生物组织中还原糖的测定
检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质的方法
检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质的方法糖类的检测方法:1.放射免疫法:利用放射性同位素标记的抗体或反应物与目标糖类结合,通过测量放射同位素的放射性强度来定量糖类。
2.高效液相色谱法:利用高效液相色谱仪将样品中的糖类分离,并通过检测器测定糖类的浓度。
3.还原糖法:通过还原糖的特性,将还原糖与试剂反应生成有色化合物,通过测量其吸光度来定量糖类的浓度。
4.酶法:利用具有特异性的酶针对特定的糖类进行酶解反应,生成可测定的产物,通过检测产物的浓度来定量糖类。
脂肪的检测方法:1.水解法:将样品中的脂肪水解为脂肪酸和甘油,再通过酶法或化学法测定脂肪酸或甘油的浓度。
2.胆固醇氧化酶法:利用脂肪样品中的胆固醇通过酶催化反应生成可测定的产物,通过测量产物的浓度来定量脂肪。
3.紫外吸收法:利用脂肪样品中的化学结构特性,通过紫外光谱测量脂肪的吸光度来定量脂肪的含量。
4.气相色谱法:通过气相色谱仪将样品中的脂肪分离,并通过检测器测定脂肪的浓度。
蛋白质的检测方法:1.低里氏法:利用低里氏试剂与蛋白质发生反应,形成可测定的复合物,通过测量复合物的吸光度来定量蛋白质的浓度。
2.高效液相色谱法:利用高效液相色谱仪将样品中的蛋白质分离,并通过检测器测定蛋白质的浓度。
3.毛细管电泳法:将样品中的蛋白质在电场作用下在毛细管中分离,根据蛋白质的电荷、大小和形状的差异来测定蛋白质的浓度。
4.射流显色法:利用射流试剂将蛋白质样品中的蛋白胺基酸与试剂反应生成有色产物,通过测量产物的吸光度来定量蛋白质的浓度。
需要注意的是,以上方法中的每一种都有其适用范围和局限性,具体选择方法时需根据实验要求、样本特性和实验设备等因素进行合理选择。
此外,还可结合多种方法进行确认和校准以提高检测结果的准确性和可靠性。
生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验答案doc
实验二检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质学习目标:初步掌握鉴定生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的基本方法,尝试用化学试剂检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质。
重点、难点:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质知识链接:了解同种生物组织中有机物含量的差异和不同生物组织间有机物含量的差异,为本章第一节及第四节的学习打下基础。
学习过程实验原理:1、某些化学试剂能使生物组织中的有机化合物产生特定的_____________________________________2、糖类中的还原糖,如:________________与_________________发生作用,生成________________3、脂肪可以被_____________________染成橘黄色,或被__________________ 染成红色4、蛋白质与__________________发生作用,产生_______________反应5、淀粉遇_____________蓝色实验过程:一、还原糖的检测和观察1、制备生物组织样液(1)_________________(洗净、去皮、切块)取5克放入研钵中。
(2)____________________________(加少许Si02和5ml水)(3)_____________(将漏斗插入试管,漏斗上垫一层纱布)(4)_____________(组织样液备用)2、还原糖的检测和观察(1)试管+2ml__________________________________(2)加_______________1ml振荡(溶液呈蓝色)(3)_______________(将试管放入盛有50—600C温水的大烧杯中加热约2min)(4)观察颜色变化二、脂肪的检测和观察1、制备生物组织实验材料:花生种子(浸泡3-4小时)、作徙手切片、取极薄的一片移至载玻片中央。
2、_____:滴2—3滴苏丹Ⅲ染液,染色3min(苏丹Ⅳ染色1min)3、______:吸取剩余染液,并滴1-2滴50%酒精溶液,洗取浮色4、______:吸取酒精,滴1-2滴蒸馏水,盖上盖波片。
高中生物必修一可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定-人教版
8、下面是一组探究生物体内主要有机物存在与否的鉴别实验,按表中数字顺序
(2)__用__滴__管__向__试__管__中__滴___加__2_—__3_滴__5_%__的__N_a_O__H_溶__液__,__振__荡__。___ (3)_用__滴__管__向__试__管__中__滴__加__2_—__3_滴__3_%__的__C__u_S_O_4_溶___液__,__振__荡__ (4)结果观察:_静__置__一__会__儿__后__,__观__察__到__红__紫__色__,__说__明__唾液中含有蛋白质
②A组发育正常,B组和C组不正常,但B组比C组发育状况指标好,差异显著。说明“人造蛋白”比缺乏 蛋白质对儿童正常发育更有害(注:其他的合理答案均可)
参考答案:
2. (2) ①选取年龄相当、体重相当、发育良好的大白鼠若干,平均分为三组,标记为A、 B、C。分别饲养 ②每天分别给A、B、C三组大白鼠饲喂等量的真正的纯牛奶、不含任何蛋白质的假 牛奶、含有“人造蛋白”的假牛奶
【实验一】 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
【实验一】生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
【实验原理】
1、可溶性还原糖的鉴定原理 : (1)生物组织中普遍存在的可溶性还原糖种类较多,常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖, 分子内都含有游离的具有还原性的半缩醛羟基,因此叫做还原性糖; (2)用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性的还原糖的存在与否。斐林试剂由质量浓 度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成,二 者混合后,立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的 条件下,能够生成砖红色的Cu2O沉淀 (3)用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色—棕色—砖红 色(沉淀)。
高考生物 考点一遍过3 检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质(含解析)
藏躲市安详阳光实验学校考点03 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质高考频度:★★★☆☆难易程度:★★★☆☆1.实验原理2.实验步骤考向一糖类、脂肪和蛋白质的检测原理与操作1.关于生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验,下列叙述正确的是A.还原糖、脂肪的鉴定通常分别使用双缩脲试剂、重铬酸钾试剂B.鉴定还原糖、蛋白质都需要进行水浴加热C.用于配制斐林试剂的NaOH溶液是无色的D.脂肪、蛋白质鉴定时分别可见橘黄色颗粒、砖红色沉淀【参考答案】C【试题解析】还原糖、脂肪的鉴定通常分别使用斐林试剂、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ试剂,A错误;鉴定蛋白质不需要进行水浴加热,B错误;NaOH溶液是无色的,C正确;蛋白质鉴定时出现紫色,D错误。
技法提炼利用“一同三不同”区分斐林试剂与双缩脲试剂:“一同”是指都含有NaOH和CuSO4两种成分,且NaOH溶液的质量浓度都为0.1 g/mL。
“三不同”分别指:(1)使用原理不同。
斐林试剂的实质是新配制的Cu(OH)2溶液,双缩脲试剂的实质是碱性环境中的Cu2+。
(2)使用方法不同。
鉴定还原糖时将甲、乙两液等量混匀后立即使用;鉴定蛋白质时先加A液1 mL摇匀,然后加B液4滴,振荡摇匀。
(3)CuSO4溶液的浓度不同。
斐林试剂中CuSO4溶液的质量浓度为0.05 g/mL,双缩脲试剂中CuSO4溶液的质量浓度为0.01 g/mL。
2.下列关于“检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质”实验操作步骤的叙述中,正确的是A.用于鉴定还原糖的斐林试剂甲液和乙液,可直接用于蛋白质的鉴定B.若要检测植物体中是否含有脂肪,一定需要用显微镜观察C.鉴定可溶性还原糖时,要加入斐林试剂(甲液和乙液等量混合均匀再加入) D.用双缩脲试剂鉴定蛋白质时,需水浴加热2 min才能看到紫色【答案】C【解析】斐林试剂甲液和双缩脲试剂A液的成分及浓度都相同,斐林试剂乙液和双缩脲试剂B液的成分相同但浓度不同,因此用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液不能直接用于蛋白质的鉴定,A错误;鉴定脂肪时,可将植物组织制成匀浆后检测,不需要使用显微镜,B错误;鉴定可溶性还原糖时,斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀再加入,C正确;用双缩脲试剂鉴定蛋白质时,不需要水浴加热,D错误。
5检测生物组织中的还原糖脂肪和蛋白质
五、练习题
(一)单选题 1.下列糖类中属于可溶性还原糖的是:① 葡萄糖 ②淀粉 ③纤维素 ④蔗糖 ⑤果糖 ⑥ 麦芽糖 A.①⑤⑥ B.①② C.①②③④ D.②③④⑥
2.某学生在显微镜下观察花生子叶的切片 ,当转到细准焦螺旋时,有一部分细胞看得 清晰,另一部分细胞较模糊,这是由于 A.反光镜未调节好 B.标本切得厚薄不均 C.细准焦螺旋未调节好 D.显微镜物镜损坏
反应条件
反应现象 样液变 色 样液变 色
2、思考
(1)鉴定还原糖的选材为何不选用双子叶植 物或单子叶植物的叶片?理想的实验材料是 什么?
①在双子叶植物中,光合作用的主要产物 葡萄糖形成后,合成为淀粉,暂时贮藏在 叶子内,而淀粉属于非还原糖,因此,选 材时最好不用双子叶植物的叶子作实验材 料。
②有些单子叶植物,如韭菜、鸢尾等,并不 将光合作用的初始产物转变为淀粉,因此叶 内含有大量的还原糖。但是,由于叶片中叶 绿素含量高而颜色较深,对于鉴定时的颜色 反应起着掩盖作用,导致实验现象不明显, 因此,也不宜用单子叶植物的叶子作实验材 料。 本实验最理想的实验材料是还原糖含量 较高的植物组织或器官,而且组织的颜色较 浅或近于白色,如苹果和梨的果实。经实验 比较,颜色反应的明显程度依次为:苹果→ 梨→白色甘蓝叶→白萝卜。
四、例题 (一)考查实验材料
1.在生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 实验中,对实验材料选择的叙述中错误的是 A.甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等,都含 有较多的糖且近于白色,故可以用于进行 还原糖的鉴定 B.花生种子含脂肪多且子叶肥厚,是用于脂 肪鉴定的理想材料 C.大豆种子蛋白质含量高,是进行蛋白质鉴 定的理想植物材料 D.鸡蛋清含蛋白质多,是进行蛋白质鉴定的 动物材料
7.脂肪鉴定实验时,切片做好后应进行的操 作步骤依次是 A.削片-染色-洗浮色-镜检 B.染色-洗浮色-制片-镜检 C.制片-镜检-染色-洗浮色 D.染色-制片-洗浮色-镜检
高考生物一轮复习:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
观察溶液颜色变化,则不必使用显微镜。
02 Part
命题趋势必明 MINGTIQUSHIBIMING
命题点 1 考查实验原理、材料选取和操作过程
1.关于生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质和 DNA 的鉴定实验,下
高考生物一轮总复习 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
01
相关知识必会
02
命题趋势必明
03
强化训练必做
01 Part
相关知识必会 XIANGGUANZHISHIBIHUI
实验基础
1.还原糖的检测
2.脂肪的检测 (1)检测原理:脂肪+苏丹Ⅲ(Ⅳ)染液→_橘__黄_色__(_红_色__)____ 。 (2)检测步骤: 方法一:花生种子匀浆+3 滴苏丹Ⅲ(Ⅳ)染液→橘黄色(红色)。 方法二:
剂和NaOH溶液都是无色的;用双缩脲试剂鉴定蛋白质时,会
发生紫色反应。 答案:C
2.对下表的有关分析错误的是
()
溶液 溶质的元素组成 检测试剂 颜色反应 溶质的基本单位
甲
C、H、O
①
砖红色
葡萄糖
乙 C、H、O、N等 双缩脲试剂 ②
③
A.甲可能是麦芽糖溶液
B.①是斐林试剂,使用时需水浴加热
C.乙液可能是一种酶溶液
3.下列有关物质检测的说法正确的是( ) A.淀粉的水解产物可将斐林试剂还原产生砖红色沉淀 B.变性的蛋白质不会与双缩脲试剂发生颜色反应 C.DNA 溶解在二苯胺试剂中可使溶液呈蓝色 D.苏丹Ⅳ染液可使花生子叶细胞中的脂肪颗粒呈现红色 解析:淀粉的水解产物是葡萄糖和麦芽糖,可将斐林试剂还原产 生砖红色沉淀,A正确;变性的蛋白质的空间结构被破坏,但是 肽键没有被破坏,仍然会与双缩脲试剂发生颜色反应,B错误; DNA溶解在二苯胺试剂中后,需要水浴加热才能使溶液呈蓝色, C错误;苏丹Ⅳ染液遇脂肪呈现红色,D正确。 答案:AD
生物实验报告(精选9篇)
生物实验报告生物实验报告(精选9篇)在人们素养不断提高的今天,我们使用报告的情况越来越多,报告中提到的所有信息应该是准确无误的。
那么你真正懂得怎么写好报告吗?下面是小编整理的生物实验报告,欢迎大家分享。
生物实验报告篇1一、实验目的初步掌握鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。
二、实验原理1、还原糖的鉴定原理生物组织中普遍存在的还原糖种类较多,常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖。
它们的分子内都含有还原性基团(游离醛基或游离酮基),因此叫做还原糖。
蔗糖的分子内没有游离的半缩醛羟基,因此叫做非还原性糖,不具有还原性。
本实验中,用斐林试剂只能检验生物组织中还原糖存在与否,而不能鉴定非还原性糖。
斐林试剂由质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。
Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下,能够生成砖红色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。
其反应式如下:CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色棕色砖红色(沉淀)。
2、蛋白质的鉴定原理鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂。
双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液(A)和质量浓度为0.01g/mL(B)的硫酸铜溶液。
在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲(H2NOC—NH—CONH2)能与Cu2+作用,形成紫色或紫红色的络合物,这个反应叫做双缩脲反应。
由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此,蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。
3、脂肪的鉴定原理脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色,被苏丹Ⅳ染成红色三、实验过程(见书P18)四、实验用品(见书P18)五、注意1、关于鉴定还原糖的实验,在加热试管中的溶液时,应该用试管夹夹住试管上部,并放入盛开水的大烧杯中加热。
实验报告还原糖测定(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习还原糖的检测原理和方法。
2. 掌握斐林试剂的使用方法。
3. 通过实验了解还原糖在食品、生物样品中的应用。
二、实验原理还原糖是指在水溶液中能将斐林试剂还原成砖红色沉淀的糖类物质。
斐林试剂是一种含有CuSO4和NaOH的混合溶液,在加热条件下,Cu2+被还原成Cu2O,形成砖红色沉淀。
还原糖与斐林试剂反应,生成砖红色沉淀的多少与还原糖的浓度成正比。
三、实验材料1. 试剂:斐林试剂、NaOH溶液、CuSO4溶液、葡萄糖标准溶液、蒸馏水。
2. 仪器:试管、试管架、酒精灯、恒温水浴锅、移液器、滴定管。
四、实验步骤1. 准备斐林试剂:将CuSO4溶液和NaOH溶液按1:9的比例混合,现配现用。
2. 配制葡萄糖标准溶液:准确称取1.0g葡萄糖,用蒸馏水溶解并定容至100ml,配制成10mg/ml的葡萄糖标准溶液。
3. 样品处理:准确称取待测样品0.1g,用蒸馏水溶解并定容至10ml,配制成0.01mg/ml的样品溶液。
4. 实验步骤:a. 取一支试管,加入1ml斐林试剂;b. 取另一支试管,加入1ml样品溶液;c. 将两支试管同时放入恒温水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态2分钟;d. 观察颜色变化,记录结果。
5. 结果处理:a. 将实验结果与葡萄糖标准溶液进行对照;b. 计算样品中还原糖的浓度。
五、实验结果与分析1. 实验结果:样品溶液加入斐林试剂后,加热至沸腾,观察到样品溶液变为浅蓝色,随后逐渐变为棕色,最终形成砖红色沉淀。
2. 结果分析:根据实验结果,样品溶液中加入斐林试剂后,发生了还原反应,生成了砖红色沉淀。
这说明样品中含有还原糖,且其浓度与斐林试剂反应生成的沉淀量成正比。
六、实验讨论1. 实验过程中,样品溶液加热至沸腾时,需保持沸腾状态2分钟,以确保还原糖与斐林试剂充分反应。
2. 实验结果中,样品溶液的颜色变化过程为浅蓝色→棕色→砖红色沉淀,说明还原糖在加热条件下,与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。
高中生物必修一可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 人教版
2、据报道,继“阜阳假奶粉案”曝光后,“假牛奶案”逐渐浮出水面。一些不法商家生产的所
谓“100%纯牛奶”居然与牛没有任何关系,只要用香精、糖、自来水和一些添加剂,就可以生 产出“纯牛奶”。更耸人听闻的是,不法商家利用垃圾堆里的破旧皮鞋、皮衣、皮帽及其他皮 具,经过化学、生物处理,水解出皮革中的原有蛋白(称“人造蛋白”),作为原料制成假牛
C
B
D
A
5.对斐林试剂和双缩脲试剂的配方,叙述不正确的是( C )
A.都含有NaOH溶液和CuSO4 B.斐林试剂的配制是将4~5滴0.05g/mL的CuSO4溶液滴入2mL 0.1g/mL的NaOH C.双缩脲试剂是将3~4滴0.01g/mL的CuSO4溶液滴入2mL 0.1g/mL 的NaOH D.双缩脲试剂含有两种试剂:质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液和质量 浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液
奶。有人分析,“阜阳假奶粉案”所造成的大头娃娃致死,并非单纯是蛋白质含量低那么单纯
,很可能是添加了“人造蛋白”所致。 请设计实验,探究“人造蛋白”是否比缺乏蛋白质更有害儿童正常发育。 (1)实验材料:幼龄大白鼠若干、真正的纯牛奶、不含任何蛋白质的假牛奶、含有“人造蛋白
”的假牛奶、发育状况测定装置(可测定一定的发育状况指标)、饲养装置等。
(1 0.1g/mL的NaOH
和乙液(0.05g/mL的CuSO4溶液)分别配制、储存,使用时,再临时配制,将4~5 滴乙液滴入2mL甲液中,配完后立即使用。 (2)双缩脲试剂的使用,应先加试剂A(0.1g/mL的NaOH溶液),造成碱性的反应 环境,再加试剂B(0.01g/mL的CuSO4溶液)。
用发育状况测定装置测定 A、B、C三组鼠的发育状况。记录各组发育状况指标,计算出各组的平均值,进行比较分折 ④_____________________________________________________________________
还原糖鉴定步骤
还原糖鉴定的步骤
在生物化学和食品科学中,还原糖鉴定是一个重要的实验过程。
这个过程用于确定样品中是否含有可还原性糖,例如葡萄糖、果糖等。
以下是还原糖鉴定的一般步骤:
1. 准备样本:首先,你需要准备一个包含可能含有还原糖的样本。
这可以是任何你想测试的食物或液体。
2. 配制试剂:还原糖鉴定的主要试剂是本尼迪特试剂,它由硫酸铜和酒石酸钾钠混合而成。
这种试剂会在遇到还原糖时发生颜色变化。
3. 加入样本:将你想要测试的样本加入到配制好的本尼迪特试剂中。
确保样本充分与试剂混合。
4. 加热反应:将混合了样本和试剂的试管放入沸水中加热约5分钟。
在此过程中,如果有还原糖存在,那么它会与本尼迪特试剂发生反应,生成红色的氧化亚铜沉淀。
5. 观察结果:从热水中取出试管,让其冷却至室温。
然后,通过观察试管中的溶液颜色变化来判断是否存在还原糖。
如果溶液变为砖红色,那么就说明样本中含有还原糖。
6. 记录和分析结果:最后一步是记录你的观察结果,并对数据进行分析。
你可以根据颜色变化的程度来大致估计还原糖的含量。
一、还原糖含量的测定
三、实验材料、仪器和试剂:
1、实验材料:苹果(约0.5 g)
2、仪器:水浴锅;可见分光光度计等。 3、试剂:
(1)0.5 mg/mL葡萄糖标准液
(2)3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂(碱性)
四、实验步骤:
1、葡萄糖标准曲线的绘制 2、还原糖的提取
3、样品含糖量的测定:
生物化学实验
实
验
四
植物组织中还原糖的测定
—3,5-二硝基水杨酸比色法
学时:3
一、实验目的:
1、掌握还原糖和总糖测定的基本原理。
2、掌握比色法测定还原糖的操作方法。
二、实验原理:
1、还原糖:指含有游离的半缩醛(酮)基糖。 单糖都是还原糖;某些二糖是还原糖(如麦芽糖、
乳糖等);多糖为非还原糖。
2、总糖的提取及双、多糖的酸水解。 利用糖的溶解度不同,可将植物样品中的单糖、
3、样品含糖量的测定: 取提取液0.5ml,按上表操作。
五、计算:
还原糖含量(μg/ g )=
还原g)
六、思考题:
1、何谓还原糖?测定还原糖的方法还 有哪几种? 2、本实验的注意事项?
测定还原糖其它方法
(1)蒽酮比色法:
强酸可使糖类脱水生成糠醛,糠醛与蒽
葡萄糖含 量(μg) 0 50 100 150 200
0.5
4 混匀
250
χ1
2、还原糖的提取
① 取0.5g样品于研钵中,加水2ml,充分研磨。
② 用2ml蒸馏水分三次冲洗研钵(总体积小于10 ml),转入10ml离心管中。 ③ 在50℃水浴中恒温20分钟,冷却后于 4000r/min, 离心5分钟。 ① 取上清转入50ml容量瓶中,用蒸馏水定容, 待测。
1检测生物组织中还原糖
1.检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质2.用显微镜观察多种多样的细胞3.观察线粒体和叶绿体4.通过模拟实验探究膜的透性5.观察植物细胞的质壁分离和复原6.探究影响酶活性的因素7.叶绿体色素的提取和分离8.探究酵母菌的呼吸方式9.观察细胞的有丝分裂10.观察细胞的减数分裂11.调查常见的人类遗传病12.植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用13.探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化14.土壤中动物类群丰富度的研究15.探究酶在洗涤方面的作用16.酵母细胞的固定化技术17.腐乳的制作18.果酒和果醋的制作19.蛋白质的提取和分离20.DNA的粗提取与鉴定实验一检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质一.实验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质二.实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。
1.可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O 沉淀。
如:葡萄糖+ Cu ( OH ) 2 ___加热_______ 葡萄糖酸+ Cu 2O↓(砖红色)+ H 2O,即Cu ( OH ) 2被还原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。
2.脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色)。
淀粉遇碘变蓝色。
3.蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。
(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反应。
)三.实验材料提示:低倍镜的视野大,通过的光多,放大的倍数小;高倍镜视野小,通过的光少,但放大的倍数高。
问(2)为什么要先用低倍镜观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察?提示:如果直接用高倍镜观察,往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。
因此,需要先用低倍镜观察清楚,并把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察。
问(3)用转换器转过高倍镜后,转动粗准焦螺旋行不行?提示:不行。
实验一还原糖和总糖的测定——3,5二硝基水杨酸比色法
《生物化学》实验指导书适用专业:生物科学、食品科学、生物工程、农学、园艺、环境科学孝感学院生命科学与技术学院生物化学实验细则为了保证生物化学实验的顺利进行,培养同学们掌握良好、规范的生物化学基本实验技能,特制定以下实验细则,请同学们严格遵守。
1. 实验前应提前预习实验指导书并复习相关知识。
2. 严格按照生物化学实验分组,分批进入实验室,不得迟到。
非本实验组的同学不准进入实验室。
3. 进入实验室必须穿实验服。
各位同学进入各自实验小组实验台后,保持安静,不得大声喧哗和嬉戏,不得无故离开本实验台随便走动。
绝对禁止用实验仪器或药物嬉耍。
4. 实验中应保持实验台的整洁,废液倒入废液桶中,用过的滤纸放入垃圾桶中,禁止直接倒入水槽中或随地乱丢。
5. 实验中要注意节约药品与试剂,爱护仪器,使用前应了解使用方法,使用时要严格遵守操作规程,不得擅自移动实验仪器。
否则,因非实验性损坏,由损坏者赔还。
6. 使用水、火、电时,要做到人在使用,人走关水、断电、熄火。
7. 做完实验要清洗仪器、器皿,并放回原位,擦净桌面。
8. 实验后,要及时完成实验报告。
目录实验一还原糖和总糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法...............................1实验二油脂酸价的测定............................................................5实验三蛋白质的提取及浓度测定¬(紫外吸收法)........................................7实验四淀粉酶活力的测定...........................................................9实验五酶的激活和抑制作用......................................................13实验六氨基酸的分离鉴定――纸层析法............................................14实验七基因组DNA的快速提取---碘化钾法........................................16实验八琼脂糖凝胶电泳技术――DNA样品检测.....................................18实验一还原糖和总糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法一、目的与要求掌握还原糖和总糖测定的基本原理,学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用。
2021年高考试题真题——生物(湖南卷) Word版含解析
20.某林场有一片约2公顷的马尾松与石栎混交次生林,群落内马尾松、石栎两个种群的空间分布均为随机分布。为了解群落演替过程中马尾松和石栎种群密度的变化特征,某研究小组在该混交次生林中选取5个固定样方进行观测,每个样方的面积为0.04公顷,某一时期的观测结果如表所示。
实验名称
实验操作
A
检测生物组织中的还原糖
在待测液中先加NaOH溶液,再加CuSO4溶液
B
观察细胞中DNA和RNA的分布
先加甲基绿染色,再加吡罗红染色
C
观察细胞中的线粒体
先用盐酸水解,再用健那绿染色
D
探究酵母菌种群数量变化
先将盖玻片放在计数室上,再在盖玻片边缘滴加培养液
A.AB.BC.CD.D
3.质壁分离和质壁分离复原是某些生物细胞响应外界水分变化而发生的渗透调节过程。下列叙述错误的是()
79
77
注:同一树种的树高与年龄存在一定程度的正相关性;两树种在幼年期时的高度基本一致。
回答下列问题:
(1)调查植物种群密度取样的关键是_________;根据表中调查数据计算,马尾松种群密度为_________。
(2)该群落中,马尾松和石栎之间的种间关系是_________。马尾松是喜光的阳生树种,石栎是耐阴树种。根据表中数据和树种的特性预测该次生林数十年后优势树种是_________,理由是_________。
②该实验中,光反应速率最高的是叶绿体C,表明在无双层膜阻碍、类囊体又松散的条件下,更有利于_________,从而提高光反应速率。
③以DCIP为电子受体进行实验,发现叶绿体A、B、C和D的ATP产生效率的相对值分别为1、0.66、0.58和0.41。结合图b对实验结果进行解释_________。
实验专题生物组织可溶性还原糖脂肪和蛋白质的鉴定
(淡兰色→棕色→砖色) )
(2)脂肪的鉴定
制作切片→
(D染液→吸水纸吸去染液→酒精洗去浮色→吸去多余酒精→
滴加1-2滴蒸馏水→盖片)
(3)蛋白质的鉴定
→镜检(橘黄色小颗粒)
制备样液→
2ml双缩脲试剂A液→
(红紫色)
另取2ml样液加2mlI水,颜色无变化
染色
鉴定
(2ml样液→
滴B液3-4D摇匀观察)
材料:
富含蛋白质的大豆或蛋清,(蛋清要稀释)
试剂:
双缩脲试剂
( A液:0.1g/ml NaOH;B液:0.1g/mlCuSO4)
双缩脲反应:HNOC-NH-CONH+Cu+→紫色或紫红色络合物(碱性环境)
3、实验方法及步骤
(1)可溶性还原糖的鉴定
制备组织样液→
鉴定样液→
(取2ml样液于试管→
取2ml斐林试剂放入试管中→
用一移液管吸取1号试管中的唾液稀释液1ml到2试管中,充分摇匀。
另取一移液管吸取2号试管内的唾液稀释液1ml到3号试管中,充分摇匀。
用同样的方法,从3号试管中吸取唾液稀释液1ml到4号试管。
e、分析讨论
#2022
实验六.探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用
试剂与仪器: 斐林试剂等
01
02
1、实验原理:
3、试剂与仪器
4、实验方法与步骤
(1)取两支洁净的试管,编号,并且各注入2ml过氧化氢溶液
(2)向1号试管内滴入2滴肝脏研磨液;向2号对试管内滴入2滴氯化铁溶液
(3)堵住试管口,轻轻地振荡两支试管,使试管内的物质混合均匀。仔细观察并记录哪支试管产生的气泡多
(4)将点燃但无火焰的卫生香分别放入1、2试管内液面的上方,观察并记录哪支卫生香燃烧猛烈。
还原糖检测方法
4
2
2
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
4
标 准 试 验
1
1
1
4
2
1
1
4
总 糖 试验
1
2
4
2
2
4
2. 各试管冷却后,摇动试管,使试管底部的红色沉淀分散后倾入相应的三角瓶中; 3. 分别在每个试管中加入2mL 2%碘化钾溶液和2mL 2 mol/L HSO,以洗涤管中的残留物,并转入相应的试管中,最后再用1mL蒸馏水洗涤试管2次; 4. 用0.005 mol/L NaSO滴定至碘颜色接近消失时加入淀粉指示剂5滴,继续滴定至蓝色消失为止。 五、计算
实验二 总糖和还原糖的测定
一、目的要求 掌握碱性铜试剂法测定还原糖的原理和操作方法。 二、原理 单糖和某些寡糖含有游离的醛基或酮基,有还原性,属于还原糖;而多糖和蔗糖等属于非还原性糖。利用多糖能被酸水解为单糖的性质可以通过测定水解后的单糖含量对总糖进行测定。 还原糖的测定方法多种,本实验采用间接滴定法。其原理是:在碱性溶液中,二价铜离子被还原糖还原成一价的氧化亚铜,氧化亚铜在酸性环境中与一定量的过量碘起反应, 再用标准硫代硫酸钠滴定剩余的碘,即可算出还原糖的含量。反应方程式是:
+ CuO↓
CHOH
+
+
2
酒石酸甲钠
可溶性的氧化铜络合物
葡萄糖
酒石酸甲钠
葡萄糖酸
IO3¯ + 5 I¯ + 6 H 3 I + 3 HO
+
CuO + I + H Cu + I ¯+ HO
+
2+
I + 2 SO SO + 2 I¯
实验六植物组织中总糖和还原糖含量的测定DNS法
DNS法在测定总糖和还原糖中的应用
在植物组织中,总糖包括还原糖和非还原糖,通过DNS法可以测定总糖的 含量,再通过差减法得到还原糖的含量。
DNS法具有较高的灵敏度和准确性,操作简便,适用于多种植物组织中糖 含量的测定。
03
学习并掌握如何根据标准曲线计算糖含量,以及如何处理实验数据和 分析结果。
04
通过本实验的学习,学生将能够掌握植物组织中总糖和还原糖的提取 和测定方法,为后续相关研究打下基础。
02 实验原理
DNS法(二硝基水杨酸法)基本原理
DNS(二硝基水杨酸)法是一种常用 的糖类物质测定方法,通过在强酸环 境下,利用DNS与还原糖发生氧化还 原反应,生成有色产物,再通过比色 法测定糖的含量。
掌握DNS法测定总糖和还原糖的原理有助于理解实验操作步骤和结果分析,为后 续实验打下基础。
学习并掌握植物组织中总糖和还原糖的提取和测定方法
01
学习植物组织中总糖和还原糖的提取方法,包括采集样品、清洗、破 碎、浸提等步骤,以获取可用于测定的糖提取液。
02
掌握DNS法的操作流程,包括配置DNS试剂、糖提取液与DNS试剂 混合、加热煮沸、冷却、比色测定等步骤。
04 实验结果与数据分析
实验结果记录
实验组1
总糖含量为20.5mg/g,还原糖含量为15.3mg/g。
实验组2
总糖含量为22.1mg/g,还原糖含量为16.7mg/g。
实验组3
总糖含量为19.8mg/g,还原糖含量为14.9mg/g。
实验数据分析与处理
• 平均总糖含量:通过对三组实验数据的计算,得出平均总糖含量为 (20.5+22.1+19.8)/3=20.8mg/g。
知识点-检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质_2
变成砖红色
50----650C的温水
结论:可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过
程中生成砖红色沉淀,说明植物组织 样液中含有还原糖。
注意事项:
①还原糖有 葡萄糖,果糖,麦芽糖 。 ②试剂: 斐林试剂 . (甲液:0.1g/ml 的 NaOH , 乙液:0.05g/ml的 CuSO4 .) 甲乙液必须 等量混合均匀 后再加入样 液中, 现配现用 。 ③必须 用水浴加热 。
细胞和蒸馏水.上述四支试管中加入双
缩脲试剂振荡后,有紫色反应的是
( D)
A.甲、丁
B.甲、乙、丁
C.甲、乙、丙 D.甲、丙
B 2.下列关于实验操作步骤的叙述中,正确的是
A.用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙 液,可直接用于蛋白质的鉴定 B.脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄 色的脂肪滴 C.鉴定可溶性还原糖时,要加入斐林试剂甲液摇 匀后,再加入乙液 D.用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混 合均匀后,再加入含样品的试管中,且必须现配 现用
④颜色变化:
浅蓝色 棕色
砖红色
2、脂肪的检测和观察:
方法一:待测组织样液+苏丹Ⅲ染液→橘黄色
方法二:制作子叶临时切片,用显微镜观察 子叶细胞的着色情况。
取材:花生种子(浸泡3~4h),将子叶削成薄片
制片
①取最理想的薄片
②在薄片上滴苏丹Ⅲ染液(2~3min) ③去浮色(用50﹪酒精) ④ 制成临时装片
知识点—— 检测生物组织中的 糖类、脂肪和蛋白质
一.实验原理:
某些化学试剂能够使生物组织中的有关有
机化合物产生特定的颜色反应。如:
①.还原性糖的鉴定: ▲
还原性糖+ 斐林试剂
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
1、明确实验目标 2、提取知识 3、确定合适的检测方法 4、原材料处理 5、试剂和器材 6、整理实验步骤 7、明确注意事项 8、实施实验 9、总结反思
设计实验
一、实验原理
还原糖和斐林试剂在加热的条件下生成砖红色沉淀。
二、实验目的
检测生物组织中的还原糖
三、材料用具
+2H2O
砖红色沉淀
四、实验步骤 1、把梨洗干净后去皮,放在榨汁机中榨汁,获得
没有杂质的梨汁,取2ml与试管中,作为待测液
2、配制斐林试剂:取甲夜和乙液各1ml与试管中, 混合均匀
3、迅速把斐林试剂加到待测液中,震荡均匀,水 浴加热2--3分钟。
@your name
材料用具
实验材料:梨子
非还原性糖:蔗糖、淀粉等 (不能和斐林试剂发生反应)
斐林试剂
斐林试剂是由质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液和质量浓 度为0.05g/ml的硫酸铜溶液配制而成,两者混合后,立即生 成淡蓝色的(Gu(OH)2)沉淀。
2NaOH+2CuSO4→Cu(OH)2↓+Na2SO4
淡蓝色沉淀
CH2OH-(CHOH)4-CHO+2Cu(OH)2→CH2OH-(CHOH)4-COOH+Cu2O↓
注意事项
1、裴林试剂要现用现配 2、注意安全 3、废物回收
仪器:水果刀,榨汁机,
试剂:斐林试剂(甲液:0.1g/ml的氢氧化钠溶液;
乙液:0.05g/ml的硫酸铜溶液)
实 验
实验步骤 1、把梨洗干净后去皮,放在榨汁机中榨汁,获得
没有杂质的梨汁,取2ml与试管中,作为待测液
2、配制斐林试剂:取甲夜和乙液各1ml与试管中, 混合均匀
3、迅速把斐林试剂加到待测液中,震荡均匀,静 止观察。
实验材料:梨子、苹果
仪器:水果刀、榨汁机、试管、移液管、纱布
试剂:斐林试剂(甲液:0.1g/ml的氢氧化钠溶液;
乙液:0.05g/ml的硫酸铜溶液)
知识储备
生物组织内的糖类根据其有无有还原性分为还原 糖和非还原性糖。
还原糖:葡萄糖、果糖等(还原糖和斐林试剂 在加热的条件下可以生成砖红色的沉淀)