甾体激素类药物的分析精品PPT课件

制备对照液 加入四氮唑盐 制备供试液
484nm 有色产物
AX AR
标示量（%）=
AX× CX AR ×V×标示量
×100%
3. 讨论 （1） 基团对反应速度的影响
C11= O＞ C11－OH C21－OH＞ C21-酯
（2） 溶剂、水分的影响
含水量＞5%→ν↓ 含水10%→A↓10% 含水30%→几无反应
性质
UV、与羰基试 剂反应
C17 – α – 醇酮基
还原 性
2. 雄性激素及蛋白同化激素
主要活性基团 △4 – 3 – 酮 C17 – β – 羟基
性质
UV、与羰基 试剂反应
可成酯
3. 孕激素
主要活性基团
性质
△4 – 3 – 酮
C17 –甲酮基 C17 –乙酰氧基
C17 –乙炔基
UV、与羰基试 剂反应
D．酸性
学习总结
经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量 Study Constantly, And You Will Know Everything. The More
You Know, The More Powerful You Will Be
含炔基 的甾体 激素
硝酸银
白色银盐沉淀
A gN O 3
↓
6. 有机卤素 蓝色配合物
有机氟 有机氯
茜素氟蓝 硝酸亚
铈 有机破坏
Fˉ
Clˉ
硝酸—硝酸银
AgCl↓
（三） UV法
CCCO
△４-3-酮
240nm
CCCCCC
苯环
280nm
（四） IR法
（五） TLC法
主要用于甾体激素类 药物制剂的鉴别
（六） HPLC法
— 无水乙醇
醛 → A↑ — 无醛无水乙醇
（3） O2与光线的影响
反应过程 反应产物
怕光
O2影响 颜色强 度和稳 定性
→避光、快速
→隔绝空气、 快速、充N
（4）碱的种类及加入顺序 反应应在强碱性（pH13.75） 条件下进行 以氢氧化四甲基铵的结果最佳
加入顺序：
皮质激素溶液 四氮唑盐 碱试液
（5） 温度与时间 t℃↑→ν↑→甲瓒分解↑ ChP 25℃ 40～45′
2020/12/14
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（2）HPLC法（高低浓度对比法）
判定方法： ❖ 规定杂质峰数目 ❖ 规定杂质峰面积
（二）游离磷酸的检查 对照品法
地塞米松磷酸钠 氢化可的松磷酸钠 倍他米松磷酸钠 氢化泼尼松磷酸钠
（三）有机溶剂残留量的检查 甲醇和丙酮
GC法
甲醇 ≤0.3% 丙酮 ≤0.5%
四、含量测定
异烟肼比色法
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C3－酮基 1. 原理
肾上腺皮质激素、 雄性激素和蛋白同 化激素、孕激素
C3
酮基 异烟肼 异烟腙（黄）
HCl
（缩合）
2.测定方法
3.讨论 （1）反应速度
C3= O ＞ C17= O 、 C20= O C11= O 不反应
反应专属性 C3－酮基
（2）溶剂的选择 异烟肼盐酸盐→甲醇、乙醇
解 UV法、Kober反应比色法及HPLC
法在其含量测定中的应用
• .Kober反应是指雌激素类药物与_______共热呈色。(
)
•
A.硫酸－甲醇 B.硫酸－乙醇
•
C.硫酸－甲醛 D.硫酸－醋酐
素类
用四氮唑比色法测定皮质激
药物，是利用C17 –α醇酮基的何种 性
质
A．氧化性
B．还原性
C．可加成性
氨制硝酸银
Ag↓黑色
碱性 酒石酸铜
Cu2O↓橙红色
2. C3–酮基和C20–酮基
甾体类激 羰基试剂 素药物
黄色的腙
＃常用的羰基试剂：
2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯 肼
3. 甲酮基呈色反应
黄体酮 其他甾体
亚硝基铁 氰化纳
蓝紫色 淡橙色
不显色
4. 酚羟基
雌激素 重氮苯磺酸 红色偶
类药物
氮染料
5. 乙炔基
△４-3-酮 240nm（±）
肾上腺皮质激素 雄性激素和蛋白同化激素 孕激素
苯环
280nm（±）
雌激素
（三）比色法
弱、非分 光光度活
化学反应
强分光 光度活
性药物
性药物
四氮唑比色法
1. 原理 肾上腺皮质激素类
C17 -α－醇酮基 强还原性
四氮唑盐 C 醇酮基 有色甲瓒
OH - [还原]
2、方法：以醋酸地塞米松为例
与亚硝基铁氰 化纳反应
水解鉴定乙酸
与硝酸银沉淀
4. 雌激素
主要活性基团
性质
A环为3–OH 苯环
UV、与重氮苯 磺酸盐反应
C17 –乙炔基 C17 –羟基
与AgNO3反应 可成酯
二、鉴别试验 （一）与强酸的呈色反应
（母核）
甾体激素 H2SO4 H3PO4 类药物 HClO4 HCl
呈色
与硫酸显色反应
醋酸可的松
炔雌醇 炔雌醚 泼尼松 泼尼松龙
显 色 荧光 加水稀
黄或微 带橙
褪色并澄 清
橙红
橙红 橙
黄绿 黄绿
絮状↓玫红
↓红色 黄→蓝绿
深红
絮状↓灰
(二) 官能团的反应
1 C17 – α – 醇 还原性 酮基
A. 呈色反应
肾上腺 皮质激 素药物
四氮唑盐 费林试液 多伦试液
OHˉ
呈色
B. 沉淀反应
肾上 腺皮 质激 素药 物
无水甲醇 无水乙醇
Kober反应比色法 雌激素 原理
雌激素 H2S O4 乙醇 桃红
λmax=515
第十章 复习内容
1、熟悉本类药物的分类，掌握其结构 特征与分析方法的关系
2、熟悉某些官能团的呈色反应，了解 其他鉴别方法
3、掌握本类药物中其他甾体的检查方 法，了解其他特殊杂质的检查
4、掌握四氮唑比色法、异烟肼比色法 的原理、方法及测定条件。了
（一）HPLC法 USP、BP、JP均采用
RP－HPLC（大多内标法）
（甾体激素类药物常含有结构相似的其他甾体 杂质，对利用结构特征设计的比色法有干扰）
特点 用样量少，灵敏度高，分离效 果好，测定速度快
例：黄体酮的含量测定：ODS柱； 甲醇-水（65：35）；254nm 内标：己烯雌酚
（二）UV法
主要用于甾体激素类 药物制剂的鉴别（如：醋酸曲 安奈德软膏、醋酸氟轻松软膏）
三、 杂质检查 （一）有关物质检查
1.定义 与标示药物结构不
同的甾体化合物都称为“有关 物质”
（1）TLC法（高低浓度对比法）
判定方法： ❖ 规定杂质斑点数目 ❖ 规定杂质斑点颜色
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第十五章
甾体激素类药物 的分析
一、基本结构及分类
C21
11 19 1
18 12
C20
17
C 13D 16
2
A
10
9
B
14 8
15
3 45 6 7
基本结构：环戊烷并多氢菲
分类：
肾上腺皮质激素
甾体激素
雄性激素及蛋 白同化激素
性激素 孕激素
雌激素
二、结构与性质
1. 肾上腺皮质激素
主要活性基团 △4 – 3 – 酮