaCO3单独灭菌，在培养基调到中性后才
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例：人工合成培养基只能维持细胞生存，要 想使细胞生长和繁殖，还需补充一定量的天 然培养基（如血清）。 血清中含有： ①多种蛋白质（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等） ②多种金属离子； ③激素； ④促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析球蛋白、 胶原等； ⑤转移蛋白； ⑥各种生长因子； ⑦不明成分。
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2.2按状态分类 2.2.1液体培养基:在常温下呈液体状态的培养基。 80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的营 养成分，主要用于增菌、积累代谢产物和生理代谢 等基本理论的研究。 2.2.2固体培养基 :在液体中加入凝固剂（琼脂1~2%） 或直接采用固体材料(如马铃薯等)与水和盐混合制成。 适合于菌种和孢子的培养、保存、分离、纯化、鉴 定等 2.2.3半固体培养基:即在配好的液体培养基中加入少 量的琼脂，一般用量为0.5%～0.8% ,主要用于观察 微生物的运动性、效价测定。