克伦特罗酶联免疫定量检测试剂盒I
克伦特罗说明书一步法
盐酸克伦特罗酶联免疫检测试剂盒使用说明书一、概要克伦特罗（clenbμterol，CLE）是一种 －肾上腺受体激动剂，此类药品在临床上用于治疗支气管哮喘、慢性支气管炎和肺气肿等疾病。
因为该药可以提高瘦肉率，减少脂肪沉积和促进动物生长，被一些畜牧养殖企业作为养殖促进剂非法使用。
人食用了饲喂克伦特罗作为添加剂的动物所产生的畜产品后，残留的克伦特罗可导致人体肌肉震颤、心悸、神经过敏、头痛、目眩、恶心、呕吐、发烧、战栗等症状，对消费者的健康造成极大危害。
我国农业部第235号文件规定不得检出。
本试剂盒是应用ELISA技术研发的药物残留检测产品,与仪器分析技术比较，能经济、快速地检测出尿样、肌肉、肝脏及饲料等中的克伦特罗。
二、测定原理本试剂盒是利用竞争ELISA方法，在酶标板微孔上预包被抗克伦特罗抗体。
检测时，加入标准品或样品溶液及克伦特罗酶结合物，他们竞争性地与克伦特罗抗体结合，形成抗原抗体复合物；用TMB底物显色；加入反应终止液后在450nm波长酶标仪下进行检测，样品中的克伦特罗浓度与吸收光强度成反比。
三、试剂盒组成酶标板1块(包被抗克伦特罗抗体)标准液6瓶（1ml/瓶）：0、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb。
酶结合物…………………………7ml显色剂A …………………………7ml显色剂B …………………………7ml终止液…………………………7ml10×浓缩洗涤液…………………50ml说明书……………………………1份四、需要但试剂盒中不提供的器材和试剂（1）设备……微孔板酶标仪(450nm)……振荡器……离心机……微量移液器：20μl～200μl,100μl~1000μl……容量瓶：100ml，500ml，1000ml（2）试剂……三氯乙酸……氢氧化钠……叔丁基甲醚色谱级……浓HCl……氯仿……磷酸……Tris……乙酸乙酯……乙腈五、样本前处理步骤样本处理前须知处理任何样本时，都须注意：（1）实验中必须使用一次性吸头，在吸取不同的试剂时要更换吸头。
克伦特罗ELISA快速检测方法
克伦特罗ELISA快速检测方法克伦特罗属于-兴奋剂类药物，可以提高脂肪型动物的瘦肉率和加速动物生长。
8.3 当板间差异性大时，可能原因是板与板之间孵育时间相差太大，板与板之间洗涤不一致，移液枪使用不当，温度不同等。
克伦特罗属于-兴奋剂类药物，可以提高脂肪型动物的瘦肉率和加速动物生长。
目前由于多起克伦特罗中毒事件且出现了死亡案例，因此被禁止使用。
克伦特罗ELISA快速检测试剂盒与经典色谱法相比，具有操作过程简单、样品处理快捷，可同时分析多个样品，分析时间短、成本低、灵敏度高且对环境污染小等优点。
1 原理ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗体分子共价结合，此种结合不会改变抗体的免疫学特性，也不影响酶的生物学活性。
此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。
2 试样的准备2.1 对于尿样可直接用于检测，或者样品比较浑浊时，可适当离心。
当尿样冷冻时，应将尿样回温再测。
2.2 饲料样品要按照说明书的处理步骤进行。
当然，为保证样品充分被提取，可适当延长涡旋时间、离心时间及离心转数。
3 试剂的准备3.1 不同批次的试剂盒不能混用，因为抗体和微孔板具有盒与批次的特异性。
3.2 按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。
ELISA中用的蒸馏水或去离子水，包括用于洗涤的应为新鲜的和高质量的。
自配的缓冲液应用pH计测量较正。
3.3 从冰箱中取出的实验用试剂应待温度与室温平衡后使用。
试剂盒中本次实验不需用的部分应及时放回冰箱保存。
3.4 检测过程中应尽量保持室温20~25℃，避免在通风口操作，温度过低、过热或蒸发都会影响检测数据的准确性。
同样不应再阳光直射下实验，防止过热或蒸发带来影响。
4 加样4.1 在ELISA中一般有4次加样步聚，即加标本或样品、酶结合物、底物、终止液。
加样时应将所加物加在板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡，当有气泡时可用干净的枪头小心刺破。
4.2 加标准及样品时一般用微量加样器，按规定的量加入板孔中，每次加标本应更换吸嘴，以免发生交叉污染。
胶体金法与酶联免疫法相结合快速检测克伦特罗
胶体金法与酶联免疫法相结合快速检测克伦特罗苏存举,陈福生3,高志贤3①,苗颂②,刘楠①,冯屹(华中农业大学食品科技学院,武汉430070) 摘要:目的研究胶体金免疫层析法(GIC A)与酶联免疫吸附法(E LIS A)相结合,以建立对饲养、屠宰、流通各环节的畜尿克伦特罗(Clenbutero1,C L)定性和定量检测的方法。
方法用柠檬酸三钠还原氯金酸,制备20nm粒径的胶体金,胶体金标记单抗后喷涂到玻璃纤维膜上,特异性抗原(C L2BS A)以线状包被在硝酸纤维素膜上,制成快速检测试纸条。
用E LIS A进行定量。
结果对G C2MS不确定的36份阴性样品和24份阳性样品用GIC A方法检测,其阴性符合率为97%,阳性符合率为96%。
同样样品用E LIS A方法检测,其符合率为100%。
最低检测限为5.0ng/m L;用GIC A法只需在试纸条上滴加4～5滴样液5～10min就可出结果;在2个月的随机抽查中,试纸条的检测结果没有变化。
结论本方法准确性高、稳定性好,操作过程简单,适合于作现场大规模、高通量检测。
因此本方法具有广泛的应用及推广价值。
关键词: 胶体金; 克伦特罗; 酶联免疫吸附法 中图分类号:R155.5 文献标识码:A 文章编号:1001-5248(2008)03-0176-04 克伦特罗(Clenbutero1,C L)俗称“瘦肉精”,是β2肾2上腺受体激动剂。
在家畜养殖中加入C L可以提高瘦肉率或者加速动物的生长。
C L作为药物使用时可以治疗哮喘等疾病,但是如果用作家畜生长调节剂,其剂量通常是治疗疾病剂量的5～10倍,这样就可能残留于食品中而引起人体的不良反应,主要包括心跳过快和四肢肌肉颤动等中枢神经中毒后的失控症状,甚至导致死亡〔1〕。
目前已有多种方法用于对C L的残留分析,主要包括酶联免疫检测法(E LIS A)、高效液相色谱法(HP LC)、气相色谱2质谱联用法(G C2MS)、液相色谱2质谱联用法(LC2MS)等,主要是依靠特殊仪器进行分析,不能适应市场监督需要快速、简便、价廉的要求。
克伦特罗的CLIA 分析试剂盒的研制
克伦特罗的CLIA 分析试剂盒的研制沈浩龙;张长弓;陈巧钦;江良振;庄晓勇;黄江山;郭书林;黄印尧【摘要】A highly active antibody was produced by making manmade antigen of Clenbuterol . We established a direct competition method to detect Clenbuterol that used HRP as markers and luminol as chemiluminescent substrates ,with which many parameters were optimized ,including coating buffer ,coating condition ,blocking condition ,incubating time , and enzyme consumption . Based on this method we developed a chemiluminescent detecting kit ,whose linear range was 0.1-8.1 ng · mL -1 ,the linear correlation coefficient wasr=0.996 ,the IC50 was 0.607 ng mL -1 ,the detection limit was under 0.1 ng · mL -1 ,the within-run assay coefficient of variation was 6.76% -8.31% ,the between-run assay coefficient of variation was 7.4% ,the coefficient of recovery was between (90 ± 15)% ,and there was no cross reaction with other β-agonists .%通过制备克伦特罗（Clenbuterol ，CL）人工抗原获得高活性抗体，用辣根过氧化物酶（HRP）标记CL抗原，以鲁米诺（luminol）为发光底物，建立直接竞争法检测分析盐酸克伦特罗，并对包被液、包被条件、封闭蛋白、孵育时间、酶用量等参数进行优化，成功研制出化学发光法检测 CL 试剂盒。
酶联免疫吸附法测定盐酸克伦特罗常见误差分析及解决对策
（ ）ｎ （ １ ａ 样 试剂 ） 不完 全 。操作 不稳定 ， 一些 样 品 （ 剂） 留在微 孔 的边缘 上 ， 试 会 比如 在 加抗 体 溶液 或 酶标 记物 不完全使 最 终测 得 结果 （ 酸 克伦 特 罗含 盐 量） 高 ； 偏 加入标 准或处理 好的样 品、 或基 质／ 色试 发 剂 不完全使 最终 结 果偏 低 。在 加样 时 ， 的枪 头会 有 留有一滴 液体 ， 造成 每个 微 孔 中加 入 液 体体 积 的 不
收 稿 日期 ： ０ ７０ — ９ ２ ０ —８ １ 第 一 作者 简 介 ： 范 锋 （９ ８） 男 ， 苏 无 锡 人 ， 科 ， 医 师 ， １７ 一， 江 本 兽
全 即被加入 停止 液终止反应 ， 使得 最终 结果不 正确 ，
难 以形成标 准 曲线 图 ； 度 过高 会 加快 抗 体 抗 原 反 温
从 事 水 畜 产 品检 测 工作 。
维普资讯
畜 牧 兽 医杂 志
第 ２ ７卷
第 １ 期
２ ９
应 ， 造成后 加样 微孔 里还 未来得 及加完 试剂 ， 面 可 前 已加好 试剂 的微 孔 已经 发 生 了 反应 ， 别 是一 些 反 特
１ 德 国拜 发 试 剂 盒 的检 测标 准要 求
ｌ １ 检测对 象 ＿ 可 以检 测尿 、 肉及 牛 眼等组织样 品 。 肌 １ ２ 检测环 境 要求 ． １ ２ １ 室 温 ２ ～２ ℃ ， ．。 Ｏ ４ 使用 之 后立 即将 所 有试 剂 放 回 ２ ℃。 ～８
后在测 定时都 可导致测 量结 果偏低 。 （） ４对于一些浓度超出最高检 出限 ８ １ ／ ． ｇ Ｌ的样
品， 稀释的倍数过大 ， 虽然能在检测范 围内可 以检测出 其浓度 ， 但是增加了误差 ， 测出的结果准确底偏低 。
酶联免疫吸附法(ELISA)检测猪肉中盐酸克伦特罗
酶联免疫吸附法（ELISA）检测猪肉中盐酸克伦特罗作者：薛金英来源：《中国动物保健》2014年第10期盐酸克伦特罗（俗称瘦肉精）为一种人工合成的β-肾上腺素兴奋剂，具有扩张支气管的作用，常用来防治哮喘、肺气肿等肺部疾病。
当其应用量达到治疗量的5～10倍时，其有能量重分配作用，可使肌肉合成增加，脂肪沉积减少，因此俗称为“瘦肉精”。
在畜牧业生产中一些非法使用者将其作为一种和生长促进剂添加到动物饲料中，用以改善胴体的品质，同时也造成食品中盐酸克伦特罗（瘦肉精）的残留。
当人们食用盐酸克伦特罗残留的产品后会出现一系列的中毒症状。
动物源性食品药物残留问题逐渐引起人们的重视。
本法用于定量、定性检测猪肉中盐酸克伦特罗的残留。
1试验原理采用间接竞争ELISA法，在微孔板上包被抗盐酸克伦特罗检测抗原，样品中的盐酸克伦特罗将和酶标板上的盐酸克伦特罗检测抗原竞争结合盐酸克伦特罗抗体，盐酸克伦特罗检测抗原结合的盐酸克伦特罗抗体再与同时加入的酶标二抗结合，洗涤后，用TMB底物系统显色，微孔板吸光值与样品中盐酸克伦特罗含量成负相关，与标准曲线比较再乘以浓度比值即可得出盐酸克伦特罗在样品的实际含量。
2试验方法（稀释倍数为4倍）称取1.0 g（±0.05 g）均质样品于50 mL聚苯乙烯离心管中，加入1 mL 0.1 M盐酸，再加入2 mL提取工作液，充分振荡混匀5 min，4 000 rpm（20～25℃）离心10 min。
取1 mL上清液加入约25 μL 1 M 氢氧化钠调节pH至6.5～7.5之间，充分振荡混匀，取50 μL用于分析。
如果上层中存在白色脂肪层，取样时应避开。
试剂准备：将10×浓缩洗涤液和蒸馏水（或去离子水）按1∶9充分混匀，即为1×洗涤液。
编号：将盐酸克伦特罗标准溶液和待测样品对应微孔按序编号，建议每个标准溶液和待测样品均做重复孔。
加样：加入标准溶液或样品50 μL，然后每孔分别加入盐酸克伦特罗酶标二抗50 μL和盐酸克伦特罗抗体溶液50 μL。
农业部公告2005年第558号——准予克仑特罗等14种酶联免疫检测试剂盒备案
农业部公告2005年第558号——准予克仑特罗等14种酶联
免疫检测试剂盒备案
【法规类别】兽医兽药
【发文字号】农业部公告2005年第558号
【发布部门】农业部
【发布日期】2005.10.21
【实施日期】2005.10.21
【时效性】现行有效
【效力级别】部门规范性文件
农业部公告
（2005年第558号）
根据我部《关于加强兽药残留检测试剂（盒）管理的通知》（农办医[2005]3号）要求，为加强兽药残留检测试剂管理，保证兽药残留检测质量可靠和动物性食品安全，我部组织残留专家委员会对中国兽医药品监察所等单位申请备案的克仑特罗等14种酶联免疫检测试剂盒进行了审查。
经审查，该14种酶联免疫检测试剂盒符合有关规定，准予备案，允许生产和用于全国兽药残留监控计划的检测。
现将该14种酶联免疫检测试剂盒（附件1）及其质量标准与使用说明书予以公布（附件2）。
特此公告
中华人民共和国农业部
二〇〇五年十月二十一日
附件1
备案酶联免疫检测试剂盒名单。
克伦特罗检测试剂盒使用说明书 Kit CatalogNo BC-3003
克伦特罗检测试剂盒使用说明书Kit Catalog No.BC-3003一、概要:克伦特罗(Clenbuterol)，俗称瘦肉精，是一种β2兴奋剂。
能提高动物体内的瘦肉的比例，并加速动物生长，而被广泛添加于动物饲料中，然而其会残留在动物体内，人类食用后会产生严重的副作用，轻则导致心跳及心率不正常，重则可引发心脏病。
目前，许多国家政府已明令禁止其使用于动物饲料中。
本公司研发生产的克伦特罗检测试剂盒的检测结果准确、稳定，可检测存在于动物的尿液、血清、血浆、组织(肌肉、心脏、肝脏等)、及动物饲料樣本中的克伦特罗。
样品前处理方式简单、方便，适用于各级政府食品安全检测机构、各类屠宰企业、肉类食品加工及饲料生产企业等。
二、检测原理:本试剂盒利用竞争酶联免疫方法，预先在微孔中包被羊抗兔抗体，实验时先后加入克伦特罗标准品，或待测样本，克伦特罗酶标抗原和兔抗克伦特罗抗体。
经过室温温育，反应液中的兔抗克伦特罗抗体与微孔板上的羊抗兔抗体结合，待测样品中的克伦特罗与克伦特罗酶标抗原竞争微孔板上的兔抗克伦特罗抗体。
洗涤后，没有与抗体结合的待测样品中的克伦特罗或酶标抗原被洗去，再加入反应底物，结合的酶标抗原的酶将底物转化为蓝色产物，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色。
反应完成后，样品中克伦特罗含量越多，反应呈色就越浅；反之，样品中克伦特罗含量越少，则呈色越深。
利用标准曲线可计算出样品中克伦特罗含量。
三、试剂盒提供试剂:1.羊抗兔抗体包被的微孔板:96孔。
2.克伦特罗参考标准品:0，0.05，0.25，1.00，2.50，5.00ppb (ng/ml);1.5ml/瓶，一套共6瓶。
3.克伦特罗酶标抗原试剂(1X):7ml/瓶。
4.兔抗克伦特罗抗体:7ml/瓶。
5.样品稀释液：100ml/瓶。
6.显色剂/底物：11ml/瓶。
7.反应终止液：11ml/瓶。
8.洗涤液(20X)：50ml/瓶，使用前稀释20倍。
四、其它试剂和仪器:1.试剂∙盐酸(5mM,10mM )∙氢氧化钠溶液(2.0M )2.仪器∙均质机(Ultra-turrax)∙微孔板酶标仪∙振荡器∙离心机∙氮气吹干仪或旋转蒸发器∙超声波破碎仪∙20µl,50µl,100µl,200µl,及1ml 移液器五、待测样品处理方法:1.尿液将样品在室温(18-25ºC)以4,000转离心10分钟后取上清液或者过滤后取滤液100克伦特罗检测试剂盒使用说明书Kit Catalog No.BC-3003μl,加入样品稀释液400μl （5倍稀释），用于下一步检测。
克伦特罗酶免疫定量检测试剂盒 说明书
ELISA kit for quantitative detection of Clenbuterol概述：克伦特罗(Clenbuterol)属于一类β-兴奋剂，具有改进脂肪型动物体内肉与脂肪的比例的作用，亦可促进动物生长。
但同时，此药物还会使非横纹肌松弛，人体摄入后可引起心跳、心率不正常等副反应，甚至可导致心脏病。
因此在我国，克伦特罗在畜牧业上的使用是被严格禁止的。
本试剂盒利用竞争酶联免疫法对生物样品中的克伦特罗进行定量分析。
适用于动物尿液、血清、内脏等物质中克伦特罗的快速检测。
由于ELISA法的高通量与简便快速，适合大量样本的定量筛查，自样本加入至结果读出，不超过60分钟，检测灵敏度为0.1ppb。
一、简要原理试剂盒所提供的微孔板上包被有抗体，然后将校准品或样本中的克伦特罗与酶标记的克伦特罗加入微孔中后，两者可竞争结合克伦特罗抗体，洗去未结合的酶标记克伦特罗。
加入底物后，在酶作用下，底物溶液会显蓝色，加入终止剂后，溶液由蓝转为金黄色。
在450nm波长光下测吸光度，吸光度高低与校准品或样品中克伦特罗的含量呈反比，根据校准品的读数作出校准曲线，并利用校准曲线计算出样品中克伦特罗的含量。
二、试剂盒组成1.酶标96孔易折板(抗体已包被)……………………………………………………………………… 96孔2.克伦特罗校准品(0ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb)…………………………… 1 套3.11×浓缩酶标记物…………………………………………………………………………1瓶4.底物溶液…………………………………………………………………………1瓶5.酶标稀释液………………………………………………………………………1瓶6.50×浓缩洗涤液……………………………………………………………………1瓶7.终止剂……………………………………………………………………………1瓶8.其他（说明书、自封袋、封板膜）…………………………………………………………………1套2-8℃贮存，有效期一年三、实验需要但试剂盒不提供的试剂和仪器1.试剂…………50mM盐酸溶液…………氯化钠…………50mM PH7.0 PBS (配制:9g NaCl；4.65g Na2HPO4·12H2O；0.56g NaH2PO4·2H2O 溶解于1000ml 蒸馏水中)…………2M 氢氧化钠溶液…………异丙醇和乙酸乙酯2.仪器…………微孔板酶标仪…………涡旋振荡器或超声波粉碎仪或摇床…………离心机及离心管…………20μl、200μl、1ml移液器…………氮吹仪或旋转蒸发仪ELISA kit for quantitative detection of Clenbuterol四、待测样品处理方法1.尿液新鲜尿液可直接测定，如尿液混浊，则离心取上清进行检测。
采购产品技术参数和需求
采购产品技术参数和需求一、瘦肉精检测卡(一)盐酸克伦特罗+莱克多巴胺二联检测卡：1、供货范围：完成盐酸克伦特罗+莱克多巴胺二联检测卡及伴随服务(全部货物的运输、人员培训和售后服务等)的采购。
2、技术要求：3、检测卡检测限为：3ng∕m1o4、包装组成：(1)盐酸克伦特罗+莱克多巴胺二联检测卡需单独密封包装，每盒外包装应用封条封包，每盒和每个卡的外包装上应印有品牌、生产厂名、生产批号、有效期等相关标识。
(2)每盒盐酸克伦特罗+莱克多巴胺二联检测卡内应配套5双以上塑料手套和与检测卡数目相同的塑料吸管。
5、其他方面：(1)室温保存，室温操作，质保期两年以上；(2)设立质控对照线；(3)检测不需要设立阴性、阳性对照；(4)检测卡特异性强，与结构类似物无交叉反应；(5)★对于快速检测卡检测出阳性的样品，能在48小时内提供法定检测机构出具的检测报告（检测项目通过计量认证CMA）,提供承诺函。
（6）★生产商产品具有保障质量稳定的实力，具有保障检测卡的检测限的准确性与精确性，对胶体金类产品生产实力强，产品通过国家相关注册认证。
（二）沙丁胺醇检测卡1、供货范围：完成沙丁胺醇检测卡及伴随服务（全部货物的运输、人员培训和售后服务等）的采购。
2、技术要求3、检测卡检测限为:5ng∕m1o4、包装组成：（1）检测卡需单独密封包装，每盒外包装应用封条封包，每盒和每个卡的外包装上应印有品牌、生产厂名、生产批号、有效期等相关标识。
（2）每盒检测卡内应配套5双以上塑料手套和与检测卡数目相同的塑料吸管。
5、其他方面：（1）室温保存，室温操作，质保期两年以上；（2）设立质控对照线；（3）检测不需要设立阴性、阳性对照；（4）检测卡特异性强，与结构类似物无交叉反应；（5）★对于快速检测卡检测出阳性的样品，能在48小时内提供法定检测机构出具的检测报告（检测项目通过计量认证CMA）,提供承诺函。
（6）★生产商产品具有保障质量稳定的实力，具有保障检测卡的检测限的准确性与精确性，对胶体金类产品生产实力强，产品通过国家相关注册认证。
克仑特罗酶联免疫试剂盒的比较评价
克仑特罗酶联免疫试剂盒的比较评价王鹤佳;刘智宏;金银珍;汪霞;徐士新【摘要】考察了市售18个厂家生产的克仑特罗酶联免疫试剂盒,对其用于猪尿中克仑特罗残留检测的可操作性、灵敏度、准确度、精密度等参数进行比较,试验表明目前市售的部分克仑特罗酶联免疫试剂盒可用于猪尿中克仑特罗残留的筛选监测,检测限为1 μg/L.【期刊名称】《中国兽药杂志》【年(卷),期】2013(047)006【总页数】3页(P50-52)【关键词】克仑特罗;残留;猪尿;酶联免疫试剂盒【作者】王鹤佳;刘智宏;金银珍;汪霞;徐士新【作者单位】中国兽医药品监察所,北京100081;中国兽医药品监察所,北京100081;中国兽医药品监察所,北京100081;中国兽医药品监察所,北京100081;中国兽医药品监察所,北京100081【正文语种】中文【中图分类】S859.83克仑特罗(Clenbuterol)是一种β－受体激动剂，在临床上用于防治支气管哮喘以及哮喘型慢性支气管炎、肺气肿等疾病［1］。
由于其能显著降低胴体脂肪含量，提高瘦肉率，曾在畜牧业上作为促生长剂而广泛使用。
克仑特罗具有较大毒性，人们食用克仑特罗高残留的动物性食品后，可导致心悸、头痛、恶心、呕吐、血管扩张和肌肉震颤等中毒症状。
农业部176号公告规定，禁止在饲料和动物饮用水中使用克仑特罗［2］。
农业部193号公告规定克仑特罗禁用于所有食品动物的所有用途［3］。
农业部235号公告规定，禁止使用克仑特罗及其盐、酯，且在动物性食品中不得检出［4］。
目前检测动物性食品中克仑特罗残留的确证方法主要为液相色谱－质谱联用法和气相色谱－质谱联用法。
但由于需要昂贵的仪器设备，且前处理步骤复杂，成本较高，不利于基层单位的日常监测和大规模筛查。
而酶联免疫(ELISA)试剂盒可经济、快速地检测动物性食品中的克仑特罗。
实验比较了市售18个厂家的试剂盒，用于猪尿中克仑特罗残留检测时，在可操作性、灵敏度、准确度、精密度等参数［5，6］上的差异，为了解国内市场上克仑特罗酶联免疫试剂盒的现状提供参考。
国产盐酸克伦特罗ELISA检测试剂盒与进口同类型产品的性能对比
１材料与方法
１． 材料 １
随饥抽取相同饲喂条件下５ ０ 的拜城油鸡母鸡和海兰褐壳蛋 ２ ｄ 鸡各６ 羽， ０ 禁饲１ ｈ ２ 后屠宰， １ ｍｉ。全取左右胸 、 ， 沥１． ｎ ］ ］ ５ 腿肌 用保鲜膜
称重 ， 记为Ｗ２ 。用下面公式计算失水率 ：
失水率（ ＝ １ Ｗ２Ｗ１ ０％ ％） 一 ） １ ／ Ｘ０ 肌 内脂肪 ： 氏抽提法（ＢＴ１７ ２ ２０ ） 索 Ｇ ／ ７ — ０ ８。 ４ 粗蛋 白： 凯氏定氮法（Ｂ５ ０ ．— ０ 。 Ｇ ０ ９ ２ １１ ５ ｏ
腹 ， 鬈 泻 ＝
１ 数 据 统 计分 析 ＿ ５
。
用平均数 ± 标准误Ｏ ±ｓ ） （ Ｅ表示。
２结果 与分析
两组 断奶 仔 猪 试 验期 间 生产 陛能见 表 ２ 。
试验数据先用Ｅ ｃｌ０ ３ ｘｅ２ ０进行整理和初步计算 ， 再用Ｓ Ｓ８ Ａ ． ０
表 ２ 试验 期 间断 奶仔 猪生 产性 能
Hale Waihona Puke ３结 论 国内外很多专家通过大量试验研究表 明对仔猪以小肽 的形 式供给蛋 白质 ，小肽 比单一的氨基酸更容易被消化吸收和利用 ，
仔猪的 日采食量 、日均增重 、料重 比等技术指标都没有受 到影
响， 且还有一定 的提高 ； 单位增重饲料成本 有所下降 ， 经济指标
好于血浆蛋 白粉组。故从技术指标和经济效益来对 比可以看 出， 在断奶仔猪 日粮 中， 使用小肽制品替代血浆蛋 白粉应是可行 的。 参考文献 ： 篇 ， （ 略） ４
鸡做对照，对５ ０ 拜城油鸡 的屠宰性能和肌肉的部分品质进行 测定 肉柱的剪切力值 ， ２ ｄ 取平均值 ， ｇ 以ｋ 为单位 。 了测定 ， 为该鸡种的生产和进一步加工提供参考。 失水率 ：称取 ３ ４ｇＥ ４℃条件下冷藏２ 的肉样 ， ～ （０— ； ４后 ｈ 精 确到０ ０ ２ｇ记为Ｗ１ ．０ ， ０ 。置于１ ｍＬ ０ 离心管中 ， 配平后用低速离心 机４００ｄ ｎ 心１ ｉ， 出肉样 ， ０ ｍｉ 离 ０ ｎ取 ａ ｒ 用定性滤纸吸去表面水分 ，
R-Biopharm酶联免疫检测试剂盒：实现乳品激素的快速监控检测
烷 雌酚 作为 动物 的生长 促进 剂 ； 我国
农 业 部 和 卫 生 部 等 相 关 部 门 也 将 醋 酸 甲孕 酮 、 基 睾 酮 等 １ 种 性 激 素 及 甲 ９ 具 有 雌 激 素 样 作 用 的 兽 药 列 为 违 禁 药 物 ， 禁 在食品源 动 物饲 养 中使 用。 严
玉米 赤霉醇
植 物雌 激素
其 灵 敏 度 高 完 全
符 合 我 国对 激 素残 留进 行监 控 管理
的 实 际 需 求 。 产 品 进 入 中 国 已 经 该 十 余 年 产 品 品 质 得 到 了 国 家 检 测 机 构 及 大 型 出 口企 业 ～ 致 的 认 同 并
图１ －Ｂ ｐａｍ 激 素检 测 试 剂盒 Ｅ ｉ ｈｒ 雌 ｏ
酶联免疫检测试剂盒的
检测项目和特点
～
直 以 来 奶 和 奶 制 品 都 是 欧
洲 最 主 要 的 食 品 之 一 ， 了保 障 其 为 产 品安 全 众 多核 心 实验 室 和 单 位 ， 均 使 用 德 国 拜 发 Ｒ Ｂｌ ａ Ｏ ｈ ｍ酶 Ｐ ｒ
联 免 疫 检 测 试 剂 盒 ，对 奶 和 奶 制 品 以 及 奶 牛 的 体 液 、血 液 等 进 行 激 素 水 平 的 监 控 检 测 ， 产 品 的 检 测 项 其
醋 酸甲 烯雌醇
１ 一雌二醇 ７
尿液 ．组织 、血
撇一 ～ ～一一 ～一
尽管如 此 ， 受经济 利益的驱使 ， 食品中 违 法滥 用激 素 事件 仍 时有发 生 。 为了
保 障 人 民 的 健 康 安 全 ， 素 残 留 检 测 激 势在必行。
快 速 、பைடு நூலகம்量稳定 、 质 性 价 比 高 、结 果准
酶联免疫法测定饲料中克伦特罗的注意事项
６ 仪器设备 的维修
仪器 的一 般 故 障 ，由仪器 使用 人 员 自行 排 除 ，并在仪器使用记 录上 记录。当仪器 出现操作 错误或 出现结果 可疑 时 ，应立 即停用 ，申请专业 人员维修 ，大 中型精 密贵重仪器未经维修人员 同 意 ，不得私 自拆 卸。维修 过程 中，使用人员和维 修人员应积极 配合。检修 完毕后 ，应填写维修记
业
２ ０ １ ３年 第 ６ 期
酶联免疫法测定饲料中克伦特罗的注意事项
韩 文军 ，张培 大
（ １ ． 新疆维吾 尔 自治区兽药饲料监察所，新疆 乌鲁木齐
２ ． 新疆 维吾 尔 自治 区动 物卫 生监 督所 ，新 疆 乌 鲁木 齐
８ ３ ０ ０ ６ ３ ；
８ ３ ０ ０ ６ ３）
作者 简介 ：韩 文军 （ １ ９ ７ ０ 一） ， 男， 汉族， 大专， 主要 从事兽 药
饲料样品处理和库管工作。
时 ，应 立 即停 止使 用 。为确保 仪 器设 备 有效 运
行 ，对 于 检 测 结 果 有 较 大 影 响 的仪 器 设 备 ，应 在 定 期检 定， 校 准 的基 础上 ，进 行 必要 的期 间核查 。
期通 电，检查其功能是否正常。
７ 仪器 设备的报废
仪器设备 因故无法满足检测要求并无法修复 时 ，仪器使 用人可书面 申请报废 ，报废后 的仪器 设备档案仍需保存 。
２ ０ １ ３年 第６ 期 ２ 饲料样 品的准备
饲料样 品抽取后 ，应严格按照饲料样 品分装
经 入，以防止交叉污染；吸取各试剂或样本时，要防
收 稿 日期 ：２ ０ １ ３ — ０ １ — １ ５
氯霉素风波 ，使得Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 法在我 国畜产 品安全检测
关于“动物性食品中克伦特罗(瘦肉精)残留的检测”的实验分析
关于“动物性食品中克伦特罗(瘦肉精)残留的检测”的实验分析LINK链接猪肉是否含瘦肉精的迅速推断办法看该猪肉的脂肪(猪油)，如该猪肉在皮下就是瘦肉或仅有少量脂肪，则该猪肉就可能含有“瘦肉精(CLB)”。
含有“瘦肉精”的瘦肉外观特殊鲜红，纤维比较疏松，切成二三指宽的猪肉比较软，不能立于案，瘦肉与脂肪间有黄色液体流出，脂肪特殊薄。
而普通健康的瘦猪肉是淡红色，肉质弹性好，瘦肉与脂肪间没有任何液体流出。
购买时一定要看清该猪肉是否盖有检疫印章和检疫合格证实。
一、样品迅速检测办法 1.胶体金检测卡法(1)特点①操作容易、检测速度快，尿样检测时光约5min，组织约10min。
②无需其他仪器设备。
③样品量需求少。
④适用于大量样本的迅速步筛。
⑤结果推断容易明白。
(2)推断结果①阴性:C线条显色，T线条肉眼可见，无论色彩深浅均判为阴性。
②阳性:C线条显色，T线条不显色，判为阳性。
③无效:C线条不显色，无论T线条是否显色，该试纸均判为无效。
(3)检测对象猪尿液、组织；猪饲料；猪肉制品。
(4)适用单位生殖养殖场、屠宰场，农业、贸易等主管部门。
2.酶联免疫(ELISA)法(1)检测原理测定的基础是抗原抗体反应。
微孔板包被有针对克伦特罗IgG的包被抗体。
克伦特罗抗体被加入，经过孵育及洗涤步骤后，加入竞争性酶标志物、标准或试样溶液。
克伦特罗与竞争性酶标志物竞争克伦特罗抗体，没有与抗体衔接的克伦特罗酶标志物在洗涤步骤中除去。
将底物(过氧化尿素)和发色剂(四甲基联苯胺)加入孔中孵育，结合的标志酶将无色的发色剂转化为蓝色产物。
加入反应停止液后使色彩由蓝色改变为黄色。
在450nm处测量吸光度值，吸光度壁纸与克伦特罗浓度的自然对数成反比。
(2)试剂磷酸二氢钠、高氯酸、异丙醇、乙酸乙酯、0.1mol/L高氯酸溶液、1mol/L氢氧化钠溶液、pH=6的0.1mol/L磷酸二氢钠缓冲溶液、异丙醇+乙酸乙酯(40+60)、针孔式微孔过滤膜(0.45μm，水相)、克伦特罗酶联免疫试剂盒、96孔板(12调×8孔)包被有针对克伦特罗IgG的包被抗体、克伦特罗系列标准液(最少5倍比稀释第1页共4页。
肉原料肉中激素(盐酸克伦特罗、莱克多巴胺)的测定—酶联免疫快速测定法
2 酶联免疫法检测瘦肉精 2.2操作 2.2.1 国标-酶联免疫法（ELISA) )实验方法与步骤
(1)主要试剂： 高氯酸、异丙醇+乙酸乙酯(40+60)、克伦特罗酶联免疫试剂盒等
(2)主要仪器:匀浆器、离心机微量移液器：单道20ul、50ul、100ul和多道50ul- 250ul 可调、 酶标仪（配备450nm滤光片）
2.2操作 2.2.2 克伦特罗快速检测卡检测步骤
（1）取5 g匀浆去脂肪肉样（或肉泥）于50 mL离心管中，盖紧管盖。 （2）将装有样品的离心管放入沸水中加热10 min，用微量移液器或滴管取出管中 液体移至干净离心管中，冷却至室温（注意：样品温度应控制在20±5℃）。 （3）取出检测卡，开封后平放于桌面，使用本产品附带滴管，吸取离心管中的上 清液加3-4滴于样品孔中。 （4）加样后3-5min，观察显色区，判断结果，其他时间判断无效。
2 酶联免疫法检测瘦肉精
2.2.1酶联免疫法（ELISA) )实验方法与步骤
(3)测定 ① 提取肌肉、肝脏及肾脏试样 ② 准备竞争酶标记物、克伦特罗抗体、包被有抗抗体的微孔板条试样；
准备试样：提取物取20ul进行分析。高残留的试样用蒸馏水进一步稀释。
测定：详细过程参考实训指导书或国标GB-T5009.192-2003。
酶联免疫法测定激素（盐酸克伦 特罗、莱克多巴胺）-初筛Fra bibliotek目录页
检测依据 酶联免疫法检测瘦肉精
1 检测依据
检测标准： GB-T5009.192-2003动物性食品中克伦特罗残留量的
测定第三法酶联免疫法（ELISA筛选法）
2 酶联免疫法检测瘦肉精
2.1酶联免疫法（ELISA)原理
基于抗原抗体反应进行竞争性抑制测定。微孔板包被有针对克仑特罗IgG的包被抗体。 克伦特罗抗体被加入，经过孵育及洗涤步骤后，加入竞争性酶标记物、标准或试样溶液。 克仑特罗与竞争性标记物竞争克仑特罗抗体，没有与抗体连接的克伦特罗标记酶在洗涤步 骤中被除去。将底物（过氧化尿素）和发色剂（四甲基联苯胺）加入到孔中孵育，结合的 标记酶将无色的发色剂转化为蓝色的产物。加入反应停止液后使颜色由蓝转变为黄色。在 450nm处测量吸光度值，吸光度比值与克伦特罗浓度的自然对数成反比。
盐酸克伦罗(瘦肉精)ELISA试剂盒质量综合评价
中圈分 类号 ：８ １ ￥ ５． ４
文献 标识码 ： Ｂ
文章编 号 ：０６ ９７ ２０ ）６００ － ３ １０ ０ ｛０６ ０－ ０６ ０ －
盐酸克伦特罗是人工合成的肾上腺索 Ｂ 受 一
１ ． ４仪 器 高速 冷冻 离心机 ＳＧ Ａ ５ （ 格 ＩＭ ３Ｋ 西 码公 司）酶标仪 Ｍｕ ｉ ａ Ｋ （ ； ｌｓ ｎ Ｍ ３雷勃公司）Ｇ Ｚ ｔｋ ；Ｘ
型人工气候箱 （ 南京 同立实验仪器有限公 司）
２ 方 法
各项 均按试 剂盒操作 步骤进行试验 。 用酶标
仪测定吸光度值或浓度 。
４ ０ ０ ２湖 南农 业 大学 ， 南 长 沙 １０ ６；． 湖
４ ０２ ； １ １８
３湖 南省畜禽 水产 品质 量检 验检测 中心 ） ． 摘 要 ： 通过 对盐酸 克伦特 罗 Ｅ Ａ试 剂 盒的 综合评价 ， 讨 了盐 酸克伦 物 罗 Ｅ Ａ试 剂盒 的检 出限 与定 量限 、 ｕＳ 探 ｕＳ 准确 度 、 密度 、 精 灵敏度 与 Ｉ 加值 、 Ｃ 线性 范 围等指 标 ， 同时对检 测 温度 、 尿液 ｐ Ｈ值 的影响度 Ｅ Ａ 试剂 盒的假 阳性 ＵＳ
｛ 考 文献 ： － ｜
Ａｎ ｍａ ｕ ｒ ｉｎ ａ ｄ Ｈｅ ｌ １ ７ ，９： — ． ｉ ｌ Ｎ ｔ ｔ ｎ ａｔ ９ ４ ２ ４ ８ ｉｏ ｈ，
３ 添 Ｊ畜 】 究还不够 ， 而益生索在羊上的应用效果 的报道更 【】 钞 海 峰 ． 加 益 生 素 对 羔 羊 增 重 效 果 的影 响【 ． 禽 业， ２０ ， ） － ． ０ ４ ５： ９ （ ８
【】 Ｐｒｅ．．． ｅ ｔｅ ａ ｆｔｅ ａ ｔ ｉ ｉ ｔ ｙ 】 ２ ａｋｒ ＢＴ ｏ ｒ ｌ ｏ ｈ ｎｉ ｏ ｃ ｓ ｒ Ⅱ ． Ｒ ｈ ｈ ｈ ｆ ｂ ｔｓ ｏ
瘦肉精(盐酸克伦特罗)快速检测卡
猪瘟抗体快速检测试剂盒——（胶体金法）使用说明书一、原理：本试纸采用酶联免疫原理和胶体金层析技术制成快速检测猪血清中的猪瘟抗体。
将猪瘟抗原包被在硝酸纤维素膜的检测线（T）上，兔抗猪瘟抗体包被在硝酸纤维素膜的质控线（C）上，用胶体金标记的猪瘟抗原干燥后置于玻璃纤维素膜下端。
当血清加入加样孔内，由于层析的原理，血清开始沿纸条移动，当遇上干燥的金标抗原，将其溶解，并带着金标抗原继续往上移动，至硝酸纤维素膜的检测线。
如果样品中有猪瘟抗体存在时，会与玻璃纤维素上的金标猪瘟抗原和包被在检测线上的猪瘟抗原，在检测上形成一个夹心的免疫复合物，呈一条紫红色线。
样品中的抗体越高，色线颜色越深，判定为阳性。
如果样品中没有猪瘟抗体，检测线（T）线上没有色带出现，判定为阴性。
样品和金标抗原继续往上移至质控线时，此处的兔抗猪瘟抗体将会同金标猪瘟抗原结合，在质控线（C）上形成一条紫红色线，证明本试纸有效。
整个试验仅需20分钟。
操作简便、快速、准确、灵敏度高，直观、结果容易判定。
二．产品组成：1、检测卡(1个)：由一特制的塑料检测卡将猪瘟抗体检测试纸条夹于卡内，卡面上设有加样孔和观察孔。
加样孔作为加入待检血清，观察孔内为试剂检测线（T），试剂质控线（C）。
一个检测试剂卡用一个铝箔袋包装，内装干燥剂。
2、吸样管1个；3、5份塑料手套；4、使用说明书一份。
三．操作方法：1．用1.5ml样品管，采血0.5~1ml待检测血清自然析出或用离心机离心10分钟左右，使血清析出。
2．将检测卡平置于桌面上，用吸样管吸取被检血清，在检测卡的椭圆形加样孔内加入2滴约80~100ul。
在室温下反应20分钟判定结果。
（检测卡如在4℃保存，必须恢复至室温后方可进行检测）四．结果判断：1．阳性：在检测线（T）处，质控线（C）处，各出现一条紫红色条带，判定为阳性；检测线（T）处条带色泽的深浅，依检测样品中猪瘟抗体效价的高低而变化，效价越高色带越深，反之越浅。
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克伦特罗酶联免疫定量检测试剂盒（I）
使用说明书
概述：
克伦特罗(Clenbuterol)属于一类β-兴奋剂，具有改进脂肪型动物体内肉与脂肪的比例的作用，亦可促进动物生长。
但同时，此药物还会使非横纹肌松弛，人体摄入后可引起心跳、心率不正常等副反应，甚至可导致心脏病。
因此在我国，克伦特罗在畜牧业上的使用是被严格禁止的。
本试剂盒利用竞争酶联免疫法对生物样品中的克伦特罗进行定量分析。
适用于动物尿液、血清、内脏等物质中克伦特罗的快速检测。
由于ELISA法的高通量与简便快速，适合大量样本的定量筛查，自样本加入至结果读出，不超过60分钟，检测灵敏度为0.1ppb。
一、简要原理
试剂盒所提供的微孔板上包被有抗体，然后将校准品或样本中的克伦特罗与酶标记的克伦特罗加入微孔中后，两者可竞争结合克伦特罗抗体，洗去未结合的酶标记克伦特罗。
加入底物后，在酶作用下，底物溶液会显蓝色，加入终止剂后，溶液由蓝转为金黄色。
在450nm波长光下测吸光度，吸光度高低与校准品或样品中克伦特罗的含量呈反比，根据校准品的读数作出校准曲线，并利用校准曲线计算出样品中克伦特罗的含量。
二、试剂盒组成
1.酶标反应板： 96孔易折板，抗体已包被
2.克伦特罗校准品： 1ml/瓶×6瓶浓度：0ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb
3.11×酶标记克伦特罗浓缩液： 1.2ml/瓶×1瓶(稀释11倍使用)
4.底物液： 11ml/瓶×1瓶
5.酶标稀释液： 20ml/瓶×1瓶
6.50×浓缩洗涤液： 20ml/瓶×1瓶(稀释50倍使用)
7.终止剂： 11ml/瓶×1瓶
8.其他：说明书×1份自封袋×1个
2-8℃贮存，有效期一年
三、实验需要但试剂盒不提供的试剂和仪器
1.试剂
――――――10mM盐酸溶液
――――――氯化钠
――――――50mM PH7.0 PBS (配制:9g NaCl；4.65g Na2HPO4·12H2O；0.56g NaH2PO4·2H2O 溶解于1000ml蒸馏水中)
――――――异丙醇
――――――乙酸乙酯
2 .仪器
――――――微孔板酶标仪
――――――涡旋振荡器或超声波粉碎仪
――――――离心机
――――――20μl、200μl、1ml移液器
――――――氮吹仪或旋转蒸发仪
四、待测样品处理方法
1.尿液
新鲜尿液可直接测定，如尿液混浊，则离心取上清进行检测。
(如尿液中克伦特罗含量超出试剂盒线性范围,可用蒸馏水或50mM PH7.0的PBS对尿液进行适当稀释后再行检测)
2.肉样及内脏组织
1).称取肌肉或内脏样本10g，用20ml 10mM盐酸溶液匀浆，置于离心管中，充分振荡混匀5min或超声混匀5min,
再静置10分钟。
之后10000rpm离心10min或4500rpm离心20min(离心温度保持在10℃左右)。
收集澄清的上清液(注意勿吸取脂肪层)，可直接用于检测。
(相当于0.5g样品/ml)
2).若要获得更高的检测灵敏度，可在离心后收集所有上清，加入氯化钠固体至0.32g/ml，可能会有沉淀或乳化现
象产生，请勿离心!将2ml上清转移至玻璃离心管中，加入4ml异丙醇+乙酸乙酯(2+3)，充分振荡混匀5分钟,静置15分钟。
提取完毕，3000r/min离心10min，将2ml上层有机相转移至玻璃试管中，用氮吹仪60℃吹干有机相，然后加入一定量的蒸馏水或 50mM PH7.0的PBS溶液将残留物溶解，待检(若复溶体积为0.5ml,则相当于1g样品/ml)
3.动物饲料
称取5.0g研碎的饲料样品，加入10ml 5mM HCL，置于离心管中充分振荡混匀5min或超声混匀5min，再静置10分钟。
之后10000rpm离心10min或4500rpm离心20min(离心温度保持在10℃左右)，转移出上清液，可直接用于检测。
若要获得更高的检测灵敏度，可按“肉样及内脏组织”处理方法2).中所述进行处理。
(如完全按前述处理,则复溶体积为0.5ml时，相当于1g样品/ml)
五、试剂准备
1.实验前准备
将试剂盒取出，室温(20-25℃)放置30分钟，使试剂盒回温。
2.酶标记克伦特罗工作液准备
由于稀释后的酶标记克伦特罗工作液稳定性较差，所以请从试剂盒中取出所需量的酶标记克伦特罗浓缩液，用酶标稀释液以1:11的比例稀释浓缩酶标记液(例如80μl浓缩液+800μl样品稀释液)。
3.洗涤液配制
取出所需量的浓缩洗涤液，加入49倍体积的蒸馏水，即成洗涤工作液(例如10ml浓缩液+490ml蒸馏水)
六、操作步骤
1.从锡箔袋中取出所需的微孔板条，将暂时不用的微孔板条放回带有干燥剂的锡箔袋中，并用试剂盒附带的自封
袋封存。
2.在一个微孔中加入150μl蒸馏水作为空白对照。
3.其余各微孔中加入50μl克伦特罗校准液或已完成前处理的待测样品。
注意：加入校准液顺序为按照浓度从低到高加入，以避免校准液浓度出现偏差。
4.每孔(除空白对照孔以外)加入100μl酶标记克伦特罗工作液(配制方法见五-2)
注意：在试剂加入过程中，请避免移液器滴头接触已加入的校准液或待测样品，防止孔间交叉污染；避免在加样过程中产生气泡。
5.振荡混匀反应液，于20-25℃环境下放置30分钟(建议使用25℃恒温箱)。
6.取出微孔板，倾空液体，每孔加入400μl洗涤液，轻轻振荡，静置片刻，倾去洗涤液，重复4次。
最后在吸水
纸上将微孔板拍干。
7.每孔加入100μl的底物液，20-25℃避光环境下放置20分钟(建议使用25℃恒温箱)。
8.取出微孔板，每孔加入100μl反应终止液，充分混匀(微孔中切忌存在气泡)，用酶标仪在450nm下读数，扣
除空白，并绘制校准曲线。
七、结果判定
1.样本中的克伦特罗含量可以通过在半对数坐标纸木上手工绘制校准曲线来进行定量计算；或者应用合适的计算
绘图软件绘制出校准曲线，得出公式，并计算样品中的克伦特罗浓度。
2.先将除空白孔外的所有测定孔扣除空白对照的吸光度。
然后将扣除空白后的校准品孔吸光度值 (B) 除以扣除空
白后的阴性对照孔吸光度值 (B0) ，再乘以100%，即：
B
为纵坐标（y）
×100%
B0
以所对应的校准品浓度为横坐标（x），绘制出校准曲线。
3.用上述方法，同样地得出对于样本测定孔的y值，代入校准曲线，即可计算出相应样本的克伦特罗浓度值。
以
下为校准曲线的一个示意图：
八、试剂盒相关方法学数据
1.试剂盒灵敏度
本试剂盒灵敏度为0.1ppb
2.试剂盒半抑制率
本试剂盒半抑制率约在0.7～1.0ppb左右
3.试剂盒的重复性
对不同浓度的校准品进行8次重复测定，获得每个浓度所对应的OD450值，计算变异系数，结果如下：
4.试剂盒线性范围
本试剂盒在0.2ppb～4ppb区间呈线性相关。
5.添加回收实验的回收率
以猪尿为例，回收率在80～120%之间。
6.交叉反应
结构类似物交叉反应率
沙丁胺醇 3.5%
特普他林 1.2%
异丙基肾上腺素<0.1%
九、实验中注意事项
1.在试验前将所有试剂预热至室温。
2.试剂加入各微孔的时间差越小越好，如果检测样本较多，建议使用多孔移液器。
3.操作过程中手尽量少接触酶标板底部，并且在读数前用软纸轻轻擦去底部可能附着的水珠或指痕。
4.在加入反应终止液后1小时内读数。
5.本实验可采用单孔或平行双孔定量测定，但双孔定量更准。
6.反应终止液为强酸物质，避免接触皮肤或衣物。
7.不要使用过期试剂，不要将不同批号试剂混用，否则会造成灵敏度降低。