临床生物化学习题

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临床生物化学习题

1双缩尿法测血清白蛋白:

原理:血清中蛋白质的肽键在碱性溶液中能与2价铜离子作用生成稳定的紫红色络合物,此反应和2个尿素分子缩合后生成的双缩尿在碱性溶液中与铜离子形成紫红色的反应相似,故称之双缩尿反应。这种紫红色络合物在540nm处有明显吸收峰,吸光度在一定范围内与血清总蛋白含量成正比,经与同样处理的蛋白质标准也比较,即可得到蛋白质的含量。

临床意义:

1)血清总蛋白浓度降低

A蛋白质合成障碍:当肝功严重受损时,蛋白质合成减少,以减轻蛋白降低最为显著

B蛋白质丢失增多:严重烧伤,大量血浆渗出;大出血;肾病综合征尿中长期丢失蛋白质;溃让性结肠炎可以从粪便中长期丢失一些蛋白质

C营养不良或消耗增加:营养失调,低蛋白饮食,维生素缺乏症或慢性肠道疾病所引起的吸收不良是体内缺乏合成蛋白质的原料;长期换消耗病可导致血清总蛋白浓度降低

D血浆稀释:如静脉注射过多低渗溶液或各种原因引起的水钠瀦流

2升高A蛋白质合成增加:建元多发性骨髓瘤,是异常球蛋白增加,是血清总蛋白增加B血浆浓缩:如急性脱水,外伤性休克

注意事项:

A黄疸血清,严重溶血;葡萄糖,酚酞,溴磺酞钠对本法有明显的干扰,故用标准空白管来消除。但标本空白管吸光度太高,可影响测定的准确度B高脂血症浑浊血清会影响比色,消除用:取2支离心管,各加待测血清0.1ml,再加蒸馏水0.5ml和丙酮10ml,倾去上清液,将是试管倒立于滤纸上吸取残余液体。想沉淀中分别加入双缩尿试剂及双缩尿空白试剂,在计算C本法也可用于血清总蛋白浓度的标准化,操作步骤完全与测定表本是相同,但显色温度需控制在(25+-1)度的范围内,以及使用经矫正的高级分光光度计进行比色,计算血清总蛋白(g/l)=? 2血清葡萄糖氧化酶法测定

原理:葡萄糖氧化酶利用水和氧将葡萄糖氧化成葡萄酸,并释放过氧化氢,过氧化物酶在色原性氧受体存在时将过氧化物分解为水和氧,并将色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物,即Trinder,红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比

临床意义:

1)生理性高血糖可见于摄入高糖食物后,或情绪紧张肾上腺分泌增加时

2)病理性高血糖

A糖尿病:常见于胰岛素绝对或相对不足的糖尿病患者

B内分泌功能障碍:甲状腺功能亢进,肾上腺皮质功能及髓质功能亢进及对抗胰岛素分泌过多会出现高血糖,

C颅内压增高:颅内压增高刺激血糖中枢

D脱水引起的高血糖:如呕吐,腹泻等也可引起血糖增高

3)生理性低血糖:见于饥饿和剧烈运动4)病理性低血糖:特发性功能性低血糖多见,依次为药源性,肝原性,胰岛素瘤

A胰岛B细胞增生,使胰岛素分泌过多

B对抗胰岛素的分泌不足,如垂体前叶机能减退使生长素,肾上腺皮质激素分泌较少C严重肝病患者,由于肝脏储存糖原及糖原异生等功能减低,肝脏不能有限的调节血糖注意事项:

A新配置的葡萄糖标准液主要是a型,故需放置2h以上,待变旋平衡后方使用

B葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液葡萄糖含量,但不能直接测定尿液葡萄糖含量。因为尿液中尿酸等干扰物质浓度过高,可干扰过氧化物酶反应,造成结果假性偏低

C测定标本以草酸钾-氟化钠为抗凝剂的血浆较好

D本法用血量终甚微,操作中应直接加标本至试剂中,再吸试剂反复冲洗吸管,以保证结果可靠

E严重黄疸,溶血及乳糜样血清应先制备无蛋白血滤液,然后再进行测定

邻甲苯胺法测定血清葡萄糖

原理:在热的醋酸溶液中,葡萄糖醛基与邻甲苯胺缩合,脱水生成希夫氏碱,经分子重

拍生成蓝绿色化合物,其颜色深浅在一定范围内与血糖浓度成正比。

临床意义:同氧化酶法

注意事项:1、邻甲苯胺为浅黄色油状液体,易氧化。2、邻甲苯胺在冰醋酸中并不十分稳定,易氧化产生棕色物质而干扰比色,故在邻甲苯胺试剂中加入硫脲,使试剂有氧化作用,减少棕色干扰,增加试剂的稳定性,降低空白管的吸光度,并有一定的增色效应。3、沸水浴时废水一定要盖过管内的液面,否则温度不均匀,影响显色。

乙酰丙酮显色发测定血清甘油三酯(TG)原理:血清甘油三酯经过正庚烷-异丙醇混合溶剂抽提,用氢氧化钾皂化生成甘油,在过点算的作用下甘油被氧化为甲醛,当有铵离子存在时,甲醛和乙酰丙酮发生缩合反应生成带荧光的黄色物质即3,5-二乙酰-1,4二氢二甲基吡啶,反应液颜色的身前与TG浓度成正比。

临床意义:1、血清TG增高常见于家族性脂类代谢紊乱、肾病综合症、糖尿病、甲状腺功能减退,急性胰腺炎、糖原累积病、单道梗阻、原发性甘油三酯增高症、动脉粥样硬化等。2、血清TG降低比较少见,慢性梗阻性肺疾病、脑梗死、甲状腺功能亢进症、营养不良和消化吸收不良综合征等可引起血清TG的降低。

注意事项:显色后吸光度随时间延长会有一定量的增高,故加样后要立即比色,当标本过多时,可置冰箱中逐管进行比色。

血清胆固醇测定TC

原理:胆固醇酯+H2O----(上胆固醇,下酸酶)胆固醇+游离脂肪酸

胆固醇+O2----(胆固醇氧化酶)三角号4-胆甾烯酮+H2O

2H2O2+4-氨基安替比林和酚-------(POD)醌亚胺+4H2O

临床意义:1、TC增高:常见于动脉粥样硬化、原发性高脂血症、糖尿病、肾病综合症、总胆管阻塞、甲状腺功能减退、肥大性骨关节炎、老年性白内障和牛皮癣。

2、TC降低:常见于地址蛋白血症,贫血,败血症,甲状腺功能亢进,肝脏疾病,严重感染,营养不良,肠道吸收不良和药物治疗过程中的溶血性黄疸及慢性消耗性疾病,如癌症晚期。

注意事项:试剂中酶的质量影响到测定结果还原钼蓝法测定血清磷

原理:磷和钼酸铵在酸性溶液中生成磷钼酸复合物,对甲氨基酚硫酸盐还原生成钼蓝,与同样处理的标准液进行比色,可求的血磷的含量。试剂中加入聚山梨酯-80以抑制蛋白质干扰。

临床意义

血清磷增高见于:(1)甲状旁腺机能减退,由于肾小管对磷的重吸收增强使血磷增高。(2)排泄障碍:慢性肾炎晚期、尿毒症等磷酸盐排泄障碍而使血磷滞留(3)维生素D过多,促使肠道的钙磷吸收,使血清钙磷含量增高。(4)多发性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病及骨折愈合期等可使血磷增高。

血磷降低见于:(1)甲状旁腺机能亢进时,肾小管重吸收受抑制,尿磷排出增多,血磷降D低(2)维生素D缺乏所致的软骨病与佝偻病伴有继发甲状腺增生,使尿磷排泄增多,而血磷降低。(3)碳水化合物吸收利用时,葡萄糖进入细胞内被酸化,磷可降低。(4)肾小管变性病变时,肾小管重吸收磷功能障碍,血磷偏低;长期服用制酸类药物可生成不溶性磷酸盐,吸收障碍,可是血磷降低。

注意事项:血标本采用血清或肝素抗凝血。应避免使用枸橼酸钠、EDTA和草酸盐作抗凝剂。标本避免溶血。米吐尔试剂宜少量配置,放置时间不宜过长。

二乙酰一呜测定血清尿素

原理二乙酰一呜+水----酸性---二乙酰+羟胺二乙酰+尿素----酸性,加热----二嗪化合物(粉红色)

临床意义:血液尿素浓度增高分生理因素和病理性因素

生理因素:高蛋白饮食引起血清尿素浓度和尿液排出量增高。血清尿素浓度男性比女性高0.3~0.5mmol/L,并随着年龄增加有增高倾向。成人日间生理变异平均0.63mmol/ L.

病理因素:(1)肾前性:最重要的原因是失水,因血液浓缩是肾血流量减少,肾小球滤过率减低致血液尿素浓度增加。见于剧烈呕

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