关于细菌培养基中的NaCl的作用

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高二生物微生物的培养与应用试题答案及解析

高二生物微生物的培养与应用试题答案及解析1.某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。

下列叙述正确的是A．培养基分装到培养皿后进行灭菌B．转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C．接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D．培养过程中每隔一周观察一次【答案】B【解析】在配制培养基的过程中要先灭菌后分装，A错误；转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌再进行划线，B正确；接种后放置在恒温培养箱中进行培养，C错误；培养过程中一般要隔天观察一次，D错误。

【考点】微生物的分离和培养【名师】本题提醒学生要注意细节，如培养基的制备、灭菌的方法、接种方法的选择、结果的分析等，需要考生在平时的学习过程中注意积累，学会构建知识网络结构，对选项作出准确的判断。

2.下列微生物的产物中没有菌种特异性的一组是A．氨基酸、核苷酸、多糖、色素B．多糖、脂类、维生素、抗生素、氨基酸C．核苷酸、多糖、维生素、毒素、抗生素D．核苷酸、维生素、多糖、脂类、氨基酸【答案】D【解析】对于不同的微生物来说，初级代谢途径是一样的，产生的物质也不具有特异性，而在不同微生物体内次级代谢的途径是千差万别的，因此产物也各不相同，表现出特异性。

色素属于次级代谢产物，A错误；抗生素属于次级代谢产物，B错误；毒素、抗生素属于次级代谢产物，C错误；核苷酸、维生素、多糖、脂类、氨基酸都属于初级代谢产物，没有菌种特异性，D正确。

【点睛】解答本题的关键是了解到初级代谢产物是没有菌种的特异性的，而次级代谢产物有菌种特异性，并识记常见的次级代谢产物。

3.某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验，实验包括制备培养基、灭菌、接种、培养及菌落观察与计数，请回答与此实验相关的问题：(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了__________和__________。

除此之外，培养基还必须含有的基本成分是__________和__________。

(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是___________________________________。

微生物的培养和应用(含答案)

课题2 微生物的培养和应用一、培养基（1）培养基成分必须添加：碳源、氮源、水、无机盐；根据需要添加：特殊营养物质(又称生长因子，包括：氨基酸、维生素、碱基等)1.下列属于微生物不可缺少的微量有机物有( )①牛肉膏②蛋白胨③氨基酸④维生素⑤碱基A.①②③B.②③④C.②③④⑤D.③④⑤2．可以作为硝化细菌碳源、氮源及能量来源的物质依次是（）A.含碳有机物、氨、光B.含碳无机物、氮、氮C.含碳有机物、氨、氨D.含碳无机物、氨、氨3.下列叙述错误的是（）Ａ.培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素Ｂ.培养霉菌时需将培养基的PH调至碱性Ｃ.培养细菌时需将PH调至中性或微碱性Ｄ.培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件4.关于微生物的营养，说法正确的是（）A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源B.凡是碳源都能提供能量C.除水以外的无机物仅能提供无机盐D.无机氮源也可能提供能量5．下列对四种微生物相关的叙述，错误的是（）A．CO2和NH3分别是硝化细菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自NH3的氧化B．CO2和硝酸盐分别是褐藻的碳源和氮源，该生物所需的能源来自太阳能C．糖类和N2是乳酸菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自乳酸的氧化分解D．葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源，但CO2一定不是酵母菌的碳源(2)培养基的分类A.根据物理性质分为：固体培养基和液体培养基B.根据用途分：选择培养基：只允许目的微生物生长鉴定培养基：使目的微生物形成特殊的特征通用培养基：所有微生物都能生长C.根据成分分为：天然培养基和合成培养基6.要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（）A.固体培养基B.液体培养基C.加入青霉素的培养基D.加入高浓度食盐的培养基7.从土壤中分离能分解尿素的细菌，可以利用选择培养基，其成分中一定有（）①尿素②有机氮化物③无机盐④有机碳化物⑤水⑥无机碳化物A.①③④⑤B.②③④⑤C.①③⑤⑥D.②③⑤⑥8.甲、乙、丙是三种微生物，下表I、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。

lb培养基配方

lb培养基配方LB培养基是由Bertani于1951年开发的一种常用的培养基。

它是一种富含营养物质的培养基，适用于多种细菌的生长和培养。

LB培养基常被用于细菌的培养和研究中，提供了细菌生长所需的营养物质和能量来源。

下面是LB培养基的配方和制备方法。

配方如下：1. 十氯酸钾（KClO₃）：0.05 g/L2. 酵母浸粉（Yeast extract）：5 g/L3. 蛋白胨（Peptone）：10 g/L4. 氯化钠（NaCl）：10 g/L5. 水：适量制备方法：1. 将酵母浸粉、蛋白胨和氯化钠加入适量的水中，搅拌溶解。

2. 加入十氯酸钾，继续搅拌混合。

3. 将溶液加热至沸腾，然后冷却至室温。

4. 调整溶液的pH值为7.0（如果需要）。

5. 用适当的容器（如试管或烧杯）装载培养基，然后用自动灭菌器（如高压灭菌器）进行灭菌。

注意事项：1. 在制备培养基时，要注意实验室卫生和操作规范，避免污染和交叉感染。

2. 使用无菌的工具和容器，避免微生物的污染。

3. 制备后的培养基应保持在适当的温度和环境条件下，以确保细菌的生长。

4. 若长时间存储，建议将培养基分装于适当的容器中，并密封保存在低温（如4℃）的冰箱中。

总结：LB培养基是一种简单易制备、适用范围广的细菌培养基，提供了细菌所需的营养物质和环境。

其配方简单，制备方法方便，常被广泛应用于生物学研究和实验室中的细菌培养。

请注意，以上为LB培养基的一般配方和制备方法，具体使用时还需根据实验需要进行调整和优化。

同时，个人在实验室操作时应遵循相关的实验安全规范和操作规程，确保实验的顺利进行。

氯化钠化学试剂

氯化钠（NaCl）是一种常见的化学试剂，也被称为食盐。

它由钠离子（Na+）和氯离子（Cl-）组成，是一种白色晶体或粉末。

氯化钠在化学实验中有多种用途，包括但不限于以下几个方面：
- 电解质：氯化钠在溶液中离解成钠离子和氯离子，因此它可以作为电解质参与电化学反应。

- 培养基：氯化钠常用于制备细菌和细胞培养的培养基，提供细胞生长所需的离子环境。

- 沉淀剂：在一些化学分离和提纯过程中，氯化钠可以作为沉淀剂，使某些化合物从溶液中沉淀出来。

- 反应物：氯化钠可以参与一些化学反应，例如与银离子（Ag+）反应生成氯化银（AgCl）沉淀。

大肠杆菌培养和分离

大肠杆菌培养和分离超净台实验准备工作2灭菌和消毒无菌操作目的：为了避免被杂菌污染。

1对实验操作空间：超净台：紫外线灭菌，过滤风桌面：酒精擦拭，酒精灯外焰附近操作2.操作者衣服和手进行：清洁和消毒，70%酒精3.避免已灭菌处理的材料用具和周围物品的接触消毒的方法1、100℃煮沸5-6min2、巴氏消毒法70-75℃下煮30min或80℃下煮15min3、用70%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒4、氯气、高锰酸钾消毒……（1）消毒：利用化学或物理方法，杀死大部份致病微生物的过程。

消毒与灭菌的区别（2）灭菌：灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。

以化学剂或物理方法消灭所有微生物，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒，而达到完全无菌的过程。

实验1大肠杆菌的培养和分离超净台上紫外灯和过滤风实验过程：准备阶段：1培养基的配制，2灭菌和消毒操作阶段：1倒平板：分装固体培养基倒平板：将已灭菌的固体培养基倒入培养皿的过程。

分装培养基：1倒平板：将灭菌后的固体培养基倒入培养皿培养基冷却到60度时倒入2培养基的分装（试管，三角瓶，培养皿）倒入三角瓶和试管（漏斗法）1.培养基灭菌后，需要冷却到60℃左右时，才能用来倒平板。

你用什么办法来估计培养基的温度？答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。

2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。

朊病毒就是蛋白质病毒，是只有蛋白质而没有核酸的病毒。

1997年诺贝尔医学/生理学奖的获得者美国生物学家斯垣利·普鲁辛纳(S.B.Prusiner)就是由于研究朊病毒作出卓越贡献而获此殊荣的。

细菌细胞壁的主要成分是肽聚糖，它使得这层壁坚韧并富有弹性。

一旦失去细胞壁，所有的细菌都将变成球形。

细菌细胞壁的主要功能是保护细胞、维持细胞形状、协助鞭毛运动等，而且还与细菌的抗原性、致病性和对噬菌体的敏感性有关。

食品微生物习题库(含答案)

食品微生物习题库（含答案）一、单选题（共90题，每题1分，共90分）1、真菌( )。

A、比细菌能在水分活性较低下生长。

B、比细菌能在水分活性高下生长C、在中等的水分活性下生长。

D、在A、B两项中生长。

正确答案：A2、细菌芽胞抗热性强是因为含有:( )A、胞壁酸B、氨基酸C、聚–ß -羟基丁酸D、2,6-吡啶二羧酸正确答案：C3、接种环常用的灭菌方法是___A、火焰灭菌B、间歇灭菌C、高压蒸汽灭菌D、热空气灭菌正确答案：A4、酵母菌细胞壁的主要成分为A、几丁质B、葡聚糖和甘露聚糖C、纤维素D、肽聚糖,磷壁酸正确答案：B5、菌膜是微生物( )培养特征A、固体平板B、液体表面C、明胶穿刺D、固体斜面正确答案：B6、酵母菌属于( )微生物。

A、微厌氧型B、兼性厌氧型C、好氧型D、厌氧型正确答案：B7、下列发酵属于好氧性发酵作用的是( )。

A、柠檬酸发酵B、乳酸发酵C、酒精发酵。

D、丙酮丁醇发酵正确答案：A8、碳素营养物质的主要功能是:( )A、构成细胞物质B、提供能量C、A,B 两者正确答案：C9、下列微生物中不能利用分子氮的是A、圆褐固氮菌B、根瘤菌C、霉菌D、弗兰克氏菌正确答案：C10、细菌的主要繁殖方式为____A、增殖B、都对C、芽殖D、裂殖正确答案：D11、测空气中微生物数量的方法通常采用:( )A、稀释培养法B、滤膜培养法C、稀释平板法正确答案：B12、直接显微镜计数法用来测定下面所有微生物群体的数目,除了( )之外。

A、真菌孢子B、细菌C、原生动物D、病毒正确答案：D13、在原核微生物细胞中单糖主要靠( )途径降解生成丙酮酸。

A、EDB、HMPC、EMP正确答案：C14、向培养基中加入水果汁培养酵母菌,此培养基属( )A、加富培养基B、鉴别培养基C、基础培养基D、选择培养基正确答案：A15、细菌荚膜是细菌( )。

A、细胞膜伸入原生质中的部分B、细胞膜的一部分C、细胞壁和细胞膜间的一层膜结构D、细胞的特殊结构之一正确答案：C16、土壤中三大类群微生物以数量多少排序为A、细菌>真菌>放线菌B、真菌>细菌>放线菌C、细菌>放线菌>真菌D、放线菌>真菌>细菌正确答案：C17、( )不是原核生物和真核生物的细胞膜跨膜运动的方法。

API 20E (20100)使用说明

- 在 MacConkey(McC)培养基上的生长； - 葡萄糖氧化型(OF-O)； - 葡萄糖发酵型(OF-F)。根据相同的原理，将相应的反应编码，则得到一个 9 个位数的编码。
附加试剂: TDA (Ref. 70400)
JAMES (Ref. 70540)
VP 1 (Ref. 70420)
VP 2 (Ref. 70430)
NIT 1 (Ref. 70440)
NIT 2 (Ref. 70450)
OX
(Ref. 70460)
－Zn 试剂 (Ref. 70380)
－石腊油 (Ref. 70100)
试验条的接种用吸管将细菌悬液充满檬酸CIT、VP各GEL管；其它管仅充满管部(不是杯部)； ADH、LDC、URE、ODC和H2S，则用矿物油覆盖；盖上盖子，孵育於 35~37°C 18~24 小时。於周未孵育：API 20 E的生化反应需於孵育 18-24 小时後判读，如无法进行试条需於温箱取出并置於 2-8°C直至可以进行判读。
试验条的准备：准备一个培养盒（盘和盖子），倒入约 5ml 水於盘的蜂窝小凹中，造成一个湿室。记菌株资料於盘的边沿部分。从包装中取出试验条放到盘中。进行 Oxidase 氧化酶检测:
- 在玻片上放上张滤纸片。 - 在滤纸上滴一滴水。 - 取一个菌落涂在滤纸上。 - 加一滴 OX 试剂 - 如於 1 至 2 分钟内呈现深紫色，则为阳性反应。
储存试剂。
4. Zn 附加试剂－打开小瓶－取大约 2-3mg Zn 粉未,使用小刮铲将粉未加入
反应小管. －使用试剂後，拧紧瓶盖，根据"试剂的储藏"一栏，
储存试剂。
警告及留意事项：
只供体外诊断用。合格检验科工作人员应采用无菌操作方法并防范带传染性物质。不应用口吸取标本或试剂。

微生物学习题及答案

第一章一、选择题：( ) 1．属于细菌细胞基本结构的为A、荚膜B、细胞壁C、芽胞D、鞭毛( ) 2．生鞭毛最多的菌属于A、螺旋菌B、杆菌C、球菌D、假菌丝( ) 3．在放线菌发育过程中,吸收水分和营养的器官为A、基质菌丝B、气生菌丝C、孢子丝D、孢子( ) 4．放线菌属于A、病毒界B、原核原生生物界C、真菌界D、真核原生生物界( ) 5．菌苔是微生物培养特征。

A、固体平板B、固体斜面C、液体表面D、明胶穿刺( ) 6．放线菌的形态是A、单细胞B、多细胞C、单或多细胞D、非细胞( ) 7．用来测量细菌大小的单位是A、 C、mB、mmC、 umD、nm( ) 8．细菌缺乏下列哪一种结构仍可存活A、细胞壁B、细胞膜C、细胞质D、核质( ) 9．下列结构中并非细菌生活的必须结构的为A、细胞壁B、细胞膜C、核D、核糖体( ) 10．下列微生物器官耐温顺序为A、营养体＞孢子＞芽孢B、芽孢＞孢子＞营养体C、孢子＞营养体＞芽孢D、芽孢＞营养体＞孢子( ) 11．放线菌适宜生长的pH范围为A、＜4.0B、 4.0～6.0C、 6.5～8.0D、＞8.0( )12．革兰氏染色结果中，革兰氏阳性菌应为A、无色B、红色C、紫色D、黄色( ) 13．细菌主要繁殖方式为A、增殖B、芽殖C、裂殖D、孢子生殖( ) 14．大肠杆菌经革兰氏染色后,菌体应呈A、无色B、红色C、黑色D、紫色( ) 15．下列耐热能力最强的是A、营养细胞B、菌丝C、孢子D、芽孢( ) 16．细菌生长的最适PH为A、6.5～7.5B、7.0～8.0C、7.5～8.5D、3.8～6.0( ) 17．属于细菌细胞的特殊结构部分为A、细胞壁B、芽孢C、细胞膜D、原生质( ) 18．革兰氏染色的关键步骤是A、结晶紫(初染)B、碘液(媒染)C、酒精(脱色)D、蕃红(复染)( ) 19．细菌形态通常有球状、杆状、螺丝状三类。

自然界中最常见的是A、螺旋菌B、杆菌C、球菌D、弧菌( ) 20．自然界长期进化形成的缺壁细菌是A、支原体B、L型细菌C、原生质体D、原生质球( ) 21．革兰氏阳性菌细胞壁特有的成分是A、肽聚糖B、几丁质C、脂多糖D、磷壁酸( ) 22．革兰氏阴性菌细胞壁特有的成分是A、肽聚糖B、几丁质C、脂多糖D、磷壁酸( ) 23．原核细胞细胞壁上特有的成分是A、肽聚糖B、几丁质C、脂多糖D、磷壁酸( ) 24．放线菌具吸收营养和排泄代谢产物功能的菌丝是A、基内菌丝B、气生菌丝C、孢子丝D、孢子( ) 25．蓝细菌的光合作用部位是A、静息孢子B、类囊体C、异形胞D、链丝段( ) 26．产甲烷菌属于A、古细菌B、真细菌C、放线菌D、蓝细菌( ) 27．在革兰氏染色中一般使用的染料是A、美蓝和刚果红B、苯胺黑和碳酸品红C、结晶紫和番红D、刚果红和番红( ) 28．下列微生物中，哪种属于革兰氏阴性菌A、大肠杆菌B、金黄葡萄球菌C、巨大芽孢杆菌D、肺炎双球菌( ) 29．G＋菌由溶菌酶处理后所得到的缺壁细胞是A、支原体B、L型细菌C、原生质体D、原生质球( ) 30．G－菌由溶菌酶处理后所得到的缺壁细胞是A、支原体B、L型细菌C、原生质体D、原生质球( ) 31．实验室中自发突变形成的缺壁细菌称作A、支原体B、L型细菌C、原生质体D、原生质球( ) 32．工业发酵生产抗主素时，放线菌主要借助哪种方式以产生新的菌丝体。

《微生物的营养》的相关测试题及答案

《微⽣物的营养》的相关测试题及答案《微⽣物的营养》的相关测试题及答案【知识精讲】⼀、微⽣物的营养物质分为和五⼤类。

（1）碳源——⽆机碳源如：；有机碳源如：。

（2）氮源——⽆机氮源如：；有机氮源如：。

（3）⽣长因⼦——主要包括、、等。

⼆、培养基的配制原则：1． 2． 3．三、培养基的种类 1．根据物理性质：种类是否含凝固剂⽤途固体培养基半固体培养基液体培养基 2．根据化学成分：种类化学成分是否明确⽤途合成培养基天然培养基编号成分含量 ①粉状硫 10.00g ②（NH 4） 2SO 4 0.40g ③ K 2HPO 4 4.0g ④ MgSO 4 9.25g ⑤ FeSO 4 0.50g ⑥ CaCl 2 0.50g ⑦ H 2O 100ml 3．根据⽤途种类制备⽅法原理⽤途实例选择培养基鉴定培养基【题例领悟】右表是某微⽜物培养液成分。

请据此回答： (1)右表培养基可培养的微⽣物类型是； (2)若不慎将过量NaCl加⼊培养基中，如不想浪费此培养基，可再加⼊，⽤于培养； (3)若除去成分②，加⼊(CH20)，该培养基可⽤于培养； (4)表中营养成分共有类； (5)不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进⾏的是； (6)右表中各成分重量确定的原则是； (7)若右表培养基⽤于菌种鉴定，应该增加的成分是。

答案：⑴⾃养微⽣物⑵含碳有机物⾦黄⾊葡萄球菌⑶固氮微⽣物⑷3 ⑸调整PH值⑹依微⽣物的⽣长需要确定⑺琼脂（或凝固剂）【⾃我评价】⼀、选择题 1．下列物质中，能为根瘤提供碳源、氮源的Ａ．⼤⾖粉和蛋⽩Ｂ．CO2和N2 Ｃ．葡萄糖和N2 Ｄ．碳酸盐和NH3 2．下列关于⽣长因⼦的叙述不正确的是Ａ．⽣长因⼦是指微⽣物⽣长不可缺少的微量有机物Ｂ．⼀般是酶、核酸的组成部分Ｃ．⾃⾝不能合成，必须由外界补充Ｄ．主要包括维⽣素、氨基酸和碱基等 3．对下列培养基的叙述正确的是Ａ．制作固体培养基必须加⼊琼脂Ｂ．加⼊青霉素可得到放线菌Ｃ．培养⾃⽣固氮菌不需氮源Ｄ．发酵⼯程⼀般⽤半固体培养基 4．要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要⽤Ａ．固体培养基Ｂ．液体培养基Ｃ．加⼊青霉素的培养基Ｄ．加⼊⾼浓度⾷盐的培养基⼆、⾮选择题 5．下表是⼀种培养基的.配⽅。

l15培养基成分

l15培养基成分
L15培养基是一种常用的细菌培养基，其成分对于细菌的生长和繁殖起着重要的作用。

L15培养基的主要成分包括无机盐、有机物质和缓冲剂等。

一、无机盐类：L15培养基中含有多种无机盐，如氯化钠（NaCl）、磷酸二氢钾（KH2PO4）、硫酸镁（MgSO4）等。

这些无机盐提供了细菌所需的微量元素，维持了细菌体内的正常生理功能。

二、有机物质：L15培养基中的有机物质主要包括葡萄糖、氨基酸和维生素等。

葡萄糖是细菌的主要能源来源，为其提供能量进行生长和繁殖。

氨基酸是构成细菌蛋白质的基本单元，维生素则是细菌正常生长所必需的辅助因子。

三、缓冲剂：L15培养基中的缓冲剂主要是碳酸氢钠（NaHCO3）。

缓冲剂的作用是维持培养基的酸碱平衡，保持细菌生长环境的稳定性。

L15培养基的配方经过精心设计，能够提供细菌生长所需的各种营养物质。

在培养细菌时，我们可以根据需要添加其他成分，如抗生素等，以达到特定的研究目的。

L15培养基是一种优良的细菌培养基，其成分的合理配比为细菌的生长和繁殖提供了良好的条件。

通过对L15培养基成分的了解，我们可以更好地理解细菌的生长机制，并为相关研究提供基础支持。

培养基配方

培养基配方1、PDA培养基（用于分离、培养植物内生真菌）：马铃薯（去皮）200g , 葡萄糖20g , 蒸馏水1000 ml , 琼脂粉15g。

用于分离内生真菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的氯霉素和硫酸链霉素各50 μ g/ml，用于抑制细菌的生长。

2、NA培养基（用于分离、培养植物内生细菌）：牛肉膏3g，蛋白胨5g，葡萄糖2.5g，琼脂粉15g，蒸馏水1000ml，pH 7.0。

用于分离内生细菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的放线菌酮50μg/ml，用于抑制真菌生长。

115℃，20min 灭菌。

3、LB培养基：胰蛋白胨10 g，酵母提取物5 g，NaCl 10 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0；4、DSM1培养基：磷酸三钾26.631 g（pH=7.0)，二水柠檬酸三钠9.999 g，硫酸镁0.2465 g，硫酸铵19.821 g，牛肉膏3 g，NaCl 5 g，胰蛋白胨10 g，葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL，pH=7.0；5、DSM2培养基：磷酸三钾26.631 g（pH=7.0)，二水柠檬酸三钠9.999 g，硫酸镁0.2465 g，硫酸铵19.821 g，牛肉膏3 g，NaCl5 g，细菌学蛋白胨10 g，葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0；6、Msgg培养基：磷酸钾5 mmoL/L(pH7.0)，MOPs 100 mmoL/L（pH7.0），MgCl2 2 mmoL/L，CaCl2 700 mmoL/L，MnCl2 50 μM，FeCl3 50 μM，ZnCl2 1 μM，VB1 2 μM，甘油0.5 %，谷氨酸0.5 %，色氨酸50 μg/mL，苯丙氨酸50 μg/mL，蒸馏水1000 mL，pH 7.0。

7、N%NA培养基：牛肉膏3.0 g，细菌学蛋白胨10 g，NaCl 5 g，琼脂粉N*10 g，8、BGM1培养基：牛肉膏3 g，胰蛋白胨10 g，NaCl 5 g，磷酸三钾26.631 g（pH7.0），二水柠檬酸三钠9.999 g，硫酸镁0.2465 g，硫酸铵19.821 g，葡萄糖1 g，蒸馏水1000 mL，pH 7.0。

培养基的主要成分及其作用

培养基的主要成分及其作用培养基是用人工方法配制而成，适合微生物生长繁殖需要的混合营养基质。

适宜的培养基不仅用于细菌的分离、纯化、传代及菌种保存等，还可用于研究细菌的生理、生化特性。

因此，掌握培养基的制备技术及其原理，是进行细菌学检验的重要环节和必不可少的手段。

细菌的生长繁殖除需要一定的营养物质，如含氮化合物、糖类、盐类、类脂质及水外，有的还需加入特殊营养物质，如维生素的辅助生长因子或某些其他特殊因子；有的则需加入指示剂或抑制剂，以利于细菌的分离和鉴定。

1．营养物质营养物质提供细菌生长繁殖所需的能量、合成菌体的原料以及激活细菌酶的活性和调节渗透压等作用。

细菌需要的营养物质主要有氮源、碳源、无机盐及生长因子。

(1)蛋白胨：是由动物或植物蛋白质经酶或酸碱分解而产生的中间产物，是培养基中最常用的成分之一，主要供给细菌氮源，合成菌体蛋白质、酶类等，另外还具有缓冲作用。

由于蛋白质的来源和消化程度不同，因而制得的蛋白胨质量相差很大。

按照生产原料的性质，蛋白胨可分为植物胨和动物胨两类。

蛋白胨经喷雾干燥成粉末，吸水性较强，保存时应干燥密封，防止潮解结块。

(2)肉浸液：系用新鲜牛肉(去掉脂肪、肌膜及肌腱等)浸泡煮沸制成的肉汤。

肉浸液中包括含氮和非含氮两类浸出物，还有一些生长因子。

作为细菌生长所需要的氨源和碳源，由丁加热后大部分蛋白质凝固，仅留少部分氨基酸和其他含氮物质，不能满足细菌生长需要，故在制作培养基时，一般需加1％～2％蛋白胨和0.5％的NaCl。

(3)牛肉膏：又称牛肉浸膏，是肉浸液加热浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。

其中不耐热的物质如糖类已被破坏，故其营养价值不及肉浸液，但因无糖，可作为肠道细菌鉴别培养基的基础成分。

(4)糖(醇)类：含有细菌所需的碳源。

制备培养基所应用的糖(醇)类很多，常用的糖类有单糖(如葡萄糖、阿拉伯糖等)、双糖(如乳糖、蔗糖等)、多糖(如菊糖、淀粉等)：醇类有甘露醇、卫矛醇及侧金盏花醇等。

生物学实验 LB培养基的配置

实验6 LB培养基的配置一、实验目的明确培养基配置原理通过对LB培养基的配置，掌握配置培养的一般方法二、实验原理LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。

它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl。

其中酵母提取物为微生物提供碳源和能源，磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源，而NaCl 提供无机盐。

在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。

琼脂在常用浓度下96℃时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化，以免琼脂烧焦。

琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。

固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。

由于这种培养基多用于培养细菌，因此，要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁殖。

LB培养基的配方如下：酵母提取物5g 蛋白胨10gNaCl 5g 琼脂15～20g水1000mL pH 7.4～7.6三、实验设备试管，三角烧瓶，烧杯，量筒，玻棒，培养基分装器，天平，牛角匙，高压蒸汽灭菌锅，pH 试纸（pH 5.5～9.0），棉花，牛皮纸，记号笔，麻绳，纱布等。

四、实验试剂酵母提取物，蛋白胨，NaCl，琼脂；1mol/L NaOH，1mol/L HCl；五、操作步骤1．称量按培养基配方比例依次准确地称取酵母提取物、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。

蛋白胨很易吸潮，在称取时动作要迅速。

另外，称药品时严防药品混杂，一把牛角匙用于一种药品，或称取一种药品后，洗净、擦干，再称取另一药品，瓶盖也不要盖错。

2．溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解。

待药品完全溶解后，补充水分到所需的总体积。

如果配制固体培养基，将称好的琼脂放入已溶化的药品中，再加热溶化，在琼脂溶化的过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底使烧杯破裂。

最后补足所失的水分。

3．调pH在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值，如果pH偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH值，直至pH达7.6。

微生物常用生化实验

微生物常用生化实验胆汁-七叶苷试验原理：培养基中的胆汁对某些细菌有抑制作用，只有既能在胆汁中生长，又能水解七叶苷的细菌才能表现出对七叶苷的水解活性。

肠球菌和D群链球菌都能在含有胆汁的培养基中生长并水解七叶苷，生成七叶素，七叶素与培养基中枸橼酸铁的Fe3+反应形成黑色沉淀，使培养基变黑。

65g/L NaCl生长试验原理：肠球菌具有很强的耐盐能力，能在上述培养基生长，并且分解培养基中的葡萄糖产酸，使指示剂溴甲酚紫变黄。

而链球菌的耐盐能力较弱，在此培养基不能生长。

原理：培养基中葡萄糖和乳糖的比例为1︰10，指示剂为酚红，酚红变色范围在pH6.4~8.2（黄~红），而KIA的pH为7.4，产少量的酸就可导致颜色改变。

斜面部分为有氧环境，底层与空气隔绝是相对厌氧的环境。

如接种的是能发酵葡萄糖和乳糖的细菌，因产生大量的酸，使斜面与底层均成黄色。

如接种的是只发酵葡萄糖不发酵乳糖的细菌，培养基内仅有0.1%葡萄糖可产酸。

开始的8~12h时，产生的酸足以引起斜面和底层的颜色变黄。

在接下来的时间里，葡萄糖被完全消耗，斜面部分所生成的酸可因接触空气而氧化挥发，细菌在有氧的条件下开始分解蛋白质，氧化降解氨基酸，产生碱性化合物，18~24h整个斜面又转换成碱性颜色—红色。

底层（相对缺氧状态），细菌发酵葡萄糖所生成的酸类物质不被氧化而氨基酸降解产生的碱性化合物不足以中和形成的酸，所以培养基仍为黄色。

细菌如分解蛋白质产生硫化氢，则与培养基中枸橼酸铁形成黑色的硫化铁。

细菌产气时，在底层还可看到有气泡或裂口现象。

苯丙氨酸脱氨酶试验培养基：苯丙氨酸微量液体培养基2）原理：细菌分解氨基酸可通过脱氨或脱羧基生成反应物。

某些细菌可产生苯丙氨酸脱氨酶，使苯丙氨酸脱去氨基生成苯丙酮酸，与10%三氯化铁试剂产生深绿色反应。

3）方法：待检菌用接种针以无菌操作接种于上述培养基中，35 ℃培养18~24h，滴加入10%三氯化铁试剂3-4滴。

4）结果：立即（延长时间颜色会退去）观察结果，出现绿色环者为阳性，阴性为黄色。

LB的配置

LB培养液配制:、基本原理LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。

它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl。

其中酵母提取物为微生物提供碳源和能源，磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源，而NaCl提供无机盐。

在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。

琼脂在常用浓度下96℃时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化，以免琼脂烧焦。

琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。

固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。

由于这种培养基多用于培养细菌，因此，要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁殖。

LB培养基的配方如下：酵母提取物 5g蛋白胨 10gNaCl 5g琼脂 15～20g水 1000mLpH 7.4～7.6三、器材酵母提取物，蛋白胨，NaCl，琼脂；1mol/L NaOH， 1mol/L HCl；试管，三角烧瓶，烧杯，量筒，玻棒，培养基分装器，天平，牛角匙，高压蒸汽灭菌锅，pH试纸（pH 5.5～9.0），棉花，牛皮纸，记号笔，麻绳，纱布等。

四、操作步骤1．称量按培养基配方比例依次准确地称取酵母提取物、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。

蛋白胨很易吸潮，在称取时动作要迅速。

另外，称药品时严防药品混杂，一把牛角匙用于一种药品，或称取一种药品后，洗净、擦干，再称取另一药品，瓶盖也不要盖错。

2．溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解。

待药品完全溶解后，补充水分到所需的总体积。

如果配制固体培养基，将称好的琼脂放入已溶化的药品中，再加热溶化，在琼脂溶化的过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底使烧杯破裂。

最后补足所失的水分。

3．调pH在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值，如果pH偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/LNaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH值，直至pH达7.6。

反之，则用1mol/LHCl进行调节。

专题2微生物的培养与应用练习及答案(b4)

专题二微生物的培养与应用一选择题1．在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为 ( )A．鉴别培养基 B．固体培养基 C．选择培养基 D．液体培养基2．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基 ( )A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水C．KH2PＯ4、Na2HPＯ4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水3．用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比 ( )A．比实际值高 B．比实际值低 C．和实际值一致 D．都有可能4．用来判断选择培养基是否起到了选择作要设置的对照是( )A．未接种的选择培养基 B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 D．接种了的选择培养基5．关于土壤取样的叙述，错误的是( )A．应选取肥沃、湿润的土壤 B．先铲去表层土3cm左右，再取样C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D．应在火焰旁称取土壤6．关于微生物培养的叙述错误的是( )A．细菌一般在30～37℃的温度下培养1～2dB．放线菌一般在25～28℃的温度下培养5～7dC．霉菌一般在25—28℃的温度下培养3～4dD．不同种类的微生物，一般需要相同的培养温度和培养时间7．不同种类的细菌菌落表现为不同的特征。

下列属于菌落特征的是( )①菌落的大小②菌落的形状③菌落的隆起程度④菌落的颜色⑤菌落的透明度A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②③④⑤8.分离土壤中纤维素分解菌用到的方法( )①稀释倒平板法②涂布平板法③单细胞挑取法④选择培养A．①② B．②③④Ｃ．②③ D．①③④9．纤维素酶可以将哪种物质分解 ( )A．牛肉片 B．鱼片Ｃ．滤纸条 D．塑料条10．寻找纤维素分解菌应到( )A．富含无机盐的环境中 B．富含纤维素的环境中Ｃ．湿润的环境中 D．池塘中11．在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是 ( )A．乳酸菌B．硝化细菌 C．分解尿素的细菌D．分解纤维素的细菌12．两种刚果红染色法的结果是( )Ａ．均会出现透明圈Ｂ．均不会出现透明圈C．方法一出现，方法二不出现D．方法一不出现，方法二出现13．生活在反刍动物胃内的纤维素分解菌，其新陈代谢类型为( )A．自养需氧型 B．异养厌氧型 C．异养需氧型 D．自养厌氧型14．培养基为微生物的生长繁殖提供( )A．水B．碳源 C.氮源D．水、碳源、氮源和无机盐等15．将配制好的培养基进行灭菌应用( )A．灼烧灭菌B．高压蒸汽灭菌C．干热灭菌D．煮沸灭菌16．为了保证结果准确，一般选择菌落数在何种范围的平板进行计数( ) A．30～100 B．30～200 C．30～300 D．30～60017．土壤中的细菌能分解尿素，是因为它们能合成一种( )A．尿素酶B．脲酶C．蛋白酶D．肽酶18．能排除培养基是否有杂菌污染的方法是( )A．将未接种的培养基放在窗台上培养B．将未接种的培养基放在实验桌上培养C．将未接种的培养基放在恒温箱中培养D．将已接种的培养基放在恒温箱中培养20．灭菌的标准是 ( )A．使病原菌不生长B．杀死所有的微生物C．杀死所有的病原微生物 D．杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子21．能够测定样品活菌数的方法是( )A．稀释涂布平板法 B．直接计数法 C．重量法 D．比浊法22.有关稀释涂布平板法，叙述错误的是（）A．先将菌液进行一系列的梯度稀释B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面C．适宜条件下培养D.结果都可在培养基表面形成单个的菌落23．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是( )A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板24．甲、乙、丙是三种微生物，下表I、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。

myp培养基作用

myp培养基作用
MYP（Mannitol-Yeast-Peptone）培养基是一种常用的微生物培养基，主要用于细菌的培养和研究。

它的配方包括以下成分和作用：
1.蔗糖（Mannitol）：提供碳源供细菌进行代谢和生长。

2.酵母浸出物（Yeast Extract）：提供氮源、维生素和微量元素，有助于细菌的生长和代谢。

3.蛋白胨（Peptone）：提供氮源和营养物质，促进细菌的生长和繁殖。

4.磷酸二氢钾（KH2PO4）：提供磷源，参与细菌的代谢反应。

5.磷酸氢二钠（Na2HPO4）：提供磷源和缓冲剂，维持培养基的pH值稳定。

6.氯化钠（NaCl）：提供适当的离子强度和渗透压，维持细菌的生长环境。

7.酚红（Phenol Red）：作为pH指示剂，根据培养基的pH变化显示颜色变化。

MYP培养基的配方可以根据具体需要进行调整和优化，以适应不同细菌的生长要求。

它常用于肠道细菌的分离、培养和研究，特别是对于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的检测和鉴定非常有用。

细菌的培养实验报告

细菌的培养实验报告实验目的：本次实验目的是通过培养和观察细菌的生长情况，掌握基本的微生物培养技术，了解不同条件下菌落形态的差异，加深对微生物生物学的认识。

实验原理：细菌的培养技术是微生物学的基础。

在人工培养细菌的过程中，通常需要选择适合细菌生长的培养基和培养条件。

培养基的种类有很多种，不同的细菌种类需要使用不同的培养基。

在本次实验中，我们使用的是营养琼脂培养基，这是一种基础的细菌培养基，可以适用于很多细菌的生长。

营养琼脂培养基的配方为：牛肉膏 5g，酵母提取物 2.5g，NaCl 5g，琼脂 15g，将这些物质加入 1L 的蒸馏水中，经高温高压灭菌后，就得到了可以用于培养细菌的琼脂培养基。

实验步骤：1. 准备培养基和培养器材。

2. 取一支无菌环，消毒处理。

3. 开始取细菌涂板：取一支无菌环，在紫外灯下进行消毒。

用细菌接种环沾取待测菌株，将细菌接种环沾满细菌后均匀地在琼脂培养基上进行划线。

划线的方式是从培养基的一侧到另一侧，如前后或左右等方向，避免在同一方向划线，以免细菌在较依次沿线生长而聚集形成不规则菌域。

4. 培养：由于不同的细菌生长条件不一样，因此需要选择适合细菌生长的温度和湿度进行培养。

通常情况下，细菌的培养温度在 30 ~ 37℃之间，湿度要保持在一定的范围内。

在本次实验中，我们选择了 37℃下培养 24 小时。

实验结果：经过 24 小时的培养，我们观察到在琼脂培养基上出现了许多不同的细菌菌落。

这些菌落的外形、大小、颜色等方面都有所不同，说明这些菌落对应的是不同的细菌种类。

菌落的形状一般有以下几种：1. 球菌状：直径为约 1-2 mm，呈圆形，菌体鲜艳光滑。

2. 不规则菌落：菌落具有不规则的形状，表面粗糙，边缘不整齐，直径约在 0.5-1 mm 左右。

3. 边缘不整齐的菌落：菌落具有比较规则的形状，但是边缘不整齐，呈波浪状。

4. 溶解菌落：菌落在琼脂培养基上呈透明的圆形区，周围的琼脂被菌体溶解，形成一个透明的环状区域。