国产重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)
重组酵母乙肝疫苗产品介绍
➢ 流行病学部分 增加2006年全国乙肝血清流行病学调查结果 ➢ 预防部分 乙肝疫苗接种对象：增加15岁以下儿童补种 无应答者处理：增加60 μ g乙肝疫苗接种 增加入学和就业体检不检测HBV标志物；乙肝疫
苗免疫前可以不筛查HBV标志物
中华医学会肝病学分会，中华医学会感染病学分会。中国病毒病杂志，2011,1:9-23
Hale Waihona Puke 问题？谢谢！试验设计总体思路
▪ 筛查4~5万表面抗原阴性并未接种乙肝疫苗的成人
▪ 用金标法现场筛查出表面抗原阴性者约3万人
▪ 用10ug乙肝疫苗进行三针全程接种 ▪ 筛查10ug乙肝疫苗全程接种后的无/弱应答者
▪ 在10ug乙肝疫苗全程接种后1个月用金标法现场筛查表面抗 体，估计金标法现场筛查表面抗体 2~3万人；对初筛表面抗 体阴性者约5千人采集静脉血用放免定量表面抗体检测法确 证其表面抗体达不到保护性水平（未产生抗-HBs或抗体滴 度<10mIU/ml），即无/弱应答者
60μg/1.0ml/支
10μg/支 20μg/支 10μg/0.5ml/支 20μg/ml 10μg/0.5ml/支 20μg/1.0ml/支
不同剂量乙肝疫苗接种成人后阳转率比较
第1针 第2针 第3针
60μg
30μg
10μg
83.26 （358/430）
89.53 （385/430）
92.79 （399/430）
背景资料
乙肝疫苗
儿童
1992年纳入新生儿 计划免疫，2002 年调查显示3～12 岁儿童HBsAg阳性 率2.07%，较1992 年7.12%下降了 70.93%
成人
计划免疫外人群 1992～1995年全 国病毒性肝炎血清 流行病学调查表明， 一般人群 HBsAg 阳性率为9.7 %
重组乙型肝炎疫苗 华北金坦
重组乙型肝炎疫苗（CHO细胞）【药品名称】通用名称：重组乙型肝炎疫苗（CHO细胞）英文名称：Hepatitis B Vaccine Made by Recombinant DNA Techniques in CHO Cell 汉语拼音：Chongzu Yixing Ganyan Yimiao(CHO xibao)【成分和性状】本品系由重组CHO细胞表达的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）经纯化，加入氢氧化铝佐剂制成。
为乳白色悬浊液体，可因沉淀而分层，易摇散，含硫柳汞防腐剂。
【接种对象】本疫苗适用于乙型肝炎易感者，尤其是下列人员：（1）新生儿，特别是母亲为HBsAg、HBeAg阳性者。
（2）从事医疗工作的医护人员及接触血液的实验人员。
【作用与用途】接种本疫苗后，可使肌体产生抗乙型肝炎病毒的免疫力。
用于预防乙型肝炎。
【规格】每瓶0.5ml、1.0ml。
每1次人用剂量0.5ml（含HBsAg10ug）或1.0ml（含HBsAg10ug 或20ug）。
【免疫程序和剂量】（1）于上臂三角肌肌内注射。
（2）基础免疫程序为3针，分别在第0个月、第1个月、第6个月接种，新生儿第1针在出生24小时内注射。
一般易感者使用10ug/瓶，母婴阻断的新生儿使用20ug/瓶。
【不良反应】个别人可有注射局部疼痛、红肿或中、低度发热，一般不需特殊处理，可自行缓解，必要时可对症治疗。
【禁忌】（1）发热、患急性或慢性严重疾病者（2）过敏体质者。
【注意事项】（1）注射前应充分摇匀。
（2）疫苗有摇不散的块状物或疫苗瓶有裂纹者，不得使用。
（3）应备有肾上腺素等药物，以备偶有发生严重过敏反应时急救用。
接受注射者在注射后应在现场休息片刻。
（4）严禁冻结。
【储藏】于2~8℃避光保存和运输【包装】安瓿：0.5ml：10ug，3支/盒1.0ml：10ug，3支/盒1.0ml：20ug，2支/盒、3支/盒西林瓶：0.5ml：10ug，1支/盒、3支/盒1.0ml：10ug，1支/盒、3支/盒1.0ml：20ug，1支/盒、3支/盒【有效期】36个月【执行标准】《中国药典》2005年版三部【批准文号】0.5ml：10ug，国药准字S2*******；1.0ml：10ug，国药准字S2*******；1.0ml：20ug，国药准字S2*******；【生产企业】企业名称：华北制药金坦生物技术股份有限公司。
重组cho细胞乙肝疫苗生产流程
重组cho细胞乙肝疫苗生产流程英文回答：Recombinant hepatitis B vaccine production process involves several steps. First, a genetically engineered yeast cell line is used to produce the hepatitis B surface antigen (HBsAg), which is the main component of the vaccine. The yeast cells are modified to express the gene encoding HBsAg, and then they are grown in large fermentation tanks under controlled conditions.During the fermentation process, the yeast cellsmultiply and produce HBsAg. The culture is then harvested, and the cells are removed by centrifugation or filtration. The resulting HBsAg-containing solution is purified using various techniques such as chromatography andultrafiltration to remove impurities and other cellular components.Once purified, the HBsAg is formulated into the finalvaccine product. This may involve the addition of adjuvants, preservatives, and stabilizers to enhance the vaccine's effectiveness and shelf life. The final vaccine product is then filled into vials or syringes, and undergoes quality control testing to ensure its safety, potency, and purity.The production process of recombinant hepatitis B vaccine is highly regulated and follows strict quality control measures to ensure the safety and efficacy of the vaccine. The entire process, from the initial genetic engineering of the yeast cells to the final formulation and packaging of the vaccine, is carried out in a controlledand sterile environment to prevent contamination and maintain product integrity.中文回答：重组乙肝疫苗的生产流程涉及多个步骤。
重组cho细胞乙肝疫苗生产流程
重组cho细胞乙肝疫苗生产流程英文回答：Recombinant CHO Cell-based Hepatitis B Vaccine Production Process.The recombinant CHO cell-based hepatitis B vaccine production process involves the following steps:1. Cloning of the Hepatitis B Virus (HBV) Gene:The HBV gene encoding the surface antigen (HBsAg) is cloned into a plasmid vector.2. Transfection of CHO Cells:The plasmid vector containing the HBV gene is transfected into CHO cells.3. Selection of Stable Transfectants:Transfected cells that stably express HBsAg are selected using a selective marker, such as resistance to antibiotics.4. Large-Scale Culturing:Stable transfectants are cultured in bioreactors to produce large quantities of HBsAg.5. Purification:HBsAg is purified from the culture supernatant using various purification techniques, such as chromatography and filtration.6. Formulation:Purified HBsAg is formulated with adjuvants and other excipients to enhance immunogenicity and stability.7. Quality Control:The final vaccine product undergoes extensive quality control testing to ensure safety, purity, and potency.Advantages:High yield of HBsAg production.Consistent product quality.Scalability for large-scale production.Improved safety profile compared to plasma-derived vaccines.中文回答：重组cho细胞乙肝疫苗生产流程。
cho重组乙肝疫苗制作原理
cho重组乙肝疫苗制作原理宝子们，今天咱们来唠唠cho重组乙肝疫苗这个超厉害的东西的制作原理呀。
咱先得知道乙肝是个啥玩意儿，乙肝病毒可坏啦，它要是跑到咱身体里，就可能让咱肝脏生病呢。
所以呀，科学家们就想办法来预防这个坏家伙，这就有了乙肝疫苗。
那cho重组乙肝疫苗是怎么来的呢？这里面可有着很有趣的科学故事哦。
这个疫苗的制作呀，得从一种细胞说起，就是中国仓鼠卵巢（cho）细胞啦。
这细胞就像是一个小小的工厂呢。
科学家们先把乙肝病毒表面抗原的基因给找出来。
这基因就像是一个密码，它藏着能让身体识别乙肝病毒的关键信息。
然后呢，就像变魔术一样，把这个基因放到cho细胞里。
这就好比把一个特殊的生产配方给了这个小工厂。
这个cho细胞可聪明啦，它拿到这个基因之后呀，就开始按照这个基因里的指示来生产东西。
它生产的就是乙肝病毒表面抗原啦。
这个抗原就像是乙肝病毒的一个小标签，身体的免疫系统只要看到这个小标签，就知道乙肝病毒是个坏家伙啦。
这个生产的过程也不是一下子就完成的呢。
cho细胞要在合适的环境里慢慢悠悠地把这个抗原生产出来。
就像我们做手工一样，得一步一步来，不能着急。
它需要合适的温度、营养啥的。
比如说，就像我们人要吃饭才能有力气干活一样，cho细胞也得有各种营养物质来支撑它生产这个抗原。
等cho细胞生产出足够多的乙肝病毒表面抗原之后呢，就要把这个抗原从细胞里分离出来。
这就像是从工厂的产品里挑选出合格的产品一样。
科学家们会用各种高科技的方法，把这个抗原单独拿出来，然后进行一系列的处理。
处理之后呀，这个抗原就变得更纯净、更安全啦。
然后呢，再把这个抗原和一些其他的东西混合起来，做成疫苗。
这些其他的东西呢，有的是为了让疫苗更稳定，就像给宝贝东西加个保护罩一样；有的是为了让我们的身体更容易接受这个疫苗，就像给它穿上一件友好的外衣。
当我们把这个cho重组乙肝疫苗打到身体里的时候呀，身体里的免疫系统就像一群小卫士一样。
它们看到这个乙肝病毒表面抗原这个小标签，就开始警惕起来啦。
重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞) 华北金坦
重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)【药品名称】通用名称：重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)英文名称：Diagnostic Kit for Hepatitis B e Antigen(ELISA)【成份】本品系由重组CHO细胞表达的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)，经纯化加佐剂吸附后制成，用于预防乙型肝炎。
疫苗有轻微乳白色沉淀。
【适应证】本疫苗接种后，可刺激机体产生抗乙型肝炎病毒的免疫力，用于预防乙型肝炎。
【用法用量】1.一般新生儿、儿童、成年人接种乙肝疫苗10微克/支，按0、1.6月免疫，三角肌肌内注射。
2.高危人群，尤其是HBsAg阳性母亲的新生儿接种乙肝疫苗20微克/支，按0、1.6月免疫，三角肌肌内注射。
3.HBsAg和HBeAg阳性母亲的新生儿联合使用HBIG与乙肝疫苗20微克/支。
即在出生后6小时内，肌内注射1支HBIG(100IU/毫升)，2-4周后开始注射第一针乙肝疫苗，第二、三针间隔与一般新生儿相同。
【不良反应】乙肝疫苗应用已近20年，尚未见到有严重的不良反应，极个别人接种后可能会出现中、低度发热，或注射局部有轻微胀痛等，一般在24小时内即自行消失。
【禁忌】对发热、患有严重急、慢性疾病和有严重过敏史者暂时都不要接种乙肝疫苗。
【注意事项】1.接种乙肝疫苗前安瓿一定要充分摇匀，如发现安瓿有破裂、疫苗变质或有摇不散的团块时，不能使用。
2.每一接种对象必须使用单独的注射器，防止交叉感染。
【药理作用】CHO(中国仓鼠卵巢细胞)细菌产的乙肝基因工程疫苗是将编码乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的基因插入适当载体，重组到CHO细胞内，表达出HBsAg经纯化和添加佐剂制备出的疫苗。
CHO细胞属哺乳动物细胞类，它是基因工程表达系统中最高等的宿生细胞，其表达产物更接近于天然产品。
【贮藏】于2~8℃避光保存，严防冻结。
【批准文号】国药准字S2*******【生产企业】企业名称：华北制药金坦生物技术股份有限公司。
两种剂量重组酵母乙肝疫苗免疫接种效果比较
两种剂量重组酵母乙肝疫苗免疫接种效果比较目的比较儿童接种5 μg、10 μg两种不同剂量重组酵母乙肝疫苗的免疫效果，为儿童乙肝疫苗免疫方案的制定提供参考依据。
方法选择笔者所在医院乙肝疫苗接种婴幼儿为观察对象，将200名儿童分组以5 μg组、10 μg组两种剂量，按照0-1-6免疫程序接种重组酵母乙肝疫苗，于首次免疫后的第7个月检测血清抗-HBs(HBsAb)阳性率和抗体HBsAb效价。
结果5 μg组、10 μg组血清抗-HBs阳性率分别为90.0%,97.5%，两组间无显著性差异；两组效价组间比较有显著性差异，10 μg组血清抗-HBs效价明显高于5 μg组。
结论接种较大剂量(10 μg)的乙肝疫苗后，抗HBs阳性率高且抗体效价也高，有效保护时间会更长。
标签：计划免疫；酵母乙肝疫苗；抗体测定病毒性乙型肝炎的治疗至今没有理想的抗病毒药物，乙型肝炎的预防和控制关键依靠接种乙型肝炎疫苗。
目前，我国研制开发的基因工程疫苗主要有两种：重组酵母乙型肝炎疫苗和重组（中国仓鼠卵巢细胞，CHO细胞）乙肝疫苗。
我国儿童疫苗接种常采取0-1-6免疫程序，重组酵母乙型肝炎疫苗的常用剂量为5 μg/（0.5 ml·支），而重组（CHO细胞）乙肝疫苗的常用剂量为10 μg/（0.5 ml·支）。
本组研究主要观察两种不同剂量重组酵母乙肝疫苗抗体阳性率和抗体的效价。
1资料与方法1.1一般资料选择笔者所在医院母亲体检HBsAg阴性的小儿为接种重组酵母乙肝疫苗的观察对象，将200名儿童按0-1-6免疫程序，分别以5 μg/（0.5 ml·支）和10 μg/（0.5 ml·支）两种不同剂量分组接种重组酵母乙肝疫苗，于首次免疫后的第7个月检测血清抗-HBs(HBsAb)阳性率和抗体HBsAb。
1.2疫苗与接种按第0个月、第1个月、第6个月为接种时间点，于上臂三角肌肌肉注射接种。
1.3抗体检测方法采用固相放射免疫试剂,检测抗HBs，以HBsAb效价(GMT)大于1 IU/L计为阳性，HBsAb效价(GMT)大于10 IU/L为血清有保护作用。
重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)研究概述
重组乙型肝炎疫苗（CHO细胞）研究概述作者：曹洋洋来源：《世界家苑·学术》2017年第07期摘要：全世界目前有慢性乙肝病毒感染3.5亿人，我国目前有慢性乙肝病毒感染1.3亿人，慢性乙肝病毒感染严重威胁着人类健康。
慢性乙肝病毒持续感染会发展为慢性肝炎、肝硬化、肝癌，故积极防治慢性乙肝病毒感染非常重要。
重组[中国仓鼠卵母细胞（（CHO细胞）乙肝疫苗]是采用基因工程技术将无传染性的乙肝病毒表面抗原（HBsAg）的s基因片段克隆到载体，用重组载体转染真核生物CHO细胞，通过细胞培养、增殖、分泌出HBs旭到培养液中，收集分泌液，经高速离心、纯化、除菌后，加入佐剂吸附（氢氧化铝）而制成。
提取总的核酸RNA，逆转录成cDNA，利用特异l性引物扩增出轻重链Fd片段，成功构建人源抗乙肝病毒表面抗原基因工程抗体文库。
富集筛选，通过ELISA功能分析和序列测定，选择有较高的亲和力的抗体。
关键词：乙肝；CHO；基因重组；抗体1.背景介绍乙型肝炎病毒（HBV）属嗜肝DNA病毒科正嗜肝DNA病毒属，HBV感染严重威胁人类生命健康，HBV感染在我国是一个严重的公共卫生问题。
接种乙肝疫苗对预防乙肝病毒感染，控制乙肝病毒传播具有重要意义。
在HBsAg的两种表达系统中，利用CHO细胞表达的乙肝表面抗原具有免疫原性强，阳转率高的优点，但产量低是目前遇到的主要问题。
1.1乙肝病毒基因组结构HBV基因组是一部分双链DNA分子，由约3200个碱基对组成。
HBV的DNA双链中，短链称为正链，长度可变。
两条链5’端开始的250个核普酸交错排列，其碱基互补配对，故HBV DNA可保持环形。
HBV基因结构1.2乙肝病毒的分子生物学性质完整的HBV颗粒，即Dane颗粒，直径为42nm，由外膜和核衣壳组成。
外膜由HBsAg组成，后者含有一个环状的部分双链DNA分子，DNA多聚酶（P蛋白），DNA结合蛋白（C蛋白），及蛋白激酶（X蛋白）等。
1.3 CHO细胞表达系统蛋白质在合成过程中往往要经过翻译后的加工和修饰，才能成为有活性的蛋白质。
乙肝疫苗接种剂量标准
乙肝疫苗接种剂量标准乙肝疫苗是用于预防乙型肝炎的疫苗，其接种剂量标准对于确保疫苗的有效性和安全性至关重要。
以下是关于乙肝疫苗接种剂量标准的详细介绍。
一、乙肝疫苗种类及剂量目前，乙肝疫苗主要分为三种类型：重组乙型肝炎疫苗（酵母型和CHO细胞）、重组乙型肝炎疫苗（汉逊酵母表达），以及重组乙型肝炎疫苗（哺乳动物表达）。
每种疫苗的接种剂量可能存在差异，因此在实际接种前，需确保了解所使用疫苗的剂量标准。
二、乙肝疫苗接种剂量标准1.重组乙型肝炎疫苗（酵母型）：该疫苗适用于儿童及成人，通常需要接种三剂。
在接种第一剂时，儿童和成人分别使用5μg和20μg的剂量；第二剂在第一剂接种后1个月进行，剂量与第一剂相同；第三剂在第二剂接种后5-8个月进行。
对于某些免疫功能低下的人群，可能需要增加接种剂量。
2.重组乙型肝炎疫苗（CHO细胞）：该疫苗适用于儿童及成人，也需要接种三剂。
在接种第一剂时，儿童和成人分别使用10μg和20μg的剂量；第二剂在第一剂接种后1个月进行，剂量与第一剂相同；第三剂在第二剂接种后6个月进行。
同样，对于某些免疫功能低下的人群，可能需要增加接种剂量。
3.重组乙型肝炎疫苗（汉逊酵母表达）：该疫苗适用于儿童及成人，需要接种两剂。
在接种第一剂时，儿童和成人分别使用10μg和20μg的剂量；第二剂在第一剂接种后6个月进行，剂量与第一剂相同。
对于某些免疫功能低下的人群，可能需要增加接种剂量。
4.重组乙型肝炎疫苗（哺乳动物表达）：该疫苗适用于儿童及成人，需要接种三剂。
在接种第一剂时，儿童和成人分别使用10μg和20μg的剂量；第二剂在第一剂接种后1个月进行，剂量与第一剂相同；第三剂在第二剂接种后6个月进行。
同样，对于某些免疫功能低下的人群，可能需要增加接种剂量。
三、注意事项1.在接种乙肝疫苗前，应了解自己的乙肝病毒感染情况。
如果已经感染乙肝病毒，则无需接种疫苗。
2.在接种乙肝疫苗期间，应避免接触已知的乙肝病毒感染者或血液制品。
2024年重组乙型肝炎疫苗市场规模分析
2024年重组乙型肝炎疫苗市场规模分析1. 引言重组乙型肝炎疫苗是一种预防乙型肝炎感染的疫苗，通过对乙型肝炎病毒表面抗原的重组技术制备而成。
乙型肝炎是一种全球范围内的重要公共卫生问题，对人类健康造成了严重威胁。
重组乙型肝炎疫苗的研发与推广应用为乙型肝炎的控制与预防做出了重要贡献。
本文将对重组乙型肝炎疫苗市场规模进行分析。
2. 重组乙型肝炎疫苗的检测重组乙型肝炎疫苗的市场规模分析首先需要了解其检测方法和标准。
通常情况下，重组乙型肝炎疫苗的检测主要包括疫苗有效成分的测定和质量控制两个方面。
其中，疫苗有效成分的测定主要通过流式细胞术和免疫印迹等技术手段进行，以确保疫苗的有效性。
质量控制则包括比重法、氨基酸测定等多种方法，以确保疫苗的无菌和纯度。
3. 重组乙型肝炎疫苗市场规模根据市场调查数据统计，自重组乙型肝炎疫苗推出以来，其市场需求逐年增长。
重组乙型肝炎疫苗的市场规模可从以下几个方面进行分析。
3.1 全球市场规模按照地域划分，重组乙型肝炎疫苗在全球范围内的市场规模呈逐年增长趋势。
根据统计数据，自2015年至今，重组乙型肝炎疫苗市场每年增长率稳定在10%左右。
预计未来几年，随着乙型肝炎疫苗接种率的提高和国际合作的增加，市场规模将继续扩大。
3.2 中国市场规模中国作为世界人口最多的国家之一，乙型肝炎的发病率较高，因此，重组乙型肝炎疫苗在中国市场的需求量很大。
根据数据分析，中国市场是全球重组乙型肝炎疫苗市场的最大消费市场之一，占据了全球市场规模的30%左右。
随着中国国民健康意识的提高以及国家对乙型肝炎疫苗接种的推广力度增加，市场规模有望进一步扩大。
3.3 市场竞争格局重组乙型肝炎疫苗市场存在较强的竞争力。
目前，国内外众多制药企业都参与了重组乙型肝炎疫苗市场的竞争。
主要的市场竞争者包括默沙东、瓦蓝斯、克尔维和中国生物制药等。
针对市场竞争的情况，各家企业不断加大研发力度，提升产品质量以及推广力度，以在市场中获得更大的份额。
重组乙型肝炎疫苗(乙肝疫苗,HepB)使用说明
重组乙型肝炎疫苗(乙肝疫苗，HepB)使用说明(一)免疫程序与接种方法1.接种对象及剂次：按“0-1-6个月”程序共接种3剂次，其中第1剂在新生儿出生后24小时内接种，第2剂在1月龄时接种，第3剂在6月龄时接种。
2.接种途径：肌内注射。
3.接种剂量：①重组(酵母)HepB：每剂次10μg，无论产妇乙肝病毒表面抗原(HBsAg)阳性或阴性，新生儿均接种10μg的HepB。
②重组[中国仓鼠卵巢(CHO)细胞]HepB：每剂次10μg或20μg，HBsAg阴性产妇所生新生儿接种10μg的HepB，HBsAg阳性产妇所生新生儿接种20μg的HepB。
(二)其他事项1.在医院分娩的新生儿由出生的医院接种第1剂HepB，由辖区接种单位完成后续剂次接种。
未在医院分娩的新生儿由辖区接种单位全程接种HepB。
2.HBsAg阳性产妇所生新生儿，可按医嘱肌内注射100国际单位乙肝免疫球蛋白(HBIG)，同时在不同(肢体)部位接种第1剂HepB。
HepB、HBIG和卡介苗(BCG)可在不同部位同时接种。
3.HBsAg阳性或不详产妇所生新生儿建议在出生后12小时内尽早接种第1剂HepB；HBsAg阳性或不详产妇所生新生儿体重小于2000g者，也应在出生后尽早接种第1剂HepB，并在婴儿满1月龄、2月龄、7月龄时按程序再完成3剂次HepB接种。
4.危重症新生儿，如极低出生体重儿(出生体重小于1500g 者)、严重出生缺陷、重度窒息、呼吸窘迫综合征等，应在生命体征平稳后尽早接种第1剂HepB。
5.母亲为HBsAg阳性的儿童接种最后一剂HepB后1-2个月进行HBsAg和乙肝病毒表面抗体(抗-HBs)检测，若发现HBsAg阴性、抗-HBs阴性或小于10mIU/ml，可再按程序免费接种3剂次HepB。
(三)补种原则1.若出生24小时内未及时接种，应尽早接种。
2.对于未完成全程免疫程序者，需尽早补种，补齐未接种剂次。
3.第2剂与第1剂间隔应不小于28天，第3剂与第2剂间隔应不小于60天，第3剂与第1剂间隔不小于4个月。
重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)
重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)Chongzu Yixing Ganyan Yimiao(CHO Xibao ) Hepatitis B Vaccine Made by Recombinant DNA Techniques in CHO Cell本品系由重组CHO细胞表达的乙型肝炎(简称乙肝)病毒表面抗原 (HBsAg) 经培养、纯化, 加入氢氧化铝佐剂后制成, 用于预防乙型肝炎。
1 基本要求生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物应符合“凡例”有关要求。
2 制造2.1 生产用细胞2.1.1 细胞名称及来源生产用细胞为DNA重组技术获得的表达HBsAg的CHO细胞C株。
282.1.2 细胞库的建立及传代应符合“生物制品生产用动物细胞基质制备及检定规程”规定。
C株主细胞库的传代应不超过第21代，工作细胞库应不超过第26代，28生产疫苗的最终细胞代次应不超过第33代。
2.1.3 主细胞库及工作细胞库的检定应符合“生物制品生产和检定用动物细胞基质制备及检定规程”规定。
2.1.3.1 细胞外源因子检查无菌、支原体、细胞病毒外源因子检查均应符合规定。
2.1.3.2 细胞鉴别试验应用同功酶分析、生物化学方法、免疫学、细胞学和遗传标记物等任何方法进行鉴别，应为典型CHO细胞。
2.1.3.2.1 细胞染色体检查用染色体分析法进行检测，染色体应为20条。
2.1.3.2.2 目的蛋白鉴别采用ELISA检测，应证明为HBsAg。
2.1.3.3 HBsAg表达量主细胞库及工作细胞库细胞HBsAg表达量应不低于原始细胞库的表达量。
2.1.4 保存细胞种子应保存于液氮中。
2．2 原液2.2.1 细胞制备取工作细胞库细胞，复苏培养后，经胰蛋白酶消化, 置适宜条件下培养。
2.2.2 培养液培养液为含有适量灭能新生牛血清的DMEM液。
新生牛血清的质量应符合规定（附录XIII D）。
2.2.3 细胞收获培养适宜天数后，弃去培养液，换维持液继续培养适1－2天后，当细胞表达HBsAg达到1.0 mg/L以上时收获培养上清。
成人10μg重组(CHO细胞)乙肝疫苗免疫效果分析
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全 程 免 疫 ８ ５人 。 种 率 ８ ．２ 。免 疫 前 后 抗 一Ｈ ｓ ３ 接 ５１％ ｂ 阳性 率 为 ５ ．０ 和 ９ ．４ ， ２ １％ ８ ４ ％ 抗
某 城 区随 机抽 取 一 般 健 康 状 况 良好 的 １ ５ ８— ０岁 的 职 工 １５ ０５名 ， 乙肝 表 面 抗 原 （ Ｂ Ａ ） 测 阴 性 、 ０ １６程序 接 种 １ ｇ ｍｌ 经 Ｈ ｓｇ 检 按 、、 ０ ／
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重组乙肝疫苗的研究
Recombivax 畅销的处方药中排字第147位，销售额 比1998年增长6．9％。
• 其它公司生产的CHO表达基因重组乙肝疫苗：
法国巴斯德研究所的Gen Hevac B 以色列 Bio-Technology General公司的BioHep-B 瑞士的Hepreeombe等。
断，这4家公司掌国握外着全四球大约3公／4司的疫苗市场。 占据全球3/4 疫苗市场
葛兰素 史克
赛诺菲巴斯 德
默克公司
立达公司
葛兰素史克公司
Engerix-B 由Biogen公司与英 国的Edinburgh大学共同研发 酵母菌制造乙肝疫苗技术，并 授权史克必成公司销售其产品。
本品是葛兰素史克公司集乙肝 疫苗Engerix-B 超过15年的经 验的基础上研制而成的。本品 的几何平均滴度(GMTs)更高， 抗体存在的时间更长。
使用时的接种程序等方面问题的不断探索，相信越来越多的集便捷、舒适、安全、有 效于一体的联合疫苗将用于免疫预防 。
治疗性疫苗 VS 传统疫苗
• 治疗性疫苗是指在已感染病原微生物或已患有某些疾病的机体中，通 过诱导特异性的免疫应答，达到治疗或防止疾病恶化的天然、人工合 成或用基因重组技术表达的产品或制品。
• 乙肝疫苗的发展为预防和治疗乙肝起到了巨大的作用，从传统的血源疫苗发展到目前普遍采 用的重组乙肝疫苗
重组乙型肝炎疫苗的种类及现状
• 重组乙肝疫苗：由重组酵母或重组CHO工程
细胞表达的乙型肝炎表面抗原，经纯化、灭 活及加入佐剂吸附制成的疫苗。
• 目前重组乙肝疫苗主要分为酵母表达疫苗， （酿酒酵母和甲基营养型酵母）以及中国仓 鼠卵巢细胞（CHO）表达疫苗。
重组乙肝疫苗(汉逊酵母)的介绍
10. 再与氢氧化铝共沉淀，此时抗原吸附在氢氧化铝上
纯度测定
乙肝疫苗是通过肌肉注射的方式进入人体系统，为了降低疫苗内杂质含量对人体产生的 不良影响，必须进行疫苗的纯度检测。
乙肝疫苗表面抗原的纯度检定是疫苗质量控制的关键手段之一。目前分析测定重组乙 型肝炎疫苗纯度的HPLC常用方法是应用TSK-G5000PW分子筛。中国药品生物制品检定所 疫苗二室曾报道应用该系统对Merck酿酒酵母重组乙肝疫苗和CHO细胞重组乙肝疫苗进行 纯度分析，可获得良好的分离效果。对重组汉逊酵母乙肝疫苗，现有的HPLC检测系统应用 0.1mol/L DTT与1:50吐温80等量混合处理后能有效地检测不同类型重组乙肝疫苗表面抗原 的纯度。
疫苗保存
疫苗的稳定性较差，一般在2~8℃下能保存12个月，但当温度升高后，效力很快降低。 在37℃下，许多疫苗只能稳定几天或者几个小时，非常不利于在室温下运输。为了使疫苗 的稳定性提高，可用冻干的方法使之干燥。这样，疫苗的有效期往往可延长1倍或以上，在 室温下其效价的损失亦较慢。 冻干要点是： （1）冷冻，即将疫苗冷冻至共熔点以下。 （2）真空升华，即在真空状态下降水分直接由固态升华为气态。 （3）升温缓慢，即升温的过程尽量缓慢，不使疫苗在任何时间下有融解的情况发生。 （4）冻干好的疫苗应在真空或充氮气后密封保存，使其残余水分保持在3%以下。这样的 疫苗能保持良好的稳定性。
4.细胞破碎后加入表面活性剂使抗原溶解。
5.粗细胞裂解物用0.2微米中空纤维柱进行微滤。抗原和大部分 低分子量宿主细胞内含物通过滤膜，细胞碎片被膜拦截。
6.滤液再进行超滤，此时抗原被膜拦截而低分子浪宿主细胞内含 物通过滤膜除去
乙肝疫苗自愿放弃接种
乙肝疫苗自愿放弃接种
根据****的要求，并遵从自愿的原则为职工进行乙肝疫苗接种。
接种疫苗单位及来源为*****，接种疫苗名称为重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)，剂量包装为20ug/1ml/支，批准文号为国药准字***。
该疫苗适用于乙型肝炎易感者，但已知对该疫苗所含任何成分过敏者、患急性疾病、严重慢性疾病、慢性疾病的急性发作期和发热者、妊娠期妇女、患有未控制的癫痫和其他进行性神经系统疾病者均禁止接种。
接种乙肝疫苗后，少数受种者在24小时内可能出现注射部位疼痛、红肿，72小时内可能出现一过性发热反应，一般可在2-3日内自行缓解，不需处理。
在极罕见情况下可能发生过敏反应（过敏性皮疹、阿瑟反应等）、过敏性休克，需及时就医，必要时应及时与接种单位联系进行对症治疗。
接受注射者在注射后应在现场观察30分钟。
家族或个人有惊厥史者、患慢性疾病者、有癫痫史者、过敏体质者应特别注意。
注射第1针后出现高热、惊厥等异常情况者，一般不再注射第2针。
疫苗瓶有裂纹、标签不清、或失效者，疫苗瓶内有异物者，均不得使用。
本人已知晓个人乙肝血清学检测指标，包括乙肝病毒表面抗原HBsAg、乙肝病毒表面抗体HBsAb、乙肝病毒核心抗体HBcAb、乙肝病毒e抗原HBeAg和乙肝病毒e抗体HBeAb等
5项结果。
已认真阅读并理解以上内容，因个人原因拒绝接种，并签署乙肝疫苗自愿放弃接种书。
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19
现有的国产及进口基因重组乙肝疫苗
生产单位
大连汉信 天坛生物 国内 华药金坦 深圳康泰 北京华尔盾 进口
疫苗名称(种类)
重组乙肝苗（汉逊酵母） 重组乙肝苗（酿酒酵母） 重组乙肝苗（CHO） 重组乙肝苗（酿酒酵母） 重组乙肝苗（CHO） 重组乙肝苗（汉逊酵母） 重组乙肝苗（酿酒酵母） 倍尔来福 10μg/0.5ml/支 5μg/0.5ml/支 10μg/1.0ml/支 10μg/0.5ml/支 10μg/0.5ml/支 5μg/0.5ml/支 10μg/支 10μg/0.5ml/支 10μg/0.5ml/支
6
不同种类疫苗抗体滴度比较
250
200
150
100
50
0
(mIU/ml) GMT 酵母5ug 酵母10ug 华北CHO10ug 华北CHO20ug T1 48.15 67.91 85.23 201.08 (mIU/ml) GMT T3 33.36 35.28 68.17 167.43 (mIU/ml) GMT T6 23.51 39.97 47.31 81.81
CHO乙肝疫苗 啤 酒 酵 母乙肝疫苗
24
CHO乙肝疫苗的优势
CHO苗特性 酵母苗特性
重组CHO细胞乙肝疫苗技术为 酵母技术系美国默克公司技术
我国专有技术，国家Ⅰ类新药 型的HBsAg基因，针对性更强 转让。
用我国乙肝病毒流行株adr亚 流行株为adw亚型 由哺乳动物细胞（CHO细胞） 低等的真核细胞酵母菌表达，
陈胤忠，江苏省盐城市CDC，《基因重组乙型肝炎疫苗用于成人的免疫程序和接种剂量的研究》， 《中国计划免疫》2005.2 结果：高剂量疫苗组抗一HBsGMT和抗体高滴度分布比例均高于低剂量疫苗组；重组(CHO细胞) 乙肝疫苗抗一HBsGMT高于重组(酵母)乙肝疫苗，重组(CHO细胞)乙肝疫苗10ug诱导的抗一HBs GMT显著优于10ug重组(酶母)乙肝疫苗。 结论:对成人开展乙肝疫苗接种应选择高剂量的乙肝疫苗，建议选用20ug重组(CHO细胞)乙肝 疫苗．并优先选择0、1、6个月免疫程序。 12 华北制药—金坦生物
华北制药—金坦生物 9
9
结论:1、接种10ugX3重组HepB(酵母)阻断 HBV母婴传播的效果优于5ugX3重组HepB(酵 母)。 2、对于母亲HBsAg阳性儿童，特别是 母亲HBsAg和HBeAg双阳性的儿童，主动免疫 时采用10ugX3的重组HepB(酵母)为宜。
10
不同免疫剂量低、无应答率比较
13
北京疾控中心做的观察
华北制药CHO20-10-10
大连汉逊酵母10-10-10
深圳康泰酵母10-5-5
北京天坛酵母10-5-5 在大学新生当中做的观察，华北CHO疫苗阳转 率最高，达到98.7%。
全国肝炎疫苗研究及应用经验交流会、 《中国计划免疫》2007.8
14
1、天坛 2、康泰 3、大连 4、华北
全国肝炎疫苗研究及应用经验交流会、 《中国计划免疫》2007.8
15
由此可见
剂量越高，抗体滴度越高。 相同剂量，产生抗体滴度相近。
16
乙肝疫苗的种类
1、血源乙肝疫苗—用无症状的HBsAg携带者的血液制成 2、基因工程乙肝疫苗—利用基因工程研制重组DNA乙肝
疫苗，曾先后研制过大肠杆菌系统、啤酒酵母细胞系统、哺乳动 物细胞系统和牛痘病毒系统的重组乙肝疫苗。
什么是重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)？
采用基因工程技术将无传染性的乙肝病毒表面 抗原(HBsAg)的 S基因片段克隆到载体，用 重组载体转染真核生物CHO细胞通 过细胞培 养、增殖、分泌出HBsAg到培养液中，收集分 泌液， 经高速离心、纯化、除菌后，加人佐 剂吸附(氢氧化铝)而制成
CHO—中华仓鼠卵巢细胞
----《中国计划免疫》，2007年2月
28
华北疫苗与其它CHO疫苗的区别
1、质量标准最高。
• 原液纯度达到99%以上； • 效力>1.2 • 有效期3年
2、连续生产、自动化水平高。 3、生产规模大，产量高。 4、扩免经验丰富。
根据生产系统：（酵母、CHO细胞）
啤酒酵母乙肝疫苗（酿酒酵母、酵母） 汉逊酵母乙肝疫苗 毕赤酵母乙肝疫苗 CHO细胞乙肝疫苗
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乙肝疫苗的种类
3、含前S蛋白的乙肝疫苗
目前临床上应用的血源性疫苗与基因工程疫 苗，均只含HBsAg蛋白，当证实S蛋白能增 强HBsAg的免疫应答后，又注意到单纯只含 HBsAg蛋白的疫苗对血液透析病人与新生儿 免疫效果较差时，遂生产出添加前S蛋白的 酵母源性重组乙肝疫苗，它确能明显地增强 免疫应答。
国产重组乙型肝炎疫苗 （CHO细胞）
1
什么是乙型肝炎？
是一种由乙型肝炎病毒（HBV）感染机 体后所引起的疾病。 乙型肝炎病毒是一种嗜肝病毒，主要存 在于肝细胞内并损害肝细胞，引起肝细 胞炎症、坏死、纤维化。 乙型病毒性肝炎分急性和慢性两种。
急性乙型肝炎在成年人中90%可自愈，而慢性 乙型肝炎表现不一，分为慢性乙肝携带者、慢 性活动性乙型肝炎、乙肝肝硬化等。 我国目前乙肝病毒携带率为7.18%，其中约三 分之一有反复肝损害，表现为活动性的乙型肝 炎或者肝硬化。随着乙肝疫苗的推广应用，我 国乙肝病毒感染率逐年下降，5岁以下儿童的 HBsAg携带率仅为0.96%。(2006年我国进行的 乙型肝炎流行病毒调查结果 )
酵母疫苗：Engerix-B(史克)、Recombivac-B（merck） 汉逊酵母：莱茵、Hepavax-Gene(绿十字韩)、 GeneVac B(印度), 毕赤酵母：Shanvac B (印度)、 Enivax-HB(印度), Euvax(LG韩国) CHO细胞：Bio-hep-B（以色列）, Genhevac-B（法国）, Hepacare(英国), Sci-B-vac(澳大利亚、香港、以色列) 默克2004年已经改为生产CHO疫苗。
汉逊酵母疫苗第一针后平均第25天后产 生抗体。 CHO 天
8
汉逊酵母
25天
26
----中国药品生物制品检定所十一五课题
产生抗体滴度高
CHO疫苗 酵母疫苗
27
CHO疫苗的持久性
数据：中国CDC病毒所在河北正定的观察 剂量：10 μg 人群：新生儿 免疫8年后，抗体阳性率85.76%，抗体水 平在18.47mIU/ml以上。
乙肝为何难治?
乙肝病毒两层结构，外包一层致密坚硬的蛋白质外壳，专门抵御药物对 他的作用，药物对他根本无可奈何； 病毒隐匿在肝细胞里面复制，药物分子比肝细胞还大，根本无法进入到 肝细胞里面，进而也不可能对病毒有丝毫的作用； 病毒有一个复制模块，存在于细胞核中，专门诱导病毒高速复制繁殖， 药物分子连细胞都无法进入，更无法进入到细胞核中； 病毒会变性、变异。药物一接近它它就会迅速的改变结构和特性，从而 让药物无法捕捉到他，逃避掉药物对它的作用； 久之病毒会与人体基因长生链接，此时任何药物都无法做到切除，必需 借助其它高科技医学手段； 病毒生命周期是90天，附着药物分子没有那么久的吞杀效力，一般都会 被人体快速消化掉，所以杀灭病毒根本无从谈起。
剂型
10μg/0.5ml/支 20μg/1.0ml/支 20μg/1.0ml/支 20μg/1.0ml/支 60μg/1.0ml/支 20μg/支 20μg/ml 20μg/1.0ml/支
益可欣
葛兰素史克 北京科兴
联合疫苗
HA 500 EI.U.+ HB 10mg/1ml HA 720 EI.U.+ HB 20mg/1.0ml
高剂量疫苗是主流疫苗
中华医学会肝病学分会、中华医学会感 染病学分会联合制订《慢性乙型肝炎防 治指南》（2010版）建议：
对成人建议接种20μg CHO或20μg 重组酵母 乙型肝炎疫苗。 对免疫功能低下或无应答者，应增加疫苗的 接种剂量和针次；对3 针免疫程序无应答者 可再接种3 针，并于第2 次接种3 针乙型肝 炎疫苗后1~2个月检测血清中抗-HBs。
10g3
5g3 合 计
171
259 430
2
33 35
1.17
12.74 8.14
90
61 151
4
23 27
4.44
37.70 17.88
X2=23.032,P<0.001
（X2=32.616,P<0.001）
崔富强 王富珍 郑徽，接种不同剂量重组乙型肝炎疫苗（酵母）阻断乙型肝炎病毒母婴 传播的评价，中国计划免疫.2007,13(4).-289-292
乙肝治疗新技术
三大肝病突破性技术先后研发成功。最早的是日本中 微子透析技术；紧随其后，德国O3技术也震撼性问世 ；2011年末，我国上海复旦大学研究的治疗性疫苗（ 乙克）也宣告三期临床试验效果显著。
复旦新闻文化网 /fudannews/2011/1115/29282.html
20
葛兰素史克
到目前为止，有两种规模化生产的基因 工程乙肝疫苗：
一种是CHO细胞表达的 一种是酵母细胞表达的
同重组乙肝疫苗(酵母)相比，重组乙肝疫苗(CHO细胞) 具有如下特点:CHO细胞表达的重组HepB是高等真核细胞 表达产物，其天然结构较低等的真核细胞酵母表达的 HBsAg蛋白更适合人体吸收，生产过程中不同于酵母使用 硫氰酸盐处理，安全性好
10 20 25 30 35 40 45
2006年调查结果表明，我国1-59人群乙肝表面抗原携带率 为7.18%，5岁以下儿童的HBsAg携带率仅为0.96%
55
5Hale Waihona Puke 0年龄（岁）1992年 2006年
4
2011年全国报告发病/死亡前10位病种
位次
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 发病 病种 发病数 乙肝 1093335 肺结核 其它感染性腹泻病 流行性腮腺炎 梅 毒 痢 疾 丙肝 淋 病 流行性感冒 953275 836591 454385 395182 237930 173872 97954 66133 手足口病 1619706 死亡 病种 艾滋病 肺结核 狂 犬 病 乙肝 手足口病 丙肝 出 血 热 梅 毒 甲型H1N1流感 乙脑 死亡数 9224 2840 1879 637 509 125 119 75 75 63 病死率(%) 病种 鼠 疫 人禽流感 狂 犬 病 艾滋病 流 脑 新生儿破伤风 脊 灰 乙脑 钩 体 病 出 血 热 病死率 100.00 100.00 98.02 45.11 10.96 6.62 5.00 3.88 1.26 1.10