组织培养技术汇总
组织培养技术
组织培养技术1、概念植物组织培养即植物无菌培养技术，是根据植物细胞具有全能性的理论，利用植物离体的器官、组织或细胞等，在无菌和适宜的人工培养条件下，经脱分化和再分化过程，最后形成完整植株的技术。
2、原理细胞全能性。
3、常用培养基的配方培养基名称配方MS（1L）琼脂粉（8g）+蔗糖（30g）+大量元素（20X）50ml+微量元素（100X）10ml+铁盐（100X）10ml+水定容（PH5.8-6.0）LB培养基（1L）胰蛋白胨(10g)+酵母提取物(5g) +NaCl（10g）+琼脂粉（10g）+水定容(pH 5.8-6.0)YEB培养基（1L）分化培养基（1L）生根培养基（1L）蛋白胨（5g）+牛肉浸膏（5g）+酵母粉（1g）+蔗（5g）+硫酸镁（0.49g）+琼脂粉（10g）( pH 5.8-6.0)琼脂粉（8g）+蔗糖（30g）+大量元素（20X）50ml+微量元素（100X）10ml+铁盐（100X）10ml+相应的激素+水定容（PH5.8-6.0）琼脂粉（8g）+蔗糖（30g）+大量元素（20X）50ml+微量元素（100X）10ml+铁盐（100X）10ml+相应的激素+水定容（PH5.8-6.0）培养基配制好后，于121℃，20Min高温高压湿热灭菌。
灭菌完成后，于紫外杀菌后的无菌工作台内分装即可。
4、外植体的灭菌和培养4.1 外植体的灭菌不同类别的外植体，可能灭菌的方式有所区别。
外植体灭菌常用方法如下：4.1.1 乙醇乙醇由于乙醇具有脱水作用和一定的溶脂性, 所以它能使蛋白质脱水、变性、沉淀及质膜破损、透性增加, 使微生物致死, 是一种常用的外植体表面杀菌剂。
70% (W/V)的乙醇对细胞具有很强的穿透性和杀伤力,故用乙醇作杀菌剂, 灭菌时间不宜过长, 约30s即可杀死外植体表面的绝大部分微生物。
因植物材料不同, 一般控制在5-60s之间, 种子的灭菌可适当延长。
延长灭菌时间会增加外植体损伤的程度。
植物细胞组织培养的基本技术(总结版)
植物细胞组织培养的基本技术（总结版）本章主要内容? 商业性组织培养实验室和小工厂的设计与主要设备 ? 培养基及其配制 ? 外植体的选择与培养 ? 试管苗的驯化与移载第一节商业性组织培养实验室和小工厂的设计与主要设备? 培养皿的清洗；? 培养基的配制、分装和高压灭菌； ? 无菌操作――材料的表面灭菌和接种； ? 将培养物放到培养室培养；? 试管苗的驯化、移栽和初期管理。
(一)、洗涤室(cleaning room)? 洗涤室用于完成玻璃器皿等仪器的清洗、干燥和贮存。
? 室内配备：? 大型水槽，最好是白瓷水槽。
为防止碰坏玻璃器皿，可铺垫橡胶。
上下水道要畅通。
? 备有塑料筐，用于运输培养器皿。
? 备有干燥架，用于放置干燥涮净的培养器皿。
(二)、准备室(repairing room)? 完成培养基制备以及试管苗出瓶、清洗与整理工作。
准备室要求明亮、通风。
? 如果房间较多，可将准备室分为洗涤室和配置室两部分。
洗涤室专门负责试管苗出瓶与培养器皿的清洗工作；配置室则负责培养基的配制、分装、包扎和高压灭菌等工作。
(三)、缓冲室? 进入无菌室前要在缓冲室里换上经过灭菌的卫生服、拖鞋，戴上口罩。
? 应当在此室内安装灭菌用的紫外灯。
控制无菌室及培养室的配电板等。
(四)、无菌操作室(transfering room)? 接种室是进行植物材料的分离接种及培养物转移的一个重要操作室。
其无菌条件的好坏对组织培养成功与否起重要作用。
? 配置：? 在工作方便的前提下，接种室宜小不宜大，一般7-8m2，要求地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑，易于清洁和消毒。
配置拉动门，以减少开关门时的空气扰动。
?接种室要求干爽安静，清洁明亮。
在适当位置吊装1-2盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。
最好安装一小型空调，使室温可控，这样可使门窗紧闭，减少与外界空气对流。
(五)、培养室(culturing room)? 培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。
组培知识点总结
组培知识点总结一、组织培养的定义及原理组织培养是一种无菌条件下，通过营养培养基为载体，结合适当条件使细胞或组织在体外生长、分化的生物技术方法。
它是一种通过控制培养条件（包括培养基成分、温度、湿度、光照等）来调控细胞或组织的生长与分化的技术手段。
组织培养的成功依赖于对培养细胞或组织的营养需求和生长特性有所了解，通过提供适宜的培养条件，促进其生长和分化。
二、组织培养的分类根据培养的细胞或组织的来源，组织培养可以分为植物组培和动物组培两大类。
1.植物组培植物组培是指利用植物的组织、细胞等在无菌条件下进行培养，促进其生长、分化和再生的技术。
植物组培可以分为植物器官培养、胚胎培养、愈伤组织培养、植物细胞悬浮培养等多种类型。
2.动物组培动物组培是指对动物体内的细胞或组织在无菌条件下进行培养，促进其生长、增殖和分化，主要包括动物组织培养、动物细胞培养等。
三、组织培养的应用领域由于组织培养技术具有操作简单、时间短、成本低等优点，因此在植物学、生物学、医学等领域得到了广泛的应用。
1.植物组培的应用（1）植物育种。
利用植物组织培养技术，可以实现无性系的繁殖、筛选和改良。
比如，在农业上可以利用植物组培技术进行无性系育种、快速繁殖、病毒、真菌和细菌病害的抗性的筛选。
（2）植物生物技术。
通过植物组培技术，可以实现植物的再生和转基因的导入，以及对植物的基因编辑等，为植物生物技术的研究和应用提供了重要的手段。
2.动物组培的应用（1）生物医学研究。
通过动物组织培养和动物细胞培养技术，可以进行动物细胞的分离、培养和扩增，从而为生物医学研究提供了重要的研究材料，并在体外实验模型中得到了广泛的应用。
（2）生物药物研发。
利用动物细胞培养的技术，可以实现重组蛋白的大规模生产，为生物制药的研发提供了重要的技术支持。
（3）细胞治疗。
利用动物干细胞和其它动物细胞培养技术，可以实现疾病治疗的干细胞移植和细胞治疗等，为医学临床治疗提供了新的思路和手段。
组织培养的技术要点
组织培养的技术要点
组织培养是现代企业管理中至关重要的一环，其技术要点包括以下
几个方面：
1. 确定培训目标
在开始组织培训之前，需要提前确定培训目标，即想要通过培训达到
什么目的。
这样可以更好地规划培训的内容和方向，确保培训的质量
和效果。
2. 制定培训计划
根据培训目标，制定详细的培训计划，包括培训时间、地点、内容、
方式等。
培训计划应该有条不紊、严谨可行，确保培训的计划实现。
同时，根据实际情况，还应随时对培训计划进行调整和改进。
3. 确定培训方式
根据不同员工的情况和不同的培训目标，可以选择不同的培训方式。
例如：内部培训、外部培训、网络培训、实地考察等。
同时，还需要
考虑员工的工作性质、工作时间等实际情况，确定最适宜的培训方式。
4. 多元化培训内容
培训内容应该覆盖技能、知识、文化、态度等方面，并且需要多元化。
例如，可以开展各种课程和讲座、实践操作和案例分析、反思和讨论
等形式的培训活动，以及学习和分享经验等形式，培养员工全面发展
的能力，提高他们的工作效率。
5. 密切跟踪并评估培训效果
组织完培训，还需要密切跟踪、评估培训效果。
可以采用问卷调查、
考试及实际操作、面谈等方式，了解员工的培训收益和成果，及时调
整培训计划和内容，不断提高培训效果。
6. 持续性的培训
组织培训需要持续，不能只是一次性的培训活动。
企业应该制定出持
续性的培训计划，为员工提供持续的、不断更新的知识和技能。
这样
可以为企业发展提供稳定人才保障。
组织培养技术
1、潜伏期(Latent
Phase)
主要过程：
1）粘附与贴壁（锚着依赖性细胞）
细胞附着于底物上，游离期结束; 细胞株平均在10分钟~4小时贴壁 底物：胶原、玻璃、塑料、其它细胞等 带正电荷的糖蛋白促贴壁因子先吸附于底物上， 悬浮细胞再与有促贴壁因子处附着。
2）铺展 3）细胞运动 4）细胞分裂
贴壁、铺展、细胞运动、细胞分裂
(三) 细胞功能态(Functional )
细胞周期的分子调控
G1-S-G2-M
Cyclin CCK
周期素复合体
（四） 细胞增殖类型
1、 干细胞（最易培养） 2、 活跃增殖细胞 3、 功能Ⅰ型细胞 4、 功能Ⅱ型细胞
（五）干细胞
1、基本属性 2、分类 全能性 (TPS) 多能性 (PPS) 单能性 (MPS) 3、一般性状
细胞增殖周期
G1 phase: 合成DNA复制所需蛋白(RNA) . S phase: 合成DNA和组蛋白
G2 phase: 合成少量RNA M phase: 有丝分裂, 形成两个子代细胞
1．G1 期 DNA合成前期或细胞分裂后期 2．S 期 DNA合成期 3．G2 期 DNA合成后期或细胞分裂前期 4．M 期 细胞有丝分裂期 1）前期 2）中期 3）后期 4）末期 （体内 受精卵特殊分裂增殖 — 连续增殖） --异常分裂
八、不同性别生物性状类型（名词解释） 二倍体细胞 永生性细胞 肿瘤细胞 遗传缺陷细胞
九、 能量代谢 (一) 糖代谢 (二) 蛋白质代谢 (三)脂类代谢 (四)核酸代谢
十、 细胞附着底物
(一) 玻璃 (二) 一次性塑料 聚苯乙烯、聚四氟乙烯 (三) 微载体
第三节
培养细胞 成功率的分析
医学组培知识点总结
医学组培知识点总结一、医学组织培养的基本原理医学组织培养的基本原理是将微生物放置在一定条件下的培养基上，利用培养基中的营养物质和适宜的生长条件，使微生物进行生长和繁殖。
培养基中的成分通常包括碳源、氮源、微量元素、生长因子、缓冲剂、水和不含有抑制细菌生长的物质。
根据不同的微生物，在不同的温度、湿度和氧气条件下进行培养。
二、医学组织培养的基本流程1. 选择合适的培养基：根据微生物的特性和需要培养的目的，选择适合的培养基，例如常用的富养分培养基、选择性培养基、富集培养基等。
2. 准备培养基：将所需的培养基称量、溶解、灭菌等操作，确保培养基的质量和无菌性。
3. 分装培养基：将培养基分装到培养皿或试管中，根据需要进行灭菌和冷却。
4. 样本采集：从需要检测的样本中采集微生物，根据需要进行前处理，如悬浮、离心、稀释等。
5. 接种样本：将处理过的样本接种到培养基上，然后进行彻底均匀地涂布，使细菌均匀地分布于培养基中。
6. 培养过程：将接种好的培养皿或试管放置在适宜的温度和湿度条件下，进行培养。
7. 观察生长：在适当的时间间隔内观察培养皿或试管中是否有生长，根据生长的特点确定微生物的类型。
三、医学组织培养的常见技术1. 纯培养技术：将纯种的微生物接种到培养基上，使其进行单一种类的生长，以获取纯种培养物。
2. 混合培养技术：将多种微生物共同接种到同一培养基上，进行共同生长。
3. 表层培养技术：将微生物接种到培养基表层，以观察其在表层的生长特点。
4. 深层培养技术：将微生物接种到培养基深层，以观察其在深层的生长特点。
四、医学组织培养的应用1. 临床诊断：通过培养微生物，可对疑似感染病例进行确诊，指导临床治疗方案的制定。
2. 药敏试验：通过培养微生物，观察其对不同抗生素的敏感性，为临床选择合适的抗生素提供参考。
3. 感染病原体鉴定：通过培养微生物，可以对感染病原体进行鉴定，为感染病原体的研究提供可靠的实验数据。
4. 疫情监测：通过培养微生物，可以对疫情的发生和传播进行监测，及时采取控制措施。
植物组织培养的方法
植物组织培养的方法植物组织培养（Plant tissue culture）是指利用无菌条件下培养植物细胞或组织，以实现繁殖、繁育新品种、生物合成化合物、环境污染处理等目的的技术。
其不仅可以大幅度提高植物材料的品质和数量，还可以在无限制地产生同一种植物。
方法一：赤潮法（Embryogenesis）这一方法是利用赤潮细胞发生器官（如胚性板）的细胞分化，诱导植物组织的胚胎发生，进而实现植物再生。
该方法适用于很多种植物，如玉米、大麦、水稻等。
步骤为：1. 准备培养基：含有赤潮素、氨基酸、维生素、植物激素和适当的糖类和盐类的基础培养基。
2. 处理材料：将植物的姿态板或种子材料在高温（35-40C）下进行消毒，使其无菌。
3. 材料分离：将消毒材料放入无菌条件下进行材料分离。
4. 培养细胞：将细胞或组织放入含有培养基的无菌培养皿中，保持恒定的温度、湿度和光照条件，促进发生素感应化。
5. 发生胚胎体：促进胚胎形成，通过培养发生胚胎胶囊或胚胎体。
6. 块茎冷藏：利用低温存储胚胎体或胚胎胶囊。
方法二：组织培养（Organogenesis）组织培养方法是通过培养植物的基本组织如叶片、茎尖、芽分根进而再生整个植株。
步骤为：1. 材料处理：对种子或植株进行表层消毒处理。
2. 制备组织片：将消毒好的植株切成组织片段，如茎尖、叶片等。
3. 培养基准备：准备无菌的培养基，其中含有植物的必需胰凡陈列如糖类、氨基酸、维生素、生长因子和植物激素等。
4. 组织分化：将组织片段放入含有培养基的培养皿中，使其分化成根、茎、叶等。
5. 干涸与移栽：将培养的加上适量水后，移栽到含有生长素适量的培养基中，促进植物以正常生长的形式营养。
方法三：悬浮细胞培养（Suspension Culture）在此方法中，使用悬浮培养细胞进行植物细胞或组织的生物合成和生物转化。
步骤为：1. 培养基准备：通常使用植物基础培养基加入氨基酸、维生素和植物激素等。
2. 细胞处理：将细胞分散在含有培养基的匀浆器中，使其悬浮在培养基中。
组织培养技术
第五章组织培养技术第一节植物组织培养所谓植物组织培养广义又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织.器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
狭义上是指用植物各部分组织，如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株，也包括在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植株。
一、概述（一）概念1.植物组织培养：是指通过无菌操作，把植物的外植体接种于人工配置的培养基上，在人工控制的条件下进行培养，使其成为完整植株的方法。
2.外植体：是指用于植物组织培养的接种材料，它包括植物体的各个器官、组织、细胞和原生质体等。
3.愈伤组织（Callus）：原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组培中则指人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。
（二）组织培养类型1.根据接种的外植体不同分：胚胎培养；器官培养；3组织培养；细胞培养；原生质体培养；2.根据培养基态相不同分：固体培养；液体培养；3.根据培养过程不同分：初代培养；继代培养；（三）植物组织培养历史植物组织培养是20世纪初开始，以植物生理学为基础发展起来的。
有以下过程：思想准备阶段；理论奠基阶段；技术建立阶段；形态发生阶段；应用研究阶段；1902年德国植物学家Haberlandt提出了细胞全能性概念。
1939年White报道了烟草组培成功。
并提出植物细胞全能性学说。
同年，Gautheret与Nobecourt 培养胡萝卜成功。
三人被誉为植物组培奠基人。
罗士韦是我国植物组织和细胞培养研究的开拓者和奠基人之一（四）植物组织培养的应用⒈植物的快速繁殖：⑴园艺、花卉植物的大规模快速繁殖；⑵抢救濒危珍稀植物⑶进行某些植物的种质资源保存⒉培育无病毒的植物，如脱病毒草莓等；⒊制造人工种子。
4突变体的筛选培育5药用植物的工厂化生产6花药培养和花粉单倍体育种7基因工程的应用等二、实验室设计和设备（一）实验室设计一般具有：1.准备室器皿洗涤，培养基配制、分装、高压灭菌，植物材料的预处理，重蒸馏水的制备以及进行生理、生化因素的分析等各种操作都要在此室中进行 .2.缓冲室进入无菌室前需在缓冲室里换上经过灭菌的卫生服、拖鞋，戴上口罩。
组培苗技术
组培苗技术组织培养技术是一种重要的植物繁殖技术，它可以帮助实现植物快速繁殖并生产优质种苗。
本文将重点介绍组织培养技术在植物育种、植物保护和植物生产等方面的应用，以及该技术的优势和发展趋势等内容，并对相关概念和术语进行解释。
一、概念与原理1.1 组织培养技术概述组织培养是一种利用植物体细胞和组织的生理特性，在无菌条件下通过外界激素和营养物质的定量调控，使细胞分化和再生生长的方法。
其基本原理是在无菌条件下，利用植物体内部的细胞和组织特性，通过外源激素的刺激和营养物质的供给，诱导细胞分裂、分化和重组，形成新的植株。
1.2 组织培养的发展及意义20世纪60年代以来，组织培养技术作为一种先进的植物繁殖技术，引起了全球范围内的广泛关注。
它的出现为植物育种、植物种苗培育、疾病防治、药用植物繁殖、植物改良等领域提供了新的手段和途径，对于提高农作物产量和品质、解决种质资源保存和植物疾病防治等问题具有重要的意义。
1.3 组织培养的基本操作组织培养技术的基本操作主要包括无菌条件下的培养基制备、细胞和组织的获取和处理、激素处理和培养条件的控制等步骤。
无菌条件的保持是组织培养技术取得成功的关键，需要在无菌工作台下进行操作，使用高压蒸汽灭菌器对培养基和操作器具进行消毒。
二、应用领域2.1 植物育种组织培养技术在植物育种中的应用主要体现在快速繁殖新品种和改良传统品种上。
通过组织培养技术，可以从优良植株中获取高质量的组织、细胞和胚，通过外源激素控制其生长分化，进而获得大量的同质化植株，为育种工作提供了快速、高效的手段。
2.2 植物保护在植物保护中，组织培养技术主要应用于植物抗逆性研究、病原体筛选和抗病育种等方面。
通过组织培养技术可以获得受到病原体或环境胁迫的植株组织，加以处理和观察，以便研究植物的抗病性和抗逆性。
2.3 植物生产在植物生产中，组织培养技术可以用于生产药用植物、优质果树和花卉苗木等。
通过组织培养技术可以快速繁殖出无病害的植株，减少繁殖时间和繁殖成本，提高种苗的质量和繁殖效率。
植物组织培养技术的主要类型与应用范围
植物组织培养技术的主要类型与应用范围植物组织培养技术是一种通过体外培养植物细胞、组织和器官的方法，以实现植物无性繁殖、基因转化、品种改良等目的。
该技术已经被广泛应用于植物科研、种质资源保护与利用、植物病害防治和植物繁殖等领域。
本文将介绍植物组织培养技术的主要类型与应用范围。
一、植物组织培养技术的主要类型1. 植物离体培养植物离体培养是指将植物组织或器官从体内分离出来，放置在富含营养物质的培养基中进行培养。
这种技术可以用于植物无性繁殖、基因转化、种质资源保存和研究等方面。
根据培养的组织类型不同，植物离体培养可分为愈伤组织培养、胚性组织培养、根尖培养等。
2. 植物悬浮细胞培养植物悬浮细胞培养是指将植物组织中的一部分细胞分离出来，通过悬浮培养技术使其在液体培养基中保持悬浮状态进行培养。
这种技术主要用于生产植物次生代谢产物、基因转化等方面。
3. 植物器官培养植物器官培养是指将植物体中的器官（如茎、叶、种子等）分离出来进行培养。
通过植物器官培养技术，可以快速繁殖优良品种、实现植物基因转化、筛选抗病性植株等。
二、植物组织培养技术的应用范围1. 植物无性繁殖植物无性繁殖是指通过植物组织培养技术，将植物组织或器官培养后产生新的植株。
这种方法可以实现高效繁殖植物种质资源，解决传统繁殖方式低效率的问题。
2. 品种改良植物组织培养技术可以用于品种改良。
通过离体培养技术，可以进行基因转化，导入抗病、抗逆性等优良基因，从而提高植物的品质和抗性。
3. 植物次生代谢产物的生产植物组织培养技术可以用于大规模生产植物次生代谢产物。
通过悬浮细胞培养技术，可以实现大量的细胞生产，从而获得丰富的植物次生代谢产物。
4. 种子无菌化和种子贮藏植物组织培养技术可以实现植物种子的无菌化和长期保存。
通过种子胚性培养技术，可以去除种子内的微生物，保证种子的无菌性。
同时，也可以通过离体胚培养技术，将种子胚胎保存在液体培养基中，延长种子的储藏寿命。
5. 植物病害防治植物组织培养技术可以用于植物病害的防治。
《植物的组织培养技术》 知识清单
《植物的组织培养技术》知识清单一、什么是植物的组织培养技术植物组织培养技术是在无菌的条件下，将植物的离体器官、组织或细胞等培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，使其发育成完整植株的技术。
这项技术的核心在于利用植物细胞的全能性，即每个植物细胞都具有发育成完整植株的潜在能力。
通过特定的培养环境和激素调节，激发细胞的分裂和分化，从而实现植株的再生。
二、植物组织培养技术的基本步骤1、外植体的选择与消毒外植体是指用于组织培养的植物材料，如茎尖、叶片、花药等。
选择生长旺盛、无病虫害的外植体，并进行严格的消毒处理，以避免微生物的污染。
常用的消毒方法有酒精浸泡、氯化汞消毒等。
2、培养基的制备培养基是植物组织生长和发育的营养基础，通常包含大量元素、微量元素、有机成分、植物生长调节剂等。
不同的植物和培养阶段需要不同的培养基配方。
例如，诱导愈伤组织形成的培养基与诱导芽分化的培养基成分就有所不同。
3、接种在无菌操作台上，将消毒后的外植体接种到培养基上。
操作过程要迅速、准确，以减少污染的机会。
4、培养接种后的培养物需放置在适宜的环境中进行培养。
培养条件包括温度、光照、湿度等。
一般来说，温度在 25℃左右，光照强度和时间根据植物种类和培养阶段进行调整。
5、继代培养当培养的细胞或组织生长到一定阶段，需要转移到新的培养基上进行继代培养，以促进其持续生长和分化。
6、生根与炼苗当芽苗生长到一定程度，需要诱导生根，形成完整的植株。
生根后的植株需要经过炼苗，逐渐适应外界环境，然后才能移栽到土壤中。
三、植物组织培养技术的应用1、快速繁殖优良品种对于一些繁殖系数低、难以用常规方法繁殖的植物，如名贵花卉、珍稀树种等，组织培养技术可以快速大量地繁殖优质种苗，满足市场需求。
2、脱毒苗的培育许多植物容易受到病毒的感染，导致产量和品质下降。
通过组织培养技术，可以选取未被病毒感染的茎尖或根尖等部位进行培养，获得无病毒的植株。
3、新品种的选育利用组织培养过程中的变异现象，结合人工选择，可以选育出具有优良性状的新品种。
2-组培基本技术 [兼容模式]汇编
![2-组培基本技术 [兼容模式]汇编](https://img.taocdn.com/s3/m/4b629d38650e52ea5518984d.png)
2 组织培养基本技术Basic techniques in plant tissue culture植物细胞组织培养的基本技术基本设备超净工作台(0.2微米过滤,紫外灯）酸度计（培养基pH5.5-6.0; 使用前标定,）天平(电子天平)磁力搅拌器高压蒸汽灭菌锅(121℃,20分钟)干燥灭菌器离心机(4000–16000rpm)电冰箱摇床培养箱显微镜(普通显微镜,倒置显微镜,体视镜) 仪器设备•配制培养基:烧杯，容量瓶，量筒，移液器•培养用具:试管,三角瓶,培养瓶,培养皿,封口膜•接种:酒精灯,喷雾器,镊子,解剖刀等•用具洗涤,转基因废弃物必须高压灭菌•用具灭菌:干热灭菌(160-180℃烘箱2-4hr),酒精灼烧,高压蒸汽灭菌（120℃,1kg/cm 2,15-20min）用具分注器，血球计数器移液器过滤灭菌器小型器具培养室洁净:2%次氯酸钠或95乙醇擦洗，紫外线照射；消毒剂培养架,植物生长专用灯25℃,70%-80%湿度培养基的主要成分不同培养基中矿质元素组份培养基的主要成分●水（蒸馏水）●无机成分大量元素(>0.1% of dry weight)氮nitrogen：核酸、蛋白质、辅酶成分。
无机氮25-60mM:NO3-25-40mM;NH4+2-20mM。
磷phorsphorus：1-3mM，核酸和蛋白质合成,光合作用,呼吸作用。
钾potassium：2-26mM，渗透压调节和酶活性；光合作用中离子平衡和叶绿体pH。
钙calcium：1-3mM，阳离子平衡、细胞壁合成、细胞信号。
镁magnesium：1-3mM，酶代谢，叶绿素的建成。
硫sulfur：1-3mM，蛋白质，脂类建成。
微量元素❒铁iron：光敏色素组份，电子传递❒硼boron：生殖器官发育，蛋白质，糖类运输❒锰manganese：酶辅助因子❒锌zinc：酶辅助因子❒铜copper：酶辅助因子，电子传递反应❒钼molybdenum：酶辅助因子，硝酸还原酶组份❒钴cobalt：维生素组份❒氯chlorine：光合作用所需有机成分●糖(sugar),碳源: 渗透压。
植物组织培养的关键技术
植物组织培养的关键技术
植物组织培养是一种重要的生物技术，可以用于繁殖和研究植物。
以下是植物组织培养中的关键技术。
1. 筛选合适的植物材料
选择合适的植物材料是成功进行组织培养的关键。
植物材料应具有较高的再生能力和耐受性，并能适应无菌环境。
2. 表面消毒
在组织培养前，必须对植物材料进行表面消毒，以去除外部的细菌和真菌。
通常使用消毒剂（如酒精，过氧化氢等）进行表面消毒。
3. 内部消毒
除了表面消毒外，还需要进行内部消毒，以去除植物材料内部的细菌和真菌。
一种常用的方法是通过热处理杀死内部微生物。
4. 培养基选择
选择适合的培养基对于组织培养至关重要。
培养基应包含必需的营养成分，如糖类、氮源、矿物质等，并应根据植物材料的需要进行调整。
5. 激素调节
激素在植物组织培养中起着重要的作用。
适当调节激素的浓度和组合可以促进植物再生和分化。
6. 无菌操作
组织培养需要在无菌环境下进行，以防止外部菌种污染。
无菌操作包括使用无菌工具和，并采取适当的措施维持无菌环境。
7. 培养条件控制
控制合适的培养条件对于植物组织培养的成功至关重要。
培养箱内的温度、湿度和光照条件应根据植物材料的要求进行调节。
8. 亲和性培养
亲和性培养是一种特殊的组织培养技术，通过培养特定的组织或细胞类型，可以获得纯化的植物物质或生化产品。
以上是植物组织培养的关键技术，通过合理应用这些技术，可以实现高效的植物培养和繁殖。
菊花组织培养技术总结
菊花组织培养技术总结一、引言菊花是我国重要的观赏植物之一，其花色丰富，形态优美。
为了满足人们对于菊花的需求，研究人员不断探索菊花的培育和种植技术。
其中，菊花组织培养技术是一项重要的研究内容。
二、菊花组织培养技术的基本原理菊花组织培养技术是指将菊花的组织或细胞分离出来，在含有适当营养物质的培养基中进行生长和分化，最终得到新植株或各种有用产物。
三、菊花组织培养技术的步骤1. 材料准备：选取健康无病虫害的母株作为材料，并进行消毒处理。
2. 组织分离：将所需组织分离出来，如叶片、茎尖等。
3. 培养基配制：根据不同类型的组织选择不同类型和浓度的培养基，并加入适当营养物质。
4. 培养条件调节：控制温度、湿度、光照等条件，以促进组织生长和分化。
5. 培养时间控制：根据不同类型的组织和培养目的，确定适当的培养时间。
6. 植株移栽：将培养好的植株移植到适当的土壤中进行生长。
四、菊花组织培养技术的应用1. 菊花新品种选育：通过组织培养技术，可以选择优良材料进行杂交和筛选，从而培育出新品种。
2. 菊花生产：菊花组织培养技术可以大量繁殖优良品种，提高生产效率。
3. 菊花药用价值开发：通过组织培养技术，可以获得具有药用价值的次生代谢产物。
五、菊花组织培养技术存在的问题与展望1. 技术难度较大：菊花组织培养技术需要掌握一定的专业知识和操作技能，对操作人员要求较高。
2. 成本较高：由于所需营养物质较多且价格较贵，导致成本较高。
3. 研究还不够深入：目前，菊花组织培养技术仍存在许多问题，需要更深入的研究。
展望：未来，随着科技的不断发展和研究的深入，菊花组织培养技术将会更加成熟和完善，为菊花产业的发展提供更多的支持。
六、结论总之，菊花组织培养技术是一项重要的研究内容，具有广泛的应用前景。
虽然该技术存在一些问题，但随着科技进步和研究深入，相信这些问题都会得到有效解决。
植物的组织培养技术知识梳理
愈伤组织 幼苗 移栽 外植体 ＿＿＿＿＿ ＿＿＿＿＿植物的组织培养技术知识梳理一、菊花的组织培养1．理论基础：植物细胞的＿＿＿＿＿＿。
2．基本过程：3．影响因素：（1）材料：＿＿＿＿、年龄、保存时间长短等。
（2）营养：①无机营养：a ．大量元素。
b ．＿＿＿＿＿＿＿＿。
②有机营养：＿＿＿＿＿、甘氨酸、＿＿＿＿＿、肌醇以及蔗糖等。
（3）激素：＿＿＿＿＿和细胞分裂素。
（4）pH ：＿＿＿＿左右。
（5）温度：18～22 ℃。
（6）光照：＿＿＿＿＿12 h 。
4．实验操作步骤：制备MS 培养基→外植体消毒→＿＿＿＿→培养→＿＿＿＿→栽培二、月季的花药培养1．理论基础：花粉具有＿＿＿＿＿＿＿＿。
2．花粉发育过程：＿＿＿＿＿、单核期、＿＿＿＿＿＿等阶段。
3．产生花粉植株的两种途径：4．操作关键：（1）选材：①要选择＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿的花蕾。
②花粉最好处于＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，花药培养的成功率最高。
③确定花粉发育时期最常用的方法是＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿，可以将细胞核分别染成红色和蓝黑色。
（2）接种：①剥离花药尽量不损伤花药，否则接种后容易＿＿＿＿＿＿＿。
②要＿＿＿＿＿＿＿＿，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或＿＿＿＿的形成。
（3）培养：花药培养一段时间后开裂，＿＿＿＿＿＿＿或释放出胚状体。
要将前者及时转移到分化培养基上，如释放出胚状体，要尽快在花药开裂后，将＿＿＿＿＿＿＿，分别移植到新的培养基上。
【答案】一、1．全能性2．脱分化再分化3．种类微量元素维生素烟酸生长素 5.8每日光照4．接种移栽二、1．全能性2．四分体时期双核期4．初花期完全未开放单核期细胞核由中央移向细胞一侧的时期醋酸洋红法焙花青—铬矾法从受伤部分产生愈伤组织彻底去除花丝胚状体长出愈伤组织幼小植株分开。
植物组织培养知识点归纳
植物组织培养知识点归纳一、植物组织培养的概念植物组织培养就是在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。
这就像是给植物细胞来了一场单独的“特训”，让它们在脱离母体的情况下也能茁壮成长呢。
二、植物组织培养的原理这背后的原理是植物细胞的全能性哦。
简单来说，就是每个植物细胞都像是一个潜在的小魔法师，都具备发育成完整植株的能力。
不过呢，在正常情况下，这种能力被抑制了，而我们通过组织培养的手段，就可以把这种能力释放出来。
三、植物组织培养的基本过程1. 外植体的选择与消毒外植体就是我们从植物体上取下来用于培养的部分，可以是叶片、茎段、根尖等。
就像我们挑选参加比赛的选手一样，要选健康、有活力的。
选好之后，还要对它进行消毒，把上面的病菌都除掉，不然就会影响后面的培养啦。
2. 初代培养把消毒后的外植体接种到初代培养基上。
初代培养基里有各种营养成分，像氮、磷、钾这些大量元素，还有铁、锰、锌等微量元素，以及一些植物生长调节剂，就像是给外植体准备的营养大餐。
在这个阶段，外植体会开始分化，可能会长出愈伤组织。
愈伤组织就像是一团白白嫩嫩的小肉球，是一团未分化的薄壁细胞。
3. 继代培养当愈伤组织长到一定大小后，我们要把它转移到新的培养基上，也就是继代培养基。
这个过程就像是给植物宝宝换个更大更好的“房子”，让它有更多的空间和营养继续生长。
在继代培养中，愈伤组织可能会继续分化，形成芽或者根。
4. 生根培养当我们看到有芽长出来后，就可以把它转移到生根培养基上了。
生根培养基里的植物生长调节剂的种类和浓度会有所调整，目的就是让小芽长出健康的根系。
根系就像是植物的脚，有了脚，植物才能稳稳地站在土壤里（这里是培养基里啦）。
5. 移栽驯化当植物在培养基里长出了完整的根系和茎叶后，就可以把它从无菌的环境中移栽到普通的土壤里了。
不过，这个过程可不能太突然，要先让植物适应一下外界的环境，就像我们从空调房突然走到炎热的户外，也需要一点时间适应呢。
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农高会组培生产汇总本次农高会参展组培苗的企业有21家。
主要有陕西（12家）、山东（7家）、天津（1家）、宁夏（1家）。
其中苹果组培有8家、樱桃7家、草莓2家、猕猴桃1家、蓝莓1家、花卉1家、十月光辉1家、马铃薯1家。
一、组培苗企业（一）陕西1.陕西华圣现代农业集团种苗（1）品种：苹果砧木B9、T337（2）瓶苗长势（分化）：T337分化2-3,一瓶4株，愈伤组织大、瓶底愈伤发黑、叶片大但顶尖叶片干枯、茎干粗壮，拔高不明显（如图）。
（3）穴盘苗：穴盘50孔，深度8cm左右；基质：草炭长势：苗子整齐一致，叶片大，高度8cm。
（4）年产量：20万株（压条繁殖为主）（5）组培苗单价：根据等级不同，价格不一样，2-5元/株。
（6）技术沟通：未见到组培技术人员2.海升现代农业有限公司（1）品种：苹果砧木T337、樱桃、草莓（2）瓶苗长势（分化）：樱桃分化3,，愈伤组织小、苗子健壮，拔高明显（如图）。
（3）穴盘苗：穴盘：樱桃：50孔，草莓：32孔，穴盘无纹隙，基质：珍珠岩+草炭长势：樱桃：须根多，盘根紧致，叶片大、绿，高度20cm，长势好（如图）。
草莓：叶片大，叶色正常，苗子长势旺。
樱桃草莓（4）年产量：未说（5）组培苗单价：樱桃16元/株，苹果砧木不卖（6）技术沟通：未见到组培技术人员3.陕西果业（新世界）种苗集团有限公司（1）品种：苹果砧木T337、M26、樱桃吉塞拉6号（12号）、猕猴桃、花椒（根据订单）（2）瓶苗长势（分化）：苹果分化2，每瓶15株，愈伤组织小、苗子健壮，高（如图）。
猕猴桃：分化3，叶片绿，苗子粗壮，但拔高不明显（如图）。
T337 猕猴桃生根：M26根系10条左右，根长2-3cm，苗子茎干粗壮，拔高不明显，25-30天可驯化（如图）。
（3）穴盘苗：穴盘50孔，穴盘有纹隙。
基质：小颗粒蛭石长势：叶片大绿、苗子未木质化、苗高约4cm。
（4）年产量：饱和200万（5）组培苗单价：5元/株（6）技术沟通：（组培室管理、炼苗微信已加）组培室面积：2000平米，温室5000平米，已做10多余年，近3年开始有成效。
人均接种量：每瓶15株，每人每天接种120瓶（1800株）。
外植体采茎尖，外植体玻璃化严重，加（活性炭、聚乙烯醇）做实验，效果不佳。
炼苗：管理人员说基质用珍珠岩和草炭，根蛆每年会出现，但未找到解决方法。
4.西安市阎良区永宏樱桃种植专业合作社（1）品种：樱桃吉塞拉6号（12号）、俄罗斯8号（2）瓶苗长势（生根）：根系数量5-8条，根长2-3cm，根系发达且根白，苗子叶片大，茎干粗壮（如图），瓶底干净透亮。
（3）穴盘苗：穴盘50孔，穴盘无纹隙，穴盘深度3.5cm。
基质：海藻长势：叶片大绿、苗子未木质化、茎干细，苗高约5-7cm。
5.宝鸡市金果生态农业科技开发有限公司（1）品种：樱桃（2）瓶苗长势（生根）：每瓶8-10株，根系数量6-10条，根长3-6cm，茎干细，长势不整齐，瓶底菌多（如图）。
分化：分化3-4，愈伤组织小，苗子细弱（如图）（3）穴盘苗：穴盘50孔，穴盘有纹隙。
基质：珍珠岩+草炭长势：叶片大绿、茎干粗，苗高约10-12cm。
6.宝鸡高格农业科技发展有限公司（1）品种：樱桃吉塞拉6号、晓文一号品种（2）穴盘苗：穴盘50孔基质：海藻（3）年产量：20万株（4）组培苗单价：5元/株7.杨凌秦岭山现代农业股份有限公司创新园（1）品种：花卉（蝴蝶兰、君子兰）（2）穴盘苗：穴盘128孔（3）年产量：200万株（4）组培苗单价：150-280元/盘组培室建于2016年，总面积1256平米。
8.陕西咸阳秦耀园艺有限公司（1）品种：苹果砧木T337、M26、樱桃（2）瓶苗长势（分化）：T337每瓶15株，分化3-4株，茎干粗壮，愈伤组织微大，叶片小，菌多（如图）。
T337分化 29天生根（T337）：根系数量4-8根，根系健壮，根长约1-2cm，苗子壮实（如图）。
T337 30天生根（樱桃）：每瓶10株，苗子健壮，根系数量6-10条，根长月2-3cm，根色发褐且有细菌（如图）。
（2）穴盘苗：穴盘50孔，无纹隙，穴盘高约5cm 基质：草炭长势：樱桃苗子健壮，叶片大、绿。
石榴叶片发黄严重，茎干细、弱，长势参差不齐。
（3）年产量：5-10万株9.陕西佰瑞猕猴桃研究院有限公司（1）品种：瑞玉、璞玉、徐香、东红、紫玉（2）佰瑞组培室900平米，炼苗温室3000平米。
10.陕西省眉县春光苗木专业合作社（1）品种：樱桃吉塞拉6号（12号）（2）瓶苗长势（分化）：每瓶6株，分化3-4株，拔高2-3cm，愈伤组织小，叶片微卷。
（3）穴盘苗：穴盘50孔，有纹隙基质：珍珠岩+草炭长势：樱桃苗子茎干粗壮，叶片大，整体苗子长势不整齐。
（4）组培苗单价：5元/株（量大最低4元/株）（5）组培室可参观。
11.杨凌（酒泉）龙德盛农业科技有限公司（1）品种：草莓（章姬、红颜、甜查理、宁玉等）（2）穴盘苗：穴盘50孔，无纹隙基质：珍珠岩+草炭长势：苗子健壮、叶片绿、长势好。
（3）组培苗单价：5元/株12.西北农林科技大学高档果品示范园（1）品种：樱桃砧木吉塞拉5号（6号），品种：俄罗斯8号、DY-1、福晨等。
（二）山东1.烟台青旗农业科技开发有限公司（1）品种：草莓（香野、枥乙女、丰香、甜查理等）（2）瓶苗长势（生根）：每瓶6株，苗子健壮、拔高显著，根系数量6-8条，根长3-4cm（如图）。
（3）穴盘苗：穴盘50孔基质：珍珠岩+草炭（4）组培苗单价：10元6株。
原原种200株以上50元/株（5）公司2008年开始做组培，2012年审定，组培室1500平米，连栋温室3间。
2.山东世丰农业有限公司（1）品种：美国红枫（十月光辉）、栎树（娜塔栎）（2）穴盘苗：穴盘50孔圆柱状基质：珍珠岩+草炭（3）钵苗单价：12cm 16元/株 16cm 18元/株（4）年产量：2000万株，组培室3600平米3.烟台金果农业开发有限公司（1）品种：蓝莓（2）瓶苗长势：每瓶30株，苗子茎干细弱，叶片发黄。
（3）穴盘苗：苗子茎干细，弱。
（4）组培苗单价：15元2株4.小草沟种苗基地（1）品种：T337、俄罗斯抗寒砧木、樱桃吉塞拉6号（2）瓶苗长势（生根）：每瓶6株，苗子叶片大，根系数量2-4条，根高约2-4cm。
分化：分化1-2株，分化不明显T33731天（3）穴盘苗：穴盘50孔，有纹隙基质：珍珠岩+草炭长势：叶片绿，苗子约3-5cm，根系未盘住基质。
（4）年产量：30万株（5）组培苗单价：5元/株（6）公司2018年开始做组培，组培室2600平米。
5.烟台现代果业科学研究院（1）品种：T337、八棱海棠、烟富8号、神富6号（2）瓶苗长势（分化）：每瓶5株，分化1-2，茎干微细，叶片小，整齐一致（如图）（3）穴盘苗：穴盘50孔，有纹隙基质：珍珠岩+草炭长势：苗子叶色发黄，叶片干枯（4）年产量：350万株（5）组培室1200平米，驯化室5000平米，砧木不卖。
6.中林丰沃（1）品种：苹果砧木T337、M26、B9 、蓝莓、梨、樱桃（2）瓶苗长势（分化）：T337苗子拔高不显著，分化2-3株，叶片大。
B9：分化2-3株，愈伤组织大，叶片大。
蓝莓：分化2-3、叶片小，苗子茎干细，但拔高显著。
梨：愈伤组织大，未分化，苗子高壮。
蓝莓（3）穴盘苗：穴盘50孔，圆柱状基质：草炭+锯末长势：苗子叶片绿、大，茎干微细，苹果砧木高约3-5cm。
（3）组培苗单价：12元/株7.山东惠农园艺科技有限公司（1）品种：吉塞拉6号（12号）、T337、M26、JM7、M7、美国G系列（2）瓶苗长势（生根）：每瓶18株，根系发达，根系长约3-5cm。
樱桃（3）穴盘苗：穴盘50孔，无纹隙基质：锯末+草炭长势：苗子叶色绿，苗高10-12cm，大小均匀（如图）。
（4）年产量：600万株（5）公司2009年开始做，组培室2400平米。
（三）天津1.颐正源（天津）科技公司（1）品种：T337、M26、M7、B9、青砧1号、樱桃吉塞拉6号（12号）、瓜蒌（2）瓶苗长势（分化）：愈伤组织大、分化1-2，茎秆粗壮。
（3）穴盘苗：穴盘50孔，无纹隙基质：珍珠岩+草炭（4）年产量：800万株（5）组培苗单价：4元/株（6）组培技术已做4年，组培室2000平米。
（四）宁夏1.固原马铃薯繁育基地（1）品种：马铃薯（大西洋、青署9号）（2）瓶苗长势：每瓶25株，根系细长，茎干微粗，叶片干黄。
（4）组培室4500平米，年产6000万株，块茎1.5元/斤,组培室可参观。
总结：本次农高会主要以苹果砧木、樱桃砧木为主。
以下是组培室需要改进的地方：（1）分化系数的提高;（2）有糖生根需进一步实验，落实配方；（3）无糖成活率、，苗木整齐度的提高；（4）品种多元化的实验；（5）多学、多沟通、多观察。
（二）其它基质、穴盘厂家：山东兴达育苗基质、山东润丰农业科技有限公司、湖北博越、山东寿光育苗基质加工厂、山东鲁源育苗基质、圣基育苗基质等。
温室、大棚智能控制系统：常州瑞尼克数控科技有限公司植物灯：慧农植物补光灯除草布：临沭多多塑料制品有限公司。