实验室常用灭菌法ppt课件
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《灭菌与除菌》课件
3 对灭菌与除菌的正确
选择
根据不同的环境和需求， 选择合适的灭菌或除菌方 法。
结论
灭菌与除菌的重要性
保持清洁和杀灭细菌是预防感染 和疾病传播的关键。
适用于不同环境的灭菌与 除菌方法的比较
根据环境的特点和需求，选择合 适的灭菌和除菌方法。
对后续操作的影响
正确的灭菌和除菌可以确保后续 操作的安全和有效性。
灭菌
1
物理灭菌
使用物理性能杀灭细菌的方法，包括蒸
化学灭菌
2
汽灭菌、热空气灭菌、紫外线灭菌和红 外线灭菌。
使用化学物质杀灭细菌的方法，包括氧
化剂灭菌、氨基酸灭菌和乙醛灭菌。
3
生物学灭菌
使用生物学方法杀灭细菌，包括使用菌 株灭菌、免疫灭菌和抗生素灭菌。
除菌
物理除菌
使用物理力量除去微生物，包 括过滤除菌和热力除菌。
化学除菌
使用化学物质除去微生物，包 括消毒剂除菌、洗涤剂除菌和 有机物除菌。灭菌代替除菌和活菌制剂 的除菌效果。
注意事项
1 灭菌与除菌的区别
灭菌是完全杀死或去除所 有微生物，除菌是减少或 去除微生物的数量。
2 灭菌与除菌的应用场
合
灭菌常用于需要高度清洁 的环境，除菌主要用于日 常生活和公共场所。
《灭菌与除菌》PPT课件
这是《灭菌与除菌》的PPT课件，通过本课件，我们将带你了解灭菌与除菌的 概念、应用领域以及各种方法和注意事项。
什么是灭菌与除菌？
灭菌是完全杀死或去除所有的微生物，包括细菌、病毒和真菌。除菌是减少或去除微生物的数量，以减少感染 的风险。 它们的应用领域非常广泛，包括医疗保健、食品加工和生产、实验室和日常生活。
实验室消毒灭菌ppt课件
7
（二）湿热灭菌 原理：使微生物的蛋白质及核酸变形导致其死亡。
高压蒸汽灭菌器
脉动真空灭菌器
实验室消毒灭菌
卡式灭菌器
8
•（二）湿热灭菌
仪器设备
灭菌过程
应用
不适用灭菌物品
高压蒸汽 灭菌器
准备-加压升温—灭 菌—排气—干燥—
结束
适用于普通培养基、生理盐水、手术器械、 玻璃容器及注射器、敷料等耐高温、高压及 不怕潮湿的物品。是目前应用最广泛、灭菌
最佳杀菌波长在265-266nm。用于空气消毒与物品表面的消毒。微生物实验室、无菌 室（紫外线灯），手术室、产房、婴儿室、早产儿室、供应室无菌区、烧伤病房、
重症监护病房、一般病房等（空气消毒机）。
红外线灭菌 红外线灭菌器
应用于接种环、接种针等小型物品的高温灭菌消毒。
微波灭菌
微波杀菌机
常用于食物及餐具的消毒、医疗药品及耐热的非金属材料器械的消毒灭菌。
物品的灭菌。
灭菌。
卡式灭菌 器
置换—预热—升 温—灭菌—排汽-干
燥—结束
牙科器械（手机、镊子、牙科钻头等）、眼 科器械、妇科器械（腹腔镜、宫腔镜）、口
腔科等手术医疗器械的灭菌
不适用于纺织品、液体或 生物医疗废弃物的灭菌。
实验室消毒灭菌
9
辐射灭菌法
相关设备
应用
紫外线灭菌
紫外线灯，循环风 紫外线空气消毒机
机
液室、生化室、实验室等，以及生物制药、食品生产、公共场所，会议室等。
过氧化氢等离子体 灭菌器
主要应用于临床的医疗材质和几何形状都符合要求的器材。
实验室消毒灭菌
10
空气消毒机
红
外
线
灭
菌
（二）湿热灭菌 原理：使微生物的蛋白质及核酸变形导致其死亡。
高压蒸汽灭菌器
脉动真空灭菌器
实验室消毒灭菌
卡式灭菌器
8
•（二）湿热灭菌
仪器设备
灭菌过程
应用
不适用灭菌物品
高压蒸汽 灭菌器
准备-加压升温—灭 菌—排气—干燥—
结束
适用于普通培养基、生理盐水、手术器械、 玻璃容器及注射器、敷料等耐高温、高压及 不怕潮湿的物品。是目前应用最广泛、灭菌
最佳杀菌波长在265-266nm。用于空气消毒与物品表面的消毒。微生物实验室、无菌 室（紫外线灯），手术室、产房、婴儿室、早产儿室、供应室无菌区、烧伤病房、
重症监护病房、一般病房等（空气消毒机）。
红外线灭菌 红外线灭菌器
应用于接种环、接种针等小型物品的高温灭菌消毒。
微波灭菌
微波杀菌机
常用于食物及餐具的消毒、医疗药品及耐热的非金属材料器械的消毒灭菌。
物品的灭菌。
灭菌。
卡式灭菌 器
置换—预热—升 温—灭菌—排汽-干
燥—结束
牙科器械（手机、镊子、牙科钻头等）、眼 科器械、妇科器械（腹腔镜、宫腔镜）、口
腔科等手术医疗器械的灭菌
不适用于纺织品、液体或 生物医疗废弃物的灭菌。
实验室消毒灭菌
9
辐射灭菌法
相关设备
应用
紫外线灭菌
紫外线灯，循环风 紫外线空气消毒机
机
液室、生化室、实验室等，以及生物制药、食品生产、公共场所，会议室等。
过氧化氢等离子体 灭菌器
主要应用于临床的医疗材质和几何形状都符合要求的器材。
实验室消毒灭菌
10
空气消毒机
红
外
线
灭
菌
消毒与灭菌(共75张PPT)
• 噬菌体的增殖分4个阶段
吸附—侵入—生物合成—成熟和释放
吸附
侵入
生物合成〔复制和成熟〕
释放
噬菌体生长迹象的观察：
噬菌体可使混浊的细菌液体培养物变清朗，在 固体培养基上可形成噬菌斑。
一个噬菌斑由一个噬菌体繁殖而成，不同噬菌 体产生的噬菌斑大小、形态、边缘和透明度 均不同，所以，噬菌斑可用于噬菌体的鉴定、 纯种别离和计数。
② 高温瞬时法
71～72℃保持15s
③ 超高温法
132℃保持1～2s
巴氏消毒装置
二、辐射灭菌法
〔一〕非电离辐射
包括： 紫外线
日光
可见光
红外线
微波
1、紫外线
波长200～300nm的紫外线具有杀菌作用， 其中253～265nm段杀菌力最强。
杀菌机理：
主要破坏菌体细胞DNA的构型，使DNA分子 中间形成胸腺嘧啶二聚体，干扰DNA的复
温和噬菌体的增殖
噬菌体的应用
• 由于噬菌体感染具有菌种或菌型的特异性， 故可用噬菌体进行细菌的鉴定和分型、检 测未知细菌、进行流行病学调查。
• 此外，噬菌体也是分子生物学及基因工程 研究的工具。
第四节 微生物实验室的生物平安
一、生物平安的概念和一般要求
〔一〕生物平安
是指与生物有关的各种因素对社会、经济、 人类健康可能产生的潜在的有害影响。而 兽医微生物实验室的生物平安是指在转移、 检查和处理病料、污染材料等过程中，防 止污染环境及对人员造成危害。
〔二〕细菌素〔bacteriocin〕
是某些细菌产生的一类具有杀菌作用的蛋 白质，只能作用于同种细菌不同的菌株 或与它有亲缘关系的其他细菌。
例如：
大肠菌素 作用大肠杆菌其他菌株和与它有亲 缘关系的志贺氏菌、沙门氏菌、克雷伯氏菌 等。
吸附—侵入—生物合成—成熟和释放
吸附
侵入
生物合成〔复制和成熟〕
释放
噬菌体生长迹象的观察：
噬菌体可使混浊的细菌液体培养物变清朗，在 固体培养基上可形成噬菌斑。
一个噬菌斑由一个噬菌体繁殖而成，不同噬菌 体产生的噬菌斑大小、形态、边缘和透明度 均不同，所以，噬菌斑可用于噬菌体的鉴定、 纯种别离和计数。
② 高温瞬时法
71～72℃保持15s
③ 超高温法
132℃保持1～2s
巴氏消毒装置
二、辐射灭菌法
〔一〕非电离辐射
包括： 紫外线
日光
可见光
红外线
微波
1、紫外线
波长200～300nm的紫外线具有杀菌作用， 其中253～265nm段杀菌力最强。
杀菌机理：
主要破坏菌体细胞DNA的构型，使DNA分子 中间形成胸腺嘧啶二聚体，干扰DNA的复
温和噬菌体的增殖
噬菌体的应用
• 由于噬菌体感染具有菌种或菌型的特异性， 故可用噬菌体进行细菌的鉴定和分型、检 测未知细菌、进行流行病学调查。
• 此外，噬菌体也是分子生物学及基因工程 研究的工具。
第四节 微生物实验室的生物平安
一、生物平安的概念和一般要求
〔一〕生物平安
是指与生物有关的各种因素对社会、经济、 人类健康可能产生的潜在的有害影响。而 兽医微生物实验室的生物平安是指在转移、 检查和处理病料、污染材料等过程中，防 止污染环境及对人员造成危害。
〔二〕细菌素〔bacteriocin〕
是某些细菌产生的一类具有杀菌作用的蛋 白质，只能作用于同种细菌不同的菌株 或与它有亲缘关系的其他细菌。
例如：
大肠菌素 作用大肠杆菌其他菌株和与它有亲 缘关系的志贺氏菌、沙门氏菌、克雷伯氏菌 等。
实验室常用灭菌法详细版.ppt
效均一
最新.
10
灭菌容器操作注意
• 使用前认真检查设备的完好性
• 灭菌时须先将灭菌器中冷空气排出，以保
证最佳灭菌效果
• 灭菌时间应从待灭菌物品到达预定温度时
算起
• 灭菌完毕后停止加热，待压力表降至0，放
汽、开启灭菌器，物品温度降至80℃ 以下 时才能将灭菌器门全部开启
最新.
11
影响湿热灭菌的因素
• 辐射灭菌：短小芽孢杆菌孢子（ATCC27142等，活孢子数为5×107～
5×108个/片 )
• 气体灭菌：
环氧乙烷灭菌：枯草芽孢杆菌孢子（ATCC9372等，活孢子数为 5×105～5×106菌孢子（ATCC7953等，活孢子 数为1×106～5×106个/片 )
不挥发，不易燃
无色醚样臭味气体，沸点 10.8 扩散穿透能力强，属广谱杀菌
环氧乙烷
℃，沸点以下为无色透明液 剂；用于对热敏感的药物等的
体，比重 0.882，溶于水。 灭菌；时间长，费用贵。
苯酚（石炭酸）
3～5%
地面、墙壁喷撒
甲酚皂溶液（来苏尔）
5～100%
• 效果可靠、操作简便 • 应用广泛：容器、培养基、无菌衣、胶塞等 • 包括
– 热压灭菌 – 流通蒸汽灭菌 – 煮沸灭菌 – 低温间歇灭菌
最新.
9
湿热灭菌条件
• 121℃× 15min、 121℃× 30min 、116 ×
40min 或其他可以保证灭菌效果的程序条 件。
×
• 过度杀灭法 • 灭菌过程有适当的装载方式，保证灭菌有
• 微生物种类和数量
• 灭菌物品特性
• 蒸汽的性质
饱和蒸汽 热含量高 潜热大 穿透力强
湿饱和蒸汽
最新.
10
灭菌容器操作注意
• 使用前认真检查设备的完好性
• 灭菌时须先将灭菌器中冷空气排出，以保
证最佳灭菌效果
• 灭菌时间应从待灭菌物品到达预定温度时
算起
• 灭菌完毕后停止加热，待压力表降至0，放
汽、开启灭菌器，物品温度降至80℃ 以下 时才能将灭菌器门全部开启
最新.
11
影响湿热灭菌的因素
• 辐射灭菌：短小芽孢杆菌孢子（ATCC27142等，活孢子数为5×107～
5×108个/片 )
• 气体灭菌：
环氧乙烷灭菌：枯草芽孢杆菌孢子（ATCC9372等，活孢子数为 5×105～5×106菌孢子（ATCC7953等，活孢子 数为1×106～5×106个/片 )
不挥发，不易燃
无色醚样臭味气体，沸点 10.8 扩散穿透能力强，属广谱杀菌
环氧乙烷
℃，沸点以下为无色透明液 剂；用于对热敏感的药物等的
体，比重 0.882，溶于水。 灭菌；时间长，费用贵。
苯酚（石炭酸）
3～5%
地面、墙壁喷撒
甲酚皂溶液（来苏尔）
5～100%
• 效果可靠、操作简便 • 应用广泛：容器、培养基、无菌衣、胶塞等 • 包括
– 热压灭菌 – 流通蒸汽灭菌 – 煮沸灭菌 – 低温间歇灭菌
最新.
9
湿热灭菌条件
• 121℃× 15min、 121℃× 30min 、116 ×
40min 或其他可以保证灭菌效果的程序条 件。
×
• 过度杀灭法 • 灭菌过程有适当的装载方式，保证灭菌有
• 微生物种类和数量
• 灭菌物品特性
• 蒸汽的性质
饱和蒸汽 热含量高 潜热大 穿透力强
湿饱和蒸汽
常见的消毒和灭菌方法ppt课件
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种类主要方法区别联系灼烧灭菌法干热灭菌法高压蒸汽灭菌法巴氏消毒法煮沸消毒法紫外线消毒法化学药物消毒法酒精灯火焰灼烧干热灭菌160170加热12h121维持1530min7080处理1530min100沸水浴56min30w紫外灯照射30min用体积分数为7075的乙醇碘酒涂抹来苏水喷洒等微生物接种工具如接种环接种针或其他金属用具等接种过程中试管口或三角瓶口等玻璃器皿如滴管培养皿等金属用具等凡不适合用其他方法灭菌而又能耐高温的物品培养基及多种器材物品牛奶啤酒果酒和酱油等不宜进行高温灭菌的液体日常食品罐装食品接种室空气用于皮肤伤口动植物组织表面消毒空气手术器械塑料或玻璃器皿等强烈的理化因素杀死生物体内外包括芽孢在内的所有微生物温和的物理化学方法杀死表面微生物营养体或抑制营养体繁都借助理化性质营造微生物难以生存的不良环境其作用实质都是通过使蛋白质变性来抑制微生物生命活动或杀死微生物此课件下载可自行编辑修改供参考
常见的消毒和灭菌方法
内 容
种类
主要方法
区别
灼烧灭菌法
灭 菌 干热灭菌法
酒精灯火焰 灼烧
干热灭菌 160～170℃加
热1～2h
微生物接种工具如接种环、接种 针或其他金属用具等，接种过程 中试管口或三角瓶口等
强烈的理化 因素，杀死
玻璃器皿（如滴管、培养皿等）、 生物体内外 金属用具等凡不适合用其他方法 包括芽孢在
灭菌而又能耐高温的物品
内的所有微
高压蒸汽灭菌法
121℃维持 15～30min
培养基及多种器材、物品
生物
巴氏消毒法 煮沸消毒法
70～80℃处理 15～30min
100℃沸水浴 5～6min
消毒与灭菌技术PPT课件
煮沸消毒法（boiling sterilization）
要求 适用 方法 注意
❖殖❖配可强防❖物❖橡▪▪▪▪经应 有 空 物煮将 的体成提杀锈取 将适如❖浸沸❖❖第品胶轴将腔品消间从间后轴碗应 置5前将消如出，1高菌。▪， ， 当碳用金没二根玻橡～节物导不类及冷为放节、毒用 于%物毒中海 水 延水据璃胶达沸作酸的管品宜于属在次消水入1或盆1时等无 无～0器制物拔 长0器须刷放的品时途毒或，盖不到点用氢～的耐、水水间菌 菌分2皿品品械洗先置高时温时沸打能1刷间加沸消达，钠煮%湿搪；中沸器 容5应用性钟或在干过间水间开重的点m点洗从入毒还1海加时的用纱质、瓷械 器，后带腔净多中为叠再i可地n受0也纱布决干水物拔内盖，将 内效可入浓放5，放耐 、5然重区杀气～低布 包定℃灌的大每入要入物净沸品果去水度高玻后新气1压灭包 好放水容小，，保水，增0品，后，。污中时温璃m压加计裹 ，入影煮器相繁需消证中高增及i全计则n好 待水、低，，应同响的和热时毒物后适时后 水的部算在时煮， 沸时
特点：紫外线穿透力较弱
紫外线可杀灭多种微生物，包括杆菌、 病毒、真菌、细菌繁殖体等。杀灭繁殖 体需3~5s；杀灭芽孢需10min以上。
杀菌机制
使菌体DNA失去转换能力而死亡； 破坏菌体蛋白质中的氨基酸，使菌体蛋白光解 变性； 降低菌体内氧化酶的活性，使氧化能力丧失； 使空气中的氧电离产生具有极强杀菌作用的臭 氧。
第三章 清洁、消毒与灭菌技术
一、基本概念 二、物品清洁法 三、物理方法 四、化学方法
一 基本概念
洁清消 毒灭菌防 腐
是切清 上清上污抑 与清除 的除的迹制 繁除或 一脂物病,微 殖如或杀 切品等原生尘杀灭 微上微物埃灭物生的生的,物品物油一物生品, 长 以杀灭芽孢为准
常见消毒灭菌的基本方法ppt课件
常见的化学消毒剂
（2）、使用方法为浸泡与擦拭法，
容器要加盖。一般污染物品的消毒 用0.05（500mg/L）过氧乙酸浸泡 对细菌、芽孢污染物品的消毒用 1%（1000mg/L）过氧乙酸浸泡5 分钟。灭菌时浸泡30分钟。浸泡后 用无菌蒸馏水冲洗干净应存储于通 风阴凉处，用前应测定有效含量， 原液浓度低于12%时禁止使用 。
常见的物理消毒
3、监测方法：开启紫外线灯5分钟后，将 紫外线强度监测指示卡放置在距紫外线灯 管1米处测定。有图案一面朝上照射1分钟， 并按指示卡的颜色判断照射强度。新管在 安装后立即监测，合格后才能使用，使用 中的灯管1000小时后每月监测一次，监测 结果判定：新灯管不低于90vw /c㎡ 为合格， 使用中的灯管不低于70vw/ c㎡为合格。
医院常用物品的消毒方法
2、听诊器、血压计、袖带，若被
血液、体液污染应在清洁的基础上 使用含有效氯250-----500 mg/L 的 消毒液浸泡30分钟后再清洗备用。 听诊器可在清洁的基2础上用75% 乙醇溶液擦拭消毒。
医院常用物品的消毒方法
3、容器：首先应密闭保存每周更
换2次，容器每周高压蒸汽灭菌2次。 无菌敷料罐应每天更换并灭菌，无 菌储槽中的无菌用品（棉球、纱布） 一经打开使用时间不得超过24小时。
常见的物理消毒
4、注意事项： （1
）在使用过程中应保持紫外线 灯表面的清洁，一般每周用95%酒 精棉球擦拭一次，发现灯管表面有 灰尘、油污时，应随时擦拭。
常见的物理消毒
（2）用紫外线灯消毒时空气时，
房间内应保持清洁干燥，减少尘埃 和水雾。温度低于20℃ 或高于 40℃，相对湿度大于60%时应适 当 延长照射时间。
灭菌技术入门知识PPT课件
适于消毒及不耐高热的物பைடு நூலகம்的灭 菌，但不能保证杀灭芽孢
用于注射器等的灭菌，必要 时加入抑菌剂
低温间歇灭菌法
适于不耐热、热敏 物料的灭菌
3
干热灭菌法
❖ 干热灭菌法:是指在干燥环境（如火焰或干热空气）进行灭菌 的技术。一般有火焰灭菌法和干热空气灭菌法。 —原理：高热使蛋白质凝固变性；水分缺失使微生物原浆电解 质浓缩死亡。 —火焰灭菌法是指用火焰直接烧灼的灭菌方法。该方法灭菌迅 速、可靠、简便，适合于耐火焰材料（如金属、玻璃及瓷器等） 物品与用具的灭菌 —干热空气灭菌法是指用高温干热空气灭菌的方法。该法适用 于耐高温的玻璃和金属制品的灭菌，不适合橡胶、塑料及的灭 菌。 —在干热状态下，由于热穿透力较差，微生物的耐热性较强， 必须长时间受高温的作用才能达到灭菌的目的。因此。干热空 气灭菌法采用的温度一般比湿热灭菌法高。为了保证灭菌效果， 一般规定：135-140℃灭菌3-5h；160-170 ℃灭菌2-4h；180200 ℃灭菌0.5-1h。
—蒸气性质 —灭菌器物的性质和灭菌时间 —温度，压力
6
❖ 必须用饱和蒸气
保证灭菌效率 应注意的事项
❖ 必须排尽灭菌柜内的空气
❖ 全部器物的温度达到所要求的温度时开始计时
❖ 灭菌结束后必须先停止加热
7
煮沸灭菌法◆流动蒸汽灭菌法◆低温间歇灭菌法
❖ 煮沸灭菌法是指将待灭菌物置于沸水中灭菌的 方法。煮沸时间通常为30-60分钟。。
①对肥皂 碘 高锰酸钾等阴离子表面活性剂 有拮抗作用 ②有吸附作用，会降低药效， 所以溶液内不可投入纱布、棉花等物品。
③对铝制品有破坏作用，故不能用铝制品 盛装
17
小知识
❖ 最早使用的消毒药液—漂白粉（Ca(ClO)2 ） ❖ 芽孢—有些细菌（多为杆菌）在一定条件下，
消毒灭菌技术及效果监测(共26张PPT)
灭菌物品消毒效果监测本卷须知
1、无菌检验应在洁净度为100级单 向流空气区域内进行，最好把灭菌包带 回在百级实验室翻开。应严格遵守无菌 操作，防止微生物污染。
2、应采有效期内的样品〔高压灭菌： 一般是两周；还氧乙烷：两年〕
6、灭菌器灭菌效果监测
1、监测方法：
工艺监测
化学监测〔化学指示卡、指示胶带〕 生物监测 2、常用灭菌器种类 压力蒸汽灭菌器 环氧乙烷灭菌器 3、生物指示物
嗜热脂肪杆菌芽胞〔ATCC7953〕,压力蒸汽灭菌器
枯草杆菌黑色变种芽胞〔ATCC9372〕环氧乙烷灭菌器
7、压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测
检测方法
生物指示菌片布放方法〔?消毒技术标准? 〕
枯草杆菌黑色变种芽胞〔ATCC9372〕菌片事先放入一次性注射器中〔每个注射器中放1个菌片〕，然后封装在一剥离式包装袋内。
门把手等不规那么物体外表用棉拭子直接涂擦采样
物体外表消毒效果监测
3、检测方法：
〔1〕细菌总数检测：检测方法按?消毒技术标准?3.17.6. 3〔1〕执行。小型物体外表的结果计算，用cfu/件。
〔2〕致病菌检测：检测方法按?消毒技术标准原那么执行。 4、结果判定
Ⅰ、Ⅱ类区域：细菌总数≤5cfu/cm2，并未检出致病菌 为消毒合格。
4、消毒液细菌菌落总数标准值≤100cfu/ml，无菌器械保 存液细菌菌落总数标准值是不得检出。
5、致病菌检测包括金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、沙 门氏菌、溶血性链球菌。
5、灭菌物品消毒效果监测
1、采样时间：在灭菌处理后，存放有效 期内采样。
2、采样方法：按?消毒技术标准原那么 执行
3、结果判定：阳性对照在24小时内应有 菌生长，阴性对照在培养期间应无菌生长, 如需-厌氧菌及霉菌培养管内均为澄清或虽 显浑浊但经证明并非有菌生长，判为灭菌合 格；如需-厌氧菌及霉菌培养管中任何1管显 浑浊并证实有菌生长，应重新取样，分别同 法复试2次，除阳性对照外，其他各管均不
压力蒸汽灭菌ppt课件
清洁灭菌器
对灭菌器进行彻底清洗，以便下次使 用。
04
压力蒸汽灭菌效果检测
物理检测方法
温度检测
通过温度传感器记录灭菌过程中 各点的温度变化，确保灭菌温度
到达标准要求。
时间检测
记录灭菌过程所需时间，确保到达 规定的时间要求。
压力检测
监测灭菌过程中压力的变化，确保 压力到达标准要求。
化学检测方法
化学指导剂法
可靠性高
压力蒸汽灭菌具有可靠的灭菌 效果，能够保证医疗用品的安
全使用。
02
压力蒸汽灭菌设备
压力蒸汽灭菌设备的分类
01
02
03
按用途分类
医用压力蒸汽灭菌设备、 实验室压力蒸汽灭菌设备 、工业压力蒸汽灭菌设备 等。
按结构分类
立式压力蒸汽灭菌设备、 卧式压力蒸汽灭菌设备、 便携式压力蒸汽灭菌设备 等。
利用化学指导剂的颜色变化判断 是否到达灭菌条件，适用于批量 灭菌效果的检测。
溴甲烷气体检测法
通过检测溴甲烷气体浓度判断是 否到达灭菌条件，适用于密封包 装的物品灭菌效果检测。
生物检测方法
嗜热脂肪芽孢杆菌检测法
将嗜热脂肪芽孢杆菌置于灭菌物品中，灭菌后通过视察该细菌存活情况判断灭 菌效果。
枯草芽孢杆菌检测法
将枯草芽孢杆菌置于灭菌物品中，灭菌后通过视察该细菌存活情况判断灭菌效 果。
05
压力蒸汽灭菌注意事项
灭菌前的注意事项
灭菌前需确保待灭菌物品处于 清洁状态，去除表面的污垢和 尘埃，以免影响灭菌效果。
灭菌前应检查待灭菌物品是否 合适采用压力蒸汽灭菌，了解 其耐受温度和压力范围。
灭菌前需将待灭菌物品放置在 合适的容器或包装中，以避免 在灭菌过程中产生湿气凝结或 污染。
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40min 或其他可以保证灭菌效果的程序条 件。
×
• 过度杀灭法 • 灭菌过程有适当的装载方式，保证灭菌有
效均一
精选ppt
10
灭菌容器操作注意
• 使用前认真检查设备的完好性 • 灭菌时须先将灭菌器中冷空气排出，以保
证最佳灭菌效果
• 灭菌时间应从待灭菌物品到达预定温度时
算起
• 灭菌完毕后停止加热，待压力表降至0，放
• 撰写验证方案及制定评估标准。 • 确认灭菌设备技术资料齐全、安装正确，
并能处于正常运行。
• 确认关键设备控制仪表在规定的参数范围
内能正常运行。
• 采用被灭菌物品或模拟物品进行重复实验
确认灭菌效果符合规定。
• 完善文件记录，撰写验证报告。
精选ppt
3
灭菌程序运行监控
• 关键参数应在验证确定的范围内：温度、
汽、开启灭菌器，物品温度降至80℃ 以下 时才能将灭菌器门全部开启
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11
影响湿热灭菌的因素
• 微生物种类和数量
• 灭菌物品特性
• 蒸汽的性质
饱和蒸汽 热含量高 潜热大 穿透力强
湿饱和蒸汽
低
过热蒸汽
穿透力差
• 灭菌时间等
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12
干热灭菌法
• 利用干热空气达到杀灭微生物或消除热原
的方法。
• 适用范围：耐高温但不宜使热灭菌法灭菌
的物品，如玻璃物品、金属物品、纤维制 品、固体试药、液体石蜡等。
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13
干热灭菌条件和效果
• 160～170℃× 120min、 170～180℃×
60min、250 ℃× 45min以上
• 灭菌过程有适当的装载方式，保证灭菌有
效均一
• 效果：
繁殖型细菌100℃ /1h可杀灭
繁殖型微生物1um，芽孢约0.5um或以下
0.45um可滤去大多数细菌，0.15um可滤 去热原
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19
物理灭菌法
方法
主要技术参数
应用特点
干热灭菌
药典规定 180℃，1h 或 160-170℃， 穿透力弱，温度不易均匀，温度高，不
2-4h
适于大部分药品
湿热 灭菌
热压 灭菌 流通 蒸汽
98kPa(1kg/cm2),15-20min 100℃，30-60min
耐热细菌: 120℃ 长时间不死亡,140 ℃ 杀菌率剧增
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14
火焰灭菌
置于火焰上直接灼烧 简便、可靠
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15
辐射灭菌法
• 将灭菌物品置于适宜放射源辐射的射线或
适意的电子加速其发生的电子束中进行电 离辐射而达到杀灭微生物的方法。
• 常用60Co-γ射线 • 用于医疗器械、容器、生产辅助用品、不
压力、时间、湿度、灭菌气体浓度、辐照 剂量等
• 灭菌程序定期验证，时效不超过半年。 • 灭菌设备或程序发生变更重新进行验证。
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4
灭菌保证
• 灭菌效果与灭菌前产品污染程度及污染菌
特性有关，把握微生物污染水平及污染菌 耐受性，注意各个环节降低污染程度。
• 灭菌冷却阶段防止已灭菌物品再次污染。
• 适用生物指示剂、化学指示剂等监控灭菌
法，常用环氧乙烷、气态过氧化氢、甲醛、 臭氧等。
• 适用于医疗器械、塑料制品等，能吸附环
氧乙烷的物品不宜采用。
• 控制参数：温度、相对湿度、灭菌压力、
灭菌时间等
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18
过滤除菌法
• 利用细菌不能通过致密具孔滤材的原理除
去气体或液体中的微生物。
• 用于热不稳定的药品或原料除菌
• 滤膜材料确定
• 滤膜孔径要求
受辐射破坏的原料药及成品等。
• 参数：辐射剂量
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16
辐射灭菌特点
• γ射线
60Co
穿透力强
• β射线
由电子加速器产生
穿透力弱，灭菌效果差
• 不升高温度
• 设备费用高
• 辐射能引起一些药物pH值、含量、活性等改变，
某些制品不宜选用
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17
气体灭菌法
• 用化学消毒剂形成的气体杀灭微生物的方
• 干热灭菌：枯草芽孢杆菌孢子（ATCC9372等，活孢子数为5×105～
5×106个/片 )
• 辐射灭菌：短小芽孢杆菌孢子（ATCC27142等，活孢子数为5×107～
5×108个/片 )
• 气体灭菌：
环氧乙烷灭菌：枯草芽孢杆菌孢子（ATCC9372等，活孢子数为 5×105～5×106个/片 )
结果
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5
生物指示剂
• 基本要求：
菌种的耐受性应大于需灭菌产品中所有 可能污染菌的耐受性。
菌种应无致病性。 菌株应稳定，存活期长，易于保存。
易于培养。若使用休眠孢子，孢子含量 在90%以上。
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6
常用生物指示剂
• 湿热灭菌：嗜热脂肪芽孢杆菌孢子（ATCC7953等，活孢子数为
5×105～5×106个/片 )
无毒
丙二醇
1ml/m3 加热蒸发
不挥发，不易燃
无色醚样臭味气体，沸点 10.8 扩散穿透能力强，属广谱杀菌
环氧乙烷
℃，沸点以下为无色透明液 剂；用于对热敏感的药物等的
体，比重 0.882，溶于水。 灭菌；时间长，费用贵。
气态过氧化氢灭菌：嗜热脂肪芽孢杆菌孢子（ATCC7953等，活孢子 数为1×106～5×106个/片 )
过滤除菌法：缺陷假单胞菌（ ATCC19146等）
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7
灭菌方法
• 方法：湿热灭菌法、干热灭菌法、辐射灭
菌法、气体灭菌法、过滤除菌法。
• 根据灭菌物品特性选择一种或几种方法组
合灭菌。只要产品允许，尽可能选用最终 灭菌法。
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8湿热灭菌法• 在高源自高压条件下利用沸水、蒸气变性微生物菌
体中的蛋白质、核酸而达到灭菌效果的方法。
• 效果可靠、操作简便 • 应用广泛：容器、培养基、无菌衣、胶塞等 • 包括
– 热压灭菌 – 流通蒸汽灭菌 – 煮沸灭菌 – 低温间歇灭菌
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9
湿热灭菌条件
• 121℃× 15min、 121℃× 30min 、116 ×
穿透力强，效果可靠，适用广 不能杀灭细菌芽胞
低温 60-80℃，1h + 室温 24h，重复操作 适于必须加热灭菌而又不耐高温者；时
间歇
3 次以上
间长，效果不理想；须加抑菌剂
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20
化学灭菌法
40%甲醛溶液（福尔马林） 20ml/m3 加热蒸发,6～12h
粘膜强烈刺激
乳酸
1ml/m3 加热蒸发 0.5～1h
灭菌法
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1
灭菌法定义
• 用适当的物理或化学手段将物品中活的微
生物杀灭或除去的方法。适用于制剂、原 料、辅料、医疗器械等的灭菌。
• 灭菌是指将物品中污染的微生物残存概率
下降至一定水平，以无菌保证水平 SAL(Sterility Assurance Level)表示。
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2
灭菌程序验证内容
×
• 过度杀灭法 • 灭菌过程有适当的装载方式，保证灭菌有
效均一
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10
灭菌容器操作注意
• 使用前认真检查设备的完好性 • 灭菌时须先将灭菌器中冷空气排出，以保
证最佳灭菌效果
• 灭菌时间应从待灭菌物品到达预定温度时
算起
• 灭菌完毕后停止加热，待压力表降至0，放
• 撰写验证方案及制定评估标准。 • 确认灭菌设备技术资料齐全、安装正确，
并能处于正常运行。
• 确认关键设备控制仪表在规定的参数范围
内能正常运行。
• 采用被灭菌物品或模拟物品进行重复实验
确认灭菌效果符合规定。
• 完善文件记录，撰写验证报告。
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3
灭菌程序运行监控
• 关键参数应在验证确定的范围内：温度、
汽、开启灭菌器，物品温度降至80℃ 以下 时才能将灭菌器门全部开启
精选ppt
11
影响湿热灭菌的因素
• 微生物种类和数量
• 灭菌物品特性
• 蒸汽的性质
饱和蒸汽 热含量高 潜热大 穿透力强
湿饱和蒸汽
低
过热蒸汽
穿透力差
• 灭菌时间等
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12
干热灭菌法
• 利用干热空气达到杀灭微生物或消除热原
的方法。
• 适用范围：耐高温但不宜使热灭菌法灭菌
的物品，如玻璃物品、金属物品、纤维制 品、固体试药、液体石蜡等。
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13
干热灭菌条件和效果
• 160～170℃× 120min、 170～180℃×
60min、250 ℃× 45min以上
• 灭菌过程有适当的装载方式，保证灭菌有
效均一
• 效果：
繁殖型细菌100℃ /1h可杀灭
繁殖型微生物1um，芽孢约0.5um或以下
0.45um可滤去大多数细菌，0.15um可滤 去热原
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19
物理灭菌法
方法
主要技术参数
应用特点
干热灭菌
药典规定 180℃，1h 或 160-170℃， 穿透力弱，温度不易均匀，温度高，不
2-4h
适于大部分药品
湿热 灭菌
热压 灭菌 流通 蒸汽
98kPa(1kg/cm2),15-20min 100℃，30-60min
耐热细菌: 120℃ 长时间不死亡,140 ℃ 杀菌率剧增
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14
火焰灭菌
置于火焰上直接灼烧 简便、可靠
精选ppt
15
辐射灭菌法
• 将灭菌物品置于适宜放射源辐射的射线或
适意的电子加速其发生的电子束中进行电 离辐射而达到杀灭微生物的方法。
• 常用60Co-γ射线 • 用于医疗器械、容器、生产辅助用品、不
压力、时间、湿度、灭菌气体浓度、辐照 剂量等
• 灭菌程序定期验证，时效不超过半年。 • 灭菌设备或程序发生变更重新进行验证。
精选ppt
4
灭菌保证
• 灭菌效果与灭菌前产品污染程度及污染菌
特性有关，把握微生物污染水平及污染菌 耐受性，注意各个环节降低污染程度。
• 灭菌冷却阶段防止已灭菌物品再次污染。
• 适用生物指示剂、化学指示剂等监控灭菌
法，常用环氧乙烷、气态过氧化氢、甲醛、 臭氧等。
• 适用于医疗器械、塑料制品等，能吸附环
氧乙烷的物品不宜采用。
• 控制参数：温度、相对湿度、灭菌压力、
灭菌时间等
精选ppt
18
过滤除菌法
• 利用细菌不能通过致密具孔滤材的原理除
去气体或液体中的微生物。
• 用于热不稳定的药品或原料除菌
• 滤膜材料确定
• 滤膜孔径要求
受辐射破坏的原料药及成品等。
• 参数：辐射剂量
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16
辐射灭菌特点
• γ射线
60Co
穿透力强
• β射线
由电子加速器产生
穿透力弱，灭菌效果差
• 不升高温度
• 设备费用高
• 辐射能引起一些药物pH值、含量、活性等改变，
某些制品不宜选用
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气体灭菌法
• 用化学消毒剂形成的气体杀灭微生物的方
• 干热灭菌：枯草芽孢杆菌孢子（ATCC9372等，活孢子数为5×105～
5×106个/片 )
• 辐射灭菌：短小芽孢杆菌孢子（ATCC27142等，活孢子数为5×107～
5×108个/片 )
• 气体灭菌：
环氧乙烷灭菌：枯草芽孢杆菌孢子（ATCC9372等，活孢子数为 5×105～5×106个/片 )
结果
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5
生物指示剂
• 基本要求：
菌种的耐受性应大于需灭菌产品中所有 可能污染菌的耐受性。
菌种应无致病性。 菌株应稳定，存活期长，易于保存。
易于培养。若使用休眠孢子，孢子含量 在90%以上。
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6
常用生物指示剂
• 湿热灭菌：嗜热脂肪芽孢杆菌孢子（ATCC7953等，活孢子数为
5×105～5×106个/片 )
无毒
丙二醇
1ml/m3 加热蒸发
不挥发，不易燃
无色醚样臭味气体，沸点 10.8 扩散穿透能力强，属广谱杀菌
环氧乙烷
℃，沸点以下为无色透明液 剂；用于对热敏感的药物等的
体，比重 0.882，溶于水。 灭菌；时间长，费用贵。
气态过氧化氢灭菌：嗜热脂肪芽孢杆菌孢子（ATCC7953等，活孢子 数为1×106～5×106个/片 )
过滤除菌法：缺陷假单胞菌（ ATCC19146等）
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7
灭菌方法
• 方法：湿热灭菌法、干热灭菌法、辐射灭
菌法、气体灭菌法、过滤除菌法。
• 根据灭菌物品特性选择一种或几种方法组
合灭菌。只要产品允许，尽可能选用最终 灭菌法。
精选ppt
8湿热灭菌法• 在高源自高压条件下利用沸水、蒸气变性微生物菌
体中的蛋白质、核酸而达到灭菌效果的方法。
• 效果可靠、操作简便 • 应用广泛：容器、培养基、无菌衣、胶塞等 • 包括
– 热压灭菌 – 流通蒸汽灭菌 – 煮沸灭菌 – 低温间歇灭菌
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9
湿热灭菌条件
• 121℃× 15min、 121℃× 30min 、116 ×
穿透力强，效果可靠，适用广 不能杀灭细菌芽胞
低温 60-80℃，1h + 室温 24h，重复操作 适于必须加热灭菌而又不耐高温者；时
间歇
3 次以上
间长，效果不理想；须加抑菌剂
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20
化学灭菌法
40%甲醛溶液（福尔马林） 20ml/m3 加热蒸发,6～12h
粘膜强烈刺激
乳酸
1ml/m3 加热蒸发 0.5～1h
灭菌法
精选ppt
1
灭菌法定义
• 用适当的物理或化学手段将物品中活的微
生物杀灭或除去的方法。适用于制剂、原 料、辅料、医疗器械等的灭菌。
• 灭菌是指将物品中污染的微生物残存概率
下降至一定水平，以无菌保证水平 SAL(Sterility Assurance Level)表示。
精选ppt
2
灭菌程序验证内容