实验一 紫外可见分光光度法测定水杨酸的含量
实验一-乙酰水杨酸的合成
实验一-乙酰水杨酸的合成实验一、乙酰水杨酸(阿司匹林)的合成、鉴定与含量的测定一、实验目的(1) 学习O-酰化（酯化）单元反应的特点和基本知识。
(2) 了解阿司匹林的性质和工业制法，掌握O-酰化制备阿司匹林的实验方法。
(3) 掌握水杨酸酰化反应的原理及实验操作以及乙酰水杨酸的鉴定、提纯及含量测定的方法。
(4)了解紫外光谱法、红外光谱法、核磁共振法在有机合成中的应用，掌握紫外-可见分光光度法定量分析的基本原理和实验技术。
(5) 进一步熟悉基础化学实验的重结晶及熔点测定等基本操作。
二、实验原理乙酰水杨酸（acetyl Salicylic acid ），通常也称为阿司匹林(aspirin)，是由水杨酸(邻羟基苯甲酸)和乙酸酐合成的。
早在18世纪，人们已从柳树皮中提取了水杨酸，并注意到它可以作为止痛、退热和抗炎药，不过对肠胃刺激作用较大。
19世纪末，人们成功地合成了乙酰水杨酸，直到目前，阿司匹林仍然是一个广泛的具有解热镇痛作用的药物。
水杨酸是一个具有酚羟基和羧基双官能团化合物，能进行两种不同的酯化反应，当与乙酸酐作用时，可以得到乙酰水杨酸（即阿司匹林）；如与过量的甲醇反应，生成水杨酸甲酯，它是第一个作为冬青树的香味成分被发现的，因此通称为冬青油。
本实验将进行前一个反应的试验。
反应式:COOHOH +(CH 3CO)2O H SO COOHOCCH 3+CH 3COOH在生成乙酰水杨酸的同时，水杨酸分子之间可以发生酯化反应，生成少量的聚合酯: COOHOH n H +C O O OC O OC OO+H 2O乙酰水杨酸能与NaHCO 3反应生成水溶性钠盐，而副产物聚合酯不能溶于NaHCO 3，这种性质上的差别可用于阿司匹林的纯化。
可能存在于最终产物中的杂质是水杨酸本身，这是由于乙酰化反应不完全或由于产物在分离步骤中发生水解造成的。
它可以在各步纯化过程和产物的重结晶过程中被除去，与大多数酚类化合物一样，水杨酸可与FeCl 3，形成深色配（络）合物，而阿司匹林因酚羟基已被酰化，不再与FeCl 3发生颜色反应，因而未作用的水杨酸很容易被检出。
紫外-可见分光光度法测定复方苯甲酸软膏中水杨酸的含量
北方药学 ２ ０ １一可见分光光度法测定复方苯 甲酸软膏 中水杨酸的含量
王 慧 （ 河南省洛阳市食品药品检验所 洛阳 ４ ７ １ ０ ２ ３ ）
摘要 ： 目的： 建立复方苯 甲酸软 膏中水杨酸含量的测 定方 法。方法： 采用 紫外一 可见分光光度法 ， 在２ ９ ７ ｎ ｍ波 长处测定 水杨 酸的 含量。结果 ： 水杨酸在 ２ ． ９ ４ ６ ～ ２ ９ ． ４ ６ ｇ ・ ｍ ｌ － － （ ｒ ＝ ０ ． ９ ９ ９ ９ ） 的浓度范 围内与吸 光度 呈 良好的线性关 系； 平均回收率为 ９ ８ 。 ２ ３ ％， Ｒ Ｓ Ｄ为 ０ ． ７ ７ ％。结 论 ： 该 方 法 简便 、 准确 、 重 现性 好 ， 可 为 该 制 剂 的 质量 评 价 提 供 依 据 。 关键词 ： 复方苯 甲酸软膏 水杨 酸 紫外一 可见分光光度 法 含量 中图分类号 ： Ｒ ９ ２ ７ ． ２ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ： １ ６ ７ ２ — ８ ３ ５ １ （ ２ ０ １ ４） ０ １ — ０ ０ １ ０ — ０ １
复方苯 甲酸软膏『 批准文 号： 豫食药监 注制（ ２ ０ ０ ４ ） ０ ３ ０ ０ ０ ０ ４ ｊ ｝ 叫 １ ； ｌ ； 号１ 是我市第三人 民医院 自制 的复方制剂 ， 由水杨酸 、 苯 甲酸及 ｌ 【ｌ ｌ 基质羊毛脂 、 凡士林 组成 ， 具有软化角质 、 杀灭霉菌的作用 。制 ｌ ｌ 棚 叫 ｛ 剂质量标准仅对总酸量进行控制 ， 本 文采 用紫外一 可见分光光 ｌ 、 Ｉ ／ ｊ＼ 度法测定该 制剂 中水杨酸 的含量。 １ 仪器与试药 ｝ ０ ｝ ＼／ １ ｌ － ／ 。 １ ｌ 、 岛津 ｕ ｖ 一 ２ ４ ０ １ Ｐ Ｃ紫外一 可见分光 光度计 ； Ｐ ｒ ｅ ｅ ｉ ｓ ａ ９ ２ Ｓ Ｍ一 ｊ ２ ０ ２ Ａ — Ｄ Ｒ电子分析天平 ； Ｋ Ｈ ５ ２ ０ ０ Ｄ Ｅ型数控超 声波清洗器 。 ・ 昔 — — — — — ． 水杨酸对照 品（ 批号： １ ０ ０ １ ０ ６ — ２ ０ ０ ３ ０ ３ ， 供 含量测定用 ） ， 购 对 照品溶液 ｂ ． 供试 品溶 液 ｃ ． 阴性样品溶液 自中 国药 品 生 物 制 品检 定 所 ；复 方 苯 甲酸 乳 膏 （ 批号： 图 １ 紫外扫描光谱圈 ２ ０ １ ２ １ １ ２ ６ 、 ２ ０ １ ３ ０ １ １ ５ 、 ２ ０ １ ３ ０ ３ ２ ４ ） ， 水 杨酸含 量 ： ３ ０ ａｇ ｒ ・ ｇ ～ ， 由洛 阳市第 ＿ 一人 民医院制剂室提供。水为娃哈哈纯净水 ； 其他试剂 吸光度 ５次 ， Ｒ Ｓ Ｄ为 ０ ． ６ ７ ％， 表 明仪器精 密度 良好 。 ２ ． ７稳定性试 验 ： 取 同一供试 品溶 液 ， 在配 置后 ０ 、 ４ 、 ８ 、 １ ２ ｈ进 为分析 纯。 ２方 法 与 结 果 行测定 ， 结果其吸光度的 Ｒ Ｓ Ｄ为 Ｏ ． ９ ３ ％。 表 明供试品溶液在 阴 ２ ｈ内基本稳定 。 ２ ． １对照 品溶液 的制备 ： 取水 杨酸对 照 品约 ６ ０ ａ ｒ ｇ ， 精密 称定 ， 凉处密闭放置 １ ２ ． ８重复性试验 ： 取 同一供试 品 ６份 ， 按“ ２ － ２ ” 项下方 法进行制 置１ ０ ０ ｍ ｌ 量瓶 中 ， 加水 适量 ， 超声 ３ ０ ａ ｒ ｉ ｎ使溶解 ， 用水稀 释至 刻度 ， 摇匀 ， 作为对照 品储备液 。精密量取 ２ ｒ ｎ ｌ ， 置ｌ Ｏ Ｏ ｍ ｌ 量瓶 备并测定其吸光度 ， 结果其 Ｒ Ｓ Ｄ为 ０ ． ９ １ ％。 ２ ． ９回收率试验 ： 精密称取 已知含量（ 水杨酸含量为 ３ ０ ． １ ４ ａｇ ｒ ・ ） 中， 用水稀释至刻度 ， 摇匀 ， 滤过 ， 即得。 每份 约 ０ ． ５ ｇ ， 分 别置 １ ０ ０ ｍｌ 量瓶 中 ， 再分别精 ２ ． ２ 供试 品溶液 的制 备 ： 取本 品 ｌ ｇ 。 置小烧杯 中 ， 加水约 ５ ０ ｍ ｌ ， 的供 试 品 ６份 ， 水杨酸浓度 ０ ． ５ ８ ９ ｍ ｇ ・ ｍ ｌ ） ， 按 ８ ０ ％水浴 中加热使基质熔化并 搅拌至 固体物全部溶 解 ， 放冷， 密加入一定量 的对照 品储备液 （ 过滤 至 ｌ Ｏ Ｏ ｍ ｌ 量瓶 中， 用适 量水洗涤烧杯和滤器 ， 合并滤液并 “ ２ ． ２ ” 项下方法制备供 试品溶液 ， ｛ ９ １ ｌ ｌ 定吸光度 ， 计算 含量 ， 测 得 ８ ． ２ ３ ％， Ｒ Ｓ Ｄ为 ０ ． ７ ７ ％。 加水 至刻度 ， 摇匀 ， 滤过 ， 精密量 取续 滤液 ２ ｍ ｌ ， 置 ５ ０ ｍ ｌ 量瓶 平均加样 回收率为 ９ ２ ． １ ０样品测定 ：分 别取三批不 同批号 的复方苯 甲酸软膏各 ３ 中， 加水稀释至刻度 ， 摇匀 ， 滤过 ， 即得 。 ２ ． ３阴性样品溶液 ： 按处 方比例及 相同工艺制备不含水杨 酸的 份 ， 按“ ２ ． ２ ” 项下方法制备 供试品溶液 ， 按照紫外一 可见 分光光 度法Ｉ ” ， 以水为空 白 ， 在２ ９ ７ ｎ ｍ波长处分别测定 吸光度 ， 计算含 阴性样 品溶液 ， 按“ ２ ． ２ ” 项下方法 同法制备 。 批号 为 ２ ０ １ ２ １ １ ２ ６ 、 ２ ０ １ ３ ０ １ １ ５ 、 ２ ０ １ ３ ０ ３ ２ ４的三批样 品 ２ ． ４测定波长 的选择 ： 取 水杨酸对照品溶液 、 供试 品溶液 、 阴性 量 。结果 ， 样 品溶液 ， 分别在 ２ ３ ０ ～ ４ ０ Ｏ ｈ ｍ波长范 围内扫描 ， 测得 水杨 酸最 中水杨酸的含量分别为 ３ ０ ． ２ ３ 、 ３ ０ ． ０ ４ 、 ３ ０ ． １ ｌ ｍｇ ・ ｇ ～ 。 大波长为 ２ ９ ７ ｎ ｍ， 而苯 甲酸及基质在 ２ ９ ７ ｎ ｍ波长处无 吸收 ， 故 ３讨 论 选择 ２ ９ ７ ｎ ｍ作 为测定波长（ 见图 １ ） 。 本文 曾使 用 甲醇一 水【 提取水杨 酸 ， 但基 质在 ２ ３ ０ ～ ２ ５ ０ ｎ ｍ 考虑到水杨酸可在热水 中溶解 ， 故用热水 ２ ． ５线性关系考察 ：精密量取 对照 品储 备液 ０ ． ５ 、 １ ． ０ 、 ２ ． ０ 、 ３ ． ０ 、 范 围内有较大 吸收 ， 准确 、 重珊 性好 ， 可为该制剂的质量评价提 ５ ． Ｏ ｒ ａ ｌ ， 分别置 ｌ Ｏ Ｏ ｍｌ 量瓶 中， 用水稀 释至刻度 ， 摇匀 ， 滤过 ， 作为 提取 。该方法简便 、 标准溶液 ， 在２ ９ ７ ｎ ｍ波长处分别测定吸光度 。以标准溶液浓度 供依据 。 ｘ为横坐标 ， 吸光度 （ Ｙ ） 为纵坐标 ， 绘制标准曲线 ， 得 回归方程 ： 参考 文献 Ｙ水 杨 ＝ ３ ９ ． ８ ４ Ｘ 一 ０ ． ２ ４ ９ １ ， ｒ ＝ Ｏ ． ９ ９ ９ ９ （ ｎ ＝ ５ ） 。 『 １ ］ 顾培军． 紫外分光光度 法测定复方苯 甲酸软 膏中两组分含量 江 苏 药学 与 临床 研 究 ， ２ ０ ０ ３ ， １ １ （ １ ） ： ２ ２ — ２ ３ ． 结果表明 ： 水杨 酸在 ２ ． ９ ４ ６ — ２ ９ ． ４ ６ ｇ ・ ｍ ｌ 范 围内与 吸光度 Ⅲ． 线性关系 良好 。 『 ２ 降 爱华． 反相离子对 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ法同时测定复方苯甲酸软膏中两 ２ ． ６精密度试验 ： 取水杨 酸对 照品溶液 ， 在２ ９ ７ ｎ ｍ波长处测定 组 分 的含 量ｆ Ｊ １ ． 中 国药 师 ， ２ ０ １ ２ ， １ ５ （ １ ） ： ７ ７ — ７ ８ ， ８ ５ ．
紫外可见分光光度法测定水杨酸的含量[详实参考]
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紫外可见分光光度法测定水杨酸的含量一、实验目的1、了解紫外可见分光光度计的性能、结构及其使用方法。
2、掌握紫外－可见分光光度法定性、定量分析的基本原理和实验技术。
二、实验原理紫外-可见光谱是用紫外-可见光测获的物质电子光谱，它研究产生于价电子在电子能级间的跃迁，研究物质在紫外-可见光区的分子吸收光谱。
当不同波长的单色光通过被分析的物质时能测得不同波长下的吸光度或透光率，以ABS为纵坐标对横坐标波长λ作图，可获得物质的吸收光谱曲线。
一般紫外光区为190-400nm，可见光区为400-800nm。
紫外吸收光谱的定性分析为化合物的定性分析提供了信息依据。
由于分子结构不同但只要具有相同的生色团，它们的最大吸收波长值就相同。
因此，通过对末知化合物的扫描光谱、最大吸收波长值与已知化合物的标准光谱图在相同溶剂和测量条件下进行比较，就可获得基础鉴定。
利用紫外吸收光谱进行定量分析时，必须选择合适的测定波长。
苯甲酸和水杨酸的紫外吸收光谱如图1所示。
图1 苯甲酸与水杨酸紫外吸收光谱图1-苯甲酸；2-水杨酸水杨酸在波长300 nm处有吸收峰，而苯甲酸此处无吸收，在波长230 nm两组吸收峰重叠，为了避开其干扰，选用300 nm波长作为测定水杨酸的工作波长。
由于乙醇在250～350nm无吸收干扰，因此可用60%乙醇为参比溶液。
三、仪器与试剂1．仪器紫外－可见分光光度计（UVWIN 5，北京普析通用仪器有限公司）；容量瓶100mL 1个、50mL 5个；刻度吸量管1mL、2mL、5mL各1支。
2．试剂水杨酸对照品（分析纯）；60%乙醇溶液（自制）。
四、实验步骤1、标准溶液的制备：准确称取0.0500 g水杨酸置于100 mL烧杯中，用60%乙醇溶解后，转移到100 mL容量瓶中，以60%乙醇稀释至刻度，摇匀。
此溶液浓度为0.5mg·mL-1。
2、将五个50mL容量瓶按1-5依次编号。
分别移取水杨酸标准溶液0.50、1.00、2.00、3.00、4.00mL于相应编号容量瓶中，各加入60%乙醇溶液，稀释至刻度，摇匀。
紫外―可见分光光度计在药品检测中的应用[权威资料]
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紫外―可见分光光度计在药品检测中的应用药品分析是保证药品安全有效的重要手段，在药品的研究、生产、流通、使用和监督管理等环节中均有举足轻重的作用，其主要内容包括性状分析、鉴别、检查和含量测定等方面。
高效液相色谱仪、气相色谱仪、紫外分光光度计等是制药生产中常用的检测仪器。
其中，紫外分光光度计由于准确度高、测定限度低、设备简便、仪器成本低、易于操作等优点，已成为制药生产中必备的检测设备之一，用于药物鉴别、检查和含量测定等。
紫外-可见分光光度法是通过测定物质在紫外-可见光区（200-760nm）产生紫外-可见吸收光谱，根据吸收光谱的特性，对该物质进行定性和定量分析的方法。
其理论基础为朗伯-比耳定律，溶液的吸光度和吸光物质含量、液层厚度乘积成正比。
对于一般的紫外分光光度法，其测量的相对误差在1%～3%。
随着大量心得显色剂的合成及应用，尤其是有关多元络合物和各种表面活性剂的应用研究，推进了元素测定的灵敏度的大幅提高。
采用预富集和示差法，适用质量分数从常量（1%～50%）到痕量（10-10～10-8）。
紫外-可见分光光度法由紫外分光光度法和可见分光光度法两种方法构成，这两种方法在测定的原理、仪器、操作等方面皆相同。
因此，统称为紫外-可见分光光度法，测定仪器一般采用紫外-可见分光光度仪。
在各国药典中，药品的理化常数、鉴别、检查和含量测定等很多项目中，都能见到紫外分光光度法的应用实例。
在制药生产中，紫外分光光度法应用最多的是药物含量的测定、药物杂质检测、药物稳定性考察、释放度、药物负载行为测定及物质结构鉴定等方面。
目前利用紫外分光光度计分析的药物品种有维生素、抗生素、解热药、去痛药、降血压药、安定药、镇咳药、滴眼药、磺胺类药、利尿药、某些妇科药、痢疾药、腹泻药、抗肿瘤药、抗结核药等。
1 紫外分光光度法应用于药物含量测定紫外-可见分光光度法由于灵敏度较高，不仅可用于常量组分的含量测定，也可用于测定微量组分、超微量组分以及多组分混合物同时测定等，在药物分析中主要用于原料药含量测定、制剂含量测定、含量均匀度和溶出度的检查等。
紫外分光光度法测定未知物
紫外分光光度法测定未知物1.仪器1.1紫外分光光度计（uv-1801型）；配石英比色皿（1cm）2个1.2容量瓶（100ml）：10个；容量瓶（250ml）1个1.3吸量管（10ml、5ml）：各1支1.4移液管（20ml、25ml、50ml）：各1支2.试剂2.1标准溶液（1mg/ml）：维生素c、水杨酸、苯甲酸、山梨酸、邻二氮菲分别硝酸锶1mg/ml的标准溶液，做为储备液。
2.2未知液：浓度约为（40~60ug/ml）。
（其必为给出的五种物质之一）3.实验操作3.1比色皿配套性检查石英比色皿装蒸馏水，以一只比色皿为参比，在测定波长下调节透射比为100%，测定其余比色皿的透射比，其偏差应小于0.5%，可配成一套使用。
3.2未知物的定性分析将五种标准储备液均吸收成10ug/ml的试液（酿制方法由球手自的定）。
以蒸馏水为滴定法，于波长200~350nm范围内读取五种溶液，绘制稀释曲线，根据所获得的稀释曲线对照标准谱图，确认被测物质的名称，并依据稀释曲线确认测量波长。
五种标准物质溶液的稀释曲线参五种标准物质溶液的稀释曲线参五种标准物质溶液的稀释曲线参五种标准物质溶液的稀释曲线参照吴际顺托福附图附图附图附图。
3.3未知物定量分析根据未明液稀释曲线上测量波长处的喷光度，确认未明液的吸收倍数，并酿制试样溶液3份，展开平行测定。
所推荐方法3.3.1维生素c含量的测定：准确吸取1mg/ml的维生素c标准储备液50.00ml，在250ml容量瓶中定容（此溶液的浓度为200ug/ml）。
再分别准确移取1、2、4、6、8、10ml上述溶液，在100ml容量瓶中定容（浓度分别为2、4、8、12、16、20ug/ml）。
准确移取20.00ml维生素c未知液，在100ml容量瓶中定容，于最小稀释波长处分别测量以上溶液的喷光度。
由标准曲线上Malvaleix未明液的浓度。
3.3.2苯甲酸含量的测量：精确汲取1mg/ml的苯甲酸标准储备液25.00ml，在250ml容量瓶中定容（此溶液的浓度为100ug/ml）。
紫外分光光度法测定水扬酸含量
实验七紫外分光光度法测定水扬酸含量一、实验目标1．进一步熟练吸收曲线的测绘方法。
2．掌握利用紫外吸收光谱曲线定性方法。
3．掌握紫外分光光度法测定水杨酸的方法。
二、实验原理水杨酸即邻羟基苯甲酸，分子中含有生色团（苯环和羰基）和助色团（羟基），并且共轭，在近紫外光区有较强的特征吸收，吸收稳定，重现性好，可用紫外分光光度法进行定性分析和定量分析。
三、实验用品1．仪器（1）紫外-可见分光光度计（配有石英吸收池），1台；（2）容量瓶，100mL 1个，50mL 8个；（3）吸量管，10mL，2支。
2．试剂（1）水杨酸标准储备液（1mg/mL）。
（2）水杨酸标准溶液（100μg/mL）准确吸取1mg/mL的水杨酸标准储备液10mL，在100mL容量瓶中用水稀释定容。
（3）未知液（两种或以上，浓度约为10μg/mL）。
四、实验步骤及数据记录1．定性分析测绘吸收曲线以蒸馏水为参比，于波长200～330nm范围内，分别测定各未知液的吸光度，按下表记录测量数据，并分别制作吸收光谱曲线。
λ/nm200201202203204205206207210215220Aλ/nm225226227228229230231232234235240Aλ/nm245250255260265270275280285290295Aλ/nm296297298299300305310315320325330A（3）定性分析将未知液的吸收曲线与水杨酸标准溶液参考吸收曲线作比较，确定哪种未知液为水杨酸。
2．定量分析（1）在吸收光谱曲线上确定测量波长（2）测绘标准曲线①取7个按要求洗净的50mL容量瓶，编号为0、1、2、4、6、8、10；②分别准确移取100μg/mL水杨酸标准溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00 mL，依次放入各容量瓶中，用蒸馏水稀释至标线，浓度分别为0.00、2.00、4.00、8.00、12.00、16.00、20.00μg/mL。
[讲解]紫外可见分光光度法测定阿司匹林中乙酰水杨酸和水杨酸含量
![[讲解]紫外可见分光光度法测定阿司匹林中乙酰水杨酸和水杨酸含量](https://img.taocdn.com/s3/m/cef75037bdd126fff705cc1755270722192e59dc.png)
紫外可见分光光度法测定阿司匹林中水杨酸和乙酰水杨酸的含量一、实验目的1．掌握用紫外可见分光光度法测定药物中乙酰水杨酸的方法。
2．学会使用UV-2550紫外-可见分光光度计。
二、实验原理阿司匹林是解热镇痛药，主要成分为乙酰水杨酸，摩尔质量180.16g/mol。
阿司匹林少量水解成水杨酸，因而在阿司匹林样品中混有少量水杨酸。
本实验采用双波长法和校正曲线法。
水杨酸干扰阿司匹林的吸光度测定，在选定的两波长下测定吸光度差值。
配制一系列浓度不同的标准阿司匹林溶液，在测定条件相同的情况下，分别测定其在两个波长下的吸光度，以标准浓度为横坐标，以相应吸光度差值为纵坐标，绘制△A-C关系图，在相同条件下测出试样在两波长处的吸光度，可从校正曲线上查出试样液的浓度。
三、仪器和试剂1.仪器 UV-2550紫外-可见分光光度计、容量瓶10ml 、50ml。
2.水杨酸标准品1.008mg/ml、阿司匹林标准品1.008mg/ml、阿司匹林样品40mg/片、乙醇。
四、实验步骤1. 样品溶液、标准溶液的配置：标准溶液的配置：取6个10ml容量瓶，标号1~6。
使用微量进样器精密吸取阿司匹林标准品0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml注入各个容量瓶，95%乙醇定容。
配置成约40μl/ml、60μl/ml、80μl/ml、100μl/ml、120μl/ml 的标准溶液，备用。
并将水杨酸标准品溶液稀释为20μl/ml，备用。
样品溶液的配置：取1片阿司匹林研细，加入无水乙醇1~2ml分次研磨，使溶解。
利用滤膜过滤后转入50ml容量瓶中，充分振摇，乙醇定容（浓度：800μl/ml）。
取1ml定容后的样品溶液，转入10ml容量瓶，乙醇定容。
配置成约为80μl/ml的样品溶液。
2. 波长选择使用紫外-可见分光光度计，先用95%乙醇进行基线校正。
用阿司匹林标准品3和稀释过的水杨酸标准品进行光谱测量。
将扫描波长范围定在200-400nm，分别找出两者的最大吸收峰。
水杨酸分光光度法
2.2 水质氨氮的测定2.2.1 水杨酸分光光度法（HJ 536-2009）2.2.1.1 适用范围适用于地下水、地表水、生活污水和工业废水中氨氮的测定。
当取样体积为8.0 mL，使用10 mm比色皿时，检出限为0.01 mg/L，测定下限为0.04 mg/L，测定上限为1.0 mg/L（均以N计）。
当取样体积为8.0 mL，使用30 mm比色皿时，检出限为0.004 mg/L，测定下限为0.016 mg/L，测定上限为0.25 mg/L（均以N计）。
2.2.1.2 采样及样品贮存2.2.1.2.1 水样的保存水样采集在聚乙烯瓶或玻璃瓶内，并应尽快分析，必要时可加硫酸将水样酸化至pH<2，于2-5℃下可存放7 d。
酸化样品应注意防止吸收空气中的氮而遭致污染。
2.2.1.2.2 水样的预处理水样带色或浑浊以及含其它一些干扰物质，影响氨氮的测定。
为此，在分析时需做适当的预处理。
加适量的硫酸锌于水样中，并加氢氧化钠使呈碱性，生成氢氧化锌沉淀，再经过滤去除颜色和浑浊等。
取100 mL水样于具塞量筒或比色管中，加入1 mL10%硫酸锌溶液和0.1-0.2 mL 25%氢氧化钠溶液，调节pH至10.5左右，混匀。
放置使沉淀，用经无氨水充分洗涤过的中速滤纸过滤，弃去初滤液20 mL。
2.2.1.3 方法原理在碱性介质（pH=11.7）和亚硝基铁氰化钠存在下，水中的氨、铵离子与水杨酸盐和次氯酸离子反应生成蓝色化合物，在波长697 nm具最大吸收。
2.2.1.4 试剂的配制2.2.1.4.1 铵标准贮备液称取3.8190 g经100~105℃干燥过2 h的氯化铵（NH4Cl，优级纯）溶于水中，定容至1000 mL容量瓶中。
此溶液每毫升含1.00 mg氨氮。
2.2.1.4.2 铵标准使用液吸取10.00 mL氨标准贮备液于100 mL的容量瓶中，定容至刻度线，即为氨标准中间液（可稳定1周）。
吸取10.00 mL铵标准中间液于1000 mL容量瓶中，稀释至刻度线，即为氨标准使用液。
紫外分光光度法测定水杨酸
紫外分光光度法测定水杨酸一、实验目的1、了解紫外可见光度法的应用。
2、进一步掌握紫外分光光度计的基本操作和数据处理。
二、实验原理分光光度法是根据物质的吸光光谱及光的吸收定律，对物质进行定性、定量分析的一种方法。
光照射溶液时，当光子的能量（hn）与被照射物质的基态和激发态能量之差相等时，就能被吸收，不同物质的基态和激发态的能量之差不相等，因此吸收光子的能量也不相同，即吸收光的波长不同，这就是物质对光的选择性吸收。
分光光度法测定物质含量的依据是朗伯-比尔定律，A = ebc ，C为物质的量浓度，e称为摩尔吸光系数，b 为吸收层厚度，吸光度与透光率T的关系是：A = —lgT。
定量测定时，常用的定量方法有标准曲线法、标准对照法、吸光系数比较法及差示分光光度法，它们各有其适用的范围，由于许多物质在可见光区无特征吸收，而在近紫外（200nm—400nm）却有特征吸收，故需用紫外光为光源进行测定，紫外光光度法除了定量测定外尚能做定性鉴别，纯物质检查，并可为结构分析提供信息。
三、仪器和试剂仪器：TU-1900双光束紫外分光光度计，计算机试剂：水杨酸标准品、5%的甲醇水溶液、水杨酸样品四：实验步骤1、样品溶液的配制：取水杨酸72.0000mg，置于1000ml容量瓶中加5%的甲醇水溶液使之溶解并稀释至刻度，用吸量管精密吸取5.0、10.0、15.0、20.0、25.0ml上述溶液分别置于100ml容量瓶中，各加5%甲酸水溶液稀释至刻度，编号得4个不同浓度水杨酸标准溶液。
2、绘制吸收曲线：取上述水杨酸标准溶液，以甲酸水溶液作参比。
用TU-1900双光束紫外分光光度计在200-700nm间进行波长扫描，得吸收光谱图，确定最大吸收波长λman。
3、绘制标准曲线：以λman为波长，测定标准系列的吸光度A。
以吸光度A为纵坐标，浓度C为横坐标绘制标准曲线。
4、样品的测定：在与标准曲线同样的测定条件下，测定待测水杨酸样品的浓度。
实验一 紫外可见分光光度法测定水杨酸的含量
紫外可见分光光度法测定水杨酸的含量一、实验目的1、了解紫外可见分光光度计的性能、结构及其使用方法。
2、掌握紫外－可见分光光度法定性、定量分析的基本原理和实验技术。
二、实验原理紫外-可见光谱是用紫外-可见光测获的物质电子光谱，它研究产生于价电子在电子能级间的跃迁，研究物质在紫外-可见光区的分子吸收光谱。
当不同波长的单色光通过被分析的物质时能测得不同波长下的吸光度或透光率，以ABS为纵坐标对横坐标波长λ作图，可获得物质的吸收光谱曲线。
一般紫外光区为190-400nm，可见光区为400-800nm。
紫外吸收光谱的定性分析为化合物的定性分析提供了信息依据。
由于分子结构不同但只要具有相同的生色团，它们的最大吸收波长值就相同。
因此，通过对末知化合物的扫描光谱、最大吸收波长值与已知化合物的标准光谱图在相同溶剂和测量条件下进行比较，就可获得基础鉴定。
利用紫外吸收光谱进行定量分析时，必须选择合适的测定波长。
苯甲酸和水杨酸的紫外吸收光谱如图1所示。
图1 苯甲酸与水杨酸紫外吸收光谱图1-苯甲酸；2-水杨酸水杨酸在波长300 nm处有吸收峰，而苯甲酸此处无吸收，在波长230 nm两组吸收峰重叠，为了避开其干扰，选用300 nm波长作为测定水杨酸的工作波长。
由于乙醇在250～350nm无吸收干扰，因此可用60%乙醇为参比溶液。
三、仪器与试剂1．仪器紫外－可见分光光度计；容量瓶100mL 1个、50mL 5个；刻度吸量管1mL、2mL、5mL各1支。
2．试剂水杨酸对照品（分析纯）；60%乙醇溶液（自制）。
四、实验步骤1、标准溶液的制备：准确称取0.0500 g水杨酸置于100 mL烧杯中，用60%乙醇溶解后，转移到100 mL容量瓶中，以60%乙醇稀释至刻度，摇匀。
此溶液浓度为0.5mg·mL-1。
2、将五个50mL容量瓶按1-5依次编号。
分别移取水杨酸标准溶液0.50、1.00、2.00、3.00、4.00mL于相应编号容量瓶中，各加入60%乙醇溶液，稀释至刻度，摇匀。
2023年阿司匹林主成分定量分析实验报告
题目：阿司匹林主成分定量分析试验者： 第五大组 班级： 12应用化学 学号：同组试验者： 班级： 学号：摘要：紫外-可见分光光度法是根据物质分子对波长为200-760nm 这一范围旳电磁波旳吸取特性所建立起来旳一种定性、定量和构造分析措施。
复方阿司匹林（APC ）是应用广泛旳热解镇痛非甾体抗炎药，对于感冒、发热、头痛、牙痛等有很好旳疗效，还能克制血小板汇集，用于防止和治疗缺血性心脏病、心绞痛。
其中有效成分为乙酰水杨酸（阿司匹林）、非那西汀和咖啡因。
本试验通过紫外分光光度法定量分析阿司匹林中重要有效成分乙酰水杨酸旳含量，计算其有效成分所占比例，为其单位计量旳有效成分对于人体旳作用强度提供理论根据。
OCC O OH OCH 3乙酰水杨酸（阿司匹林）关键词：阿司匹林，紫外-可见分光光度法，水杨酸1. 引言：阿司匹林是生活中十分常见，应用十分广泛旳平常抗炎药物。
可用于镇痛解热，抗风湿，关节炎。
抗血栓等等。
阿司匹林为白色针状或板状结晶或粉末，熔点135-140摄氏度，无气味，微带酸味。
在干燥空气中稳定，在潮湿空气中缓慢水解成其他有效成分水杨酸和乙酸。
采用老式旳酸碱滴定法测定阿司匹林溶片中乙酰水杨酸旳含量，受环境影响较大。
采用紫外分光光度法测定可有效消除温度、湿度等环境影响，且快捷、精确、重现性好。
2. 试验措施和原理2.1理论根据在光度分析中，常会因共存组分与被测定组分旳吸取谱带重叠而干扰测定，采用双波长分光光度法可以处理这些干扰问题。
根据朗伯-比尔定律A=Kbc,运用吸光度具有加和性旳原理，试样溶液在两测定波长λ1和λ2处旳吸光度差ΔA与溶液中待测物质旳浓度成正比，这是双波长分光光度法进行定量分析旳根据。
Aλ1=Kλ1bcAλ2=Kλ2bcΔA=A1－A2=K（λ1－λ2）bc样品中共存干扰物质旳双组分体系中，采用等吸取点法测定消除干扰组分旳影响，选择测定波长时有两个原则：干扰组分在这两个波长处应有相似旳吸光度，即差吸光度只与一种组分浓度有关，而另一组分无关；待测组分在这两个波长处旳吸光度差值应足够答，以保证较高旳敏捷度。
阿司匹林中乙酰水杨酸和水杨酸含量的测定(正式)
09级临床药学唐辰逍0929014、彭文星0929012、邸宣0929009
一、实验目的
1．掌握用紫外可见分光光度法测定药物中乙酰水杨酸的方法。
2．学会使用UV-2550紫外-可见分光光度计。
二、实验原理
阿司匹林是解热镇痛药，主要成分为乙酰水杨酸，摩尔质量180.16g/mol。阿司匹林少量水解成水杨酸，因而在阿司匹林样品中混有少量水杨酸。
本实验采用双波长法和校正曲线法。水杨酸干扰阿司匹林的吸光度测定，在选定的两波长下测定吸光度差值。配制一系列浓度不同的标准阿司匹林溶液，在测定条件相同的情况下，分别测定其在两个波长下的吸光度，以标准浓度为横坐标，以相应吸光度差值为纵坐标，绘制△A-C关系图，在相同条件下测出试样在两波长处的吸光度，可从校正曲线上查出试样液的浓度。
0.4188
C
40.24
60.36
80.48
100.6
120.72
x
2．标准曲线（△A-C关系图）
第一次测量
第二次测量
3．利用第一次测量得出的曲线，根据样品的吸光度值，在标准曲线上找到相应的浓度94.37μl/ml。
因样品稀释10倍，故原样品溶液浓度为943.7μl/ml=0.9437mg/ml。
故样品中阿司匹林的质量为0.9437*50=47.185mg。
样品溶液的配置：取1片阿司匹林研细，加入无水乙醇1~2ml分次研磨，使溶解。利用滤膜过滤后转入50ml容量瓶中，充分振摇，乙醇定容（浓度：800μl/ml）。取1ml定容后的样品溶液，转入10ml容量瓶，乙醇定容。配置成约为80μl/ml的样品溶液。
2.波长选择
使用紫外-可见分光光度计，先用95%乙醇进行基线校正。用阿司匹林标准品3和稀释过的水杨酸标准品进行光谱测量。将扫描波长范围定在200-400nm，分别找出两者的最大吸收峰。阿司匹林标准品在277.5nm、235.0nm处有最大吸收峰。因在277.5nm处，阿司匹林、水杨酸均有吸收，故采用双波长法。以277.5nm为λ1，从水杨酸的光谱中找到与277.5nm处A值相等的点所对应的波长值λ2=320nm。
药理化学实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解药理化学实验的基本操作方法和实验原理。
2. 掌握药物在体内的代谢过程及代谢产物。
3. 学会通过实验手段检测药物在体内的代谢情况。
4. 提高实验操作技能和实验数据分析能力。
二、实验原理药物在体内的代谢主要涉及氧化、还原、水解和结合等反应。
本实验通过模拟药物在体内的代谢过程，观察药物在代谢过程中产生的代谢产物，并对其进行分析和鉴定。
三、实验材料1. 仪器：紫外-可见分光光度计、高效液相色谱仪、旋转蒸发仪、恒温水浴锅、离心机、分析天平等。
2. 药品：药物样品、代谢产物标准品、实验试剂等。
3. 试剂：甲醇、乙腈、磷酸盐缓冲液、磷酸、盐酸等。
四、实验步骤1. 药物样品处理（1）称取一定量的药物样品，用甲醇溶解并定容至50mL容量瓶中。
（2）将溶液离心，取上清液待测。
2. 代谢产物检测（1）将代谢产物标准品用甲醇溶解并定容至10mL容量瓶中，制备成一系列标准溶液。
（2）取一定量的药物样品溶液和标准溶液，在紫外-可见分光光度计上测定其吸光度。
（3）以吸光度为纵坐标，浓度（μg/mL）为横坐标，绘制标准曲线。
（4）根据药物样品溶液的吸光度，从标准曲线上查出其浓度。
3. 代谢产物鉴定（1）将药物样品溶液进行高效液相色谱分析，记录色谱图。
（2）将色谱图与代谢产物标准品的色谱图进行比对，鉴定代谢产物。
4. 数据处理（1）计算药物样品中代谢产物的含量。
（2）分析实验结果，得出结论。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制根据实验数据，绘制标准曲线，如图1所示。
图1 代谢产物标准曲线2. 代谢产物含量测定根据标准曲线，计算药物样品中代谢产物的含量，结果如表1所示。
表1 药物样品中代谢产物含量样品编号 | 代谢产物A浓度（μg/mL） | 代谢产物B浓度（μg/mL） | 代谢产物C浓度（μg/mL）--------|------------------------|------------------------|------------------------1 | 0.25 | 0.15 | 0.102 | 0.30 | 0.20 | 0.123 | 0.28 | 0.18 | 0.113. 代谢产物鉴定根据色谱图比对，鉴定药物样品中的代谢产物为代谢产物A、B和C。
紫外分光度法测水杨酸
紫外吸收光谱法测定APC 片剂中乙酰水杨酸的含量一、实验目的1、了解7500型紫外－可见分光光度计的性能、结构及其使用方法。
2、掌握紫外－可见分光光度法定量分析的基本原理和实验技术。
二、方法原理APC 药片，研磨成粉末，用稀NaOH 水溶液溶解提取，乙酰水杨酸水解成水杨酸钠进入水溶液，该提取液在295nm 左右有一个吸收峰，测出稀释成一定浓度的提取液的吸光度值，并用已知浓度的水杨酸的NaOH 水溶液做出一条标准曲线，则可从标准曲线上求出相当于乙酰水杨酸的含量。
根据两者的分子量，即可求得APC 中乙酰水杨酸的含量。
溶剂和其他成分不干扰测定。
COOH OC +COO CH 3O +C 3O C H O OH 3+H O 22乙酰水杨酸浓度=[水杨酸浓度]×12.13815.180 三、仪器和试剂仪器 天美7500或岛津240紫外—可见分光光度计；3G 玻璃砂芯漏斗1个；抽滤瓶250mL 1个；容量瓶250mL 1支；50mL 7支；胖肚吸量管20mL 1只；刻度吸量管5mL 2只。
试剂 0.5000mg ·mL -1水杨酸贮备液：称取0.5000g 水杨酸先溶于少量0.10moL ·L -1NaOH 溶液中，然后用蒸馏水定容于1000mL 容量瓶中；0.10moL ·L -1 NaOH 溶液。
四、实验内容1、将七个50mL 容量瓶按0-6依次编号。
分别移取水杨酸储备液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL 于相应编号容量瓶中，各加入1.0mL 0.10moL ·L -1NaOH 溶液，先用蒸馏水稀释至30mL 左右，80℃水浴加热10分钟，冷却至室温，稀释至刻度，摇匀。
2、放一片APC 药片在清洁的50mL 烧杯中，加2.0mL0.10moL ·L -1 NaOH 先溶胀,再用玻棒搅拌溶解。
在玻璃砂芯漏斗中先放入一张滤纸，用玻璃砂芯漏斗定量地转移烧杯中的内含物，用10mL 的0.1MNaOH 淋洗烧杯和玻璃砂芯漏斗2次(共20mL)，20mL 蒸馏水淋洗漏斗4次(共80mL)，并将滤液收集于同一个250mL 容量瓶中，最后用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
食品中水杨酸含量的测定指导书(精)
准确移取2mL水杨酸未知液，在50mL容量瓶中定存，在选定的最大波长下测定吸光度，从工作曲线上查得未知液的浓度。
三、定量
1）工作曲线绘制
将6个50mL干净的容量瓶按1~6依次编号，分别准确移取水杨酸标准溶液0.00mL、1.00mL、2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL于相应编号容量瓶中，用60%乙醇溶液稀释至刻度，摇匀。以试剂空白为参比溶液，在选定最大波长下，测定并记录各溶液的吸光度，然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制工作曲线。
两种（也可以是多种）未知液：未知液均配成100μg/mL的待测溶液（其中一种为水杨酸）。
二、定性（绘制吸收曲线）
用1cm石英吸收池，以60%乙醇为参比，在波长200~350nm范围内分别测定水杨酸标准溶液和两种未知液的吸光度，并做吸收光谱曲线，根据吸收曲线的形状确定哪种未知溶液为水杨酸，并从吸收光谱曲线上确定最大吸收波长做为定量测定时的测量波长.
《现代仪器分析技术》单项技能实训指导书
实训项目名称
食品中水杨酸含量的测定
学时2Βιβλιοθήκη 时实训目的1.解紫外可见分光光度计的性能、结构及其使用方法。
2.掌握紫外-可见分光光度法定律、定量分析的基本原理和实验技术
一、试剂：水杨酸对照品（分析纯），60%乙醇溶液。
水杨酸标准溶液（100μg/mL）：准确称取0.1g水杨酸置于100mL烧杯中，用60‰乙醇溶解后转移到100mL容量瓶中，以60%乙醇稀释至刻度，摇匀，作为储备液（1mg/mL）。再用该储备液稀释成浓度为100μg/mL的水杨酸标准溶液。
紫外分光光度法测水杨酸含量
作者：张劬婷作者单位：201508 上海，上海市金山区中心医院漕泾分院加入收藏夹向本刊在线投稿【摘要】目的建立测定樟柳酊中水杨酸含量的方法。
方法以60%乙醇为溶剂，采用紫外分光光度法测定樟柳酊中水杨酸的含量，测定波长为300.10 nm。
结果水杨酸的平均回收率为100.05%，RSD为0.70%，在8～28 μg/ml浓度范围内线性关系良好，相关系数r=0.9999。
结论用紫外分光光度法测定樟柳酊中水杨酸的含量，此方法快速、简便、结果准确、重现性好。
【关键词】紫外分光光度法水杨酸樟柳酊为我院的自拟制剂，其处方组成：水杨酸20 g，樟脑25 g，60%乙醇加至1000 ml，临床用于治疗慢性皮炎。
对该制剂的质量控制，除了利用中和法测定水杨酸含量外［1］，本文通过实验考察建立了仪器测定法，即采用紫外分光光度法测定水杨酸的含量［2］，该方法简便、快速、结果满意。
1 仪器与药品日本岛津uv-2401型分光光度计；水杨酸对照品（中国药品生物制品检定所）；60%乙醇（自制）；纯化水（自制）；樟柳酊（自制）。
2 方法与结果2.1 标准溶液的制备精密称取水杨酸对照品0.1000 g，置50 ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，得2 mg/ml水杨酸储备液。
2.2 测定波长的选择精密吸取水杨酸储备液0.5 ml置50 ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，在400～200 nm波长范围内扫描，测得在300.10 nm处有一最大吸收峰，同时在此波长范围内，按处方比例稀释的樟脑液无吸收，不干扰测定。
2.3 标准曲线的绘制精密吸取水杨酸储备液0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7 ml分别置50 ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，在300.10 nm处测其吸收度，得回归方程：C=37.9399A-0.2130，r=0.9999（n=5）。
可见，水杨酸在8～28 μg/ml浓度范围内线性关系良好。
紫外分光光度法测定维体舒片乙酰水杨酸含量
紫外分光光度法测定维体舒片乙酰水杨酸含量
陈启蒙;张晓梅
【期刊名称】《天津药学》
【年(卷),期】1995(007)003
【摘要】维体舒片是复方解热镇痛药，制剂中主要含有乙酰水杨酸和维生素Ｃ。
本文采用双波长分光光度法测定其中乙酰水杨酸含量，通过对其线性关系，稳定性，回收实验的考察，表明精密度，准确度良好，乙酰水杨酸的回收率平均为１００．１％，ＲＳＤ为０．９９％。
【总页数】3页(P58-60)
【作者】陈启蒙;张晓梅
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
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紫外可见分光光度法测定水杨酸的含量
一、实验目的
1、了解紫外可见分光光度计的性能、结构及其使用方法。
2、掌握紫外－可见分光光度法定性、定量分析的基本原理和实验技术。
二、实验原理
紫外-可见光谱是用紫外-可见光测获的物质电子光谱，它研究产生于价电子在电子能级间的跃迁，研究物质在紫外-可见光区的分子吸收光谱。
当不同波长的单色光通过被分析的物质时能测得不同波长下的吸光度或透光率，以ABS为纵坐标对横坐标波长λ作图，可获得物质的吸收光谱曲线。
一般紫外光区为190-400nm，可见光区为400-800nm。
紫外吸收光谱的定性分析为化合物的定性分析提供了信息依据。
由于分子结构不同但只要具有相同的生色团，它们的最大吸收波长值就相同。
因此，通过对末知化合物的扫描光谱、最大吸收波长值与已知化合物的标准光谱图在相同溶剂和测量条件下进行比较，就可获得基础鉴定。
利用紫外吸收光谱进行定量分析时，必须选择合适的测定波长。
苯甲酸和水杨酸的紫外吸收光谱如图1所示。
图1 苯甲酸与水杨酸紫外吸收光谱图
1-苯甲酸；2-水杨酸
水杨酸在波长300 nm处有吸收峰，而苯甲酸此处无吸收，在波长230 nm两组吸收峰重叠，为了避开其干扰，选用300 nm波长作为测定水杨酸的工作波长。
由于乙醇在250～350nm无吸收干扰，因此可用60%乙醇为参比溶液。
三、仪器与试剂
1．仪器
紫外－可见分光光度计；容量瓶100mL 1个、50mL 5个；刻度吸量管1mL、
2mL、5mL各1支。
2．试剂
水杨酸对照品（分析纯）；60%乙醇溶液（自制）。
四、实验步骤
1、标准溶液的制备：准确称取0.0500 g水杨酸置于100 mL烧杯中，用60%乙醇溶解后，转移到100 mL容量瓶中，以60%乙醇稀释至刻度，摇匀。
此溶液浓度为0.5mg·mL-1。
2、将五个50mL容量瓶按1-5依次编号。
分别移取水杨酸标准溶液0.50、1.00、2.00、3.00、4.00mL于相应编号容量瓶中，各加入60%乙醇溶液，稀释至刻度，摇匀。
3、用1 cm石英吸收池、，以60%乙醇作为参比溶液，在200～350 nm波长范围内测定一份水杨酸标准溶液的紫外吸收光谱，确定最大吸收波长。
4、在选定波长下，以60%乙醇为参比溶液，由低浓度到高浓度测定水杨酸标准溶液系列及未知液的吸光度。
以水杨酸标准溶液的吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线，根据水杨酸试液的吸光度，通过标准曲线计算水杨酸试样中水杨酸的含量。
表1 标准曲线制定及未知试样浓度检测
五、数据处理
1、根据某一浓度下的全波长扫描图，确定最佳吸收波长。
2、绘制标准曲线，计算工作曲线方程及R2值。
3、计算未知样中水杨酸的浓度。
六、注意事项
1、配制样品前要将所使用的玻璃仪器清洗干净。
2、移取标准溶液之前要润洗移液管。
3、测量前用待测液润洗比色皿，测量由低浓度到高浓度依次进行。
思考题
1、综述紫外吸收光谱分析的基本原理。
2、归纳影响紫外光谱定性、定量检测时的各种误差影响因素。
3、为什么选用300 nm而不选用230 nm波长进行水杨酸的定量分析？
4、本实验为什么用60%乙醇作参比溶液?。