基础16项生化试剂的种类及意义

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生化试剂

生化试剂

生化试剂生化试剂(Biochemicalreagent)是指有关生命科学研究的生物材料或有机化合物,以及临床诊断、医学研究用的试剂。

生化试剂的介绍由于生命科学面广、发展快,因此该类试剂品种繁多、性质复杂。

生化试剂的种类主要有电泳试剂、色谱试剂、离心分离试剂、免疫试剂、标记试剂、组织化学试剂、透变剂和致癌物质、杀虫剂、培养基、缓冲剂、电镜试剂、蛋白质和核酸沉淀剂、缩合剂、超滤膜、临床诊断试剂、染色剂、抗氧化剂、防霉剂、去垢剂和表面活性剂、生化标准品试剂、生化质控品试剂、分离材料等等。

(1)免疫试剂包括抗体及抗血清、正常血清及补体、抗原、免疫组织化学研究用试剂、细胞培养用试剂、细胞分离试剂、凝胶内扩散法及电泳试剂等。

(2)基因工程用试剂包括基因表达与基因重组、人工合成蛋白、激素、核酸合成试剂、核酸制剂、内切酶等。

(3)诱变剂和致癌物质主要供测定工作场所与生活环境中的毒物质的致癌性与化学毒物的致突变性。

(4)临床诊断试剂主要供医疗系统中的临床病理诊断、生化诊断、液晶诊断、同位素诊断与一般化学诊断等诊断检查中所用的一大类化学试剂。

(5)工业用化学品包括试制开发的工业用化学品,有四千种以上,还在不断增加。

从生物体中提取的或由化学合成的生物体的基本成分,用于生物成分的分析鉴定及生物制品的制造。

随着生命科学的发展,生化试剂已发展成为化学试剂的一大类,有商品10000多种。

中国销售的生化试剂品种有2500种。

生化试剂受热、受潮、受光后易丧失活力,保存期短,因此贮运条件比较苛刻。

例如,绝大多数酶试剂怕热,需在0~6℃下保存,有些作为遗传工程用的酶试剂则需在-20℃下保存。

生化试剂按生物体组织中所含有的或是在代谢过程中所产生的物质可分为氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸、酶、辅酶、糖类、酯类、激素等;按生物学研究的需要可分为电泳试剂、色谱试剂、免疫试剂、标记试剂、组织化学试剂等。

生化试剂根据用途不同对其纯度及技术均有一定的要求。

高中生物常用试剂及其作用

高中生物常用试剂及其作用

高中生物常用试剂及其作用高中生物实验中常用的试剂有很多种,根据实验的不同目的和需要,选择的试剂也有所不同。

以下是一些常见的高中生物实验试剂及其作用的介绍:1. 蒸馏水(Distilled water):用于制备其他试剂的溶液,去除水中的杂质和离子。

2. 水合铜硫酸(Copper sulfate pentahydrate):用于检测蛋白质的存在。

蛋白质与水合铜硫酸反应生成紫色沉淀,称为比色法。

3. Lugol碘试液(Lugol's iodine solution):用于检测淀粉的存在。

淀粉与Lugol碘试液反应生成蓝黑色复合物。

4. 苏丹红(Sudan red):用于检测有机物质中的脂肪。

脂肪与苏丹红结合生成红色颜料。

5. FeCl3 溶液(Ferric chloride solution):用于检测酚类和酮类化合物的存在。

酚类和酮类与FeCl3反应生成蓝色溶液。

6. 硫酸铜(Copper sulfate):用于测定蓝藻中叶绿素含量的溶液。

7. 氯化铁溶液(Ferric chloride solution):用于检测植物叶片中的鞣料和类黄酮。

鞣料和类黄酮与氯化铁反应生成蓝、黑色或紫红色溶液。

8. Coomassie亮蓝R-250(Coomassie brilliant blue R-250):用于染色蛋白质,可定量测定蛋白质的浓度。

9. 活性炭(Activated charcoal):用于吸附有机物质,净化溶液和去除气体中的有害物质。

10. 氢氧化钠溶液(Sodium hydroxide solution):用于调节溶液的pH值,调控酶活性。

11. 盐酸(Hydrochloric acid):用于调节溶液的酸碱度,促进酶的反应。

12. 硫酸(Sulfuric acid):用于消化样品、蛋白质的分解和酶的去活化。

13. 氯化钠溶液(Sodium chloride solution):用于调节细胞培养基的渗透压。

生物学生化试剂产品及临床意义介绍

生物学生化试剂产品及临床意义介绍

白蛋白的检测
溴甲酚绿终点法
血清中白蛋白与溴甲酚绿(BCG)在 pH4.15环境中结合生成绿色复合物,溶 液由黄色变为绿色,在600nm有吸收峰, 其颜色深浅与白蛋白浓度成正比,从而 测出白蛋白含量。
白蛋白+溴甲酚绿→白蛋白-BCG复合物
与溴甲酚紫法的比较
溴甲酚绿法操作简单、快速,既可手工 操作,也能自动化分析,是目前国内最 常用方法。
2.排泄功能:对胆红素和某些染料的排泄 3.解毒功能:生物转化功能(同化、异化) 4.物质合成功能:凝血和纤溶因子、纤溶抑制因
子的生成及对活性凝血因子的灭活清除
2.肝功能实验的内容
▪ 蛋白质代谢功能检查 (TP、ALB、PA、 AFP)
▪ 胆红素代谢检查(TBIL、DBIL) ▪ 胆汁酸代谢检查(TBA) ▪ 摄取、排泄功能检查 ▪ 血清肝酶谱的检查(ALT、AST、ALP、
酶循环法测定反应式
Thio-NAD+
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
Thio-NADH + H+
胆汁酸
3α-羟基类固醇脱氢酶
3-酮类固醇
NAD+
NADH + H+
临床意义
▪ 总胆汁酸升高
• 肝损害:肝炎、肝硬化、肝癌 • 胆道阻塞:胆管梗阻引起的胆汁淤积 • 小肠污浊综合症
与第一代胆汁酸测定试剂相比
成倍提高了测定灵敏度,克服了第一代酶 比色法试剂在测定低值标本时的重复性差的问 题。
Zn
Fe
5’-NT GPDA AFP NAG CSF CYS-C MALB HbA1c D3-H ACE
LDH1 C3
C4
IgA IgG
IgM TRF
生化试剂分类:

生化试剂的基础知识

生化试剂的基础知识

生化试剂的基础知识生化试剂的基本知识一、生化试剂的分类 (4)(一)按照化学性质分类4(二)按照临床应用分类4二、反应速度特性 (5)(一)终点法试剂5(二)动力学法试剂6三、显色原理 (9)(一)NAD-NADH和NADP-NADPH系统9(二)p-NP和p-NA系统10(三)H2O2偶联的指示系统10(四)抗原抗体反应指示系统10(五)其它显色反应11四、性能评价方法 (11)(一)主要性能指标:11(二)性能评价方法12一、生化试剂的分类(一)按照化学性质分类1.酶类:包括ALT,AST,ALP,ACP,r-GT,α-HBDH,LDH,CK,CK-MB,α-AMY,MSO,ADA,ChE 等。

2.底物/代谢产物类:包括TG,TC,HDL-C,LDL-C,UA,UREA,Cr,Glu,TP,Alb ,T-Bil,TBA,NH4+,CO2等。

3.无机离子类:包括Ca,P,Mg,Cl等。

4.特种蛋白类:包括apoAl,apoB,Lp(a),C3,C4,PFB(B因子),IgG,IgA,IgM等。

(二)按照临床应用分类1.无机离子:包括Ca,P,Mg,Cl等。

2.肝功能:包括ALT,AST,r-GT,ALP,MSO,T-Bil,D-Bil,TBA,TP,Alb等。

3.肾功能:UA,UREA,Cr等。

4.心肌酶谱:CK,CK-MB,LDH,α-HBDH,AST,MSO。

5.糖尿病:GLU等。

6.前列腺疾病:ACP,p-ACP等。

7.胰腺炎:α-AMY。

8.血脂:TC,TG,HDL-C,LDL-C,apoA1,apoB,Lp(a)。

9.痛风:UA。

10.有机磷中毒:ChE。

11.免疫性疾病:C3,C4,PFB(B因子), IgG,IgA,IgM,Kappa链,Lambda链。

二、反应速度特性按照反应速度,可以分为终点法试剂和动力学试剂。

而动力学试剂又可再分为零级动力学法和一级动力学法。

(一)终点法试剂终点法,指经过一段时间(一般为几分钟)的反应,反应进行到完全,使全部底物(被测物)转变成产物,称终点法,更确切地说应称平衡法,这是最理想的分析类型。

常用生化试剂品名

常用生化试剂品名

常用生化试剂品名Tris:Tris(Hydroxymethyl)aminomethane 三羟甲基氨基甲烷分子式: NH2C(CH2OH)3 分子量: 121.14 TRIS 是一种最常用的生物缓冲液,常配成PH 值为 6.8,7.4,8.0,8.8。

其PH 值随温度变化很大。

一般来说,温度每升高一度,PH 值下降0.03。

EDTA:Ethylene Diamine Tetraacetic Acid 乙二胺四乙酸分子式: C10H16N2O8 分子量: 292.248 EDTA 是化学中一种良好的配合剂,它有六个配位原子,形成的配合物叫做鳌合物,EDTA 在配位滴定中经常用到,一般是测定金属离子的含量。

尿素:(脲碳酰胺; 碳酰二胺脲)尿素:脲; 碳酰胺碳酰二胺脲)Urea (分子式: CH4N2O 分子量: 60.05 尿素易溶于水,在20℃时100 毫升水中可溶解105 克。

SDS:dodecyl sulfate, sodium salt 十二烷基硫酸钠:分子式: C12H25SO4Na 分子量: 288.38 溶解性:溶于水,微溶于醇,不溶于氯仿、醚。

健康危害:对粘膜和上呼吸道有刺激作用,对眼和皮肤有刺激作用。

可引起呼吸系统过敏性反应。

SDS 是一种已知的能够使蛋白质变性的去污剂。

它用于确定蛋白分子量的聚丙烯酰胺凝胶电泳。

它也可以用于核酸抽提操作中破坏细胞壁及裂解核酸:蛋白复合物。

在乳液聚合反应中,可充当两相溶液的乳化剂。

DTT:DL-Dithiothreitol二硫苏糖醇分子式为C4H10O2S2,分子量为154.25 常用还原剂,有抗氧化作用,进口分装。

DTT 和巯基乙醇相比,作用相似,但DTT 的刺激性气味要小很多,毒性也比巯基乙醇低很多。

DTT 的用途之一是作为巯基化DNA 的还原剂和去保护剂。

巯基化DNA 末端硫原子在溶液中趋向于形成二聚体,特别是在存在氧气的情况下。

这种二聚化大大降低了一些偶联反应实验(如DNA 在生物感应器中的固定)的效率;而在DNA 溶液中加入DTT,反应一段时间后除去,就可以降低DNA 的二聚化。

生化试剂的基础知识详解.doc

生化试剂的基础知识详解.doc

生化试剂的基础知识——详解一、生化试剂的分类(―〉按照化学性质分类I.酶类:色括ALT,AST,ALP,ACP,r-GT,a-HBDH,LDH,CK,CK-MB,a-AMY,MSO,ADA,ChE 等。

2.底物/代谢产物类:包括TG,TC,HDL-C,LDL-C,UA,UREA,Cr,Glu,TP,Alb,T-Bil,TBA,NH4+,C02 等。

3.无机离子类:括Ca,P,Mg,CI等。

4.特种蛋白类:包括apoAI,apoB,Lp(a),C3,C4,PFB(B 因子),IgG,IgA,IgM 等。

(二>按照临床应用分类1. 无机离子:包括Ca, P,Mg,Cl等。

2. 肝功能:包括ALT, AST,r-GT, ALP, MSO, T-Bil, D-Bil, TBA, TP, Alb 等。

3. 肾功能:UA,UREA,Cr 等。

4•心肌酶谱:CK,CK-MB, LDH,a-HBDH, AST, MSO。

5.糖尿病:GUJ等。

6.前列腺疾病:ACP,p-ACP等。

7.胰腺炎:a-AMY…8.血脂:TC,TG, HDL-C,LDL-C,apoAl,apoB,Lp(a)。

9•痛风:UA010.有机磷中毒:ChE。

II•免疫性疾病:C3, C4, PFB(B 因子),IgG, IgA, IgM, Kappa 链,Lambda 链。

二、反应速度特性按照反应速度,可以分为终点法试剂和动力学试剂。

而动力学试剂乂可再分为零级动力学法和一级动力学法。

(一)终点法试剂终点法,桁经过一段时间(-•般为几分钟)的反应,反应进行到完全,使全部底物(被测物)转变成产物,称终点法,更确切地说应称平衡法,这是虽理想的分析类型。

如阁(1)。

图整个反应达到T衡,山于K叫反应的肀衡常数很大,可认为所打的被测定物己转变为产物,反应液的吸光度不PI增加(或降低).吸光度的増加(或降低)稈度与被测定物的浓度成正比。

终点法对反应条件(如酶萤、pH、温度)小的改变不敏感,只耍这种改变不影响在一定时间内反应达到平衡即可,是最理想的反应模型。

生物化学试剂(2024)

生物化学试剂(2024)

引言概述:生物化学试剂是在生物学,化学和医学研究中广泛应用的关键工具。

它们能够用于在实验室中模拟和研究生命系统的各种活动和过程。

生物化学试剂的种类繁多,涵盖了从基本的有机和无机化合物到高级的生物大分子和酶。

在本文中,我们将深入探讨生物化学试剂的相关知识,结合其在科学研究和临床应用中的重要性,以及一些常见的生物化学试剂的用途和特点。

正文内容:1.生物化学试剂的分类1.1有机化合物1.1.1碳水化合物1.1.2脂肪和类脂1.1.3氨基酸和蛋白质1.2无机化合物1.2.1盐类1.2.2酸碱试剂1.2.3金属离子试剂1.3生物大分子1.3.1DNA和RNA1.3.2蛋白质和多肽1.3.3酶和酶底物2.生物化学试剂在科学研究中的应用2.1分子生物学研究2.1.1DNA/RNA扩增和测序2.1.2蛋白质表达和研究2.1.3细胞培养和激素研究2.2生物化学分析2.2.1色谱和质谱分析2.2.2光谱分析2.2.3色素检测和酶动力学2.3细胞和组织学研究2.3.1细胞染色和显微镜技术2.3.2细胞培养试剂2.3.3组织切片和标记试剂3.生物化学试剂在临床应用中的意义3.1临床诊断3.1.1血液和尿液分析试剂3.1.2诊断试纸3.1.3病原体检测试剂3.2药物开发和治疗3.2.1新药筛选和优化3.2.2药物代谢和解毒试剂3.2.3药物载体和控释试剂3.3小分子治疗和检测3.3.1大肠杆菌和酵母菌表达系统3.3.2抗体和蛋白质纯化试剂3.3.3荧光和化学探针4.常见生物化学试剂的用途和特点4.1PCR试剂盒4.1.1DNA扩增和PCR技术4.1.2群体和个体基因分型4.1.3试剂盒配套和优化4.2蛋白质纯化试剂盒4.2.1亲和层析和凝胶过滤4.2.2基于柱的纯化方法4.2.3高效和选择性纯化试剂4.3免疫检测试剂盒4.3.1抗体检测和免疫组化4.3.2速度和灵敏度优势4.3.3背景噪声和特异性问题5.生物化学试剂使用的注意事项和质量控制5.1储存和保存5.1.1防潮和避光5.1.2冷冻和冷藏5.1.3分装和标记5.2试剂配制和稀释5.2.1纯化和分析方法5.2.2质量和浓度控制5.2.3标定和标准曲线5.3安全和环保意识5.3.1个人防护和实验室规范5.3.2废液处理和废弃物管理5.3.3试剂包装和运输标准总结:生物化学试剂作为科学研究和临床实践的重要工具,在促进生物学、化学和医学领域的发展方面发挥了至关重要的作用。

高中生物常用试剂及其作用

高中生物常用试剂及其作用

高中生物常用试剂及其作用1.斐林试剂:用于检测还原糖。

成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。

用法:将斐林试剂甲液和乙液等量混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,现配现用,水浴加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。

2.双缩脲试剂:用于检测蛋白质或者多肽(注意:氨基酸不和其发生作用)。

成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。

用法:向待测液中先加入1ml甲液,摇匀,再向其中加入3~4滴乙液,(先A后B,A大于B)。

摇匀。

如待测中存在蛋白质,则呈现紫色。

3.苏丹Ⅲ:用于检测脂肪。

可将脂肪染成橘黄色苏丹Ⅳ:用于检测脂肪。

可将脂肪染成红色4.碘液:用于鉴定淀粉的存在。

遇淀粉变蓝。

遇糖原变红5.二苯胺:用于鉴定DNA。

在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

6.班氏试剂:由A液(CuSO4溶液)B液(柠檬酸钠和NaCO3溶液)配制而成。

作用及检测原理与斐林试剂相似,但班氏试剂可长期使用。

7.甲基绿和吡罗红:甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。

8.健那绿:检测线粒体,专一性让线粒体染色呈蓝绿色,而细胞质接近无色。

活体染色剂9.龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色时,前者呈深蓝色,后者呈红色10.改良苯酚品红染液:检测染色体,红色11.溴麝香草酚蓝水溶液:检测CO2,由蓝变绿再变黄12.酸性重铬酸钾溶液:检测酒精,橙色变为灰绿色13.二氧化硅:在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入,可使研磨充分。

14.碳酸钙:研磨绿色叶片时加入,可中和有机酸,防止色素受破坏。

15.丙酮:用于提取叶绿体中的色素16.层析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93号汽油)可用于色素的层析,即将色素在滤纸上分离开17.0.3g/mL的蔗糖溶液:相当于30%的蔗糖溶液,比植物细胞液的浓度大,可用于质壁分离实验。

1生化试剂介绍

1生化试剂介绍

1生化试剂介绍生化试剂是一类用于生物化学、分子生物学、细胞生物学及其他生命科学研究领域的化学试剂。

它们一般用于检测、分析和测量生化过程中的分子、酶、蛋白质等,可用于生物标记、酶活性测定、DNA/RNA分离纯化、细胞培养、免疫分析等多个领域。

本文将对生化试剂的分类、功能以及常见应用进行详细介绍。

一、分类根据其功能与应用的不同,生化试剂可以分为许多不同的类别。

以下是一些常见的生化试剂分类:1.缓冲液和盐溶液:生化试剂常常用于调节酸碱度和离子浓度,以维持反应体系的平衡。

2.染料:用于检测和观察生物分子的染色试剂,如染蓝、染红等。

3.底物和试剂盒:用于测定特定酶活性的物质。

常见的底物有还原剂、显色剂等。

4.标准品和质控品:用于进行质量控制和标定仪器的标准物质。

5.抗体:特异性识别和结合特定抗原的蛋白质,广泛应用于免疫印迹、免疫组化等实验中。

6.酶:催化生物反应的蛋白质分子,如DNA酶、蛋白酶等。

7.DNA/RNA相关试剂:用于DNA/RNA的提取、纯化、扩增和测序等实验。

8.蛋白质相关试剂:用于蛋白质的提取、纯化、定量和研究。

二、功能与应用1.生物标记:如离子荧光染料、荧光素、生物素等,用于检测、定位和量化生物分子。

2.酶活性测定:通过添加特定的底物和试剂盒,测定酶的活性,以研究酶的性质和功能。

3.DNA/RNA提取与纯化:通过化学方法,可以从生物样本中提取DNA 或RNA,并经过纯化得到高质量的核酸样品。

4.细胞培养:提供细胞所需的培养基、添加剂和生长因子等,用于细胞的培养和增殖。

5.免疫分析:通过特异的抗体与抗原结合反应来检测和分析生物样本中的分子、蛋白质等。

6.分子诊断:通过分离、扩增和测序DNA/RNA,进行疾病的诊断、基因突变分析等。

三、常见应用生化试剂广泛应用于生命科学研究和医学诊断领域。

以下是一些常见的生化试剂应用:1.实验室研究:生化试剂常用于生物学、生物化学、分子生物学、遗传学等实验室的常规实验。

高中生物各种试剂及其应用总结

高中生物各种试剂及其应用总结

高中生物各种试剂及其应用总结高中生物实验中常用的试剂有很多种,它们在生物实验中具有各种不同的应用。

以下是对一些常见试剂及其应用的总结。

1. 盐溶液:盐溶液是生物实验中一种常用的试剂,它可以用于制备各种生理盐溶液、缓冲液和培养液等。

常见的盐溶液有氯化钠溶液、磷酸盐缓冲液等,它们在细胞培养、生物化学实验和分子生物学实验中起到重要的作用。

2. 酸碱溶液:酸碱溶液用于调节溶液的pH值,它对生物体内的酶活性和细胞功能具有重要影响。

常见的酸碱溶液有盐酸、硫酸、氢氧化钠等,它们可以用于制备酶解液、蛋白质电泳缓冲液等。

3. 酶:酶是生物体内参与生物化学反应的催化剂,它可以加速反应速率并降低反应所需的能量。

常见的酶有过氧化氢酶、葡萄糖氧化酶等,它们在生物化学实验中用于测定物质浓度、鉴定化合物等。

4. 蛋白质:蛋白质是生物体内重要的生物大分子,它们在细胞生物学和分子生物学实验中具有重要作用。

常用的蛋白质试剂有明胶、乳清蛋白等,它们可以用于制备凝胶、蛋白质电泳等。

5. DNA/RNA:DNA和RNA是生物体内储存遗传信息的核酸分子,它们在分子生物学实验中起到重要的作用。

常见的DNA/RNA试剂有聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖等,它们用于制备凝胶电泳、提取DNA/RNA等。

6. 染色剂:染色剂在生物实验中常用于染色和鉴定物质。

常见的染色剂有伊红、甲基绿等,它们在显微镜下用于染色细胞和组织。

7. 水:水是生物实验中最基础的试剂,它用于稀释试剂、制备溶液等。

在生物实验中,纯净水或去离子水是非常重要的试剂。

除了上述常用试剂外,还有许多其他的试剂在生物实验中被广泛应用,如抗体、脂质、酶底物等。

这些试剂在生物学研究中扮演着不可或缺的角色,它们能够帮助我们更好地理解生命的奥秘。

但是,在使用试剂时需要注意安全性和正确操作,遵守实验室的规章制度,确保实验的顺利进行。

总而言之,高中生物实验中使用的试剂种类繁多,每一种试剂都有其特定的应用。

了解并正确应用这些试剂对于生物实验的进行和结果分析至关重要。

生物化学检验试剂总结

生物化学检验试剂总结

生物化学检验试剂总结生物化学检验试剂总结一、引言生物化学检验试剂在现代医学和生物研究中起着至关重要的作用。

它们被广泛应用于疾病的诊断、研究的实验室工作以及药物开发等领域。

本文将总结常见的生物化学检验试剂,包括常规试剂、特殊试剂和新型试剂,并介绍其应用领域和特点。

二、常规试剂1. 比色试剂比色试剂主要用于测定生化指标,如葡萄糖、蛋白质、尿素等。

常见的比色试剂有本果试剂、费林试剂和尼龙试剂等。

本果试剂主要用于葡萄糖的测定,其原理是通过和葡萄糖发生化学反应,产生带有颜色的化合物,利用比色法测定其浓度。

2. 免疫学试剂免疫学试剂用于检测血清中的抗体和抗原,常见的试剂有酶标法试剂、荧光试剂和放射性同位素试剂等。

酶标法试剂是一种免疫学试剂中使用最广泛的方法,其原理是通过将抗体或抗原标记上特定的酶,然后利用酶的催化作用测定样本中抗体或抗原的浓度。

3. 酶试剂酶试剂主要用于测定酶的活性或酶在生物体内的含量,常见的试剂有还原型辅酶、底物和酶抑制剂等。

还原型辅酶是一种用来传递电子的小分子,通过与底物和酶发生反应,可以测定酶的活性。

酶抑制剂能够抑制特定酶的活性,起到分析和研究酶功能的作用。

三、特殊试剂1. 分子生物学试剂分子生物学试剂主要用于DNA和RNA的分析和操作,常见的试剂有DNA聚合酶、限制性内切酶和荧光染料等。

DNA聚合酶是一种用来合成DNA的酶,广泛应用于PCR反应和DNA文库构建等实验中。

限制性内切酶能够识别DNA上的特定序列并切割,用来进行DNA的重新组装和重组。

荧光染料用于可视化DNA分子或蛋白质的表达,可以通过荧光显微镜或流式细胞术进行观察。

2. 细胞培养试剂细胞培养试剂主要用于细胞的培养和增殖,常见的试剂有细胞培养基、培养补充物和细胞分裂抑制剂等。

细胞培养基提供细胞生长所需的营养物质和环境,是细胞培养的基础。

培养补充物含有细胞生长和增殖所需的生长因子和激素。

细胞分裂抑制剂能够抑制细胞的分裂和增殖,常用于细胞周期研究和药物筛选等实验中。

生化试剂的基础知识详解

生化试剂的基础知识详解

生化试剂的基础知识——详解一、生化试剂的分类(一)按照化学性质分类1.酶类:包括ALT,AST,ALP,ACP,r-GT,α-HBDH,LDH,CK,CK-MB,α-AMY,MSO,ADA,ChE等。

2.底物/代谢产物类:包括TG,TC,HDL-C,LDL-C,UA,UREA,Cr,Glu,TP,Alb,T-Bil,TBA,NH4+,CO2等。

3.无机离子类:包括Ca,P,Mg,Cl等。

4.特种蛋白类:包括apoAl,apoB,Lp(a),C3,C4,PFB(B因子),IgG,IgA,IgM等。

(二)按照临床应用分类1.无机离子:包括Ca,P,Mg,Cl等。

2.肝功能:包括ALT,AST,r-GT,ALP,MSO,T-Bil,D-Bil,TBA,TP,Alb等。

3.肾功能:UA,UREA,Cr等。

4.心肌酶谱:CK,CK-MB,LDH,α-HBDH,AST,MSO。

5.糖尿病:GLU等。

6.前列腺疾病:ACP,p-ACP等。

7.胰腺炎:α-AMY。

8.血脂:TC,TG,HDL-C,LDL-C,apoA1,apoB,Lp(a)。

9.痛风:UA。

10.有机磷中毒:ChE。

11.免疫性疾病:C3,C4,PFB(B因子),IgG,IgA,IgM,Kappa链,Lambda链。

二、反应速度特性按照反应速度,可以分为终点法试剂和动力学试剂。

而动力学试剂又可再分为零级动力学法和一级动力学法。

(一)终点法试剂终点法,指经过一段时间(一般为几分钟)的反应,反应进行到完全,使全部底物(被测物)转变成产物,称终点法,更确切地说应称平衡法,这是最理想的分析类型。

如图(1)。

整个反应达到平衡,由于正向反应的平衡常数很大,可认为所有的被测定物已转变为产物,反应液的吸光度不再增加(或降低),吸光度的增加(或降低)程度与被测定物的浓度成正比。

终点法对反应条件(如酶量、pH、温度)小的改变不敏感,只要这种改变不影响在一定时间内反应达到平衡即可,是最理想的反应模型。

生化试剂产品及临床意义介绍(1)

生化试剂产品及临床意义介绍(1)
• 升高:Hodgkin病(恶性淋巴瘤的一种独
特类型 )
胆红素代谢检查
胆红素主要是在网状内皮系统中,由衰
老RBC的血红蛋白分解后形成 生成后在血液中与白蛋白聚合,此时尚 未与其它化合物结合,称为非结合胆红 素(间接胆红素IBIL或游离胆红素) 非结合胆红素被转运到肝脏,经肝细胞 摄取后,通过肝脏的生物转化作用,与 葡萄糖醛酸结合后 称为结合胆红素(直 接胆红素DBIL)
血清前白蛋白测定
免疫比浊法
标本中PAB与特异性抗体反应形成不溶性
复合物,可在340nm测定该复合物的浊度, 与同样处理的标准品比较,得出标本中 PAB的含量。
临床意义
• 降低:见于慢性感染、肿瘤、肝炎、肝
硬化、肝癌,(因为半衰期比ALB短,PA 的变化远较ALB敏感),故对早期肝炎、 急性重肝具有特殊诊断价值
申报中
5’-NT LDH1 GPDA C3 AFP C4 NAG IgA CSF IgG CYS-C IgM MALB TRF HbA1c D3-H ACE
生化试剂分类:
酶类:
AMY,CK,CK-MB,HBDH,LDH,LDH1,ALT,AST,ALP,GGT,AFU,CHE, 5’-NT,ADA,NAG,ACE,GPDA
白、糖蛋白、凝血因子、纤溶因子及各种转运蛋白等 都由肝细胞合成,当肝细胞受损时,合成上述蛋白的 功能降低,蛋白质的合成量就减少; -球蛋白虽然不是肝细胞合成,但当肝实质细胞受损, 间质细胞增生时,球蛋白的生成增加; 因此,在肝脏疾病时,可表现出血液中蛋白质质和量 的改变; 其主要表现为白蛋白减少,纤维蛋白原减少,球蛋白 的增多等; 因此,测定血清中蛋白质含量和分析其组分的变化, 可以了解肝脏蛋白质代谢的功能。

常用生化试剂作用

常用生化试剂作用

常用生化试剂作用:1、蛋白酶K:能水解消化蛋白质,特别是与DNA结合的组蛋白,在尿素和SDS中稳定。

一般工作浓度是50—100μg/ml,推荐反应缓冲液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。

2、SDS:十二烷基硫酸钠,溶解细胞膜上的脂类与蛋白质,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜,并解离细胞中的核蛋白,SDS 还能与蛋白质结合而沉淀。

3、IPTG:异丙基-β-D-硫代半乳糖苷,常用于蓝白斑筛选及IPTG 诱导的细菌内的蛋白表达等。

IPTG和乳糖的结构相似,所以它和乳糖一样,可以与乳糖操纵元的阻遏蛋白结合,使阻遏蛋白的空间构像变化,四聚体解聚成单体,失去与操纵子特异性结合的能力,从而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以转录合成利用乳糖的酶类。

与乳糖不同的是,IPTG不被β-半乳糖苷酶水解。

常与X-GAL一起用于蓝白斑筛选。

作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定。

4、X-gal:5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,是IPTG的显色试剂,在IPTG的催化下显蓝色。

常跟IPTG一起用与蓝白斑筛选。

5、G418:一种抗生素,对几乎所有的细胞都有毒性,是稳定转染最常用的选择试剂。

当neo基因被整合进真核细胞基因组合适的地方后,则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达,使细胞获得抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长。

G418的这一选择特性,已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。

6、DMSO:二甲基亚砜。

实验室常用于作液体层析溶剂,同时用作测试物质紫外消光值上时用作参照物。

能溶于所有烷烃和烯烃。

7、曲拉通X-100:TritonX-100,用的细胞裂解液成分之一,在保护蛋白活性方面有一定作用,能力介于NP40和SDS之间,偏向于NP40。

8、NP-40:很温和的去垢剂,1%浓度的基本可以破坏掉胞膜,而对核膜破坏的作用弱,结合特定的buffer可以获得胞浆蛋白。

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考核生化试剂的种类及意义一、血脂类检查项目(4项)1.总胆固醇(CHO)参考值:0~5.2mmol/L(90~200mg/dL)高胆固醇血症与动脉粥样硬化的形成有明确关系,血液胆固醇增高多见于甲状腺功能减低,糖尿病等;胆固醇降低见于营养不良,肝功能严重低下等。

血清胆固醇的测定可用作肝脏功能、胆汁功能、肠吸收功能和冠状动脉疾病的诊断指标。

它在高脂蛋白血症的诊断和分类方面也有着重要的意义。

血清总胆固醇超过5.70mmol/L可考虑为高胆固醇血症,高胆固醇血症容易引起动脉粥样硬化,造成堵塞性心脑血管疾病,病理性高胆固醇血症见于肾病综合症、糖尿病、甲状腺功能减退。

胆固醇降低常见于:贫血、肝硬化、甲亢、营养不良等。

因此,胆固醇的测定对于血脂疾病的诊断具有重要的临床意义。

2.甘油三酯(TG)参考值:0.7~1.7mmol/L高甘油三酯血症为心血管疾病的危险因素,降低则见于甲状腺功能亢进,肝功能严重低下等。

测定甘油三酯的重要意义在于诊断和处理高脂血症。

这些疾病可能是原发性的,或是继发于其它疾病如肾病、糖尿病和内分泌失调。

甘油三酯增高常见于:高脂血症、肾病综合症、糖尿病、肝胆疾病、动脉粥样硬化、甲减等。

甘油三酯降低常见于:严重营养不良、脂肪消化吸收障碍、甲亢。

甘油三酯升高已被证实是冠状动脉硬化性心脏病的危险因素。

因此,甘油三酯的测定是对于血脂疾病的诊断具有重要的临床意义。

3.高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)参考值:0.77~2.25mmol/L(47~65mg/dl)降低见于急、慢性肝病,糖尿病,慢性贫血等高密度脂蛋白胆固醇的主要生理功能是转运磷脂和胆固醇,它是一种抗动脉粥样硬化的脂蛋白,是冠心病的保护因子,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量与动脉管腔狭窄程度呈显著的负相关。

临床上以不同种类脂蛋白比例的分析作为不同类型的高脂蛋白症的鉴别诊断。

高密度脂蛋白胆固醇增高常见于:饮酒、长期体力活动等。

高密度脂蛋白胆固醇降低常见于:冠心病、脑血管病、糖尿病、肝炎、肝硬化等。

4.低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)参考值:1.27~4.13mmol/L(80~120mg/dl)低密度脂蛋白胆固醇用于冠心病和动脉粥样硬化的诊断。

动脉粥样硬化(AS)斑块中沉淀的脂质主要是低密度脂蛋白(LDL),在各类脂质中,LDL被认为是主要的致病因素,而高密度脂蛋白(HDL)可能起保护作用,血清总胆固醇(TC)大致反映LDL胆固醇(LDL-CHO)水平,但也受HDL-C水平的影响,因此在AS脂类危险因素判别中,TC偏高时,测定LDL-C有重要临床意义。

二、肝功类检查项目(8项)1.碱性磷酸酶(ALP)参考值:45~135U/L是监测胎盘功能状况的指标。

碱性磷酸酶几乎存在于人体的各个组织中,以骨骼、肾脏和肝脏中含量较多。

其病理性变化表现在:升高:阻塞性黄疸、急慢性黄疸性肝炎、肝癌、纤维性骨炎、佝偻病、骨转移癌等。

降低:呆小症、维生素C缺乏症等。

2.γ-谷氨酰转移酶(GGT)参考值:男≤47U/L 女≤32U/LGGT升高是乙醇中毒的敏感指标。

γ-谷氨酰氨基转移酶(γ-GT)存在于肾、胰、肝脏和前列腺、盲肠、脑中,血清中γ-谷氨酰转肽酶主要来源于肝、胆系统,因此,当肝胆发生疾病或损伤时,如:阻塞性黄疸、胆汁性肝硬变、胆管炎、胆囊炎时,其活性显著增高;胰腺癌、乏特壶腹癌时,其活性亦显著增高,同时饮酒、服药等亦可引起γ-谷氨酰转肽酶活性升高。

因此,γ-谷氨酰转肽酶的测定对于肝胆疾病的检测具有重要的临床意义。

3.天门冬氨酸氨基转移酶(AST)参考值:女性<31 U/L 男性<40U/L临床测定AST主要用于诊断急性心肌梗塞,肝细胞及骨骼肌疾病。

天门冬氨酸氨基转移酶(AST)又称谷草转氨酶(GOT),主要存在于各组织细胞中,肝、骨胳肌和肾脏含有相似的AST量。

AST在心肌细胞中较多,当心肌梗塞时,血清中AST活力增高,在发病后6-12h之内显著增高,增高的程度可反映损害的程度,并在发作后48h达到最高值。

约3-5d后恢复正常。

各种肝病时AST可增高,肝病早期和慢肝增高不明显,AST/ALT比值小于1;严重肝病和肝病后期(活动性慢肝)增高,此时AST/ALT比值大于1。

其它如心肌炎、肾炎及肺炎等也可使AST轻度增高。

天门冬氨酸氨基转移酶主要用于诊断心肌梗塞、中毒性肝炎、肝癌、骨骼肌疾病等。

因此,天门冬氨酸氨基转移酶的测定对心脏、肝脏疾病的检测具有重要意义。

4.丙氨酸氨基转移酶(ALT)参考值:女性<31 U/L 男性<41U/LALT活性增高见于急性病毒性肝炎,骨骼肌等组织坏死等。

丙氨酸氨基转移酶(ALT)又称谷丙转氨酶(GPT),在肝脏中有较高的浓度,而在肾、心、骨胳肌、胰、脾、肺脏中则含量较少。

通常ALT的升高由某些与肝脏有关的疾病引起,包括: 肝硬化、肝癌、病毒性或中毒性肝炎和阻塞性黄疸;ALT升高也见于广泛损伤和肌肉疾病,伴有休克、氧不足的循环衰竭,心肌梗塞和溶血性疾病。

丙氨酸氨基转移酶活性的测定对以上疾病的诊断具有重要的价值。

5.总蛋白(TP)参考值:60~88g/L浓度升高:各种原因失水所致血液浓缩;多发性骨髓瘤等单克隆性免疫球蛋白病;系统性红斑狼疮等。

浓度降低:体内水分过多,各种渠道的蛋白丢失,如肾病综合症;营养不良消耗增加,如肿瘤;蛋白合成障碍,如肝功能受损等。

总蛋白降低,常伴随着白蛋白降低,常见于肝功能严重受损、烧伤、大出血、肾病综合症、溃疡性结肠炎、营养不良等。

合成缺陷、营养不良、蛋白质吸收障碍、蛋白质丢失综合症。

总蛋白增高常见于多发性骨髓瘤、急性脱水、外伤性休克、慢性肾上腺皮质功能减退等。

6.白蛋白(ALB)参考值:35~55g/L高白蛋白血症偶见于脱水所致的血液浓缩;急性降低见于严重烧伤与大量出血;慢性降低见于肝功能受损,结核慢性失血等。

白蛋白降低,常伴随着总蛋白降低,常见于营养不良、慢性胃肠道疾病等,糖尿病、甲状腺功能亢进、高烧、外伤等可造成蛋白消耗过多,高白蛋白血症则常见于脱水或血液浓缩。

7.总胆红素(TBIL)参考值:新生儿24h内<150μmol/L 成人:0~20.0μmol/L降低常见于严重肝衰竭病人。

总胆红素增高临床上表现有黄疸,超过20.1μmol/L时有临床意义;增高到34.2μmol/L表现出黄疸体征。

红细胞大量破坏、胆道阻塞、肝脏疾病,均可导致血中胆红素增高而引起黄疸。

因此,总胆红素的测定对有无黄疸及黄疸深度的鉴别、肝细胞损害程度和预后的判断等具有重要的临床意义。

血清总胆红素降低见于:再生障碍性贫血、慢性肾炎等。

8.直接胆红素(DBIL)参考值:0~8.8μmol/L直接胆红素测定是常用肝功能试验之一,直接胆红素增高临床上多见于肝细胞受损、肝内外胆道阻塞、代偿性肝硬化、急性黄疸肝萎缩等疾病。

因此,直接胆红素的测定对于对溶血性黄疸、新生儿黄疸、肝脏疾病的的诊断具有重要的临床意义。

三、肾功检查项目临床意义(3项)1.尿素(UREA)参考值:血清/血浆1.7~8.3mmol/L(尿素氮5~23mg/dL)浓度升高可引起三类氮质血症:肾前性氮质血症,肾性氮质血症,肾后性氮质血症.浓度降低一般见于婴儿,孕妇等,无意义.尿素氮增高可见下列三种情况:(1)肾性增高见于急性肾炎、慢性肾炎、中毒性肾炎、严重肾盂肾炎、肾结核、肾血管硬化症、先天性多囊肾和肾肿瘤等引起的肾功能障碍。

尤其是对尿毒症的诊断有特殊价值,其增高程度与病情严重性成正比,如氮质血症期UREA超过9mmol/L,至尿毒症期UREA可超过20mmol/L,有助于病情的估计。

(2)肾前性增高见于充血性心力衰竭、重度烧伤、休克、消化道大出血、脱水、严重感染、糖尿病酸中毒、肾上腺皮质功能减退、肝肾综合征等。

(3)肾后性增高见于因尿路梗阻增加肾组织压力,使肾小球滤过压降低时,如前列腺肥大、肿瘤压迫所致的尿道梗阻或两侧输尿管结石等。

减少:临床意义较小,偶见于急性肝萎缩、中毒性肝炎、类脂质肾病等。

尿素浓度降低常见于:严重的肝坏死。

2.尿酸(UA)参考值:血清/血浆女性140~360μmol/L,男性200~480μmol/L;尿液:≤4.76mmol/24h浓度升高多见于痛风,白血病等,肾功能受损也会增高,但不作为指标;降低见于剥脱性皮炎等.尿酸增高:血尿酸测定对痛风诊断最有帮助,痛风患者血清中尿酸常增高。

核酸代谢增加:如白血病、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症。

肾脏疾病:急性或慢性肾炎时,血中尿酸显著增高,其增高程度较非蛋白氮、尿素氮、肌酐更显著,出现更早。

由于肾外因素对尿酸的影响较大,故血尿酸升高程度往往与肾功能损害程度不平行。

其他:氯仿中毒、四氯化碳中毒、铅中毒、子痫、妊娠反应、饮食中脂肪过多、肥胖、糖尿病等。

尿酸减少:遗传性黄嘌呤尿症和剥脱性皮炎等。

3.肌酐(CR)参考值:苦味酸法:血清/血浆女性53~97μmol/L,男性80~115μmol/L;尿液女性97~177μmol/24h,男性124~230μmol/24h酶法:血清/血浆女性44 - 106umol/L,男性53-123 umol/L;首次晨尿:1530-15320umol/L;24小时尿:6.6-15.0mmol/d;肌酐浓度反应肾脏损害、尿路通畅性等肾功能,是一项比尿素尿酸更特异的肾功能指标,受饮食等因素的影响较少,与疾病严重性平行.血浆肌酐浓度反映肾脏损害、肾小球滤过率、尿路通畅性等肾功能,是一项比尿素、尿酸更特异的肾功能指标。

因为肌酐浓度受饮食、运动、激素、蛋白质分解代谢等因素的影响较少。

肾脏代偿与储备能力强,只有肾功能明显受损才使肌酐浓度升高。

肌酐增高:肾病初期肌酐值常不高,直至肾实质性损害,血肌酐值才升高。

其值升高3~5倍提示有尿毒症的可能,升高10倍,常见于尿毒症。

如果肌酐和尿素氮同时升高,提示肾严重损害,如果尿素氮升高而肌酐不高常为肾外因素所致。

肌酐降低:肾衰晚期、肌萎缩、贫血、白血病、尿崩症等。

肌酐含量的测定常用于肾功能的评价。

四、糖代谢检查项目临床意义(1项)1.葡萄糖(GLU)参考值:3.9~6.4mmol/L病理性增高常见于胰岛功能低下,脑震荡,脑溢血等;病理性减低见于呆小症,长期营养不良,酒精中毒等。

生理性高血糖:见于饭后1~2小时;摄入高糖食物后或情绪紧张肾上腺素分泌增加时。

病理性高血糖:内分泌腺功能障碍引起高血糖;颅内压增高,颅内压增加刺激血糖中枢使血糖水痘升高;脱水引起高血糖;如呕吐、腹泻和高热等也可使血糖轻度升高麻醉、感染性疾病、毒血症、抽搐、胰腺炎、胰腺癌等情况下也可出现高血糖。

生理性低血糖:见于饥饿和剧烈运动。

病理性低血糖:对抗胰岛素的激素分泌不足,如垂体前叶功能减退、肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使生长素、肾上腺皮质激素分泌减少;严重肝病患者,由于肝脏储存糖原及糖异生等功能低下,肝脏不能有效地调节血糖。

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