关于离体蛙心灌流演示实验的解释
离体蛙心灌流实验
离体蛙⼼灌流实验实验五离体蛙⼼灌流实验⼀实验⽬的1、了解蟾蜍离体⼼脏的灌流的⽅法。
2、观察细胞外液钾离⼦、钙离⼦浓度变化对⼼脏活动的影响。
⼆实验原理⼼脏离体后,如⽤⼈⼯灌流的⽅法,保持其新陈代谢的顺利进⾏,则⼼脏仍能有节律的⾃动收缩和舒张,并可维持较长的时间。
离体⼼脏所需的条件应与动物内环境的理化性质基本相近,因此改变灌流液的理化因素,则可引起⼼脏活动的变化。
1、任⽒液:正常对照含有NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、 Na2HPO4和蒸馏⽔,其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。
2、0.65%NaCl灌流:3、2%CaCl2灌流4、 1%KCl灌流5、1:10000 E 灌流6、1:10000 Ach灌流7、⼼得安β1受体阻断剂,抑制肾上腺素与β1受体结合,使E不能发挥作⽤。
8.、阿托品M受体阻断剂,抑制Ach减慢⼼率,加速房室传导,增加⼼房收缩⼒。
三实验器材微机⽣物信号处理系统, physiology系统,学校服务器系统,蟾蜍离体蛙⼼,任⽒液,1%KCl,3%CaCl2,65%NaCl,1/10000 E,⼼得安+1/10000,1/10000 Ach,阿托品+1/10000 Ach。
四实验步骤1、标本制备(观看视频)2、仪器及标本的连接3、具体软件操作:1)离⼦试剂:任⽒液→0.65%NaCl溶液→任⽒液清洗→1%KCl溶液→任溶液→任⽒液清洗⽒液清洗→2%CaCl22)药物试剂:肾上腺素(E)→任⽒液清洗→⼼得安→任⽒液清洗→Ach,任⽒液清洗→阿托品→任⽒液清洗。
五实验结果表1 离体蛙⼼灌流数据记录六结果分析此实验说明⼼脏具有⾃律性,兴奋性,传导性,收缩性,离体⼼脏静脉窦还能产⽣兴奋并传导到⼼房和⼼室,引起⼼脏有节律的兴奋和收缩。
体内细胞所直接⽣存的环境较为稳定,内环境的稳态是细胞、器官维持正常⽣存和活动的必要条件,所以改变灌流的溶液,会引起⼼脏收缩的改变。
生理实验斯氏离体蛙心灌流
实验八蛙心灌流一、实验目的1、学习斯氏离体蛙心灌流法2、了解心肌的生理特性。
3、观察、、及肾上腺素(Adr)、乙酰胆碱(ACh)对离体心脏活动的影响。
二、实验原理维持心脏正常收缩的节律和强度,需要有一个适当的理化环境(离子的浓度、比例、溶液的酸碱度、环境温度等),这种环境条件稍有改变,便可影响心脏的正常活动。
心脏的正常节律性活动必须在适宜的理化环境里才能维持,一旦适宜的理化环境被干扰或破坏,心脏活动就会受到影响。
心脏受植物性神经的双重支配,交感神经兴奋时,其未梢释放去甲肾上腺素,使心肌收缩力加强,传导增快,心率加快;而迷走神经兴奋时,其未梢释放乙酰胆碱,使心肌收缩力减弱,心率减慢。
把离体蟾蜍心脏,即失去了神经支配的蟾蜍心脏保持在适宜的环境中,在一定时间内其仍能产生节律性兴奋和收缩活动。
这是由于蟾蜍的静脉窦能够自动按照一定的节律产生兴奋,并传导到其他心肌细胞,从而引起整个心脏有节律地兴奋和收缩。
离体心脏灌流,是在有控制的条件下研究体液因素以及药物对心肌作用机制的重要实验方法。
两栖类动物心脏无冠状循环,心肌的血液供应直接来自心室腔,故灌流时套管插入心室腔内,但灌流哺乳动物心脏时则须通过冠状血管。
本实验是将蛙心离体后,用人工配制理化特性近似蛙血浆的任氏溶液灌流,在一定时间内,可保持节律性收缩和舒张,如改变任氏液的组成成分或浓度,心脏活动的强度和频率将受到影响。
三、动物与器材实验动物:蟾蜍4只/组。
实验器材:蟾蜍解剖器械、生物/桥式前置、刺激/记录电极、蛙心插管、万向轮、蛙心夹、线、滴管、培养皿、支架、木夹、蛙针。
实验试剂:任氏液(含肝素)、0.65%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1∶5000去甲肾上腺素溶液、1∶10000乙酰胆碱溶液、**品溶液、1%乳酸、2.5%NaHCO3。
四、方法与步骤一)离体蛙心制备用刺蛙针捣毁蛙的脑和脊髓,将蛙仰卧固定于蛙板上。
打开胸腔,剪开心包膜,暴露心脏。
生理学实验报告蛙心灌流
生理学实验报告-蛙心灌流————————————————————————————————作者: ————————————————————————————————日期:ﻩ蛙类离体心脏灌流一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法。
2、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh),乳酸对离体心脏活动的影响。
二、【原理】将离体蛙心(失去神经支配的蛙心)保持在适宜的环境中,在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩,心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境,离体心脏也是如此,离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响,可以通过改变灌流液的某些成分,观察其对心脏活动的作用。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性,都与钠、钾及钙等离子有关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。
三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。
套管夹、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰肌碱、3%乳酸。
四、【方法与步骤】1、斯氏蛙心插管法(1)一只青蛙,双毁髓后背位置于蜡盘中,按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。
在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎(动物个体小时,结扎位置可靠上些)。
再从左右两主动脉下方穿一线,并打一活结备用。
左手提起主动脉上的结扎线,右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。
选择大小适宜的蛙心套管,然后将盛有少量(套管内2~3cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管,山开口处插入动脉圆锥(见右图)。
当套管尖端到达动脉圆锥基部时,应将套管稍稍后退,使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进,经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入,但不可插得过深,以免心室壁堵住套管下口)。
蛙心生理实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 探究心脏节律性活动的生理机制。
二、实验原理蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法,通过将蛙心取出并置于人工灌流液中,使其在一定时间内保持节律性收缩。
实验中,通过改变灌流液的成分,可以观察不同理化因素对心脏活动的影响,从而了解心脏生理活动的调节机制。
蛙心无营养性血管,离体后采用人工灌流的方法,仍可保持其新陈代谢,心脏仍能有节律的自动收缩、舒张,并维持较长时间。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性,都与钠、钾及钙等离子有关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。
三、实验材料与仪器1. 实验动物:青蛙2. 实验器材:蛙心夹、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、套管夹。
3. 生理信号采集系统、计算机。
四、实验方法与步骤1. 暴露蛙心:取一只青蛙,双毁髓后背位置于蛙板上,按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管,在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎。
2. 插管:用斯氏蛙心插管法,将蛙心夹插入心脏,并通过蛙心夹上的管道与灌流系统连接。
3. 灌流:将蛙心置于任氏液中,开始灌流,调节灌流速度和压力,使心脏保持节律性收缩。
4. 观察与记录:观察心脏的收缩、舒张情况,记录心率和心搏曲线。
5. 改变灌流液成分:分别用0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸等灌流液替换任氏液,观察心脏活动的变化。
6. 分析与讨论:分析不同灌流液对心脏活动的影响,讨论心脏生理活动的调节机制。
五、实验结果与分析1. 在正常任氏液中,心脏保持节律性收缩,心率为60-100次/分钟。
离体蛙心实验实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 观察离体蛙心的生理特性,了解心脏在离体条件下的收缩和舒张规律。
2. 探讨神经递质、激素等对离体蛙心功能的影响。
3. 掌握离体蛙心灌流实验的操作方法。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是研究心脏生理学的重要方法之一。
在实验过程中,通过灌流装置向蛙心提供氧气和营养物质,同时可以观察心脏的收缩和舒张情况。
实验中,可以通过改变灌流液成分、温度、pH值等条件,观察心脏功能的改变,从而了解心脏生理特性及影响因素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:蟾蜍、蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、氯化钙、肾上腺素、乙酰胆碱等。
2. 实验仪器:手术显微镜、蛙心灌流装置、注射器、秒表、滴管等。
四、实验方法与步骤1. 准备工作:将蟾蜍置于蛙板上,用手术剪剪开胸腔,暴露心脏。
用蛙心夹固定心脏,并连接灌流装置。
2. 灌流液准备:配制任氏液、氯化钙溶液、肾上腺素溶液、乙酰胆碱溶液等。
3. 实验分组:将实验分为对照组、氯化钙组、肾上腺素组、乙酰胆碱组。
4. 实验步骤:a. 对照组:灌流任氏液,观察心脏的收缩和舒张情况。
b. 氯化钙组:灌流氯化钙溶液,观察心脏功能的改变。
c. 肾上腺素组:灌流肾上腺素溶液,观察心脏功能的改变。
d. 乙酰胆碱组:灌流乙酰胆碱溶液,观察心脏功能的改变。
5. 记录数据:观察心脏的收缩和舒张频率、收缩幅度等,并记录数据。
五、实验结果与分析1. 对照组:心脏呈现规律的收缩和舒张,收缩幅度适中,频率约为60次/分钟。
2. 氯化钙组:心脏收缩幅度明显增大,频率加快,收缩时间延长,舒张时间缩短。
3. 肾上腺素组:心脏收缩幅度增大,频率加快,收缩时间延长,舒张时间缩短。
4. 乙酰胆碱组:心脏收缩幅度减小,频率减慢,收缩时间缩短,舒张时间延长。
六、实验结论1. 离体蛙心在灌流条件下可以维持一定时间的收缩和舒张功能。
2. 氯化钙和肾上腺素可以增强离体蛙心的收缩功能,使收缩幅度增大、频率加快。
蛙类离体心脏灌流实验
蛙类离体心脏灌流实验蛙类离体心脏灌流实验一、实验目的1、探究不同溶液对心肌特性的影响2、掌握离体心脏灌流的技术二、实验原理(一)两栖类动物无冠状循环两栖类动物无冠状循环,心肌直接从流经心腔的血流中获取营养。
即心室肌直接从心室腔中获得营养。
故用任氏液置换心室中的血液后,心室插管中的灌流液便成为心室肌的细胞外液。
(二)心肌对细胞外离子浓度和体液因素敏感(三)钾、钙和钠离子对心肌特性的影响由于心肌细胞生物电活动和收缩过程与离子密切相关,因此,细胞外液中离子浓度升升高或降低均会影响到心肌的电生理特性和收缩性。
(1)钾离子的影响K+与静息电位的形成有关。
细胞外液K+浓度[K+]0变化对心肌生理特性的影响较为复杂。
高钾:[K+]0轻度或中度增高时,膜内、外K+浓度差减小,静息电位绝对值减小,与阈电位差距缩短,因此,兴奋性增高。
[K+]0显著升高时,由于静息电位绝对值减小过多(膜内达-55mV 左右),Na+通道失活,因而兴奋性降低甚至消失。
另外,还使0期去极化速度和幅度减小,传导性降低,导致兴奋传导减慢,甚至传导阻滞。
此外,[K+]0增高还可提高膜对K+的通透性,加速K+外流,动作电位平台期缩短,因此,不应期缩短。
此外由于平台期缩短,减少了Ca2+的内流,加上细胞外K+与Ca2+在膜上有竞争性抑制作用,导致心肌收缩功能减弱;(2)钙离子的影响细胞外Ca2+在细胞膜上对Na+内流有竞争性抑制作用,称为膜屏障作用。
[Ca2+]0增高时,Na+内流受抑制,细胞0期除极速度与幅度减小,使兴奋性及传导性均降低。
[Ca2+]0增高使Ca2+内流增多,因此慢反应细胞0期去极化加快加强,传导性增高,而快反应细胞平台期缩短,有效不应期缩短,复极加速。
Ca2+内流增多,使心肌收缩能力增强。
[Ca2+]0降低时,所引起的变化与高钙时相反。
(3)钠离子的影响细胞外液中钠浓度差梯度的变化一般对心肌活动影响不明显。
只有当[Na+]0明显增高时,膜内外钠的浓度差梯度增大,因此,快反应细胞Na+内流加快,0期去极速度和幅度均增加,导致传导性和自律性增高。
离体蛙心灌流
窦房结细胞4期K+ 外流增加、最大复 极电位增大 自律性降低 心率减慢 细 胞 膜 对 Ca2 + 通透性下降 动作电位期间 Ca2+内流减少 抑制钙通道
心肌收缩力降低
6. 2.5%NaHCO3 中和H+,Ca2+与肌钙蛋白结合,心肌收缩力恢复。 7. 3%乳酸 H+与Ca2+竞争肌钙蛋白, Ca2+不能与肌钙蛋白结 合,心肌收缩力↓。
迷走神经和乙酰胆碱
迷走神经兴奋时,节后纤维释放Ach,激动心肌 细胞膜上M型胆碱受体,产生负性变力、负性传导、 负性变时等效应。
心交感神经与去甲肾上腺素
心交感神经节后纤维释放的递质是去甲肾上 腺素,激动心肌细胞膜上的ß受体,产生正性变 力、正性传导、正性变时等效应。
1.无钙任氏液
无钙任氏液灌流 细胞外液Ca2+ ↓↓ 心肌细胞动作电位期间 Ca2+ 内流↓↓ 心肌细胞胞浆Ca2+ ↓↓ 心肌收缩力收缩 ↓↓
六、观察项目
一、描记正常心搏曲线
曲线幅度 —— 收缩的程度 曲线疏密 —— 心率 曲线基线 —— 舒张的程度
二、观察离子、药物和酸碱的影响
1. 换成无钙任氏液灌注,冲洗(下同) 2. 加入3%氯化钙溶液1~2滴 3. 加入1%氯化钾溶液1~2滴
4. 加入1:10000 肾上腺素溶液1~2滴
5. 加入1:10000 乙酰胆碱溶液1~2滴 6. 加入2.5% 碳酸氢钠溶液1~2滴
心肌细胞的生理特性表现为:自动节 律性、兴奋性、传导性和收缩性。 心肌细胞外离子浓度的变化和因体内 生物活性物质(如激素)引起的细胞膜离 子通透性的改变,对心肌细胞的生物电活 动和生理特性必然会产生明显的影响。
实验4-4 蛙类离体心脏灌流
实验4-4 蛙类离体心脏灌流引言离体心脏灌流实验是生理学中常用的方法之一。
不同种类的动物可以通过体表切口或开放胸骨来取出其心脏进行灌流。
而离体心脏灌流实验可以帮助研究者了解心脏的解剖学和生理学特征。
本实验将讲解如何进行蛙类离体心脏灌流实验。
实验器材和试剂1.蛙类(建议使用大型蛙类)。
2.离体心脏灌流系统,包括:- 离体心脏灌流装置(含灌流缓冲液、温度控制器等)。
- 稳压泵。
3.灌流缓冲液,常用的为Tyrode's盐溶液。
实验步骤1. 先将离体心脏灌流系统检查一遍,保证各项设备均运转正常。
2. 杀死一只蛙类,立即进行解剖,取出心脏,并将其迅速转移到灌流装置中。
在移植心脏时应注意不损伤其血管和肌肉组织。
在灌流系统中,除了心脏,不能有其他生物组织残留。
3. 确认灌流系统中的灌流缓冲液温度为20~25℃。
在开始灌流之前,要先排除灌流管路中的空气。
4. 打开灌流泵,根据所选择的灌流缓冲液flow rate控制注入速度,一般建议在3~8ml/min。
确保满足心脏需求的氧气和营养物质可以通过灌流液输送到心脏内部。
5. 注入灌流缓冲液的同时,对心脏进行观察,确认心脏速率、收缩波幅度等生理特征。
6. 加入适当的药物来研究心脏对药物的反应性。
此时应读取每个添加药物后的心脏特征和响应(如速率、波幅等)。
7. 在实验结束时,切断灌流管路和心脏连接,灌流系统中的灌流液应该被排除并清洁。
结果和分析离体心脏灌流实验可以观察心脏的生理学特征和对不同药物的反应,这有助于研究者了解心脏的生理学机制。
在进行本实验时,需要注意不仅仅是心脏的特征,还要关注灌流流量和药物导致的生理反应。
在实验的过程中,如果发现心脏节律不齐或收缩波幅度明显下降,这可能是灌流流量不足造成的。
而添加不同的药物,可以帮助研究者了解心脏的调控机制,同时也可以评估药物的疗效。
需要注意的是,不同种类的动物其心脏组织的特征也是不同的,因此需要根据具体的实验目的选择合适的动物进行实验。
离体蛙心灌流实验报告
离体蛙心灌流实验报告离体蛙心灌流实验报告近年来,科学技术的快速发展为人类探索生命奥秘提供了更多的工具和方法。
其中,离体器官实验是一种常见的研究手段,通过将动物器官分离出来进行实验,可以更深入地了解其结构和功能。
本文将介绍一项离体蛙心灌流实验,探究心脏的工作原理和血液循环。
实验开始时,我们首先需要准备实验所需的器材和材料。
实验器材包括显微镜、注射器、导管等,材料则包括新鲜的蛙心和生理盐水。
在实验室的洁净台上,我们小心地将蛙心取出,并用生理盐水清洗,以确保实验的准确性和可靠性。
接下来,我们需要进行灌流的准备工作。
首先,将蛙心放置在显微镜下,用显微镜观察心脏的结构和血管的分布。
通过观察,我们可以清晰地看到心脏的主要组成部分,如心房、心室和动脉、静脉等。
然后,我们将准备好的生理盐水注入注射器中,并连接导管。
在注射器中注入适量的生理盐水,以保持心脏的湿润,并确保血液循环的正常进行。
接下来,将导管插入心脏的主动脉,并将生理盐水缓慢地注入心脏内。
随着生理盐水的注入,我们可以观察到心脏开始跳动,并将血液推送到体内各个组织和器官。
这个过程中,我们可以通过显微镜观察到心脏的收缩和舒张,以及血液在血管中的流动情况。
这一实验过程不仅让我们更加深入地了解了心脏的工作原理,还帮助我们理解了血液循环的过程。
通过实验观察,我们可以发现心脏的跳动是有规律的,每次跳动都是由心房和心室的收缩和舒张所控制。
心脏的收缩将血液推送到动脉中,而心室的舒张则使血液回流到心脏中。
这种有序的跳动和血液流动保证了氧气和养分的输送,维持了身体各个组织和器官的正常功能。
除了观察心脏的跳动和血液流动,我们还可以通过实验进一步研究心脏的特性和功能。
例如,我们可以改变生理盐水的浓度,观察心脏的反应。
我们还可以加入药物,以模拟不同的生理和病理情况,进一步研究心脏的适应性和反应能力。
通过离体蛙心灌流实验,我们不仅可以深入了解心脏的结构和功能,还可以探究血液循环的机制。
离体蛙心灌流实验报告
一、实验目的1. 学习离体器官(蛙心)灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握实验操作技巧,提高实验技能。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是生理学实验中的一个重要实验,通过人工灌流的方法,使离体蛙心在适宜的生理条件下保持正常节律性收缩和舒张。
实验原理如下:1. 蛙心无营养性血管,离体后采用人工灌流的方法,仍可保持其新陈代谢,心脏仍能有节律的自动收缩、舒张,并维持较长时间。
2. 心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透而得。
3. 通过改变灌流液中的离子浓度、pH值等理化因素,可以观察蛙心活动的变化,了解理化因素对心脏活动的影响。
三、实验对象与用品1. 实验对象:蟾蜍2. 实验用品:斯氏蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、长滴管、铁支架、生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱等。
四、实验方法与步骤1. 实验准备:将蟾蜍仰卧固定于蛙板上,用剪刀剪开胸壁,暴露心脏。
用蛙心夹夹住蛙心尖部,固定在蛙板上。
2. 动脉插管:在主动脉分支下预埋一条棉线,结扎主动脉左支,剪一向心斜切口,插入斯氏蛙心套管,送入动脉球。
3. 连接实验装置:将蛙心套管与二道仪相连,记录蛙心活动。
4. 灌流液准备:配制正常灌流液(任氏液)和实验灌流液(分别含有不同离子浓度的生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱等)。
5. 实验操作:a. 将蛙心置于正常灌流液中,观察蛙心活动,记录心率、收缩幅度等指标。
b. 分别将蛙心置于不同实验灌流液中,观察蛙心活动的变化,记录心率、收缩幅度等指标。
c. 对比分析不同灌流液对蛙心活动的影响。
五、实验结果与分析1. 正常灌流液条件下,蛙心以正常节律收缩和舒张,心率适中,收缩幅度适中。
2. 在0.65%NaCl溶液替换任氏液后,蛙心收缩幅度稍微减小,收缩力稍微减弱。
分析原因:相当于细胞外环境中缺乏Ca2+,动作电位2期Ca2+内流减少,胞浆中Ca2+减少,心肌收缩力降低。
离体蛙心灌流实验原理
离体蛙心灌流实验原理离体蛙心灌流实验是一种常见的心脏生理学研究方法,通过在呼吸、循环、体温、神经影响等条件下灌注药物来研究心脏的生理与病理。
实验所需仪器设备包括:离体蛙心、温度控制器、心肌收缩力检测仪、心室压力传感器等。
实验原理主要基于心肌细胞和心脏整体的生理特征和表现来进行。
心肌细胞存在动作电位和细胞内外环境的离子梯度。
当细胞外液体含有高钠离子、低钾离子、低钙离子时,心肌细胞能够进入顺应期,此时的心肌细胞无法被刺激而产生动作电位。
反之,钠离子的浓度降低,钾离子浓度提高,这时心肌细胞便处于易兴奋状态,钙离子通过轻微的电流而内流,而细胞摇摆起来,并随之产生动作电位。
当心脏收到神经作用、荷尔蒙、温度或其他外部因素时,心脏的血流动态和代谢需要作出反应。
例如,正常情况下,随着感知到体内血压过低的指令,自主神经系统将神经冲动传导到心脏,心脏由此加速并增强收缩力。
如果是在休息时进行实验,将变量固定和控制,以达到结构恒定、纯正、严谨的实验结果。
具体实验步骤如下:1.准备一只已经死亡的蛙,并取出其心脏。
将离体的心脏置于台架上,与灌注溶液流经同一管路。
2.将心脏中的血清和杂质用离体灌满心脏的冰冷盐水,以减小水力影响,同时又可维持心肌收缩。
然后放入恒温水浴盆中,设置体温为32度左右。
3.按照实验需要的药物和试剂与灌注保护液混合后,借水泵引入心室,以保证药物充分灌注到心脏。
为了控制在系统通道中的药物浓度和流速,我们需要在止回阀处实现液位控制和压力控制。
4.通过调整同步泵的速率和灌注药物的时间,可以控制心室的灌注压力和流动情况。
同时,使用心肌收缩力检测仪和心室压力传感器等设备,实时监测并记录实验数据。
最后,统计数据并分析实验结果。
总的来说,离体蛙心灌流实验可以更准确地研究心肌细胞和心脏整体对药物、环境、神经和代谢等不同条件的反应,对心脏相关疾病的诊断和治疗具有重要意义。
离体蛙心灌流
实验一离体蛙心灌流(八木氏)一、目的在维持离体心脏循环的条件下,观察不同的阳离子(Na+、K+、Ca2+);酸、碱及肾上腺素,乙酰胆碱等神经递质对心脏活动的影响,同时记录心输出量与心率的变化。
二、原理心脏离体后,如用人工灌流法保持其新陈代谢的顺利进行,则心脏仍能有节律地自动收缩和舒张,且可维持较长的时间。
离体心脏活动所需的灌流液。
应同动物内环境一致改变灌流液的成分,则可引起心脏活动的改变。
三、实验用品蛙(蟾蜍)、蛙心夹、蛙板、蛙心套管、常规手术器械(蛙)、试管夹、双凹夹、铁支架、小烧杯、滴管、张力换能器。
D-95生理记录系统、任氏液、5%NaCl、l%KCl、1%CaCl2、0.01%肾上腺素、0.01%乙酰胆碱、3%乳酸、2.5%NaHCO3、滴管、棉球、棉线等。
四、方法与步骤(一)离体蛙心的制备1、暴露心脏取青蛙(或蟾蜍)一只,用蛙针从枕骨大孔插入破坏延髓后,仰卧固定于蛙板上,依次剪开胸前区皮肤和肌肉。
开胸暴露心脏。
然后用镊子提起心包膜,再用虹膜剪刀将其剪破,使心脏完全暴露出来。
2、蛙心插管用蛙心夹在心舒张期夹住心室尖。
将心脏轻轻提起,辨认与心脏相连的诸血管。
出入蛙心脏的血管共有九条(左主动脉、右主动脉、左、右前腔静脉、后腔静脉,左、右肺静脉,左、右肝静脉)然后将蛙心夹之连线用胶泥(或胶布)固定在蛙板上,以便操作。
用虹膜剪将连在左肝静脉上的心包膜剪去(注意:不要损伤静脉窦)。
用镊子将已浸湿任氏液的一条线穿过左肝静脉的下方,用另一条线穿过左主动脉下面,尽量向远端结扎,并结扎除左主动脉及左肝静脉外的全部血管。
左主动脉做输出管(动脉插管)。
左肝静脉做输入管(静脉管)插管。
首先用小镊子提起左肝静脉,用虹膜剪刀朝向心端剪一“V”型切口,把盛有任氏液的蛙心静脉从此插入,注意勿损伤静脉窦。
用线结扎固定。
冲洗心脏,洗净余血。
再翻正心脏,在左主动脉上离动脉圆锥1厘米处,朝向心端剪一“V”形切口,将蛙心动脉插管插入,用线结扎固定。
离体蛙心灌流实验原理
离体蛙心灌流实验原理veronica 心脏正常的节律性活动必须在适宜的理化环境中进行,一旦适宜的环境被破坏,例如酸碱度及离子浓度的急剧改变等,心脏的活动就会受到影响.在整体内,心脏的活动受自主神经的双重支配,交感神经兴奋时,其末梢释放去甲肾上腺素,使心肌收缩力量增强,心率加快;而迷走神经兴奋时,其末梢释放乙酰胆碱,使心肌收缩力量减弱,心率减慢.强心甙类药物能够增强心肌收缩能力,减慢心率.蟾蜍心脏离体后,用理化特性近似于血浆的Ringer氏液灌流,在一定时间内,可保持其比较稳定的节律性收缩和舒张.改变Ringer氏液的组成成分,如改变Na+、K+、Ca2+ 的浓度及酸、碱度等,心脏跳动的频率和幅度就会发生相应的改变.K+对心脏活动的影响:总体看来心脏对细胞外K+浓度变化比较敏感;但不同部位心肌的敏感性不同,心房肌最敏感,房室束-浦肯野纤维系统次之,窦房结敏感性较低.细胞外[K+]↑时,对兴奋性的影响与其浓度升高的程度有关.当[K+]轻度或中度升高时,细胞内外[K+]梯度减小,K+外流力量减小,静息电位(RP)的绝对值减小,和阈电位(TP)的差值减小,细胞的兴奋性升高;当[K+]大幅度升高时, RP的绝对值减小到-55mv时,钠通道的开放效率降低,钠通道逐渐失活,细胞的兴奋性降低或丧失,严重时,可导致心肌停搏于舒张状态.此时,仅由Ca2+来构成动作电位,故上升支小而缓慢,使兴奋传导性降低.当细胞外[K+]↑时,细胞膜对钾的通透性升高,心室肌细胞复极过程加速,平台期缩短,不应期也缩短.高钾对心肌收缩功能有抑制作用.因为细胞外的钾和钙在细胞膜上有竞争性抑制,因此当膜外[K+]↑时,平台期内流的Ca2+减少,心肌细胞内的Ca2+浓度难于升高,减小了Ca2+的兴奋-收缩偶联作用,从而减低了心肌的收缩能力.4期自动除极速度减慢,导致窦房结自律性降低,心律减慢. Ca2+对心脏活动的影响:细胞外Ca2+在心肌细胞膜上对Na+的内流有竞争性的抑制作用,称为膜屏障作用.因此,细胞外Ca2+浓度发生变化时,与Na+的内流和Ca2+的内流相关的电活动都将受到影响,而对静息电位则无明显作用.当细胞外Ca2+浓度↑时,对Na+的屏障作用↑,由于这种抑制作用,触发Na+快速内流产生0期去极化就比较困难,即TP上移,从而与RP的差距增大,兴奋性降低;发生兴奋后,Na+内流的抑制则导致0期去极化速度和幅度降低,传导性下降.Ca2+内流是慢反应细胞0期去极化和快反应细胞2期的主要离子活动.当细胞外Ca2+浓度↑,使Ca2+内流加快,慢反应细胞0期去极化加快加强,传导性升高.细胞膜对Ca2+的通透性升高,心室肌细胞平台期Ca2+内流增加,心肌收缩力增强增快;当细胞外Ca2+浓度过高时,心脏将停搏于收缩状态,称为钙僵直.去甲肾上腺素对心脏活动的影响:去甲肾上腺素与心肌细胞膜上的β肾上腺素能受体结合,激活腺苷酸环化酶(AC),使细胞内cAMP浓度升高,激活PKA和细胞内的蛋白质磷酸化过程,使心肌细胞膜上的钙通道激活,动作电位平台期Ca2+内流增加,心肌收缩力增强;另外去甲肾上腺素能加强4期的内向电流If,使心率加快.乙酰胆碱对心脏活动的影响:乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M型胆碱能受体结合,抑制AC,细胞内cAMP浓度降低,肌浆网释放的Ca2+减少,心肌的收缩力量减弱,心率减慢.乙酰胆碱与窦房结细胞膜上的Ikach通道结合,促进K+的外流,最大复极电位增大,自律性降低,此外还抑制4期的内向电流If,使心率减慢.%NaCl对心脏活动的影响:%NaCl对蟾蜍来说使等渗溶液,完全置换任氏液后,细胞外的Ca2+浓度,K+浓度大大降低,使心肌的收缩能力减弱,心率减慢.3%乳酸对心脏活动的影响:乳酸的PH值较低,当加入乳酸后,细胞外H+浓度升高,H+和Ca2+离子竞争性结合肌钙蛋白的结合位点,抑制Ca2+离子与肌钙蛋白结合,心肌收缩力量减弱.当再加入%NaHCO3后,解除了H+对Ca2+离子的竞争性作用,Ca2+离子又可与肌钙蛋白结合,心肌收缩力量恢复.。
娃心灌流实验报告
一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握心脏生理学基本知识,提高实验操作技能。
二、实验原理蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法,通过将蛙心取离体后,采用人工灌流的方法,模拟心脏在体内的血液供应,观察灌流液中理化因素对心脏活动的影响。
蛙心灌流实验中,常用的灌流液为任氏液,其中含有与心脏内环境相似的离子成分,如Na+、K+、Ca2+等。
改变灌流液中这些离子的浓度,可以观察到心脏活动的变化。
三、实验材料与方法1. 实验材料:蟾蜍、任氏液、生理盐水、CaCl2、KCl、注射器、灌流管、蛙心夹、显微镜等。
2. 实验方法:(1)将蟾蜍处死,剥皮,暴露心脏,用蛙心夹固定心脏。
(2)将心脏的动脉插管,连接灌流管,并调整灌流速度。
(3)用生理盐水冲洗灌流管,使灌流液充满管内。
(4)观察心脏在任氏液中的正常活动,记录心率、振幅等指标。
(5)分别改变灌流液中Na+、K+、Ca2+的浓度,观察心脏活动的变化,记录心率、振幅等指标。
(6)对实验结果进行分析和讨论。
四、实验结果与分析1. 正常蛙心在任氏液中的活动:心率适中,振幅适中,处于与内环境相似的任氏液中,蛙心以正常节律收缩和舒张。
2. 改变灌流液中Na+浓度:当灌流液中Na+浓度降低时,心率减慢,振幅减小;当灌流液中Na+浓度升高时,心率加快,振幅增大。
3. 改变灌流液中K+浓度:当灌流液中K+浓度升高时,心率加快,振幅增大;当灌流液中K+浓度降低时,心率减慢,振幅减小。
4. 改变灌流液中Ca2+浓度:当灌流液中Ca2+浓度升高时,心率加快,振幅增大;当灌流液中Ca2+浓度降低时,心率减慢,振幅减小。
五、结论与展望1. 结论:通过本实验,我们掌握了离体蛙心灌流的方法,观察到理化因素对蛙心活动的影响,进一步了解了心脏生理学的基本知识。
2. 展望:本实验为后续心脏生理学实验奠定了基础。
在今后的实验中,我们可以进一步研究其他因素对心脏活动的影响,如pH值、温度等,以深入了解心脏生理学的基本原理。
离体蛙心灌流浅谈
恒温装置
维持实验环境温度稳定,保证蛙心正常生理功能。
记录仪器
用于记录蛙心收缩曲线、收缩压、舒张压等数据。
实验试剂
灌流液
常用的是任氏液,模拟蛙心的生理环境。
生理盐水
用于清洗实验器具和维持蛙心生理环境。
药物
用于研究不同药物对蛙心功能的影响,如肾 上腺素、阿托品等2、MgCl2 等。
离体蛙心灌流浅谈
目录
CONTENTS
• 实验原理 • 实验材料 • 实验步骤 • 实验结果分析 • 实验改进与展望
01 实验原理
蛙心灌流实验简介
蛙心灌流实验是一种常用的生理学实验方法,用于研究心脏 的生理和药理特性。通过将蛙心取出并灌流,可以模拟心脏 在离体状态下的功能和反应。
该实验方法最早由生理学家威廉·哈维于17世纪提出,经过数 百年的发展,已经成为生理学领域中不可或缺的实验手段。
05 实验改进与展望
实验方法的优化建议
蛙心灌流技术的改进
采用更先进的灌流设备和技术,提高灌流效率,减少 对蛙心的损伤。
实验操作细节的优化
规范实验操作流程,提高实验的准确性和可重复性。
实验条件的控制
严格控制实验条件,如温度、pH值、氧气浓度等, 确保实验结果的可靠性。
实验技术的创新与发展趋势
新型灌流技术的研发
研究开发更高效、更稳定的灌流技术,提高离体蛙心实验的可靠 性和实用性。
新型药物的筛选
利用离体蛙心灌流技术,筛选具有潜在治疗作用的新型药物。
实验技术的数字化与智能化
运用现代科技手段,实现离体蛙心灌流实验的数字化和智能化,提 高实验效率和准确性。
本实验的局限性及改进空间
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离体蛙心实验报告实验结论
离体蛙心实验报告实验结论离体蛙心实验是一种经典的生物学实验,通过对蛙心进行离体实验,可以研究心脏的生理功能和调控机制。
本实验旨在验证不同刺激对蛙心的影响,以及探究心脏自律性和传导性的机制。
实验中,我们选取了新鲜的蛙心,并将其置于离体心脏灌流装置中,通过流体供给和调控,使蛙心继续跳动。
在实验过程中,我们分别给予蛙心不同的刺激,观察其对心脏跳动的影响。
我们给予蛙心正常的生理盐水,观察到心脏跳动规律有序、强度适中。
这表明正常的生理盐水对于维持心脏的稳定跳动起到了重要作用,保证了心脏的自律性和传导性。
接着,我们添加了一定浓度的肾上腺素溶液。
肾上腺素是一种重要的激素,它能够增加心脏的收缩力和频率。
实验结果显示,肾上腺素的加入使得蛙心的跳动更加有力,频率也显著增加。
这说明肾上腺素能够通过刺激心脏细胞的β受体,增加心脏收缩力和兴奋性,从而提高心脏的整体功能。
随后,我们给予蛙心高钾溶液。
高钾溶液能够干扰细胞内外钾离子的平衡,导致细胞膜电位异常。
实验结果显示,高钾溶液的加入使得蛙心的跳动变得不规律,甚至出现停跳的情况。
这说明钾离子是维持心脏正常跳动的重要离子之一,其平衡对于心脏的稳定跳动至关重要。
我们给予蛙心一定浓度的乙酰胆碱溶液。
乙酰胆碱是一种神经递质,能够通过刺激心脏细胞的M受体,抑制心脏的兴奋性和传导性。
实验结果显示,乙酰胆碱的加入使得蛙心的跳动变得缓慢而有规律。
这说明乙酰胆碱能够通过刺激心脏细胞的M受体,减慢心脏的兴奋性和传导速度,从而降低心脏的整体功能。
通过离体蛙心实验,我们验证了不同刺激对蛙心跳动的影响。
正常的生理盐水能够维持心脏的稳定跳动,肾上腺素能够增加心脏的收缩力和频率,高钾溶液干扰了细胞内外钾离子的平衡,导致心脏跳动不规律,乙酰胆碱能够抑制心脏的兴奋性和传导速度。
这些实验结果揭示了心脏自律性和传导性的重要机制,对于深入理解心脏的生理功能具有重要意义。
然而,需要注意的是,离体蛙心实验虽然能够提供一定的信息,但与真实的生理环境仍存在一定差异。
离体蛙心灌流实验报告
离体蛙心灌流实验报告
实验目的,通过离体蛙心灌流实验,观察心脏在不同药物作用下的生理变化,
为心脏药理学研究提供实验数据。
实验材料与方法,取新鲜的蛙心,进行离体灌流实验。
首先,将蛙心置于离体
心脏灌流装置中,通过主动脉插管进行心脏灌流。
然后,分别加入不同药物溶液,如肾上腺素、乙酰胆碱等,观察心脏的生理变化。
实验过程中,记录心脏的心率、收缩力、舒张力等指标,并进行统计分析。
实验结果,在加入肾上腺素后,观察到蛙心的心率明显增加,心脏收缩力增强,舒张力减弱;而在加入乙酰胆碱后,心率明显减慢,心脏收缩力减弱,舒张力增强。
这些结果表明,肾上腺素具有增强心脏收缩力和加快心率的作用,而乙酰胆碱则具有减慢心率和减弱心脏收缩力的作用。
实验讨论,离体蛙心灌流实验是一种常用的心脏药理学研究方法,通过模拟体
内环境,观察心脏在不同药物作用下的生理变化。
本实验结果与心脏药理学理论相符,说明离体蛙心灌流实验是一种可靠的实验方法,能够为心脏药理学研究提供重要数据。
结论,通过离体蛙心灌流实验,我们观察到了心脏在不同药物作用下的生理变化,验证了心脏药理学理论。
这为心脏药物的研发和临床应用提供了重要参考,也为心脏疾病的治疗提供了新的思路和方法。
在今后的研究中,我们将进一步探索心脏药物的作用机制,寻找更多有效的心
脏药物,并将离体蛙心灌流实验应用于心脏药理学研究的更多领域,为心脏疾病的治疗和预防做出更大的贡献。
通过本次实验,我们对离体蛙心灌流实验有了更深入的了解,并对心脏药理学
研究有了更加清晰的认识。
希望本实验能为相关领域的研究工作提供一定的参考和帮助。
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关于离体蛙心灌流演示实验的说明
一.实验目的
1.演示蛙心灌流实验, 得出兴奋传递需要神经递质,阐明兴奋在神经元间传递的实质。
2.分析蛙心灌流实验结果,体验学科知识的形成过程,培养探究意识和理性思维。
二.实验原理
乙酰胆碱是M胆碱能受体激动剂,当乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M胆碱能受体特异性结合时,会使心率减慢、房室传导减慢、心肌收缩力减弱。
阿托品是M胆碱能受体阻断剂,抑制乙酰胆碱与M受体结合,从而加速房室传导,增加心肌收缩力。
三.材料与用具
1.实验动物
牛蛙
2.实验试剂
任氏液(Biotopped)
乙酰胆碱(博美):1:10000mg/L
硫酸阿托品注射液(天津金耀药业有限公司):1:2000mg/L
3.实验器材
解剖器材:托盘、解剖蛙板、蛙钉、镊子、眼科剪、毁髓针、棉线、烧杯、滴管。
蛙心管流装置:铁支架、蛙心夹、蛙心插管、蛙心套管、力传感器、信号集线器、数据线、DisLab波形软件
四.实验步骤及结果(一)课前准备
1.蛙心解剖
1)毁脑毁脊髓
2)打开胸腔
3)剪开心包膜、暴露心脏2.蛙心插管
1)结扎
2)插管
3)心脏离体
4)铁支架固定
(二)课堂演示
1.演示步骤
1)观察任氏液条件下,心脏跳动频率及幅度。
2)加入2滴1∶10000乙酰胆碱溶液,观察心脏跳动频率及幅度变化。
3)当出现明显变化时,加入少许1:2000mg/L阿托品溶液,观察心脏跳动频率及幅度变化。
2.实验结果
1)任氏液条件下,心脏跳动频率及幅度
结果:心脏跳动正常。
2)滴加1:10000乙酰胆碱溶液
结果:心脏跳动变慢。
3)滴加1:2000阿托品溶液
结果:心脏跳动逐渐恢复。
附:实验用具及药品。