(7)艾滋病实验室规范化管理及生物安全

艾滋病： 按乙类传染病管理 艾滋病病毒： 按一类菌毒种管理，属高致病性病原微生物
艾滋病有关试验的实验室要求：
血清学检测(筛查和确认实验室) 、免疫学和 核酸检测在二级生物安全实验室（BSL-2）实验室 进行。 病毒分离及使用病毒株进行的有关研究工作 在三级生物安全实验室（BSL-3）实验室进行。
实验室标记举例 二级生物安全实验室 BSL-3 病原体名称：HIV 实验室负责人： 联系电话：
6 管理要求
6.1 管理责任
实验室管理层对所有员工和实验室来访者的安全负责。最 终责任由实验室负责人或指定的与其地位相当者承担。应 任命一名有适当资质和经验的实验室安全负责人协助管理 层负责安全事宜。安全负责人应制定、维护和监督有效的 实验室安全计划。一个有效的实验室安全计划应包括教育、 定位及培训、审核及评估、促进实验室安全行为的程序。
6.3HIV常用的消毒方法
6.3.1物理消毒法 6.3.1.1高压蒸汽消毒,121℃,15-20min 6.3.1.2干燥空气烘箱消毒,140℃ ,2-3h 6.3.2化学消毒法 含氯消毒剂(次氯酸钠,含有效氯2000-
5000mg/L)、75%乙醇和2%戊二醛，保持 警惕0-30min
6.3 程序 应根据实验对象、生物危害程度评估、研究内容、 设施特点、设备具体制定相应的标准操作程序。实验 室的标准操作程序应包括对涉及的任何危险以及如何 在风险最小的情况下开展工作之详细的作业指导书。 负责工作区活动的管理责任人每年应对这些程序至少 评审和更新一次。应制定书面计划，至少包括以下内 容： 1）员工的健康监护。
关掉电源
及时清理废弃液
传递窗： 一次内容物不宜过多
避免叠放 联锁门：不宜携带物品通过联锁门 操作台：选择圆角操作台
移动推车：避免堆积物过多
废液缸：放在生物安全柜内，保证有效的
消毒剂，轻轻放入废弃物
一次性包装物：集中处理，勿随地乱扔
6、废弃物处置
6.1废弃物处置应符合《实验室生物安全
通用要求》（GB19489-2004)和<消毒技 术规范(2002) 6.2从艾滋病实验室出来的所有废弃物,包 括再需要的样品\培养物和其它物品,均视 为感染性废弃物，应置于专用的密封防漏 容器中，安全运到消毒室，并在高压消毒 后再进行处理或废弃。
艾滋病实验室规范化管理及生物安全
内江市预防控制中心 罗水斌
中华人民共和国国家标准
GB
19489－2008
实验室
生物安全通用要求
laboratories—General requirements for biosafety

2008－12－26发布
2009-07-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会
（4）如果怀疑离心机内有破损情况发生，需要等转头停 止30分钟后再进行消毒。 （5）避免使用质量差的离心管。 （6）专人定期维修、保养、检定。 （7）仪器放置位置要平，可承重，仪器上避免放置物品。
高压灭菌器
（1）定期检查排水桶。
（2）注意防护，防止烫伤，待温度降
下后再开盖。
（3）一次高压物不宜过多。
2）实施危害评估，记录结果及采取措施的安排。
3）化学品和其他危险物品的确认（包括适当的标识要 求）、安全存放与处置及监控程序。 4）操作有害材料的安全行为的程序。 5）防止高风险和污染材料失窃的程序。
6）确认培训需求和教材的方法。 7）获得、维持和分发实验室所有使用材料之安全数据 单（MSDS）的程序。 8）实验室设备安全去污染和维护的程序。 9）紧急程序，包括暴露处理程序。
生物安全柜
使用前的培训 (1) 它如何工作以及所有控制装置和指示的功能。 (2) 它属于哪种分类。 (3) 它的性能的限制。 (4) 使用后EPC如何消毒。
离心机：最易导致污染的设备！
（1）在离心感染性材料时要把其放在密封的离心桶内。 （2）离心桶在使用后要消毒其表面。 （3）若离心桶需要平衡，应在生物安全柜中进行。
发布
内
1. 术语和定义 2. 危害程度分级 3. 生物危害评估
容
4. 防护屏障和生物安全水
Βιβλιοθήκη Baidu
平分级 5. 个人防护装备 6. 管理要求
7.
废弃物处置
1
术语和定义
1.1 生物因子 biological agents 一切微生物和生物活性物质 1.2 病原体 pathogens 可使人、动物或植物致病的生物因子。 1.3 危险废弃物 hazardous waste 有潜在生物危险、可燃、易燃、腐蚀、有毒、放射和起 破坏作用的对人、环境有害的一切废弃物。 1.4 危害 risk 伤害发生的概率及其严重性的综合。 1.5 气溶胶 aerosols 悬浮于气体介质中的粒径一般为0.001μｍ－100μｍ的 固态或液态微小粒子形成的相对稳定的分散体系。
5 个人防护
1、防护服用：白大衣、隔离服或一次性工作服。


清洁区专柜存放。 2、一次性手套（双层）、一次性口罩、安全防 护眼镜。 3、专用工作鞋、鞋面覆盖足背，某地底防滑。 4、洗眼器。 5、高标准的个人保健，任何伤口和擦伤都应以 防水敷料覆盖。 6、进实验室前要摘除首饰，修长的带刺的指甲， 以免刺破手套。 7、离开实验室时应先脱去手套，再脱防护服 ， 放入污物袋中，待消毒后方可洗涤或废弃。用肥 皂和流动水洗手。
显微镜
（1）注意安全使用载玻片
（2）按正确方向缓慢调解镜头
（3）一次观察样品不宜过多
（4）注意劳逸结合
冰箱
（1）安全存放样品
（2）专人管理制度 （3）定期检查
（4）相对分区
洗板机 每次使用前检查机器是否正常运转 确认后开始洗涤，按要求完成全部洗涤次数
定期检查，避免管道堵塞，漏液
使用后清理干净，避免结晶
10）事件记录、报告及调查。
11）废弃物处理和处置。
6.4 安全检查
实验室管理层有责任确保安全检查的执行。 每年应对工作场所至少检查一次，以保证：
1）应急装备、警报体系和撤离程序功能及状态正 常； 2）用于危险物质漏出控制的程序和物品状态，包 括紧急淋浴；
3）对可燃易燃性、可传染性、放射性和有毒物质 的存放进行适当的防护和控制；
实验室的每个出口和入口应可分辨，入口处应有标记，标 记应包括国际通用的危险标志（如：生物危险标志、火险标志 和放射性标志）以及其他有关的规定的标记。应设紧急出口并 有标记以和普通出口区别。紧急撤离路线应有在黑暗中也可明 确辨认的标识。 实验室入口应有可锁闭的门。门锁应不妨碍紧急疏散。实 验室的进入应仅限于经授权的人员。房间内的门按需要安装门 锁；正当操作高危险样品时应有进入限制。存放高危险样品、 培养物、化学试剂或供应品，还需采取其他的保安措施，如可 锁闭的门、可锁闭的冷冻箱、特殊人员的进入限制等。应评估 生物材料、样品、药品、化学品和机密资料被偷盗和被不正当 使用的危险，并采取相应措施防范其发生。 应有专门设计以确保存储、转运、收集、处理和处置危险 物料的安全。 实验室内温度、湿度、照度、噪声和洁净度等内环境符合 工作要求和有关要求。
4）去污染和废弃物处理程序的状态；
5）实验室设施、设备、人员的状态。
6.5 安全手册（编写适合于艾滋病实验室的安全手册）
要求所有员工阅读的安全手册应在工作区随时可用。手 册应针对实验室的需要，主要包括但不限于以下几方面： 1）生物危险； 2）消防； 3）电气安全； 4）化学品安全；
5）辐射；
6）危险废弃物处理和处置。 安全手册应对从工作区撤离和事件处理规程有详细说明。 实验室管理层应至少每年对安全手册评审和更新。 实验室中其他有用的信息来源还包括（但不限于）实验室涉 及的所有材料的安全数据单，教科书和权威性杂志文章等参 考资料。
4 防护屏障和生物安全水平分级
4.1 防护屏障 4.1.1 一级防护屏障 实验室的生物安全柜和个人防护装备等构成的防护屏障。 4.1.2 二级防护屏障 实验室的设施结构和通风系统等构成的防护屏障。 4.2 生物安全水平分级 根据所操作的生物因子的危害程度和采取的防护措 施，将生物安全防护水平（biosafety level, BSL）分 为4级，I级防护水平最低，Ⅳ级防护水平最高。以BSL －1、BSL－2、BSL－3、BSL－4表示实验室的相应生 物安全防护水平；以ABSL－1、ABSL－2、ABSL－3、 ABSL－4表示动物实验室的相应生物安全防护水平。
实验室安全负责人应有权阻止不安全的活动。如设有安全 委员会，实验室安全负责人如果不是该委员会的主任，至 少应是该委员会有职权的成员。 实验室负责人应制定规定和程序确保实验室设施、设 备、个人防护设备、材料等符合国家有关安全要求，定期 检查、维护、更新，确保不降低其设计性能。
6.2 员工健康管理 所有人员应有文件证明其对工作及实验室全部设施 中潜在的风险受过培训。 应要求所有人员根据可能接触的生物接受免疫以预 防感染。应保存免疫记录。
1.9 实验室分区 laboratory area 按照生物因子污染概率的大小，实验室可 进行合理的分区。 1.10 缓冲间 buffer room 设置在清洁区、半污染区和污染区相临两 区之间的缓冲密闭室，具有通风系统，其 两个门具有互锁功能，且不能同时处于开 启状态。
2 危害程度分级
根据生物因子对个体和群体的危害程度将其分为4级。 2.1 危害等级Ⅰ（低个体危害，低群体危害） 不会导致健康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫 等生物因子。 2.2 危害等级Ⅱ（中等个体危害，有限群体危害） 能引起人或动物发病，但一般情况下对健康工作者、群体、家 畜或环境不会引起严重危害的病原体。实验室感染不导致严重 疾病，具备有效治疗和预防措施，并且传播风险有限。 2.3 危害等级Ⅲ（高个体危害，低群体危害） 能引起人类或动物严重的疾病，或造成严重经济损失，但通常 不能因偶然接触而在个体间传播，或能使用抗生素、抗寄生虫 药治疗的病原体。 2.4 危害等级Ⅳ（高个体危害，高群体危害） 能引起人类或动物非常严重的疾病，一般不能治愈，容易直接、 间接或因偶然接触在人与人，或动物与人，或人与动物，或动 物与动物间传播的病原体。
1.6 生物安全 biosafety 避免危险生物因子造成实验室人员暴露、向实 验室外扩散并导致危害的综合措施。 1.7生物安全柜 biological safety cabinet(BSC) 负压过滤排风柜。防止操作者和环境暴露于实 验过程中产生的生物气溶胶。 1.8个人防护装备 personal protective equipment(PPE) 用于防止人员受到化学和生物等有害因子伤害 的器材和用品。
3 生物危害评估
当实验室活动涉及传染或潜在传染性生物因 子时，应进行危害程度评估。危害程度评估应至 少包括下列内容：生物因子的种类（已知的、未 知的、基因修饰的或未知传染性的生物材料）、 来源、传染性、致病性、传播途径、在环境中的 稳定性、感染剂量、浓度、动物实验数据、预防 和治疗。 危害程度评估应由适当的有经验的专业人员进行。
生物危害等级：I级、II级、III级、IV级 生物安全防护水平：I级、II级、III级、IV级
生物安全实验室：
BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4 ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4
生物安全实验室分级
ＢＳＬ－1 没有特殊要求, 不需要特殊培训。进行一级生物安全实验。 ＢＳＬ－2 工作人员需要经过培训，配备生物安全柜（1级或2级），有可能发生气溶 胶或溢出的实验要求在安全柜内进行。进行二级生物安全实验。 Ｂ Ｓ Ｌ － 3 工作人员必须经过特殊培训, 配备生物安全柜（1级或2级）, 有感染性材 料的实验, 有可能发生气溶胶或溢出的实验要求在安全柜内进行，实验室 内为负压, 进行三级生物安全实验。 Ｂ Ｓ Ｌ － 4 除BSL-3的条件外, 必须是独立的建筑物，生物安全柜为2或3级，进 行四级生物安全的实验。