腹水-辛酸硫酸铵沉淀法纯化

1)取腹水，10000 rpm 4℃离心30min，取上清，向上清中加入三倍体积的pH5.0的0.06 M的CH3COONa缓冲液，而后用1M的HCl调pH4.2-4.8。

2)以每ml腹水加入33 µL正辛酸，滴加完后继续搅拌30 min，4℃静置1.5h。

3)4℃离心（10000 r/min，30 min），收集上清夜，弃去沉淀。

4)向上清中加入1∕10体积的0.1M的PBS，用1M 的NaOH调pH至7.4，在4℃下缓慢加入（NH4）2SO4至终浓度0.277 g∕ml（边加边搅拌，30min内加完）；4℃静置过夜；

5)4℃离心（10000 r/min，25min)），弃去上清液。收集沉淀。

沉淀用0.01M的PBS溶解；每6h更换透析液，4℃透析3天。

溶液配制：

1.醋酸钠缓冲溶液：4.45 mL 0.2 M 醋酸溶液+10.55 mL 0.2 M 醋

酸钠溶液+35 mL 水

2.0.2 M 醋酸溶液: 0.107 mL 冰醋酸溶于8.9 mL 水

3.0.2 M 醋酸钠溶液：0.173 g 醋酸钠溶于10.55 mL 水