小鼠肾脏移植模型具体步骤及说明

小鼠肾脏移植模型具体步骤及说明

动物案例

57BL/6、BALB/C

造模方法

血管吻合采用供受体腹主动脉和下腔静脉端-侧连续缝合，尿路重建采用供受体输尿管端-端吻合

供体手术

腹部正中切口，选择左肾作为供肾，显露左肾及血管，游离左肾血管下方1.0～1.2cm处的腹主动脉及下腔静脉，结扎并剪断其侧支和左侧精索动静脉、左肾

上腺动静脉，游离左肾及输尿管，阻断远心端腔静脉和腹主动脉，于左肾血管上方分别结扎阻断腹主动脉和下腔静脉，并在左肾血管下方约5mm处剪断下腔静脉，以使灌注液从此处流出，6号套管针穿刺腹主动脉远端，拔取针芯，低压、匀速(0.8～10ml/min)注入10～15ml4℃的H-CA液，直至从下腔静脉流

出清凉的灌注液和左肾变为黄白色为止。灌注完毕，在结扎线以上剪断腹主动脉和腔静脉，在左肾输尿管中段剪断输尿管。此时左肾、血管及输尿管均已完

全游离，将左肾及其附带的血管、输尿管放入4℃H-CA液中保存。

受体手术

腹部正中切口，肠管右置，盐水纱布覆盖，充分暴露左肾及血管。将4℃肝素盐水2ml(50U/ml)注入右侧腹膜后进行全身肝素化。以5/0的线结扎肾蒂，行包膜下肾切除。游离左肾动脉下方1.0～1.2cm处的腹主动脉和下腔静脉，并结

扎其所有的侧支，在腹主动脉的预计吻合口处，仔细剪去部分血管外膜，以备血管吻合。在受体大鼠腹部左侧，将供肾放在两层冰棉片之间，维持供肾的低温状态。分别在左肾血管下方和髂血管水平处用阻血夹阻断下腔静脉和腹主动脉的血流。判断确无血液回流后，将下腔静脉和腹主动脉分别纵向剪开一与供

体血管口径相吻合的小口，长约4～6mm。在6～10倍手术显微镜视野下，先吻合动脉后吻合静脉，第1针从12点的位置开始，用9/0线做连续吻合血管右侧壁直至6点位置，然后连续吻合左侧壁，每侧缝6～7针，以同样的方法吻合下腔静脉。吻合结束后，开放阻血夹，可见供肾迅速转红，肾动脉有明显搏动，肾静脉充盈。如果吻合口有渗血，轻压2～3min，不要随便加针，以免造成吻合口狭窄。

尿路重建

血管吻合成功后，观察2～3min，见供肾输尿管蠕动并有清亮的尿液流出时开始重建尿路。在平受体左肾下极水平处锐性游离受体输尿管并剪断，修剪供体输尿管至合适长度，肝素盐水冲洗断端。25倍显微镜视野下，用11/0的显微手术缝线两定点法间断1～2针吻合输尿管前壁，以两定点牵引线翻转至输尿管后壁，间断1～2针吻合供受体输尿管后壁，完成尿路重建后，观察吻合口有无狭窄和血栓，若输尿管蠕动正常，将肠管左置，肾包膜下行受体右肾切除。

关腹

腹腔无出血渗血及棉球滞留后，将肠管复位。将肝素盐水2～4ml注入腹腔，以补充受体体液丢失并防止血栓形成。用1/0线腹壁分层连续缝合关腹。

造模周期

约1h一对

模型成功率

90%