病理生理设计性实验

缺氧实验（一）

【目的要求】1．学习复制动物缺氧病理模型的方法，掌握不同缺氧类型主要的发病原因和机制。2．观察不同类型缺氧时呼吸、皮肤粘膜颜色、活动以及氧分压的改变。3．了解机体功能、代谢特点与缺氧对机体影响的关系。【实验原理】不同的缺氧条件均可造成动物的缺氧状态，并表现出相应的机…

【目的要求】

1．学习复制动物缺氧病理模型的方法，掌握不同缺氧类型主要的发病原因和机制。

2．观察不同类型缺氧时呼吸、皮肤粘膜颜色、活动以及氧分压的改变。

3．了解机体功能、代谢特点与缺氧对机体影响的关系。

【实验原理】

不同的缺氧条件均可造成动物的缺氧状态，并表现出相应的机能代谢改变。但动物的不同年龄、不同机能状态，对缺氧的耐受能力也不尽相同。

【实验动物】

1．体重相近的小白鼠6只。

2．新生幼鼠1只。

【药品与器材】

钠石灰、玻璃珠、7%柠檬酸钠溶液、CO、2%亚硝酸钠、0.04%氰化物、蒸馏水、测氧仪、天平称、手术器械一套、试管、5ml注射器、青霉素小瓶、广口瓶、三角烧瓶。

【实验项目、步骤与观察指标】

1．年龄因素对缺氧耐受性的影响

（1）取新生幼鼠1只，放入青霉素小瓶内（瓶口塞以少量棉花以免成年鼠伤害），然后将其与成年鼠一起放入广口瓶内，观察动物一般状况。

（2）密闭瓶塞，记录时间，观察两鼠状况。

（3）记录两鼠死亡时间。注意，当其中一只小鼠死亡后，不能揭开瓶盖；如另一鼠至各项实验结束时仍未死亡，实验也应中止。

2．低张性缺氧实验

（1）用天平称重小鼠，取体重相近的2只小白鼠（体重相差<1g），分别投入钠石灰瓶（A）和玻璃珠瓶（B）内，在观察它们一般的活动状况后，同时密闭两只玻璃瓶，并开始计时。观察过程中必须经常注意瓶子的密闭性。

观察要点：两鼠在瓶内的活动度、呼吸、皮肤粘膜的颜色等变化，每3min记录一次，在其中一只小鼠死亡时，记录死亡时间，并做下步骤操作。

（2）立即用5ml注射器同时地从连接两只瓶子的乳胶管部位分别抽取约2ml气体，在注意固定注射针与注射器连接部位的情况下拔出注射针，并立即将注射针插入软木塞使抽取的气体与外界空气隔绝。经测氧仪测定A、B瓶内当时的氧分压。在持续保存两瓶密封的条件下继续观察另一未死亡小鼠的活动情况。在该鼠死亡时立即记录死亡时间，并同上述要求再次抽取A、B两瓶内的气体，测量氧分压。

比较A、B两只小鼠在不同密闭空间内存活时间的差别，以及与两鼠各自死亡时它们周围气中O2量消耗的差异。

（3）尸检：当两小鼠都死亡后，取其中1只小白鼠，打开胸腔，观察内脏颜色并与以下各项实验后小鼠尸检作比较。

开胸后，剪破心脏，用吸管滴入2滴7%柠檬酸钠溶液，迅速混匀，取出2滴，滴入盛有

5ml蒸馏水的试管内，立即用软木塞盖紧，摇匀，观察试管内溶液的颜色，并与以下各项实验后制备的同种溶液作比较。

注：以下每个实验都有尸检这一步，以便比较不同原因所致缺氧时血液颜色的差异。所以，每次取血都应该尽量做到操作的“标准化”，如加入柠檬酸钠溶液的量和吸取抗凝血液的量（2滴，滴管口径粗细不同，2滴血液量多少可明显有差异）等。另外，放入血液的蒸馏水试管应立即用软木塞盖紧。）

3．一氧化碳中毒

（1）取1只小白鼠观察其正常时的活动、腹式呼吸的频率等。

（2）将其放入烧瓶内，瓶内放入通入家用煤气的装置，通入煤气的玻璃管插入盛水的试管内，以试管内水中放出的气泡数调节通气量，气泡产生速度控制在10个/min左右，通气速度过快，可使小鼠所在三角量烧瓶内的CO浓度迅速增高，导致动物迅速死亡而影响血液颜色发生明显变化。记录通气时间和速度，观察实验小鼠一般状况的变化，直至死亡，再记录时间。

（3）观察记录死亡小白鼠其尾巴、耳朵、口唇颜色的改变。

（4）尸检（方法同实验第2项），并与其他实验动物比较。

4．亚硝酸钠中毒

（1）取1只小白鼠，称重，观察其一般状况。

（2）皮下注射2%亚硝酸钠，用量为0.35ml/10g体重，记录时间。

（3）观察实验小鼠一般状况的改变，直至死亡，记录时间。

（4）尸检（方法同实验第2项），并与其他实验动物比较。

5．氰化钾中毒

（1）取1只小白鼠，称重，观察其一般状况。

（2）腹腔注射0.04%氰化物（具体操作过程，可见P58），用量为0.2ml/10g体重，记录时间。

（3）观察实验小鼠一般状况的改变，直至死亡，记录时间。

（4）尸检（方法同实验第2项），并与其他实验动物比较。

【注意事项】

1．实验1、2所用广口瓶的容量应一致，瓶口须能密闭不漏气，以防因瓶内空间容积不同和漏气影响实验结果。

2．记录时间要准确，以便进行实验结果分析。

3．氢化物有剧毒，勿沾染皮肤、粘膜，特别是有破损处。

4．一氧化碳有毒，防止其过度溢出。

5．在血液颜色的对比观察时，试管应事先编号，以免搞错。另外，心脏取血的量要尽可能一致，否则造成溶液颜色对比性下降。

【思考题】

1．不同年龄动物对缺氧耐受性有何不同？分析其原因。

2．本实验中各种类型缺氧的原因和发病机制是什么？

3．各种缺氧时，小鼠口唇黏膜、耳、尾及血液颜色的改变为何不同？

4．如果发生煤气，对中毒者进行早期抢救处理的原则应注意什么？

5．亚硝酸钠中毒引起缺氧时，有哪些具有针对性的抢救治疗措施？