革兰氏阴性球菌.ppt

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形态与染色
革兰染色阴性,0.6革兰染色阴性,0.6-0.8µm 肾形、成双排列 有菌毛,无芽胞和鞭毛,新分离株有荚膜
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男性急性淋病患者尿道分泌物涂片(革兰染色)
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男性慢性淋病患者尿道分泌物涂片(革兰染色)
淋病奈瑟菌鉴定依据:
1. 涂片染色为革兰阴 性双球菌; 性双球菌; 2. 巧克力平板上为半 透明、灰白色、 透明、灰白色、凸 起滴露状菌落; 起滴露状菌落; 3. 氧化酶及触酶均阳 性; 4. 只分解葡萄糖,产 只分解葡萄糖, 酸不产气; 酸不产气; 5. 血清学试验阳性。 血清学试验阳性。
防治原则
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防治原则
综合性预防措施
隔离病人、检查带菌者、预防性投药,室内通风 流脑疫苗: 流脑疫苗:
6个月-2岁接种两次,间隔1月 个月- 岁接种两次,间隔1 A群脑膜炎球菌多糖抗原。制备疫苗
青霉素、磺胺大剂量治疗
脑膜炎接种
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淋病奈瑟菌,淋球菌
37℃ 24h
血琼脂平板
观察菌落特征 及溶血情况
生化反应、 生化反应、致病力试验及药敏试验
葡萄球菌鉴别
金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 色素 金黄色 白色 α-溶血素 + 溶血素 + 血浆凝固酶试验 耐热DNA酶试验 + 耐热 酶试验 + 甘露醇发酵试验 致病力 强 弱或无 脓汁标本 找出两种菌落 Gram染色 染色 甘露醇发酵试验
革兰阴性双球菌,肾形或豆形 革兰阴性双球菌 肾形或豆形
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脑膜炎奈瑟菌( 脑膜炎奈瑟菌(N.meningitidis)
生物学性状
生化反应:氧化酶及触酶( ), ),分解葡萄糖 生化反应:氧化酶及触酶(+),分解葡萄糖 和麦芽糖 抗原和分类: 抗原和分类:根据荚膜多糖群特异性抗原的不 同可分为13个血清群 根据膜蛋白不同, 个血清群, 同可分为 个血清群,根据膜蛋白不同,各血 清群又可分为若干血清型 抵抗力:很弱,对热、 抵抗力:很弱,对热、冷、干燥和消毒剂极度 敏感
生化反应
可产生自溶酶,人工培养时若不及时移种,数 日后菌体自溶
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抗原构造、抵抗力
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致病性与免疫性
致病物质
荚膜 菌毛 内毒素
所致疾病
流行性脑膜炎(简称流脑)
人类是唯一的易感宿主
免疫性
6月~2岁年龄组婴儿免疫力最低,是易感人群 月~2
第七章 革兰阴性球菌
奈瑟菌属
Neisseria
医学检验系
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脑膜炎奈瑟菌
N. meningitis meningococcus
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奈瑟菌属 (Neisseria) Neisseria)
脑 膜 炎 双 球 菌
奈瑟氏菌属是一群革兰阴性球菌,常成双排列,无鞭毛,无芽胞, 奈瑟氏菌属是一群革兰阴性球菌,常成双排列,无鞭毛,无芽胞,有菌 毛 人类为奈瑟氏菌属的自然宿主, 人类为奈瑟氏菌属的自然宿主,对人致病的只有脑膜炎奈瑟菌和淋病奈 瑟菌,两种细菌DNA序列有 %的同源性 序列有70% 瑟菌,两种细菌 序列有 主要区别点 区别点为 淋病奈瑟菌寄居于尿道黏膜,引起泌尿生殖系统疾病; 主要区别点为,淋病奈瑟菌寄居于尿道黏膜,引起泌尿生殖系统疾病; 而脑膜炎奈瑟菌和其他奈瑟菌和其他奈瑟菌均存在于鼻咽腔黏膜。 而脑膜炎奈瑟菌和其他奈瑟菌和其他奈瑟菌均存在于鼻咽腔黏膜。脑膜炎 奈瑟菌有多糖成分 Taizhou University
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致病物质
菌毛 脂多糖(内毒素) IgA1蛋白酶 IgA1蛋白酶
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所致疾病
淋病
人类是淋球菌唯一的天然宿主 成人淋病绝大多数通过性接触感染,是重要的 性传播疾病( 性传播疾病(sexually transmitted disease, disease, STD) STD)
形态与染色
G- ,0.6-0.8µm 0.6肾形或豆形,成双排 列,凹面相对; 病人脑脊液(CSF) 病人脑脊液(CSF) 中典型,多位于中性 粒细胞内; 无鞭毛和芽胞;新分 离株具有荚膜和菌毛
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培养特性与生化反应
培养特性
专性需氧。营养要求高。最常用的培养基是巧 克力色培养基
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女性急性淋病患者阴道分泌物涂片(革兰染色)
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培养特性 生化反应
培养特性
需氧,营养要求高。常用的培养基为巧克力色 需氧,营养要求高。常用的培养基为巧克力色 血液琼脂平板
生化反应
除葡萄糖外,不分解其它糖类 葡萄糖外,不分解其它糖类
Gonococcus
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脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌
相似点:
生物学性状
两者关系
差异:
荚膜:有荚膜(脑),分离初期有荚膜(淋 荚膜:有荚膜(脑),分离初期有荚膜(淋) 质粒:很少有质粒(脑),有质粒(淋 质粒:很少有质粒(脑),有质粒(淋); 所致疾病:引起脑膜炎(脑 所致疾病:引起脑膜炎(脑),引起泌尿生殖 系统疾病(淋 系统疾病(淋)。 感染部位不同,标本取材部位不同
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氧化酶试验 阳性: 阳性:紫红色 阴性:无色
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脑膜炎奈瑟菌的鉴定
生化鉴定(光滑露珠样菌落) 生化鉴定(光滑露珠样菌落)
氧化酶: + 氧化酶: DNA酶: 酶 营养琼脂生长: 营养琼脂生长: 葡萄糖: + 葡萄糖: 麦芽糖: + 麦芽糖:
4.Optochin抑制试验:
抑菌环中也微弱的生长了些菌落,但经过涂片发现是口腔球菌 可 抑菌环中也微弱的生长了些菌落 但经过涂片发现是口腔球菌.可 但经过涂片发现是口腔球菌 能是做该试验的同事挑菌落的时候,没把握好 把杂菌带进去了.尽 没把握好.把杂菌带进去了 能是做该试验的同事挑菌落的时候 没把握好 把杂菌带进去了 尽 管如此,抑菌环还是非常明显而宽大 抑菌环还是非常明显而宽大(22mm). 管如此 抑菌环还是非常明显而宽大
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淋病奈瑟菌
• 生物学特性
– 形态染色:与脑膜炎奈瑟菌相似, G—,双球菌,咖啡豆 形态染色:与脑膜炎奈瑟菌相似, 双球菌, 有荚膜和菌毛,无芽胞, 状,有荚膜和菌毛,无芽胞,无鞭毛 急性病人: 脓汁标本中 急性病人:细菌位于中性粒细胞内 慢性病人: 慢性病人:细菌位于细胞外 – 培养特性:与脑膜炎奈瑟菌相似,营养要求更高,只能在 培养特性:与脑膜炎奈瑟菌相似,营养要求更高, 巧克力平板及专用培养基上生长,形成灰白色细小S型菌 巧克力平板及专用培养基上生长,形成灰白色细小 型菌 落 – 生化反应:氧化酶(+),只分解葡萄糖,不分解麦芽糖 生化反应:氧化酶( ),只分解葡萄糖, ),只分解葡萄糖 (脑膜炎奈瑟菌分解麦芽糖)等其它糖类 脑膜炎奈瑟菌分解麦芽糖) – 抗原及分类:以外膜蛋白抗原分 个血清型 抗原及分类:以外膜蛋白抗原分16个血清型 – 抵抗力:极弱(与脑膜炎奈瑟菌相似) 抵抗力:极弱(与脑膜炎奈瑟菌相似)
完全溶血 乙型链球菌 • 菌落小、半透明 、 菌落小、 丙型链球菌 表面光滑、 表面光滑、边缘整齐 不溶血 草绿色不完全溶血环 • G+ 、链状 甲型链球菌
菊糖发酵试验 胆汁溶菌试验 -(紫色) (紫色) -(混浊) (混浊)
肺炎链球菌
+(黄色) (黄色) +(澄清) (澄清)
喉拭子标本
找出两种菌落
预防淋病应取缔娼妓、防止不正当的两性 关系 新生儿1%硝酸银滴眼,或红霉素、四环素 新生儿1%硝酸银滴眼,或红霉素、四环素 眼药膏 药物首选青霉素,但多有耐药性,应用新 药物首选青霉素,但多有耐药性,应用新 型青霉素族抗生素
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脑膜炎奈瑟菌与淋病奈瑟菌比较
比较内容 形态结构 生 物 学 性 状 培养特性 生化反应 抗原 与 分类 抵抗力 致 病 性 致病物质 所致疾病 防治原则
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脑膜炎奈瑟菌
菌/败血症 鼻咽腔繁殖 中枢神经系统
主要侵犯蛛网膜
繁殖入血
暴发型脑膜炎
微循环衰竭、内毒素休克、DIC 微循环衰竭、内毒素休克、
儿童和成人的脑膜炎症状
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脑膜炎奈瑟菌( 脑膜炎奈瑟菌(N.meningitidis)
新生儿淋球菌性结膜炎
“脓漏眼”
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微生物学检查法
标本
保暖(运送时35ºC保温)、保湿、立即送检 保暖(运送时35ºC保温)、保湿、立即送检
直接涂片镜检 分离培养与鉴定
巧克力色培养基快速诊断法 ELISA法、核酸杂交、PCR技术 ELISA法、核酸杂交、PCR技术
微生物学检查法
标本 直接涂片镜检
如镜下见到中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌,即 可作出初步诊断
分离培养与鉴定
巧克力色血琼脂平板
快速诊断法
对流免疫电泳 SPA协同凝集试验 SPA协同凝集试验
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脑膜炎奈瑟菌( 脑膜炎奈瑟菌(N.meningitidis)
生面相对, 形态染色: G- ,呈肾型,成双排列(凹面相对,凸面相 ),有荚膜及菌毛 背),有荚膜及菌毛 培养特性 • 营养要求较高,血平板或巧克力平板或卵黄双抗平板, 营养要求较高,血平板或巧克力平板或卵黄双抗平板, 形成光滑透明“露滴样” 形成光滑透明“露滴样”菌落 •专性需氧,5~10%CO2,35-37℃(> ℃ < 30℃均不生 专性需氧, 专性需氧 , ℃(>40 ℃ 长)pH7.4~7.6 •易产生自溶酶 易产生自溶酶
病原性球菌的鉴别
• 由脑脊液标本中发现中性粒细胞内外有G-双球菌,可初步诊 由脑脊液标本中发现中性粒细胞内外有G 双球菌, 断为脑膜炎球菌 断为脑膜炎球菌 • 由泌尿、生殖系统来源的标本中分离出的G-双球菌,可初步 由泌尿、生殖系统来源的标本中分离出的G 双球菌, 诊断为淋球菌 诊断为淋球菌
脓汁或 喉拭子 涂片、革兰染色、镜检 涂片、革兰染色、
小结
化脓性球菌
• 革兰阳性菌:葡萄球菌,链球菌,肺炎链 革兰阳性菌:葡萄球菌,链球菌, 球菌 • 革兰阴性菌:脑膜炎奈瑟菌, 淋病奈瑟菌 革兰阴性菌:脑膜炎奈瑟菌,
staphylococcus
Streptococcus
S. pneumoniae
N.meningitidis
N. gonorrhoeae
脑膜炎奈瑟菌 G-双球菌;有荚膜、菌毛 新) 双球菌;有荚膜、菌毛(新 高营养、 露滴状、 高营养、5%CO2露滴状、自溶酶 分解葡萄糖、 分解葡萄糖、麦芽糖 同左
淋病奈瑟菌
高营养、 高营养、5%CO2 只分解葡萄糖
荚膜多糖群特异Ag外膜蛋白型特异 菌毛蛋白Ag 荚膜多糖群特异 外膜蛋白型特异Ag 菌毛蛋白 外膜蛋白型特异 脂多糖Ag 脂多糖 脂多糖Ag 脂多糖 核蛋白Ag 核蛋白 外膜蛋白Ag (PⅠ、PⅡ、PⅢ) Ⅰ 外膜蛋白 Ⅱ Ⅲ 冷、热、干燥、消毒剂均敏感 干燥、 荚膜、菌毛、 荚膜、菌毛、内毒素 流行性脑脊膜炎 荚膜多糖疫苗 同左 荚膜、菌毛、外膜蛋白、 荚膜、菌毛、外膜蛋白、 IgA1 淋病 洁身自好
Gram染色 染色
微生物检验
痰培养肺炎链球菌检验全程报道
姚军
1.痰涂片(肺炎链球菌镜下):
1.痰涂片(肺炎链球菌镜下):
2.原始培养物18h后菌落(肺炎链球菌菌落):
2.原始培养物18h后菌落(肺炎链球菌菌落):
3.传代后的纯培养物:
3.传代后的纯培养物:
传代后的菌落直径较首代有些缩小了,菌落湿润程度也有些降低 但仍然很 传代后的菌落直径较首代有些缩小了 菌落湿润程度也有些降低,但仍然很 菌落湿润程度也有些降低
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与脑膜炎奈瑟菌相似,营养要求更高,只能在巧 克力平板及专用培养基上生长,形成灰白色细小S 型呈滴露样菌落
主要菌体表面抗原构造
菌毛
与粘附有关,免疫原性不强
脂多糖抗原
经常变异,相应抗体不能防止再感染
外膜蛋白
PI:主要外膜蛋白,将淋病奈瑟菌分为18个血清型 PI:主要外膜蛋白,将淋病奈瑟菌分为18个血清型 PII:吸附易感细菌的蛋白 PII:吸附易感细菌的蛋白
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