酸性染料比色法69页PPT
酸性染料比色法测定百合中总生物碱的含量
合 科 植 物 卷 丹 )其 余 试 剂 均 为 分 析纯 。 ,
醋 酸 一 酸 钠 缓 冲 液 (H .)取 醋 酸 钠 51 , 冰 醋 酸 醋 p 36 : .g 加
2 mL 再 加 水 稀 释 至 2 0 L 即得 【 0 , 5m , l J 。 0 5 . %溴 甲酚 绿 酸 性 染 料 的配 制 :精 密 称 取 溴 甲 酚 绿 0
缄 为 对 照 品 , 甲 酚 绿 为 酸 性 染 料 , p . 冲 溶 液 条 件 下 , 氯 仿 萃取 , 4 4 m 波 长 处 测 定 其 吸 光 度 , 测 定 溴 在 H36缓 用 于 1n 并
了 4个 产 区 的 百 合 中 总 生物 碱 的 含 量 。结 果 : 水 仙 碱 在 10 2 0 g 秋 2— 0t/ x mL范 围 内与 吸 光 度 呈 良好 的 线 性 关 系 , 归 方 回
1 仪器 、 剂与 材 料 试
00 g 加 p 36醋 酸一 .5 , H . 醋酸 钠 溶 液 溶解 至 10 , 匀 , 0mL 摇 即得 。
2 方 法 与 结 果
21 对 照 品溶 液 的 制备 精 密称 取 干 燥 至 恒 重 的秋 水 仙 碱 .
对 照 品 1m 。 于 5 m 0 g置 0 L容 量 瓶 中 , p . 酸一 酸 钠 用 H 36醋 醋
的秋 水 仙碱 对 照 液 。
基 金 项 目 : 苏省 中 医药领 军人 才 项 目(J0 9 3 江 L2 0 1 )
按 : 患者经过手术 、 疗后 正气受损 , 腑功 能减弱 , 此 化 脏
[] 陈 娜 ,武彪 .乳腺 癌 易 感 基 因 的 研 究进 展 .江 西 医 药 ,0 0 4 2 2 1 ,5
酸性染料比色法原理
酸性染料比色法原理
酸性染料比色法是一种常用的分析化学方法,它主要用于测定物质中的酸性染
料成分。
该方法基于酸性染料在特定条件下与其他物质发生显色反应的原理,通过比色测定来确定物质中酸性染料的含量。
下面将详细介绍酸性染料比色法的原理。
首先,酸性染料比色法的原理基于酸性染料分子结构中含有苯环和杂环的特性。
在酸性条件下,酸性染料分子中的苯环和杂环结构会与酸性物质发生酸碱中和反应,形成显色化合物。
这些显色化合物具有特定的吸收波长和光谱特征,可以通过比色测定来确定酸性染料的含量。
其次,酸性染料比色法的原理还涉及到酸性染料与其他物质之间的化学反应。
在特定的酸性条件下,酸性染料分子中的官能团会与其他物质发生化学反应,形成显色产物。
这些显色产物可以通过比色测定来确定酸性染料的含量。
另外,酸性染料比色法的原理还包括了光谱分析的原理。
酸性染料显色产物具
有特定的吸收波长和光谱特征,可以通过光谱仪器进行测定。
利用光谱分析可以准确地测定酸性染料的含量,提高了测定的准确性和精密度。
总的来说,酸性染料比色法的原理是基于酸性染料分子结构和化学反应特性,
通过比色测定和光谱分析来确定酸性染料的含量。
这种方法简单、快速、准确,广泛应用于纺织品、食品、化妆品等领域的酸性染料含量测定。
通过了解酸性染料比色法的原理,可以更好地理解和应用这一分析方法,为相关领域的研究和生产提供技术支持。
酸性染料比色法原理及影响因素
酸性染料比色法原理及影响因素
酸性染料比色法是一种经常用于测定大量生物分子含量的分析方法。
该法使用含有具有酸性染料的标记试剂,能够有效提取和定量检
测生物分子,如蛋白质和核酸等,广泛应用于生物分子检测。
酸性染料比色法的原理主要是根据标记试剂中染料的色度变化,
来直接检测分子的浓度。
首先,选定要检测的生物分子,然后添加染
料标记试剂,当试剂和检测分子结合时,染料会变色,染色的强度和
活性分子的浓度成正比。
因此,根据标记染料的色度变化判断出检测
物质的含量,实现定量检测。
对于酸性染料比色法,影响检测结果的因素很多,其中最主要的
有染料的稳定性、灵敏度和定量范围等。
如果染料的稳定性不好,则
检测结果将受到影响;如果灵敏度较低,就会影响浓度检测的精确性;而定量范围合适则决定了该法能够应用在检测多大浓度范围内的分子。
另外,为了保证测得准确的数据,还需要保证实验条件的恒定性,如
温度和湿度等。
酸性染料比色法是一种灵敏、可靠、有效的方法,能够快速准确
地定量检测生物分子含量,广泛应用于分子生物学的研究和实际应用。
但是,为了获得准确的定量检测结果,必须考虑对实验条件的恒定性
和对染料的稳定性、灵敏度和定量范围的要求。
酸性染料比色法测定延胡索中总生物碱的含量 (1)
酸性染料比色法测定延胡索中总生物碱的含量一、目的要求掌握酸性染料比色法测定延胡索中总生物碱含量的原理和方法。
二、基本原理在适当的介质中,生物碱(B )可与氢离子(H +)结合成阳离子(BH +),一些酸性染料,如溴百里酚蓝、溴酚蓝、溴甲酚紫或溴甲酚绿等,在此条件下可解离成阴离子(In -)。
上述阳离子与阴离子定量地结合成有色配位物(BH +In -)离子对,可以定量地溶于某些有机溶剂,在一定波长处测定该溶液有色离子对的吸光度,即可计算出生物碱含量。
++−→←+BH H B-++−→←In H HIn有机相水相)()(__In BH In BH In BH ⋅−→←⋅−→←+++-+三、实验方法对照品溶液的配制 取延胡索乙素对照品约2mg ,精密称定,置25ml 量瓶中,加三氯甲烷溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。
供试品溶液的配制 取延胡索粉末约0.5g ,精密称定,置50ml 具塞锥形瓶中,加少量氨水湿润(约20滴),密塞放置15分钟,精密加乙醚-三氯甲烷-甲醇(25:8:2.5)混合溶剂25ml ,轻轻摇匀,称重,冷浸一周,称重,补足重量,滤过,精密吸取续滤液10ml ,置25ml 具塞锥形瓶中,水浴加热挥干溶剂,精密加入三氯甲烷10ml ,使完全溶解,摇匀,即得。
测定法 精密量取对照品溶液和供试品溶液1ml ,分别置分液漏斗中,各精密加三氯甲烷9ml ,再分别加溴甲酚绿溶液5ml ,振摇3分钟后,静置使分层;同法制备空白溶液。
分取上述三种溶液的三氯甲烷液,在410nm 的波长处测定吸光度,按下式计算,即得。
%100%)1(25(%)⨯-⨯⨯=水分含量样对对样W C A A式中 A 样与A 对分别为供试品溶液与对照品溶液吸光度;C 对为对照品溶液中延胡索浓度,g/ml ;W 样为取样量,g 。
四、思考题1.酸性染料比色法的影响因素有哪些?2.本法中使用的溶剂均有挥发性,操作中应注意哪些事项?。
酸性染料比色法原理
盐酸硫利达嗪 显蓝色
—
—
2. 与钯离子络合显色反应
利用分子结构中未被氧化的硫与金属钯离子络合形成有色络 合物,如与癸氟奋乃静形成红色络合物。
N 2S
N
O
N
O [CH2]8 CH3
CF3
+ PdCl2
N S
N
O
N
O [CH2]8 CH3
CF3
2+
Pd
CF3
S N
+ 2Cl-
N
O
N
O [CH2]8 CH3
4. 碱性
二、鉴别试验
(一)UV和IR
UV:奋乃静 ChP(2005) [鉴别]取本品,加无水乙醇制成每1ml 中含 7g 的溶液, 照分光光度法(附录ⅣA)测定,在 258nm 的波长处 有最大吸收,吸收度约为0.65。
IR:本品的红外吸收图谱应与对照的图谱一致
(二)显色反应
1. 与氧化剂的显色反应
本类药物溶于硫酸后,在紫外光(365nm)下, 显
不同颜色的荧光。例如:
地西泮
黄绿色
黄色
氯氮卓
黄色
紫色
艾司唑仑 + H2SO4 亮绿色 + 稀硫酸
硝西泮
淡蓝色
蓝绿色
奥沙西泮
淡黄绿色
天蓝色
4. 含卤素 C X 氧 瓶 燃烧法 破 坏 X
(二)紫外特征吸收和红外吸收光谱 (三)色谱法
共性: (1)杂环类药物是合成药物中所占比例最多 的一大类药物. (2)多为五元环或六元环,单环或并合环. (3)杂环结构较稳定,不易开环,其性质受杂 原子种类、数目、位置影响. (4)杂环上取代基性质较活泼,常用于分析. (5)含氮杂环,其碱性的强弱往往用于分析.
酸性染料比色法原理
酸性染料比色法原理
酸性染料比色法是一种常用的分析化学方法,用于测定物质中
特定成分的含量。
其原理是利用酸性染料与待测物质发生化学反应,形成有色产物,通过测定产物的光吸收或光散射来确定待测物质的
含量。
首先,酸性染料比色法的原理基于酸性染料与待测物质之间的
化学反应。
酸性染料通常具有芳香环结构和酸性基团,能够与许多
物质发生化学反应。
在酸性条件下,染料分子中的酸性基团会与待
测物质中的特定官能团发生反应,形成有色产物。
这种有色产物通
常具有特定的吸收或散射特性,可以被光谱仪等仪器测定。
其次,酸性染料比色法的原理还涉及到光谱分析技术。
光谱分
析技术是利用物质对特定波长的光的吸收或散射来研究物质的性质
和含量的一种方法。
在酸性染料比色法中,产生的有色产物会吸收
特定波长的光,产生吸收峰。
通过测定吸收峰的强度,可以确定待
测物质的含量。
这种方法通常具有灵敏度高、准确性好的特点。
最后,酸性染料比色法的原理还包括了色度计的应用。
色度计
是一种专门用于测定溶液颜色深浅的仪器,通过比较待测溶液与标
准溶液的颜色深浅来确定待测物质的含量。
在酸性染料比色法中,可以利用色度计测定产生的有色产物的颜色深浅,从而确定待测物质的含量。
综上所述,酸性染料比色法的原理是基于酸性染料与待测物质的化学反应,利用光谱分析技术和色度计来测定产生的有色产物,从而确定待测物质的含量。
这种方法在分析化学领域具有广泛的应用,可以用于测定酸性物质、有机物质、无机物质等多种物质的含量,是一种重要的分析方法。
酸性染料比色法的基本原理及影响因素
酸性染料比色法的基本原理及影响因素
酸性染料比色法是一种常用的定量分析技术,在可以生成某种有色物质的条件下进行。
它可以测定一定范围内的pH 值,可作为临床用途及研究实验使用。
当变换pH 值时,酸性染料可以由无色到蓝、绿、紫、红直至黑色,取决于染料的种类。
该比色法简单、快捷而又有效,可以用于定量分析各种侯氏离子溶液的pH 值。
酸性染料比色法影响因素主要有:
(1)pKa 值:酸性染料把有色物质生成有pKa 值,且只有在低于pKa 值的pH 值时,才能使染色物质产生色彩。
(2)稳定性:酸性染料的稳定性不同,影响颜色的稳定性和时效性也不同。
(3)交互作用:当染料与其他物质发生交互作用时,其敏感性将受到影响。
(4)离子强度:由离子强弱的变化影响染色物质的极性,也会影响染料的染色强度。
(5)温度:温度也能影响染料的染色物质极性,随着温度升高,酸性染料的染
色强度会减弱。
酸性染料比色法测定雅连中总生物碱的含量
酸性染料比色法测定雅连中总生物碱的含量李雪磊;米盈盈;王秋红;匡海学【摘要】Objectiue:To determine total alkaloids in coptidis deltoideae, which can be used for quality control. Methods: Berberine hydrochloride was used as a control standard. The contents of total alkaloids were determined by acid dye colorimetry. Results:The linear range of berberine hydrochloride was 44.7~178.8μg·mL-1, the regres-sion equation wasY=1.7765x+0.124, r=0.9991. The average recovery was 100.35%, and RSD was 1.02%. Conclu-sion:This method is accurate with good reproducibility, which can be used for quality control.%目的:测定雅连中总生物碱的含量,为其质量的控制提供实验依据.方法:以盐酸小檗碱为标准品,采用酸性染料比色法测定雅连总生物碱的含量.结果:盐酸小檗碱在44.7~178.8μg·mL-1内,回归方程为Y=1.7765x+0.124,r=0.9991,吸光度与浓度具有良好的线性关系,平均回收率分别为100.35%,RSD=1.02%.结论:该方法准确度好,有一定的专属性,为雅连质量的控制提供实验依据.【期刊名称】《化学工程师》【年(卷),期】2015(000)012【总页数】3页(P29-31)【关键词】雅连;总生物碱;酸性染料比色法【作者】李雪磊;米盈盈;王秋红;匡海学【作者单位】黑龙江中医药大学北药基础与应用研究省部共建教育部重点实验室,黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室,黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学北药基础与应用研究省部共建教育部重点实验室,黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室,黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学北药基础与应用研究省部共建教育部重点实验室,黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室,黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学北药基础与应用研究省部共建教育部重点实验室,黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室,黑龙江哈尔滨 150040【正文语种】中文【中图分类】R927.2雅连为四川著名道地药材,来源于毛茛科植物三角叶黄连(Coptis deltoideaC.Y.Cheng et Hsiao)的根茎,其味苦,寒,归心、脾、胃、肝、胆、大肠经,清热燥湿,泻火解毒。
第八章酸性染料 ppt课件
(一)单偶氮类酸性染料
通常以吡唑啉酮、R酸、H酸、γ酸等氨基萘酚磺酸作为偶合组分, 而以对氨基苯磺酸、氨基萘磺酸等苯胺和萘胺衍生物以及以氨基 对位或邻位上引入长链烷基、苯甲氧基、对甲苯砜基、对甲苯磺 酸酯基等芳胺作为重氮组分,通过偶合反应合成而得。
NaO3S
HO NN
AE 酸性红 A
11
A 苯胺衍生物 + E 以萘系衍生物,可制得橙、红色系的染料。 A 萘胺衍生物 + E 萘系衍生物,可制得一系列红色染料。 A H酸为重氮 + E N–苯基–1–萘胺–8–磺酸,可制得蓝色酸性染 A 对苯胺及其衍生物+ E 吡唑啉酮,可制得嫩黄色染料。
7
3、中性浴染色的酸性染料 ➢ 中性浴染色的酸性染料也称耐缩绒性酸性染料,属于非
匀染性酸性染料。 ➢ 染料结构复杂,分子量大,分子中磺酸基所占比例小,
疏水性部分比例大,水溶性不好; ➢ 对羊毛等纤维的亲和力高,移染性和匀染性差,常在近
中性浴中染色,色泽不够鲜艳,熨烫和湿处理牢度好。 ➢ 染色毛制品经得起洗呢和缩呢处理,对湿处理牢度要求
OH NN
SO3H
HO
NN
HO3S
酸性大红 G
17
8.2.2 蒽醌类酸性染料
R6 O
R1 R2
R5
R4 O
R3
通常具有优异光稳定性
以深色为主:艳蓝、翠蓝及绿色
发光强度较低,有的只有偶氮 染料的二分之一
18
(一)1, 4 – 二氨基蒽醌衍生物类酸性染料 大多是由1,4-二羟基蒽醌、1-氨基-4-溴蒽醌和溴氨酸等中料合成。
13
(二)双偶氮类酸性染料
双偶氮染料按照合成途径分为三种: (1)A1 Z A2, A1=A2或者A1≠A2. (2)A M E. (3)E1 D E2, E1=E2或者E1≠E2
染整工艺原理(Ⅱ)课件:第4章 酸性染料染色
(二)弱酸性染料 染色pH(4~6) >=PI(3.5~5.2)
➢ pH=PI时 染料-纤维:氢键、范德华力、离子键
➢ pH>PI时 染料-纤维:氢键、范德华力 食盐起促染作用
(三)中性染料 染色pH(6~7) >PI(3.5~5.2) 染料-纤维:氢键、范德华力 食盐起促染作用
D D DD
防止染料析出,产生色点
措施:
✓ 加抗沉淀剂; ✓ 分开进料; ✓ 分散型阳离子染料
毛/涤
✓ 羊毛 ----酸性染料、中性染料或活性染料等
✓ 涤纶 ----分散染料、高温高压
染色方法 ✓ 一般是用散毛或毛条染色后再混纺; ✓ 涤纶纤维染色后与本色毛条混纺→织造→匹染 ✓ 采用酸性染料、分散染料一浴法载体染色
三 染色工艺
(一)强酸性染料染羊毛
1.染色配方:
✓ 染料 ✓ 元明粉 ✓ 66oBe,H2SO4 ✓ pH值 ✓ 100℃*60 min
X% 10~20% 2~4% 2~4
2.工艺因素分析
➢ 元明粉 缓染作用
✓ 用量根据颜色深浅决定 • 浅色,用量高 ←浅色要求匀染性好; • 深色, 则反之。
缓染
弱酸性浴染色 的酸性染料 较复杂 中等 较少 稍差,聚集 较大 中等 较差 中等 较好 4-5 醋酸 缓染作用小
中性浴染色的 酸性染料 较复杂 较大 小 差,低温聚集 很大 差 很差 较好 很好 6-7 硫酸铵 促染
➢ 结构分类
➢ 偶氮结构 ✓ 单偶氮:匀染性好,但湿牢度较差 ✓ 双或多偶氮:之间无共轭双键,色浅,湿牢度较好
2.兔毛染色
中国兔毛占世界产量80~90% 存在问题:掉毛较严重
酸性染料比色法
R2O OHH 20
3
H
RO
H 甘草酸
1、溶解度:
3
R1O
6 人参皂甙(A型)
①可溶于水,易溶于热水、含水稀醇、热甲醇和热乙醇中,
几不溶于或难溶于乙醚、苯等极性小的有机溶剂;
❖ 酸性染料的选择:甲基橙、溴麝香草酚兰(BTB)和溴甲酚绿等; ❖ pH值的选择:与生物碱和酸性染料的性质有关。 ❖ 有机溶剂的选择:一般用氯仿、二氯甲烷 ❖ 水分的干扰及消除
药物分析学科
第一节 生物碱类成分分析
四、含量测定
(一)总生物碱的含量测定 (3)雷氏盐比色法
原理: BH++ [Cr(NH3)2(SCN)4]-→ BH [Cr(NH3)2(SCN)4]
202.
常用定量分析方法
滴定法 酸性染料比色法 一阶导数紫外分光光 度法 薄层扫描法 高效液相色谱法
药物分析学科
第二节 黄酮类成分分析
一、概述
1、中药定名义称:黄酮类主化要黄合酮物类是成指分 基本母核中药为名2称-苯基色原主要酮黄(酮2类-p成h分enyl
黄芩
黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、 山柰
山柰酚、山柰素
药物分析学科
第一节 生物碱类成分分析
二、理化性质
3、显色反应 ➢ 生物碱在一定pH条件下可与一些酸性染料(多为磺酸肽
类)生成有色络合物,可被氯仿等有机溶剂定量提出 ➢ 结构中具有酯键的酯碱如乌头碱等可与异羟肟酸铁试剂反
应产生紫红色; 这些特点可用于中药制剂中生物碱成分的分析
药物分析学科
第一节 生物碱类成分分析
素
茵陈
茵陈黄酮、芫花素、槲皮素 补骨脂
补骨脂查耳酮、异补骨脂 查耳酮
山楂
酸性染料比色法测定西米替丁含量
71 5 G分 光 光 愎计 :上 海 分 析 仪 器 厂 。
8 0 离 心沉 淀 机 :上 海 手术 器 械 厂 。西 米 0型 替 丁原 拳 药 ,注 射 用 规 格 ,重 庆 制药 七 厂 , 斗
列 1 至 1 ml 塞 试 管 ,加 入 p m1 5 具 H值 6 4磷 . 酸 盐 缓 冲 液 1ml 0 1 溴 麝 香 草 酚 兰 水 溶 , .%
现误差 。
K
99. 0
1 0.1 C
表 中 数 据 为 三 次 测 定 平 均 渔
3.本 法 具 有 快 速 、 准 确 、 简 便 的 优
点 , 适 用 于 西 米 替 丁 原 料 及 制 剂 的 含 量 测
定。
表 3 酸 性 染料 比色 法 与对 照 法测 定结 果 比较
法 增 加 了测 定 灵 敏 度 ,且 水溶 液 操 作 方
序号
量
m (量 g M 测得 )
¨
回 收 率 X ( ) ( ) CV% % %
l 01. T 99. 5 l O0.1 1. 2
0
O 0
0
便 ,稳 定 . 2.片 剂 测定 前 要 充 分 研 细 ,否 则 易 出
果最佳 。
0 1 lL 氢 氧 化 钠 为 空 白 , 吸 取 氢 氧 化 . mo/ 钠 层 于6 5 m处 进 行 测 定 。 以 吸收 度 A 为 纵 3n 座 标 , 浓 度 ( g m1 C为 横座 标 , 绘 制标  ̄/ ) 准 曲线 ( 略 ) ,并 将 所 得 数 据 进 行 线性 回 图
4.试 用 不 同 的 酸 性 染 料 以 溴 麝 香 草 酚
高中生物实验的染色与颜色观察ppt文档
斐林试剂检测可溶性还原糖
• 原理:还原糖 + 斐林试剂(加热后) → 砖红色沉淀
• 注意:斐林试剂的甲液和乙液要等量混合 均匀后方可使用,而且是现用现配,条件 需要水浴加热。
• 应用:检验和检测某糖是否为还原糖;不同 生物组织中含糖量高低的测定;在医学上进 行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎。
高中生物实验的染色与颜色观察
碱性染料与染色体的观察
• 生物实验中所用的染料,按其来源可分为天然 染料和人工染料两大类。人工染料根据其主要 化学成分的性质,又分成碱性染料、酸性染料 和中性染料三大类,其碱性、酸性和中性是由 染料中有色部分的性质所决定的。若染料的有 色部分为阴离子,即为“酸性”染料;若染料 的有色部分为阳离子,则称为“碱性”染料; 若染料的阴、阳离子均有颜色,则称为“中性” 染料。染色体(质)是细胞核内容易被碱性染料 染成深色的物质。
(5)记准混合后加入——斐林试剂,且现配现用;分别加入 ——双缩脲试剂(先加 A 液,后加 B 液,且 B 液不能过量)。 两者成分相同,但 CuSO4 的浓度不同,所以不能混用。 (6)若用大豆作为材料,必须提前浸泡;若用蛋清作材料,必 须稀释,防止其粘在试管壁上不易刷洗;且该实验应预留部 分组织样液做对比。 (7)易写错别字提示:“斐林试剂”中的“斐”不可错写成 “非”;双缩脲试剂中的“脲”不可错写成“尿”。
体会 还原糖的鉴定是新制得的 Cu(OH)2 与醛基反应,产生 Cu2O 沉淀,而蛋白质的鉴定是在碱性环境下 Cu2+与肽键结 合成特定化合物的显色反应,原理的不同决定了实验操作方 法的不同。
2.实验注意问题 (1)还原糖鉴定实验材料的要求 ①浅色:不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料,防止颜色 的干扰。 ②还原糖含量高:不能用马铃薯(含淀粉)、甘蔗、甜菜(含 蔗糖)。 (2)唯一需要加热——还原糖鉴定,且必需水浴加热,不能 用酒精灯直接加热。若不加热,则无砖红色沉淀出现。 (3)非还原糖(如蔗糖)+斐林试剂―水加―浴热→现象不是无色而是浅 蓝色[Cu(OH)2 的颜色]。 (4)唯一需要显微镜——脂肪鉴定,实验中 50%酒精溶液的 作用——洗掉浮色。