环境工程微生物学一微生物细胞数的计数
微生物菌落总数计数方法
微生物菌落总数计数方法微生物菌落总数计数方法有很多种，下面列举了其中的50种方法并对其进行详细描述：1. 胶平板法：将微生物样品通过稀释后均匀涂布在富营养培养基上，培养后统计菌落数量。
2. 液体计数法：使用专门的装置进行微生物菌落计数，例如波形计数器。
3. 膜过滤法：将微生物样品通过膜过滤器，然后将膜放到富养分培养基上进行培养和计数。
4. 容积法：将微生物样品通过稀释，然后使用容积计数器对其进行计数。
5. 水平采样法：将微生物样品通过固体培养基，然后根据采样水平进行菌落计数。
6. 微阵列计数法：使用微阵列技术进行微生物菌落计数，高通量，自动化程度高。
7. 波数计数法：通过光学检测装置对微生物样品的波数进行计数。
8. 流式细胞技术：通过流式细胞仪对微生物样品中的细胞进行计数和分析。
9. PCR技术：通过定量PCR对微生物样品中的特定基因进行定量，从而间接计算出微生物菌落总数。
10. 分光光度计法：通过分光光度计测定微生物样品中生物的光学密度，进而计算其菌落总数。
11. 过膜法：利用薄膜将微生物分布均匀后计数。
12. 电子计数法：通过电子显微镜进行微生物菌落计数。
13. 温度计数法：根据微生物在不同温度下的生长特性进行计数。
14. 荧光法：利用荧光染料对微生物菌落进行标记并计数。
15. 光学显微镜法：利用光学显微镜对微生物进行直接观察和计数。
16. 超声波法：利用超声技术将微生物分散均匀后计数。
17. 图像分析法：对微生物样品在图像上的特征进行分析，并计算菌落总数。
18. 颜色计数法：通过颜色反应对微生物菌落进行计数。
19. 电泳计数法：通过蛋白电泳对微生物进行计数。
20. 微型生物反应器法：利用微型生物反应器的特性对微生物进行计数。
21. 电化学法：通过电化学技术对微生物样品进行计数。
22. 生物传感器法：利用生物传感器对微生物进行快速计数。
23. 感光计数法：利用光敏感材料对微生物进行计数。
24. 气溶胶计数法：利用气溶胶技术对微生物进行计数。
环境工程微生物知识点总结(重点)
环境工程微生物⭐1-1、何谓微生物？它主要包括哪些类群？P27微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物总称。
1.原核类（真细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、衣原体、立克次氏体）2.真核类（真菌、原生动物、显微藻类）3.古生菌和非细胞型类（介于原核和真核之间）（病毒、亚病毒因子）⭐1-2、微生物有哪些特点？1.个体微小，结构简单，表面积大。
微生物大多是单细胞生物，有点复杂的多细胞微生物也少有组织器官的分化。
2.吸收多，转化快。
一些微生物的呼吸速率也比高等动、植物的组织强数十至数百倍。
这个特性为微生物的生长繁殖和合成大量代谢产物提供了充分的物质基础。
3.生长旺，繁殖快。
微生物具有极高的生长和繁殖速率。
4.适应强，易变异。
微生物结构简单，整个细胞直接与环境接触，易受环境因素影响，使其具有极其灵活的适应性或代谢调节机制。
5.分布广，种类多。
因微生物极小，很轻，附着于尘土随风飞扬，漂洋过海，栖息在世界各处，分布极广。
6.杂居混生，因果难联。
在自然条件下，微生物一般都是许多种相互杂居混生。
1-3、环境微生物学的主要研究内容有哪些？1.环境中微生物的分离、鉴定、培养及生理生化研究2.微生物与自然环境之间的关系3.微生物对环境的污染和危害4.微生物对受污染环境的净化和修复5.微生物在环境监测中的应用6.微生物产品1-4、试述显微镜的种类及与微生物学之间的关系。
1.光学显微镜2.电子显微镜3.扫描隧道显微镜2-2、如何命名微生物？种以上的系统单元有那几级？命名：一、俗名二、学名1、双名法学名=属名+种名加词+（首次定人名）+现名定名人+现名定名年（斜体字）（正体字）2、三名法学名=属名+种名加词+符号（可省略）+亚种或变种名的加词斜体斜体级：不知道2-3、试比较古生菌、细菌与真核生物的主要区别。
⭐2-4、微生物的鉴定方法。
其中现代分子生物鉴定分两类：1.通过核酸分析鉴定微生物遗传类型2.细胞化学成分作用鉴定指标2-5、试述16SrRNA寡核苷酸测序技术的原理、优点和简明操作步骤，并说明它在生物学基础理论研究中的重要意义。
环境工程微生物学
环境工程微生物学环境工程微生物学摘要：环境工程微生物学是微生物学的一个分支学科，它研究微生物在环境工程中的应用和作用。
在环境治理、废水处理、有机废弃物处理、土壤修复、空气污染控制等方面发挥重要作用。
本文将介绍环境工程微生物学的基础知识、微生物对环境的影响、微生物在环境治理中的应用等内容。
关键词：环境工程微生物学、微生物、环境治理、废水处理、有机废弃物处理、土壤修复、空气污染控制第一章环境工程微生物学的基础知识1.1 环境工程微生物学的概念环境工程微生物学是微生物学的一个分支学科，它研究微生物在环境工程中的应用和作用。
环境工程微生物学主要包括微生物的分类、数量、分布及其对环境的影响、微生物在环境治理中的应用等内容。
1.2 微生物的分类微生物是一类很小的生物体，包括细菌、真菌、蓝藻等。
按照形态特征和营养方式可将微生物分为原核生物和真核生物两大类。
原核生物可以进一步分为细菌，古细菌和蓝藻等。
1.3 微生物的数量和分布微生物是地球上最多的生物群体之一，它们广泛分布于大气、海洋、土壤、水体等各种环境中。
微生物数量的大小受多种因素影响，例如环境温度、湿度、pH值、营养物质的供应等。
第二章微生物对环境的影响2.1 微生物的生态作用微生物在生态系统中扮演着重要的角色。
微生物可以降解有机物，释放出二氧化碳，水和能量，它们也可以合成和分解无机物，参与氮、硫、碳循环等生态过程。
2.2 微生物与环境的关系微生物与环境之间的关系非常密切。
它们之间的相互作用影响着环境的质量和稳定性。
环境中的温度、湿度、pH值以及营养物质的供应等，都会影响微生物的生长和代谢，进而影响环境质量。
2.3 微生物在环境污染中的作用微生物可以在环境污染控制和治理中发挥重要作用。
它们可以利用废物和有害物质作为其生长代谢的基础，进行生化转化和分解，从而清除污染物。
第三章微生物在环境治理中的应用3.1 废水处理中的微生物微生物在废水处理中发挥着重要的作用。
（完整版）环境微生物学练习题及答案
（完整版）环境微⽣物学练习题及答案绪论⼀、名词解释1、微⽣物微⽣物是所有形体微⼩，⽤⾁眼⽆法看到，需借助显微镜才能看见的单细胞或个体结构简单的多细胞或⽆细胞结构的低等⽣物的统称。
“微⽣物”不是⼀个分类学上的概念，⽽是⼀切细⼩的、⾁眼看不见的微⼩⽣物的总称。
2、原核微⽣物原核⽣物：①细胞核发育不完善，只有DNA链⾼度折叠形成的⼀个核区，仅有核质，没有定形的细胞核，称为拟核或拟核。
②没有特异的细胞器。
③不进⾏有丝分裂。
⼆、选择题1．微⽣物分类中基本的分类单位是（D ）。
A、科B、属C、⽬D、种2．各种微⽣物具有⼀些共同点，下列选项中描述错误的是（ C ）A．分布⼴，种类多 B．适应强，易变异C．体积⼩，表⾯积⼩ D．⽣长速，繁殖旺5．所有微⽣物的共同特征是（ C ）。
A、单细胞B、没有真正的细胞核C、个体微⼩D、细胞结构简单6．在分类系统中，细菌和蓝细菌皆属于（ A ）。
A、原核⽣物B、真核⽣物C、多细胞D、单细胞三、填空题1. 微⽣物的命名采⽤双名法，即由⼀个___属名____和⼀个___种名____构成；书写排列上，____属___名在前，___种___名在后。
四、简答题1. 真核微⽣物与原核微⽣物的差异表现在哪些⽅⾯？它们各⾃包括哪些主要类群？原核⽣物：①细胞核发育不完善，只有DNA链⾼度折叠形成的⼀个核区，仅有核质，没有定形的细胞核，称为拟核或拟核。
②没有特异的细胞器。
③不进⾏有丝分裂。
真核⽣物：①细胞核发育完善，有核膜将细胞核和细胞质分开，核内有核仁和染⾊质。
②有⾼度分化的细胞器，如线粒体、中⼼体、⾼尔基体、内质⽹、溶酶体和叶绿体等。
③能进⾏有丝分裂。
原核微⽣物：细菌、古菌、放线菌、蓝细菌、⽀原体、⾐原体、⽴克次⽒体真核微⽣物：藻类、真菌（酵母菌、霉菌）、原⽣动物、微型后⽣动物五、论述题3. 结合微⽣物的特点，分析微⽣物在环境保护和环境治理中起着举⾜轻重的作⽤。
1、微⽣物在环境保护和治理中的作⽤：保持⽣态平衡污染物的降解废⽔、废⽓、废渣的处理污染⽔体、⼟壤的⽣物修复2、研究内容包括：微⽣物学基础知识环境⼯程中的微⽣物原理饮⽤⽔卫⽣细菌学⾃然环境物质循环与转化⽔体和⼟壤的⾃净作⽤污染⽔体治理、污染⼟壤的修复等环境⼯程净化3、环境⼯程微⽣物学的研究任务就是充分利⽤有益微⽣物资源为⼈类造福。
环境工程微生物学复习题
1.原核微生物：包括细菌、古菌、放线菌、蓝细菌、支原体、衣原体、立克次氏 体、螺旋体。 2.真核微生物：包括藻类、真菌（酵母菌、霉菌、伞菌）、原生动物、微型后生 动物。 3.微生物的特点：1）微生物个体极小 2）种类繁多、分布广 4）繁殖快 5）易变 异。
第一章 病毒 1.病毒定义：病毒是没有细胞结构，专性寄生在活的敏感宿主体内的超微小生物。 它们只具有简单的独特结构，可通过细菌过滤器。 2.病毒特点：1）形体极其微小，必须在电子显微镜下才能观察；2）没有合成蛋 白质的机构——核糖体；3）没有合成细胞物质和繁殖必备的酶系统，不具备独 立代谢能力；4）必须专性寄生在活的敏感宿主细胞内；5）依靠宿主细胞细胞合 成病毒的化学组成和繁殖新个体。 3.病毒的化学组成：有核酸和蛋白质，个体大的病毒除含蛋白质和核酸外，还含 类脂质和多糖。 4.病毒的结构：病毒没有细胞结构，却有其自身独特的结构。整个病毒分两部分： 蛋白质衣壳和核酸内芯，两者构成核衣壳。完整的具有感染力的病毒叫病毒粒子。 病毒粒子有两种：一种是不具被膜（亦称囊膜）的裸露病毒粒子；另一种是在核 衣壳外面有被膜所构成的病毒粒子。 5.毒性噬菌体：指侵入宿主细胞后，随即引起宿主细胞裂解的噬菌体 6.温和噬菌体：指侵入细胞后，其核酸附着并整合在宿主染色体上，和宿主细胞 的核酸同步复制，宿主细胞不裂解而继续生长，这种不引起宿主细胞裂解的噬菌 体称作温和噬菌体。 7.溶原细胞：指含有温和噬菌体核酸的宿主细胞。 8.原噬菌体：指在溶原细胞内的温和噬菌体核酸，又称为前噬菌体。 9.溶原性细菌：指在核染色体上整合有原噬菌体的细菌。可进行正常生长繁殖, 而不被裂解。 10.病毒的测定：1）病毒颗粒计数法；2）间接计数法；3）病毒感染效价测定法。
等电点高，细菌的游离氨基电力受抑制，游离羧基电离，细菌则带负电荷；否则 ，游离氨基电离，游离羧基电离受抑制，细菌则带正电。已知细菌的等电点的pH 为2~~5，pH为6、pH为7和pH为7.5的溶液属于偏碱性、中性和偏酸性，都高于细 菌的等电点。所以细菌表面总是带负电荷。而在pH=1.5的溶液中细菌则带正电。
2021年专业技术人员继续教育专业课-环境工程微生物学测试题及答案
1【单选题】微生物按其生物属性及它们的亲缘关系,有序的分类,从大到小分别是( )。
•A、界、域、门、纲、目、科、属、种•B、界、域、门、纲、目、科、种、属•C、域、界、门、纲、目、科、属、种•D、域、界、门、纲、目、科、种、属2【单选题】关于微生物的命名,说法错误的是( )。
•A、采用生物学中的二名法•B、属名在前,首字母大写;种名在后,首字母无需大写•C、属名和种名都用正体字•D、如果某细菌只被鉴定到属,则该菌的名称只有属名,没有种名,可用sp.(单数)或spp.(复数)来代替种名表达3【单选题】原核微生物的特点是( )。
•A、发育完好的细胞核,有核膜,有核仁和染色质•B、没有发育完全的核,只有DNA链高度折叠的核区•C、有高度分化的细胞器•D、能进行有丝分裂。
4【单选题】不属于微生物的共同特征的是( )。
•A、个体小•B、分布广、种类多•C、繁殖快、易变异•D、致病性1【单选题】以下对病毒影响最大的物理因素为( )。
•A温度•B气压•C光•D电磁辐射2【单选题】组成病毒粒子衣壳的化学物质是( )。
•A糖类•B蛋白质•C核酸•D脂肪3【单选题】关于病毒的特点和组成,错误的是( )。
•A病毒是没有细胞结构、专性寄生在活的宿主体内的超微小微生物B多数病毒的大小在0.2μm以下C病毒具有独立生存能力D病毒的化学组成主要有蛋白质和核酸4【单选题】噬菌体属于病毒类别中的( )。
•A细菌病毒•B动物病毒•C植物病毒•D真菌病毒5【单选题】病毒在宿主体内的繁殖过程包括( )。
• A吸附、侵入、复制与聚集、成熟和释放• B变性、退火和延伸• C引发、延伸、终止• D解旋、复制、子链与母链盘旋生成双螺旋结构1【单选题】不属于球菌的是( )。
• A单球菌、双球菌• B四联球菌、八叠球菌2【单选题】不属于杆菌的是( )。
• A单杆菌• B弧菌• C双杆菌• D链杆菌3【单选题】螺纹不满一圈的螺旋菌称为( )。
• A逗号弧菌• B弧菌• C螺旋体菌• D单杆菌4【单选题】有关细菌的大小说法正确的是( )。
环境微生物学课程标准
《环境微生物学》课程标准一、概述（一）课程性质环境工程微生物学是《水污染控制工程》、《固体废物处理与处置》等专业课程的基础，所以只有在理论上掌握微生物的基础理论知识才能更充分理解和学好《水污染控制工程》和《固体废物处理与处置》。
（二）课程基本理念《环境微生物学》是环境科学专业的专业基础课程，需要生物化学的知识为基础，可以作为污水处理、大气处理及固体废弃物处理等专业课程的基础。
（三）课程设计思路环境微生物学是微生物学的一个重要分支，是环境科学专业的一个重要的专业基础必修课。
通过本课程的学习，本专业学生必须掌握环境微生物学基础知识，了解环境中微生物的主要类群及其生理、生态特性，并在此基础上进一步学习微生物与环境的相互作用关系以及污染物的微生物降解与转化规律，深刻理解传统及新兴的污染控制与治理技术中所涉及的微生物学原理，逐步掌握环境微生物学研究的基本方法，了解有害微生物的控制技术，了解微生物在环境工程中的应用及相关的实验技术，为从事相关领域的科研和实践打下必要的基础。
二、课程目标1、总目标通过本课程的学习，使学生系统地了解微生物学的基本形态、类型，掌握微生物的结构、生理特性、生长规律、遗传与变异及微生物在自然界物质转化中的作用、微生物在环境工程中的作用，从而进一步利用微生物为治理环境服务。
2、具体目标1、理论教学的目的和任务本课程主要介绍病毒、原核微生物、真核微生物等的形态、结构和功能、微生物的营养和培养基、微生物的新陈代谢、微生物的生长及其控制、微生物的遗传变异、微生物的生态、水环境污染控制与治理的生态工程及微生物学原理、污、废水深度处理和微污染源水预处理中的微生物学原理、有机固体废弃物与废气的微生物处理及其微生物群落。
注重微生物学的基础知识，特别是微生物的构造特点，与环境治理相结合，引导学生解决实际问题；同时结合科技的发展，着重介绍微生物的遗传变异，将微生物学诱变与工程菌筛选、优化相衔接。
为将来从事环境科学以及环境工程方面的工作打下一定的专业基础。
周群英《环境工程微生物学》(第3版)章节题库(第五章 微生物的生长繁殖与生存因子)【圣才出品】
第五章微生物的生长繁殖与生存因子一、选择题1．生长速率常数最大的时期是（）。
A．停滞期B．对数期C．静止期D．衰亡期【答案】B【解析】B项，对数期的细菌得到丰富的营养，细胞代谢活力最强，合成新细胞物质的速率最快，细菌生长旺盛。
这时的细菌数不但以几何级数增加，而且每分裂一次的时间间隔最短，生长速率常数最大。
2．下列关于恒浊连续培养的描述正确的是（）。
A．是使培养液中细菌的浓度恒定的培养方式B．在恒浊器中微生物始终以最高生长速率进行生长C．是一种设法使培养液的流速保持不变的培养方式D．微生物始终在低于其最高生长速率的条件下进行生长繁殖的方式【答案】A【解析】恒浊连续培养是使细菌培养液的浓度恒定，以浊度为控制指标的培养方式。
按实验目的，首先确定细菌的浊度保持在某一恒定值上。
调节进水（含一定浓度的培养基）流速，使浊度达到恒定（用自动控制的浊度计测定）。
3．固氮菌和纤维素分解菌生活在一起时的关系是（）A．拮抗B．共生C．寄生D．互生【答案】D【解析】D项，固氮菌固定的氮为纤维素分解菌提供氮源，纤维素分解菌分解纤维素的产物有机酸被固氮菌用作碳源和能源，也为纤维素分解菌解毒。
两者可以单独生活，共存于同一环境中，相互提供营养及其他生活条件，双方互为有利，相互受益，属于互生关系。
4．细菌的生长曲线中，总菌数和活菌数几乎相等的是（）。
A．适应期B．对数期C．稳定期D．衰亡期【答案】B【解析】B项，对数期由于营养物质足以供给合成细胞物质使用，因此细菌细胞质的合成速率与活菌数的增加速率一致，细菌总数的增加率和活菌数的增加率一致，总菌数和活菌数几乎相等。
5．常用的消毒酒精的浓度为（）。
A．30％B．70％C．95％D．100％【答案】B【解析】B项，醇是脱水剂和脂溶剂，可使蛋白质脱水、变性，溶解细胞质膜的脂质，进而杀死微生物机体。
体积分数为70％的乙醇杀菌力最强。
乙醇浓度过低无杀菌力，纯乙醇因不含水很难渗入细胞，又因它可使细胞表面迅速失水，表面蛋白质沉淀变性形成一层薄膜，阻止乙醇分子进入菌体内，故不起杀菌作用。
环境工程微生物学实验四 微生物数量的测定实验报告
南昌大学实验报告学生姓名：学号：专业班级：实验类型：√验证□综合□设计□创新实验日期：实验成绩：实验四微生物数量的测定一、实验目的：1了解血球计数板测定微生物数量的原理；2 了解血球计数板的结构，学习并掌握血球计数板计数微生物数量的技术，包括样品的点样、菌数计数的方法与计算；二、实验基本原理：镜检计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液，如有杂菌或杂质常不易分辨。
菌体较大的酵母菌或霉菌泡子可采用血球计数板；一般细菌则采用彼得罗夫·霍泽(Petroff Hausser)细菌计数板。
两种计数板的原理和部件相同，只是细菌计数板较薄，可以使用油镜观察。
而血球计数板较厚，不能使用油镜，故细菌不易看清。
血球计数板是一块特制的厚载玻片，载玻片上有4条槽而构成3个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各有一个方格网。
每个方格网共分9大格，其中间的一大格(又称为计数室)常被用作微生物的计数。
计数室的刻度有两种：一种是大方格分为16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格；另一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格。
但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即每个大方格都由400个小方格组成。
每个大方格边长为1mm，则每一大方格的面积为1mm2，每个小方格的面积为1／400mm2，盖上盖玻片后，盖玻片与计数室底部之间的高度为0.1mm，所以每个计数室(大方格)的体积为0.1mm3，每个小方格的体积为l／4000mm3。
使用血球计数板直接计数时，先要测定每个小方格(或中方格)中微生物的数量，再换算成每毫升菌液(或每克样品)中微生物细胞的数量。
本方法适用于细胞数较多的样品测定（每毫升105～106以上），当样品中的细胞浓度较低时，须选择其他方法测定，否则因误差太大而影响实验结果。
板的构造a.平面图(中间平台分为两半，各刻有一个方格网)b.侧面图(中间平台与盖玻片之间有高度为0.1毫米的间隙)血球计数板计数网的分区和分格三、主要仪器设备及耗材：显微镜、血球计数板、盖玻片（22mm×22mm）、吸水纸、滴管、擦镜纸、酵母菌液四、实验步骤：(1)取洁净的血球计数板一块，在计数室上盖上一块盖玻片。
2023 环境工程微生物学试题及答案
2023 环境工程微生物学试题及答案2023 环境工程微生物学试题及答案(一)一、名词解释(每题 1、5 分，计 30 分)类病毒：是一个裸露的闭合环状 RNA 分子，它能在感染寄主细胞并在其中进行自我复制使寄主产生病症。
异染粒：分散在细胞质中的多聚磷酸盐颗粒。
细胞壁：细胞壁是包在细菌细胞表面、内侧紧贴细胞质膜的较为坚韧并略具弹性的结构。
半知菌：还不知道是否有有性繁殖阶段的真菌。
锁状联合：是担子菌的次生菌丝为确保子细胞都含有________于父母亲本的核而进行的特殊的分裂方式。
无氧呼吸：以无机物作为最终电子受体，进行有机物的生物氧化的过程。
主动运输：是微生物中的主要运输方式，在代谢能和载体的参与下可进行逆浓度梯度的运输。
表面活性剂：具有降低表面张力效应的物质叫做表面活性剂。
它改变细胞的稳定性和透性，使细胞内的物质逸出细胞外，从而引起微生物的死亡。
互生：两个群体相互协作，达到在某一生境中共同生存的目的。
碱基配对：核酸分子中嘌呤碱基和嘧啶碱基配对互补。
DNA 聚合酶：以反向平行的 DNA 链为模板催化合成新链 DNA。
生物圈：是地球表面进行生命活动的有机圈层，包括了生活于大气圈下层、水圈、岩石圈以及三圈界面的所有生命体。
活性污泥：具有活性的微生物絮凝体。
氨化作用：是指有机态 N 被微生物降解形成NH3 的过程。
细胞膜：是围绕在细胞质外面的双层膜结构。
污泥容积指数：在暴气池出口处的混合液，经过 30 分钟静沉后，每克干污泥所形成的沉淀污泥的体积。
优势菌种挂膜法：将优势菌种附着在滤料上，以废水中的有机物为营养生长繁殖，使之形成生物膜的方法。
生态系统：是生物群落与其生存环境组成的整体系统。
生物絮凝剂：是一类具有絮凝作用的微生物产生的代谢产物。
废气的微生物滴滤法：用微生物挂膜的生物填料上方喷淋循环水，当废气中的有机污染物经过填料时，被挂膜的微生物分解的过程。
二、是非题(每题 1 分，计 10 分)1、病毒有抗青霉素的效应，因它们不具有基因组。
《环境工程微生物学》课程实验教学大纲.doc
《环境工程微生物学》课程实验教学大纲［适用对象］环境科学专业［实验学时］18学时一、实验教学任务和目的《环境工程微生物学实验》是与《环境工程微生物学》理论课程密切结合的一门重要的、非单独设课的环境科学专业基础实验课程。
课程学习的目的是让学生掌握本课程基本技能操作，为学习基础环境科学有关课程和为学生将来从事环境相关工作和科研工作奠定基础。
二、实验教学基本要求(1)训练学生掌握环境微生物学最基本的操作技能。
(2)加深理解课堂讲授的某些环境微生物学理论。
(3)培养学生观察、思考、分析问题、解决问题和提出问题的能力。
(4)培养学生实事求是、严肃认真的科学态度，以及敢于创新的开拓精神。
(5)培养学生树立勤俭节约、爱护公物的良好作风。
三、实验教学内容实验一细菌的人工培养法1、实验目的和要求(1)掌握各种培养基接种技术。
(2)熟悉细菌在培养基中的生长现象；认识菌落、菌苔。
(3)了解常用的液体、固体和半固体培养基的成分、制备方法和用途。
2、实验内容(1)培养基的配制，摆斜面，倒平板(2)分离培养法(平板划线法)(3)斜面培养基接种方法(4)液体培养基接种法(5)半固体培养基的接种法(6)观察细菌在培养基上的生长情况：细菌各种培养物的示教；描述细菌在各种培养基上的生长现象；观察大肠杆菌与痢疾杆菌在半固体培养基上的现象。
普通琼脂平板，普通琼脂斜面，半固体培养基，肉汤培养基，接种环，接种针，酒精灯，大肠杆菌24小时斜面培养物等。
4、实验学时3学时实验二细菌的分布及消毒与灭菌1、实验目的和要求掌握高压蒸气灭菌器的使用方法及注意事项；证实热力和紫外线的杀菌效果；证实常用消毒剂的消毒效果；证明细菌在自然界和正常人体的存在，为在微生物学实践中树立严格的“无菌观念”提供依据。
2、实验内容(1)高压蒸气灭菌法(2)干热灭菌器(干烤箱)(3)紫外线的杀菌实验(4)热力对芽胞及繁殖体的作用(5)药物敏感性试验(6)化学消毒剂的杀菌的作用------ 手指皮肤消毒前后的细菌学检查(7)空气中的细菌检查(8)污水和净水中的细菌数检查(9)皮肤表面的细菌检查3、实验仪器普通琼脂平板、1%高层琼脂，血琼脂平板，无菌试管，无菌吸管，无菌平皿，灭菌棉签，咽拭子，酒精灯等。
环境工程微生物学实验
（1）试管编号；
（2）2只试管分别穿刺接种大肠杆菌和变形杆菌； （3）37 ℃ ，培养24h 3、柠檬酸盐利用试验
（1）试管编号；
（2）2只试管分别划线接种大肠杆菌和枯草杆菌； （3）37 ℃ ，培养24h
四、实验结果观察与记录
1、将实验结果填入下表，＋表示阳性，－表示阴性。 2、思考题：微生物生理生化反应的意义何在？
三操作步骤1微生物大小的测量1枯草杆菌标本片的制作2目镜测微尺的标定放置镜台测微尺放置目镜测微尺校正目镜测微尺计算不同放大倍数下目镜测微尺每格代表的长度3枯草杆菌大小的测量四实验报告1将目镜测微尺校正结果填入下表接物镜接物镜倍数目镜测微尺目镜测微尺每格代表的长度2在高倍镜下测量枯草杆菌大小的实验结果填入下表菌体编号长度的目镜测微尺格数宽度的目镜测微尺格数平均值菌体大小平均值m3分析实验结果一实验目的明确显微镜计数的原理
酵母菌的形态构造
线 粒 体 芽体液泡 芽 体 核 液 泡 膜 细 胞 壁 细 胞 膜
根霉（Rhizopus)
青霉（Penicillum):
曲霉(Aspergillus)
四、实验报告
1. 分析实验结果，绘制酵母菌、青霉、黑曲霉的形
态图，并注明各部位名称，。 2. 怎样才能观察到较为完整的霉菌形态，各种霉菌 制片过程中分别有哪些注意事项？
121℃,灭菌20~30min
使用时, 将培养基加热融化, 待温度降至50 ℃左右时在 100mL培养基中加入1%链霉素0.3mL
糖发酵培养基：
蛋白胨2g，葡萄糖10g， K2HPO4 0.2g, NaCl 5g, 琼脂5～6g， pH7.0～7.2 ，蒸馏水1L ， 1%溴百里酚蓝 3ml. 分装试管，每管4～5cm， 112℃,灭菌30min.
环境工程微生物学
环境工程微生物学声明：1、此份资料仅供参考，具体概念以书本为准!2、带有猜题性质，若中不谢，未中莫打。
一、名词解释1.空斑（蚀斑）：原代或传代单层细胞被病毒感染后，被病毒蚀空形的成空斑。
（单位：PFU）2.噬菌斑：将噬菌体的敏感细菌接种在琼脂固体培养基上生长形成许多菌落，当接种稀释适度的噬菌体悬叶引起点性感染，在感染点上进行过反复的感染过程，宿主细菌菌落就一个个地被裂解成一个个的空斑。
（单位：PFU）3.温和噬菌体：核酸附着并整合在宿主细胞，与宿主核酸同步复制但不引起宿主细胞裂解死亡的噬菌体病毒噬菌体：侵入宿主细胞后，随即引起宿主细胞裂解的噬菌体。
4.病毒滴度：能产生培养管中50%的细胞病理效应的最高病毒稀度。
5.芽孢：某些细菌在其生活史的某个阶段或遇到不良环境时，在细胞内形成的一个内生孢子。
6.酶活力：酶催化一定化学反应的能力。
（单位为IU、Kat）IU：在最适条件下，每分钟转化1μmolKat（催量）：在最适条件下，每秒钟催化1mol底物转化的酶量7.比活力：在固定条件下，每毫克或每毫升酶液所具有的酶活力。
8.米氏常数K m：反应速率为最大反应速率一般时的底物浓度。
9.主动运输：需要浓度和渗透酶的逆浓度梯度积累营养物质的过程。
10.基团转位：存在于某些原核生物中的一种物质运输方式。
11.世代时间（代时）：细菌两次分裂之间的时间。
12.糖酵解（EMP）：在无氧条件下，1mol葡萄糖逐步分解产生2mol丙酮酸并释放出能量的过程。
13.三羧酸循环（TAP）:丙酮酸在有氧条件下继续进行有氧分解，最后分解成CO2和H2O。
14.PCR技术：一种具有选择性的体外扩增DNA或RNA片段的方法。
15.水体自净：河流在接纳一定的有机污染物后，在物理、化学和生物等因素的综合作用下得到净化，水质恢复到污染前的水平和状态。
16.堆肥化（法）：依靠自然界广泛分布的细菌、放线菌、真菌等微生物，有控制地促进被生物降解的有机物向稳定的腐殖质转化的生物化学的过程。
环境工程微生物学5~9章
环境工程微生物学5~9章第五章微生物的生长繁殖与生存因子1、微生物群的生长的研究方法微生物的培养方法有分批培养和连续培养-分批培养分批培养是讲一定量的微生物接种在一个封闭的，盛有一定体积液体培养基的容器内，保持一定的温度，pH，溶解氧，微生物在其中生长繁殖，结果出现微生物的数量由少变多，达到高峰后又有多变少，甚至死亡的变化规律。
这就是微生物的生长曲线。
-停滞期特点：（1）代谢活跃，个体体积重量增大；（2）不立即进行分裂增殖，数量不变，甚至变少。
缩短或消除停滞期的方法：（1）采用处于高效菌群对数期的菌种；（2）增大接种量；（3）保持接种前后所处的培养介质和条件一致。
-对数期特点：（1）繁殖速度最大；（2）平均代时最短；（3）形态、染色、生物活性都很典型。
-静止期特点：（1）消耗了大量营养物质，代谢毒物增多；（2）死亡率=出生率。
-衰亡期特点：死亡率>出生率（相当于内源呼吸阶段）连续培养定义：是细胞培养对数期后，以一定速率流入新鲜培养基，并利用溢流方式等流出培养物，使容器内培养物或细菌达到动态平衡。
微生物生长维持在某一对数生长期的生长速率。
-恒浊连续培养（细菌以最高生长速率生长）恒浊连续培养是使细菌培养液的浓度恒定，以浊度为控制指标的培养方式。
-恒化连续培养（使细菌在低于最高生长速率的条件下生长繁殖）恒化连续培养是维持进水中的营养成分恒定，以恒定流速进水，以相同流速流出代谢产物。
2、细菌生长曲线在污水生物处理中应用-常规活性污泥法利用生长速率下降阶段的微生物，包括减速期、静止期。
-生物吸附法利用生长速率下降阶段的微生物。
-高负荷活性污泥法利用生长速率上升阶段（对数期）和生长速率下降阶段（减速期）的微生物。
-有机物含量低的污水，利用内源呼吸阶段（衰亡期）的微生物。
-为什么常规活性污泥法不利用对数生长期的微生物而利用静止期的？（1）对数生长期的微生物虽然生长繁殖快，代谢活力强，能大量去除污水中的有机物，但相应要求进水有机物浓度高，则出水的绝对值也相应提高，不易达到排放标准。
微生物细胞数的计数-实验二
实验二《微生物细胞数的计数》标准实验报告适用专业：环境工程江苏科技大学生物与化工学院环境工程系2012年8 月一、实验目的1.了解血球计数板的结构；2.掌握利用血球计数板计微生物细胞数的原理和方法二、实验要求1．遵守实验室安全制度，听从指导教师安排；2．认真听讲，不懂就问；3．完成实验报告三、实验仪器和材料显微镜、血球计数板、移液管、盖玻片、吸耳球、酵母菌液（或其他微生物材料）等四、血球计数板的结构血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器，由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面刻有一个方格网。
方格网上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室。
这一大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，其容积为0.1mm3，即1mm×1mm×0.1mm方格的计数板；大方格的长和宽各2mm，深度为0.1mm，其容积为0.4mm3，即2mm×2mm×0.1mm方格的计数板。
在血球计数板上，刻有一些符号和数字，其含义是：XB-K-25为计数板的型号和规格，表示此计数板分25个中格；0.1mm为盖上盖玻片后计数室的高；1/400mm2表示计数室面积是1mm2，分400个小格，每小格面积是1/400 mm2。
计数室通常也有两种规格：一种是16×25型，即大方格内分为16中格，每一中格又分为25小格；另一种是25×16型，即大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格。
但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。
1．16×25型的计数板将计数室放大，可见它含16中格，一般取四角：1、4、13、16四个中方格（100个小方格）计数。
将每一中格放大，可见25个小格。
环境工程微生物学期末复习纲要
环境工程微生物学绪论1.微生物是肉眼看不见的、必须在电子显微镜或者光学显微镜下才能看见的所有微小生物的总称，按细胞结构的有无分非细胞结构微生物以及细胞结构微生物，按细胞核膜、细胞器及有丝分裂等的有无，划分为原核微生物和真核微生物。
2.微生物分类级别：界，门，纲，目，科，属，种。
3.微生物的命名：二名法，即用两个拉丁词命名一个微生物的种。
属名在前，第一个字母大写，种名灾后，第一个字母小写。
微生物的名称之后缀有命名人的姓。
4.原核微生物与真核微生物的区别原核微生物无成型细胞核，没有核膜，称为拟核；没有各种细胞器；不能进行有丝分裂；真核微生物有发育完好的细胞核，内有核仁和染色质，有核膜；有高度分化的细胞器；进行有丝分裂。
5.微生物的特点个体极小；分布广，种类多；繁殖快；易变异。
病毒1.病毒的特点大小在0.2um以下，在光学显微镜下看不到，只能通过电子显微镜看；病毒没有核糖体，不能合成蛋白质，也没有合成细胞物质和繁殖所必备的酶系统，不具备独立代谢能力，靠寄生生活；在宿主体外呈现不具生命特征的大分子物质，但保留感染宿主的潜在能力，进入宿主体内后重新具备生命特征，感染新的宿主。
2.病毒的化学组成为蛋白质和核酸。
3.病毒繁殖过程的步骤（大肠杆菌为例）：吸附、侵入、复制与聚集、释放。
4.噬菌体有烈性噬菌体和温和噬菌体两种类型。
5.病毒在液体培养基中的培养特性将噬菌体的敏感细菌接种在液体培养基中，经培养后敏感细菌均匀分布在培养基中而是培养基浑浊。
接种噬菌体，敏感细菌被噬菌体感染后发生菌体裂解，原来浑浊的细菌悬液变成透明的裂解溶液。
6.噬菌斑是指将噬菌体的敏感细菌接种在琼脂固体培养基上生长成许多个菌落，当接种稀释适度的噬菌体悬液后引起点性感染，在感染点上进行反复的感染过程，宿主细菌菌落就一个个地被裂解成一个个空斑，称为噬菌斑。
7.对病毒影响最大的物理因素是温度、光、干燥度。
1.微生物学家根据rRNA序列的不同，将所有微生物分为三大域，即古菌域、细菌域、真核生物域。
环境工程微生物实验指导
环境工程微生物实验指导实验一微生物形态观察一、实验目的1、认识细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的基本形态特征。
2、巩固显微镜的使用方法。
3、学习微生物画图方法。
二、实验原理1、细菌的基本形态细菌是单细胞的微生物，能够独立进行生活，它的种类繁多，但基本形状有四种：球状、杆状、螺旋状和丝状，分别称为：球菌、杆菌、螺旋菌和丝状菌。
（1）球菌：细胞呈球形或椭圆形，根据它们相互联结的形式可以分为单球菌、双球菌、链球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌等。
如金黄色葡萄球菌。
球菌大小以直径表示，一般为0.5~1μm。
（2）杆菌：细胞呈杆状或圆柱形，大小以宽度×长度表示，各种杆菌的长度与直径比例差异很大，有的粗短，有的细长。
如大肠杆菌就比较细而短、枯草杆菌粗而长。
杆菌是细菌中种类最多的，工农业生产中所用的细菌大多是杆菌。
（3）螺旋菌：细胞呈弯曲杆状，螺旋菌细胞壁坚韧较硬，常以单细胞分散存在。
大小一般为（0.3~1.0）μm×（1.0~50）μm，根据其弯曲情况可分为弧菌、螺菌、螺旋体。
弧菌只有一弯曲，而螺菌有2~6个弯曲。
其大小为0.3~1×1~50μm。
若菌体弯曲螺旋圈数较多者，无坚韧的细胞壁，比较柔软，能自由运动，通称为螺旋体。
2、细菌的特殊构造细菌细胞的特殊构造有荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等。
（1）荚膜：是有些细菌生活在一定营养条件下，向细胞壁表面分泌的一种粘液状、胶质状的物质。
用显微镜观察，中心部位是细菌菌体，在暗色背景下荚膜呈透明状环绕菌体。
（2）鞭毛和菌毛：鞭毛是某些微生物细胞表面着生的一根或数根细长、波曲、毛发状的丝状物。
直径为0.1~0.2μm，它是细菌的运动器官。
在光学显微镜下不能直接观察到。
经过特殊的鞭毛染色后，在光学显微镜下可以看到鞭毛。
（3）芽孢：是某些细菌在其生长的一定阶段，在细胞内形成一个圆形、椭圆形、壁厚、含水量极低、抗逆性极强的休眠体。
芽孢形成的位置、形状、大小可因菌种而异。
环境工程微生物学
微生物的生长与繁殖
微生物的生长
微生物的生长包括吸收营养、合成细 胞物质和产生能量等过程。其生长曲 线可分为延滞期、对数期、稳定期和 衰亡期四个阶段。
微生物的繁殖
微生物的繁殖方式主要有二分裂、出芽 生殖、孢子生殖等。其中，二分裂是最 常见的繁殖方式，即一个细胞分裂成两 个相同的子细胞。
微生物的代谢与遗传
3
微生物组学在环境工程中的应用 利用微生物组学技术，优化污水处理、固废处理 等环境工程中的微生物群落结构，提高处理效率。
微生物代谢组学与蛋白质组学研究
01
微生物代谢途径解析
通过代谢组学技术，研究环境微生物的代谢途径和代谢产物，揭示其在
环境中的适应机制。
02
蛋白质组学在环境工程中的应用
利用蛋白质组学技术，分析环境工程中微生物的蛋白质表达谱和蛋白质
微生物的代谢
微生物的代谢包括分解代谢和合成代谢两个方面。分解代谢是指微生物将大分 子有机物分解为小分子物质的过程，而合成代谢则是将小分子物质合成为细胞 物质的过程。
微生物的遗传
微生物的遗传物质主要是DNA，其遗传方式遵循孟德尔遗传定律。同时，微生 物还具有基因重组、基因突变等遗传变异现象，这些变异为微生物的进化和适 应环境提供了可能。
微生物的分类
根据形态和结构，微生物可分为细 菌、放线菌、真菌、病毒、立克次 氏体、支原体、衣原体、螺旋体等 八大类。
微生物的形态与结构
微生物的形态
微生物的形态多种多样，有球形、杆形、螺旋形、弧形等。
微生物的结构
微生物的结构包括细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核等部分。 其中，细胞壁主要起保护作用，细胞膜负责物质交换，细胞质 是细胞进行新陈代谢的主要场所，细胞核则控制细胞的遗传和 代谢活动。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
三、杆菌、大肠杆菌。
2. 器材： 废液缸、洗瓶、载玻片、接种杯、酒精灯、
擦镜纸、显微镜
3. 试剂： 草酸铵结晶紫染液 革兰氏碘液 体积分数为95%酒精 质量浓度为5蕃红（沙黄）染色液
五、实验内容与步骤
(一)细菌的简单染色 涂片→干燥（固定）→染色→水洗→干燥→镜检
1．涂片 取干净的载玻片于实验台上，在载玻片的中央滴一滴无菌蒸馏水，将接种环在火焰上烧红，待冷却
后从斜面挑取少量菌种(玻片上的水滴混匀后，在载玻片上涂布成一均匀的薄层，涂布面不宜过大。 2．干燥（固定）
室温下使其自然干燥，有时为了使之干得更快些，可手持载玻片的一端，标本向上，在酒精灯火焰外 层尽快的来回通过2~3次，共约2~3秒钟，并不时以载玻片背面加热触及皮肤，不觉过烫为宜（不超过 60℃）,放置待冷后，进行染色。切勿紧靠火焰或加热时间过长，以防标本烤枯而变形。
环境工程微生物学一微生物细胞数的计数
一、目的
（1）了解细菌的涂片及染色在微生物学实验中的重要性。 （2）学会细菌染色的基本技术，从而掌握微生物的一般染色法和革兰氏染色法。
二、染色原理
由于微生物细胞含有大量水分，对光线的吸收和反射与水溶液的差别不大,机体是无色透明的，与周 围背景没有明显的反差,在普通光学显微镜下不易识别，必须对它们进行染色，使经染色后的菌体与背 景形成明显的色差，从而能更清楚地观察到其形态和结构。
先低倍观察，再高倍观察，并找出适当的视野后，将高倍镜转出，在涂片上加香柏油一滴，将油镜 头浸入油滴中仔细调焦观察细菌的形态。
五、实验内容与步骤
(二)细菌的革兰氏染色步骤 涂片→干燥→固定→初染→水洗→媒染→水洗→脱色→水洗→复染→水洗→干燥→观察
1. 涂片、固定 染色约1同简单染色法。 2. 初染 滴加草酸铵结晶紫染色液1-2滴，使染色液覆盖涂片，染色约1-2，水洗。 3. 媒染 滴加革兰氏碘液，染色约1-2，水洗。
革兰氏染色
紫色的是革兰氏阳性菌， 红色的是革兰氏阴性菌。
六、注意事项
1．革兰氏染色成败的关键是脱色时间，如脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为革兰氏阴性菌； 如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被误认为是革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片厚薄及乙醇用 量多少等因素的影响，难以严格规定。 2.染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后，应吸去玻片上的残水，以免染色液被稀释而影响染色效果。 3.选用幼龄的细菌。菌培养1216h，细菌培养24h。若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转 呈阴性反应。
七、思考题
1 ．作革兰氏染色涂片为什么不能过于浓厚？其染色成败的关键一步是什么？ 2 ．通过革兰氏染色，你认为它在微生物学中有何实践意义？
谢谢！
三、染色方法
(一)简单染色法 简单染色法又叫作普通染色法，只用一种染料使细菌染上颜色，如果仅为了在显微镜下看
清细菌的形态，用简单染色即可。
三、染色方法
(二)复染色法 用两种或多种染料染细菌，目的是为了鉴别不同性质的细菌，所以又叫鉴别染色法。主要的复染色
法有革兰氏染色法和抗酸性染色法。 革兰氏染色法：不仅能观察到细菌的形态，而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色
(一)细菌的简单染色 涂片→干燥（固定） →染色→水洗→干燥→镜检
3．染色 在涂片薄膜上滴加染色液(石炭酸复红、草酸铵结晶紫或美蓝任选一种)一滴，使染色液覆盖涂片，
染色约1。 4．水洗
斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。 5．干燥
用吸水纸吸去涂片边缘的水珠，置于室温下自然干燥或微热烘干。用吸水纸时切勿将菌体擦掉。 6．镜检
微生物细胞是由蛋白质、核酸等两性电解质及其他化合物组成。所以，微生物细胞表现出两性电 解质的性质。两性电解质兼有碱性基和酸性基，在酸性溶液中离解出碱性基呈碱性带正电。在碱性溶 液中离解出酸性基呈酸性带负电。
经测定，细菌等电点在2-5之间，故在中性、碱性或偏酸性溶液中，细菌的等电点均低于上述溶液 的值，所以细菌带负电荷，容易与带正电荷的碱性染料结合，故用碱性染料染色的较多。微生物体内 各结构与染料结合力不同，故可用各种染料分别染微生物的各结构以便观察。
(二)细菌的革兰氏染色步骤 涂片→干燥→固定→初染→水洗→媒染→水洗→脱色→水洗→复染→水洗→干燥→观察
4. 脱色 滴加体积分数为95%乙醇，约20-30S后即水洗，至流出的乙醇不现紫色为止；或滴加体积分数为95%乙 醇后将玻片摇晃几下即倾去乙醇，如此重复2-3次后即水洗。 5. 复染 滴加沙黄染液（番红）1-2滴，使染色液覆盖涂片，染色约2-3，水洗并使之干燥。 6. 镜检 同简单染色，并根据呈现的颜色判断该菌属是细菌还是细菌，紫色的是革兰氏阳性菌，红色的是革兰氏 阴性菌。