转基因检测试剂盒(植物)介绍

合集下载

转基因植物35S基因核酸检测试剂盒说明书

转基因植物35S基因核酸检测试剂盒说明书

转基因植物35S基因核酸检测试剂盒说明书转基因植物35S基因核酸检测试剂盒说明书试剂盒简介货为了适应新加坡石斑鱼虹彩病毒染料法荧光定量PCR试剂盒快速检测和疫病研究的需要,本公司参照 OIE国际标准中规定的引物序列,经多次实验及系统优化,开发生产了本试剂盒。

应用本试剂盒进行检测具有快速、灵敏、特异、准确、安全操作简单、应用广泛和高通量检测等特点及优点。

试剂盒组成及试剂配制:酶联板(Assay plate):一块(96孔)。

2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。

3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶4.生物su标记抗体稀释液(Biotinantibody Diluent):1×10ml/瓶。

5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRPavidin Diluent):1×10ml/瓶。

6.生物su标记抗体(Biotinantibody):1×120μl/瓶(1:100)7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRPavidin):1×120μl/瓶(1:100)8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

9.浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10.终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

样本处理及要求:1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于20℃或80℃保存,但应避免反复冻融。

2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于20℃或80℃保存,但应避免反复冻融。

3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。

碧云天植物原生质体分离试剂盒产品说明书

碧云天植物原生质体分离试剂盒产品说明书

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线: 400-1683301或800-8283301订货e-mail:******************技术咨询: *****************网址: 碧云天网站 微信公众号植物原生质体分离试剂盒产品编号产品名称包装C0362S 植物原生质体分离试剂盒5ml×20次产品简介:碧云天生产的植物原生质体分离试剂盒(Plant Protoplasts Isolation Kit),是一种能够简单、快捷地通过酶学方法消化植物尤其是拟南芥(Arabidopsis thaliana)细胞壁中的纤维素并释放出大量且具有生物活性的原生质体的试剂盒。

使用本试剂盒分离出的原生质体可用于质粒DNA转染以及原生质体融合等实验研究。

植物原生质体是指去除掉细胞壁后由细胞膜包被的具有生命活力的植物细胞体。

植物细胞壁的主要成分为纤维素(cellulose),半纤维素(hemicellulose)和果胶(pectin)等。

植物细胞壁组分被适当的酶消化降解后,就能释放出无细胞壁包被的植物原生质体。

原生质体是开展一系列植物细胞研究的重要材料,可以用于短时间基因表达(transient gene expression)、病毒感染(viral transfection)、体细胞杂交(somatic hybridization)、电生理研究(electrophysiological study)和形态学研究(morphological study)等,从而在植物亚细胞定位(subcellular localization)、蛋白活性分析以及蛋白与蛋白相互作用(protein-protein interaction)等研究方面发挥重要作用。

使用本试剂盒处理拟南芥叶片所获得的原生质体效果图(图1):图1. 碧云天生产的植物原生质体分离试剂盒(Plant Protoplasts Isolation Kit)分离制备的拟南芥原生质体效果图。

ELISA方法检测转基因产品(蛋白质检测方法)

ELISA方法检测转基因产品(蛋白质检测方法)

(一)适用范围本办法适用于转基因大豆及其初级加工产品中CP4 EPSPS蛋白的检测,也适用干含有CP4 EPSPS蛋白的其他转基因植物检测。

(二)试验原理酶标板表面包被有特异的单克隆捕捉抗体。

当加上测试样品时,捕捉抗体与抗原特异性结合,未结合的样品成分通过洗涤除去。

洗涤之后,加入与辣根过氧化物酶偶联的多克隆抗体,该抗体可与CP4 EPSPS蛋白的另一个抗原表位特异结合,洗涤之后,加入辣根过氧化物酶的显色底物。

H RP可催化底物产生色彩反应,色彩信号与抗原浓度在一定范围内呈线性关系。

显色一定时光后,加入终止液终止反应。

在450nm波长测每一孔的光密度。

(三)试剂1.检测试剂盒通常提供的试剂(1)大豆抽提缓冲液缓冲液,pH7.5,(2)大豆分析缓冲液磷酸盐缓冲液,Tw een-20,BS A,pH7.4(3)包被有单克隆捕捉抗体的酶标孔。

(4)与辣根过氧化物酶偶联的兔抗。

(5)偶联抗体稀释剂10%热灭活的小鼠血清。

(6)显色底物。

(7)终止液0.5%。

(8)10倍浓缩的洗涤缓冲液PBS,Tw een-20,pH7.1,(9)与基质匹配的阴性和阳性标准品,如0.1%、0.5%、1%、2%、5%。

2.其他需要预备的试剂(1)70%的溶液(体积比)取700m L甲醇加水定容至1000 m L。

(2)95%的。

(四)仪器设备1.通常试验室仪器设备。

2.酶标仪;多通道移液器。

3.孔径450 um的滤膜;孔径150 um的滤膜。

(五)操作步骤1.样品的预处理取500g以上大豆,粉碎、微孔滤膜过滤。

在操作过程中当心避开污染,避开局部过热。

定性检测的微孔滤膜孔径应为450 um,保证孔径小于450um的粉末质量占大豆样品质量的90%以上。

定量检测的样品先用孔径为450 um的微孔滤膜过滤后,再经孔径为150um的微孔滤膜过滤,过滤得到的样品量只要能满足检测要求即可。

对于其他类型的材料采纳类似的办法处理。

在检测不同批次样品之间应将处理大豆样品的全部设备举行彻底清洁。

转基因植物及其产品的检测方法

转基因植物及其产品的检测方法

转基因植物检测依据
启动子、目基因、终止子;选择标记基因 • 启动子:CaMV 35s和土壤农杆菌的nos启动子 • 终止子:土壤农杆菌的nos终止子 • 目的基因:近百种 • 选择标记基因:
✓抗生素抗性基因:新霉素磷酸转移酶基因npt-Ⅱ/ 潮霉素磷酸转移酶hpt
✓除草剂抗性基因:bar基因和als基因
组织化学染色:检测gus基因表达产物的方法 萤光测定法:
– gus基因 – 萤光素酶 – gfp基因
NanoLuc™ 萤光素酶
转基因植物检测 ---外源基因表达产物的检测
免疫学检测法:
– ELISA: – 试剂条检测: – Western blot:
转基因植物 及其产品的检测方法
转基因植物(GMO)
• 自1983年首例转基因植物问世以来,其商 业化种植面积和经济效益迅速扩大。
✓ 提高农产品产量、品质 ✓提高植物对生物和非生物胁迫的抗性
• 转基因植物及其食品的生物安全性
✓对环境的影响及生态效应 ✓食品的安全性
• 转基因植物及产品的检测
定性及定量
转基因植物检测---外源基因检测
PCR检测:
– 常规PCR – 多重PCR – 巢式PCR – 实时荧光定量PCR – PCR-ELISA – PCR-genescan
核酸杂交检测
– 印记杂交 – 斑点杂交 – 细胞原位杂交
基因芯片技术
– GMO芯片试剂盒
转基因植物检测 ---外源基因表达产物的检测

斑马鱼直接PCR的方法及说明

斑马鱼直接PCR的方法及说明

斑马鱼直接PCR的方法及说明斑马鱼直接PCR试剂盒是基于一种新的,第三代(3G)的DNA聚合酶,通过改进工程常见的植物衍生的PCR抑制剂如多酚和多糖耐受的分子进化。

包是从原油样品植物DNA 快速扩增的优化,含DNA的粗提取方法进行了抑制剂,纯化的DNA。

斑马鱼直接PCR试剂盒主要特点包括:1快速PCR技术直接从植物组织中如叶盘,种子和天然植物提取物。

2简化工作流程为转基因筛选。

3改进的PCR成功率和可重复性。

4从样品类型的漫长而艰难的目标有效放大。

斑马鱼直接PCR试剂盒描述斑马鱼直接PCR试剂盒是由于组织内的植物组织的类型和潜在的PCR抑制剂中的多样性是一个具有挑战性的应用。

斑马鱼直接PCR试剂盒是DNA从天然植物样品成功扩增的优化,含DNA粗提取方法进行了抑制,以及纯化的DNA。

斑马鱼直接PCR试剂盒包含一个新的DNA聚合酶,工程通过分子进化过程中,为提高普通植物来源的PCR抑制剂如多酚和多糖的耐受性。

在强大的放大在很宽的范围内的植物种类的样品,扩增子长度的酶结果的独特的特点,与粗提取方法。

该套件包含4个独立的部分组成:1)该厂PCR缓冲液(2X)是准备使用含有除DNA聚合酶,引物和模板的成分的鸡尾酒。

这2个缓冲区包含3毫米氯化镁;2)kapa3g植物DNA聚合酶是一个融合工程TaqDNA聚合酶的基础(A型)和改进的古细菌(B型)DNA聚合酶。

这种混合酶结合专有的抗体灭活酶*变性步骤之前;3)该厂PCR 增强剂是作为改善困难的样品和检测氯化镁滴定未能改善结果PCR性能的一个可选的添加剂;4)额外的MgCl2(25毫米)是检测需要的MgCl2优化提供。

斑马鱼直接PCR试剂盒应用斑马鱼直接PCR试剂盒是专为从各种植物样品包括长度的DNA片段的扩增≤5KB:含有携带抑制剂植物DNA粗提物直接从叶盘,种子样品,和其他植物组织样品样品中含有植物来源的化合物浓度显著斑马鱼直接PCR试剂盒包含一个新的DNA聚合酶工程通过过程的分子进化提高耐常见植物源性抑制剂。

转基因_检测_实验报告

转基因_检测_实验报告

一、实验目的通过本实验,学习并掌握转基因检测的基本原理和方法,验证转基因植物或生物体内是否存在特定目标基因,为转基因生物的安全评估提供技术支持。

二、实验原理转基因检测主要基于分子生物学技术,通过PCR(聚合酶链反应)、Southern blotting、Western blotting等方法,检测转基因生物体内是否存在目标基因及其表达产物。

三、实验材料1. 转基因植物或生物样品2. 靶标基因DNA或cDNA3. DNA提取试剂盒4. PCR试剂5. Southern blotting试剂6. Western blotting试剂7. 仪器:PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统、离心机等四、实验方法1. DNA提取(1)取一定量转基因植物或生物样品,按照DNA提取试剂盒说明书进行操作,提取总DNA。

(2)对提取的DNA进行定量,确保其浓度和纯度符合实验要求。

2. PCR检测(1)根据靶标基因设计特异性引物,进行PCR扩增。

(2)将PCR产物进行电泳分析,观察扩增条带。

3. Southern blotting检测(1)将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,转移至尼龙膜上。

(2)用靶标基因探针进行杂交,洗涤后进行化学显色。

4. Western blotting检测(1)将转基因植物或生物样品制备成蛋白质提取物。

(2)进行SDS-PAGE电泳,转移至NC膜上。

(3)用靶标蛋白抗体进行免疫检测,洗涤后进行化学显色。

五、实验结果与分析1. PCR检测通过PCR扩增,成功得到预期大小的靶标基因片段,说明转基因植物或生物体内存在目标基因。

2. Southern blotting检测通过Southern blotting检测,成功将PCR产物与靶标基因探针进行杂交,说明转基因植物或生物体内存在目标基因。

3. Western blotting检测通过Western blotting检测,成功检测到目标蛋白的表达,说明转基因植物或生物体内存在目标基因的表达产物。

TAKARA植物DNA提取试剂盒说明书

TAKARA植物DNA提取试剂盒说明书
加入 Extraction Solution 1 振荡仪振荡 5 秒,轻微离心
加入 Extraction Solution 2 振荡仪振荡 5 秒,轻微离心
加入 Extraction Solution 3 振荡仪振荡 5 秒,轻微离心
50℃温浴 15 分钟
上层水相移至新的 Microtube 中 加入异丙醇混匀后,12,000 rpm 4℃离心 10 分钟
-1-
8. 轻微离心 2 秒钟以内,于 50℃温浴 15 分钟。 注:长时间离心 Extraction Solution 3 将会分层, 务必控制在 2 秒钟以内。
9. 12,000 rpm 4℃离心 15 分钟。 10. 取上层水相移至新的 1.5 ml Microtube 中,上层水
相约 400 μl。注意尽量不要混入水相以外的物质。 11. 添加等量的异丙醇,轻柔混匀。
除去上清,加入 1 ml 70%乙醇清洗沉淀 12,000 rpm 4℃离心 3 分钟
●实验例
除去上清,沉淀干燥后用 TE Buffer 溶解
实验例 1:从植物组织中提取基因组 DNA
将拟南芥的幼芽、西红柿的幼芽和菠菜叶用剪刀剪至 3 mm 以下角形状,分别称取 20 mg 和 50 mg 放入
1.5 ml Microtube 中,于-20℃冻结后按“操作方法”进行基因组 DNA 的提取,基因组 DNA 使用 20 μl TE
淀。 注:沉淀过度干燥将导致难以溶解,请注意。
注 1. 回收的基因组 DNA 溶液可直接作为 PCR 反应的 模板或直接进行限制酶切断等反应。 使用 20 μl TE Buffer 溶解基因组 DNA 时,PCR 反应液(25 μl 反应体系)或限制酶酶切反应液(20 μl 反应体系)中添加的 DNA 溶液在 0.5~2 μl 之 间为好。

植物基因组DNA提取试剂盒(北京天根)

植物基因组DNA提取试剂盒(北京天根)

植物基因组DNA提取试剂盒1 取植物新鲜组织约100 mg或干重组织约30 mg,加入液氮充分研磨。

2 将研磨好的粉末迅速转移到预先装有700 μL 65℃预热缓冲液GP1的离心管中(实验前在预热的GP1中加入巯基乙醇,使其终浓度为0.1%),迅速颠倒混匀后,将离心管放在65℃水浴20 min,水浴过程中颠倒离心管以混合样品数次。

3 加入700 μL氯仿,充分混匀,12,000 rpm(~13,400×g)离心5 min。

注:若提取富含多酚或淀粉的植物组织,可在第3步前,用酚:氯仿/1:1进行等体积抽提。

4 小心的将上一步所得水层上相转入一个新的离心管中,加入700 μL缓冲液GP2,充分混匀。

5 将混匀的液体转入吸附柱CB3中,12,000 rpm(~13,400×g)离心30 s,弃掉废液。

(吸附柱容积为700μL左右,可分次加入离心。

)6 向吸附柱CB3中加入500 μL缓冲液GD(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm(~13,400×g)离心30 s,倒掉废液,将吸附柱CB3放入收集管中。

7 向吸附柱CB3中加入600 μL漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm(~13,400×g)离心30 s,倒掉废液,将吸附柱CB3放入收集管中。

8 重复操作步骤7。

9 将吸附柱CB3放回收集管中,12,000 rpm(~13,400×g)离心2 min,倒掉废液。

将吸附柱CB3置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。

注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,漂洗液中的乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。

10 将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200 μL洗脱缓冲液TE,室温放置2-5 min,12,000 rpm(~13,400×g)离心2 min,将溶液收集到离心管中。

转基因快速检测试纸条的检测原理及使用方法详解

转基因快速检测试纸条的检测原理及使用方法详解

转基因快速检测试纸条的检测原理及使用方法详解一、转基因快速检测试纸条简介概述:随着科技的发展,转基因产品在我们身边并不少见,尤其是转基因粮食,因此为了加强转基因作物种子选育、生产和销售等环节管理,当前农业部建议“充分利用试纸条等快速检测方法,降低成本,扩大监测范围”。

转基因快速检测试纸条作为检测水稻、玉米等农作物种子转基因检测的重要工具,在行业中的应用越来越广泛。

转基因物质属于看不见摸不着的东西,因此通过什么途径将其快速有效地检测出来,是现代人们需要考虑的一个问题,同时由于转基因快速检测的特殊性,要求检测的方法必须简单、快速,而且成本要低,而转基因快速检测试纸条正好符合这些要求,采用转基因快速检测试纸条开展农作物种子转基因检测,不仅可以降低成本,而且适用性广,可以扩大监测范围,在转基因作物实验室研究和试验、品种区域试验和审定、种子生产和销售、产品加工等各重点环节加以监管,有效避免转基因非法扩散所带来的安全隐患。

托普云农转基因快速检测试纸条的模样、原理以及使用方法,基本和早孕试纸雷同,因此其使用方法非常简单,以水稻种子检测为例,首先是取一粒水稻种子,充分压碎,转移到做好标记的提取管中。

加0.5毫升提取缓冲液溶解,盖好提取管的盖子,用力上下震荡提取管20秒~30秒,确保样品与缓冲液充分混匀,静置等待固体物质沉淀在管底,然后插入试纸条,根据其显示的结果进行对比,就可以清楚的知道种子、植株、产品等中是否含有转基因物质。

托普云农转基因快速检测试纸条用于快速检测种子或植物叶片等样品中的转基因 Bt Cry1C,灵敏度为 1%,整个检测过程只需要 10-15 分钟,适用于各类企业及检测机构。

二、转基因快速检测试纸条检测原理:转基因 Bt Cry1C 快速检测试纸应用双抗体夹心免疫层析的原理,样本中的抗原在侧向移动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体 1 结合,形成抗原-抗体复合物,继续向前方流动和 NC 膜检测线上特异性单克隆抗体 2 的结合形成双抗体夹心复合物。

检测转基因实验报告(3篇)

检测转基因实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的本实验旨在通过分子生物学技术检测转基因烟草植株中目标基因的整合和表达情况,验证转基因植株的遗传稳定性,为后续的转基因烟草的研究和应用提供科学依据。

二、实验材料1. 转基因烟草植株:含有目标基因的烟草再生植株。

2. 实验试剂:DNA提取试剂盒、PCR试剂盒、DNA分子量标准、限制性内切酶、连接酶、T载体、感受态细胞、质粒提取试剂盒等。

3. 实验仪器:PCR仪、凝胶成像系统、离心机、电泳仪、显微镜等。

三、实验方法1. DNA提取- 将转基因烟草植株的叶片剪成小块,使用DNA提取试剂盒提取总DNA。

2. PCR扩增- 设计特异性引物,针对目标基因进行PCR扩增。

- 将提取的DNA作为模板,进行PCR扩增。

3. 电泳检测- 将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,观察扩增条带。

4. 测序验证- 对扩增的特异性条带进行测序,验证其序列与目标基因的一致性。

5. Southern blot检测- 使用限制性内切酶酶切转基因烟草植株DNA和野生型烟草DNA。

- 将酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳,转移至硝酸纤维素膜上。

- 使用放射性同位素标记的目标基因探针进行杂交。

- 显影后观察杂交信号。

6. Northern blot检测- 提取转基因烟草植株RNA,进行反转录PCR,扩增目标基因mRNA。

- 将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,转移至硝酸纤维素膜上。

- 使用放射性同位素标记的目标基因探针进行杂交。

- 显影后观察杂交信号。

四、实验结果1. PCR扩增- 转基因烟草植株DNA的PCR产物在预期位置出现特异性条带,而野生型烟草DNA没有扩增产物。

2. 测序验证- 测序结果显示,扩增产物序列与目标基因序列一致。

3. Southern blot检测- 转基因烟草植株DNA的酶切产物与探针杂交后,在预期位置出现杂交信号,而野生型烟草DNA没有杂交信号。

4. Northern blot检测- 转基因烟草植株RNA的RT-PCR产物与探针杂交后,在预期位置出现杂交信号,而野生型烟草RNA没有杂交信号。

(完整版)新型植物基因组DNA快速提取试剂盒使用说明书

(完整版)新型植物基因组DNA快速提取试剂盒使用说明书

◆新型植物基因组DNA快速提取试剂盒◆目录号DN15◆使用手册◆实验室使用,仅用于体外新型植物基因组DNA快速提取试剂盒目录号:DN15目录编号包装单位DN1501 50次DN1502 100次DN1503 200次❖适用范围:适用于快速提取植物组织、细胞、真菌基因组DNA❖试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存50次100次200次RNaseA(10mg/ml)-20℃250 μl500 μl 1 ml 缓冲液AP1 室温25 ml 50 ml 100 ml 缓冲液AP2 室温10 ml 20 ml 40 ml缓冲液AP3/E 室温15 ml 25 ml 50 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇漂洗液WB 室温15 ml 25ml 50ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温15 ml 20 ml 40 ml吸附柱AC 室温50个100个200个收集管(2ml)室温50个100个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。

储存事项:1.裂解液AP1、AP3/E低温时可能出现析出和沉淀,可以在65℃水浴几分钟帮助重新溶解(AP3加入乙醇前可加热,加入乙醇后不可加热),恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。

2.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。

❖产品介绍:该试剂盒采用DNA吸附柱和新型独特的溶液系统,适合于从含酚类、多糖类和酶抑制物的植物样品中快速简单地提取基因组DNA。

可在30分钟内完成一个或多个100mg新鲜或20mg干燥的植物样品DNA的纯化工作。

提取过程不需要用到有毒的酚氯仿等有机物抽提,也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀,并能快速高效地去除多糖类、酚类和酶抑制物等杂质,纯化的DNA可直接用于PCR、酶切和杂交等实验。

新鲜或干燥的植物组织(细胞)磨碎后经裂解液裂解;蛋白质、多糖、细胞残片被沉淀去除;然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 进一步将多糖,多酚和细胞代谢物,蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。

设计转基因植物实验报告

设计转基因植物实验报告

一、实验目的本研究旨在通过基因工程技术,将目的基因导入植物细胞中,构建转基因植株,并对其表达情况进行检测和分析,以验证目的基因在植物体内的有效表达。

二、实验材料1. 植物材料:拟南芥(Arabidopsis thaliana)种子。

2. 基因工程工具:质粒载体(pUC19)、目的基因(GUS基因)、限制性内切酶(EcoRI、BamHI)、T4连接酶、DNA标记物、农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)。

3. 实验试剂:LB培养基、YEB培养基、IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)、X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)、无水乙醇、氯仿、酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)、NaCl、SDS、Tris-HCl、EDTA、MgCl2、DNA模板制备试剂盒、PCR产物纯化试剂盒等。

4. 实验仪器:PCR仪、凝胶成像系统、超净工作台、离心机、恒温培养箱、电泳仪、紫外分光光度计等。

三、实验方法1. 目的基因的克隆与鉴定(1)设计引物:根据目的基因序列,设计一对引物,分别包含EcoRI和BamHI酶切位点。

(2)PCR扩增:以目的基因的DNA模板为模板,PCR扩增目的基因片段。

(3)酶切与连接:将PCR产物进行EcoRI和BamHI双酶切,回收目的基因片段,与线性化的质粒载体连接。

(4)转化大肠杆菌:将连接产物转化大肠杆菌DH5α,挑选阳性克隆进行鉴定。

2. 转基因植株的构建(1)农杆菌转化:将鉴定后的重组质粒转化农杆菌EHA105,挑选阳性克隆进行鉴定。

(2)浸染植物组织:将转化后的农杆菌浸染拟南芥种子,培养获得转基因植株。

3. 转基因植株的分子鉴定(1)DNA提取:提取转基因植株的基因组DNA。

(2)PCR扩增:以转基因植株的基因组DNA为模板,PCR扩增目的基因片段。

(3)电泳检测:将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,观察目的基因片段的扩增情况。

4. 转基因植株的表型鉴定(1)GUS基因表达检测:提取转基因植株的叶片总蛋白,进行GUS活性检测。

美国阿格迪agdia公司转基因检测产品

美国阿格迪agdia公司转基因检测产品
NPTII检测试纸条
STX74000/0050
50条
2450
阳性质控物
LPC73000
220
8Байду номын сангаас
Bt-Cry1F, ELISA DAS ELISA
内毒素蛋白检测试剂盒
过氧化物酶标记物
PSP10301/0096
96反应孔
2660
PSP10301/0288
288反应孔
4600
PSP10301/0480
480反应孔
6.Bt-Cry1F and Bt-Cry34Ab1货号:STX10900/0050规格:50条报价:2240元
7.Bt-Cry2A货号:STX05801/0050规格:50条报价:1540元
8.Bt-Cry34Ab1货号:STX04500/0050规格:50条报价:1540元
9.Bt-Cry3Bb1货号:STX06100/0050规格:50条报价:1540元
多克隆抗体/多克隆抗体,碱性磷酸酶标记物
PSA05900/0096
96反应孔
2660
PSA05900/0288
288反应孔
4600
PSA05900/0480
480反应孔
7210
PSA05900/4800
4800反应孔
38920
Bt-Cry3AImmunoStrip检测试纸条,必须与SEB4样品提取缓冲液结合使用,请另外购买SEB4缓冲液。
10.mBt-Cry3A货号:STX06700/0050规格:50条报价:1540元
11.neomycin phosphotransferase II货号:STX73000/0050规格:50条报价:2450元

转基因检测试剂盒的原理及使用

转基因检测试剂盒的原理及使用

转基因检测试剂盒的原理及使用可能很多人都有疑问,市面上的商品哪些是转基因农作物,哪些是非转基因农作物?据小编收集资料得出,我国批准种植的转基因作物仅有棉花和番木瓜,批准进口用作加工原料的有大豆、玉米、棉花、油菜和甜菜5种作物。

那么,该如何分辨哪些是转基因产品呢?一般人可能是会通过外观或者口感来分辨,事实上这些方法都是不科学的,专业的检测转基因的方法是使用转基因检测试剂盒,尤其是在对转基因产品的安全评价、身份验证、国内监管、进出口检验、企业自控等,都离不开高效的转基因检测技术的支撑。

托普云农研发生产转基因检测试剂盒具有多种型号,不同的型号具有不同的功能特点,本文就重点介绍一下转基因Cry1C 试剂盒,该仪器也叫转基因植物蛋白浓度测定试剂盒,适用于玉米、棉花、大豆以及其各种农作物中转基因成分的快速定量测试,一起的测定原理及使用注意事项具体如下:一、转基因检测试剂盒原理:转基因Cry1C 试剂盒系用特异性抗Cry1C 单抗包被的微孔板和酶标记抗Cry1C 单抗,双抗体夹心法检测Cry1C 基因表达产物,可以高灵敏度和特异性的检测转基因植物中的Bt-Cry1C 蛋白。

二、转基因检测试剂盒使用注意事项:1、测定中需使用的所有试剂和96 孔板提前30 min 放置室温温育(否则会影响试验准确性),注意12 连管必须温育后再从平板上取下,未使用完的预包被板条应置于有干燥剂的封口袋中密封保存;2、试剂使用前应充分摇匀;3、摇动平板混匀时注意避免样品之间交叉污染;4、使用洗涤液漂洗时,洗涤液需要填满每个小孔,进行充分漂洗;5、研磨好的样品如果不能一次全部测量,可以暂时在4 ℃避光保存,但是最好在24 h 内测定;6、结果判读请在反应终止后15 min 内完成。

以上便是转基因检测试剂盒的原理和使用注意事项,转基因作物对人类的贡献毋庸置疑,规范、严格的监管是这一产业继续高速发展的根本保障,也是促进人们更加正确、客观地认识转基因作物,理性看待转基因技术和转基因食品的前提。

转基因检测试剂盒使用说明

转基因检测试剂盒使用说明

转基因检测试剂盒使用说明随着转基因问题日益成为热点,越来越多的人开始关注转基因,但是同时也出现了关于转基因的诸多争议。

目前在中国,与转基因产业相关的检验检疫机构对相关的检查和检验任务越来越多,所要面对的转基因检验指标也在不断地增加。

为了减轻相关检验人员的工作负担,也为了使他们能更好的进行检测试验,目前市场上就需要一种结构简单,可以方便贮存和携带,对存放在内的检测试剂有保温和保护效果的转基因检测试剂盒。

而托普云农Bt Cry1Ab/1Ac转基因检测试剂盒则可以快速检测种子或植物叶片等样品中的转基因,灵敏度为1%,整个检测过程只需要10-15分钟,且适用于各类企业及检测机构。

转基因检测试纸条检测原理:转基因检测试纸应用双抗体夹心免疫层析的原理,样本中的抗原在侧向移动的过程中与胶体金标记的特异性单克三隆抗体1 结合,形成抗原-抗体复合物,继续向前方流动和NC 膜检测线上特异性单克隆抗体2 的结合形成双抗体夹心复合物。

如果样本中转基因蛋白占可溶性蛋白的含量大于1%,检测线(T 线)显红色,结果为阳性;反之,检测线(T 线)不显色,结果为阴性。

【样品处理】植物种子:1、称取0.25 g 粉碎的种子样本(玉米、水稻等),到干净提取管中。

充分粉碎样本能够提高测试准确度。

)2、加0.75 mL 缓冲液溶解。

3、盖好提取管的盖子,用力上下振荡提取管20~30s,确保样品与缓冲液充分混匀。

静置等待固体物质沉淀在管底。

吸取500 μL 上清用于检测。

4、请注意不要交叉污染,每个样品采用单独的提取管。

叶片组织:1、将植物叶片组织置于一次性组织提取管的盖子与管身之间,迅速盖住盖子,重复 2 次,得到2 片圆形叶片组织。

用杵将叶片置于提取管的底部。

用记号笔在管壁做好标记。

2、将叶片充分捣碎。

3、加入0.2 mL 样品缓冲液。

4、重复碾碎步骤使样品与缓冲液充分接触混合。

拿掉杵棒(注意请将杵棒一次性使用,以免不同样品间交叉污染)。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

转基因检测试剂盒(植物)介绍
在今年年初,农业农村部制定了《2020年农业转基因生物监管工作方案》,该方案的主要就是为了切实做好农业转基因生物安全监管工作,保障我国农业转基因生物研究与应用的健康发展。

一直以来,转基因作物及其产品的检测技术是转基因生物安全管理的基础和技术保障,随着转基因技术研究和应用的不断扩大,国际贸易日益频繁,引种交流力度加大,每年都涌现出大量新的转化体和新的加工品,因此,只有通过准确检测和科学溯源,才能确保标识制度的实行,才能实现对转基因作物及其产品的有效监督和有力监管。

那么,对于不可见的转基因物质我们该如何快速有效地检测呢?可以使用转基因检测试剂盒。

Cry1C 转基因检测试剂盒也叫转基因植物蛋白浓度测定试剂盒,可用于转基因作物叶片蛋白浓度测定,转基因Cry1C 试剂盒系用特异性抗Cry1C 单抗包被的微孔板和酶标记抗Cry1C 单抗,双抗体夹心法检测Cry1C 基因表达产物,可以高灵敏度和特异性的检测转基因植物中的Bt-Cry1C 蛋白。

【Cry1C转基因检测试剂盒原理】
转基因Cry1C 试剂盒系用特异性抗Cry1C 单抗包被的微孔板和酶标记抗Cry1C 单抗,双抗体夹心法检测Cry1C 基因表达产物,可以高灵敏度和特异性的检测转基因植物中的Bt-Cry1C 蛋白。

【Cry1C转基因检测试剂盒试剂准备】
试剂盒中的20×浓缩洗涤液30 ml 加570 ml 灭菌ddH2O 溶解稀释至1×洗涤液,
5×抽提液(30 ml)加120 ml ddH2O 稀释至1×抽提液,4℃存放备用。

【样品准备】
称取约20 mg 叶片,加0.5 ml 1×抽提液(使用前30 min 放置室温)研磨至匀浆,室温放置30 min,测定前把样品上清液稀释5-20 倍。

测定茎干和胚乳中的Bt 蛋白时,样品称取约40 mg,加1 ml 1×抽提液研磨。

【Cry1C 转基因检测试剂盒注意事项】
1. 测定中需使用的所有试剂和96 孔板提前30 min 放置室温温育(否则会影响试验准确性),注意12 连管必须温育后再从平板上取下,未使用完的预包被板条应置于有干燥剂的封口袋中密封保存;
2. 试剂使用前应充分摇匀;
3. 摇动平板混匀时注意避免样品之间交叉污染;
4. 使用洗涤液漂洗时,洗涤液需要填满每个小孔,进行充分漂洗;
5. 研磨好的样品如果不能一次全部测量,可以暂时在4 ℃避光保存,但是最好在24 h 内测定;
6. 结果判读请在反应终止后15 min 内完成。

【储存条件及有效期】
试剂盒储存于2-8℃,切勿冻存;未开封试剂盒有效期12 个月,开封后3 个月内用完。

(见包装盒上标签有效期)
以上就是对转基因检测试剂盒(植物)的介绍,托普云农除了供应转基因检测试剂盒之外,还供应转基因测试纸,主要分为抗虫试纸、抗除草剂试纸、抗虫试剂盒,具有特异性强、灵敏度高、通用性广和反应速度快、耐储存等优点。

如有需要,可详细咨询!。

相关文档
最新文档