离子交换剂

CH 4.1 酶制剂的工业提取方法
3 酶蛋白的初步纯化与浓缩
3.一2 有般机作溶为剂沉沉淀淀剂法的乙醇浓度是95%，沉淀不同的酶蛋白需要乙醇 量稍有差除异用。盐析法沉淀酶蛋白外，还可以用有机溶剂沉淀酶蛋白，
目前选用的有机溶剂主要有丙酮和乙醇，并且丙酮的沉淀效果 如比沉乙淀醇枯好草，杆但菌丙的酮淀的粉价酶格发高酵，液蒸时馏，回要收求困乙难醇，浓所度以为目：前每多体采积用的 发酵乙液醇加作0沉.2淀—剂0.8。体积的乙醇；
增加，沉淀酶蛋白需要的乙醇浓度增加；pH值的影响因不同的 蛋白质而不同，一般情况下，当溶液的pH值与酶蛋白的等电点 一致时，需要的乙醇浓度最低，偏离酶蛋白的等电点越远，酶 蛋白所带电荷越多，蛋白质的溶解度越大，沉淀蛋白所需乙醇 浓度越高。
CH 4.1 酶制剂的工业提取方法
3 酶蛋白的初步纯化与浓缩
离子交换树脂基本上在脱色的同时，不吸附酶蛋白。
CH 4.1 酶制剂的工业提取方法
3 酶蛋白的初步纯化与浓缩
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CH 4 酶制剂的制备和精制
尽管发酵微生物的种类不同，有的是以胞内酶为主， 有的以胞外酶为主，无论哪一种，最终得把它们提取 出来，并使其达到一定的纯度，这就是酶制剂的制备 和精制的任务。
目前我国生产的工业酶制剂，普遍纯度较低，就丹麦 NOVO公司生产的酶制剂的纯度远远高于我国的产品。 如果胶酶（Pectinases), NOVO公司生产的酶制剂的 比酶活力较我国最好的产品高5—10倍，尽管酶制剂的 价格较高，但其在生产上应用成本还低于我国的产品。
1.1 机械破碎法：
①机械捣碎法：10000转/分。 ②研磨法：只适合于实验室的小规模操作。
③匀浆法：细胞的破碎程度较高，规模小。
1.2 物理破碎法：
①温差破碎法： ②超声波（> 20kHz）裂解法：15-25kHz，
100-150W， 0-10℃， 3-10min；
1.3 化学方法：
目前有效的化学方法主要是加入表面活性剂法常 用的有：特里顿X-100和吐温（Tween），其主要是
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CH 4.1 酶制剂的工业提取方法
—— （细胞破碎） ——发酵液预处理 ——酶液脱色 ——酶蛋白的初步纯化与浓缩 ——（酶蛋白的提纯与精制） ——酶制剂的成形。
CH 4.1 酶制剂的工业提取方法
1 细胞破碎方法
对于胞内酶的提取与制备，首先要把细胞破碎，使ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ限在细胞内
的酶蛋白游离出来，常用的破碎方法有以下几种：
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破坏细胞膜的结构，增加膜通透性。此法在实验室 和生产上已成功应用
CH 4.1 酶制剂的工业提取方法
2 发酵液的预处理
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