酸性染料比色法测定延胡索中总生物碱的含量 (1)
酸性染料比色法测定白芥子中总生物碱的含量
酸性染料比色法测定白芥子中总生物碱的含量吕伟;田实民【摘要】目的:建立自芥子中总生物碱含量测定的方法.方法:采用酸性染料比色法测定白芥子中总生物碱含量.结果:酸性染料比色法显色的条件为pH 4.2的缓冲液10 mL,0.04%的溴甲酚绿溶液2.0 mL,三氯甲烷萃取4次,每次5 mL,检测波长332 nm.芥子碱硫氰酸盐在1.696～16.960μg·mL-1与吸光度呈良好的线性关系,平均回收率99.75%,RSD=1.16%(n=6).结论:该方法灵敏度高,准确性,重现性好.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2011(013)004【总页数】3页(P18-20)【关键词】酸性染料比色法;白芥子;总生物碱;含量测定【作者】吕伟;田实民【作者单位】枣庄市药品检验所,山东,枣庄,277102;枣庄市药品检验所,山东,枣庄,277102【正文语种】中文白芥子为十字花科植物白芥Sinapis alba L.的干燥成熟种子，具有温肺豁痰利气、散结通络止痛的功能[1]。
化学成分与药理研究表明，以芥子碱为代表的生物碱类成分是其有效部位之一[2-4]，《中国药典》采用HPLC对芥子碱含量进行控制[1]。
本文首次采用酸性染料比色法，以主要有效成分芥子碱硫氰酸盐为对照品，建立白芥子中总生物碱的含量测定方法，为进一步全面控制白芥子药材质量提供实验依据。
UV-2401PC紫外-可见分光光度计(日本岛津)，超声波药品处理机(济宁金百特电子有限公司)。
芥子碱硫氰酸盐对照品(中国药品生物制品检定所，批号111702-200501)。
所用试剂均为分析纯。
白芥子样品，购自不同产地，经山东中医药大学石俊英教授鉴定为十字花科植物白芥Sinapis alba L.的种子。
2.1 对照品贮备液制备精密称取芥子碱硫氰酸盐对照品10.6 mg，用pH 4.2的醋酸-醋酸钠缓冲液溶解并定容至25 mL，作为芥子碱硫氰酸盐对照品贮备液(浓度424 μg·mL-1)。
酸性染料比色法测定巴豆中总生物碱的含量
酸性染料比色法测定巴豆中总生物碱的含量曾宝;李生梅;古俊辉;唐君苹;林吉;赖小平【摘要】目的建立巴豆中总生物碱含量的测定方法,对不同产地的巴豆总生物碱质量分数进行比较研究.方法以木兰花碱作为对照品,采用酸性染料比色法测定巴豆中总生物碱质量分数.结果酸性染料法的显色条件为加pH 6.0缓冲液至8 mL,加溴麝香草酚蓝3.5 mL,振摇3min,静置40 min,三氯甲烷8mL萃取,测定波长为420 nm,在0.024 6～0.147 3 mg范围内线性关系良好(r=0.999 5),平均回收率99.0％,RSD为2.75％.结论本含量测定方法操作简单,灵敏度高,准确性、重复性好,可用于巴豆中总生物碱的含量测定.%Objective To establish a method for the assay of the total alkaloids in Croton tiglium, and investigate the contents from different origins. Methods Acidic dye colorimetry was used for the determination of total alkaloids in Croton tiglium with magnoflorine as reference substance. Results Acid dye colorimetric conditions were as follows; pH6.0 buffer to 8.0 mL, adding 3. 5 mL bromothymol blue, extracting with 8 mL chloroform, shaking out for 3 minutes, stewing for at least 40 min, then determining at the wavelength of 420 nm. The concentration of magnoflorine showed good linearity within the range of 0. 024 6-0. 147 3 mg, r = 0. 999 5, and the average recovery ratio was 99. 0% with RSD of 2. 75%. Conclusion This method is simple, highly sensitive, accurate and reproducible, which can be used for determination of the total alkaloids in Croton tiglium.【期刊名称】《广东药学院学报》【年(卷),期】2012(028)002【总页数】3页(P170-172)【关键词】酸性染料比色法;巴豆;木兰花碱;总生物碱【作者】曾宝;李生梅;古俊辉;唐君苹;林吉;赖小平【作者单位】广州中医药大学新药开发研究中心,广东广州510006;东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院,广东东莞523808;广州中医药大学新药开发研究中心,广东广州510006;东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院,广东东莞523808;广州中医药大学新药开发研究中心,广东广州510006;广州中医药大学新药开发研究中心,广东广州510006;东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院,广东东莞523808;广州中医药大学新药开发研究中心,广东广州510006;东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院,广东东莞523808;广州中医药大学新药开发研究中心,广东广州510006;东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院,广东东莞523808【正文语种】中文【中图分类】R927.2巴豆为大戟科植物巴豆(Croton tiglium L.)的干燥成熟种子，主产于我国西南及福建、湖北、湖南、广东、广西等地。
生物碱
2．极性溶剂 极性较大的生物碱可用中性甲醇、乙醇、酸性甲 醇、乙醇、酸水（常用0.1%-1%盐酸、硫酸、乙酸 、酒石酸等）以及缓冲液等进行提取，这方法较 简便，但提出的杂质较多，需进一步净化。 3．混合溶剂
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生物碱的提取方法，常用的有冷浸、渗漉、 超声波振荡、索氏提取、热回流提取。 在含量测定中常用的提取方法为超声波振荡提 取，大部分待测的有效成分能够被提出。
24
3）比色法测定总碱含量是最重要的方法之一，它是 根据生物碱的颜色、官能团与特定试剂发生反应产生的 颜色，或生物碱与酸性染料在一定条件所成的复合物颜 色等，按比色法完成总碱的测定的。 4）大多数生物碱分子结构中含有双键，在紫外区有吸 收，因此，可按紫外分光光度法于特定波长处测定吸收 系数相近的总碱含量。同理，有荧光的生物碱也可用荧 光分光光度法测定。 以上均属测定总碱的好方法，但测定指定成分的含量， 就有一定的困难。
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5．沉淀反应
生物碱在酸性水溶液或酸性稀醇（＜50%）中能与生物 碱沉淀试剂生成难溶性沉淀。 沉淀反应的阳性结果，往往并不可靠，但阴性反应却 可以证实其不含生物碱。检查时常需用3种以上灵敏的沉 淀试剂对照观察。 生物碱沉淀一般都是试剂分子的阴离子，与生物碱阳 离子形成难溶络盐而产生沉淀（沉淀剂多为重金属盐类 或分子量较大的复盐）。 常用的生物碱试剂有：碘-碘化钾（Wagner试剂）、碘 化铋钾（Dragendorff试剂）、碘化汞钾（Mayer试剂）、 硅钨酸（Bertrand试剂）等。
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生物碱类型
序号 类型 1 吡咯啶衍生物类 2 吡啶衍生物类 3 喹啉衍生物类 4 异喹啉衍生物类 5 吲哚衍生物类 6 咪唑衍生物类 7 喹唑酮衍生物类 8 嘌呤衍生物类 9 甾体生物碱类 10 莨菪烷衍生物类 11 无环生物碱类 12 其它
酸性染料比色法测定乌头属不同药材中乌头生物碱含量
酸性染料比色法测定乌头属不同药材中乌头生物碱含量
张敏敏;蔡晓丹;李耿;肖日平;阮永队;马春玲;陈长青;赖小平
【期刊名称】《中医药导报》
【年(卷),期】2012(18)8
【摘要】目的:测定毒性中药附子、川乌、草乌、雪上一枝蒿的乌头生物碱含量,对这4种药材的临床用量进行控制。
方法:用酸性染料比色法,测定制附子、川乌、草乌中雪上一枝蒿的乌头生物碱含量。
结果:附子中生物碱含量为0.2403 mg/g,川乌为1.0412 mg/g,草乌为2.1149 mg/g,雪上一枝蒿为0.6702 mg/g。
结论:本实验中建立的酸性染料比色法测定乌头生物碱含量,可作为评价毒性药材质量的根据。
【总页数】3页(P78-79)
【关键词】酸性染料比色法;乌头属;生物碱;附子;川乌;草乌;雪上一枝蒿
【作者】张敏敏;蔡晓丹;李耿;肖日平;阮永队;马春玲;陈长青;赖小平
【作者单位】广州中医药大学;塘厦医院
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.酸性染料比色法测定呼和嘎日迪-9总乌头碱含量 [J], 萨仁格日乐;陈红梅
2.酸性染料比色法测定川乌、草乌中总乌头生物碱的含量 [J], 李云霞;孙照;郭艳玲
3.液相色谱/质谱/质谱联用法测定乌头属药材及中成药中乌头类生物硷含量 [J], 王兆基;何绍基;徐树棋
4.酸性染料比色法测定痛血康胶囊总乌头碱含量 [J], 陈美川
5.酸性染料比色法测定痹痛消膏中乌头生物碱的含量 [J], 蔡大可;李耿;彭绍忠;何耀慧;林忠泽;古挺威;苏子仁
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生物碱类药物分析 酸性染料比色法
02
影响因素
1、最佳PH值的选择
能使有机碱全部以盐的形式存在，酸性 染料能够解离成离子，以便它们定量地结合成 离子对而转溶于有机相，且又能将剩余的染料 完全保留在水相。
02
影响因素
2、酸性染料的选择
溴麝香草酚蓝
甲基橙
溴甲酚绿
增加染料的浓度可提高测定灵敏度
02
影响因素
3 有机溶剂的选择
常用的有机溶剂有三 氯甲烷、二氯甲烷、 二氯乙烷、苯、甲苯、 四氯化碳等。
4 水分的影响
测定时用脱水剂或干燥 滤纸过滤
5 有色杂质的影响
测定时缓冲液与酸性染料 混合液先用有机溶剂提取
03
小结
01
酸性染料比色法的原理
02
常用的酸性染料
03
影响因素
04
思考题
常用的酸性染料有哪些？
酸性染料比色法
目录
01 02 03
基本原理 常用酸性染料
影响因素
01
基本原理
BH+ + In
[BH+·In-]
水相 有机相
[BH性染料
磺酞类指示剂
溴麝香草酚蓝(BTB)
pH 6.0-7.6（黄-蓝）
溴甲酚绿(BCG)
pH 3.6-5.2（黄-蓝）
溴酚蓝(BPB)
pH 3.8-4.6（黄-紫）
延胡索2种炮制品煎液中的生物碱含量测定
安徽农业科学 ,Journal of Anhui Agri. Sci. 2009 ,37 (15) :6984 - 6985 责任编辑 熊章琴 责任校对 汪伟
延胡索 2 种炮制品煎液中的生物碱含量测定
梁晓华 , 徐成东 3 , 张志星 (楚雄师范学院化学与生命科学系 ,云南楚雄 675000)
(3) 醋制延胡索。先将延胡索洗净后水浸润一下 ,直至 透心为止。放入锅中炒热 ,按质量比延胡索∶醋为 10∶1 拌炒 , 至醋干后取出 ,冷却后用粉碎机粉碎备用。 1. 1. 2 仪器与试剂。PHS23C 型数字酸度计 (上海鹏顺科学 仪器有限公司) ;DFY2500 型 500 g 摇摆式高速中药粉碎机(温 岭市林大机械有限公司) ; EL204 型电子天平 (梅特勒2托利多 仪器(上海) 有限公司) 。试验中所用试剂硫酸、醋酸、氨水、 氯仿均为分析纯 。 1. 2 方法 1. 2. 1 样品液的制备[2 - 3] 。精密称取延胡索生品 、醋制延胡 索和米泔水制延胡索粉各 10 g ,分别置于 500 ml 烧杯中 ,加 水 200、100 ml 煎煮 2 次 ,每次微沸 20 min ,用脱脂棉过滤 ,加 氨水调 pH 值至 10 以上 ,移入 250 ml 分液漏斗中 ,用氯仿萃 取至无生物碱反应 ,合并萃取液 ,加 20 ml 蒸馏水洗涤 ,再用 5 ml 氯仿洗涤水层 ,合并氯仿。加无水硫酸钠 3 g 脱水后 ,回 收氯仿至小体积 ,转入 10 ml 容量瓶中 ,加氯仿至刻度 ,备用。 1. 2. 2 总生物碱含量的测定。 1. 2. 2. 1 酸碱滴定法。精密吸取上述样品液各 5 ml ,分别置 于 100 ml 锥形瓶中水浴挥去氯仿 ,加氯仿 2 ml 溶解残渣 ,加 0. 0l mol/ L 硫酸 20 ml ,水浴挥去氯仿 ,加甲基红 - 溴甲酚绿 指示剂 2 滴 ,用 0. 02 mol/ L 氢氧化钠液滴定 ,终点由红色变 为绿色 。
分光光度法测定元胡止痛片中延胡索总生物碱的含量
分光光度法测定元胡止痛片中延胡索总生物碱的含量刘琳琳;李正国;刘丽芳【摘要】目的采用分光光度法测定元胡止痛片中延胡索总生物碱的含量,确定最佳的提取及测定方法.方法用溴甲酚绿与生物碱结合成有机络合物,以定量的有机溶剂提取,用分光光度法在波长413 nm 处测定.结果平均回收率为100.9%,RSD 为0.53%.结论本方法准确、可靠、重复性好,可作为元胡止痛片的质量控制标准.【期刊名称】《中国医药科学》【年(卷),期】2012(002)003【总页数】2页(P141-142)【关键词】元胡止痛片;延胡索总生物碱;分光光度法【作者】刘琳琳;李正国;刘丽芳【作者单位】中国药科大学中药分析教研室,江苏,南京,211198;山东省济宁市药品检验所,山东,济宁,272025;山东省济宁市药品检验所,山东,济宁,272025;中国药科大学中药分析教研室,江苏,南京,211198【正文语种】中文【中图分类】R284元胡止痛片由延胡索与白芷两味药材组成，主治由气滞血瘀引起的胃痛、胁痛、头痛及痛经，效果确切。
药理实验证明，延胡索中所含的生物碱类物质为主要的镇痛成分。
处方中所用延胡索多经过醋制，因为游离的生物碱较难溶于水，经醋制后生成醋酸盐而易溶于水。
本研究通过分光光度法测定元胡止痛片中总生物碱含量可有效控制元胡止痛片生产投料，确保药品质量。
梅特勒-托利多XS-43；TU-1800SPC紫外可见光分光光度计，SBC-100超声波处理器（济宁市超声波仪器厂），所用试剂均为分析纯。
元胡止痛片（市售品）；延胡索乙素（中国药品生物制品检定所，批号：110726-200610）。
取本品20片，糖衣片除去糖衣，精密称定，研细，取约1 g，精密称定，用石油醚（60～90℃）脱脂1 h。
取药渣，挥干溶剂后，加1.5%盐酸溶液50 mL，超声处理30 min，滤过，取滤液2 mL，置于分液漏斗中，加醋酸-醋酸钠缓冲液（pH=5.2）20 mL，加溴甲酚绿显色剂2.0 mL，用氯仿15 mL萃取，待静置分层后，分取氯仿层作为供试品溶液。
中药制剂分析模拟试题
模拟试卷(一)一、选择题(一)A型题(每题的5个备选答案中，只有一个最佳答案)(20分)1.中药制剂分析的任务是A.对中药制剂的原料进行质量分析B.对中药制剂的半成品进行质量分析C.对中药制剂的成品进行质量分析D.对中药制剂的各个环节进行质量分析E.对中药制剂的体内代谢过程进行质量检测2.中药制剂化学成分的多样性是指A.含有多种类型的有机物质B.含有多种类型的无机元素C.含有多种中药材D.含有多种类型的有机和无机化合物E.含有多种的同系化合物3.在牛黄解毒片的显微化学反应中，取本品研细，加乙醇10mL,温热10分钟，滤过，取滤液5mL，加镁粉少量与盐酸0.5mL，加热，即显红色，为鉴别方中哪味药材的反应。
A.大黄B.牛黄C.黄芩D.冰片E.雄黄4.杂质限量的表示方法常用A.ppmB.百万分之几C.μgD.mgE.ppb5.砷盐限量检查中，醋酸铅棉花的作用是A.将As5+还原为As3+B.过滤空气C.除H2SD.抑制锑化氢的产生E.除AsH36.农药残留量分析中最常用的提取溶剂为A.丙酮B.甲醇C.乙醇D.正丁醇E.水7.样品粉碎时，不正确的操作是A.样品不宜粉碎得过细B.尽量避免粉碎过程中设备玷污样品C.防止粉尘飞散D.防止挥发性成分损失E.粉碎颗粒不必全部通过筛孔，只要过筛的样品够用即可8.回收率试验是在已知被测物含量(A)的试样中加入一定量(B)的被测物对照品进行测定，得总量(C)，则A.回收率(%)=(C-B)/A×100%B.回收率(%)=(C-A)/B×100%C.回收率(%)=B/(C-A)×100%D.回收率(%)=A/(C-B)×100%E.回收率(%)=(A+B)/C×100%9.薄层扫描定量时均采用随行标准法，即标准溶液与供试品溶液交叉点在同一块薄层板上，这是为了A.防止边缘效应B.消除点样量不准的影响C.克服薄层板厚薄不均匀而带来的影响D.消除展开剂挥发的影响E.调整点样量10.分析中药制剂中生物碱成分常用于纯化样品的担体是A.中性氧化铝B.凝胶C.SiO2D.聚酰胺E.硅藻土11.用C18柱进行生物碱HPLC测定时，为克服游离硅醇基影响可采用A.调整流速B.改变流动相极性C.调整检测波长D.调整进样量E.流动相中加入隐蔽试剂12.可从水提液中提取皂苷的溶剂是A.氯仿B.苯C.甲醇D.乙醇E.正丁醇13.木脂素成分可用紫外光检测是因为A.分子量较小B.亲脂性较小C.结构中有芳香核D.结构中有亚甲二氧基E.本身有颜色14.对麝香的含量测定下列说法不正确者A.主要用色谱法B.色谱法都是用麝香酮为对照品C.气相色谱法是以麝香酮为对照品D.高效薄层扫描可测多种化合物E.高效液相色谱可测麝香中多种甾体成分15.合剂与口服液最常用的净化方法为A.液—固萃取B.液—液萃取C.蒸馏法D.沉淀法E.升华法16. 分析栓剂时除去基质的方法下列哪项是错误的?A.用硅藻土吸附B.亲水性基质用水提取C.油脂性基质用水提取D.油脂性基质用熔融冰浴凝固法E.亲水性基质用有机溶剂提取17.唾液药浓一般比血浆药浓A.高B.低C.相等D.不一定E.以上均不是18.在含量测定方法建立过程中，以回收率估计方法的A.重复性B.线性C.可靠性D.选择性E.灵敏度19.含量测定限度低于多少，可增加一个浸出物测定A.百分之一B.千分之一C.万分之一D.十万分之一E.均需20. 对于HRGC的主要色谱条件进行选择时，下列说法中不正确的是A.柱内径和容量因子增加均使柱效降低B.柱内径小的开管柱，载气的最佳线速大，更适于快速分析C.开管柱内径小，可用高载气线速度，使用热导检测器时，可减小系统的最小检测限D.柱内径的选择要兼顾柱效、分析速度和柱容量E.柱温的选择也要多方面兼顾，而且开管柱十分有利于作程序升温气相色谱(二)B型题(备选答案在前，试题在后，每组若干题，每组题均对应同一组备选答案，每题只有一个正确答案。
延胡索与不同药物配伍中总生物碱含量的测定_罗彦龙
薄层扫描法、紫外分光光度法、酸碱滴定法等，相比较各有特点和不足。
本文选择了以延胡索，延胡索与白芷、当归配伍为研究对象，采用
水煎煮提取总生物碱，利用生物碱盐类易溶于水的原理提取出游离的
生物碱和生物碱盐类，再调节 pH 值，在碱性条件下用有机溶剂萃取，提
取出生物碱。 采用酸碱滴定法测定总生物碱，按消耗的硫酸计算出总
科技信息
职教与成教
延胡索与不同药物配伍中总生物碱含量的测定
杨凌职业技术学院 罗彦龙 陕西交通职业技术学院 李婷婷
［摘 要］为有效指导临床用药和中药新产品的研发,采用酸碱滴定法测定延胡索、延胡索与白芷、延胡索与当归不同配伍中总生物 碱的含量，得出延胡索与白芷配伍中总生物碱含量最高，其次是延胡索与当归配伍中总生物碱的含量，延胡索中总生物碱的含量在 三者中最少。 ［关键词］延胡索 白芷 当归 配伍 水煎煮法 酸碱滴定法
硫酸、甲基红 - 溴甲酚绿指示剂为兰州大学药物分析教研室提供。
1.2 氢氧化钠溶液的标定
用分析天平精密称取 0.2g 固体氢氧化钠置于 100mL 的烧杯中，加
少量蒸馏水溶解，转置 250mL 的容量瓶中，加蒸馏 水 置 刻 度 ，用
0.049mol/L 的硫酸溶液标定，其氢氧化钠溶液浓度为 0.019089mol/L。
7.1084mg 的延胡
索乙素,单位：mg.mol/L
1—— —指其是在 1g 延胡索中，单位：g
2.2 元胡不同配伍中生物碱的提取
水煎煮法提取生物碱：精密称取未粉碎的延胡索颗粒 10g（延胡索
10g 与白芷 5g，延胡索 10g 与当归 10g）置于 1000mL 烧杯中，加水（第一
次 400mL，第二次 300mL）煎煮两次，每次微沸 30 分钟，合并两次水煮
【2017年整理】延胡索煎液中的生物碱含量测定
延胡索煎液中的生物碱含量测定一、实验内容1.醋煮法制备延胡索(或用醋炒延胡索)2.延胡索煎液总生物碱含量测定3.延胡索煎液镇痛试验二、目的要求通过对延胡索炮制前后生物碱含量测定及镇痛试验，进而了解延胡索的炮制意义。
三、实验器材及药品烧杯，电炉、分液漏斗、lOml容量瓶、回收装置、5ml刻度吸管、圆底烧瓶、碘瓶、碱式滴定管、注射器、秒表、计数器，氯仿、硫酸、氨水、无水硫酸钠、氢氧化钠、甲基红、溴甲酚绿、试纸、醋酸等。
四、实验方法(一)炮制1.延胡索除去杂质，洗净，打碎成颗粒状，干燥。
2.醋延胡索取净延胡索，加醋与适量水(平药面)，用文火加热，煮至透心，水干时取出，捣碎成颗粒状，干燥。
延胡索每100kg，用醋20kg。
(二)总生物碱的含量测定1.样液制备精密称取延胡索、醋延胡索各10g，分别置于500ml烧杯中，加水(200ml、100ml)煎煮2次，每次微沸20分钟，用脱脂棉过滤，加氨水调至pHl0以上，移入250m1分液漏斗中，用氯仿萃取至无生物碱反应，合并萃取液，加20ml蒸馏水洗涤，再用5ml氯仿洗涤水层，合并氯仿。
加无水硫酸钠3g脱水后，回收氯仿至小体积；转入10ml容量瓶中，加氯仿至刻度，备用。
2.含量测定精密吸取上述样品液5ml，至100ml锥形瓶中水浴挥去氯仿，加氯仿2ml溶解残渣，加0.0l(mol／L)硫酸20ml，水浴挥去氯仿，加甲基红－溴甲酚绿指示剂2滴，用0.02(mol／L)氢氧化钠液滴定，终点由红色变为绿色(或以电位测定法指示终点，等当点为pH5.1)。
计算方法：总生物碱含量以延胡索乙素计。
每毫升0.01(mol／L)硫酸溶液相当于7.1084mg乙素。
(三)镇痛试验——化学刺激法1.样品液的制备取延胡索生品及醋制品各25g，水煎煮2次(400ml，250m1)微沸25分钟，过滤，浓缩至100ml备用。
2.试验方法取小鼠30只，体重18～22g(雄性)随机分为三组，对照组给予等体积生理盐水，给药组分别灌以上述样液0.6ml／只，40分钟后，各鼠腹腔注射0.7％醋酸0.1ml／10g，观察并记录15分钟内产生扭体反应的动物数或每组扭体反应的次数，与生理盐水组比较其镇痛效果。
第一节 含生物碱类成分的分析 一、含生物碱类成分中药制剂的定性
实例 疏风定痛丸中麻黄碱含量测定 P144
第二节 黄酮类制剂的分析
一、含黄酮类成分的定性鉴别 定性鉴别方法主要有化学显色反应，纸色谱和薄层色谱
(一)化学显色反应 1.还原反应 盐酸-镁粉反应显色反应的机理是黄酮类 成分经还原反应后生成花色甙元及其二聚物。
定性鉴别的操作：将中药制剂用适当方法提取分离。组 分较少的制剂可用有机溶剂提取，常用的溶剂有甲醇、乙 醇或乙酸乙酯；取样品液5～10mL，加入数滴盐酸，然后 加入少许镁粉，如果有黄酮、黄酮醇或其二氢化合物存在， 数分钟后则可产生橙色或红色。必要时，需作空白试验。
W =（ A/ε）×M×V/1000 式中，M：生物碱雷氏盐沉淀的分子量，W：生物碱雷氏盐沉淀 的重量；A：吸收度；ε：克分子消光系数；V：丙酮毫升数。 本方法可不需要标准对照品，但需注意生物碱生成单盐或双盐， 并要注意样品的净化。
(2)酸性染料比色法：在一定pH的介质中，生物碱B与氢离子H+ 结合成盐(BH+)，与某些酸性染料的阴离子In-结合成有色化合物 [BH+In-]，它能定量的被有机溶剂提取出来，此结合物碱化或酸化 后，即定量放出染料可进行比色，或测定该有色的有机溶液。
2．与金属盐类试剂的络合反应
黄酮类成分能与金属离子如Al3+，Zr4+等产生络合 作用，产生荧光或颜色加深等。
中药分析章节大题
第三章3.试述薄层色谱法在鉴别中药中有何特点？鉴别时为何需要对照物？为什么鉴别要在同一薄层板上进行？如何保存薄层色谱图？答：特点：设备简单、操作快捷、专属性强、费用低廉。
具有展开剂灵活多变，色谱图新鲜直观、容易识别等特点。
原因：对照物在薄层色谱上通过展开会有相应的斑点，作为中药制剂如果含有对照物的成分，那么在对照物斑点对应的位置上将会有相相应的斑点，可鉴别出中药制剂中含有与对照物一致的成分。
克服薄层板厚薄不均匀而带来的影响以光学照片或电子图像的形式保存，也可用薄层扫描仪记录相应的色谱图。
4.应用薄层扫描法进行中药鉴别的步骤有哪些？答：薄层板制备—点样—展开—显色与检视—记录5.在中药制剂鉴别中，阴性对照试验的目的是什么？答：消除干扰〔考察制剂中其他药味对欲鉴别药味的薄层色谱干扰情况〕6.试分析为什么红外光谱法在中药鉴别中的应用比合成药物少得多？答：红外光谱具有特征性强、取样量小、简便迅速、准确等特点。
中药是多组分的混合物，红外光谱是所含组分各基团吸收峰的叠加；很合物组成的变化一定导致红外光谱谱峰的变化，因此也具有特征性。
中药的傅里叶变换近红外漫反射光谱包含了样品极为丰富的组成信息，图谱具有较强的指纹性。
7.DNA分子遗传标记技术鉴别中药有什么特点？答：具有微量、快速、特异性强、准确可靠、对样本要求较低的特点中药的检查1.中药制剂中杂质分为哪两类？它们主要来自哪些方面？答：常规物质和有害物质〔1〕药材和饮片中引入的杂质〔2〕生产制备过程引入的杂质〔3〕贮藏过程引入的杂质2.为什么中药制剂的杂质只进行限量检查，一般不测定其准确含量？在不影响疗效和不发生毒副作用的原则下，对于中药制剂中可能存在的杂质允许有一定限度，在此限度内，杂质的存在不致对人体有毒害，不会影响药物的稳定性和疗效，因此，对中药制剂中的杂质进行限度检查即可。
3.简述中药检查所包括的主要内容？答：有效性检查、纯度检查〔杂质检查〕、制剂通则检查、安全性检查4.什么是重金属？在重金属检查中，常以铅作为代表，为什么？简述其检查原理？答：重金属是指在规定实验条件下，能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色，生成不溶性硫化物的金属杂质。
酸性染料比色法测定雅连中总生物碱的含量
酸性染料比色法测定雅连中总生物碱的含量李雪磊;米盈盈;王秋红;匡海学【摘要】Objectiue:To determine total alkaloids in coptidis deltoideae, which can be used for quality control. Methods: Berberine hydrochloride was used as a control standard. The contents of total alkaloids were determined by acid dye colorimetry. Results:The linear range of berberine hydrochloride was 44.7~178.8μg·mL-1, the regres-sion equation wasY=1.7765x+0.124, r=0.9991. The average recovery was 100.35%, and RSD was 1.02%. Conclu-sion:This method is accurate with good reproducibility, which can be used for quality control.%目的:测定雅连中总生物碱的含量,为其质量的控制提供实验依据.方法:以盐酸小檗碱为标准品,采用酸性染料比色法测定雅连总生物碱的含量.结果:盐酸小檗碱在44.7~178.8μg·mL-1内,回归方程为Y=1.7765x+0.124,r=0.9991,吸光度与浓度具有良好的线性关系,平均回收率分别为100.35%,RSD=1.02%.结论:该方法准确度好,有一定的专属性,为雅连质量的控制提供实验依据.【期刊名称】《化学工程师》【年(卷),期】2015(000)012【总页数】3页(P29-31)【关键词】雅连;总生物碱;酸性染料比色法【作者】李雪磊;米盈盈;王秋红;匡海学【作者单位】黑龙江中医药大学北药基础与应用研究省部共建教育部重点实验室,黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室,黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学北药基础与应用研究省部共建教育部重点实验室,黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室,黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学北药基础与应用研究省部共建教育部重点实验室,黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室,黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学北药基础与应用研究省部共建教育部重点实验室,黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室,黑龙江哈尔滨 150040【正文语种】中文【中图分类】R927.2雅连为四川著名道地药材，来源于毛茛科植物三角叶黄连（Coptis deltoideaC.Y.Cheng et Hsiao）的根茎，其味苦，寒，归心、脾、胃、肝、胆、大肠经，清热燥湿，泻火解毒。
染料化学论文酸性染料比色法测定苦参药材中总生物碱的含量
染料化学论文/酸性染料比色法测定苦参药材中总生物碱的含量【摘要】目的：建立酸性染料比色法测定苦参药材中总生物碱的含量。
方法：将苦参的酸水提取液用氢氧化钠溶液调节至中性后，依次加入pH=7.6缓冲溶液，溴代麝香草酚蓝指示液、氯仿混合振摇，静置分层，于413 nm波长处测定氯仿层吸收度。
结果：苦参碱检测浓度在0.004mg/mL～0.02 mg／mL范围内与吸收度线性关系良好，平均加样回收率为98.96%(RSD=1.59%)，并对实际药材进行了含量测定。
结论：本方法操作简便、准确，可用于苦参药材的质量控制。
【关键词】酸性染料比色法苦参碱含量测定Abstract Objective：To establish a method to determine total alkaloids in radix Sophora lavescens by acid dye colorimetry．Methods：total alkaloids of radix Sophora lavescens were extracted by acidified water，then adjusted to neutral by sodium hydroxide solution, dissolved with buffer solution，then were mixed with 0.025％ of bromothymol solution and chloroform，and then the mixture was shaken，standing and demixed，the absorbability of chloroform layer was detected at the wavelength of 413nm．Results：The detection concentration of matrine showed good linearity with its absorbability within the range of 0.004 mg/mL～0.20 mg／mL(r=0.9992)，the average recovery was 98.96％(RSD=1.59％)．three radix Sophora lavescens from different source were determined with this method.Conlusion：The established method is simple and accurate，which can be used for quality control of Radix Sophora flavescentis.Key words Acid dye colorimetry；Matrine；Content determination中药苦参是豆科植物苦参Sophora flavescens Ait.的干燥根，所含有的生物碱是苦参药理作用的主要有效成分，具有抗炎、抗肿瘤、镇痛、抗心律失常、平喘、镇咳、杀菌等作用［１，２］。
延胡索酸碱水提物中生物碱含量比较
延胡索酸碱水提物中生物碱含量比较陈薇娜;岳显可;杨海燕;张方坤【摘要】目的比较不同浓度酸碱水溶液对延胡索中原阿片碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、去氢紫堇碱、延胡索乙素和紫堇碱6个生物碱提取的影响.方法用氨水、冰醋酸配制不同酸碱浓度水溶液,供试品加热回流提取;采用Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.6%醋酸溶液(pH 5.0)为流动相进行梯度洗脱,检测波长280 nm,柱温25℃,流速1 mL/min,测定6个生物碱及总生物碱含量.结果原阿片碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、去氢紫堇碱、延胡索乙素和紫堇碱分别在14.34~143.36、12.61~126.07、12.80~128.01、12.22~122.16、15.31~153.14、11.41~114.09μg/mL内呈良好线性关系,R2≥0.9990;平均加样回收率分别为99.31%、97.64%、101.41%、96.29%、99.63%、98.74%,RSD值均小于3.0%.结论延胡索不同酸碱提取物生物碱含量有较大差异,酸性提取物生物碱含量均高于碱性提取物.%Objective To compare the contents of 6 alkaloids(protopine,palmatine hydrochloride,berberine hydrochloride,dehydrocorydaline,tetrahydropalmatine and corydaline) from Rhizoma corydalis extractive extracted by different concentrations of acid and alkali aqueous solution. Methods Different concentrations of acid and alkali aque-ous solution was made by ammonium hydroxide and acetic acid. Test solution was prepared by heating reflux. The opti-mal conditions of separation and detection were achieved on a Agilent Eclipse XDB-C18 (4. 6 mm × 250 mm,5 μm) with linear gradient elution of acetonitrile-0. 6% acetate solution (pH 5. 0). The detection wavelength was 280 nm,the column temperature was 25 ℃,and the flow rate was 1 mL/min.Six alkaloids and total alkaloids of the solution were detected. Results All the active constituents′ calibration curves showed a good linearity,the liner range of the active constituents was 14. 34 ~143. 36,12. 61 ~126. 07,12. 80 ~128. 01,12. 22 ~122. 16,15. 31 ~153. 14,and 11. 41~114. 09 μg/mL,R2≥0. 9990,respectively. The average recovery was 99. 31%,97. 64%,101. 41%,96. 29%,99. 63%and 98. 74%,RSD<3. 0%. Conclusion The contents of alkaloidin Rhizoma corydalis which are extracted by alkali aqueous solution are higher than by acid aqueous solution,which has a significant difference.【期刊名称】《实用药物与临床》【年(卷),期】2017(020)002【总页数】5页(P207-211)【关键词】延胡索;酸碱水溶液;生物碱【作者】陈薇娜;岳显可;杨海燕;张方坤【作者单位】浙江中医药大学,杭州310053;浙江中医药大学,杭州310053;浙江中医药大学中药饮片有限公司,杭州311401;浙江中医药大学,杭州310053;杭州市中医院,杭州310006;浙江中医药大学中药饮片有限公司,杭州311401【正文语种】中文延胡索为罂粟壳植物延胡索Corydalis yanhusuo的干燥块茎，别名元胡。
酸性染料比色法测定百部养肺膏中总生物碱的含量
酸性染料比色法测定百部养肺膏中总生物碱的含量作者：徐玲玲王凌来源：《上海医药》2008年第07期摘要目的：建立百部总生物碱的测定方法，测定百部及其制剂总生物碱的含量。
方法：以盐酸麻黄碱为对照品，采用酸性染料比色法，在波长414 nm处测定百部总生物碱含量。
结果：在51.5～206 ng范围内百部总生物碱的线性关系良好，回归方程Y＝0.004 6X+0.038 4，相关系数r＝0.999 3(n=5);平均回收率为99.3 %（RSD＝1.0%）。
结论：该方法准确、可靠、重复性好，可作为百部及其制剂的质量控制标准。
关键词百部生物碱比色法中图分类号：R92 文献标识码：B 文章编号：1006-1533(2008)07-0326-百部养肺膏是我院治疗咳嗽的特色制剂，主药百部为常用中药，性味甘、苦、微温，归肺经,具有润肺止咳、杀虫灭虱的功效,可用于治疗咳嗽、肺痨、百日咳、体虱、癣疥等。
百部主要有效成分是其所含的多种百部生物碱，为有效地对该药进行质量控制，笔者建立了百部的含量测定方法，以提高百部养肺膏中总生物碱的得率和含量。
1 仪器与试药1.1 仪器-UV 2450型可见-紫外分光光度计(日本岛津)；Sartorius BS124S型电子天平(德国赛多利斯公司，1/万)；BRANSONB5200S－DT超声清洗仪 (必能信超声上海有限公司)；梅特勒-托利多 DELTA320型 pH计。
1.2 试剂与药品盐酸麻黄碱对照品(中国药品生物制品检定所，批号：171242-200405)；溴甲酚绿(分析纯，上海试剂三厂)；醋酸钠、冰醋酸、正丁醇、甲醇等试剂均为分析纯。
6批百部养肺煎膏（本院制剂室生产，批号分别为060404，060608，060911，061124，070404，070530）；百部饮片3批（上海虹桥饮片厂提供，批号分别为060427，061101，070411）。
2 方法与结果2.1 样品供试液的制备百部饮片：精密称取通过60目筛的百部粉末0．5 g ，精密加入水饱和正丁醇40 mL，放置过夜，超声20min，滤过，残渣用少量水饱和正丁醇冲洗滤过，合并所有滤液，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至5 mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
延胡索总生物碱提取工艺的实验研究
延胡索总生物碱提取工艺的实验研究作者：韩姗姗来源：《中国科技博览》2016年第10期[摘要]对延胡索总生物碱提取的最佳工艺进行对比分析和筛选。
方法：在提取的过程中，要严格得根据正交实验表来进行提取操作，在这一过程中我们可以充分的利用生物碱比较容易溶解在酸水当中而难溶于碱水当中的特征来完成提取物纯化工作，同时在这一过程中我们还要采用紫外线分光光度法对总生物碱的含量进行全面的测定，将延胡索总生物碱含量和干膏率当作是检测的指标，同时还要在这一过程中确定最为科学合理的提取工艺。
结果：最为科学的提取工艺是8倍浓度为60%的乙醇溶液，提取3次，时间间隔为2h。
结论：这一功率提取率非常高，同时具有非常强的稳定性，这样一来也为更加深度的去研究延胡索总生物碱的药理作用提供了非常好的条件。
[关键词]延胡索；生物碱；干膏率；正交试验中图分类号：U220 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2016）10-0357-01延胡索是某种罂粟科植物的干燥根茎，它最为主要的化学成分就是生物碱，它能够起到非常好的活血化瘀的作用，同时也能起到行气止痛的作用，可以有非常好的补气养血的功能，此外，在止痛效果上也有着非常好的表现，除此之外，这种药物在预防和治疗胃溃疡、镇静、催眠以及抗肿瘤等方面都有着非常广泛的应用。
在本实验当中主要是借助生物碱易溶于酸而难溶于碱的特性来对提取物进行纯化处理，将总生物碱的含量和干膏率当作最为重要的指标，同时还要在这一过程中采用正交试验设计法来对提取工艺进行有效的控制和处理，这样也能够促进延胡索总生物碱药理作用的深入研究。
1、仪器与材料752型紫外可见分光光度计（上海菁华科技仪器有限公司）；DJ-04型粉碎机（上海淀久中药机械制造有限公司）；京制0000249号电子分析天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；DRT-TW型调温电热套（郑州长城科工贸有限公司）；DZF系列真空干燥箱（上海华联医疗器械有限公司）；KUDOSSK5200LH超声仪（上海科导超声仪器有限公司）；DK-S24型电热恒温水浴锅（上海华联医疗器械有限公司）；延胡索药材（批号：131028）购自上海德华国药制品有限公司，经鉴定与2010版药典一部正品相符；延胡索乙素对照品（中国药品生物制品检定所，批号110726-201213）；95%乙醇（上海振兴化工一厂）；纯化水（自制）；其他试剂均为分析纯。
延胡索生物碱中药提取物
延胡索生物碱中药提取物延胡索生物碱【提取来源】本品为罂粟科植物延胡索CorydaLis yanhusuo W.T.Wang的块茎提取的生物碱类成分，总生物碱含量≥80%。
【主要成分】延胡索乙素Tetrahydropalma，含量：50%【随属成分】紫堇碱Corydaline原阿片碱Protopine四氢黄连碱Tetrahydrocoptisine延胡索辛素Corydalis H海罂粟碱Glaucine巴马亭Palmatine含量：30%【性状】本品为类白色至浅黄色粉末，味苦，可溶于氯仿、乙醚、丙酮、乙醇。
【鉴别】取本品加氯仿制成0.5%溶液作供试液。
取标准品延胡索甲素、延胡索乙素、延胡索丙素、延胡索丁素、延胡索戊素、延胡索辛素、延胡索壬素加氯仿制成各含0.5mg/ml溶液作对照液。
取延胡索标准对照药材1.0g加氨水1ml，湿润30分钟，加乙醚40ml，超声提取30分钟，滤液蒸干，残渣加氯仿1ml溶解作对照液。
取上述三液各5μl，分别点于同一硅胶G板，一次点二板。
(1)以甲苯-丙酮(9：2)展开，碘蒸气显色，日光下检视，再挥尽碘迹，紫外灯365nm检视。
(2)以乙醚-环己烷-甲醇(5：3：0.5)展开，碘蒸气熏1分钟，挥去碘，紫外灯254nm检视，然后将薄层板置氨蒸气中蒸10分钟，挥去氨，再以乙醚-环己烷-甲醇(5：3：0.5)二次展开，紫外灯254nm 检视。
最后以苯氯仿-甲醇二乙胺(7：2：1：0.3)第三次展开，紫外灯365nm检视。
标品斑点对应位置显相同颜色荧光斑点和可见光斑点，比对标准药材斑点，对应率≥60%。
【检查】干燥失重：不得过2.0%(附录Ⅸ G)炽灼残渣：不得过0.1%(附录Ⅸ J)重金属：不得过10ppm(附录Ⅸ E)【含量测定】照高效液相色谱法(附录Ⅵ D)测定。
色谱条件C18柱。
流动相：甲醇-0.1磷酸(三乙胺调pH=6.0) (55：45)。
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酸性染料比色法测定延胡索中总生物碱的含量
一、目的要求
掌握酸性染料比色法测定延胡索中总生物碱含量的原理和方法。
二、基本原理
在适当的介质中，生物碱（B ）可与氢离子（H +）结合成阳离子（BH +），一些酸性染料，如溴百里酚蓝、溴酚蓝、溴甲酚紫或溴甲酚绿等，在此条件下可解离成阴离子（In -）。
上述阳离子与阴离子定量地结合成有色配位物（BH +In -）离子对，可以定量地溶于某些有机溶剂，在一定波长处测定该溶液有色离子对的吸光度，即可计算出生物碱含量。
++−→←+BH H B
-++−→←In H HIn
有机相水相)()(__In BH In BH In BH ⋅−→←⋅−→←+++-+
三、实验方法
对照品溶液的配制 取延胡索乙素对照品约2mg ，精密称定，置25ml 量瓶中，加三氯甲烷溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的配制 取延胡索粉末约0.5g ，精密称定，置50ml 具塞锥形瓶中，加少量氨水湿润（约20滴），密塞放置15分钟，精密加乙醚-三氯甲烷-甲醇（25：8：2.5）混合溶剂25ml ，轻轻摇匀，称重，冷浸一周，称重，补足重量，滤过，精密吸取续滤液10ml ，置25ml 具塞锥形瓶中，水浴加热挥干溶剂，精密加入三氯甲烷10ml ，使完全溶解，摇匀，即得。
测定法 精密量取对照品溶液和供试品溶液1ml ，分别置分液漏斗中，各精密加三氯甲烷9ml ，再分别加溴甲酚绿溶液5ml ，振摇3分钟后，静置使分层；同法制备空白溶液。
分取上述三种溶液的三氯甲烷液，在410nm 的波长处测定吸光度，按下式计算，即得。
%100%)
1(25(%)⨯-⨯⨯=水分含量样对对样W C A A
式中 A 样与A 对分别为供试品溶液与对照品溶液吸光度；C 对为对照品溶液中延胡索浓
度，g/ml ；W 样为取样量，g 。
四、思考题
1．酸性染料比色法的影响因素有哪些？
2．本法中使用的溶剂均有挥发性，操作中应注意哪些事项？。