微生物检验实验室嗜血杆菌属检验标准操作规程

微生物检验实验室嗜血杆菌属检验标准操作规程

1. 概述

嗜血杆菌属包括流感嗜血杆菌、埃及嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌、杜克嗜血杆菌等9个种。临床上以流感嗜血杆菌最为常见。

2. 标本类型

血液、痰、脑脊液标本。

3.鉴定

3.1 形态与染色革兰阴性短杆菌。

3.2 培养特性在巧克力琼脂平板上35℃培养18~24小时，形成微小、无色透明似露滴状的菌落。在血琼脂平板上形成极小、圆形、透明的菌落，并有“卫星现象”。

3.3 生化反应分解葡萄糖，不分解蔗糖和乳糖，吲哚、触酶和硝酸盐还原试验均为阳性。

3.4 鉴别要点

3.4.1 本菌属特征革兰阴性细小杆菌，多形性，菌落为无色透明似露滴状，卫星现象阳性，生长需要X、V两种因子，普通培养基不生长。

3.4.2 流感嗜血杆菌的种间鉴别见表

嗜血杆菌鉴别的关键性试验

-

+

+

-

+

+

-

+

+ 注：“+”为90%以上菌株阳性，“-”为90%以上菌株阴

性，“V”为11-89%菌株阳性，“W”为弱发酵反应。

3.5 操作步骤

3.5.1 涂片、革兰染色呈革兰阴性短小杆菌。

3.5.2 鉴定从巧克力琼脂平板上挑取可疑菌落，用微

生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。

4.药敏

参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100-S20

最新版本文件。

5.质量控制

见《质量管理程序》。

6.检验结果解释与分析

如果检出β-内酰胺酶阳性流感嗜血杆菌则提示对青霉素、

氨苄西林、阿莫西林耐药（耐药机制大多为TEM型β-内酰胺酶）。如果流感嗜血杆菌β-内酰胺酶阴性，而对氨苄西林耐药，则对阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、头孢克罗、头孢他啶、头孢尼西、头孢丙烯、头孢呋辛均耐药。

7.临床意义

流感嗜血杆菌常寄居于正常人呼吸道（在呼吸道定植者可达到人群的50%），当机体抵抗力下降时，可引起人类呼吸道感染；也也可随血液入侵组织内部，引起脑膜炎、关节脓肿或其他部位的化脓感染。副流感嗜血杆菌寄居在人类的上呼吸道，可引起呼吸道感染，偶尔引起心内膜炎等。

8.鉴定流程

参考文献

[1]周庭银编著.临床微生物学诊断与图解，第二版，上海：上海科学技术出版社，2007

[2]叶应妩，王毓三，申子瑜主编，全国临床检验操作规程，第三版，南京：东南大学出版社，2006

[3]中国合格评定国家认可委员会，CNAS-GL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南，2008

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