透射电镜制样要求与制样方法

合集下载

透射电镜制样流程

透射电镜制样流程透射电镜（Transmission Electron Microscopy，TEM）制样是指通过一系列的化学和物理方法来制取透射电镜所需的样品。

透射电镜是一种高分辨率的显微镜，可以在纳米尺度下观察材料的原子结构和微观形态。

为了获取高质量的TEM图像，制样过程非常关键。

下面将详细介绍透射电镜制样的流程。

1.样品制备：样品可以是纳米颗粒、薄膜、纤维或生物样品等。

首先，准备适宜的基底材料，如碳膜覆盖的铜网格或碳膜覆盖的铜刀片。

样品通常需要制成非常薄的切片，通常在50到100纳米的厚度范围内。

制备方法包括机械切割、电解石蠟切片、离子切割或电离蚀刻等。

2.固定和固化：对于生物样品，需要先进行固定处理，以保持样品的形态和结构。

常用的固定剂包括戊二醛、酸性醛或重金属盐。

然后，固定的样品需要进一步处理以固化，如用过氧化物、树脂或聚合物进行浸渍，以增加样品的稳定性。

3.切割和悬浮：将固化的样品切割成适当的尺寸和形状。

使用超微切割机、离子切割仪或其他切割工具进行切割。

切割后，样品通常会悬浮在水或有机溶液中，以便进一步处理。

4.脱水和对比染色：脱水是将样品从水中逐渐转移到有机溶剂中的过程。

这种处理可以控制样品的体积，以减少对比染色和观察中的伪影。

脱水通常通过渗透固定液逐渐转移，然后通过有机溶剂（如醋酸乙酯、丙酮或丙二醇）进行交换。

5.嵌入：将样品嵌入到透明的聚合物或树脂中。

嵌入过程中，通常采用逐渐增加浓度的树脂混合物，以确保样品得到完全浸透。

然后，将样品与树脂进行硬化，通常在高温下进行。

6.超薄切片：将固化的样品切割成非常薄的切片。

使用超薄切片机和钻磨刀片进行切割。

切割后的切片应尽快收集并转移到透明的铜网格或铜刀片上。

7.超薄切片处理：超薄切片通常需要进行后继处理以增强对比度和解决其他问题。

这可能包括染色、胶层增强或薄膜剥离等方法。

8.观察：将制备好的样品放入透射电镜中进行观察。

在观察前，样品需要在真空中或过氮气中去除气泡和其他杂质。

透射电镜制样步骤以及注意事项

透射电镜制样步骤以及注意事项透射电子显微镜（Transmission Electron Microscope，简称TEM）是目前最常用的高分辨率电子显微镜，可以用于观察物质的微观结构。

制备TEM样品的过程非常重要，下面将详细介绍TEM制样的步骤以及需要注意的事项。

制备TEM样品的步骤一般包括样品的选择、固定与固化、切片、薄化、网格制备和贴膜等。

第一步是样品的选择，样品应具有研究价值且适合观察。

例如，生物样品可以是细胞、组织或器官的薄片，金属样品可以是扁平的块状、粉末或薄膜等。

第二步是固定与固化。

对于生物样品，常用的固定方法包括浸泡法、灌注法和切片冷冻法；对于无机样品，可以使用固定剂将样品固定在固定剂中。

第三步是切片。

将固定好的样品切割成薄片，一般要求薄片的厚度在100 nm以下，通常使用超薄切片机来进行切割。

第四步是薄化。

将切割好的样品进行薄化处理，使其达到TEM观察所需的薄度。

常见的薄化方法有机械薄化、电化学薄化和离子薄化等。

第五步是网格制备。

将薄化好的样品放置在铜网格上，网格的选取应该根据所研究样品的性质和需要进行选择。

最后一步是贴膜。

将组织切片或带有样品的网格进行贴膜，以保护样品并提高图像的对比度。

在以上步骤中，需要注意的事项有：1.样品在制备过程中要避免受到污染或氧化，尽量在纯净无尘的环境中进行操作。

2.固定剂的选择要合理，不同的样品可能需要使用不同的固定剂，应根据需要进行选择。

3.切片时要注意刀片的尖锐度和切割角度，以免对样品造成损伤或变形。

4.薄化过程中要控制好加工参数，以保证样品的均匀薄化。

5.制作网格时应选择合适的网格尺寸和类型，以适应观察需求。

6.贴膜时要使薄膜均匀平整，并避免出现气泡或杂质。

总之，TEM制样是一项复杂而关键的过程，要保证样品的质量和可观察性，需要仔细选择方法、控制操作参数、注意样品的保护与处理。

合理的样品制备能够获得高质量的TEM图像，并提供准确的实验数据和结论。

透射电镜细胞样品制备流程

透射电镜细胞样品制备流程透射电镜细胞样品制备流程概述透射电镜（TEM）是一种常用于观察细胞结构和超微结构的高分辨率显微镜。

样品制备是进行TEM观察的关键步骤，正确的制备流程能够保证样品的质量和结构完整性。

流程步骤1.选择适合的细胞样品–根据研究目的选择不同类型的细胞样品，如培养细胞、动物细胞组织或植物细胞等。

–样品选择要考虑细胞生长状态、形态和结构的要求。

2.采集样品–从培养皿中取出细胞，或从动物或植物组织中切取适当大小的样品。

–注意避免样品受到污染或损坏。

3.固定样品–使用适当的固定剂，如戊二醛、冰醋酸或凝胶固定剂，对样品进行固定处理。

–固定剂的选择要根据样品类型和所需观察结构的特点。

4.去除固定剂–使用缓冲液或盐水洗涤样品，去除多余的固定剂。

–洗涤时间和次数需根据固定剂的种类和浓度进行调整。

5.后续处理–为了进一步增强对样品的对比度和分辨率，可以对样品进行染色处理。

–常用的染色剂包括重质金属盐、乙酸铀和铅染色剂等。

6.样品包埋–涂覆样品表面的浸渍剂，如环氧树脂或丙烯酸树脂。

–用于支撑样品的网格可以放置在浸渍剂中。

7.制备超薄切片–使用超薄切片机将包埋的样品切割成透明的超薄切片。

–切片的厚度通常控制在70-100纳米之间。

8.将切片转移到网格上–使用特殊工具将切片转移到电子显微镜用的网格上。

–要小心操作，避免切片受到损坏或污染。

9.干燥和稳定–将转移到网格上的切片进行脱水和干燥处理，以提高稳定性。

–常见的方法包括用醇溶液进行脱水，然后使用气体吹干。

10.开始透射电镜观察–将处理完的样品装入透射电镜，调整参数和放大倍数。

–进行细胞结构和超微结构的观察和拍摄。

结论透射电镜细胞样品制备是进行TEM观察的关键步骤。

通过选择合适的细胞样品、适当的固定、去固定剂和染色处理，以及正确的样品包埋和超薄切片制备，可以确保样品的质量和结构完整性。

准确无误的制备流程能够为细胞学研究提供可靠的数据支持。

注意事项1.样品的选择要根据研究目的和所需观察结构的特点进行。

透射电镜样品制备方法

透射电镜样品制备方法
首先，样品的准备是透射电镜制备的第一步。

在进行透射电镜
样品制备之前，需要选择合适的样品。

样品可以是固体材料、生物
组织、纳米材料等，根据研究的目的和对象进行选择。

在选择样品
的过程中，需要考虑样品的形态、尺寸、结构等因素，以确保样品
能够满足透射电镜观察和分析的要求。

其次，样品的制备过程需要严格控制。

对于固体材料样品，通
常需要将样品切割成薄片或薄膜，以确保透射电镜的电子束能够穿
透样品并产生清晰的像像。

对于生物组织样品，通常需要进行化学
固定、脱水、包埋等处理，以保持样品的形态和结构。

对于纳米材
料样品，通常需要将样品分散在适当的溶剂中，并在透射电镜网格
上制备成薄膜。

在样品制备的过程中，需要注意避免样品的污染和
损坏，确保样品的原貌和结构不受影响。

最后，在透射电镜样品制备完成后，需要进行适当的检测和验证。

可以通过光学显微镜、扫描电子显微镜等手段对样品进行初步
的观察和分析，以确保样品的质量和完整性。

在透射电镜观察之前，还需要对样品进行真空干燥等处理，以避免在透射电镜中产生气泡
和水膜等影响观察效果的问题。

总之，透射电镜样品制备是透射电镜观察和分析的基础，正确的样品制备方法对于获得准确、可靠的实验结果至关重要。

在进行透射电镜样品制备时，需要选择合适的样品、严格控制制备过程，并进行适当的检测和验证，以确保样品的质量和完整性。

希望本文提供的透射电镜样品制备方法能够对相关研究工作有所帮助。

透射电镜样品制备步骤

透射电镜样品制备步骤透射电镜是一种重要的材料表征技术，它利用电子的波动性和微粒性来观察材料的结构和性质。

为了能够使用透射电镜观察样品，首先需要对样品进行制备。

透射电镜样品制备步骤如下：1.选择合适的样品：透射电镜样品可以是固体、液体、薄膜或纳米颗粒等。

根据研究目的和样品性质选择合适的样品。

2.样品预处理：根据样品性质的不同，进行必要的预处理。

例如，对于固体样品，可以选择切割、抛光或电解抛光等方法来得到平滑的表面。

3.样品固定：将样品固定到透射电镜样品架上。

不同的样品有不同的固定方法。

例如，对于固体样品，可以使用导电胶将其固定在样品架上。

4.薄层制备：对于厚度过大的样品，需要将其制备成透明的薄层以便透射电镜观察。

常用的方法有机械研磨、电子束刻蚀或离子束刻蚀等。

5.样品清洁：将样品放入超声波清洗机中进行清洗，以去除可能附着在样品表面的杂质或污染物。

6.特殊处理：如果需要对样品进行特殊处理，例如加热、冷冻处理或受到特定环境气氛的影响等，根据需要进行相应的处理。

7.样品干燥：将样品放入真空或氮气环境中，以确保样品干燥。

避免样品受到水汽的污染。

8.获得薄片：使用切片机将固态样品切割成适当厚度的薄片。

为了获得高质量的薄片，可以选择特殊的切片工具和技术，例如离子束切片或低速钻磨切片。

9.薄片形状整理：使用不同的研磨和抛光方法，将薄片的形状和表面进行调整，以确保样品的平滑度和一致性。

10.网格制备：将薄片粘贴在透射电镜网格上。

网格可以增强样品的稳定性和保护，同时提供用于定位和标识的标记。

11.后续处理：根据研究目的和透射电镜分析的要求，可以对样品进行进一步处理。

例如，可以进行染色、脱膜、溅射或腐蚀等处理。

以上是透射电镜样品制备的一般步骤。

不同样品和研究目的可能会有所不同。

因此，根据具体的研究需求和样品特点，制备过程可以做相应的调整和优化。

透射电镜的样品制备方法详解

透射电镜的样品制备透射电镜的样品制备是一项较复杂的技术，它对能否得到好的ＴＥＭ像或衍射谱是至关重要的．投射电镜是利用样品对如射电子的散射能力的差异而形成衬度的，这要求制备出对电子束＂透明＂的样品，并要求保持高的分辨率和不失真．电子束穿透固体样品的能力主要取决加速电压，样品的厚度以及物质的原子序数．一般来说，加速电压愈高，原子序数愈低，电子束可穿透的样品厚度就愈大．对于１００～２００ＫＶ的透射电镜，要求样品的厚度为５０～１００ｎｍ，做透射电镜高分辨率，样品厚度要求约１５ｎｍ（越薄越好）．透射电镜样品可分为：粉末样品，薄膜样品，金属试样的表面复型．不同的样品有不同的制备手段，下面分别介绍各种样品的制备．（１）粉末样品因为透射电镜样品的厚度一般要求在１００ｎｍ以下，如果样品厚于１００ｎｍ，则先要用研钵把样品的尺寸磨到１００ｎｍ以下，然后将粉末样品溶解在无水乙醇中，用超声分散的方法将样品尽量分散，然后用支持网捞起即可．（２）薄膜样品绝大多数的ＴＥＭ样品是薄膜样品，薄膜样品可做静态观察，如金相组织；析出相形态；分布，结构及与基体取向关系，错位类型，分布，密度等；也可以做动态原位观察，如相变，形变，位错运动及其相互作用．制备薄膜样品分四个步骤：ａ将样品切成薄片（厚度１００～２００微米），对韧性材料（如金属），用线锯将样品割成小于２００微米的薄片；对脆性材料（如Ｓｉ，ＧａＡｓ，ＮａＣｌ，ＭｇＯ）可以刀将其解理或用金刚石圆盘锯将其切割，或用超薄切片法直接切割．ｂ切割成φ３ｍｍ的圆片用超声钻或ｐｕｎｃｈｅｒ将φ３ｍｍ薄圆片从材料薄片上切下来．ｃ预减薄使用凹坑减薄仪可将薄圆片磨至１０μｍ厚．用研磨机磨（或使用砂纸），可磨至几十μｍ．ｄ终减薄对于导电的样品如金属，采用电解抛光减薄，这方法速度快，没有机械损伤，但可能改变样品表面的电子状态，使用的化学试剂可能对身体有害．对非导电的样品如陶瓷，采用离子减薄，用离子轰击样品表面，使样品材料溅射出来，以达到减薄的目的．离子减薄要调整电压，角度，选用适合的参数，选得好，减薄速度快．离子减薄会产生热，使样品温度升至１００～３００度，故最好用液氮冷却样品．样品冷却对不耐高温的材料是非常重要的，否则材料会发生相变，样品冷却还可以减少污染和表面损伤．离子减薄是一种普适的减薄方法，可用于陶瓷，复合物，半导体，合金，界面样品，甚至纤维和粉末样品也可以离子减薄（把他们用树脂拌合后，装入φ３ｍｍ金属管，切片后，再离子减薄）．也可以聚集离子术（ＦＩＢ）对指定区域做离子减薄，但ＦＩＢ很贵．对于软的生物和高分子样品，可用超薄切片方法将样品切成小于１００ｎｍ的薄膜．这种技术的特点是样品不会改变，缺点是会引进形变．（３）金属试样的表面复型即把准备观察的试样的表面形貌（表面显微组织浮凸）用适宜的非晶薄膜复制下来，然后对这个复制膜（叫做复型）进行透射电镜观察与分析．复型适用于金相组织，断口形貌，形变条纹，磨损表面，第二相形态及分布，萃取和结构分析等．制备复型的材料本身必须是＂无结构＂的，即要求复型材料在高倍成像时也不显示其本身的任何结构细节，这样就不致干扰被复制表面的形貌观察和分析．常用的复型材料有塑料，真空蒸发沉积炭膜（均为非晶态物质）．常用的复型有：ａ塑料一级复型，分辨率为１０～２０ｎｍ；ｂ炭一级复型，分辨率２ｎｍ，ｃ塑料－炭二级复型，分辨率１０～２０ｎｍ；ｄ萃取复型，可以把要分析的粒子从基体中提取出来，这种分析时不会受到基体的干扰．除萃取复型外，其余复型只不过是试样表面的一个复制品，只能提供有关表面形貌的信息，而不能提供内部组成相，晶体结构，微区化学成分等本质信息，因而用复型做电子显微分析有很大的局限性，目前，除萃取复型外，其他复型用的很少．。

场发射透射电镜(TEM)测试制样说明

场发射透射电镜（TEM)测试制样说明测试样品范围：各种材料内部微结构进行观察；粉末、纳米颗粒形貌和粒径观察选区电子衍射和晶体结构分析；金属、陶瓷、半导体、塑料、农作物、细胞等显微结构；配合EDS能谱仪可以对各种元素进行定性和半定量微区分析，元素检测范围：B～U元素。

透射电镜（TEM)测试制样要求：1. 透射电镜能够观察200nm以下的样品；2. 对于粉末和液体样品，要求样品均匀分散在支持膜上并且干燥；3. 块体样品，要求样品大小为直径3mm的圆，厚度为200nm以下；高分辨样品要求厚度在10nm以下；4. 含磁样品需要在委托测试单中重点标识，需要特殊处理，否则不予测试；5. 需要离子减薄的金属、陶瓷样品，需要已预减到150微米以下，否则不予制样和测试。

透射电镜生物样品制备步骤：1．取材：组织块小于1立方毫米2．固定：2.5%戊二醛，磷酸缓冲液配制固定2小时或更长时间。

用0.1M磷酸漂洗液漂洗15分三次1%锇酸固定液固定2-3小时用0.1M磷酸漂洗液漂洗15分三次3．脱水：50%乙醇15-20分70%乙醇15-20分90%乙醇15-20分90%乙醇90%丙酮（1：1）15-20分90%丙酮15-20分以上在4度冰箱内进行100%丙酮室温15-20分三次4．包埋：纯丙酮+包埋液（2：1）室温3-4小时纯丙酮+包埋液（1：2）室温过夜纯包埋液37度2-3小时5．固化：37度烘箱内过夜45度烘箱内12小时60度烘箱内24小时6．超薄切片机切片70 nm7．醋酸铀-柠檬酸铅双染色负染色的操作方法用一根细滴吸管吸一滴样品悬液滴在有膜的铜网上，滴样时要防止铜网被液体吸到管上来或翻转而被污染。

如果用Formvar膜时，在制好膜后，可以直接在粘于滤纸上的铜网进行负染色操作。

如果用碳膜时，要用镊子夹着铜网，滴液后静置数分钟，然后用滤纸从铜网边缘吸去多余的液体，滴上负染色液，染色1～2分钟用滤纸吸去负染色液，再用蒸馏水滴在铜网上洗1～2次，用滤纸吸去水，待干后可用于电镜观察。

tem透射电镜的样品制备方法

tem透射电镜的样品制备方法TEM（透射电子显微镜）是一种常用的高分辨率显微镜，可以观察到物质的结构和组成。

样品制备对于TEM观测至关重要，良好的样品制备可以提供高质量的显微图像。

以下是TEM透射电镜的样品制备方法的详细讨论。

1.样品选择：选择适合TEM观察的样品，典型的样品包括纳米材料、生物细胞、材料薄膜等。

根据需要选择合适的样品尺寸和形状。

2.样品固定：根据样品的特性和需要，采取合适的方法将样品固定在支撑物上。

常用的方法包括离心沉淀、滴定、蒸发浓缩等。

对于生物样品，可以使用化学固定剂（如戊二醛）进行化学固定。

3.样品切片：对于大尺寸或不透明的样品，需要将其切割成薄片，一般要求切片尺寸在100 nm以下。

常用的切片工具有超声切割仪、离子切割仪等。

切割样品时要注意样品的定位和定向，以确保观察到感兴趣的区域。

4.样品脱水：对于生物样品，需要将其进行脱水处理。

脱水可以使用乙醇和丙酮等有机溶剂，逐渐将样品中的水分替换为有机溶剂。

脱水过程中要避免剧烈振荡，以防止样品的破坏。

5.样品浸渍：将脱水后的样品浸渍在透明介质中，如环氧树脂或聚合物。

浸渍过程中需要避免气泡和异物的进入，以保持样品的质量。

6.样品调平：将浸渍后的样品放在平板上，用研磨纸将其调平。

调平过程中要注意避免样品的损坏。

7.样品切割：将调平后的样品切成适当尺寸的小块，便于后续的操作。

切割时要使用锋利的刀具，以保证切面的平整度。

8.样品研磨：使用研磨纸或研磨腰带对样品进行研磨，以使其表面更加平整。

研磨过程中要注意研磨力度的控制，以免样品的破损。

9.样品薄化：使用电子束或离子束对样品进行薄化处理，将其厚度控制在适当的范围内。

薄化过程中要注意能量和时间的控制，以避免样品的损坏。

10.样品清洁：最后，使用有机溶剂或气流将样品上的杂质去除，使样品表面干净。

以上就是TEM透射电镜的样品制备方法的详细讨论。

不同的样品可能需要不同的制备方法，需要根据实际情况进行调整。

透射电镜样品取材方法及要求

透射电镜样品取材⽅法及要求透射电镜样品取材⽅法及要求⼀、透射电镜样品取材⽅法（⼀）组织和器官取材⽅法：事先准备好所需的器械和固定液，并把它放4℃冰箱内预冷备⽤。

如为穿刺物（肾组织、肝组织、脾组织等）、剪取物（胃镜剪取物、⽀⽓管镜剪取物、肠镜剪取物等）、⼿术切除物（肿瘤组织以及实验动物脏器等），均应在离体后迅速⽤⽣理盐⽔冲洗后或直接投⼊预冷的2.5%戊⼆醛固定液（保质期为1个⽉）内，并把它放4℃冰箱内保存，⼀般要求在两分钟内完成。

在处理⼿术切除物时，应事先准备好两把锋利的⼑⽚（如剃须⼑或⼿术⼑）和蜡板，把固定液滴在蜡板上，再把切下来的脏器⽤⼿术⼑切成⼩块，放在蜡板上的固定液中，接着⽤双⼑⽚拉锯法在固定液中将组织切成约1⽴⽅毫⽶⼤⼩或横切⾯约1平⽅毫⽶的长条形，然后⽤⽛签或镊⼦（轻轻夹住，禁⽌挤压）把组织移⼊装有固定液的⼩瓶内，瓶⼦建议⽤带螺纹密封的样本瓶（见下图），确保固定液不会溢出，固定液⼀定要加注到瓶⼦的九成满。

如为肺组织，应在固定液中充分震荡，使其完全沉到瓶底为⽌。

（⼆）游离细胞取材法：组织培养和游离细胞（如⾎细胞、脱落细胞以及细菌病毒等），常悬浮分散在介质中，⾸先必须将其凝集成团，然后进⾏固定，具体做法如下：1、⾎浆凝集法：将抗凝全⾎离⼼分层（2000转/每分钟，10—20分钟），⽤⽑细吸管沿着管壁轻轻的将上清夜吸取（不要破坏⽩细胞层），接着⽤吸管吸取固定液，并沿着管壁将2.5%戊⼆醛固定液慢慢地加⼊进⾏固定，然后把它放在4℃冰箱内保存。

2、⾎浆（⾎清）混合法：如为细菌、病毒、脱落细胞、培养细胞则先将它们制成悬液放置于离⼼管内（最好是玻璃的），离⼼成团（1000～3000转/分钟，10分钟，下同），去上清液后加⼊2.5%戊⼆醛固定10分钟左右，离⼼，再弃去多余的固定液，然后和少量抗凝⾎浆或⾎清混合均匀，离⼼成团，去上清液（留少许），⽤吸管吸取2.5%戊⼆醛固定液沿着离⼼管壁缓慢滴⼊，尽量避免团块分散，静置于4℃冰箱内保存备⽤。

透射电镜样品制备方法

¾透射电子显微镜成像时，电子束是透过样品成像。

¾由于电子束的穿透能力比较低，用于透射电子显微镜分析的样品必须很薄。

¾根据样品的原子序数大小不同，一般在50～500nm之间。

透射电镜样品的要求：¾1. 样品必须对电子束透明。

¾2. 所制得样品必须具有代表性，以真实反映所分析材料的特征。

主要方法：粉末样品、复型、离子减薄、电解双喷。

¾透射电镜观察用的样品很薄，需放在专用的样品铜网上。

¾透射电子显微镜使用的铜网一般直径为3毫米，上面铳有许多微米大小的孔，在铜网上覆盖了一层很薄的火棉胶膜并在上面蒸镀了碳层以增加其膜的强度，被分析样品就承载在这种支撑膜上。

样品铜网的作用：¾承载样品，并使之在物镜极靴孔内平移、倾斜、旋转，寻找观察区。

¾样品通常放在外径3mm ，200目方孔或圆孔的铜网上，铜网牢固夹持在样品座中保持好的热、点接触，减少因电子照射引起的热或电荷积累而产生样品漂移或损伤。

样品台透射电子显微镜样品制备电镜观察时样品受到的影响：(1)真空的影响。

含有挥发溶剂或易升华的试样必须冷冻后观察。

(2)电子损伤的影响。

试样在电镜中受到l0－3～1A/cm2的电子束照射，电子束的能量部分转化为热，使试样内部结构或外形发生变化或污染。

观察有机物或聚合物试样时，为防止电子束对试样的损伤和污染，应提高电压。

(3)电子束透射能力的影响。

由于电子束透射能力较弱，一般100kv加速电压时，试样厚度必须在20～200nm之间。

粉末样品制备¾随着材料科学的发展，超细粉体及纳米材料发展很快，而粉末的颗粒尺寸大小、尺寸分布及形态对最终制成材料的性能有显著影响，因此，如何用透射电镜来观察超细粉末的尺寸和形态便成了电子显微分析的一的一项重要内容。

¾其关键工作是是粉末样品的制备，样品制备的关键是如何将超细粉的颗粒分散开来，使其均匀分散到支持膜上，各自独立而不团聚。

透射电镜制样方法

透射电镜制样方法
透射电镜制样方法主要包括以下步骤：
1. 样品制备：首先需要选择合适的样品，并进行必要的前处理。

根据需要，可以使用传统的金相方法，如切片、打磨和腐蚀等来制备样品；也可以使用更先进的方法，如离子切片、聚焦离子束等来制备样品。

2. 高真空处理：将样品置于高真空环境下进行处理，以去除气体和水分的影响。

这可以通过在真空槽中加热样品、通入惰性气体等方法来实现。

3. 制备薄片：将制备好的样品制备成足够薄的薄片，通常厚度要求在几十纳米至几百纳米之间。

这可以通过使用超薄切片机或聚焦离子束来实现。

4. 电导涂层：为了提高样品的导电性，可以在样品表面涂上金薄层或碳薄层。

这可以通过蒸镀、溅射、离子镀等方法来实现。

5. 透射电镜成像：将制备好的样品放入透射电镜中，调整仪器参数，如加速电压、透镜聚焦等，进行成像。

可以使用像差校正技术、电子衍射等方法来提高成像质量。

需要注意的是，不同样品的制备方法会有一定差异，制备薄片时要注意避免样品的破裂和变形，电导涂层要均匀且致密，成像时要注意样品与探针的相对位置等
细节问题。

此外，透射电镜制样方法还包括一些先进的技术，如原位制备、低温制备、离子减薄等，可以根据需要选择适合的方法进行制备。

透射电镜样品制备方法及优缺点

透射电镜样品制备方法及优缺点
透射电镜样品制备主要分为两步，即液体/固体样品处理和超薄切片制备。

1、液体/固体样品处理
第一种方法是基于普通电镜样品制备的双步处理法，即第一步用电子束处理样品表面，使其导电，再经过透射电子束进行处理。

在这种方法下，样品表面层只有几百到几千纳米厚，因此，只有比较薄的样品才能够得到满意的结果。

另一种方法是采用高真空下的固态电子涂覆，即将样品表面涂覆上薄层特殊金属。

例
如可以用铱、金、铂或其它金属的熔合物作为涂层，以获得特殊的涂层电导能力，从而保
证样品的电子图像分辨率和可视深度。

2、超薄切片制备
超薄切片制备分为超声切片和非超声切片两类。

超声切片通常是采用高能量超声波振
荡使容易被劈开的液体/固体样品形成自发非规则薄片，有时还可以加入一定量的碎薄片，从而使超声对样品的透射变的更容易，提高了结果的准确性。

非超声切片制备则采用比较稳定的技术来实现，如钻石刀片切割、钝型刀制备和原子
力显微镜焦点束来制备，具有薄层切片准确厚度的特点，且可以满足多层次数据获取。

优点：
1、透射电镜样品制备要求低，可以在常规实验室条件下完成，便于实验和分析；
2、采用精确远离样品表面的电子束，使放大比例高，且能够获得更高的分辨率和更
深的可视深度；
3、三维结构复杂的物质可以藉由采用不同的金属包覆来进行分析；
1、制备过程繁琐复杂，容易出现样品分析结果不精确的情况；
2、物质表面多层次结构信息分析难度大，可能会影响分析结果准确性；
3、结构深度较大时，获取信息较困难，分析效果受到影响。

透射电镜样品制备

一、样品要求1．粉末样品基本要求（1）单颗粉末尺寸最好小于1μm；（2）无磁性；（3）以无机成分为主，否则会造成电镜严重的污染，高压跳掉，甚至击坏高压枪；2．块状样品基本要求（1）需要电解减薄或离子减薄，获得几十纳米的薄区才能观察；（2）如晶粒尺寸小于1μm，也可用破碎等机械方法制成粉末来观察；（3）无磁性；（4）块状样品制备复杂、耗时长、工序多、需要由有经验的老师指导或制备；样品的制备好坏直接影响到后面电镜的观察和分析。

所以块状样品制备之前，最好与TEM 的老师进行沟通和请教，或交由老师制备。

二、送样品前的准备工作1．目的要明确：（1）做什么内容（如确定纳米棒的生长方向，特定观察分析某个晶面的缺陷，相结构分析，主相与第二相的取向关系，界面晶格匹配等等）；（2）希望能解决什么问题；2．样品通过X-Ray粉末衍射（XRD）测试【粉末衍射标准联合委员会】、并确定结构后，再决定是否做HRTEM；这样即可节省时间，又能在XRD的基础上获得更多的微观结构信息。

3．做HRTEM前，请带上XRD数据及其他实验结果，与HRTEM老师进行必要的沟通，以判断能否达到目的；同时HRTEM老师还会根据您的其他实验数据，向您提供好的建议，这样不但能满足您的要求，甚至使测试内容做得更深，提高论文的档次。

三、粉末样品的制备1．选择高质量的微栅网（直径3mm），这是关系到能否拍摄出高质量高分辨电镜照片的第一步；（注：高质量的微栅网目前本实验室还不能制备，是外购的，价格20元/只；普通碳膜铜网免费提供使用。

）2．用镊子小心取出微栅网，将膜面朝上（在灯光下观察显示有光泽的面，即膜面），轻轻平放在白色滤纸上；3．取适量的粉末和乙醇分别加入小烧杯，进行超声振荡10~30min，过3~5 min 后，用玻璃毛细管吸取粉末和乙醇的均匀混合液，然后滴2~3滴该混合液体到微栅网上（如粉末是黑色，则当微栅网周围的白色滤纸表面变得微黑，此时便适中。

简述透射电镜中样品制备的常用方法

透射电镜中样品制备的常用方法透射电子显微镜（Transmission Electron Microscope，TEM）是一种重要的高分辨率显微镜，常用于研究物质的微观结构和性质。

在使用透射电镜观察样品之前，需要对样品进行制备，以确保样品的质量和形貌。

本文将介绍透射电镜中常用的样品制备方法，包括样品的选择、切片制备、薄膜制备等。

1. 样品的选择在进行透射电镜观察之前，样品的选择非常重要。

通常，样品需要满足以下要求：•样品具有一定的透明度，能够让电子束穿透。

•样品存在较为稳定的晶体结构，以便进行晶体学分析。

•样品的尺寸合适，不过大以免超出透射电镜的观察范围。

•样品的形状和厚度需适合观察操作。

常见的样品包括金属、有机物、无机晶体、陶瓷和生物样品等。

2. 切片制备透射电镜观察样品的常用方法之一是制备薄片，即切片制备。

切片制备的目的是将样品制备成适合透射电镜观察的薄片，通常要求薄片的厚度在几百纳米到几微米之间。

切片制备的步骤如下：步骤1：固定样品对于生物样品，首先需要将样品固定。

常用的固定方法包括冷冻固定、化学固定和凝胶固定等。

这些方法可以保持样品原有的结构和形态。

步骤2：取样从固定的样品中取出小块样品，通常使用显微针或者显微刀进行操作。

步骤3：去脂处理（可选）对于脂肪含量较高的样品，需要进行去脂处理。

常见的方法包括冷冻去脂、溶液去脂等。

步骤4：嵌培将取样得到的样品嵌入切片中，嵌培有多种方法。

常用的方法包括：冷冻嵌培、树脂嵌培等。

步骤5：切割将嵌培好的样品进行切割。

切割时需要使用马来酸酐刀或者超薄刀，在适当的位置进行切割，得到适合的样品。

步骤6：收集和保护薄片将切割好的薄片收集并放置在适当的载玻片或网格中，然后进行保护。

保护可以使用丙酮或乙醇进行漂洗、涂层等方法。

3. 薄膜制备除了切片制备外，透射电镜观察样品的另一种常用方法是薄膜制备。

相对于切片制备，薄膜制备更加灵活，可以制备更薄的样品。

薄膜制备的步骤如下：步骤1：样品制备制备需要制备的样品，并确保样品的表面较为光滑。

纳米材料透射电镜样品制备方法

纳米材料透射电镜样品制备方法
制备纳米材料透射电镜样品是一项复杂的过程，需要精密的操
作和合适的设备。

以下是一种常见的制备方法：
1. 样品准备，首先，需要选择合适的纳米材料，例如金属纳米
颗粒或纳米结构的半导体材料。

然后，将样品分散在适当的溶剂中，如乙醇或丙酮，以获得均匀的分散液。

2. 标本制备，将分散的纳米材料溶液滴在碳膜覆盖的透射电镜
网格上。

通过自然干燥或者较低温度的热处理，使样品均匀地分布
在网格上，并且避免聚集和团聚。

3. 真空干燥，将样品置于真空中进行干燥，以去除溶剂和任何
可能的残留物，确保样品的纯净度和稳定性。

4. 透射电镜观察，将制备好的样品放入透射电镜中进行观察。

在观察之前，通常需要使用离子束或者溅射技术制备悬臂梁样品，
以确保样品的薄度和透明度。

此外，还有一些其他的制备方法，如冷冻切片法、离子磨薄法
等，可以根据具体的样品特性和研究需求选择合适的方法。

在制备过程中，需要注意样品的稳定性和纯净度，避免杂质的引入和样品的变形。

同时，也需要根据透射电镜的要求，调整样品的厚度和形貌，以获得清晰的观察结果。

总的来说，纳米材料透射电镜样品的制备是一个细致而关键的步骤，对于后续的观察和分析具有重要意义。

透射电镜的制样方法

序号
1
2 3 4
电解液成份与配比
合用材料
乙醇（80ml），冰醋酸(80ml)，高氯酸 (15ml)，甘油(10ml)
正磷酸(480ml)，硫酸(50ml)，铬酐(80g)，水(60ml)
高氯酸(80ml)，冰醋酸(70ml)
高氯酸(10ml)，乙醇(90ml)
高温合金，耐热钢，铝及其合金。
铝及铝合金
和破裂。
碳一级复型
样品放入真空镀膜装置中，在垂直方向上向样品表面蒸镀一层厚度为数十纳米旳碳膜。把样品放入配好旳分离液中进行电解或化学分离。辨别率高（2－5nm），电子束照射下不易分解和破裂，样品易遭到破坏。
碳膜与塑料一级复型旳区别：
1.碳膜复型旳厚度基本上相同，而塑料复型旳厚度随试样位置而异。
下图是横截面样品旳制备示意图，如图a所示，首先将多块具有生长薄膜旳晶片对粘在一起，然后用特殊旳装置将其压紧，经过长时间固化后，再用线切割或者其他措施切出一种略不大于3mm旳小圆柱（如图b所示），确保小圆柱旳纵向接近轴线旳地方存在横截面，接下来用金刚石锯片将小圆柱切成小旳薄片，接下来旳工作与非金属材料旳制备相同。但是需要注意旳是，横截面样品旳制备要难得多，所以制备旳过程中一定要小心仔细，最佳在挖坑后来再用抛光轮再抛光一次，不然旳话在离子减薄时，生长薄膜很轻易被减掉。
钢，硅钢镍基合金，硅钢，
马氏体时效钢
离子减薄法
首先一般是用金刚石锯将块状样品切成0.5~1mm旳薄片，接下来用手工研磨旳措施将薄片研磨到50μm左右，然后用小刀片将其划为略不大于3毫米旳小块，用树脂胶或者A、B胶将小块样品粘于铜环或者钼环上，接着用手工研磨旳措施将其研磨至不大于20μm之后，用挖坑仪将其减薄至不大于10μm，然后用离子减薄仪将其减薄至穿孔为止。离子减薄是采用高能量旳Ar离子轰击样品表面，把样品表面上旳原子团或分子团剥离样品。

透射电镜的制样方法

透射电镜的制样方法一、超薄切片法。

1.1 取材。

这可是制样的头一遭，就像盖房子打地基一样重要。

取材的时候得特别小心，要选取咱们感兴趣的部位。

这部位得有代表性啊，不能瞎取。

比如说研究细胞结构的，就得找到细胞长得好、特征明显的那块组织。

而且动作要快，就像抢红包似的，手慢无。

为啥呢？因为组织一旦离开生物体，就开始发生变化了。

1.2 固定。

固定这一步可不能含糊。

就像给组织“定个型”，让它保持生前的状态。

通常会用到化学固定剂，像戊二醛啥的。

把组织泡在里面，就像把东西放在保险柜里一样，稳稳当当的。

这一步要是没做好，后面的观察就全乱套了，那可就是“一着不慎，满盘皆输”。

1.3 脱水。

脱水就像给组织“脱衣服”，把水分一点一点去掉。

用的是一系列不同浓度的乙醇或者丙酮。

这个过程得循序渐进，不能操之过急，不然组织就会被破坏。

这就好比爬山，得一步一个脚印，急不得。

1.4 浸透与包埋。

浸透呢，就是让包埋剂慢慢渗到组织里。

包埋就像给组织做个“小房子”，把它保护起来。

常用的包埋剂有环氧树脂之类的。

这一步就像给宝贝裹上一层保护膜，得仔仔细细的。

1.5 超薄切片。

这可是个精细活，切片要薄得像蝉翼一样。

用超薄切片机来切，切的时候得全神贯注，稍有不慎就会前功尽弃。

切出来的片子就像一片片小雪花，又薄又脆弱。

二、负染法。

2.1 样品准备。

先把要观察的样品处理好，比如说提纯之类的。

这就像把菜洗干净，准备下锅一样。

得把杂质去掉，让咱们想看的东西“干干净净”地呈现出来。

2.2 负染。

用重金属盐溶液来进行负染。

这就像给样品穿上一件深色的“衣服”，让它在电镜下更明显。

染的时候要控制好量，多了少了都不行，就像炒菜放盐，得恰到好处。

三、冷冻制样法。

3.1 冷冻固定。

直接把样品快速冷冻，让它瞬间定格。

这就像给样品来了个“急冻魔法”。

这样能最大程度地保持样品的原始状态，避免化学固定带来的一些变化。

3.2 冷冻超薄切片。

在冷冻的状态下进行超薄切片。

这可不容易，就像在冰上雕刻一样，需要特殊的设备和技术。

透射电镜样品制备流程及注意事项

透射电镜样品制备流程及注意事项下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor.I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!透射电子显微镜（TEM）样品的制备流程及其重要注意事项透射电子显微镜（Transmission Electron Microscope, TEM）是一种能够观察微米甚至纳米级别结构的高分辨率成像工具。