溶液配制参考

一、常用溶液的配制

（一）溶液配制注意事项

1．药品要有较好的质量试剂分为优级纯（保证试剂，Guaranteed reagent，G．R．）、分析试剂（Antalytical reagent，A．R．）化学纯（Chemical pure，C．P．）和实验试剂（Laboratory reagent，L．R．）等等。工业用的化学试剂，杂质较多，只在个别情况下应用，如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。

2．药品称量要精确。

3．配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水，比电阻值在50万欧姆以上，pH在5.5~7.0之间才可应用，在组织培养等特殊用途时应注意此项要求，配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。

４．配好后的溶液，应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质），以防杂菌生长。

（二）0.067（1/15）Mol/L磷酸缓冲液

1．1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制：称取磷酸二氢钾（KH2PO4，A．R．）9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入1 000ml容量瓶内，再稀释至刻度（1 000ml）。

2．１/15Mol/L磷酸氢二钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，A.R.）9.47g（或者Na2HPO4·2H2O 11.87g）用蒸馏水溶解后，放入1 000ml容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度（1 000ml）。

3．按附表的比例，配制成不同pH值的缓冲溶液。

附表1 磷酸盐缓冲液配制法（单位：毫升）

pH 1/15Mol/L

Na2HPO4

1/15Mol/L

KH2PO4

pH1/15Mol/L

Na2HPO4

1/15Mol/L

KH2PO4

5.88.092.07.16

6.623.4

5.99.990.17.272.028.0

6.012.28

7.87.376.823.2 6.115.384.77.380.819.2 6.21

8.681.47.584.115.9 6.322.477.67.687.013.0 6.426.773.37.78

9.410.6 6.531.868.27.891.58.5 6.637.562.57.993.2 6.8 6.743.556.58.894.7 5.3 6.849.650.48.195.8 4.2

6.955.444.68.29

7.0 3.0

7.061.138.98.498.0 2.0

（三）0.15Mol/L PB液

附表2 0.15Mol/LPB液配制法

pH0.15Mol/L Na2HPO4（ml）0.15Mol/L NaH2PO4（ml）

6.426.573.5

6.63

7.562.5

6.849.051.0

7.061.039.0

7.272.028.0

7.481.019.0

7.687.013.0

Na2HPO4·2H2O分子量=175.05 0.15Mol/L溶液含26.3g/L。

Na2HPO4·12H2O分子量=358.22 0.15Mol/L溶液含53.7g/L。

NaH2PO4·H2O分子量=138.00 0.15Mol/L溶液含20.7g/L。

NaH2PO4·2H2O分子量=156.03 0.15Mol/L溶液含23.4g/L。

（四）0.2Mol/L PB缓冲液

附表3 0.2mol/L PB缓冲液配制法

pH0.2 Mol/L Na2HPO4（ml）0.2Mol/L NaH2PO4（ml）

5.88.092.0

6.012.38

7.7

6.218.581.5

6.426.573.5

6.63

7.562.5

6.849.051.0

7.061.039.0

7.272.028.0

7.481.019.0

7.687.013.0

7.891.58.5

8.094.7 5.3

0.2Mol/L Na2HPO4·2 H2O溶液35.1g/L

Na2HPO4·12 H2O溶液含71.64g/L

0.2Mol/LNaH2PO4·H2O溶液含27.60g/L

NaH2PO4·2 H2O溶液含31.21g/L

欲配0.1Mol/L PB缓冲液则在0.2Mol/L PB缓冲液的基础上加H2O稀释1倍即可。欲配制PBS液时，则在溶液中加0.85％的NaCl溶液即可。

（五）无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS）

（0.15Mol/L PH 7.2）

NaCl 8.0g

KCl 0.2g

Na2HPO4 1.15g

（如为Na2HPO4·12H2O，则为2.89g）

KH2PO4 0.2g

将上述试剂依次溶于 1 000ml去离子水中，完全溶解后，115℃高压灭菌10min~15min，存在4℃冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。

（六）硼酸盐缓冲液（Borate saline buffer）

1．硼酸（Ｈ3BO3）

0.2Mol/L硼酸：硼酸12.37g加水至1 000ml。

2．硼砂（Na2B4O7）

0.05Mol/L硼砂：硼砂19.07g加水至1 000ml。

附表4 不同pH的0.2Mol/L硼酸缓冲液配制法

pH0.05Mol/L硼砂

（ml）0.2Mol/L硼酸

（ml）

pH0.05Mol/L硼砂

（ml）

0.2Mol/L硼酸

（ml）

7.4 1.09.08.2 3.5 6.5 7.6 1.58.58.4 4.5 5.5

7.8 2.08.08.7 6.0 4.0

8.0 3.07.09.08.0 2.0

（七）巴比妥缓冲液

1．pH8.2离子强度0.05Mol/L巴比妥缓冲液

巴比妥钠 47.6g

蒸馏水 3 000ml

1.17N HCl 55.0ml

（1.17 N HCl=193ml浓HCl加1 807ml蒸馏水）

⑴将4.76g巴比妥钠溶于3 000ml蒸馏水。

⑵加1.17 N HCl 55ml。

⑶用HCl调节pH到8.2，并加蒸馏水至4 265ml。

2．pH8.4 0.06Mol/L巴比妥缓冲液

巴比妥 1.84g

巴比妥钠 10.30g

加蒸馏水至 1 000.00ml

3．pH8.6 0.06Mol/L巴比妥缓冲液

巴比妥 1.66g

巴比妥钠 12.76g

加蒸馏水 1 000.00ml

（八）0.2Mol/L醋酸盐缓冲液见表附表5

附表5 0.2Mol/L醋酸盐缓冲液配制法