08-09基因工程试卷(A)

安徽农业大学2008―2009学年第一学期《基因工程原理》试卷（A 卷）

考试形式: 闭卷，2小时，总分100分

一大题：填空题（共8小题，每空1分，共20分）

1. 1970 年,Smith 和Wilcox 从流感嗜血杆菌中分离到第一

个Ⅱ类限制性内切核酸酶，这个酶后来被命名为 H indⅡ ；而第

一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是 EcoR Ⅰ。

2. Ⅱ类限制性内切核酸酶仅有内切核酸酶活性，而没有 甲基化酶

活性，作用时需要 Mg2+ 作为辅助因子。

3. 原核生物主要有两种类型的DNA 连接酶： E.coli DNA

连接酶和 T4 DNA 连接酶。正常情况下只有 T4 DNA 接平末端的双链DNA 。

4. 受体细胞的感受态是 接受外源DNA 的生理状态 ，诱导处理

E.coli 通常采用的化学试剂是 CaCl 2 。

5. 两个天然

质粒pSC101和ColE1分别是 严紧型 和

松弛型个作为重组DNA 载体的质粒是 PSC101

6. pBR322质粒具有 四环素 和 氨苄青霉素 两种抗性

基因，而pUC 系列的载体仅有 氨苄青霉素 抗性基因。

7. 在分离提取DNA 的过程中，通常使用金属离子螯合剂EDTA ，其目

的是 螯合Mg 2+离子，抑制核酸酶的活性； ，而使用异戊醇

的作用是 减少气泡 ，促进分相

8.在Southern印迹中，DNA转移的速度主要取决于 DNA片段大小

和琼脂糖凝胶浓度。

1.因研究重组DNA技术而获得诺贝尔奖的科学家是（ A ）。

（a）P．Berg （b）W．Gilbert （c）A．Kormberg （d）B．McClintock 2. 关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有（B ）不太恰当。

（a）由作用于同一DNA序列的两种酶构成

（b）这一系统中的核酸酶都是Ⅱ型限制性内切核酸酶

（c）这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰（d）不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统

3. 限制性内切核酸酶可以特异性地识别和切割（B ）。

（a）双链DNA的特异碱基对（b）双链DNA的特异碱基序列（c）特定的三联密码（d）以上都正确

4. 限制性内切核酸酶的星号活性是指（ A ）。

（a）在非常规条件下，识别和切割序列发生变化的活性

（b）活性大大提高

（c）切割速度大大加快（d）识别序列与原来的完全不5. 下列限制性内切核酸酶中，选用（ B ）时要考虑连接后外源DNA 的插入方向。

（a）Eco RⅠ（b）Eco RⅡ（c）Bam HⅠ（d）PstⅠ6. 下列工具酶中，那一种可以被EGTA抑制活性（ B ）？

（a）S1核酸酶（b）Bal 31核酸酶

（c）末端转移酶（d）碱性磷酸酶

7. 用碱法分离质粒DNA时，因为（ C ）所以可以被除去。

（a）染色体DNA断成了碎片

（b）染色体DNA分子量大，而不能释放

（c）染色体DNA变性后来不及复性

（d）染色体末同蛋白质分开而沉淀

8. DNA连接酶的主要作用是在DNA复制、修复中封闭缺口，（ A ）。

（a）将双链DNA中的5′-P同3′-OH末端重新形成磷酸二脂键

（b）作用时不消耗能量

（c）需要Mn2+等二价辅助离子

（d）也可以连接RNA分子

9. 关于穿梭质粒载体，下面哪一种说法最正确？（ B ）

（a）在不同的宿主中具有不同的复制机制

（b）在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点

（c）在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶

（d）在不同的宿主细胞中具有不同的复制速度

10.关于噬菌斑筛选法的原理，下面哪一种说法不正确？（ C ）

（a）噬菌斑颜色的变化（b）cI基因失活造成噬菌斑的变化（c）对IPTG的分解能力（d）对Xgal的分解与否

11.在利用lacZ失活的显色反应筛选中，IPTG的作用是（ A）。

（a）诱导宿主的α肽的合成（b）诱导宿主的ω肽的合成（c）作为酶的作用底物（d）作为显色反应的指示剂12.在切口移位标记DNA探针时只能使用（ B）。

（a）Klenow酶（b）DNA聚合酶Ⅰ

（c）T4 DNA聚合酶（d）T7 DNA聚合酶

13.用下列方法进行重组体的筛选，只有（ C ）说明外源基因进行

了表达。

（a） Southern印迹杂交（b）Northern印迹杂交

（c） Western印迹杂交（d）原位菌落杂交

14.用免疫化学法筛选重组体的原理是（ D ）。

（a）根据mRNA同DNA的杂交（b）根据DNA同DNA的杂交（c）根据载体基因的表达（d）根据外源基因的表达15. 限制性内切核酸酶Eco RⅠ、Bam HⅠ和Hin dⅢ在野生型的λ噬菌体

DNA中有多个酶切位点，删除这些酶切位点的数量，主要通过（ A ）。

（a）体内突变（b）完全酶切后连接

（c）部分酶切（d）先用甲基化酶修饰后再酶切

1.D NA多态性就是限制性片段长度多态性。（错）

2.在限制与修饰系统中，修饰主要是甲基化作用，一旦位点被甲基化

了，其他的限制酶就不能切割了。（错）

3. E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶作用时都需要ATP和NAD+作为

辅助因子。（错）

4.用产生不同黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源DNA

片段，得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。（错）