国产重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)

剂型
10μg/0.5ml/支 20μg/1.0ml/支 20μg/1.0ml/支 20μg/1.0ml/支 60μg/1.0ml/支 20μg/支 20μg/ml 20μg/1.0ml/支
益可欣
葛兰素史克 北京科兴
联合疫苗
HA 500 EI.U.+ HB 10mg/1ml HA 720 EI.U.+ HB 20mg/1.0ml
国产重组乙型肝炎疫苗 （CHO细胞）
1
什么是乙型肝炎？
是一种由乙型肝炎病毒（HBV）感染机 体后所引起的疾病。 乙型肝炎病毒是一种嗜肝病毒，主要存 在于肝细胞内并损害肝细胞，引起肝细 胞炎症、坏死、纤维化。 乙型病毒性肝炎分急性和慢性两种。
急性乙型肝炎在成年人中90%可自愈，而慢性 乙型肝炎表现不一，分为慢性乙肝携带者、慢 性活动性乙型肝炎、乙肝肝硬化等。 我国目前乙肝病毒携带率为7.18%，其中约三 分之一有反复肝损害，表现为活动性的乙型肝 炎或者肝硬化。随着乙肝疫苗的推广应用，我 国乙肝病毒感染率逐年下降，5岁以下儿童的 HBsAg携带率仅为0.96%。(2006年我国进行的 乙型肝炎流行病毒调查结果 )
----《中国计划免疫》，2007年2月
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华北疫苗与其它CHO疫苗的区别
1、质量标准最高。
• 原液纯度达到99%以上； • 效力>1.2 • 有效期3年
2、连续生产、自动化水平高。 3、生产规模大，产量高。 4、扩免经验丰富。
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现有的国产及进口基因重组乙肝疫苗
生产单位
大连汉信 天坛生物 国内 华药金坦 深圳康泰 北京华尔盾 进口
疫苗名称(种类)
重组乙肝苗（汉逊酵母） 重组乙肝苗（酿酒酵母） 重组乙肝苗（CHO） 重组乙肝苗（酿酒酵母） 重组乙肝苗（CHO） 重组乙肝苗（汉逊酵母） 重组乙肝苗（酿酒酵母） 倍尔来福 10μg/0.5ml/支 5μg/0.5ml/支 10μg/1.0ml/支 10μg/0.5ml/支 10μg/0.5ml/支 5μg/0.5ml/支 10μg/支 10μg/0.5ml/支 10μg/0.5ml/支
表达，结构均一，抗原决定簇 与天然抗原相似，免疫原性高 抗原结构松散，影响其免疫原性。
糖基化完全，稳定性高，产
品25℃放置3月后，效力仍然 很高
抗体维持时间短 产品无糖基化，稳定性较差 有人群限制，使用不便
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全人群应用
快----产生抗体时间快
中国药品生物制品检定所检测，CHO疫 苗第一针注射完平均第8天产生抗体。
陈胤忠，江苏省盐城市CDC，《基因重组乙型肝炎疫苗用于成人的免疫程序和接种剂量的研究》， 《中国计划免疫》2005.2 结果：高剂量疫苗组抗一HBsGMT和抗体高滴度分布比例均高于低剂量疫苗组；重组(CHO细胞) 乙肝疫苗抗一HBsGMT高于重组(酵母)乙肝疫苗，重组(CHO细胞)乙肝疫苗10ug诱导的抗一HBs GMT显著优于10ug重组(酶母)乙肝疫苗。 结论:对成人开展乙肝疫苗接种应选择高剂量的乙肝疫苗，建议选用20ug重组(CHO细胞)乙肝 疫苗．并优先选择0、1、6个月免疫程序。 12 华北制药—金坦生物
酵母疫苗：Engerix-B(史克)、Recombivac-B（merck） 汉逊酵母：莱茵、Hepavax-Gene(绿十字韩)、 GeneVac B(印度), 毕赤酵母：Shanvac B (印度)、 Enivax-HB(印度), Euvax(LG韩国) CHO细胞：Bio-hep-B（以色列）, Genhevac-B（法国）, Hepacare(英国), Sci-B-vac(澳大利亚、香港、以色列) 默克2004年已经改为生产CHO疫苗。
乙肝治疗新技术
三大肝病突破性技术先后研发成功。最早的是日本中 微子透析技术；紧随其后，德国O3技术也震撼性问世 ；2011年末，我国上海复旦大学研究的治疗性疫苗（ 乙克）也宣告三期临床试验效果显著。
复旦新闻文化网 http://www.fudan.edu.cn/fudannews/2011/1115/29282.html
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北京疾控中心做的观察
华北制药CHO20-10-10
大连汉逊酵母10-10-10
深圳康泰酵母10-5-5
北京天坛酵母10-5-5 在大学新生当中做的观察，华北CHO疫苗阳转 率最高，达到98.7%。
全国肝炎疫苗研究及应用经验交流会、 《中国计划免疫》2007.8
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1、天坛 2、康泰 3、大连 4、华北
目前乙肝疫苗接种的问题
1、低无应答率高，情况普遍，10-15%接 种疫苗后无应答。 2、保护时间短，新生儿接种5微克3年后 抗体阳性率约30%。 3、成人应用剂量低。
4、母婴阻断没有正确处理。
8
乙肝疫苗预防接种常见的问题
不同剂量乙肝疫苗母婴阻断效果
疫苗 剂量 母亲单阳性 调查 人数 阳性 人数 阳性率 （％） 调查 人数 母亲双阳性 阳性 人数 阳性率 （％）
什么是重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)？
采用基因工程技术将无传染性的乙肝病毒表面 抗原(HBsAg)的 S基因片段克隆到载体，用 重组载体转染真核生物CHO细胞通 过细胞培 养、增殖、分泌出HBsAg到培养液中，收集分 泌液， 经高速离心、纯化、除菌后，加人佐 剂吸附(氢氧化铝)而制成
CHO—中华仓鼠卵巢细胞
10 20 25 30 35 40 45
2006年调查结果表明，我国1-59人群乙肝表面抗原携带率 为7.18%，5岁以下儿童的HBsAg携带率仅为0.96%
55
Hale Waihona Puke Baidu
5
0
年龄（岁）
1992年 2006年
4
2011年全国报告发病/死亡前10位病种
位次
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 发病 病种 发病数 乙肝 1093335 肺结核 其它感染性腹泻病 流行性腮腺炎 梅 毒 痢 疾 丙肝 淋 病 流行性感冒 953275 836591 454385 395182 237930 173872 97954 66133 手足口病 1619706 死亡 病种 艾滋病 肺结核 狂 犬 病 乙肝 手足口病 丙肝 出 血 热 梅 毒 甲型H1N1流感 乙脑 死亡数 9224 2840 1879 637 509 125 119 75 75 63 病死率(%) 病种 鼠 疫 人禽流感 狂 犬 病 艾滋病 流 脑 新生儿破伤风 脊 灰 乙脑 钩 体 病 出 血 热 病死率 100.00 100.00 98.02 45.11 10.96 6.62 5.00 3.88 1.26 1.10
无应答标准：<10mIU/ml
低应答标准：10～100mIU/ml
（X2=50.91 P<0.01）
郑徽,王富珍,陈园生，等.新生儿接种重组乙型肝炎疫苗（酵母）后低、无应答率及影响因素 中国计划免疫,2007;13(4):303-305. WHO, Hepatitis B position paper.
6
不同种类疫苗抗体滴度比较
250
200
150
100
50
0
(mIU/ml) GMT 酵母5ug 酵母10ug 华北CHO10ug 华北CHO20ug T1 48.15 67.91 85.23 201.08 (mIU/ml) GMT T3 33.36 35.28 68.17 167.43 (mIU/ml) GMT T6 23.51 39.97 47.31 81.81
Chinese hamster ovary cell
1、 工程细胞 2、国外75%以上基因工程药品由哺乳动 物细胞表达,我国寥寥无几（仅有乙肝疫 苗、重组人红细胞生成素两个产品） 3、产品活性高 4、技术门槛高
中国生物工程杂志 2005，25（2）
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《药典》及《预防接种工作规范》
收录品种，明确指明的常用疫苗：
汉逊酵母疫苗第一针后平均第25天后产 生抗体。 CHO 天
8
汉逊酵母
25天
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----中国药品生物制品检定所十一五课题
产生抗体滴度高
CHO疫苗 酵母疫苗
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CHO疫苗的持久性
数据：中国CDC病毒所在河北正定的观察 剂量：10 μg 人群：新生儿 免疫8年后，抗体阳性率85.76%，抗体水 平在18.47mIU/ml以上。
CHO乙肝疫苗 啤 酒 酵 母乙肝疫苗
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CHO乙肝疫苗的优势
CHO苗特性 酵母苗特性
重组CHO细胞乙肝疫苗技术为 酵母技术系美国默克公司技术
我国专有技术，国家Ⅰ类新药 型的HBsAg基因，针对性更强 转让。
用我国乙肝病毒流行株adr亚 流行株为adw亚型 由哺乳动物细胞（CHO细胞） 低等的真核细胞酵母菌表达，
高剂量疫苗是主流疫苗
中华医学会肝病学分会、中华医学会感 染病学分会联合制订《慢性乙型肝炎防 治指南》（2010版）建议：


对成人建议接种20μg CHO或20μg 重组酵母 乙型肝炎疫苗。 对免疫功能低下或无应答者，应增加疫苗的 接种剂量和针次；对3 针免疫程序无应答者 可再接种3 针，并于第2 次接种3 针乙型肝 炎疫苗后1~2个月检测血清中抗-HBs。
乙肝为何难治?
乙肝病毒两层结构，外包一层致密坚硬的蛋白质外壳，专门抵御药物对 他的作用，药物对他根本无可奈何； 病毒隐匿在肝细胞里面复制，药物分子比肝细胞还大，根本无法进入到 肝细胞里面，进而也不可能对病毒有丝毫的作用； 病毒有一个复制模块，存在于细胞核中，专门诱导病毒高速复制繁殖， 药物分子连细胞都无法进入，更无法进入到细胞核中； 病毒会变性、变异。药物一接近它它就会迅速的改变结构和特性，从而 让药物无法捕捉到他，逃避掉药物对它的作用； 久之病毒会与人体基因长生链接，此时任何药物都无法做到切除，必需 借助其它高科技医学手段； 病毒生命周期是90天，附着药物分子没有那么久的吞杀效力，一般都会 被人体快速消化掉，所以杀灭病毒根本无从谈起。
1992年与2006年HBsAg阳性率比较
14 12
HBsAg阳性率（％）
2010年湖北省CDC在2个市的3个县人群中开展乙肝血清学监 测，共监测人群700人,HBsAg阳性率为2.14%； 0～4岁为 0.67%,15岁以上为5.00%,15～19岁最高,为7.00%
10 8
6 4
2 0
15 50
20
葛兰素史克
到目前为止，有两种规模化生产的基因 工程乙肝疫苗：

一种是CHO细胞表达的 一种是酵母细胞表达的
同重组乙肝疫苗(酵母)相比，重组乙肝疫苗(CHO细胞) 具有如下特点:CHO细胞表达的重组HepB是高等真核细胞 表达产物，其天然结构较低等的真核细胞酵母表达的 HBsAg蛋白更适合人体吸收，生产过程中不同于酵母使用 硫氰酸盐处理，安全性好
华北制药—金坦生物 9
9
结论:1、接种10ugX3重组HepB(酵母)阻断 HBV母婴传播的效果优于5ugX3重组HepB(酵 母)。 2、对于母亲HBsAg阳性儿童，特别是 母亲HBsAg和HBeAg双阳性的儿童，主动免疫 时采用10ugX3的重组HepB(酵母)为宜。
10
不同免疫剂量低、无应答率比较
10g3
5g3 合 计
171
259 430
2
33 35
1.17
12.74 8.14
90
61 151
4
23 27
4.44
37.70 17.88
X2=23.032,P<0.001
（X2=32.616,P<0.001）
崔富强 王富珍 郑徽，接种不同剂量重组乙型肝炎疫苗（酵母）阻断乙型肝炎病毒母婴 传播的评价，中国计划免疫.2007,13(4).-289-292
根据生产系统：（酵母、CHO细胞）
啤酒酵母乙肝疫苗（酿酒酵母、酵母） 汉逊酵母乙肝疫苗 毕赤酵母乙肝疫苗 CHO细胞乙肝疫苗
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乙肝疫苗的种类
3、含前S蛋白的乙肝疫苗

目前临床上应用的血源性疫苗与基因工程疫 苗，均只含HBsAg蛋白，当证实S蛋白能增 强HBsAg的免疫应答后，又注意到单纯只含 HBsAg蛋白的疫苗对血液透析病人与新生儿 免疫效果较差时，遂生产出添加前S蛋白的 酵母源性重组乙肝疫苗，它确能明显地增强 免疫应答。
全国肝炎疫苗研究及应用经验交流会、 《中国计划免疫》2007.8
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由此可见
剂量越高，抗体滴度越高。 相同剂量，产生抗体滴度相近。
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乙肝疫苗的种类
1、血源乙肝疫苗—用无症状的HBsAg携带者的血液制成 2、基因工程乙肝疫苗—利用基因工程研制重组DNA乙肝
疫苗，曾先后研制过大肠杆菌系统、啤酒酵母细胞系统、哺乳动 物细胞系统和牛痘病毒系统的重组乙肝疫苗。