培养基模拟灌装试验进度计划表(无菌粉末分装粉针剂)
培养基模拟灌装无菌生产工艺验证规划方案
审批部门姓名签字日期起草人质量管理部起草人生产技术部起草人针剂车间审察人针剂车间审察人生产技术部审察人质检中心审察人质量管理部赞同人质量负责人发散部门：培养基模拟灌装（小容量注射剂）无菌生产工艺考据小组一、归纳厂区无菌操作生产线，按2010 版 GMP及其附录要求进行设计，是专用于小容量注射剂非最后灭菌产品生产使用。
某某产品因无法进行F0≥8 分钟湿热灭菌，以达到SAL≤ 10-6，但处方可以经过微生物滞留过滤器过滤，故采用除菌过滤和无菌工艺相结合的灭菌方法。
无菌生产工艺是制药领域中最难的工艺之一，保证产品无菌是该工艺最大的难点，减少无菌工艺药品污染风险的两项重要措施为：①人员的培训②无菌工艺考据。
按 SFDA化学药品注射剂基本技术要求：培养基灌装考据是对设施、环境以及人员操作的一种系统考据，是判断无菌保证水平的要点手段。
故在正式生产前必定按某某产品生产工艺进行培养基模拟灌装考据。
1 本次考据要点生产工艺流程图安瓿的冲刷称量配料工器具冲刷和灭菌除菌过滤干热灭菌灌封灯检D级背景 C 级背景 A 级背景一般区2考据原理将培养基裸露于设施、容器密封系统的表面和要点环境条件中，并模拟实质生产达成工艺操作。
对装有培养基的密闭容器进行培养以检查微生物的生长并议论结果，确定实质生产中产品污染的可能性。
对于失败的考据进行菌种解析并检查，确认并解决可能造成失败的原因后，重新进行考据。
3考据次数按 2010 版 GMP附录 1 要求因该生产线为新建厂区设施，为培养基模拟灌装试验的首次考据，故需进行连续三个批次的考据活动。
二、考据目的1经过该工艺考据活动证明新设计厂房采用既定的无菌生产工艺能保证产品的无菌要求；2经过该工艺考据活动证明无菌操作相关人员资格，降低人员带入无菌的风险；3经过该工艺考据活动保证生产吻合现行GMP法规要求。
三、考据范围和推行时间1 本考据方案适用于厂区小容量注射剂车间无菌生产线正式投入使用前某某品种小容量注射剂无菌生产工艺培养基模拟灌装考据活动；2 计划考据明行时间为2013 年 3 月 ~4 月连续三个批次。
综合制剂车间小容量注射剂生产线培养基验证时间计划表
QA
QC
干热开始灭菌
湿热第一柜开始灭菌（末次冲洗水）
湿热第二柜开始灭菌（末次冲洗水）
湿热第三柜开始灭菌（末次冲洗水）
铝盖清洗灭菌
工序起止时间
灭菌开始（末次精洗水）
胶塞清洗灭菌
工序起止时间
灭菌开始（末次精洗水）
生产第二步
配液
工序起止时间
配液时间
配液完到除菌过滤开始
除菌过滤时间
配液开始至过滤结束（沉降菌、游菌、尘埃粒子）
序号
文件名称
内容
计划时间
参与部门
1
202综合制剂车间小容量注射剂生产线培养基模拟无菌灌装验证方案（20ml）
验证前确认
培训确认、先决条件确认、文件确认、仪器仪表校验信息确认、生产用关键设备确认、物料确认
综合制剂车间
设备动力部
QA
QC
培养基无菌性试验、微生物生长性能试验
生产第一步
工器具清洗灭菌
工序起止时间
微生物负荷（滤前100ml）
阴性对照（滤后100ml）
管制瓶清洗
工序起止时间
开始洗瓶时间
灌装
工序起止时间
灌装开始时间（沉降菌、浮游菌、尘埃粒子、设备表面微生物、人员表面微生物）
管制瓶
前、中、后各取20支
胶塞
前、中、后各取20只
轧盖
轧盖开始时间（沉降菌）
灯检
灯检开始时间
灯检后产品（全取样）
备注：本次模拟灌装批量7000瓶/批。
培养基模拟灌装试验方案
培养基模拟灌装试验方案（无菌粉末分装粉针剂）目录1.目的 (3)2.范围 (3)3.验证组织及职责 (3)4.方案说明 (4)5.工艺概述 (4)6.验证前检查 (5)7.验证内容 (6)8.验证周期 (13)9.验证总结、评价与建议 (14)10.验证报告的审核批准 (14)11.验证合格证 (14)1.目的对于无菌生产来说，即使所有与产品无菌性有关的设备部件、容器以及原料都经过有效地灭菌处理，但当这些生产要素在实际工艺条件下组合在一起时，仍有可能因各种原因导致产品被污染。
对于非最终灭菌的无菌生产工艺必须进行培养基灌装来验证。
培养基灌装是用于评估整个无菌工艺过程，用于表明如果严格按照工艺要求生产，产品的无菌性有可靠保证。
2.范围本验证方案适用于无菌粉末分装粉针剂生产线的培养基模拟灌装试验。
3.验证组织及职责3.1验证职责3.2验证方案的培训验证实施前，QA部门对验证相关人员培训，填写《员工培训记录表》。
4.方案说明4.1验证过程中偏差处理的要求执行《偏差管理规程》4.2验证过程中变更的要求执行《变更管理规程》4.3验证过程中记录填写的要求执行《记录管理规程》4.4其他要求5.工艺概述5.1产品：5.1.1性状：白色结晶或结晶性粉末。
5.1.2规格：0.25g/瓶。
5.1.3包装：10ml西林瓶。
5.1.4批量：24000瓶。
5.2胶塞处理：纯化水清洗、硅化、注射用水清洗、灭菌。
（121℃，20分钟）5.3西林瓶处理：纯化水清洗、注射用水清洗、压缩空气吹干、隧道烘箱灭菌。
（灭菌段温度320℃≥5分钟，冷却温度﹤40℃）5.4铝盖干热灭菌。
（180℃，120分钟）5.5无菌药粉通过分装机充填到西林瓶中，盖胶塞、轧铝盖、灯检、贴签、包装。
5.6工艺流程图如下：6.验证前检查6.1人员的确认确认参与验证人员均接受过微生物知识、更无菌衣、无菌操作、培养基模拟灌装试验方案的培训，同时确认参与验证人员的健康体检情况，详见附件1《员工体检和培训确认表》。
冻干培养基灌装模拟试验1
××××××××粉针车间冻干粉针剂培养基无菌灌装模拟试验验证方案粉针车间冻干粉针剂培养基无菌灌装模拟试验是对粉针车间使用F2000/12/600型灌装机在局部百级工作环境中进行冻干粉针剂灌装过程中所采用的各种方法和各种规程防止微生物污染的水平可以达到可接受的合格标准的能力。
通过检查确认找出粉针车间进行冻干粉针剂灌装作业过程中的控制要求，为今后对粉针车间进行冻干粉针剂灌装作业管理确定依据。
一、该方案的实施由下述单位负责进行：二、方案实施单位责任人：三、验证小组成员：冻干粉针剂培养基无菌灌装模拟试验验证方案方案制订：制订日期：方案批准：批准日期：目录1.概括 (1)1.1目的 (1)1.2范围 (1)1.3责任 (1)2.确定可接受的合格标 (2)3.培养基性能测试 (2)3.1微生物生长性能试验 (2)3.2培养基无菌性试验 (2)4 模拟分装用无菌粉末 (2)4.1模拟分装用无菌粉末应具有的特性 (2)4.2 无菌性试验 (3)4.3 抑菌性试验 (3)4.4 溶解性试验 (3)5 模拟分装过程操作规程及操作人员控制 (3)6 操作过程及无菌环境控制与监测 (4)6.1 模拟分装使用西林瓶及胶塞无菌性检测 (4)6.2 微生物控制与监测 (4)6.3 尘埃粒子监测 (5)7 取样计划及取样点 (5)7.1 取样计划 (5)7.2 取样点 (6)8 模拟分装 (6)8.1 无菌粉针剂模拟分装方法 (6)8.2 液体培养基制备及进入无菌分装区方法 (6)8.3 液体培养基分装工具的选用及处理使用方法 (6)8.4 无菌粉针剂模拟分装试验 (7)8.5 液体培养基分装 (7)9 微生物培养 (7)9.1 阴性对照 (7)9.2 阳性对照 (7)9.3 试验样品培养 (7)10 试验结果评价 (8)11 验证制度及再验证时间安排 (8)12 确认方案执行日期 (9)1、概括冻干粉针剂培养基无菌灌装模拟试验是在其他各个系统（诸如灭菌系统、公用系统、无菌环境保持系统、设备验证、设备清洗过程验证等）验证工作完成的基础上进行的。
冻干粉针剂车间培养基模拟灌装验证方案
冻干粉针剂车间培养基模拟灌装验证编订人＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿编订日期＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿会签批准人＿＿＿＿＿＿＿＿批准日期＿＿＿＿＿＿＿＿＿目的：建立一个冻干粉针培养基模拟灌装工艺再验证方案，以规范冻干粉针车间培养基模拟灌装工艺验证工作，证明所生产的无菌产品可以在规定的环境、工艺和操作下能有效防止微生物污染，同时确定无菌灌装室内允许的最多人员数量，使生产的注射剂符合产品质量标准，尤其符合无菌标准要求。
范围：冻干粉针生产线无菌工艺的验证。
责任：设备工程管理部经理、质量管理部经理、质控主管、质保主管内容：1.概述培养基模拟灌装是在与实际生产相同的工艺条件和操作方法下，模拟灌装经除菌过滤的胰酪胨大豆胨肉汤培养基适量到抗生素瓶中，压塞后，在3~6℃条件下冻干，轧盖后，按规定条件进行培养，以确认无菌灌装工艺的可靠性。
在此验证之前,空气系统、水处理系统、灭菌系统等验证工作均已完成。
2.验证目的通过培养基模拟灌装试验证明，在无菌灌装过程中所采用的各种方法和规程，可使微生物污染的水平达到可接受的合格标准的能力，并提供保证所生产产品的无菌性的置信度达到可接受的合格标准的证据。
对整个无菌灌装过程进行验证试验，根据验证结果来评估生产线正常运转时对微生物控制的状况，判断生产过程的可靠性，利用培养基模拟灌装试验来证明，在正常状态下，生产过程是可靠的，满足当产品污染的概率为0.10%时，无菌性的可信限为95%的要求。
验证过程应严格按照本方案规定的内容进行，若因特殊原因确需变更时，应填写验证方案变更申请及批准书，报验证领导小组批准。
3. 验证分工3.1验证小组3.1.1负责验证方案的审批。
3.1.2负责验证的协调工作，以保证本验证方案规定项目的顺利实施。
3.1.3负责验证数据及结果的审核。
3.1.4负责验证报告的审批。
3.1.5负责发放验证证书。
3.1.6负责再验证周期的确认。
3.2设备工程部3.2.1负责组织验证所需厂房、设施、设备、仪器的验证。
冻干粉针无菌灌装方案
*****冻干粉针无菌灌装验证方案文件编号：执行前批准签字页部门起草人签字起草日期制造部质量保证部职责部门审核人签字审核日期制造部职责.部门批准人签字批准日期质量保证部职责1.目的本验证用胰蛋白胨大豆肉汤培养基溶液代替****冻干粉针的产品溶液，进行工艺模拟试验，检查和证明按照《注射用*****工艺规程》()所规定的生产工艺、设备及人员能够生产出符合《注射用****质量标准》()无菌试验项下要求的产品。
2.范围本次验证的范围适用于注射用*****生产的全过程，包括：人员更衣、各房间的清洁消毒、容器工具的处理、称量、调剂、除菌过滤、中控取样、动态下环境监测、无菌灌装、模拟冻干、轧盖过程，并在灌装过程中模拟的正常与非正常干扰活动。
3.责任者及职责3.1部门职责:工程部：保证所有动力系统的正常供应保证生产区域内的环境符合规定要求完成设备和设备上仪表的校验协助制造部完成验证程序制造部：起草、审核并批准验证方案和验证报告按照验证方案内容和生产操作规程进行操作完成验证记录质量保证部：审核并批准验证方案和报告监督验证实施过程质量控制部:样品无菌检查和培养基生长试验环境监测运营总监：审核并批准验证方案和验证报告3.2 验证小组成员：职责组长组织该验证工作，生产监督组员无菌灌装人员，负责按照方案实施无菌灌装过程及实施正常和非正常的干扰。
无菌灌装准备人员，负责无菌灌装物品的准备和灭菌冻干人员，负责操作冻干机维修人员，负责模拟设备维修状态QC检测人员，负责样品的无菌检查和培养基生长试验QC人员，负责环境监测QA人员，起草验证方案并负责工艺监督3.3 灌装过程中人员分工I项目人员安装灌装机组件注射用水灌装过程培养基灌装过程出箱轧盖4.验证简介本次验证考察按照工艺规程的要求进行的称量调剂、除菌过滤、湿热灭菌、西林瓶清洗灭菌、灌装和冻干过程是否可以满足无菌的要求，本次验证还考察人员的操作是否符合无菌要求,是否会对产品带来微生物方面的污染.在验证中还模拟了几种有可能发生的正常干扰和非正常故障，以考察在处理故障时，是否会对产品产生不良影响。
无菌模拟灌装试验报告
无菌模拟灌装试验报告甘肃大得利制药有限公司1.概述：本验证由质量部、生产部、质检科、粉针车间、设备部等部门按照《无菌模拟灌装试验方案》于2012年月日至年月日组织实施，并统计试验结果，分析试验结果并报告。
2.责任：参加本次试验的所有人员。
参加本次验证的人员签名：2.验证结果分类报告：2.1验证前生产系统确认：表1人员培训情况，现将其报告如下：表2 生产系统要素评价汇总2.2 培养基性能确认报告：选择了具有促生长能力的胰酪胨大豆肉汤培养基，作为本次试验的培养基。
质量部负责培养基性能的确认。
2.2.1 培养基配制：质量部派有微生物检验能力的人员负责性能试验用的培养基的配制，并将配制过程记录如下（备注：以下所指批号是配制好的培养基的批号，可以按照培养基配制的日期编批号）：表3需配制培养基名称：胰酪胨大豆肉汤培养基来源：灭菌后目视观察试管里的培养基，外观澄明。
表4表5表6结论：以上试验结果表明，胰酪胨大豆肉汤培养基符合验证使用要求，121℃灭菌30min可以达到灭菌效果，加入试验菌后有促微生物生长能力。
2.3无菌灌装试验用西林瓶无菌性试验报告：车间洗瓶岗位依据西林瓶清洗灭菌操作规程西林瓶清洗灭菌后，指定灌装岗位具体操作工在使用前，在无菌区打开烘箱箱门，在烘箱底层和最高层的四个角落处按无菌取样要求，分别取出5只（共20只）西林瓶放入无菌取样锥形瓶中,密封，作为1号样品；同法在灌装结束后，从生产线上剩余的西林瓶中随机取20只，放入无菌取样锥形瓶中,密封，作为2号样品。
将以上样品送质检科，分别加入100ml 氯化钠注射液，按《中国药典》2010年版二部附录“无菌检查法”—薄膜过滤法作无菌检查，现将检验情况汇总如下（备注：以下所指批号是指清洗灭菌后的西林瓶，可以按照清洗的日期编批号）：表7表8表9结论：依据以上试验结果表明，无菌灌装试验用西林瓶无菌检查符合要求。
2.4无菌灌装试验用胶塞无菌性试验报告：车间洗塞岗位操作工按照洗塞灭菌操作规程对胶塞清洗灭菌后，由指定的灌装岗位操作工在最初卸料时，取卸料口处的胶塞20只，放入无菌取样锥形瓶中,密封，作为1号样品；同法操作在无菌灌装结束后，从振荡器上的剩余胶塞中随机取20只，放入无菌取样锥形瓶中,密封，作为2号样品，将以上样品送质检科，，分别加入100ml氯化钠注射液，按《中国药典》2010年版二部附录“无菌检查法”—薄膜过滤法作无菌检查。
培养基模拟灌装试验
什么是无菌生产工艺？ 什么是无菌生产工艺？
Environment 原料 环境
Personnel 人员
工艺验证
无菌检验
作业环节与风险
作业环节 灭菌 房间设计 环境监测 消毒 更衣 物品转移 无菌技术（灌封） 无菌装配 验证难易度 人员依赖程度 易 N/A 中等 难 难 难 难 难 低 N/A 可变 高 很高 高 很高 很高 相关风险 低 中等 高 高 很高 高 很高 很高
非最终灭菌制剂 的风险大不大？
我们如何做到上述的无菌保障水平
无菌生产工艺
什么是无菌生产工艺？ 什么是无菌生产工艺？
无菌生产工艺
产品、容器和密封件分别进行灭菌，然后进行 灌封 在极高洁净环境下进行灌装和密封 产品在最终容器中不再做进一步的灭菌处理 对各个组成部分的灭菌工艺需要进行严格验证 和监控 在灌封前和灌封过程中的操作会带来污染风险
什么是无菌生产工艺？ 什么是无菌生产工艺？
– 生产环境 • 洁净区 • 人员 – 药液制备和过滤 – 药液除菌过滤前的微生物负荷 – 过滤器完整性测试和验证 – 生产设备和内包装材料的准备和灭菌 – 灌装过程 – 无菌工艺过程验证
L/O/G/O
培养基模拟 灌装试验
无菌的概念
什么是无菌? 什么是无菌? –理论上：无菌＝没有任何活的微生物 理论上：无菌＝ 理论上 –实际上：我们无法证明产品中没有活微 实际上： 实际上 生物存在
无菌的概念
“无菌”的实际定义: 无菌” 实际定义: • • 经生长和繁殖证明无生物 实际为概率上的无菌，普遍接受的标准是： 实际为概率上的无菌，普遍接受的标准是： 概率上的无菌
关键因素六: 灌装体积
培养基无菌模拟灌装验证方案及报告
页码：1/34 编号：VA-PV-A-201-01-12
模 拟 验 证 方 案
Simulation Validation Project
培养基无菌灌装
规格：3 ml
XXXXXXXXXXX 有限公司
X X X X X X X X X X X X P H A R M . C O . ， LT D .
5.4.2.1 负责设备的安装、调试和维护保养，并做好相应的记录； 5.4.2.2 负责提供设备的详细资料及相关 SOP； 5.4.2.3 负责建立设备档案； 5.4.2.4 负责提供设备的计量器具校验详细情况。 5.4.3 质量部
5.4.3.1 负责组织 QA 人员对验证全过程进行监控； 5.4.3.2 负责验证相关的检验及结果分析报告； 5.4.3.3 负责数据的选择与评价。 5.4.4 生产部
灌装经除菌过滤器过滤的培养基， 然后将此培养基进行冻干， 冻干后将此模拟制品在适当条件下 培养， 以确认工艺过程的可靠性。 证明在冻干粉针剂灌装过程中所采用的各种方法和各种规程以 防止微生物污染的水平达到可接受的合格标准的能力， 或提供保证所生产产品的无菌性的可信限 度达到可接受的合格标准的证据。 3 介绍 冻干粉针剂培养基无菌灌装模拟试验是在其他各个系统（诸如灭菌系统、公用系统、无菌环 境保持系统、设备验证、设备清洗过程验证等）验证工作完成的基础上进行的，采用培养基无菌 灌装模拟试验方法进行。 方法是将培养基采用灌装工艺灌装到玻璃瓶中， 整个操作过程应模拟冻干粉针剂产品的灌装 状态。再在适当的条件下进行培养，以确认无菌灌装工艺的可靠性。 由于本公司冻干粉针无菌灌装系统采用的是玻璃瓶（胶塞）清洗、灭菌、灌装、加塞、冻干 联动方式，因此本次验证是用于证明在指定的厂房、设施、设备、工艺条件下无菌灌装工艺可以 保证最终灌装出的产品在各项指标上均符合标准。 4 参考书目 《药品生产验证指南》2003 5 5.1 5.1.1 5.1.2 5.1.3 5.1.4 5.1.5 5.2 验证委员会、工艺验证小组及职责 验证委员会 负责验证方案的审批、确定验证小组成员； 负责验证的协调工作，以保证验证方案规定项目的顺利实施； 负责验证数据及结果的审核； 负责验证报告的审批； 负责发放验证证书。 验证小组 组长由生产部经理担任，组员由质量部经理、公用工程部经理、注射剂车间主任、中心化验
冻干粉针剂培养基无菌灌装模拟试验再验证方案
冻干粉针剂培养基无菌灌装模拟试验再验证方案xxxxxx制药股份有限公司1．概述培养基灌装试验是用正常的实际生产工艺相同的条件和操作方法，向冻干制品容器（西林瓶）内灌装经除菌过滤器过滤的培养基，然后将此模拟产品在适当的条件下培养，以确认无菌工艺过程的可靠性。
2008年11月冻干粉针剂百级区域进行了厂房改造，更换了高效风口。
根据xxxx《验证总则》和GMP的要求，当厂房、环境发生改变时，需要进行再验证。
在厂房和净化空调系统验证合格后，连续灌装三批培养基已证实无菌工艺的可靠性。
2．验证目的通过培养基模拟灌装试验，证实无菌工艺过程的可靠性。
3．验证计划及合格标准验证计划：按照xxxxx《培养基灌装模拟试验标准操作程序》，在厂房验证、净化空调系统验证完成后，使用正常生产的工艺条件，每批培养基配液量80L，采用10ml的西林瓶，每瓶灌装4ml,每批灌装4750~5000瓶，连续生产3批。
灌装过程半压塞，灌装结束将半压塞的西林瓶至冻干箱内，模拟冻干过程结束后全压塞，轧盖。
将培养基上下颠倒几次使培养基与胶塞基整个容器内壁充分接触，然后倒置，先置30~35℃培养7天，再置23~28℃培养7天。
于每一培养阶段的0、3、7、14天观察培养基的微生物生长情况，并分析污染的平中微生物的特点。
合格标准：每批培养基中污染品均不得多于1个，且三批的检验结果具有重现性。
4．人员、职责5．验证过程5.1验证条件确认5.1.1 厂房和空调系统确认由于原灌装间内厂房和空调系统都进行了变更，培养基灌装前应首先确认已完成厂房和净化空调系统的变更验证；5.1.2设备和系统确认模拟试验开始前还应对与本次试验密切相关的设备和系统进行确认，查阅半年的下列各系统验证档案、运行记录或监测记录确认以下内容；执行人：QA：日期：5.1.3人员和物料确认5.1.3.1查阅无菌操作室人员的健康档案和培训资料确认一下人员的2008年体检和培训情况；执行人：教育办公室：日期：5.1.3.2查阅培养基生产用物料的进货记录和检验报告，确保物料已经检验合格并在储存期内；执行人：QA: 日期：5.1.4文件确认培养基灌装试验前确认与培养基灌装有关的关键文件、记录已齐全。
培养基模拟灌装试验方案
培养基模拟灌装试验方案（无菌粉末分装粉针剂）目录1.目的 (3)2.范围 (3)3.验证组织及职责 (3)4.方案说明 (4)5.工艺概述 (4)6.验证前检查 (5)7.验证内容 (6)8.验证周期 (13)9.验证总结、评价与建议 (14)10.验证报告的审核批准 (14)11.验证合格证 (14)1.目的对于无菌生产来说，即使所有与产品无菌性有关的设备部件、容器以及原料都经过有效地灭菌处理，但当这些生产要素在实际工艺条件下组合在一起时，仍有可能因各种原因导致产品被污染。
对于非最终灭菌的无菌生产工艺必须进行培养基灌装来验证。
培养基灌装是用于评估整个无菌工艺过程，用于表明如果严格按照工艺要求生产，产品的无菌性有可靠保证。
2.范围本验证方案适用于无菌粉末分装粉针剂生产线的培养基模拟灌装试验。
3.验证组织及职责3.1验证职责3.2验证方案的培训验证实施前，QA部门对验证相关人员培训，填写《员工培训记录表》。
4.方案说明4.1验证过程中偏差处理的要求执行《偏差管理规程》4.2验证过程中变更的要求执行《变更管理规程》4.3验证过程中记录填写的要求执行《记录管理规程》4.4其他要求5.工艺概述5.1产品：5.1.1性状：白色结晶或结晶性粉末。
5.1.2规格：0.25g/瓶。
5.1.3包装：10ml西林瓶。
5.1.4批量：24000瓶。
5.2胶塞处理：纯化水清洗、硅化、注射用水清洗、灭菌。
（121℃，20分钟）5.3西林瓶处理：纯化水清洗、注射用水清洗、压缩空气吹干、隧道烘箱灭菌。
（灭菌段温度320℃≥5分钟，冷却温度﹤40℃）5.4铝盖干热灭菌。
（180℃，120分钟）5.5无菌药粉通过分装机充填到西林瓶中，盖胶塞、轧铝盖、灯检、贴签、包装。
5.6工艺流程图如下：6.验证前检查6.1人员的确认确认参与验证人员均接受过微生物知识、更无菌衣、无菌操作、培养基模拟灌装试验方案的培训，同时确认参与验证人员的健康体检情况，详见附件1《员工体检和培训确认表》。
培养基无菌性试验
7.4.1 培养基配制及器具的灭菌操作人：复核人：日期：7.4.1.2 除菌过滤前TSB培养基微生物限度检验检查依据：微生物检查参照《微生物限度测定标准操作规程》（QC117）,采用薄膜过滤法.营养琼脂培养基的配制：称取营养琼脂培养基干粉（中检所监制，批号：）g，加纯化水ml加热溶解。
检验用平皿的准备：准备直径90 mm的带盖玻璃平皿套，用牛皮纸包裹。
灭菌：以上培养基和物品统一灭菌，灭菌条件：121°C, 30 min。
操作人：复核人：日期：玫瑰红钠琼脂培养基的配制：称取玫瑰红钠琼脂培养基干粉（中检所生产，批号：）g，加纯化水ml，加热溶解。
检验用平皿的准备：准备直径90 mm的带盖玻璃平皿套，用牛皮纸包裹。
灭菌：以上培养基和物品统一灭菌，灭菌条件：121°C, 30 min。
操作人：复核人：日期：Rodac碟培养基的的配制：称取胰酪胨大豆肉汤培养基干粉（上海中科，批号：）g ，卵磷脂（国药集团，批号：）g，吐温80（批号：）g，加入纯化水ml,微温使其溶解，用1.0M的氢氧化钠调节pH值使灭菌后为7.3±0.2，加入琼脂g，加热使其溶解。
灭菌：灭菌条件：121°C, 30 min。
Rodac碟的批号：，生产厂商：，数量：。
操作人：复核人：日期：取样用试管的准备：准备10 ml试管支，内装2 ml生理盐水和一根医用棉签，管口用医用纱布包裹的脱脂棉塞塞住，再用牛皮纸封口。
灭菌：灭菌条件：121°C, 30 min。
操作人：复核人：日期：检查人：复核人：检查日期：报告日期：7.4.1.4 除菌过滤器的膜完整性检测操作人：复核人：日期：日期：操作人：复核人：附灭菌的温度打印记录操作人：复核人：日期：操作人：复核人：日期：检查人：复核人：日期：7.4.2灌装环境的清洁、消毒效果检查及人员着装检查7.4.2.1操作人员微生物监控进入无菌区的人员按照《洁净区人员更衣标准操作规程》（MF149）进行更衣，操作结束后，按照《灌装无菌区人员更衣确认程序》（QA057）对操作者的左手、右手、口罩、胸口处、帽兜额头处、左臂、右臂等部位的微生物数量进行监测。
培养基模拟灌装方案
*ml灌装线培养基模拟灌装验证方案审批目录1. 介绍…………………………………………………………………………………………… ..32.目的 (4)3.范围 (4)4.职责 (4)4.1.生产部职责.................................................................................. 错误！未定义书签。
4.2.质量保证部职责 (4)4.3 质量控制部职责 (4)4.4.设备部、物资管理部门各职责......................................................... 错误！未定义书签。
5. 法规和指南…………………………………………………………………………………… ..45.1.法规 (4)5.2.指南 (4)6.参考文件 (5)7.生产工艺描述 (7)7.1.工艺流程图 (7)7.2.模拟灌装验证流程图 (8)7.2.1模拟灌装过程流程图 (8)7.3.生产工艺过程描 (9)7.3.1 产品生产规模 (9)7.3.2 生产制度 (9)7.3.3 生产前检查 (9)7.3.4 操作前检查 (9)7.3.5 生产操作 (9)7.3.6 轧盖 (10)7.4.基本原理 (10)7.5.工艺： (10)7.6.人员： (10)7.7.设备和器具： (10)7.8.运行频次和周期 (11)7.9.运行数量 (11)7.10.模拟物料和培养基 (11)7.11.密闭和开放系统 (11)7.12.风险评估 (12)7.13.工艺风险分析 (14)7.14.模拟项目 (15)7.14.1 模拟灌装过程 (15)7.14.2 灌装机各分装器具经灭菌后的无菌组装 (15)7.14.3 模拟最多进入灌装间的人数 (15)7.14.4 人员干预 (16)7.14.5 模拟人员活动 (16)7.14.6 模拟最差条件 (16)7.15.灌装体积 (17)7.16.模拟培养基灌装样品的培养和检查 (17)7.17.人员 (18)7.18.工艺模拟 (18)7.19.取样计划 (19)7.20.培养基灌装产品的处理 (19)7.21.培养基模拟灌装清洁确认 (20)7.21.1 设备的清洁结构、取样位置及测试项目描述 (20)7.21.2 样品编号原则 (21)8.确认/测试项目 (21)9.偏差处理 (22)10.变更控制 (22)11.附件清单 (22)12.支持性附录清单 (22)13.测试报告 (22)1. 介绍培养基模拟灌装试验是用与实际生产工艺相同的生产环境、条件和操作方法，向模制瓶内灌装经除菌过滤的液体培养基，然后将此模制瓶在适当的条件下培养，确认无菌工艺规程的可靠性，提供产品无菌性的可信限度达到可接受合格标准的证据，充分验证无菌生产工艺的可靠性，同时评价生产操作人员的行为规范性。
培养基无菌灌装模拟试验方案
XXXXX制药有限公司培养基无菌灌装模拟试验再验证方案文件编号： YZML101P -09所在车间：冻干粉针车间起草人：日期： 2009年6月25日审核人：日期：2009年7月04日批准人：日期： 2009年7月05日验证方案的起草与审批验证方案的起草验证方案的审批验证进度计划提出完整的验证计划，经验证小组批准后实施，整个验证活动分三个阶段完成。
验证方案目录第一部分：概述 (4)1、验证目的 (4)2、验证概述 (4)3、验证领导小组分工及职责 (4)4、被模拟工艺 (5)5、模拟试验中使用的设备设施 (6)6、培养基的选择 (6)7、微生物培养条件 (7)8、工艺模拟的批量，批次 (7)9、灌装体积、灌装速度及灌装用容器的确定 (7)10、验证最差条件 (7)11、可接受的合格标准 (8)第二部分：试验实施 (9)1、试验实施前的准备工作 (9)1.1 培养基无菌性试验 (9)1.2 培养基促生长试验 (9)1.3 无菌环境控制与监测 (9)2、试验实施过程 (11)2.1厂房、空间清洁 (11)2.2试验相关工序准备 (12)2.3培养基配置、除菌过滤过程 (12)2.4模拟灌装 (12)2.5模拟冻干 (13)2.6轧盖 (13)2.7微生物培养 (13)3、盖胶塞密闭系统挑战试验 (15)4、偏差的处理 (15)5、试验结果分析与评估 (16)6、验证的维护 (17)第一部分：概述1、验证目的评价一个无菌工艺操作能力的最有用的方法之一是工艺模拟，其提供了一个可能影响最终产品无菌的无菌工艺操作变更进行评价的方法，它可以用于鉴别无菌操作工艺中，可以导致产品微生物污染的潜在缺陷，通过模拟无菌冻干粉针的灌装试验，证明冻干粉针灌装过程中所采用的无菌灌装工艺参数和相关的SOP对于防止微生物污染水平达到可接受的合格标准，或提供保证所生产产品的无菌性的可信限度达到可接受的合格标准的证据。
无菌工艺人员的资格和保证，以及验证生产系统的要素（包括厂房、公用系统、设备）和生产过程中工艺变化因素（物料、人员、方法）对产品质量，尤其是无菌结果影响的程度，以证明以后在正常生产条件下能生产出符合规定标准的无菌产品。
粉针剂无菌工艺验证——培养基模拟灌装试验
粉针剂无菌工艺验证——培养基模拟灌装试验发表时间：2011-12-27T15:43:00.233Z 来源：《医药前沿》2011年第20期供稿作者：钱静杰[导读] 无菌粉针灌装过程中，经培训的操作人员在规定的洁净环境中按操作规程操作所生产的产品可以确保无菌。
钱静杰 (浙江惠迪森药业有限公司浙江杭州 311400)【中图分类号】R446.1【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2011）20-0217-03【摘要】目的为确保粉针无菌分装生产过程对产品不产生污染，保证粉针生产药品质量。
方法先注入液体培养基，再以无菌甘露醇干燥粉为替代物，模拟分装于注射剂瓶，盖胶塞，轧铝盖。
分装样品先后在30～35℃与20～25℃下培养7d，并作阴性、阳性对照。
结果无菌灌装环境及操作人员表面微生物检查合格, 阴性、阳性对照成立, 试验样品微生物未检出。
结论无菌粉针灌装过程中，经培训的操作人员在规定的洁净环境中按操作规程操作所生产的产品可以确保无菌。
【关键词】粉针剂无菌工艺验证培养基灌装试验无菌药品的生产须满足其质量和预定用途的要求，应最大限度降低微生物、各种微粒和热原的污染。
生产人员的技能、所接受的培训及其工作态度是达到上述目标的关键因素。
无菌药品的生产必须严格按照精心设计并经验证的方法和规程进行。
产品的无菌或其它质量特性绝不能依赖于任何形式的最终处理或成品检验。
培养基模拟灌装试验——使用培养基作为药品的替代品（Placebo）进行无菌模拟生产，对无菌工艺进行验证。
培养基灌装在某种意义上是一种挑战性试验，因为几乎在所有情况下，微生物在培养基中的繁殖和生长要比在实际产品中更容易。
能全面反映整个生产过程采用无菌工艺生产无菌产品的能力。
而且也是各国药品法规要求的基本内容。
1 验证准备工作1.1所有的相关设备及其工艺均应事先通过确认或验证, 如洁净生产区环境须通过静态验证 (空气的悬浮粒子、浮游菌、沉降菌及表面微生物均应符合相应的规定)，操作人员的卫生及其操作行为均须经过严格的培训, 生产主要设备 ( 如分装机等)以及与生产相关的其它辅助工艺 ( 如淋洗、湿热灭菌、干热灭菌去热原、除菌过滤等)，均须通过确认或验证。
粉针剂无菌工艺验证培养基模拟分装
DOI：10.16661/ki.1672-3791.2018.02.235粉针剂无菌工艺验证培养基模拟分装李惠(海南海灵化学制药有限公司 海南海口 570311)摘 要:想要粉针针剂车间生产线能够对无菌注射剂进行分装，同时能够满足有关的法规和无菌生产的工艺。
需要在已经经过灭菌清洗的针剂瓶中灌入3%TSB培养基，在模拟无菌分装时，可将实际物料用无菌乳糖进行代替，惰性气体保护可用压缩的洁净空气进行模拟，经过灯检、压塞及轧盖后再来培养。
样品先培养7d保持在20℃～25℃环境中，再在30℃～35℃的环境中进行7d的培养，并且设置阳性、阴性的对照组。
最后操作人员表面微生物和无菌分装环境的微生物都通过了检测，也符合阳性、阴性的对照，未检出试验样本有微生物。
所以在分装无菌粉针时，只要操作人员通过严格的培训，也按照要求的流程来操作，就可以实现实际生产产品保证无菌。
关键词:粉针剂 无菌工艺 分装中图分类号:R944.1+1 文献标识码：A 文章编号：1672-3791(2018)01(b)-0235-02粉针生产线生产过程要实现无菌化，需人员、环境、设备及工艺相结合，进行定期的无菌工艺试验来模拟，才能使得无菌分装注射剂符合相关规定及生产工艺的要求。
为了让无菌制剂安全性得到保障，在生产过程中，就需要对整个过程中的无菌化程度进行评价，整个流程需经过严格精心设计且需要经过验证的流程和方法来进行。
通常会用无菌惰性粉末代替药品来进行培养基模拟分装试验，在其中装进培养基来促进微生物的生长，通过观察微生物培养生长情况，就可以了解整个生产的无菌化情况及存在的问题。
因为培养基与实际情况相比对微生物的生长繁殖更加有利，对无菌化生产过程进行模拟，就能对整个无菌措施的有效性进行验证。
1 验证准备工作1.1 前提条件首先针对参与无菌区、洁净区的人员，如果进行培养基分装操作，就要进行GMP知识的培训并进行考核通过后才能得到许可，对人员所负责的工作进行职责明确和授权。
培养基模拟灌装无菌生产工艺验证方案
培养基模拟灌装无菌生产工艺验证方案一、研究目的及背景无菌生产是制药和食品工业中至关重要的一项工艺。
培养基是无菌生产过程中不可或缺的一部分，它提供了细菌、真菌等微生物的生长所需的营养物质。
因此，为了确保产品质量和安全性，对培养基的无菌灌装工艺进行验证是非常重要的。
本研究的目的是验证培养基的无菌灌装工艺的有效性，以确保生产过程中的无菌状态。
通过验证，可以确定灌装工艺的可行性和合理性，并提供指导和保障无菌生产的稳定性和安全性。
二、研究方法1.确定灌装工艺的关键参数和控制点：包括温度、压力和速度等因素。
通过前期的实验研究和参考相关文献资料，确定灌装工艺的最佳参数设置。
2.建立合适的实验方案：选择合适的微生物作为试验菌株，并使用合适的培养基进行培养。
根据已有的灌装工艺参数，进行一定数量的灌装试验，并尽可能模拟实际生产过程。
3.进行灌装工艺验证试验：根据实验方案，按照一定的时间和数量进行培养基的灌装试验。
同时，进行相应的对照试验，采集样品进行微生物学检验。
4.微生物学检验：采集灌装好的培养基样品，通过无菌条件下培养，观察是否有微生物生长。
并进行定性定量分析，以判断培养基是否被污染。
5.数据分析和结果评估：根据实验结果，对培养基的无菌灌装工艺进行评估。
比较实验组和对照组的差异，并统计相关数据，计算灌装工艺的合格率和不合格率。
6.结果报告和验证方案调整：将实验结果进行总结和分析，撰写验证方案报告。
根据结果对灌装工艺进行调整和改进，并制定相应的控制措施。
三、实施计划和进度安排1.研究期限：本研究计划为期三个月。
2.实施计划：-第一周：搜集相关文献资料，确定研究目的和方法。
-第二周：设计实验方案，确定试验菌株和培养基。
-第三周至第五周：进行实验，进行灌装试验并采集样品。
-第六周至第七周：进行微生物学检验，观察和分析实验结果。
-第八周：数据分析和结果评估，撰写验证方案报告。
-第九周至第十二周：根据结果调整灌装工艺，并制定相应的控制措施。
CFDA起草无菌制剂培养基模拟灌装试验指南
CFDA起草无菌制剂培养基模拟灌装试验指南1.目的为指导和规无菌药品生产的培养基模拟灌装试验，充分评药品生产企业的无菌操作水平，确保所生产无菌药品的安全、有效、质量稳定，依据《药品生产质量管理规》及附录，制定本指南。
2.围本指南根据无菌生产工艺的特点阐述了非最终灭菌的无菌产品培养基模拟灌装试验的基本要求及流程，适用于采用无菌生产工艺生产无菌制剂。
3.定义本指南所指的培养基模拟灌装试验，是指采用无菌的培养基或适当的介质，模拟药品生产中无菌操作的全过程(不仅仅是灌装过程)，以评价该无菌工艺无菌保证水平的一系列活动。
4.原则在对无菌生产工艺充分认知和生产经验累积的基础上，非最终灭菌产品企业应结合工艺、设备、人员和环境等要素定期开展培养基模拟灌装试验，以确认无菌生产过程的可靠性。
开展培养基模拟灌装试验应遵循以下原则：4.1以现行GMP法规要求为准则，评价无菌生产过程的法规符合性，不符合规要求的无菌工艺过程，不能通过模拟试验来证实其无菌控制措施的合理性。
4.2对无菌生产过程实施风险评估，识别生产过程风险点以并评估现有控制措施的有效性，评估结果将在试验方案设计时给予考虑。
4.3应结合无菌生产过程所涉及到的工艺、设备、人员以及操作时限等因素有针对性开展模拟试验，尽可能模拟实际无菌生产全过程，并应特别关注“开放”操作、人工干预等高风险过程。
4.4如同一生产线生产多个包装规格的产品，应评价模拟试验方案对各产品无菌工艺过程的适用性。
应对有显著差异的无菌工艺过程逐一开展模拟试验。
5.无菌生产工艺及模拟围无菌产品的无菌生产工艺通常为：经除菌过滤或其他方法获取无菌药液或无菌粉末，在无菌条件下进行液体灌装或粉末灌装，密封。
冻干制剂在液体灌装的基础上增加了冷冻干燥工艺。
培养基模拟灌装试验应从第一步无菌操作开始，直至无菌产品完全密封结束。
如果在产品制备阶段已经采用了无菌生产的工艺，此部分工艺也应作为模拟验证的一部分。
6.模拟试验方案的设计及实施过程要求6.1.培养基模拟灌装试验的前提条件在培养基模拟灌装试验之前应确认与无菌工艺相关的支持性系统和灭菌系统的验证已完成，并达到了可接受的标准。
培养基模拟灌装方案..
******药业有限公司验证方案****生产线培养基灌装小组主要成员及职责根据《确认与验证管理规程》规定，组织成立***培养基灌装验证小组，验证小组成员及职责如下表：目录一、概述 (5)1.验证原因 (5)2.验证原理 (5)二、验证目的 (5)三、参考文件 (5)1.参考标准 (5)2.公司规程 (6)四、风险评估 (6)五、验证范围 (13)六、验证计划 (13)七、方案培训 (13)八、验证可接受标准 (13)九、验证内容 (14)1.配制 (14)2.冷藏、除菌过滤 (14)3.洗瓶 (15)4.灌封......................................................... 错误！未定义书签。
5.环境及人员卫生监测（动态） (17)6.培养 (17)7.培养基灌装后清洁确认......................................... 错误！未定义书签。
十、漏项与偏差处理 (19)十一、再验证周期 (19)十二、确立文件 (20)十三、附件 (20)附件1：....................................................... 错误！未定义书签。
一、概述1.验证原因公司****按照2010版GMP 附录1《无菌药品》的要求进行设计，洁净区级别分为A 级、B 级、C 、级、D 级，该线用于小容量注射剂非最终灭菌产品（****）生产使用。
现按2010版GMP 附录1要求对**生产线进行产品培养基灌装验证，以考察该线的无菌保证水平。
本次为第四次培养基模拟灌装（上次验证报告编号R.4-001/2015），故只进行一个批次的验证活动。
验证关键生产工艺流程图如下：将培养基暴露于设备、容器密封系统的表面和关键环境条件中，并模拟实际生产完成工艺操作。
对装有培养基的密闭容器进行培养以检查微生物的生长并评价结果，确定实际生产中产品污染的可能性。
培养基模拟灌装试验验证方案
培养基模拟灌装试验验证方案(10ml)2011年08月培养基模拟灌装试验验证方案(10ml)验证方案的起草与审批验证小组成员部门人员职责粉针车间主任李海龙负责验证方案的起草、组织、实施及培训。
生产管理部刘明华负责验证方案的审核和实施的协调工作。
设备部霍育生负责验证过程中设备设施的正常运行。
QA部宋新莉负责安排验证过程中的监控和取样。
QC部张华负责安排验证过程中物料、环境及样品的检测。
方案起草部门起草人日期年月日验证委员会审阅会签审核人职务日期年月日年月日年月日年月日年月日方案批准批准人批准日期年月日目录1概述 (3)2.验证目的 (3)3风险评估 (4)4验证参考标准 (5)5.验证范围 (4)6.验证职责 (5)7验证前提条件 (5)8 验证批次和时间 (7)9 验证步骤 (8)10培养基的培养和检查 (14)11试验结果评价 (14)12试验结果分析 (15)13风险的评估与接受 (15)14验证结果评审和结论 (15)15方案修改记录 (14)16再验证周期 (14)17附件 (14)1概述本次培养基模拟灌装试验验证是以灭菌的乳糖粉末分装到10ml西林瓶中，整个过程模拟正常的粉针剂品种的分装状态，在盖塞前将胰蛋白胨大豆肉汤培养基灌入瓶内，压塞轧盖后进行培养，确认无菌分装工艺的无菌可靠性。
2.验证目的在各种干扰和最差条件下，评估灭菌工艺、人员更衣、行为习惯、A/B级气流模式、无菌环境的建立、消毒维持方法和物料的传递控制等整个流程的无菌保证水平。
3风险评估经验证小组人员共同对培养基模拟灌装试验验证进行风险评估，对存在的质量风险提出了预防和纠正措施建议，具体见下表：风险因素风险影响现有控制措施可能性P严重性S检测性D风险优先数RPN风险级别建议采取措施人员未按更衣程序更衣及不规范动作。
污染无菌环境，使产品受到污染按相应SOP进行培训。
人员进行更衣试验。
3 4 2 24 中人员定期进行相关培训并进行更衣确认。