乙型肝炎的实验室诊断
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乙型肝炎得实验室诊断
ﻫ[血清标志物]对于乙肝得病原学诊断最初、也就是最常用得就是乙肝病毒血清标志物(HBVM)检测。HBVM主要包括:两对半(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcA b)、HBxAg、HBxAb、前S抗原及抗体、DNA多聚酶(D NA-P)及抗体等。通过检测HBVM可以间接得多角度了解患者HBV感染、复制以及病情恢复情况。常用血清标志物就是两对半,临床意义如下:1、表面抗原(HBsAg):位于病毒外壳表面,由HBV基因组S区与前S区基因编码,完整得大分子HBsAg就是完整病毒得必需条件。血清HBs Ag得出现,意味着HBV得现症感染,就是乙肝血清学检查最重要得指标。HBsAg虽然只就是HBV存在得间接指标,但诊断乙肝得最常用也就是最重要得指标,主要因它出现最早,一般在感染后3周出现,有利于早期诊断。第二,它持续时间长,急性患者至少持续5周,最长可持续5个月,并且在血液中得释放量大,非常容易检测。前S1与前S2紧随H BsAg而出现在血流中,并与HBeAg与HBV-DNA相关。
2、表面抗体(HBsAb): 由于病毒HBsAg抗原性诱发机体产生得保护性抗体,HBsAb就是一种保护系抗体,在H BsAg消失后数周后出现,并可持续多年存在。HBsAb就是所有乙肝要关抗体中出现最晚得。常与HBcAb同时存在,
而很难与HBsAg同时被检出来。抗前S1抗体出现于潜伏期,就是所有抗体中出现最早得。抗S3抗体出现在急性期,处于HBV复制终止前后,提示有清除病毒得作用。
3、 e抗原(HBeAg): HBeAg就是一种可溶性蛋白抗原,一般仅见于HBsAg阳性血清中,阴性中偶见。HBeA g出现在血中稍后于HBsAg,同时消失很快,所以窗口期也不能出现。HBeAg就是由HBV-DNA开放读码框前C区编码,与HBV得活动性复制密切相关,就是HBV传染性得重要指标。HBcAg就是HBV复制得标记,而HBeAg就是HBV 正在复制得标记。
4、e抗体(HBeAb):在病毒复制过程中,e抗原暴露诱发机体产生。有一定保护作用。HBeAb紧接着HBeAg消失而出现,表示HBV复制已经减少,传染性降低。HBeAb持续时间不长,几月后逐渐消退.血清中HBeAb得检出意味
着病毒复制中止或减少。
5、核心抗体(HBcAb):由病毒C区编码得HBcA g诱导产生,没有保护作用.由于HbcAg位于病毒内部,一般方法不能检出,在血清中只能检测到HbcAb。HbcAb可以作为H BV感染得标志。血清中得检出HBcAb表明病毒正在或曾经进行复制。常说得HBcAb一般就是指HBcAb-IgG,就是最用得两对半中最先出现得抗体,一般在HBsAg出现后2-4周出现。当HBsAg消失,而HBsAb还没有出现时,常只能
检出HBcAb,因此临床将此阶段称为窗口期。HBcAb与H BsAb一样也可以持续多年存在。HBcAb-IgM仅出现在急性期,具有鉴别诊断意义。
、乙型肝炎病毒DNA聚合酶(DNAP)DNAP位于HBV 核心部分,有逆转录酶活性,就是HBV复制得直接指标。
[基因诊断]随着分子生物学技主得发展,应用DNA分子杂交与PCR技术可以检测出血清、体液与组织中HBV DNA得存在情况,就是直接、准确得病原学诊断证据。使用PCR及定量PCR技术检测HBVDNA,就是乙肝诊断得重大进步。
1。HBVDNA检测或定量检测(病毒载量):
(1) 灵敏度提高:WANG等对206名HBsAg阴性、ALT 阴性得健康供血者用PCR方法检测HBV DNA,检出阳性9
例,占4%。这说明HBsAg虽然就是HBV得感染得标志,但由于S基因得变异或低水平表达,而常规方法难以检出,会导致漏检。而使用PCR能较好得弥补。ﻫ(2)与HBV M结合使用,可以对临床提供更为有效、更有价值得信息:基因学诊断与HBVM并不就是矛盾得,各有优势,在乙肝得诊治过程结合使用更具临床价值。如:临床有资料显示,对于H BV DNA阳性、HBeAg阳性得慢性乙肝病人病情较HBV DN A阳性、HbeAb阴性得病人重,自然缓解率也较低。
(3)动态监测病毒得载量就是疗效监测得重要指标:乙肝疗效监测以前用得就是指标血清学“两对半”检测,但由于血清学指标反应相对滞后、灵敏度较差,并不就是理想得疗效监测指标.近年随着定量PCR在临床上得应用,连续监测HBV DNA血清载量已经成为疗效监测得理想指标.临床上一般认为用药后HBV DNA下降到10^5拷贝/ml以下为对药物完全应答;定量下降大于2个数量级为对药物部分应答;未达上述标准为无应答.
常见得两对半结果