植物组织培养技术方案
植物的组织培养方法
植物的组织培养方法植物组织培养是一种无性繁殖技术，通过培养植物的各种器官组织，包括种子、茎、叶和根的细胞和组织，使其在适当的条件下进行生长和分化，从而产生新的植株。
这项技术已被广泛应用于农业、园艺、林业和植物学研究中。
以下是植物组织培养的一般步骤和方法：1. 材料准备：首先，选择适合的植物作为材料，常用的包括水果、蔬菜和花卉植物。
收集新鲜的种子、茎、叶或根，并进行消毒处理，以防止细菌、真菌和其他病原体的污染。
2. 植物组织的分离：将植物材料切成小块或将细胞分离开来。
对于植物的种子，可以直接将种子表面进行消毒处理后，在培养基上进行培养；对于茎、叶和根等组织，则需要进行切割处理。
3. 培养基的准备：制备适当的培养基是进行植物组织培养的重要步骤。
培养基通常由无机盐和有机添加剂组成，以提供植物生长所需的营养物质。
根据组织的不同类型，可以使用不同种类和浓度的培养基。
4. 培养基的调整：将分离的组织放入培养基上，可以将培养基涂覆在组织表面上，或者将组织植入培养基中。
然后，在无细菌的条件下，将组织培养在适当的温度、湿度和光照条件下。
5. 激素的添加：植物生长激素是控制植物生长和分化的关键因素。
在组织培养中，可以根据实验的需要添加适量的激素来促进细胞分裂和分化。
常用的激素有生长素、细胞分裂素和愈伤组织生成素等。
6. 愈伤组织的诱导：愈伤组织是植物组织培养中产生的一种可分化细胞。
通过搅拌、震荡或辐射等途径，诱导组织分化成愈伤组织，然后将其继续培养。
7. 植株的再生：通过培养基中激素的平衡调节，可以使愈伤组织再生为整个植株。
在培养基中，植株的幼苗养分丰富，需要的培养基成分和激素浓度可能与之前的不同。
8. 培养环境的控制：为了使植物组织正常生长和分化，需要控制培养环境的参数。
例如，可以调节培养基的pH值、光照强度、温度和湿度等因素。
9. 组织转化：经过培养，植物组织中可以引入外源基因，使其具有某种特定的性状，这被称为转基因。
《植物组织培养技术》 教学设计
《植物组织培养技术》教学设计一、教学目标1、知识与技能目标（1）学生能够理解植物组织培养的基本原理。
（2）学生能够掌握植物组织培养的操作流程，包括外植体的选择、消毒、接种、培养等环节。
（3）学生能够识别植物组织培养过程中常见的问题，并提出相应的解决措施。
2、过程与方法目标（1）通过实验操作，培养学生的动手能力和实践操作能力。
（2）通过小组合作，培养学生的团队协作能力和沟通交流能力。
（3）通过观察分析，培养学生的观察能力和问题解决能力。
3、情感态度与价值观目标（1）激发学生对生物技术的兴趣，培养学生的创新意识和探索精神。
（2）培养学生严谨的科学态度和实事求是的精神。
（3）增强学生对植物生命的尊重和保护意识。
二、教学重难点1、教学重点（1）植物组织培养的基本原理和操作流程。
（2）外植体的消毒和接种方法。
2、教学难点（1）植物激素在组织培养中的作用和调节。
（2）无菌操作技术的掌握和应用。
三、教学方法1、讲授法讲解植物组织培养的基本概念、原理和操作流程，让学生对植物组织培养有初步的了解。
2、演示法通过教师的现场演示，让学生更直观地了解外植体的消毒、接种等操作步骤和注意事项。
3、实验法组织学生进行植物组织培养的实验操作，让学生在实践中掌握植物组织培养的技术和方法。
4、讨论法针对实验过程中出现的问题和现象，组织学生进行讨论，培养学生的分析问题和解决问题的能力。
四、教学准备1、实验材料准备新鲜的植物材料（如胡萝卜、菊花等）、MS 培养基、植物激素、无菌水、75%酒精、01%氯化汞、无菌培养皿、无菌镊子、无菌剪刀等。
2、实验设备准备超净工作台、高压灭菌锅、光照培养箱等。
3、多媒体教学资源制作 PPT 课件，展示植物组织培养的原理、操作流程、实验结果等，辅助教学。
五、教学过程1、导入新课通过展示一些植物组织培养的成果图片（如花卉、蔬菜的组培苗），引起学生的兴趣，提问学生是否了解这些植物是如何培育出来的，从而引出植物组织培养的课题。
植物组织培养设计方案
植物组织培养设计方案植物组织培养是指在无菌条件下，利用植物组织的分裂与增殖能力，通过培养基的营养供应和激素的调控，使植物组织在体外生长和繁殖的技术。
其目的是快速繁殖、改良和培育优良品种的植株。
以下是一种基于组织培养的设计方案。
一、实验目的本实验旨在通过植物组织培养技术，研究植物愈伤组织的诱导和增殖条件，以期实现快速繁殖和培育优良品种的目的。
二、实验材料和仪器1.实验材料：植物组织外植体（如茎段、叶片等）；MS培养基（含植物生长素和激素）；蔗糖、琼脂、无菌水等。
2.实验仪器：无菌工作台、培养箱、显微镜、天平、恒温水浴器等。
三、实验步骤1.无菌处理：将实验材料的外植体进行无菌处理，去除外界的微生物污染。
首先，在无菌条件下，进行消毒处理，常用消毒剂为70%酒精或过氧化氢；然后，对外植体进行表面消毒，常用浸泡过氧化氢或次氯酸钠溶液进行处理；最后，在无菌条件下，进行洗涤，用干燥的无菌棉纸吸干多余的溶液。
2. 骨干培养基配制：根据原料的组成，配制适宜的骨干培养基。
常用的骨干培养基是Murashige和Skoog培养基（简称MS培养基），其中含有必需的无机盐、有机物和其他辅助物质。
3.愈伤组织诱导：将外植体放置在含有适当激素的MS培养基中，以诱导植物组织的增殖。
一般而言，气体激素如生长素（IAA）、激动素（NAA）和细胞分裂素（BA）等，能够促进植物组织的分裂与增殖。
4.愈伤组织转接：将完成诱导的愈伤组织从MS培养基中转移到新的MS培养基上，以促进组织的进一步分裂和生长。
将愈伤组织转移到含有较高激素浓度的培养基中，能够提高组织增殖的速度。
5.愈伤组织分化：在转接的培养基上，通过调节培养基的激素浓度，将愈伤组织分化为不同的细胞和组织类型，如根、茎和叶等。
6.幼苗培养：将完成分化的组织培养在不含激素的MS培养基上，使其进一步生长和发育。
在培养的过程中，观察和记录植株的生长状况。
四、实验结果分析通过上述的植物组织培养的实验过程和步骤，可以获得大量繁殖的植株，从而达到快速繁殖和培育优良品种的目的。
第五章植物组织培养技术实验方案
第五章植物组织培养技术实验方案一、实验目的：1.了解植物组织培养的基本原理和方法。
2.掌握植物组织培养的实验操作技巧。
3.培养植物组织并观察其生长和发育情况。
二、实验材料和设备：材料：麦芽糖、琼脂、植物激素（如IAA、ABA、GA3等）、幼绿豆胚轴组织。
设备：平板培养器、显微镜、高压锅、移液器、无菌操作器具等。
三、实验步骤：1.制备琼脂培养基a）称取适量琼脂加入适量蒸馏水中，搅拌均匀。
b）高压锅加热至沸腾，放入琼脂溶液，保持沸腾10-15分钟，使琼脂充分溶解。
c）将高压锅冷却后取出，倒入洁净的培养器中，晾凉并凝固。
2.准备植物组织a）将绿豆种子浸泡于水中，待种子发芽至一定程度。
b）取出绿豆胚轴组织，用刀切割成适当大小的组织片段。
3.制备植物组织培养基a）取适量砂糖和植物激素（如IAA、ABA、GA3等），溶解于蒸馏水中。
b）加入适量制备好的琼脂培养基，搅拌均匀。
4.进行组织培养a）将准备好的植物组织片段放入培养器中，倒入制备好的植物组织培养基，使组织片段完全浸没其中。
b）盖上培养器盖子，用透明胶带密封，防止细菌浸入。
c）将培养器置于适当的温度和光照条件下，进行培养。
5.观察和记录a）每天观察组织的生长和发育情况，记录变化。
b）使用显微镜观察细胞结构和细胞分裂情况。
c）观察是否有细菌感染或其他异常情况。
d）记录实验数据，如生长速率、生长周期等。
四、实验要点：1.所有实验操作都要在无菌环境下进行，避免细菌和其他微生物的污染。
2.组织培养基的配方可以根据不同的植物种类和研究目的进行调整。
3.培养条件也根据不同植物种类的要求进行调整，如温度、光照等。
4.实验中要注意观察并记录实验数据，对结果进行分析和总结。
五、预期结果：通过植物组织培养技术，可以观察到植物组织的生长和发育情况，研究不同因素对植物生长的影响，培养出健康的植物组织，为其他相关研究提供基础数据和实验材料。
六、安全注意事项：1.操作时要小心使用实验器具，避免切伤或烫伤等事故发生。
植物组织培养的方法
植物组织培养的方法植物组织培养（Plant tissue culture）是指利用无菌条件下培养植物细胞或组织，以实现繁殖、繁育新品种、生物合成化合物、环境污染处理等目的的技术。
其不仅可以大幅度提高植物材料的品质和数量，还可以在无限制地产生同一种植物。
方法一：赤潮法（Embryogenesis）这一方法是利用赤潮细胞发生器官（如胚性板）的细胞分化，诱导植物组织的胚胎发生，进而实现植物再生。
该方法适用于很多种植物，如玉米、大麦、水稻等。
步骤为：1. 准备培养基：含有赤潮素、氨基酸、维生素、植物激素和适当的糖类和盐类的基础培养基。
2. 处理材料：将植物的姿态板或种子材料在高温（35-40C）下进行消毒，使其无菌。
3. 材料分离：将消毒材料放入无菌条件下进行材料分离。
4. 培养细胞：将细胞或组织放入含有培养基的无菌培养皿中，保持恒定的温度、湿度和光照条件，促进发生素感应化。
5. 发生胚胎体：促进胚胎形成，通过培养发生胚胎胶囊或胚胎体。
6. 块茎冷藏：利用低温存储胚胎体或胚胎胶囊。
方法二：组织培养（Organogenesis）组织培养方法是通过培养植物的基本组织如叶片、茎尖、芽分根进而再生整个植株。
步骤为：1. 材料处理：对种子或植株进行表层消毒处理。
2. 制备组织片：将消毒好的植株切成组织片段，如茎尖、叶片等。
3. 培养基准备：准备无菌的培养基，其中含有植物的必需胰凡陈列如糖类、氨基酸、维生素、生长因子和植物激素等。
4. 组织分化：将组织片段放入含有培养基的培养皿中，使其分化成根、茎、叶等。
5. 干涸与移栽：将培养的加上适量水后，移栽到含有生长素适量的培养基中，促进植物以正常生长的形式营养。
方法三：悬浮细胞培养（Suspension Culture）在此方法中，使用悬浮培养细胞进行植物细胞或组织的生物合成和生物转化。
步骤为：1. 培养基准备：通常使用植物基础培养基加入氨基酸、维生素和植物激素等。
2. 细胞处理：将细胞分散在含有培养基的匀浆器中，使其悬浮在培养基中。
植物组织培养实验教案
一、实验背景植物组织培养技术是一种在无菌条件下，将植物的茎尖、茎段或叶片等切成小块，通过人工方法在特制的培养基上进行培养，使其逐渐发育成完整植物体的技术。
本实验旨在让学生了解植物组织培养的基本原理，掌握实验操作技能，培养学生的创新意识和实践能力。
二、实验目的1. 了解植物组织培养的基本原理及应用。
2. 掌握植物组织培养实验的操作步骤。
3. 培养学生的创新意识和实践能力。
三、实验材料与仪器1. 材料：植物茎段、叶片、茎尖等；培养基；植物激素；消毒剂等。
2. 仪器：无菌操作台、高压蒸汽灭菌锅、培养皿、移液器、解剖刀、镊子、滤纸等。
四、实验步骤1. 准备实验材料：选取健康的植物茎段、叶片或茎尖，去除杂质，清洗干净。
2. 消毒：将实验材料用70%酒精浸泡30秒，再用无菌水清洗，用消毒剂处理1-2分钟。
3. 切割材料：用解剖刀将消毒后的实验材料切割成适当大小的小块。
5. 培养：将接种后的培养皿放入培养箱中，控制温度、光照等条件，进行培养。
6. 观察与记录：定期观察植物组织的生长状况，记录实验现象。
五、实验注意事项1. 实验过程中需严格无菌操作，避免污染。
2. 切割材料时要注意刀片的消毒和更换。
3. 培养过程中要定期观察，调整培养条件。
4. 实验结果可能存在差异，要注重数据分析与讨论。
教案编写仅供参考，具体实验操作请根据实际情况进行调整。
祝实验成功！六、实验拓展1. 探索不同植物激素对植物组织培养的影响。
2. 尝试用植物组织培养技术繁殖难生根或珍贵植物。
3. 研究植物组织培养在基因工程中的应用。
七、实验报告要求1. 描述实验材料、仪器和实验步骤。
2. 记录实验现象和结果。
3. 分析实验结果，探讨可能的原因。
4. 提出实验中存在的问题及改进措施。
八、实验评价1. 评价学生对植物组织培养原理的理解。
2. 评价学生对实验操作的熟练程度。
3. 评价学生对实验现象的观察与分析能力。
4. 评价学生在实验过程中的团队合作精神。
植物组培实施方案
植物组培实施方案
植物组培是一种通过培养植物组织细胞来繁殖植物的技术。
它可以有效地快速
繁殖和保存珍稀植物，也可以用于植物育种和基因转化。
在进行植物组培时，需要严格按照一定的实施方案进行操作，以确保最终获得良好的组培植株。
首先，准备工作是非常重要的。
选择健康的母株，采集新鲜的茎尖、叶片或芽
鳞等组织作为外植体，消毒外植体是组培的第一步，通常采用75%酒精表面消毒，然后再进行次生消毒，以确保外植体的无菌状态。
接下来是培养基的配制，培养基的配制需要根据不同植物种类和不同培养阶段的需要进行调整，通常包括基本盐类、植物生长调节剂、碳源、氮源、维生素和琼脂等成分。
其次，外植体的接种和培养是植物组培的关键步骤。
将消毒后的外植体移至无
菌操作台上，进行切割、分离和培养。
在培养基上均匀地分布外植体，然后进行密封培养。
密封培养可以提供良好的生长环境，促进外植体的快速生长和增殖。
在培养过程中，需要定期观察外植体的生长情况，及时进行植株的转接和分离，以确保培养植株的健康生长。
最后，移栽和生根是植物组培的最后一步。
当培养植株生长到一定阶段后，需
要将其移至含有生根剂的培养基中进行生根。
生根后的植株可以移至含有适量营养物质的培养基中进行生长。
在移栽和生根的过程中，需要注意培养环境的湿度和温度，以及培养基中营养物质的浓度，以确保植株能够顺利生长。
总的来说，植物组培是一项复杂而精细的工作，需要严格按照实施方案进行操作。
只有在每一个环节都做到位，才能够获得优质的组培植株。
希望本文所述的植物组培实施方案能够对您有所帮助，谢谢阅读！。
植物组织培养设计方案
植物组织培养设计方案植物组织培养是一种繁殖植物的方法，通过在无菌条件下培养植物的组织或细胞，可以获得大量的健康无病害的植株。
植物组织培养广泛应用于植物保护、育种、快速繁殖和基因转化等领域。
本文将重点介绍植物组织培养的设计方案。
1.实验材料准备：-植物种子或幼苗：选择优良品种的无病害种子或幼苗作为材料。
- 生长基质：常用的基质包括MS培养基（Murashige和Skoog培养基）、B5培养基（Gamely和Ribble培养基）等。
根据不同的植物种类和实验目的，选择适宜的培养基。
2.无菌操作：-实验室要保持高度的无菌操作环境，使用无菌操作台、无菌培养器等工具设备。
-使用无菌操作工具，如无菌钳、无菌刀片等进行操作。
-使用无菌材料：培养基、培养瓶、培养器等都要在高温高压下灭菌处理。
3.组织处理和培养：-种子处理：以浓度为0.1%的漂白水处理种子表面，去除外层的外壳，并在无菌条件下接种到培养基上。
-组织切割：从植株中选择新鲜、无病害的茎、叶、根等组织切取，注意避免外界微生物的污染。
-培养基配制：根据实验目的和植物种类，调整培养基的配方，添加适量的植物生长调节剂（如激素）。
-培养条件控制：控制培养瓶内温度、光照强度和光周期，以及湿度等因素，提供适宜的生长环境。
4.培养过程监测与处理：-观察细胞分裂和不定芽发生情况，根据需要进行不定芽分离和转移。
-监测培养器内的细菌和真菌污染，及时采取措施防止蔓延。
-过程中温度、光照等条件的调节，根据实验需要和细胞、组织的生长情况进行调整。
5.培养结束处理：-移除培养器中的植株，将其进行除菌处理，避免对环境产生影响。
-将培养基进行无菌处理，以免细菌或真菌残留造成二次污染。
-对根据实验结果分析，总结经验教训，为后续的实验提供参考。
总之，植物组织培养设计方案需要从材料选择、无菌操作、组织处理和培养、监测与处理以及培养结束处理等方面进行全面考虑。
只有在严格的无菌条件下进行操作，并根据实验需求和植物特性进行科学的调控和管理，才能获得高效的植物组织培养。
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花粉粒的细胞核进行一次有丝分裂形成1个花粉管细胞
核和1个生殖细胞核，每个生殖细胞核再进行一次有丝
分裂生成2个精子。
基础知识 -----产生花粉植株的两种途径 • 途径一：花粉通过胚状体阶段发育为植株； • 途径二：花粉在诱导培养基上先形成愈伤组
织，再将其诱导分化成植株。
组 织
根 细胞分裂
植 物 体
胞 生长素
素<生长素
不需要光
需要光
4、植物组织培养的应用：
1、培育无病毒植株
2、 培养紫草愈伤组织,提取紫草素（治疗烫伤 和割伤的药物以及染料和化妆品的原料）
3、诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力 的胚状结构，包裹上人造种皮，制成人工种子， 可以解决有些作物品种繁殖能力差，结子困难 或发芽率低等问题
专题3 植物组织培养技术
课题1 菊花的组织培养
一、基础知识 1、植物的组织培养
（1）细胞的分化
①概念在：个体发育中，相同细胞的后代在形态、结 构、生理功能上发生稳定性差异的过程 。 ②举例：如：受精卵增殖、生长、分化形成组织、 器官、系统。 ③特点：a、持久性：是一种持久性的变化，它发生在生
物体的整个生命过程中,在胚胎期达到最大限度；b 、稳 定性：细胞分化是稳定的，一般是不可逆转的；c 、全能 性：已分化的细胞，仍具有发育的潜能。
④结果：形成不同的细胞和组织。
⑤原因：基因在特定的时间和空间条件下的选择 性表达的结果。
（2）细胞的全能性
①定义：生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个 体的潜能的特性。 ②原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特 有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需 的全部基因。 ③实例：已分化的植物细胞，仍具有全能性。高度 特化的动物细胞，从整个细胞来说，全能性受到限 制。但它的细胞核仍然保持着全能性，这是因为细 胞核内含有该物种遗传性所需要的遗传物质。 ④全能性的比较:受精卵>生殖细胞>体细胞
② 酒精处理：用无菌吸水纸吸干外植体表面的水 分，放入体积分数为70％的酒精中摇动2－3次， 持续6－7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗。
③消毒液处理：取出后用无菌吸水纸吸干外植体表 面的水分，放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中 1－2min，取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净 消毒液。
（三）接种
中
种
倍后不形成 成纯合体
两个细胞
项目 优缺点 举例
杂交育种 诱变育种 多倍体育种 单倍体育种
方法简便， 加速育种进 器官较大， 缩短育种年
• 二、材料的消毒
• 三、接种和培养
• 四、结果分析与评价 • 1、能够通过镜检找到处于适宜的发育期的花
粉。用醋酸洋红法或焙花青－铬矾法检测单 核靠边期的花粉粒。
• 2、花药出现污染的原因： • （1）消毒不彻底；（2）接种室污染；（3）
人为因素的交叉污染等。
比较杂交育种、诱变育种、多倍体育种、单 倍体育种
• 当花粉囊的壁组织逐步发育分化时，会形 成大量的花粉母细胞（小孢子母细胞）。
• （2）花粉粒是由花粉母细胞经过减数分裂而 形成，因此，花粉粒是单倍体的生殖细胞。花 粉的发育要经历四分体时期、单核期和双核期 等阶段。
实例一：
•关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是（B）D •A、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的 •B、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果 •C、被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、 单核期、双核期等阶段 •D、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧， 再移到细胞中央
4、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法
人工种子
二、实验操作
（一）制备MS固体培养基 MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般
使用4。C保存配制好的培养基母液来制备。 1、配置各种母液
①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩 100倍，常温保存； ②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一 般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液； ③用母液配制培养基时，需要根据各种母液的 浓缩倍数，计算用量。
2、愈伤组织的继代培养 继代培养所用的培养基与培养愈伤组织的相同，在 严格的无菌条件下，将愈伤组织连同原来的外植体 一起移到新培养基上。愈伤组织的继代培养一代为 20d。如果延长时间，培养基中营养物质减少，外 植体会分泌有毒物质，造成自身中毒。如果愈伤组 织长到直径为1－1.5cm时，就可以进行试管苗培 养，否则还需进行第二代继代培养。 在愈伤组织继代培养期间，将恒温箱的门打开，让 愈伤组织见光，愈伤组织见光后颜色可以转为绿色。
①每接种一块外植体前，镊子需放入体积分 数为75％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒 精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种
②外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体 数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜3－ 4块，菊的茎或叶6－8块，也不要太少，以充 分利用培养基中的营养成分和光照条件
③插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖 基部插入培养基利于吸收水分和养分
（3）植物激素的影响
①常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和 赤霉素
生长素类： 2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、 吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、 吲哚丁酸（IBA）
细胞分裂素类： 激动素（KT）、6－苄基嘌呤 （ 6－BA）、玉米素（ZT）
赤霉素类： 赤霉酸（GA3）
②生长素和细胞分裂素作用
植物细胞>动物细胞
（3）植物组织培养
①必要条件：
细胞离体 一定的营养物质、激素和其他外界
条件 ②原理: 细胞的全能性
③相关概念:
外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织 或器官。
脱分化：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过
程，称为植物细胞的脱分化或者叫去分化。
再分化：脱分化产生的愈伤组织继续培养，又可以重新分 化成根或芽等器官，这个过程叫再分化。
1、接种室消毒 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种 室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空 气消毒， 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外 线照射20分钟
2、无菌操作要求 操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后， 都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。
3、材料的切取和接种
4、接种注意事项
愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无 定形状态的薄壁细胞。
人参的愈伤组织
菠萝的愈伤组织
2、影响植物组织培养的因素 （1）植物材料的选择
烟草和胡萝卜的组织培养较为容易
枸杞愈伤组织的芽诱导比较难
同一植物材料的年龄、保存时间的长短会 影响实验结果 菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎 上部新萌生的侧枝
（2）不同的离体组织和细胞对营养、环境等条 件的要求相对特殊，需配置不同的培养基 MS培养基主要成分包括： A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等
B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、 Co等
C、有机物、植物激素
讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题 2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方 有哪些明显的不同？
• 二、课题重点和难点：
• 选取适宜的培养材料和培养基。
• 三、技能目标：
• 知道被子植物花粉发育的过程；说出产生花粉植 株的两种途径；记住影响花药培养的因素，尝试 花药培养的实验操作过程，并进行无菌操作；知 道花药培养在育种上的意义。
基础知识 ------被子植物的花粉发育：
• （1）雄蕊由花丝和花药两部分组成。花药是 雄蕊的主要部分，多数被子植物的花药由4个 花粉囊组成，花粉囊外由囊壁包围，内生许多 花粉粒。
• 人工种子是由外植体通过组织培养而获得的 胚状体，然后加上人造胚乳，人造种皮而制 成；外植体进行的是有丝分裂，无须通过两 性生殖细胞结合而发育成的个体，属于无性 生殖。
基础知识 ------影响花药培养的因素
•1、主要的影响因素：材料的选择与培养基的 组成。 •（1）接种的花药时期：一般来说，在单核期 ，细胞核由中央移向细胞一侧时，花药培养成 功率最高。选择完全未开放的花蕾，可挑选到 单核期的花药，菌少、易消毒；花瓣松动，菌 多，消毒困难。 •（2）此外，亲本植株的生长条件、材料的低 温预处理以及接种密度对诱导成功率都有一定 的影响。
三、课题延伸 1、一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也 容易进行组织培养
2、实例：芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季
课题2 月季的花药培养
• 一、课题目标：
• 说出被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花 粉植株的两种途径，说出影响花药培养的因素， 学习花药培养的基本技术，尝试用月季或其他植 物的花药进行培养。
实验操作
•一、材料的选取 •1、选择花药一般通过镜检来确定其中的花粉是 否处于适宜的发育期。 •2、确定花粉发育时期最常用方法：醋酸洋红法 ；焙花青－铬矾法。 •注：花粉细胞核内有染色体，染色体主要由 DNA和蛋白质组成，醋酸洋红为碱性染色剂，染 色体容易被染色。通过染色，可以确定细胞核为 单核期还是双核期，是单核居中期还是单核靠边 期。一般单核靠边期的花药培养成功率最高。
思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实 验吗？
答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。 设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养 基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养， 用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。
（四）培养
1、愈伤组织的培养
从接种外植体到出现愈伤组织需经过2周时间。2 周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白 色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时，恒温 箱的门应该关闭不必见光，因为在无光条件下愈 伤组织长的更快。2周后，培养基成分接近耗尽， 必须更换培养基，进行继代培养
项目 处理
杂交育种 诱变育种 多倍体育种 单倍体育种
杂交
用射线、化 用秋水仙素 花药离体培 学药品处理 处理种子或 养