甾体激素类药物的分析精品PPT课件
合集下载
第10章 甾体激素类药物的分析 PPT课件
原理：磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵反应生成磷钼酸铵，再被1-氨基-2 －萘酚-4-磺酸溶液还原，所得磷钼酸蓝在740nm有最大吸收。比较供试 液与对照液的吸收度控制药物中游离磷酸盐的量。
A B
6
9
C D
C 21 C
7、酯的反应
有些本类药物，在C17或C21位上连接有酯基，可将 其水解，产生相应的羧酸，再根据羧酸的性质进行鉴别 (如醋酸泼尼松，己酸羟孕酮等)。 醋酸,在酸性条件 下与乙醇生成醋 酸乙酯，有香气 己酸，有特臭
17
C D A B
2019/3/3
12
部分本类药物用测定衍生物熔点的方法进行鉴别 1、缩氨基脲的生成 C3位的羰基和氨基脲发生缩合，生成缩氨基脲，可测定其熔点，对 药物进行鉴别。 COCl 如苯丙酸诺龙，产物熔点约为 182℃，熔融同时分解。 CH3 CH3 2、酯的水解 O KOH + +KCl+H2O C O C N OH C HO 若结构是有机酸的酯，可水解后测定产物熔点。 O 如丙酸睾酮C17位是丙酸和睾酮形成的酯，碱性水解后得到睾酮， NH +2HO +2H2O 熔点应为150~156 ℃。 2 m.p.201℃ 炔雌醇 3、酯的生成 O N 某些药物有羟基，可与酰卤生成酯，可测定酯的熔点进行鉴别。 HO 双肟m.p.238℃ 如炔雌醇 C3位上的羟基与苯甲酰氯成酯后，熔点为 200~202℃。 黄体酮 4、酮肟的生成 有些药物C3位的羰基可与羟胺形成肟，可测定肟的熔点对药物进行 鉴别。 如黄体酮与盐酸羟胺反应后生成黄体酮双肟，熔点为235~240℃。
14.3
2019/3/3
时间(min)
14.3
22.2
19
游离磷酸盐
药物分析甾体激素类药物的分析PPT课件
CONHNH2
CONH N N
O
+
HCl
N
第14页/共47页
(二)C17--醇酮基的反应
• 皮质激素分子结构中 C17 位上的 -醇酮基 还原性
氧化剂氧化
被还原析出沉淀或显色 水合醛
氧化剂 ：碱性酒石酸铜试液、氨制硝酸银试液、碱性四氮唑试液
第15页/共47页
1. 与碱性酒石酸铜试液反应
(斐林试液)
• HPLC鉴别法 ：一般采用在含量测定项下记录的HPLC图中供试品峰的保留时间应与对照品峰的保留时间一 致。
• 特点：简便、快速、高分离效能。 • 中国药典采用HPLC鉴别醋酸氟轻松软膏等十余个品种。
第34页/共47页
第三节 特殊杂质检查
• 杂质：原料、中间体、异构体、降解产物、试剂、溶剂。
• 检查项目：
CH2OH
CO
HO
H
（I ）皮质酮 松
O corticosterone hydrocortisone
O
CH2OH
CO
HO
OH
（II ）氢化可的
第3页/共47页
CH2OPO(ONa)2
CH2OCOCH3
CO
HO
OH
CH3
CO
CH3
HO
O
C
O
CH3
F O
F O
F
第4页/共47页
主要结构特征
• （1）A环的C3上有酮基；C4/C5间有双键，并与C3酮基共轭，称为，-不饱和酮， 标记为4-3-酮。
第47页/共47页
加氢氧化钠试液数滴
显紫红色
O H NO2
O NaO S O
O
O2N O
CONH N N
O
+
HCl
N
第14页/共47页
(二)C17--醇酮基的反应
• 皮质激素分子结构中 C17 位上的 -醇酮基 还原性
氧化剂氧化
被还原析出沉淀或显色 水合醛
氧化剂 ：碱性酒石酸铜试液、氨制硝酸银试液、碱性四氮唑试液
第15页/共47页
1. 与碱性酒石酸铜试液反应
(斐林试液)
• HPLC鉴别法 ：一般采用在含量测定项下记录的HPLC图中供试品峰的保留时间应与对照品峰的保留时间一 致。
• 特点：简便、快速、高分离效能。 • 中国药典采用HPLC鉴别醋酸氟轻松软膏等十余个品种。
第34页/共47页
第三节 特殊杂质检查
• 杂质：原料、中间体、异构体、降解产物、试剂、溶剂。
• 检查项目：
CH2OH
CO
HO
H
（I ）皮质酮 松
O corticosterone hydrocortisone
O
CH2OH
CO
HO
OH
（II ）氢化可的
第3页/共47页
CH2OPO(ONa)2
CH2OCOCH3
CO
HO
OH
CH3
CO
CH3
HO
O
C
O
CH3
F O
F O
F
第4页/共47页
主要结构特征
• （1）A环的C3上有酮基；C4/C5间有双键，并与C3酮基共轭，称为，-不饱和酮， 标记为4-3-酮。
第47页/共47页
加氢氧化钠试液数滴
显紫红色
O H NO2
O NaO S O
O
O2N O
《甾体激素类药物》PPT课件
原产物为暗兰色的双甲
，
月朁
max 525nm
a
57
• 2．原理
17位-醇酮基具有还原性，
在碱性条件下能将四氮唑盐定量
地为有色的甲月朁 ，在一定波长下
具有最大吸收，可用比色法进行
含量测定
C 醇酮基
月朁
四氮唑盐 17
有色甲瓒
OH [还原]
a
58
3、测定法
• A．TTC法: BP; Ch.P
黄褐
a
25
与硫酸显色反应
显
荧光
加水稀释
醋酸可的松 黄或微带橙 ----清
炔雌醇
絮状↓玫红
炔雌醚
橙红
橙红
↓红色
泼尼松
橙
-黄→蓝绿
泼尼松龙
深红
絮状↓灰
a
色
褪色并澄
黄绿
黄绿
--------26
❖Kober反应：
指雌激素与硫酸—乙醇共热呈
色，用水或稀硫酸稀释后，重新加热
发生颜色改变，并在515nm附近有最
鉴别和含量测定。
a
29
•
②
羰基
3位,20位羰基可与羰基试剂反应
羰基试剂:羟胺、2,4-二硝基苯
肼、异烟肼 、氨基脲、苯肼等
a
30
OH
H
O
CH
H33
C
C
CO
ON
NH
HN
NH
H22
+
N
O
O
_
_HO
H22O
C
CO
ON
NH
，
月朁
max 525nm
a
57
• 2．原理
17位-醇酮基具有还原性，
在碱性条件下能将四氮唑盐定量
地为有色的甲月朁 ，在一定波长下
具有最大吸收，可用比色法进行
含量测定
C 醇酮基
月朁
四氮唑盐 17
有色甲瓒
OH [还原]
a
58
3、测定法
• A．TTC法: BP; Ch.P
黄褐
a
25
与硫酸显色反应
显
荧光
加水稀释
醋酸可的松 黄或微带橙 ----清
炔雌醇
絮状↓玫红
炔雌醚
橙红
橙红
↓红色
泼尼松
橙
-黄→蓝绿
泼尼松龙
深红
絮状↓灰
a
色
褪色并澄
黄绿
黄绿
--------26
❖Kober反应：
指雌激素与硫酸—乙醇共热呈
色，用水或稀硫酸稀释后，重新加热
发生颜色改变，并在515nm附近有最
鉴别和含量测定。
a
29
•
②
羰基
3位,20位羰基可与羰基试剂反应
羰基试剂:羟胺、2,4-二硝基苯
肼、异烟肼 、氨基脲、苯肼等
a
30
OH
H
O
CH
H33
C
C
CO
ON
NH
HN
NH
H22
+
N
O
O
_
_HO
H22O
C
CO
ON
NH
第13章 甾体激素类药物的分析 PPT课件
孕激素
主要活性基团 △4 – 3 – 酮 C17 –甲酮基
性质
UV、与羰基试 剂反应
与亚硝基铁氰 化钠反应
雌性激素
18 O H
17
OH C CH
HO
雌二醇
HO
炔雌醇
1.母核有18个碳原子,C10无角甲基 2. A环为苯环, C3位上有酚羟基 3.C17位上有β-羟基
雌激素
主要活性基团
性质
A环为3–OH 苯环
O
O
CH3
H H
HH
O
丙酸睾酮
酯化吸收减慢，作用时间长。
雄性激素及蛋白同化激素
主要活性基团 性 质
△4 – 3 – 酮
UV、与羰基 试剂反应
C17 – β – 羟基 可成酯
孕激素
CH3
CO
H
HH
O
O
黄体酮
1.母核有21个碳原子
2. A环△4-3-酮基
3.C17位上有甲酮基
O O
O H HH
醋酸甲地孕酮
CH2N
Ce
O
CH2COO
OH
药典规定地噻米松磷酸钠用氧瓶 燃烧法处理，使有机结合的氟转 变成无机的氟离子，在 pH4.3条 件下与茜素氟蓝试液和硝酸亚铈 试液反应生成蓝紫色的水溶性配 位化合物。
脂肪链上的氯可水解脱落 中国药典中氯倍他索的鉴别方法： 取本品少许，加乙醇1 ml,混合， 加热，加硝酸2 ml，摇匀，加硝 酸银数滴，即显白色沉淀。
S e , 二 氨 基 ,萘 苯 并 苯 硒
pH ..
环己烷
Anm
（三）有机溶剂残留量的检查 GC法
地塞米松磷酸钠 检查 甲醇和丙酮
内标法
药物分析 课件 甾体激素类药物的分析
3 致突变性评价
评估甾体激素类物质的致 突变性可以了解其对遗传 物质的影响。
结论
通过本课件学习，我们可以深入了解甾体激素类药物的分析方法和质量控制， 以及对其安全性进行评估的重要性。还可以展望甾体激素类药物未来的发展 趋势。
甾体激素类药物的分类及常用药物
类固醇
类固醇是甾体激素类药物的 重要一类，具有抗炎、免疫 调节等作用。
雄激素与雌激素
雄激素和雌激素是甾体激素 的两个主要类型，它们在生 殖和激素替代治疗中起着重 要作用。
肾上腺皮质激素
肾上腺皮质激素是甾体激素 类药物的另一类，常用于抗 炎、免疫调节和治疗肾上腺 功能不足。
甾体激素类药物的分析方法
1
化学方法
高效液相色谱法、气相色谱法和薄层色谱法是甾体激素类药物分析的常用化学方 法。
2
生物方法
免疫分析法和生物反应器法是甾体激素类药物分析的重要生物方法。
甾体激素类药物的质量控制
1 纯度检测
甾体激素类药物的纯度可以通过物理性质分 析和化学性质检测进行评估。
2 含量测定
准确测定甾体激素类药物的含量是确保药物 质量重要步骤。
3 杂质检测
杂质检测有助于评估甾体激素类药物的纯度 和安全性。
4 物理和化学性质检测
通过物理性质和化学性质的检测，可以进一 步评估甾体激素类药物的质量。
甾体激素类物的安全性评价
1 急性毒性评价
评估甾体激素类药物的急 性毒性对于确保人体安全 至关重要。
2 慢性毒性评价
慢性毒性评价可以揭示甾 体激素类药物的长期使用 对人体的潜在危害。
药物分析 课件 甾体激素类药 物的分析
这是一份关于甾体激素类药物分析的课件。通过本课件，我们将深入探讨甾 体激素的概述、分类、分析方法、质量控制、安全性评价以及未来发展趋势。
甾体激素类药物分析PPT课件
四、硒的检查
.
37
第四节 含量测定
一、HPLC 90%以上的本类药物用此 法
反相高效液相色谱法，内标法或 外标法定量
.
38
二、紫外分光光度法 具有△4—3—酮基的肾上腺皮质激
素、雄性激素和蛋白同化激素、孕激 素在240nm附近有最大吸收。
具有苯环的雌激素在280nm附近
有最大吸收。
.
39
原料、注射剂用一定的溶剂溶解或
.
33
（二）制备衍生物测定熔点 （四）UV （五）IR （六）TLC （七）HPLC
.
34
第三节 特殊杂质检查
一、有关物质（其他甾体）的检查
甾体激素类药物多由其他甾体化合
物经结构改造而来，易引入与标示甾
体激素药物结构不同、生理活性不同
的其他甾体化合物称为“有关物质” ，
包括原料、中间体、异构体、降解产
加热5分钟，放冷，加硫酸溶液
（1→2）2ml，缓缓煮沸1分钟，即
发生乙酸乙酯的香气。
.
32
己酸羟孕酮 Ch.P（2000） 【鉴别】（2）取本品约50mg，加 醇制氢氧化钾试液2ml，置水浴中
加热 5分钟，加水3ml，蒸去乙醇， 放冷，加硫酸溶液（1→10）2ml， 置水浴中加热，即发生己酸的特臭.
AB
O 皮质酮（肾上腺皮质激素类）
A环4酮 .基
4
可的松
O
CH 2O H CO
OH
O
曲 安 西 龙 CH2OH
CO
HO
H
OH
F
O
.
5
地塞米松磷酸钠
ONa
C H 2O P O C O ONa
HO
《甾体激素药物》课件
配伍禁忌
某些药物与甾体激素药物混合使用可能会产 生化学反应，导致药效降低或产生不良反应 。
06
甾体激素药物的研究进展与展望
新药研究与开发
要点一
新型甾体激素药物的发现
随着生物技术的不断发展，越来越多的新型甾体激素药物 被发现，这些药物具有更高的疗效和更低的副作用。
要点二
药物合成方法的改进
通过改进药物的合成方法，可以降低生产成本，提高产量 ，使得更多的患者能够获得高质量的甾体激素药物。
植物提取法
介绍通过植物提取法制备甾体激素 药物的过程和特点。
03
02
化学合成法
介绍通过化学合成法制备甾体激素 药物的过程和特点。
酶法合成
介绍酶法在甾体激素药物制备中的 应用。
04
甾体激素药物的质量控制
质量标准
介绍国家对甾体激素药物的质量标准，包括性状、鉴 别、检查、含量测定等方面的规定。
质量控择适 当的激素药物，避免不必要的 用药。
监测不良反应
在使用激素药物过程中，密切 观察不良反应的发生，及时发 现并处理。
治疗措施
一旦出现不良反应，应及时就 医，采取相应的治疗措施，如 药物治疗、停药观察等。
05
甾体激素药物的合理使用与注意 事项
适应症与禁忌症
适应症
药物作用机制研究
深入了解药物作用机制
通过对甾体激素药物作用机制的深入研究，可以更好地 了解药物的作用原理，为新药研发提供理论支持。
发现新的药物作用靶点
通过研究，可以发现新的药物作用靶点，为开发更加精 准的药物提供帮助。
临床应用前景与展望
扩大药物应用范围
随着研究的深入，甾体激素药物的应用范围 不断扩大，可以用于更多疾病的治疗。
甾体激素药PPT课件
新药研发需要经过多个阶段， 包括靶点发现、药物设计、合 成与筛选、临床试验等。
当前，随着生物技术的不断发 展，新药研发的速度和效率得 到了显著提高。
甾体激素药的研究进展
近年来，甾体激素药的研究取得了重要进展，如新型激素类似物的发现和开发。
这些新药在疗效、副作用和给药方式等方面具有更好的表现，为患者提供了更多的 治疗选择。
案例分析：某甾体激素药的临床应用
某甾体激素药是一种糖皮质激素 类药物，具有强大的抗炎和免疫
抑制作用。
在临床应用中，该药物主要用于 治疗系统性红斑狼疮、肾病综合 征、支气管哮喘等免疫性和炎症
性疾病。
通过合理的剂量和用药方案，该 药物能够有效控制病情，提高患
者的生活质量。
案例分析：甾体激素药与其他药物的相互作用
激素类药物在体内代谢过程中 产生的代谢产物可能具有毒性 作用，对组织器官造成损害。
免疫抑制
激素类药物通过抑制免疫系统 功能，降低机体对感染和过敏
的抵抗力。
内分泌紊乱
激素类药物干扰正常的内分泌 平衡，导致一系列内分泌失调
症状。
基因突变
长期使用激素类药物可能导致 基因突变和肿瘤发生。
副作用与不良反应的预防与处理
化需求等。
06 甾体激素药的临床应用与 案例分析
临床应用概况
甾体激素药是一类具有特定化学结构 和生理活性的药物，广泛应用于临床 治疗多种疾病。
临床应用时需根据患者的具体病情和 医生的指导进行个体化治疗，同时注 意药物的副作用和不良反应。
这类药物具有抗炎、抗免疫、抗肿瘤、 抗骨质疏松等作用，对于一些难治性 疾病如系统性红斑狼疮、类风湿性关 节炎等有较好的疗效。
清除率是单位时间内从体内清除的药物量 ，是评价药物在体内消除能力的指标。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
（一）HPLC法 USP、BP、JP均采用
RP－HPLC（大多内标法）
（甾体激素类药物常含有结构相似的其他甾体 杂质，对利用结构特征设计的比色法有干扰）
特点 用样量少，灵敏度高，分离效 果好，测定速度快
例：黄体酮的含量测定：ODS柱； 甲醇-水（65：35）；254nm 内标：己烯雌酚
（二）UV法
解 UV法、Kober反应比色法及HPLC
法在其含量测定中的应用
• .Kober反应是指雌激素类药物与_______共热呈色。(
)
•
A.硫酸－甲醇 B.硫酸－乙醇
•
C.硫酸－甲醛 D.硫酸－醋酐
素类
用四氮唑比色法测定皮质激
药物，是利用C17 –α醇酮基的何种 性
质
A．氧化性
B．还原性
C．可加成性
异烟肼比色法
C3－酮基 1. 原理
肾上腺皮质激素、 雄性激素和蛋白同 化激素、孕激素
C3
酮基 异烟肼 异烟腙（黄）
HCl
（缩合）
2.测定方法
3.讨论 （1）反应速度
C3= O ＞ C17= O 、 C20= O C11= O 不反应
反应专属性 C3－酮基
（2）溶剂的选择 异烟肼盐酸盐→甲醇、乙醇
D．酸性
学习总结
经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量 Study Constantly, And You Will Know Everything. The More
You Know, The More Powerful You Will Be
氨制硝酸银
Ag↓黑色
碱性 酒石酸铜
Cu2O↓橙红色
2. C3–酮基和C20–酮基
甾体类激 羰基试剂 素药物
黄色的腙
＃常用的羰基试剂：
2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯 肼
3. 甲酮基呈色反应
黄体酮 其他甾体
亚硝基铁 氰化纳
蓝紫色 淡橙色
不显色
4. 酚羟基
雌激素 重氮苯磺酸 红色偶
类药物
氮染料
5. 乙炔基
含炔基 的甾体 激素
硝酸银
白色银盐沉淀
A gN O 3
↓
6. 有机卤素 蓝色配合物
有机氟 有机氯
茜素氟蓝 硝酸亚
铈 有机破坏
Fˉ
Clˉ
硝酸—硝酸银
AgCl↓
（三） UV法
CCCO
△４-3பைடு நூலகம்酮
240nm
CCCCCC
苯环
280nm
（四） IR法
（五） TLC法
主要用于甾体激素类 药物制剂的鉴别
（六） HPLC法
醋酸可的松
炔雌醇 炔雌醚 泼尼松 泼尼松龙
显 色 荧光 加水稀
黄或微 带橙
褪色并澄 清
橙红
橙红 橙
黄绿 黄绿
絮状↓玫红
↓红色 黄→蓝绿
深红
絮状↓灰
(二) 官能团的反应
1 C17 – α – 醇 还原性 酮基
A. 呈色反应
肾上腺 皮质激 素药物
四氮唑盐 费林试液 多伦试液
OHˉ
呈色
B. 沉淀反应
肾上 腺皮 质激 素药 物
— 无水乙醇
醛 → A↑ — 无醛无水乙醇
（3） O2与光线的影响
反应过程 反应产物
怕光
O2影响 颜色强 度和稳 定性
→避光、快速
→隔绝空气、 快速、充N
（4）碱的种类及加入顺序 反应应在强碱性（pH13.75） 条件下进行 以氢氧化四甲基铵的结果最佳
加入顺序：
皮质激素溶液 四氮唑盐 碱试液
（5） 温度与时间 t℃↑→ν↑→甲瓒分解↑ ChP 25℃ 40～45′
性质
UV、与羰基试 剂反应
C17 – α – 醇酮基
还原 性
2. 雄性激素及蛋白同化激素
主要活性基团 △4 – 3 – 酮 C17 – β – 羟基
性质
UV、与羰基 试剂反应
可成酯
3. 孕激素
主要活性基团
性质
△4 – 3 – 酮
C17 –甲酮基 C17 –乙酰氧基
C17 –乙炔基
UV、与羰基试 剂反应
制备对照液 加入四氮唑盐 制备供试液
484nm 有色产物
AX AR
标示量（%）=
AX× CX AR ×V×标示量
×100%
3. 讨论 （1） 基团对反应速度的影响
C11= O＞ C11－OH C21－OH＞ C21-酯
（2） 溶剂、水分的影响
含水量＞5%→ν↓ 含水10%→A↓10% 含水30%→几无反应
与亚硝基铁氰 化纳反应
水解鉴定乙酸
与硝酸银沉淀
4. 雌激素
主要活性基团
性质
A环为3–OH 苯环
UV、与重氮苯 磺酸盐反应
C17 –乙炔基 C17 –羟基
与AgNO3反应 可成酯
二、鉴别试验 （一）与强酸的呈色反应
（母核）
甾体激素 H2SO4 H3PO4 类药物 HClO4 HCl
呈色
与硫酸显色反应
第十五章
甾体激素类药物 的分析
一、基本结构及分类
C21
11 19 1
18 12
C20
17
C 13D 16
2
A
10
9
B
14 8
15
3 45 6 7
基本结构：环戊烷并多氢菲
分类：
肾上腺皮质激素
甾体激素
雄性激素及蛋 白同化激素
性激素 孕激素
雌激素
二、结构与性质
1. 肾上腺皮质激素
主要活性基团 △4 – 3 – 酮
主要用于甾体激素类 药物制剂的鉴别（如：醋酸曲 安奈德软膏、醋酸氟轻松软膏）
三、 杂质检查 （一）有关物质检查
1.定义 与标示药物结构不
同的甾体化合物都称为“有关 物质”
（1）TLC法（高低浓度对比法）
判定方法： ❖ 规定杂质斑点数目 ❖ 规定杂质斑点颜色
SUCCESS
THANK YOU
可编辑
△４-3-酮 240nm（±）
肾上腺皮质激素 雄性激素和蛋白同化激素 孕激素
苯环
280nm（±）
雌激素
（三）比色法
弱、非分 光光度活
化学反应
强分光 光度活
性药物
性药物
四氮唑比色法
1. 原理 肾上腺皮质激素类
C17 -α－醇酮基 强还原性
四氮唑盐 C 醇酮基 有色甲瓒
OH - [还原]
2、方法：以醋酸地塞米松为例
2020/12/14
23
（2）HPLC法（高低浓度对比法）
判定方法： ❖ 规定杂质峰数目 ❖ 规定杂质峰面积
（二）游离磷酸的检查 对照品法
地塞米松磷酸钠 氢化可的松磷酸钠 倍他米松磷酸钠 氢化泼尼松磷酸钠
（三）有机溶剂残留量的检查 甲醇和丙酮
GC法
甲醇 ≤0.3% 丙酮 ≤0.5%
四、含量测定
无水甲醇 无水乙醇
Kober反应比色法 雌激素 原理
雌激素 H2S O4 乙醇 桃红
λmax=515
第十章 复习内容
1、熟悉本类药物的分类，掌握其结构 特征与分析方法的关系
2、熟悉某些官能团的呈色反应，了解 其他鉴别方法
3、掌握本类药物中其他甾体的检查方 法，了解其他特殊杂质的检查
4、掌握四氮唑比色法、异烟肼比色法 的原理、方法及测定条件。了
RP－HPLC（大多内标法）
（甾体激素类药物常含有结构相似的其他甾体 杂质，对利用结构特征设计的比色法有干扰）
特点 用样量少，灵敏度高，分离效 果好，测定速度快
例：黄体酮的含量测定：ODS柱； 甲醇-水（65：35）；254nm 内标：己烯雌酚
（二）UV法
解 UV法、Kober反应比色法及HPLC
法在其含量测定中的应用
• .Kober反应是指雌激素类药物与_______共热呈色。(
)
•
A.硫酸－甲醇 B.硫酸－乙醇
•
C.硫酸－甲醛 D.硫酸－醋酐
素类
用四氮唑比色法测定皮质激
药物，是利用C17 –α醇酮基的何种 性
质
A．氧化性
B．还原性
C．可加成性
异烟肼比色法
C3－酮基 1. 原理
肾上腺皮质激素、 雄性激素和蛋白同 化激素、孕激素
C3
酮基 异烟肼 异烟腙（黄）
HCl
（缩合）
2.测定方法
3.讨论 （1）反应速度
C3= O ＞ C17= O 、 C20= O C11= O 不反应
反应专属性 C3－酮基
（2）溶剂的选择 异烟肼盐酸盐→甲醇、乙醇
D．酸性
学习总结
经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量 Study Constantly, And You Will Know Everything. The More
You Know, The More Powerful You Will Be
氨制硝酸银
Ag↓黑色
碱性 酒石酸铜
Cu2O↓橙红色
2. C3–酮基和C20–酮基
甾体类激 羰基试剂 素药物
黄色的腙
＃常用的羰基试剂：
2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯 肼
3. 甲酮基呈色反应
黄体酮 其他甾体
亚硝基铁 氰化纳
蓝紫色 淡橙色
不显色
4. 酚羟基
雌激素 重氮苯磺酸 红色偶
类药物
氮染料
5. 乙炔基
含炔基 的甾体 激素
硝酸银
白色银盐沉淀
A gN O 3
↓
6. 有机卤素 蓝色配合物
有机氟 有机氯
茜素氟蓝 硝酸亚
铈 有机破坏
Fˉ
Clˉ
硝酸—硝酸银
AgCl↓
（三） UV法
CCCO
△４-3பைடு நூலகம்酮
240nm
CCCCCC
苯环
280nm
（四） IR法
（五） TLC法
主要用于甾体激素类 药物制剂的鉴别
（六） HPLC法
醋酸可的松
炔雌醇 炔雌醚 泼尼松 泼尼松龙
显 色 荧光 加水稀
黄或微 带橙
褪色并澄 清
橙红
橙红 橙
黄绿 黄绿
絮状↓玫红
↓红色 黄→蓝绿
深红
絮状↓灰
(二) 官能团的反应
1 C17 – α – 醇 还原性 酮基
A. 呈色反应
肾上腺 皮质激 素药物
四氮唑盐 费林试液 多伦试液
OHˉ
呈色
B. 沉淀反应
肾上 腺皮 质激 素药 物
— 无水乙醇
醛 → A↑ — 无醛无水乙醇
（3） O2与光线的影响
反应过程 反应产物
怕光
O2影响 颜色强 度和稳 定性
→避光、快速
→隔绝空气、 快速、充N
（4）碱的种类及加入顺序 反应应在强碱性（pH13.75） 条件下进行 以氢氧化四甲基铵的结果最佳
加入顺序：
皮质激素溶液 四氮唑盐 碱试液
（5） 温度与时间 t℃↑→ν↑→甲瓒分解↑ ChP 25℃ 40～45′
性质
UV、与羰基试 剂反应
C17 – α – 醇酮基
还原 性
2. 雄性激素及蛋白同化激素
主要活性基团 △4 – 3 – 酮 C17 – β – 羟基
性质
UV、与羰基 试剂反应
可成酯
3. 孕激素
主要活性基团
性质
△4 – 3 – 酮
C17 –甲酮基 C17 –乙酰氧基
C17 –乙炔基
UV、与羰基试 剂反应
制备对照液 加入四氮唑盐 制备供试液
484nm 有色产物
AX AR
标示量（%）=
AX× CX AR ×V×标示量
×100%
3. 讨论 （1） 基团对反应速度的影响
C11= O＞ C11－OH C21－OH＞ C21-酯
（2） 溶剂、水分的影响
含水量＞5%→ν↓ 含水10%→A↓10% 含水30%→几无反应
与亚硝基铁氰 化纳反应
水解鉴定乙酸
与硝酸银沉淀
4. 雌激素
主要活性基团
性质
A环为3–OH 苯环
UV、与重氮苯 磺酸盐反应
C17 –乙炔基 C17 –羟基
与AgNO3反应 可成酯
二、鉴别试验 （一）与强酸的呈色反应
（母核）
甾体激素 H2SO4 H3PO4 类药物 HClO4 HCl
呈色
与硫酸显色反应
第十五章
甾体激素类药物 的分析
一、基本结构及分类
C21
11 19 1
18 12
C20
17
C 13D 16
2
A
10
9
B
14 8
15
3 45 6 7
基本结构：环戊烷并多氢菲
分类：
肾上腺皮质激素
甾体激素
雄性激素及蛋 白同化激素
性激素 孕激素
雌激素
二、结构与性质
1. 肾上腺皮质激素
主要活性基团 △4 – 3 – 酮
主要用于甾体激素类 药物制剂的鉴别（如：醋酸曲 安奈德软膏、醋酸氟轻松软膏）
三、 杂质检查 （一）有关物质检查
1.定义 与标示药物结构不
同的甾体化合物都称为“有关 物质”
（1）TLC法（高低浓度对比法）
判定方法： ❖ 规定杂质斑点数目 ❖ 规定杂质斑点颜色
SUCCESS
THANK YOU
可编辑
△４-3-酮 240nm（±）
肾上腺皮质激素 雄性激素和蛋白同化激素 孕激素
苯环
280nm（±）
雌激素
（三）比色法
弱、非分 光光度活
化学反应
强分光 光度活
性药物
性药物
四氮唑比色法
1. 原理 肾上腺皮质激素类
C17 -α－醇酮基 强还原性
四氮唑盐 C 醇酮基 有色甲瓒
OH - [还原]
2、方法：以醋酸地塞米松为例
2020/12/14
23
（2）HPLC法（高低浓度对比法）
判定方法： ❖ 规定杂质峰数目 ❖ 规定杂质峰面积
（二）游离磷酸的检查 对照品法
地塞米松磷酸钠 氢化可的松磷酸钠 倍他米松磷酸钠 氢化泼尼松磷酸钠
（三）有机溶剂残留量的检查 甲醇和丙酮
GC法
甲醇 ≤0.3% 丙酮 ≤0.5%
四、含量测定
无水甲醇 无水乙醇
Kober反应比色法 雌激素 原理
雌激素 H2S O4 乙醇 桃红
λmax=515
第十章 复习内容
1、熟悉本类药物的分类，掌握其结构 特征与分析方法的关系
2、熟悉某些官能团的呈色反应，了解 其他鉴别方法
3、掌握本类药物中其他甾体的检查方 法，了解其他特殊杂质的检查
4、掌握四氮唑比色法、异烟肼比色法 的原理、方法及测定条件。了