-LC-MS在药物代谢动力学中的应用

目前商品化LC-MS仪主要用大气压离子 化接口（API）。API不仅是一种较好的接 口技术，同时也是一种离子化方法，该技 术使样品的离子化在处于大气压条件下的 离子化室中完成。
API的操作模式分三种：
一、电喷雾离子化（ESI) 二、气动辅助电喷雾离子化 三、大气压化学离子化（APCI)
液相色谱-质谱联用技术(LC-MS）
LC-MS在药物代谢动 力学中的应用
要点：(删除4-6片)
一、几种现代分析方法介绍与比较 二、LC-MS在药物动力学中的应用 三、LC-MS在代谢物研究中的应用 四、LC-MS在现代新药研究中的应用 1、高通量筛选 2、中药现代化
体内药物分析中的现代分析方法与技术(标题 一致性)




多级质谱, 优化的多级质谱相对碰撞能量 为30%。采用全扫描一级质谱及其源内碰
撞诱导解离 、全扫描二级质谱及三级质谱等方 式进行测定。
依据上述实验方法,在樟柳碱的大鼠肝 匀浆培养液中发现了原药及其代谢物。本 实验首先总结出樟柳碱电喷雾质谱的电离 和裂解规律,由原药的特征碎片及特征中性 丢失为依据,通过LC-MS数据鉴别代谢物,完 全可以排除内源性物质的干扰。因此,本方 法灵敏度高,专属性好。
以往文献中均以紫外检测器检测氨氯 地平的浓度, 但口服10mg氨氯地平后体内最 高血浆浓度不到10 ng · – 1 , 最低只有0.2 mL ng · – 1 , 远远超出了紫外的检测范围, 而 mL 本实验采用LC-MS法测定,结果最低检测浓 度为0.12ng · – 1 ，本法简便, 灵敏, 能满 mL 足测定血浆中药物浓度的要求。
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LC-MS在代谢物研究中的应用
在新药开发过程中，为了预防潜在的 毒性，测定是否有代谢物和已知药物相关， 是否和原药具有相同的治疗作用或对其他 治疗有内在的活性，有必要对代谢物进行 结构鉴定。
举例：
陈怀侠等人运用液相色谱-电喷雾离子阱 串联质谱(LC-MSn )联用技术研究了樟柳 碱大鼠肝匀浆中的代谢物：
特点：

样品前处理简单，无需衍生化，适用范围 广

将色谱的高分离能力与质谱的高检测灵敏 度、定性专属性集于一身
随着接口装置和离子化技术的发展成熟， 该技术在体内药物分析中逐渐发展成为一 种常规的分离检测方法

LC-MS在药物动力学中的应用介绍
药物动力学研究，需对生物样品中的微 量乃至痕量成分定量分析。而当今的药物 研制日趋低剂量，使常规的分离检测技术 难以满足复杂介质中痕量成分准确定量的 要求。LC-MS技术的高灵敏度使之在这一 领域的应用日趋广泛并趋于常规化。
一、气相色谱-质谱联用技术（GC-MS) *二、液相色谱-质谱联用技术(LC-MS) *三、液相色谱-核磁共振联用技术(LC-NMR) 四、毛细管电泳免疫分析(CEIA) 五、柱切换高效液相色谱法 六、高效毛细管电泳法(HPCE)
气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）
特点： 灵敏度高、分析速度快、鉴别能力强； 但它受到药物分子的极性和热稳定性等限制， 要求分子具有挥发性或通过衍生化提高分 子的挥发性，因此其有明显的局限性。
生物样品的分析借用LC-MS/MS 技术,通过应 用混合功能型色谱柱,样品不经处理就可以直接快 速地分析,极大地提高了药代筛选的通量性。
LC-MS在中药现代化中的应用
液相色谱-质谱联用技术自身的优点也 决定了其在中药药动学方面将发挥不可替 代的作用，对阐明和揭示中草药作用机制 及其科学内涵，设计及优选给药方案，促 进中药新药来自百度文库发和剂型改进及提高质量水 平，推动中医药走向世界，并最终实现中 药现代化具有重要意义。
LC-MS在高通量筛选中的应用
随着组合化学和高通量活性筛选技术的发展， 大量的活性化合物被发现，这就对这些活性化合 物的药代属性进行筛选提出要求。为解决体内外 药代动力学筛选规模小及化合物相互影响的问题, 国外实验室开发了快速的药代动力学筛选法,将样 品收集周期短至6～8 h ,利用串联LC-MS-MS 技术, 计算AUC0～ t 。利用体外肝细胞培养和串联LC/MS 可识别代谢产物 。
举例：

闫小华 等人用 L C/ MS 联用法测定人血浆 中氟西汀的浓度 ：
色谱条件
色谱柱：C18（250mm*4.6mm,5μm) 柱温： 30℃ 流动相：10mmol/L醋酸铵缓冲液-甲醇 （20：80） 流速：1.0ml/min
质谱条件
离子检测方式：选择性离子检测； 离子极性：正离子 离子化方式：气动辅助电喷雾离子化 检测对象：苯磺酸氨氯地平 传输区电压：100V 干燥气流速：10L/min 雾化室压力：40psi 干燥气温度：350℃
液相色谱-核磁共振联用技术(LC-NMR)
特点： 能提供最大量的分子结构信息，在体 内药物分析中对代谢产物的鉴定具有显著 优势，但是在做NMR分析前必须做大量的 分离纯化工作，不利于样品的快速分离； 另外，NMR检测灵敏度低是LC-NMR技术 的瓶颈。
液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)
基本组成： HPLC装置、接口装置与离子源、质量分析器。
色谱条件：
色谱柱：C18柱(150 mm ×2 mm i. d. , 5μm) , 流动相：甲醇/0. 01%三乙胺溶液(用甲酸 调节pH 3. 5) (60∶40, V /V ) 柱温：40 ℃ 流速：0. 2 mL /min。
质谱条件：
采用电喷雾离子化方式,检测离子为正离子。 离子源喷射电压5. 0 kV,毛细管电压45 V,毛细 管温度200℃,氮气为鞘气,其流速40个单位,其 它通过碰撞诱导解离获得母分子离子的