血培养操作规范
血培养采集技术操作规范
血培养采集技术操作规范一、操作目的严格无菌操作要求，正确留取血标本，做微生物培养，协助诊断、治疗及护理。
二、评估要点1、评估患者病情、治疗、心理状态及配合程度。
2、了解患者寒战或发热的高峰时间。
3、了解患者的用药情况，如抗生素。
4、评估患者穿刺部位皮肤、血管情况和肢体活动度。
三、物品准备治疗盘、弯盘、碘伏、棉签、止血带、血培养瓶、采血针、手套、治疗巾。
四、操作要点1、核对医嘱及培养瓶条码。
2、评估患者的病情、抗生素的使用情况以及血管等基本情况。
3、告知患者及家属采血的目的、方法及如何配合、采血后的注意事项。
4、根据要求准备用物。
5、再次核对患者手腕带和培养瓶信息，确认统一后，按要求正确留取血标本。
可选用静脉直接穿刺法或经外周穿刺的中心静脉导管进行采血。
6、协助按压穿刺部位 5-10 分钟至无出血。
7、协助取舒适卧位，询问患者需要。
8、整理床单位。
9、洗手，取口罩。
10、及时送检。
11、操作速度：完成时间 8 分钟以内。
五、指导要点1、告知患者检查的目的、方法、注意事项以及配合方法。
2、告知患者正确的降温方法，促进舒适。
六、注意事项1、血培养瓶应在室温下避光保存。
2、根据是否使用抗生素，准备合适的需氧瓶和厌氧瓶。
3、间歇性寒战患者应在寒战或体温高峰前取血；当预测寒战或高热时间有困难时，应在寒战或发热时尽快采血。
4、已经用过抗生素治疗的患者，应在下次使用抗生素前采集血培养标本。
5、消毒时应以穿刺点为中心擦拭，应消毒两遍或遵循消毒剂使用说明书，待自然干燥后方可穿刺。
6、血标本注入厌氧培养瓶时，注意不要将注射器中的空气注入瓶中。
7、两次血培养标本采集时间至少间隔一小时。
8、经外周穿刺的中心静脉导管采血留取血标本时，每次至少采集两套血培养，其中一套从独立外周血管采血，另一套则从导管采血。
两套血培养的采血时间必须接近(<5 分钟)，并做好标记。
9、成人采血 10-20 毫升，婴幼儿 1-5 毫升。
血培养操作规范PPT课件
➢相同时间采血 ➢检出时间有2-3个小时差异 ➢对于导管相关的菌血症和非导管相关的菌血症
很高的敏感性和特异性
Blot, et al., Lancet 354:1071, 1999
Malgrange, et al., Journal of Clinical Microbiology 39: 274, 2001
2.用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头（如果 行第二次穿刺，应换针头）直接注入血培养瓶
3.按厂商推荐的方法采血
徐英春，倪语星等。血培养操作规范，上海科学技术出版社，2002,1-31 33
质量保证
静脉穿刺和培养瓶的接种
4.轻轻颠倒混匀培养瓶以防血液凝固 5. 培养瓶立即送实验室，不要冷藏
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“Can Time-to-Positivity help diagnose patients with Catheter-related Bacteremia?”
需要抽取多少份血培养样本？
抽取2-3份血培养样本可使败血症病原菌检出率 达到 ~99%
败血症患者在初期千万不要（NEVER draw only 1 blood）仅抽取一套血培养
注意：“份”是指单独的静脉穿刺的数量。
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怀疑急性原发性菌血症 真菌菌血症 脑膜炎 骨髓炎 关节炎 肺炎
采血份数
2或3份血培养
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
ml
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采血量 血液和肉汤的比例1:51:10
•血液含各种抑制细菌生长因子 •稀释血液可减少这些因子亚抑制细菌生长的水平 •血液中的抗生素会稀释了 •血液：肉汤<1：5可能会抑制细菌生长，不应注入过 量的血液
【精选文档】临床微生物实验室血培养规范刘英PPT
一级报告（初步报告）
对于阳性血培养， 要立即进行涂片和革兰染 色，并报告给临床医师，包括：患者姓名、阳性 血培养瓶类型、瓶数、报警时间、涂片革兰染色 特性及形态，询问患者目前感染情况和抗菌药物 使用情况并记录，可以向医师提出治疗建议。此 外，还应记录报告时间、接收报告者信息和报告 者信息。同时将阳性培养液传种适当培养基。 各单位可以根据自身医疗需求，决定是否基于 涂片结果用培养液进行直接药敏试验。
标本处理
所有标本必须在生物安全 II 级防护下处理。疑 为高致病性病原体如结核分枝杆菌、布鲁菌属、 弗朗西斯菌属、鼠疫耶尔森菌、类鼻疽博克霍尔 德菌阳性的血培养瓶进行传代培养时，处理操作 需按生物安全 III 级防护进行。 疑为脑膜炎奈瑟菌 的菌株必须在生物安全柜中处理。
8 血培养结果的处理及报告程序
细菌浓度
0
血培养采血时机
30 时间 (分钟)
体温 60
血培养套数
应同时采集 2～3 套血培养， 2d～5 d 内无 需重复采集血培养。只有在怀疑感染性心 内膜炎或其它血管内感染（如导管相关性 感染）时，才有必要间隔多次采集血培养。 对于新生儿，采集一瓶儿童需氧瓶，宜同 时做尿液和脑脊液培养。
采血量 成人每瓶采血量 8 mL～10 mL，儿童 1mL～5 mL，但不应超过患儿总血量的 1%。血液和肉汤之比为 1： 5～1： 10。 新生儿 。 采血量充足的患者 宜配套采集需氧瓶和厌氧瓶， 将血液先注入厌氧瓶，后注入需氧瓶。 采血量不足的患者
临床微生物实验室血培养规范刘英
完整的血培养过程
医师开出医嘱 护理人员收集送检样本 实验室检测、分离并鉴定导致血流感染的
微生物 三级报告：为临床医生提供抗菌药物敏感
血液培养的规范操作
血液培养的规范操作卫生部北京医院张秀珍一、血培养的临床意义（一）指示预后血培养是细菌培养的实验室检测中最有价值的检测项目。
血培养指示预后表现在，健康人能在几分钟内将血中细菌清除，而病人则不能将病原菌控制在原发部位；医生未能将病原菌彻底清除或引流不成功，可使病原菌扩散入血；而死亡率与病原菌、药敏谱、基础病相关，亦即提供了预后信息。
（二）菌血症与败血症1．按出现时间特点的菌血症的分类：BSOP 3715（1）一过性菌血症（transient）：持续仅数分钟，感染组织、粘膜表面、管道定居的微生物，通过刷牙、钻牙、导尿、挤压毛囊等方式植入或手术进入。
（2）持续性菌血症（Continuoys）：例如感染性心内膜炎、化脓性脉管内膜炎以及伤寒、布式菌、鈎端螺旋体病的特定阶段。
（3）间断性菌血症（intermittent）：未引流或引流不足的感染性病灶，细菌间断入血，如肺炎、脑膜炎、化脓性脑膜炎、骨髓炎等。
2．几个败血症相关概念的界定（1）败血症Sepsis：具有全身反应，如发热、心动过速等感染征兆。
（2）败血症综合征Sepsis syndrome：败血症加任何一器官功能不正常，加以下症状之一：血乳酸盐升高，尿少，意识障碍，动脉压低（hypoxia）。
（3）败血症性休克Sepsis shock：：败血症加低血压。
3．其他菌血症的分类：BSOP 3715 污染瓶：占所有菌血症约2%，污染细菌包括阳性杆菌、棒状杆菌、丙酸杆菌、气球菌、凝固酶－葡萄球菌、微球菌等。
污染瓶只见于一套瓶中的1-2瓶，只有第二套来鉴别，可不作药敏，保留此瓶几天，等待第2套结果。
二、血培养的规范操作血培养的合格操作应包含以下六方面的内容：1．应从静脉取血；2．不宜从静脉导管或静脉留置口取血；3．若从导管设施取血，必需同时静脉取血，以求对比和解释（不要弃取初段血，不要用抗凝剂冲洗管子）；4．不推荐静脉血直接入瓶（指直接采血器），5．不主张换针头入瓶；6．有血的培养瓶不可放入冰箱和冻箱保存，应在常温保存。
血培养操作规范及临床意义
评估治疗效果
判断感染类 型
指导临床用 药
评估治疗效 果
预测疾病预 后
预测预后
指导抗生素使用：根据血培养结果选择敏感抗生素 预测病情进展：阳性结果提示感染，阴性结果提示感染可能较小 评估预后：根据培养结果判断病情严重程度和预后 指导治疗：根据培养结果调整治疗方案，提高治疗效果
监测耐药性
血培养在监测耐药性方面的作 用
采血次数
成人：至少2次 儿童：至少1次 特殊情况：根据临床需要，可多次采血 注意事项：避免在同一天内多次采血
培养基选择
选择无菌、无毒的培养基 根据培养目的选择适合的培养基 培养基的成分和浓度应符合要求 培养基应在使用前进行灭菌和质量控制
培养温度和时间
培养温度：35-37℃ 培养时间：通常为2-4周，根据具体病原菌和药物敏感试验结果而 定
感谢观看
汇报人：
临床医生需要 综合考虑多种 检测结果和临 床表现，以做 出准确的诊断 和治疗决策。
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血培养的未来发展方向
提高培养阳性率
优化采血技术：提 高采血技巧和操作 规范，减少污染和 交叉感染
改进培养基：研发 更高效的培养基， 提高培养阳性率
自动化技术应用： 引入自动化技术， 提高培养效率和准 确性
临床意义：提高培 养阳性率有助于更 准确地诊断感染， 指导临床治疗
扩大检测范围：将血培养检测范围扩展到更多病原体种类，如真菌、寄生虫等
提高检测灵敏度：通过优化培养基和检测方法，提高对低浓度病原体的检测灵敏度
实现早期诊断：通过缩短检测时间，为临床提供早期诊断依据，有助于患者及时得到有效治疗
实现自动化和智能化操作
自动化技术：利用机器人和自动化设备进行血培养操作，提高工作效率和 准确性
血培养操作规范及临床意义
血培养操作规范及临床意义血液培养是一种常用的临床检验方法，用于检测细菌或其他微生物在血液中的存在。
准确的血液培养操作和分析，对于临床医学的诊断和治疗具有非常重要的意义。
本文将探讨血培养操作规范及其在临床中的意义。
一、血培养操作规范1. 采样前准备医护人员应洗手并佩戴手套，对采样部位皮肤进行消毒，并用消毒棉球擦拭干净，等待皮肤干燥。
同时，应选择合适的采样部位，如肘窝静脉、桡动脉、股静脉等。
2. 采样采样时应使用无菌针和无菌管采集血液标本，一般采集量为每个采样部位2-3个管，每个管至少采集1-3ml的血液。
在采集时，应注意避免大量气泡和红细胞进入采样管中，以免影响结果。
3. 处理采集后将采样管送至实验室，并及时进行处理。
应将血液标本均匀地涂布在培养基上，可以选择使用静置法、旋转法或转移法进行操作。
静置法和旋转法适用于不同类型的培养瓶，需要在显微镜下观察细菌生长的情况。
转移法则适用于无菌环境下的操作，需要将血液标本转移至培养基上，然后进行均匀涂布和培养。
4. 结果分析血培养的结果应在一定时间内进行分析，并根据培养基的类型和细菌的特征来确定细菌的种类。
一般情况下，血培养的阳性结果表明血液内存在病原菌，阴性结果则表明血液中不存在病原菌。
在分析结果时，需要参考患者的临床症状、体征和其他检查结果来作出准确的临床诊断。
二、血培养在临床中的意义血培养是诊断血液系统感染的重要方法之一，对于临床医学的诊断和治疗具有非常重要的意义。
以下是血培养在临床中的应用：1. 诊断感染血液系统感染是一种常见的病理生理现象，可以引起严重的后果，如败血症和感染性心内膜炎等。
通过血培养可以检测细菌或其他微生物在血液中的存在，确定感染的种类并作出准确的诊断。
2. 监测治疗效果在治疗感染过程中，血培养可以用于监测治疗效果。
如治疗后血液中的细菌数量明显减少或消失，表明治疗有效。
3. 判断细菌耐药性通过血培养可以检测出细菌的耐药性，进而指导临床医生选择最佳的治疗方案。
血培养操作规范与临床意义
培养时间长：需要数天才能得到结果，不利于早期 诊断和治疗
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敏感性低：对于一些感染性疾病，血培养的敏感性 较低，可能导致漏检
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快速检测技术：采用快速检测技术，缩短检测时间， 提高诊断效率
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自动化操作：采用自动化操作技术，减少人为因素 对检测结果的影响
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血培养的定义：血培养 是通过采集患者血液标 本，在适宜的培养条件 下，对血液中的微生物 进行培养和鉴定，以确 定病原菌的一种方法。
血培养的目的：血培养主 要用于诊断和治疗感染性 疾病，特别是败血症、菌 血症等严重感染。通过血 培养可以明确病原菌的种 类和药敏情况，为临床医 生提供准确的诊断依据和 治疗方案。
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血培养可以检测出多种病原微生物
血培养在临床实践中具有广泛的应 用价值
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ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
血培养阳性结果指导抗生素治疗：通过血培养结果，确定病原体类型， 选择敏感抗生素进行治疗，提高治疗效果。
血培养阴性结果指导抗生素治疗：在血培养阴性时，仍需要根据临床情 况选择适当的抗生素进行治疗，以避免延误治疗。
血培养与PCR 技术的结合： 提高病原菌检 测灵敏度和特
异性
血培养与质谱 分析的结合： 鉴定病原菌种
类和耐药性
血培养与生物 标志物的结合： 辅助诊断感染
性疾病
血培养与基因 测序的结合： 揭示病原菌基 因变异和演化
趋势
血培养与其他诊断方法的比较：血培养与其他诊断方法如影像学检查、实验室检查等在诊断 感染性疾病时的优缺点比较。
血培养的规范化操作流程
血培养的规范化操作流程血培养是临床实验室常见的一种微生物学检查方法，用于检测人体内是否存在细菌、真菌或其他微生物的感染。
在进行血培养时，需要遵循一系列规范化的操作步骤，以确保结果的准确性和可靠性。
以下是血培养的规范化操作流程。
1.检测前准备：-检测人员应佩戴个人防护装备，如实验服、手套、口罩等，以防止交叉感染。
-准备好所需的试剂和设备，包括培养基、血培养瓶、离心机、恒温箱等。
-检查培养基是否过期、封装是否完好，并进行质量检验。
2.标本采集：-根据临床需要，在合适的部位采集血液标本，并确保采集时的无菌操作。
-选择适当的采样器官，如使用灌注式血培养瓶，可选择适合的瓶颈部位。
-采集标本后应立即将其送至实验室进行处理。
3.标本处理：-将血液标本倒入血培养瓶中，通常一组采用两瓶血培养瓶，以增加检测的灵敏度。
-标本处理前应在标本瓶上标记样本信息，如患者姓名、标本号码、采样时间等。
-轻轻摇晃血培养瓶，以混匀血液和培养基，避免凝块的形成。
4.培养条件：-将血培养瓶放入恒温箱中，设置适当的温度和湿度条件（通常为35-37摄氏度和5-10%CO2）。
-检测周期根据临床需要而定，通常为24小时和48小时，有时可能需要更长的时间。
-定期检查恒温箱中血培养瓶的状态，确保温度和湿度的稳定。
5.细菌培养和观察：-在设定的培养周期后，检查血培养瓶中是否有细菌的生长。
-若瓶内产生了混浊或沉淀，则可能存在细菌生长，应进行下一步鉴定和分离。
-借助显微镜观察瓶内的液体或沉淀物，观察细菌形态、染色性质、运动性等特征。
6.细菌鉴定和药敏试验：-对生长的细菌进行鉴定，可以通过生物化学试验、分子生物学方法和免疫学方法等。
-鉴定完成后，可进行药敏试验，以确定对不同抗生素的敏感性和耐药性。
-鉴定和药敏试验的结果应记录在实验记录表中，并向临床医生提供及时的检测报告。
7.结果解读和报告：-根据细菌鉴定和药敏试验的结果，对病原体是否存在感染、感染的种类以及抗生素的选择等进行解读。
血培养规范操作
中和抗生素 需氧成人瓶
中和抗生素 儿童瓶
成人厌氧瓶Leabharlann 二、血培养标本的采集与运送
5、血培养瓶的选择 成人成套培养：一次静脉穿刺采取的血液分别注入需氧 瓶和厌氧瓶进行培养，即完整的一“套”血培养。同时进 行需氧和厌氧培养可提高阳性率、缩短阳性报警时间、利 于鉴别污染与感染。 先注需氧瓶，再注厌氧瓶，注意勿将注射器内的空气注 入厌氧瓶内，否则破坏瓶内的无氧状态。 对于儿童患者应采用儿童瓶。
二、血培养标本的采集与运送
1、标本采集时间 （1）患者接受抗生素治疗之前； （2）患者寒战时； （3）发热初期。
2、标本采集部位 外周静脉血 三步消毒法： （1）首先采用75%的乙醇消毒穿刺部位的皮肤；
（2）待干后，用碘伏由内至外擦拭；
（3）待完全干后，再用75%的乙醇脱碘。
二、血培养标本的采集与运送
血培养的规范操作
检验科
一、血培养的临床指征
患者出现以下一种或同时具备几种临床表现时可作为血培养 的重要指征： 1、发热（≥38 ℃）或低温（≤36 ℃） 2、寒战； 3、白细胞增多，特别是有“核左移”时； 4、粒细胞减少（<1.0 ×10^9/ L）； 5、血小板减少； 6、皮肤、黏膜出血 7、昏迷； 8、多器官衰竭； 9、血压降低； 10、呼吸加快（呼吸率>20/分）；以及肝脾肿大；关节疼痛； C反应蛋白、内毒素、降钙素原升高等。
6、采血次数
对怀疑血流感染患者推荐至少同时或短期内（30-60分钟） 从2个部位分2次采集2套（儿童2瓶）血液标本进行培养。
二、血培养标本的采集与运送
7、采血时间间隔 （1）急性败血症或骨髓炎、肺炎、肾盂肾炎需要立即进行 抗菌治疗时，应在治疗前自不同部位采集2套进行培养； （2）对不明原因的发热、亚急性心内膜炎或菌血症，可于 24 小时内自不同部位采集 2-4 套血培养，每次相隔时间至 少3小时； （3）对怀疑急性感染性心内膜炎的患者，应在1-2小时内 自3个部位采集3套血培养； （4）儿童患者应尽早采血。 8、运送要求 采集标本后立即送检，不能立即送检放室温，千万不可放 冰箱储存
临床微生物实验室血培养规范
血培养瓶应尽快送至实验室孵育或上机，如果运送延迟，应在血液接种以后 尽快 35℃～37℃孵育，切勿冷藏或冷冻。如果病房没有孵箱，血培养瓶应臵 于室温下，而非冷藏或冷冻。
7 血培养安全防护
7.1 实验室获得感染途径 针刺伤病毒感染，包括乙肝病毒、 丙肝病毒和 HIV； 皮肤粘膜暴露是肝炎病 录病毒感染的主要途径，而其它的主要途径是气溶胶或微滴。 7.2 防护措施 7.2.1 洗手 洗手是预防实验室获得感染的关键要素。在戴手套前、摘手套后、工作结束后、 离开实验室和进 入清洁区时，都必须洗手。 如直接接触血液或任何潜在的感染性物质后必须立即清洗暴露部位。 7.2.2 防护屏障 1.采集血培养时应戴手套，采集下一患者时须换手套。血液污染手套、有破损迹象或失去防护作用 时，必须及时更换。在接收和处理标本时， 需要戴手套。 2.可能发生血液或其它感染性物质喷溅的情况下， 需要面部防护。 3.在没有安全柜的情况下， 血培养操作和检验时需要穿防水、长袖、前面封闭的隔离服。存在任 何可见污染时立即脱去。污染的隔离服必须作为生物危险垃圾丢弃或严格按流程清洗。离开实验室 或去实验室内的清洁区时要脱去隔离服。
7.3.3 标本处理
所有标本必须在生物安全 II 级防护下处理。疑 为高致病性病原体如结核分枝杆菌、布鲁菌属、 弗朗西斯菌属、鼠疫耶尔森菌、类鼻疽博克霍尔 德菌阳性的血培养瓶进行传代培养时，处理操作 需按生物安全 III 级防护进行。 疑为脑膜炎奈瑟菌 的菌株必须在生物安全柜中处理。
8 血培养结果的处理及报告程序
采血时间 宜在寒战或高热高峰前后采集，用抗菌 药物之前采集。
血培养采血时机
细菌浓度
体温
0
30 时间 (分钟)
60
血培养套数
血培养操作规范
血培养操作规范一、血标本采集和运送1．采血指征：一般患者出现以下一种体症时可作为采血的重要指征：发热(≥38℃)或低温(≤36℃)，寒战，白细胞增多(计数大于10，000×109/L，特别有“核左移”未成熟的或杆状核白细胞)，皮肤粘膜出血，昏迷，多器官衰竭，血压降低，CRP升高及呼吸快，特殊患者(如血液病)出现粒细胞减少(成熟的多形核白细胞<1000×109/L)，血小板减少等，或同时具备上述几种体症的临床可疑菌血症应采集血培养。
新生儿菌血症，应该增加尿液和脑脊液培养。
对入院危重感染患者在未进行系统性抗菌药物治疗之前，应及时采集血培养。
2．皮肤消毒程序：严格执行以下三步法：1）70％酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。
2)1％～2％碘酊作用30s或10％碘伏60s，从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达3cm以上。
3)70％酒精脱碘。
对碘过敏的患者，用70％酒精消毒60s，待酒精挥发干燥后采血。
3．培养瓶消毒程序1)70％酒精擦拭血培养瓶橡皮塞，作用60s。
2)用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞子表面残余酒精，然后注入血液。
4．静脉穿刺和培养瓶接种程序1)在穿刺前或穿刺期间，为防止静脉滑动，可戴乳胶手套固定静脉，不可接触穿刺点。
2)用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头直接注入血培养瓶，或严格按厂商推荐的方法采血。
3)血标本接种到培养瓶后，轻轻颠倒混匀以防血液凝固。
立即送检，切勿冷藏。
4．采血量成人采血量是8～l0ml，儿童l～5ml。
血液和肉汤之比为1：5～l：10。
5．血培养份数和采血时间采血培养应该尽量在使用抗菌药之前进行，在24h内采集2～3份血培养(一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养)。
对间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来之前0.5～1h采血液，或于寒战或发烧后lh进行。
特殊的全身性和局部感染患者采血培养的建议：1)可疑急性原发性菌血症、真菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎，应在不同部位采集2～3份血标本。
血培养的意义及操作程序
培养瓶的选择
成年人的常规血培养应该用一对瓶 需氧瓶 + 厌氧瓶
对已经使用 抗菌药物治 疗的患者 用含活性炭 的抗菌药物 吸附瓶 FA FN
对未使用 抗菌药物 治疗的患 者 用标准血 培养瓶
SA
SN
应用厌氧瓶的原因
保证足够的采血量 便于解释血培养结果是污染还是真正感染 保证兼性厌氧菌的生长 保证厌氧菌的培养
解读注意事项
4、对葡萄球菌一代比三代头孢治疗效果好。 5、有些药物不适用于单独使用，仅用于联 合用药，如利福平。 6、因为是体外药敏试验，有些药体外试验 敏感，可能临床治疗无效。 7、同一菌株可能出现亚种，导致连续药敏 结果不吻合。
与临床沟通中常见问题
1、我们想用的药物在药敏试验中没 有做？
阴性报告结果的解读
阴性报告提示以下可能 非感染性疾病 感染已治愈 感染未治愈，但各种原因导致病原体未检测出来 采样运送不当:标本采集、送检、保存不当，导致 病原菌死亡，污染菌大量增殖； 抗生素影响：经抗菌治疗，标本中含大量抗生素， 病原菌受到伤害，不能正常生长； 苛养菌：如嗜血杆菌、淋球菌等因标本采集、送检、 保存不当，导致漏检。
与临床沟通中常见问题
6、选择药敏报告敏感的药物，为什么临床治疗无效？
体外药敏试验只能预测体内治疗效果，并不等同； 一般来说，耐药＝治疗无效； 敏感≠治疗有效。 • 可能不是真正的致病菌（污染或定植菌） • 细菌本身因素（如诱导耐药，生物被膜） • 感染部位与药代动力学因素 • 细菌的MIC，给药剂量和用药方式 • 药敏试验药物中有些药物单独使用无效，但可以与其他 药物联合用药 • 药物剂型及生物利用度（纯品、商品）
血培养的意义及操作规范
共同学习的三部分内容
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
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- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
4、右手心搓左手指，左手心搓 右手指。
5、右手心搓左拇指，左手心搓 右拇指。
6、右手掌搓左手腕，左手掌搓 右手腕。
消毒液：要保质还要保量
试验前皮肤消毒程序
质量保证
1. 70%酒精（ 或70% Isopropyl Alcohol ）擦拭静脉穿 刺点 >30秒钟 2. 1%2% 碘 酊 (Tincture of iodine) 30 秒 或 10% 碘 伏 （Povidone-iodine%)消毒>=60秒 从穿刺点向外画圈消毒,直径>3cm 3.70%酒精脱碘 或一步法有效的消毒液
“How much blood should I draw from the patient?” 我们应该采集多少血液呢?
采血量与检出率的关系
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
% Relative Yield
• 血培养要连续送检,至少要送2次
• 应采集足够体积的血液成人8-10ml,儿童瓶1-3ml • 血培养要求无菌操作:细菌是干死的,不是淹死的!
谢谢
试验前： 质量保证 静脉穿刺和培养瓶接种
1 .在穿刺前或穿刺期间，防止静脉滑动，戴手 套固定静脉，不可接触静脉穿刺点 2.用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头（如果 行第二次穿刺，应换针头）直接注入血培养瓶 3.按厂商推荐的方法采血
徐英春，倪语星等。血培养操作规范，上海科学技术出版社，2002,1-31
• 革兰阳性菌感染增加
– 特别是葡萄球菌和肠球菌的感染 – 对抗生素耐很普遍（VRE、MRSA/MRSE、 VISA)
• • • •
真菌血症增加（特别是念珠菌属） 革兰阴性菌感染情况无显著变化 厌氧菌和细菌混合感染减少 在美国分枝杆菌血症呈下降趋势，但在其它国家和地 区呈现上升的趋势
菌血症的来源
菌血症的来源
Gaur, et al., Clinical Infectious Diseases 37: 469, 2003
导管相关菌血症
• Maki’s半定量法：
–5cm导管尖培养 –菌落计数15CFU阳性
特殊病原
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结论：实验室医师的观点
• 最佳检出率需要含树脂的培养瓶 • 一份血培养最好采2瓶(需氧+厌氧)
BD诊断
要
点
• 定义
• 血培养的操作规范
• 血培养的消毒方法
DEFINITIONS
定义
• 败血症（SEPSIS） ：具有临床感 染症状，同时全身反应具有以下两 个或多个症状：
– – – – 体温 >38oC，或 <36oC 心率 >90/分钟 呼吸率 >20/分钟 白细胞 >12,000； <4000；或杆状核白 细胞>10%
菌血症的类型 间歇性菌血症 （Intermittent bacteremia）
潜在的病理性改变， 脓肿未及时引流： 腹腔 骨盆 肾周 肝脏 前列腺 脓肿是不明发热常见的原因 CUMITECH，ASM，NW
菌血症的类型 持续性菌血症 （Continuous bacteremia）
显著的血管内感染症状，如：
相同时间采血 检出时间有2-3个小时差异 对于导管相关的菌血症和非导管相关的菌血症 很高的敏感性和特异性
Blot, et al., Lancet 354:1071, 1999 Malgrange, et al., Journal of Clinical Microbiology 39: 274, 2001
DEFINITIONS
定义
• 菌血症（BACTEREMIA） ：血液中有细菌存在并可 通过培养证实 一过性 间歇性 持续性
一过性菌血症 （Transient bacteremia）
菌血症的类型
通常是不发病的（如刷牙），但也可能发病（SBE） •对感染组织的处理：如：脓肿、疖、蜂窝组织炎 •污染粘膜表面的创伤性操作：如
表皮葡萄球菌临床意义
% % # of sets # of sets Positive Obtained Significant Contam 有意义 污染率 阳性样本 样本数 % Indeterm 不明
1 1 2 1 2 3
1 2 2 3 3 3
0 2 60 0 75 100
97 95 3 100 0 0
怀疑急性原发性菌血症 真菌菌血症 脑膜炎 骨髓炎 关节炎 肺炎
采血份数
2或3份血培养
临床微生物学血培养规范，中华检验医学，2004,27(2)
采血份数
不明病源的发热，如： 隐性脓肿 伤寒热 波浪热
采集2或3份
24h至36h后
估计体温升高之前 （下午） 立即采集2份以上血培养
临床微生物学血培养规范，中华检验医学，2004,27(2)
–牙齿修复、膀胱镜检、尿道扩张术 –各种插管 –引产，结肠镜检查
•污染的外科手术：如
–尿道前列腺切除 –阴道子宫切除术 –烧伤感染清创术 CUMITECH，ASM，NW
一过性菌血症 菌血症的类型 （Transient bacteremia）
• 在全身或局部感染的早期，如 脑膜炎 肺炎 化脓性关节炎 骨髓炎 腹膜炎 胆囊炎 小肠结肠炎 CUMITECH，ASM，NW 外伤感染
采血份数
急性心内膜炎 1h2h内 采集3份血培养 第1天 第2天 第3天 24h后 2份 2份 2份 阴性再采集3份以上 或可疑亚急性心内膜炎患者 每间隔一个小时采集一份,共采集3份标本.
临床微生物学血培养规范，中华检验医学，2004,27(2)
前2周 用抗生素
Optimal Combination of Blood Culture Bottles
败血症Sepsis 严重败血症Severe Sepsis 败血症休克Septic Shock 15 - 20 25 - 35 50 – 70
• 因而，还 需要培养检测其它相关的部位 （如：尿液、痰、伤口等）
Epidemiology of Bloodstream Infections
血液感染的流行病学
美国BD研究室
How many blood culture sets should be drawn?
需要抽取多少份血培养样本？
抽取2-3份血培养样本可使败血症病原菌检出率 达到 ~99% 败血症患者在初期千万不要（NEVER draw only 1 blood）仅抽取一套血培养 注意：“份”是指单独的静脉穿刺的数量。
25
25
10 5 5 10
20
Ã Ä Ú ò É ú Ö ³ µ À ô Î º ü µ À §Ö Å × â ¿ Í Æ É Ë ¿ Ú ¨µ µ À ä Ë Æ ü ² ¿ Î » ´ Ö Î ª
CUMITECH，ASM，NW
采血
临床常见的采血指徵
指徵
•发热（38C）或低温（36C） •寒战 •白细胞增多（计数大于10，000109/L，特别有“核左 移” 未成熟的或杆状核的白细胞） •粒细胞减少（成熟的多核白细胞<1000109/L） •血小板减少 •皮肤粘膜出血 •昏迷 ，休克 •多器官衰竭 •CRP升高
质量保证
静脉穿刺和培养瓶的接种
4.轻轻颠倒混匀培养瓶以防血液凝固 5. 培养瓶立即送实验室，不要冷藏
“Can Time-to-Positivity help diagnose patients with Catheter-related Bacteremia?”
阳性检出时间是否有助于诊断与留置导管相 关的感染?
• 每次采集血液标本前一定要洗手.
• 使用3-5ml抗菌皂液
• 保证所有手部皮肤接触皂液的时间超过15秒
• 双手在流水下有力的搓洗至少10秒钟
• 注意指尖及指甲内侧
手背
• 不要遗忘拇指
• 纸巾干手并勿用手直接关闭水笼头。
洗手的流程：
1、流水湿润双手，取足量皂液
2、双掌对搓。
3、右手掌搓左手背，左手掌搓 右手背。
培养瓶的最佳组合方式
• *常规采集2个培养瓶：建议使用一个树脂需氧瓶,一个含溶 血素的厌氧瓶 • 常规采集2份标本： 第一份：使用两个树脂需氧瓶 第二份：使用一个需氧树脂瓶和一个含溶血素的厌氧瓶
*JCM 35:2634-2638, 1997
META-ANALYSIS OF BACTEC RESIN MEDIA PERFORMANCE
ml
采血量
血液和肉汤的比例1:51:10
•血液含各种抑制细菌生长因子 •稀释血液可减少这些因子亚抑制细菌生长的水平 •血液中的抗生素会稀释了 •血液：肉汤<1：5可能会抑制细菌生长，不应注入过 量的血液
时间选择
16 14 12 %POS 10 BC 8 6 4 2 0 1 2 3 4
采血时间
• 第一组：发热峰值前2.5 – 12 小时 • 第二组：发热峰值前30分钟 – 2.5小时 • 第三组：发热峰值后30分钟 – 1 小时 • 第四组：发热峰值后1 – 12小时 • 无统计学差异
87.2 99.3 12.4 100.0 69.9 96.4 100.0 90.0 38.0 100.0
6.4 0.0 81.9 0.0 16.1 1.8 0.0 0.0 49.3 0.0
6.4 0.7 5.8 0.0 14.0 1.8 0.0 10.0 12.7 0.0
再谈洗手
你的手真得洗干净了吗？
血栓性静脉炎（SBE或败血症导致的） 感染性心内膜炎
感染性动脉瘤 其它血管内膜感染 伤寒热，波浪热最初几周
CUMITECH，ASM，NW
Current Status of Sepsis: Epidemiology
败血症当前状况：流行病学