油脂、糖类、蛋白质的鉴定
糖类、脂质蛋白质的鉴定
(1)该同学试图通过上述实验解决什么问题?
_斐_林_试_剂_的_甲_液_和_乙_液_是_否_必_须_混_合_后_才_能_加_入_组_织_样_液_中
_(或_答_加_入_斐_林_试_剂_甲_液_和_乙_液_的_顺_序_是_否_可_以_改_变_) __;
_双__缩__脲__试__剂__是__否__可__以__用__于__可__溶__性__还__原__糖__的__鉴__定___________。
2mL苹果汁
1mL 0.1g/mL NaOH溶液
2mL苹果汁
1mL 0.1g/mL NaOH溶液
4滴 0.01g/mL CuSO4溶液
2mL苹果汁
1mL 0.05g/mL CuSO4溶液
1mL 0.05g/mL CuSO4溶液
1mL 0.1g/mL NaOH溶液
2mL苹果汁
2mL苹果汁
10
请分析回答下列问题:
17
(江苏卷)8.下列关于细胞中化合物及其 化学键的叙述,正确的是 A.tRNA分子中含有一定数量的氢键 B.每个ADP分子中含有两个高能磷酸键 C.血红蛋白中不同肽链之间通过肽键连接 D.DNA的两条脱氧核苷酸链之间通过磷酸 二酯键连接
18
(江苏卷)9.关于生物组织中还原糖的鉴定,下列 叙述正确的是(多选)( ) A.量取2mL斐林试剂时应优先选用5mL量筒而不用 10mL量筒 B.隔水加热时,试管中液体的液面应低于烧杯中水 的液面 C.在组织样液中加入斐林试剂后试管内液体呈现无 色,加热后变成砖红色 D.实验结束时将剩余的斐林试剂装入棕色瓶,以便 长期保存备用
9
试管 1号 2号 3号 4号 5号 6号
第1次加入物 第2次加入物 第3次加入物
1mL 0.1g/mL NaOH溶液
糖类脂肪蛋白质的检测
NaOH + CuSO4
Cu(OH)2 蓝色沉淀 + … …
Cu(OH) 2 + 还原糖
Cu 2 O 砖红色沉淀 + … …
3.为什么要用新配制的试剂? 因为斐林试剂稳定性较差,要现用现配,混合使用。
二、脂肪的鉴定 A:实验原理: 脂肪+苏丹III染液
橘黄色
脂肪+苏丹IV染液
红色
B:实验步驟 选材:花生种子最好,浸泡.
制备样液: 大豆----研磨------过滤
鉴定步驟:
0.01 g/ml的CuSO4溶液
b 再加双缩脲试剂B液
a 先加双缩脲试剂A液
0.1 g/ml的NaOH溶液, 先为实验制造碱性环境.
豆浆
蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应
① B液要求量适中,否则多余的B液将会与A液发生反应生 成Cu(OH)2显色而遮盖原有的颜色。
制备样品:花生去皮------切薄片.
鉴定:
d 显微镜观察
c 制片
花生切片
b 50%酒精漂洗 a 苏丹III染色
实验现象:脂肪+苏丹III染液
橘黄色
脂肪+苏丹IV染液
红色
显微镜
三 、 蛋白质的鉴定
A: 实验原理: 蛋白质+双缩脲试剂
紫色反应
B: 实验步驟:
选择:大豆豆浆或鸡蛋蛋白(稀释) ,鲜肝提取液.
葡萄糖果糖麦芽糖蛋白质斐林试剂苏丹染液双缩脲试剂橘黄色紫色蓝色水浴加热待检有机物颜色变化砖红色沉淀苏丹染液红色一还原糖的鉴定可溶性还原糖斐林试剂砖红色沉淀水浴加热葡萄糖果糖麦芽糖是
一、还原糖的鉴定
A:实验原理:
可溶性还原糖+斐林试剂
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
考点三 (实验)检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(5年6考)检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.检测原理(1)糖类的检测(2)脂肪的检测:脂肪+⎩⎨⎧苏丹Ⅲ染液―→橘黄色苏丹Ⅳ染液―→红色 (3)蛋白质的检测:蛋白质+双缩脲试剂―→紫色2.实验步骤3.实验成功关键点(1)三个实验中都不宜选取有颜色的材料,否则会干扰实验结果的颜色变化。
(2)由于苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液易溶于酒精,故可用体积分数为50%的酒精洗去浮色。
(3)蛋白质鉴定中,若用大豆作材料,必须提前浸泡;若用蛋清作材料,必须稀释,防止其黏在试管上不易刷洗。
(4)物质鉴定实验一般可预留部分样液作对照实验,若需进一步设立对照实验,对照组应加入成分已知的物质,如验证唾液淀粉酶是蛋白质,对照组可加入稀释的鸡蛋清溶液。
1.下图是检测还原糖的实验(1)如下图示的处理,2 min后试管内将呈现何种颜色?试加以分析说明。
(2)向某试管内无色液体中加入斐林试剂,经加热若出现砖红色沉淀,则表明试管内含有葡萄糖,对吗?提示(1)应为蓝色(斐林试剂的颜色,因未经水浴加热,只有将试管置于50~65 ℃温水中,经水浴加热后,方可呈现“砖红色沉淀”)。
(2)不对。
只能证明含有“还原糖”,不能具体证明是哪种还原糖。
2.下图为某种物质鉴定方案,请推测:(1)图示的实验方案用于鉴定何类物质,其中“某试剂”是什么?A液、B液分别指什么?(2)若溶液中有被检测物质则右侧试管“摇匀后”变成何种颜色?提示(1)蛋白质及多肽化合物;双缩脲试剂;A为0.1 g/mL NaOH溶液;B为0.01 g/mL CuSO4溶液。
(2)紫色。
糖类、脂肪与蛋白质的检测1.(2016·海南卷,15)下列实验中,加入试剂后不能产生特定颜色的是()A.取成熟香蕉匀浆,用斐林试剂检测还原糖B.黑暗中生长24 h的天竺葵叶片,用碘液检测淀粉C.玉米根尖经甲基绿染色后,在显微镜下观察细胞核D.花生子叶经苏丹Ⅲ染色后,在显微镜下观察脂肪颗粒解析成熟香蕉中含有较多葡萄糖,用斐林试剂检测会出现砖红色沉淀;黑暗中生长24 h的天竺葵叶片,淀粉被消耗,加入碘液不会产生蓝色;玉米根尖经甲基绿染色后,在显微镜下观察细胞核呈绿色;花生子叶经苏丹Ⅲ染色后,在显微镜下观察脂肪颗粒呈橘黄色。
糖类、蛋白质、脂肪的鉴定教学课件 (一)
糖类、蛋白质、脂肪的鉴定教学课件 (一)
糖类、蛋白质、脂肪是人体必需的营养成分,其在人体内发挥着极其重要的作用。
为了了解这些营养成分以及它们在各类食品中的含量和比例,需要对它们进行鉴定分析。
这里介绍一种关于糖类、蛋白质、脂肪的鉴定教学课件。
一、糖类
糖类是构成食品中最主要的营养元素之一。
在糖类的鉴定中,可以使用苯酚-硫酸法。
这种方法能够把醛糖和酮糖进行分离。
实验过程中,先将待测样品加入苯酚-硫酸混合液中,并对混合液进行加热处理,最终可通过紫外光谱法来检测糖类的存在。
二、蛋白质
蛋白质是维持人体生命活动的基本营养成分。
在蛋白质的鉴定中,主要采用两种方法:英氏试剂法和比色法。
英氏试剂法是利用一种含有铜离子的试剂对蛋白质进行鉴定,而比色法则通过测定还原草酸的反应来间接地鉴定蛋白质的存在。
三、脂肪
脂肪是构成人体的重要部分,同时也是延缓饥饿的重要物质。
在脂肪的鉴定中,有一种被称为鼠弟实验的方法。
这种方法主要利用鼠弟反应,采用氯酸盐和亚硫酸盐进行萃取和检测。
具体方法包括将待测样品与氯酸盐和亚硫酸盐混合后,采用浸泡、沉淀等方法来提取脂肪物质。
综上所述,糖类、蛋白质、脂肪的鉴定教学课件涵盖了具体的实验步骤、方法、原理等内容,并在课件中附上实验图示和详细的实验说明。
这个课件不仅可以让学生掌握鉴定这些营养成分的具体方法,也能帮
助他们对三种营养成分之间的关系有更为深刻的理解。
在实践中,这
个课件能够有效地提高学生的实验操作技能以及提高他们的实验数据
分析能力。
检测脂肪、蛋白质、糖类
砖红色沉淀
Байду номын сангаас
3、蛋白质+双缩脲试剂 、蛋白质+
紫色反应
二、实验材料: 实验材料: 鉴定的有机物 适宜材料 选用的材料 苹果汁 花生种子 豆 浆
含糖量较高、 含糖量较高、颜色为 可溶性还原糖 白色或近于白色的植 物组织
脂肪 蛋白质
富含脂肪的种子 富含蛋白质的 生物组织
∗ 深入原理 1.可溶性还原糖的鉴定原理 可溶性还原糖的鉴定原理: 1.可溶性还原糖的鉴定原理: 生物组织中常见的可溶性糖有葡萄糖 、 果糖、麦芽糖、 蔗糖。 生物组织中常见的可溶性糖有 葡萄糖、 果糖 、 麦芽糖 、 蔗糖 。 葡萄糖 前三种糖分子中都含有游离的具有还原性的半缩醛羟基 还原性的半缩醛羟基, 前三种糖分子中都含有游离的具有 还原性的半缩醛羟基 , 因此 还原性糖,而蔗糖的分子中没有,因此叫非还原性糖。 叫还原性糖,而蔗糖的分子中没有,因此叫非还原性糖。 斐林试剂与可溶性还原糖在加热的条件下 生成砖红色的 与可溶性还原糖在加热的条件下, 斐林试剂与可溶性还原糖在加热的条件下,生成砖红色的 沉淀。如用沸水浴加热, 沸水浴加热 沉淀颗粒较大,呈现砖红色 砖红色; Cu2O沉淀。如用沸水浴加热,Cu2O沉淀颗粒较大,呈现砖红色; 如用酒精灯直接加热, 沉淀颗粒较小,呈现黄色。 如用酒精灯直接加热,Cu2O沉淀颗粒较小,呈现黄色。
∗ 深入原理
2.蛋白质的鉴定原理: 2.蛋白质的鉴定原理: 蛋白质的鉴定原理
碱性溶液(NaOH) 双缩脲( 在 碱性溶液 ( NaOH ) 中 , 双缩脲 ( H2NCO NH- 能与Cu 作用, 可形成紫色 - NH - CONH2 ) 能与 Cu2 + 作用 , 可形成 紫色 或紫红色的络合物 这一反应称双缩脲反应 的络合物, 双缩脲反应。 或紫红色 的络合物,这一反应称双缩脲反应 。 凡在本身结构中具有双缩脲基的化合物, 凡在本身结构中具有双缩脲基的化合物,都能 进行双缩脲反应,这是特定的颜色反应。 进行双缩脲反应 ,这是特定的颜色反应。蛋白 质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键( 中含有很多与双缩脲结构相似的肽键 质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键(两 个相邻的肽键与双缩脲结构相似) 个相邻的肽键与双缩脲结构相似),因此又称为 肽键反应。 肽键反应。
2.3+组织中的糖类、脂肪和蛋白质的鉴定教案-2024-2025学年高一上学期生物人教版必修1
《生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质的鉴定》教学设计一、教材分析:本实验出自人教版生物必修1《分子与细胞》第二章“组成细胞的分子”第1节“细胞中的元素和化合物”,是高中生物课程中的第2个实验,也是第一个可以引导学生进行初步探究的实验,所以本实验的内容不仅可以进一步培养学生的实验操作能力,也可以为学生学习本章后续内容奠定感官与知识的基础,同时也能够培养学生进行科学探究的能力,使学生掌握科学探究的一般方法,为生物实验的设计与操作奠定基础。
二、教学目标:说明检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质的原理;掌握检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质的操作方法,探讨细胞中主要化合物的种类;初步学会并说出科学探究的一般过程;学会合作学习,形成良好的实验操作习惯;认同生命的物质性,感受科学探究的过程,形成严谨认真的科学态度。
三、教学重难点:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质的原理及操作,进行初步的科学探究过程。
四、实验原理:某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。
糖类中的还原糖(如葡萄糖、果糖),与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀。
脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹IV染液染成红色)。
淀粉遇碘变蓝色。
蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。
因此,可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反应,检测生物组织中糖类、脂肪或蛋白质的存在。
五、实验用品:斐林试剂,苏丹III染液,双缩脲试剂,碘液,小试管,试管架,试管夹,烧杯,滴管,酒精灯,石棉网,三脚架,火柴,鸡蛋,植物油,葡萄糖溶液,淀粉溶液,待测组织样液六、教学过程:1、引入,用生活中的现象引入本节实验课的教学,激发学生的学习兴趣。
2、实验原理及实验操作的讲解,规范学生的实验行为,提醒注意事项。
3、学生进行实验的操作,分组进行探究实验,食物中有机物种类的鉴定,适时给与指导。
4、实验总结,学生展示实验成果,汇总实验结果,总结食物营养成分的共性。
5、整理实验器材,还原实验室,养成良好的实验习惯。
高中生物必修1 实验:检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质
斐林试剂与双缩脲试剂的比较
斐 林 试 剂 双 缩 脲 试 剂
鉴定物质 成 分
可溶性还原性糖 甲液
0.1g/ml NaOH溶液
蛋白质或多肽 A液
0.1g/ml NaOH溶液
乙液
0.05g/ml CuSO4溶液
B液
0.01g/ml CuSO4溶液
添加顺序
甲、乙两液等量混合均 匀后再注入 (即现配现用) 水浴加热
实验原理
显色反应
有机物 糖类 淀粉
染色剂 颜色反应 碘液 蓝色
还原糖 斐林试剂 苏丹Ⅲ/Ⅳ 脂肪 双缩脲试剂 蛋白质
砖红色
橘黄的检测
(1)取一支试管1,注入2mL梨匀浆; (2)另取一支试管2,注入1mL斐林试剂甲液和1mL斐林试剂乙液,振荡, 混合均匀,制成斐林试剂; (3)将试管2中刚配制好的斐林试剂注入试管1中,振荡混匀; (4)将试管放入烧杯中水浴加热,观察颜色变化。
2、脂肪的检测
(1)取材:取一片花生切片,选择最薄切片放在载玻片中央; (2)染色:滴加2-3滴苏丹Ⅲ染液染色3分钟,用吸水纸吸去染液; (3)去浮色:再滴加1-2滴体积分数50%的酒精溶液,洗去浮色; (4)制片与观察:吸去酒精,滴加一滴清水,盖上盖玻片,制成临时装片, 在显微镜下找到子叶最薄处,寻找橘黄色脂肪颗粒
蛋白质鉴定原理
鉴定生物组织中是否含有蛋白质, 常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂。 在碱性溶液中,双缩脲能与Cu2+作用, 形成紫色或紫红色的络合物,这个反应叫双 缩脲反应。 由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结 构相似的肽键,因此蛋白质可与双缩脲试剂 发生颜色反应。
紫色
注意 双缩脲试剂A: 质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液 双缩脲试剂B: 质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液 使用时,先加入2ml双缩脲试剂A,振 荡摇匀;再加入3—4滴双缩脲试剂B。
糖类、蛋白质、脂肪的鉴定 (共15张PPT)-经典教学教辅文档
2步骤: (1)试管中加样液2mL (2)加双缩脲试剂A液2mL(造成碱性环境),摇匀 (3)加双缩脲试剂B液3-4滴,摇匀 (4)观察颜色变化(紫色) 注:①若用蛋清液作材料,必须稀释,防止其 黏在试管上不易刷洗。
②B液不能过量,多余的B液会与A液反应成蓝色,而掩盖生成的紫色。
比较斐林试剂和双缩脲试剂
常用字列表
作图元素 小区、业务平台等的表示图标,上面放终端或产品示意图
作图元素 立体部件化组合
数据库
作图元素
放一些财务数据或者市场份额(国内、国际)、产品归 类、组织结构之类的文字,反白字,加阴影。
TMG
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作图元素
产品示意图标,使用时标上名称。 (组网图不能使用产品实物图, 所以大家要善于运用此示意图标)
作图元素 立体部件化组合
数据库
作图元素
放一些财务数据或字,反白字,加阴影。
TMG
AGW
作图元素
产品示意图标,使用时标上名称。 (组网图不能使用产品实物图, 所以大家要善于运用此示意图标)
Soft X (CS)
策略管理服务器
SGW 信令网关
实验 生物组织中糖类脂肪和蛋白质鉴定
一、糖类鉴定 (1)实验原理: 化学试剂+有机化合物→特定的颜色
还原糖 + 斐林试剂 水浴加热砖红色沉淀 斐林试剂:甲液:0.1g/mL的NaOH溶液
乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液 使用注意事项:等量混合,现配现用( NaOH+CuSO4)
淀粉 + 碘→蓝色 用试管取2mL待测组织样液,向试管内滴加1~2滴碘液,观察颜色变化。
GK
C&C08 iNET
MSR多业务交换机 (ATM/IP/MPLS)
生物组织中还原糖,脂肪,蛋白质的鉴定
还原糖:指具有还原性的糖类,如葡萄糖、果糖等。
在生物组织中,还原糖可以通过加入斐林试剂或班氏试剂等物质来鉴定。
这些物质会将还原糖中的醛基或酮基还原成羟基,并产生颜色反应。
脂肪:指由甘油和脂肪酸组成的化合物,是生物体内的重要能量来源之一。
在生物组织中,脂肪可以通过加热或酸化等方式来鉴定。
加热可以使脂肪分解,产生挥发性物质;酸化则可以将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
蛋白质:指由氨基酸组成的生物大分子,是生物体内的重要结构蛋白和酶类。
在生物组织中,蛋白质可以通过加热、酸性溶液、碱性溶液等方式来鉴定。
这些方法可以破坏蛋白质的结构,使其失去原有的性质,从而确定其是否是蛋白质。
糖类、蛋白质、脂肪的鉴定
1.实验原理
生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
实验原理
鉴定物质 还原性糖
脂肪
蛋白质 淀粉
试剂 斐林试剂
苏丹Ⅲ 苏丹Ⅳ 双缩脲试剂
碘
实验现象
砖红色沉淀 橘黄色 红色 紫色 蓝色
方法步骤: 1.实验材料、仪器和试剂的选择 2.设计记录表格,记录预测结果 3.检测的方法步骤 (1)还原糖的检测和观察; (2)脂肪的检测和观察; (3)蛋白质的检测和观察;
D、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用
第二章组成细胞的分子 网络构建
蛋白质的结构和功能
细胞的分子组成
核酸的结构和功能
水和无机盐的作用
糖类的种类和作用
脂质的种类和作用
C、H、O、N 种类
20种
氨基酸 脱水缩合 多肽 化学键名称 肽键
氨基酸种类、数目、排列顺序、空间结构
蛋白质结构的多样性
蛋白质7~10%
显微观察:先在低倍镜下找到已着色的薄片,后用高倍镜观察
现象:有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒
脂肪的检测结果
3.蛋白质的鉴定
选材与制备 黄豆组织样液(或鸡蛋蛋清稀释液) 组织样液:[黄豆浸泡 →去皮→切片→研磨→过滤→滤液]
显 色 反 应 现象:
(创设碱性条件)
(提供Cu2+)
无色
紫色或紫红色
而后立即使用。
砖 红 色 沉
0.05g/mL
淀
在碱性
NaOH 浓度为
蛋白质 的鉴定
双缩脲试 剂NaOH和
CuSO4
环境下 的Cu2+
0.1g/mL
CuS04 浓度为
先加入Na0H 1mL,然后 再加CuS04 4滴,摇匀。 (不能过量)
糖类脂肪蛋白质的鉴定
VS
脂肪
是长期能量储存的形式,通过β-氧化产生 ATP。
生物功能比较
• 蛋白质:在能量需求增加时可以作为能量来源,通过脱氨基产生ATP。
生物功能比较
01
糖类
是细胞膜和细胞壁的重要组成成 分。
02
03
脂肪
蛋白质
是生物膜的组成成分,并参与信 号转导。
是细胞的主要结构成分和功能执 行者,参与细胞运动、物质运输、 催化反应等。
脂肪
由碳、氢、氧组成,是脂类。
化学性质比较
• 蛋白质:由碳、氢、氧、氮、硫组成,是 氨基酸的聚合体。
化学性质比较
糖类
单糖之间通过糖苷键连接,如α-1,4-糖苷键和α-1,6-糖苷键。
脂肪
脂肪酸之间通过酯键连接。
蛋白质
氨基酸之间通过肽键连接。
物理性质比较
要点一
糖类
易溶于水,尤其是单糖和低聚糖。
要点二
酸水解法
03
将样品中的糖类物质在酸的作用下水解成单糖,再通过化学反
应进行鉴定。
物理鉴定
色谱法
利用色谱柱将糖类物质与其他物质分 离,通过检测器检测糖类物质的峰, 判断糖的存在。
红外光谱法
利用红外光谱技术检测样品中糖类物 质的特征吸收峰,判断糖的存在。
生物鉴定
酶法
利用酶与糖类物质反应,生成可被检测的产物,通过检测产物判断糖的存在。
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酯化反应
脂肪分子中的羧基可以与醇发生酯化反应,生成 酯类化合物,通过测定酯的生成量,可以判断脂 肪的存在。
物理鉴定
折射率法
脂肪分子中含有大量的碳、氢等元素, 对光线的折射率较高,可以通过测定 折射率的大小来判断脂肪的存在。
糖类脂肪蛋白质的鉴定
③刀口向内,与花生断面平行,以均匀的动作,
自左前方向右后方快速拉刀,滑行切片(注意 要整个臂部用力,而不要腕部用力。)如此连
续动作,切下一些薄片。
(2)染色
用毛笔将最 薄的几片材料移至洁净的载玻片的 中央→滴苏丹Ⅲ溶液2-3滴于花生子叶薄片上→21min后,吸去染液→滴50%的酒精洗去浮色→吸去 多余酒精→再滴1-2滴蒸馏水→盖上盖玻片,制成 临时装片。
R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O
2.实验材料
做可溶性还原糖的鉴定实验,还原糖 的含量、生物组织有无色素是影响实验结 果及其观察的最重要因素。
因此要选用可溶性还原糖含量高、 白色或近于白色的植物组织,其中以 苹果、梨最好,也可用白萝卜替代。
3.试剂配制 甲液(0.1g/mL的氢氧化钠溶液)
2.实验材料 做蛋白质的鉴定实验,一般选用蛋白质
含量较高的大豆(可用豆浆替代)或鸡蛋清。 3.试剂配制
A液(0.1g/mL的氢氧化钠溶液) 双缩脲试剂
B液(0.01g/mL的硫酸铜溶液)
4.实验步骤:
(1)制备生物组织样液(教师制备) (2)鉴定
先加 2mL组 织样液
再加 2mL双 缩脲试 剂A液
(3)镜检鉴定
在低倍镜下观察,找到花生子叶切片的 最薄处(最好只有1-2层细胞),移至视野 的中心→换用高倍镜观察,调焦至最清晰。 可发现细胞内橘黄色的圆形小颗粒,这就是 脂肪滴(油滴)。若发现观察物外围也有许 多橘黄色小颗粒,则是脂肪跑了出来。
脂肪检测实验的实验结果
若用物理方法如何鉴定脂肪的存在?
斐林试剂 乙液(0.05g/mL的硫酸铜溶液)
甲液乙液等量混合,现用现配, 切不可分开滴加,或者久置后 才用。
实验:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
思考:
1.为什么加入斐林试剂甲液和斐林试剂乙液 时必须混合后再加入? 因为若先加入NaOH溶液,还原性糖中的还 原性半缩醛羟基易被氧化而失去还原性, 再加入CuSO4溶液后不能产生Cu2O砖红色 沉淀,只有将其先配成Cu(OH)2悬浊液, 才可产生砖红色沉淀。
6
2.斐林试剂甲液和乙液既然混合后使 用,为什么不能在实验前配制好,一 定要使用时临时配制?
2
二.目的要求:
尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、 脂肪和蛋白质
三.实验过程:
1、还原糖的检测和观察: 选材 应该选择含 糖 量高.颜色为 白色或近于白色 的植物组织, 以苹果.梨为最好。
制备组织样液:制浆 过滤
用一层纱布
取液
3
注入2mL 苹果组 呈色反应 织样液
振荡、混 合摇匀呈 现蓝色
注入1mL刚配制好的 斐林试剂 甲乙液等量混匀现配现用
B液要求量适中,否则多余的B液将会与A液发生反应生成大 量蓝色Cu(OH)2沉淀而遮盖试验中所产生的紫色。同样为了防 止生成较Cu(OH)2沉淀遮蔽实验结果,在配制溶液时,双缩脲试剂B比
斐林试剂乙液浓度小得多,这也是斐林试剂和双缩脲试剂不能互换使用的道 理。 ② 鉴定前,留出一部分组织样液,以便对比。 13 ③用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释,以免实验后粘住试管壁,不易洗刷
水浴加热约2min 变成砖红色 50----650C的温水
结论:可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过
程中生成砖红色沉淀,说明植物组织 样液中含有还原糖。
4
注意事项: ①还原糖有 葡萄糖,果糖,麦芽糖 。 ②试剂: 斐林试剂 . (甲液:0.1g/ml 的 NaOH , 乙液:0.05g/ml的 CuSO4 .) 甲乙液必须 等量混合均匀 后再加入样 液中, 现配现用 。 ③必须 用水浴加热 。 ④颜色变化: 浅蓝色 棕色 砖红色
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
约2min50~65℃水浴加热三、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.实验原理:某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。
①还原糖+斐林试剂———————>砖红色沉淀②淀粉+碘液→蓝色③脂肪+苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)→橘黄色(或红色) ④蛋白质+双缩脲试剂→紫色2.实验步骤及实验现象:①还原性糖鉴定:取材→制备组织样液→加斐林试剂1ml →水浴加热煮沸→显色(浅蓝色→棕色→砖红色沉淀) ②淀粉鉴定:取材→制备组织样液(马铃薯匀浆)→滴加碘液→摇匀后变成蓝色③脂肪鉴定:方法一:取材与制备组织样液(花生种子匀浆)→滴加苏丹Ⅲ(苏丹Ⅳ)→摇匀后变成橘黄色(红色) 方法二:取材、切片、制片:花生种子浸泡,将子叶切成薄片→滴加苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)→用50%酒精洗去浮色→镜检(看到橘黄色或红色的脂肪颗粒)④蛋白质鉴定:取材→制备组织样液(豆浆或蛋清稀释液)→加双缩脲试剂A 液1ml →摇匀→加双缩脲试剂B 液4滴→观察颜色(紫色)3.实验注意事项:(1)从植物器官中提取糖类、脂肪、蛋白质的方法:设法使细胞破碎(如研磨、挤压或切割等),再将这些物质提取出来。
(2)禾谷类的果实、种子中含淀粉较多;甘蔗的茎和甜菜的根含蔗糖较多;花生、芝麻的种子中含脂质较多;大豆种子中含蛋白质较多。
(3)显色反应材料选择时要注意:①材料本身应浅色,以免对实验结果的观察产生干扰; ②材料应含有丰富的相关物质,使现象更显著。
(4)还原性糖鉴定①常见的还原糖有葡萄糖、果糖、半乳糖、麦芽糖、果糖、乳糖等。
②实验材料要选含还原性糖量高,白色或近于白色的组织,如苹果和梨的匀浆。
③不能选用甜菜、甘蔗,因为它们所含的蔗糖属于非还原性糖。
④马铃薯含淀粉较多,也不能作为该实验材料。
⑤西瓜、血液、绿色叶片等材料本身的颜色会对实验结果造成干扰,也不能作为该实验材料。
⑥斐林试剂实际上是Cu(OH)2的悬液,不稳定,如果长时间放置,Cu(OH)2悬液会变成Cu(OH)2沉淀,不易和还原糖发生反应。
实验:三大物质鉴定
双缩脲试剂 A液
0.1g/mL的 NaOH溶液
B液
0.01g/mL的 CuSO4溶液
成分
鉴定物质
0.1g/mL的 NaOH溶液
还原性糖
甲液和乙液等量混合均匀 后再加入
蛋白质
先加双缩脲试剂A液1mL,摇 匀,再加双缩脲试剂B液4滴
添加顺序 方法
反应原理 反应条件
还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化,具有两个以上肽键的化合物在碱 Cu(OH)2被还原成Cu2O 性条件下与Cu2+反应生成络合物
使用方法:
先混合再加入糖中 ( NaOH+CuSO4)
还原糖的பைடு நூலகம்定原理:
可溶性还原糖与斐林试剂发生作用, 可生成砖红色的Cu2O沉淀。
CH2OH–(CHOH)4–CHO+2Cu(OH)2 → CH2OH–(CHOH)4–COOH+ Cu2O↓+ 2H2O (葡萄糖) (浅蓝色) (葡萄糖酸) (砖红色)
样液制备(取材 5g,加入石英砂和 5ml水) → 取样液 2ml 于试管中 → 加入新配制的斐林试剂 1ml (甲液和 乙液等量混合均匀后再加入)→水浴加热2min左右→ 观察颜色变化(浅蓝色→棕色→砖红色)
2.蛋白质 + 双缩脲试剂 → 紫色
双缩脲试剂:
A液:0.1g/mL的NaOH溶液 B液:0.01g/mL的CuSO4溶液
脂肪
蛋白质 淀粉
花生
豆浆 鸡蛋清 马铃薯
橘黄色脂肪滴 红色脂肪滴 紫色
碘液
蓝色
例题:
1.可用于鉴定生物组织中可溶性还原糖的试剂( A.斐林试剂 B.双缩脲试剂 C.苏丹Ⅲ染液 D.苏丹Ⅳ染液
A)
2.下列糖中能与斐林试剂反应产生砖红色沉淀的是( B) A.淀粉 B.果糖 C.蔗糖 D.纤维素 3.下列哪个实验用到显微镜( C ) A.可溶性还原糖的鉴定 B.蛋白质的鉴定 C.脂肪的鉴定 D.淀粉的鉴定
油脂糖类蛋白质的鉴定
第二页
生物组织中有机化合物的鉴定
还原糖的鉴定
• 方法步骤与实验现象 制备生物组织样液 向试管内注入组织样液 注入刚配制的斐林试剂 蓝色 沸水浴2min 蓝色→棕色→砖红色沉淀
• 结果分析 该组织样液中含有还原糖
第三页
还 原 糖 检 测 实 验 的 实 验 结 果
第四页
生物组织中有机化合物的鉴定
脂肪的鉴定
• 原理 某些化学试剂能够使生物组织中的有 关有机化合物,产生特定的颜色反应
• 材料 富含脂肪的种子(花生) • 试剂 苏丹Ⅲ染液(橙黄色)
苏丹Ⅳ染液(红色) 50%的酒精溶液 蒸馏水
第五页
生物组织中有机化合物的鉴定
脂肪的鉴定
• 方法步骤 • 浸泡种子 • 切组织薄片(1~2mm) • 组织薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ染液染色2~3min • 吸去染液,滴50%的酒精溶液1~2滴,洗去浮色 • 吸去酒精,滴蒸馏水,盖盖玻片,制成临时装片 • 先用低倍镜,再用高倍镜观察颜色变化
油脂糖类蛋白质的鉴定
第一页
生物组织中有机化合物的鉴定
还原糖的鉴定(葡萄糖、果糖)
• 原理 某些化学试剂能够使生物组织中的
有关有机化合物,产生特定的颜色反应
• 材料 含糖量较高,颜色近于白色的植物组 织(苹果 梨)
• 试剂 本尼迪特试剂 斐林试剂:0.1g/mL的NaOH溶液(甲 液)和0.05g/mL的CuSO4溶液(乙液),
第八页
生物组织中有机化合物的鉴定 蛋白质的鉴定
方法步骤 • 制备生物组织样液(豆浆),
制备蛋白质稀释液 • 向试管内注入组织样液或蛋白质稀释液2mL • 加入A液2mL,振荡均匀 (不变色) • 加入B液3~4滴,振荡均匀 (紫色)
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蓝色
热水浴 还原糖(葡萄糖、果糖) +本尼迪
特试剂 2-3min
油脂 +苏丹Ⅲ染液
橙黄色
砖红色
蛋白质 +双缩脲试剂A +双缩脲试剂B DNA +甲基绿 30℃水浴 蓝绿色 RNA +派洛宁 30℃水浴 红色
紫色
生物组织中有机化合物的鉴定
还原糖的鉴定
• 方法步骤与实验现象 制备生物组织样液 向试管内注入组织样液 注入刚配制的斐林试剂 蓝色 沸水浴2min 蓝色→棕色→砖红色沉淀
• 结果分析 该组织样液中含有还原糖
还 原 糖 检 测 实 验 的 实 验 结 果
生物组织中有机化合物的鉴定
脂肪的鉴定
• 原理 某些化学试剂能够使生物组织中的有 关有机化合物,产生特定的颜色反应
脂 肪 检 测 实 验 的 实 验 结 果
生物组织中有机化合物的鉴定
蛋白质的鉴定
• 原理 某些化学试剂能够使生物组织中的有 关有机化合物,产生特定的颜色反应
• 材料 大豆种子(豆浆) 鸡蛋清 • 试剂 双缩脲试剂:0.1g/mL的NaOH溶液(A
液)和0.01g/mL的CuSO4溶液(B液)
生物组织中有机化合物的鉴定
生物组织中有机化合物的鉴定
还原糖的鉴定(葡萄糖、果糖)
• 原理 某些化学试剂能够使生物组织中的 有关有机化合物,产生特定的颜色反应
• 材料 含糖量较高,颜色近于白色的植物组 织(苹果 梨)
• 试剂 本尼迪特试剂 斐林试剂:0.1g/mL的NaOH溶液(甲 液)和0.05g/mL的CuSO4溶液(乙液), 用前配制(4~5滴乙液+2mL甲液)
蛋白质的鉴定
方法步骤 • 制备生物组织样液(豆浆),
制备蛋白质稀释液 • 向试管内注入组织样液或蛋白质稀释液2mL • 加入A液2mL,振荡均匀 (不变色) • 加入B液3~4滴,振荡均匀 (紫色)
蛋 白 质 检 测 实 验 的 实 验 结 果
• 四类有机化合物:糖类、脂质、蛋白质和核酸。
淀粉 +碘液
• 材料 富含脂肪的种子(花生) • 试剂 苏丹Ⅲ染液(橙黄色)
苏丹Ⅳ染液(红色) 50%的酒精溶液 蒸馏水
生物组织中ห้องสมุดไป่ตู้机化合物的鉴定
脂肪的鉴定
• 方法步骤 • 浸泡种子 • 切组织薄片(1~2mm) • 组织薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ染液染色2~3min • 吸去染液,滴50%的酒精溶液1~2滴,洗去浮色 • 吸去酒精,滴蒸馏水,盖盖玻片,制成临时装片 • 先用低倍镜,再用高倍镜观察颜色变化