白细胞分类计数(手工法)
白细胞分类计数参考方法
ICS备案号：WS白细胞分类计数参考方法Reference leukocyte differential count method（报批稿）中华人民共和国卫生部 发布目次前言 (Ⅲ)1范围 (4)2总则 (4)3方法 (4)3.1 样本采集 (4)3.2 血涂片制备和要求 (4)3.3 血涂片染色 (4)3.4 需分类的外周血有核细胞 (5)3.5 血涂片检查步骤 (5)3.6 检验人员要求和考核 (6)附录A（规范性附录）常见外周血白细胞形态学 (7)附录B（规范性附录）计算公式 (9)附录C（规范性附录）自动白细胞分类计数的性能评价 (10)参考文献 (16)前言为了保证白细胞分类计数结果具有溯源性和准确性，特制定本标准。
本标准修改采用了美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS）颁发的《白细胞分类计数参考方法和仪器评价方法》标准（H20-A）。
本标准从20XX年XX月XX日起实施。
本标准的附录A、附录B和附录C都是规范性附录。
本标准由卫生部医政司提出。
本标准由上海市临床检验中心负责起草。
本标准主要起草人：胡晓波、许蕾、宋颖、方心驰、张锦锋。
本标准由卫生部委托卫生部临床检验中心负责解释。
白细胞分类计数参考方法1 范围本标准规定了建立白细胞分类计数参考方法中有关样本采集、血涂片制备的要求、血涂片染色、血涂片有核细胞检查的步骤、对检验人员的要求和考核等内容。
本标准适用于建立白细胞分类计数参考方法的实验室2 总则2.1 本标准采用手工目视显微镜计数法作为白细胞分类计数的参考方法。
2.2 为了保证参考方法检测结果的精密度和准确性，建立参考方法的实验室必须进行比对。
3 方法3.1 样本采集将静脉血采集于EDTA－K2抗凝剂（液体或粉末状）中（浓度为每毫升血液含1.5～2.2mg EDTA－K2·H2O）。
采血后立即混匀，应拒绝分析有肉眼可见凝块的样本。
3.2 血涂片制备和要求3.2.1 血涂片制备3.2.1.1 每份样本制作3张血涂片。
白细胞
白血病： 症状、体征 骨髓、肝、脾、淋巴结变化
无显著的感染表现 有相当数量的幼稚细胞 血象 往往有红细胞和血小板数量的变化
看WBC检查结果的方法：
1、WBC总数的变化是由某种或某些WBC 的变化引起的，本身无明确临床意义。 2、主要依据各种WBC数量变化，来推断 其临床意义。
感染性疾病的实验诊断程序
棒状小体（Auer小体）
2. 嗜酸粒细胞 ( eosinophil， E) ：
反应性增加：主要见于过敏性疾病、寄 生虫感染、猩红热等 异常增生性增加：慢粒 3. 嗜碱粒细胞( basophil ， B) ： 增加（过敏、慢粒、转移癌）
某男为中药房制剂师，经常从事药材粉碎 加工等工作，近来常感气短，阵发性哮 喘、咯大量黏液痰。
核右移
异型淋巴(空泡型)
异型淋巴--不规则型
异型淋巴--幼稚型
异型淋巴细胞
单核细胞
(monocyte,M)
白细胞计数与分类计数
白细胞计数：white blood cell count (WBC)
分类计数：differential count (DC) （一）临床应用： 感染、白血病、安全用药监护等 （二）标本采集：注意生理性变化的影响
（三）方法、原理
M+ E-
1.手工法
某女，半年前确诊为甲亢，一直口服他巴 唑治疗。
最近一次复查的血液分析仪检验结果为： RBC 4.0×1012 ／ L ， Hb 120g ／ L ， Hct 0.36，MCV90fl，MCH30pg，MCHC 333g ／ L ， RDW 14% ， WBC 3.2×109 ／ L ， LCR 42%，MCR 13%，SCR 45%，PLT 135×109／L。
白细胞手工计数
校正公式：白细胞校正数/L =X×
公式中：
X：未校正前白细胞数
Y：在白细胞分类计数时，计数100个白细胞的同时计数到的有核红细胞数。
6. 参考值
成人：
男 （~）×109/L
女 （~）×109/L
儿童：
（8~10）×109/L
婴儿：
（11~12）×109/L
新生儿：
20×109/L
7. 临床意义：
增加：பைடு நூலகம்
7.1.1生理性增加：新生儿、妊娠晚期、分娩期、月经期、饭后、剧烈运动后、冷水浴后及极度恐惧与疼痛等
7.1.2病理性增加：大部分化脓性细菌所引起的炎症、尿毒症、严重烧伤、传染性单核细胞增多症、急性出血、组织损伤、手术创伤后、白血病等。
减少：病毒感染、伤寒、副伤寒、黑热病、疟疾、再生障碍性贫血、极度严重感染、、X线照射、肿瘤化疗后和非白血性白血病等。
1. 原理
规范操作程序，提高检验结果的准确性和可比性。
2. 试剂
白细胞稀释液：冰乙酸2ml，蒸馏水98ml，10g/L亚甲蓝溶液3滴，混匀过滤后备用。
3. 标本处理：
用EDTA-K2真空采血管采集静脉血，采集完毕立即轻轻颠倒混匀。或者用微量吸管采集末梢血。
4. 方法
取小试管1支，加白细胞稀释液。
用微量吸管准确吸取血样20μl，擦去管外多余血液，将吸管插入小试管中稀释液的底部，轻轻将血放出，并吸取上清液清洗吸管两次，混匀。
×101个大方格容积为μl，换算为μl
×20血液稀释倍数
×106由1μl换算成1L.
5. 注意事项
小试管、计数板需保持清洁，以免杂质、微粒等被误认为细胞。。
白细胞计数白细胞计数与白细胞分类计数讲稿
骨髓异常增生
白血病时，可有一种或几种白细胞 增加，伴有原始、幼稚细胞、形态 异常或出现异常结构。
有时也会因细胞成熟及释放障碍使 周围血白细胞减少和形态异常。
（3）应激
如大出血、大面积组织损伤（烧伤、心 肌梗死、挤压伤等）、中毒、大量血细 胞破坏等，由于应激，多导致中性粒细 胞增加甚至核象改变。而应激又经常导 致嗜酸性粒细胞减少。
（2）在检验医师正式签发的血液检查报告 单中，白细胞手工分类结果为：Nsg 86%， Nst9%，L5%。中性粒细胞内有中毒颗粒 及空泡变性，还有中性晚幼粒细胞1%。
该血象说明了什么？
2.某女，半年前确诊为甲状腺机能亢进，一 直口服他巴唑治疗。最近一次复查时，血 液检验结果为：
RBC4.0×1012／L，Hb120g／L，Hct0.36， MCV90fl，MCH30pg，MCHC333g／L， RDW14%，WBC3.2×109／L，LCR42%， MCR13%，SCR45%，Plt135×109／L。 血片上红、白细胞、血小板形态基本正常。
（1）该血象是否异常？可能原因是什么？ （2）若明确诊断，还需与哪些疾病鉴别？ （3）是否有必要进行白细胞手工分类？预
期结果如何？ （4）对该病人的情况应如何处置？
3.某男，16岁，因“感冒、发烧”静脉点滴 青霉素和病毒唑，3天后不见好转。
手工法白细胞检查结果为：WBC6.2×109 ／L， 中 性 分 叶 核 粒 细 胞 5 2 % ， 单 核 细 胞 4%，淋巴细胞44%。改用“菌必治”5天 后症状无缓解，且出现咽部疼痛、乏力等 症状，查体咽部充血、扁桃腺Ⅰ度肿大。
2.电阻抗法白细胞计数及分群
3.其他分析技术（VCS、激光法、
白细胞分类计数(手工法)SOP
白细胞分类计数（手工法）SOP文件编号: xxxx医院 XXXX临床检验实验室版序:xxxx页码:第1 页，共5 页白细胞分类计数(手工法)[测定原理]把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片，用复合染料构成的染色液染色，血片中的细胞由于内容物不同，而被染成不同的颜色，根据各类白细胞形态特征予以分类计数，得相对比值(百分率)，以观察数量)形态和质量的变化，对疾病有辅助诊断意义。
[试剂及仪器](一)染色液1. 瑞氏—姬姆萨复合染色液I液取瑞氏染粉 lg、姬姆萨染粉0.3g，置洁净研钵中，加 2 ML丙三醇和少量甲醇(分析纯)，研磨片刻，吸出上层染液。
再加少量甲醇，继续研磨，再吸出上清液。
如此连续几次，共用甲醇500ml。
收集于棕色玻璃瓶中，每天早、晚各振摇3min，共5天，以后存放一周即能使用。
?液 pH6.4—6.8磷酸盐缓冲液磷酸二氢钾(无水)6.64g磷酸氢二钠(无水)2.56g加少量蒸馏水溶解，用磷酸盐调整 pH，加水至1000ml。
2(快速染色液I液:磷酸二氢钾 6.64g磷酸氢二钠 2.56g水溶性伊红 Y 4g(或伊红 B2.5g)蒸馏水 1000ml石炭酸 40ml煮沸，待冷备用。
?液亚甲蓝 4g蒸馏水 1000m1蒸馏水 1000m1高锰酸钾 2.4g煮沸，待冷备用。
文件编号: xxxx医院 XXXX临床检验实验室版序:xxxx页码:第2 页，共5 页白细胞分类计数(手工法) 3(30s快速单一染色液贮存液瑞氏染粉 2.0g姬姆萨染粉 0.6g天青 E 0.6g甘油 10.0ml聚乙烯D比咯烷酮(PVP) 20.0g(或曲拉通X-100 3ml)甲醇 1000ml磷酸盐缓冲液(pH6.2-6.8)磷酸二氢钾 6.64g磷酸氢二钠 0.26g石炭酸 4.0ml蒸馏水加至 1000ml应用液l液、2液按3:1比例混合放置14天后备用。
(二)显微镜。
(三)计数器。
[标本的采集]取手指血或静脉血1.0ml，置于抗凝管中(2%EDTAK2)摇匀待检。
一、白细胞计数(White Blood Cell count WBC)及白细胞 ...
四大格所见WBC平均值 判断标准： WBC ≤4×109/L ,RCS ＜30% WBC (4.1--14.9)×109/L, RCS ＜20% WBC≥ 15×109/L, RCS ＜15%
三、变异百分率(v)评价法
V= I Xi-Xm l ×100
中性粒细胞neutrophil：
2）中性粒细胞增多（neutrophilia）：
反应性： 急性感染或炎症 严重的组织损伤或坏死 急性溶血、急性失血 急性中毒 恶性肿瘤
异常增生性：白血病 骨髓增殖性疾病
3）中性粒细胞减少（neutropenia）：
感染 血液系统疾病 理化损伤 单核-吞噬细胞系统功能亢进 自身免疫性疾病
（二）白细胞分类计数
淋巴细胞lymphocyte：
★淋巴细胞
1）增多（lymphocytosis）： 感染性疾病 淋巴细胞性恶性疾病 其他 ：免疫性疾病、急性传染病恢复期 相对增多 2）减少（lymphocytopenia）： 相对减少 绝对减少（接触放射线、应用肾上腺皮质激素、
DC percent（%） Absolute value（ ×109/L）
二、白细胞计数及分类计数的临床意义：
1．白细胞数量的变化： （1）生理变化：
年龄、时间、环境、身体状况等 （2）病理变化：
leukopenia leukophilia 主要受中性粒细胞等各类细胞数量的影响
（二）白细胞分类计数
Cellular morphology
一． The lymphocyte is smaller than neutrophil and possesses an ellipsoidal, slightly eccentrical nucleus.
血涂片制作与白细胞分类计数
淋巴细胞
1.细胞大小为7～15µm。 2.细胞核与细胞浆比率 为5:1～2:1。 3.细胞呈圆形或卵圆形。 4.细胞核通常呈圆形或 卵圆形；偶见核凹陷或 轻度切迹。 5.核染色质散在致密或 粗颗粒状聚集；副染色 质无或少量。 6.无核仁；有时，可见小的、淡的核小体。 7.细胞浆少至中等量；淡蓝色至中度嗜碱性；可见核周淡染区； 有时有副核窝；小淋巴细胞无颗粒；大淋巴细胞的细胞浆较多， 含少数粗大嗜天青颗粒。
单核细胞
1.细胞大小为12～20µm。 2.细胞核与细胞浆比率 为4:1～2:1。 3.细胞呈圆形，可有伪足。 4.细胞核形态各异，呈圆 形、卵圆形、马蹄形、 切迹形或分叶形。 5.核染色质轻度聚集。 6.无核仁。 7.细胞浆含蓝灰色颗粒，少量空泡。
1.手工涂片法
取一滴血滴于洁净无油脂的玻片一端. 左手持玻片，右手再取边缘光滑的另 一玻片作为推片。将推片边缘置于血 滴前方，然后向后拉，当与血滴接触 后，血即均匀附在二玻片之间。此后 以二玻片约呈30—45度的角度平稳地 向前推至玻片另一端，推时角度要一 致，用力应均匀，即推出均匀的血膜 （血膜不可过厚、过薄）。将制好的血
（4）用蒸馏水冲洗（如自来水的pH值稳定于7.2左 右时亦可代用）。冲洗血膜时应将玻璃片持平， 冲洗后斜置血涂片于空气中干燥。或先用滤纸吸 取水分迅速干燥，即可镜检。
血涂片的染色步骤：
判断染色结果：红细胞
淡红色，无核的圆形细胞，因红细胞为双凹形，故边缘部 分染色较深，中心较浅，直径7-8微米。
颗粒白细胞
•
2.细胞呈圆形或卵圆形。
•
细胞核分叶，叶间有丝状
•
连接，分为2～5叶。
•
3.核染色质聚集。
•
4.无核仁。
白细胞计数计算步骤
白细胞计数计算步骤白细胞计数是一项常见的医学检验项目，用于评估人体免疫系统的功能和检测疾病。
白细胞是人体免疫系统的主要组成部分之一，通过对白细胞数量的计算，可以提供重要的健康参考指标。
下面将介绍白细胞计数的具体步骤。
一、前期准备进行白细胞计数需要一些基本的实验室设备和试剂。
首先，需要一个血液标本，可以是采集自患者的静脉血或者是其他合适的来源。
此外，还需要抗凝剂，用于防止血液在采集后凝结。
实验室技术人员需要确保标本的采集和储存符合规范，避免任何外部因素对结果的影响。
二、样本处理在进行白细胞计数之前，需要先对血液标本进行样本处理。
通常，最常用的方式是将血液标本进行稀释，以提高结果的准确性。
稀释液可以采用盐水或其他合适的稀释液。
将血液标本和稀释液按照一定比例混合，得到适当稀释的样本。
三、计数方法有多种方法可用于白细胞计数，常用的有手工计数和自动计数两种方法。
下面将分别介绍这两种方法。
1. 手工计数手工计数是一种基本的方法，需要使用显微镜和血液计数室。
首先，将稀释后的标本吸入血液计数室中，并等待一段时间，以使白细胞在计数室中沉淀。
然后，使用显微镜对计数室中的细胞进行观察和计数。
通常，需要随机选择数个视野并计算细胞的数量，然后取平均值作为结果。
2. 自动计数自动计数是一种高效且准确的方法，通过自动化设备进行细胞计数和分类。
在这种方法中，稀释后的标本被放入自动计数仪器中。
仪器将自动进行细胞计数和分类，然后给出结果。
自动计数具有快速、高通量和准确性高的优点，且消除了人为误差的影响。
四、结果解读得到白细胞计数的结果后，需要进行正确的解读。
白细胞计数的正常范围通常在每立方毫米血液中4,000到11,000个细胞。
不同的检测方法和实验室可能会有轻微的差异，因此应该参考具体的实验室参考值进行解读。
如果白细胞计数超出正常范围，可能表明存在某种疾病或感染。
在这种情况下，通常需要结合其他检验结果和临床症状来做出准确的诊断。
白细胞分类手工计数
白细胞分类手工计数【操作人员】经批准人授权的同志。
【部门主管】【质量控制员】【目的】保证测试结果的准确性。
【适用仪器范围】双目显微镜，血球分类计算器。
【该SOP变动程序】该标准操作程序的更改，可由任一使用本程序的操作人员提出并报请专业主管及科主任签字后生效。
【应用范围】白细胞分类计数的手工操作。
【方法学原理】把血液制成细胞分布均匀的薄膜徐片，用复合染料染色，根据各类白细胞形态特征予以分类计数，求得各类白细胞的比值(百分率)，并可计算出各类白细胞的绝对值，以观察数量、形态和质量的变化，对疾病有辅助诊断意义。
【试剂】瑞氏试剂。
【操作步骤】1. 采血后推制厚薄适宜盼血膜片，血膜应呈舌状，头、体，尾清晰可分。
2. 推好的血膜在空气中晃动，以促使快干，天气寒冷或潮湿时，应于37℃温箱中保温促干，以免细胞变形缩小。
3. 瑞氏染色。
4. 先用低倍镜观察全片的染色质量和细胞分布情况，注意血片的边缘和尾部是否有巨大异常细胞和徽丝蚴等，然后选择涂片的体尾交界处染色良好的区域，在油镜下自血膜的体尾交界处向头部方向迂回检查，线路呈“弓”字形，计数l00或200个白细胞，按其形态特征进行分类计数，求出各类白细胞的比值(百分率)。
【参考范围】成人白细胞分类参考值────────────────────────────────百分率(％) 绝对值(×109／L)────────────────────────────────中性杆状核粒细胞 1-5 (0.04-0.5)中性分叶核粒细胞 50-70 (2-7)嗜酸性粒细胞 0.5-5 (0.02-0.5)嗜碱性粒细胞 0-1 (O-1)淋巴细胞 20-40 (0.8-4)单核细胞 3-8 (0.12-0.8)────────────────────────────────【质量控制】1．一般选择涂片的体尾交界处染色良好的区域用油镜计数，移动线路呈“弓”字形，避免重复计数。
临床检验之白细胞计数-练习题及答案（一）
临床检验之白细胞计数-练习题及答案（一）1.白细胞计数：白细胞计数是测定单位体积内血液中各种细胞总数。
2.下列不属于白细胞三分群分类的是（）A.小细胞B.中间细胞C.大细胞D.单核细胞解析：D 白细胞三分群分类为小细胞、中间细胞、大细胞。
白细胞数计算的方法包括手工法和血细胞分析仪计数法；而白细胞三分群的计数法是血细胞分析仪计数法中的电阻抗原理。
3.下列不属于白细胞五分群分类的是（）A.中性粒细胞B.浆细胞C.淋巴细胞D.单核细胞解析：B 白细胞五分群分类为中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞。
4.白细胞计数的参考方法是（）A.手工计数法B.电阻抗原理C.电阻抗与射频技术联合白细胞分类法D.光散射与细胞化学技术联合白细胞分类计数法解析：A 白细胞计数的参考方法是手工计数法；而电阻抗原理、电阻抗与射频技术联合白细胞分类法、光散射与细胞化学技术联合白细胞分类计数法、容量电导光散射（VCS）白细胞分类法、多角度偏振光散射白细胞分类技术属于血细胞分析仪的分类计数法。
5.下列关于白细胞手工计数法描述错误的是（）A.计数血涂片体尾交界区域的白细胞数B.有核红细胞不计入白细胞中，要单独报告C.幼稚异常的WBC应计入白细胞计数中，并分类报告D.白细胞分类计数无需有序进行解析：D 在手工计数白细胞时，一般计数血涂片体尾交界区域的白细胞数；白细胞分类计数需有序进行；手工分类计数可根据白细胞的数量进行确定计数，如白细胞数<3×109/L，手工白细胞计数数一般是100个白细胞即可，如白细胞数3-15×109/L，手工白细胞计数数一般是200个白细胞即可，如白细胞数>15×109/L，手工白细胞计数数一般是50-100个白细胞即可；有核红细胞不计入白细胞中，要单独报告；幼稚异常的WBC应计入白细胞计数中，并分类报告；计数时需注意观察WBC、RBC、PLT形态有无异常，有无寄生虫。
白细胞分类计数
中性粒细胞
粒细胞
嗜酸性粒细胞
白细胞
淋巴细胞
嗜碱性粒细胞
单核细胞
——白细胞是机体抵抗病原微生物等异物
入侵的主要防线
.
12
全能干细胞
髓系干细胞
粒-单核系祖细胞
GM-CSF
原粒细胞
早幼粒细胞 原单核细胞
淋巴系干细胞
T淋巴系祖细胞 B淋巴系祖细胞
T原淋巴细胞
B原淋巴细胞
中幼粒细胞
幼单核细胞
晚幼粒细胞
杆状核粒细胞 分叶核粒细胞
体液免疫 细胞免疫
.
15
单核细胞（Monocyte，M）
吞噬，杀灭病原体 清除损伤或已死亡的细胞 处理抗原
.
16
嗜碱性粒细胞（Basophil，B）
通过释放嗜碱性颗粒（组胺、肝素、慢反 应物质等）参与超敏反应
.
17
嗜酸性粒细胞（Eosinophil，E）
抑制嗜碱性粒细胞和肥大细胞合成和释 放活性物质，吞噬其释出颗粒，破坏组胺， 限制过敏反应
.
51
杜勒体
.
52
异 形 淋 巴 细 胞
Ⅰ型（空泡型）
Ⅱ型（单核细胞型）
Ⅲ型（幼稚细胞型）
.
53
.
28
.
29
.
30
4. 淋巴细胞（L）
形态：直径6-15um，分为大L和小L。
n胞浆：小淋巴极少,浆内无颗粒，常呈裸核。 大淋巴胞浆丰富 ，呈透明蓝色，常有少量 粗大、大小不均的紫红色嗜天青颗粒。
n 胞核：圆形或肾形，深紫红色。染色
质粗糙，排列均匀，大淋巴细胞核常
偏于一侧。
.
31
淋巴细胞 （血涂片）
血常规检查及其意义
Leukopenia Leukophilia 主要受中性粒细胞等各类细胞数量的影响
1）中性粒细胞增多（neutrophilia）：
反应性： 急性感染或炎症 严重的组织损伤或坏死 急性溶血、急性失血 急性中毒 恶性肿瘤
异常增生性： 白血病 骨髓增殖性疾病
(2)红细胞外在因素：①免疫因素：体内存在破坏红细胞的抗体，如新生儿溶血症、 自身免疫性溶血性贫血、药物所致的免疫性溶血性贫血等；②非免疫因素：如感染、 物理化学因素、毒素、脾功能亢进、弥散性血管内凝血等。
三、红细胞丢失（失血）
包括急性失血和慢性失血引起的贫血。
红细胞形态:
二、红细胞比积（hematocrit Hct/ PCV）：
贫血的形态学分类
正常细胞性
大细胞性 小细胞低色素性
小细胞正色素性
病因
再障、急性失血、 骨髓病性贫血等 巨幼细胞性贫血 缺铁性贫血、地 中海性贫血等 慢性疾病引起的贫血
四、红细胞体积分布宽度 （RBC Distribution红细胞体积分布宽度是由血液分析仪测量获得的反 映周围血红细胞体积异质性的参数，是反映红细胞 大小均一程度的客观指标。（以变异系数或标准差 表示）
（一）概述
定义： RBC指单位体积（每升）血液内的红细胞数量。 Hb指单位体积血液中所含血红蛋白的量。 方法： （1） 红细胞计数
手工法 ：取样 稀释 计数 计算 仪器法： 阻抗分析或激光分析
（2）血红蛋白测定
氰化高铁血红蛋白法（HiCN法）：
取样 加转化液（溶血、转化） 比色 血液在血红蛋白转化液中溶血后，除SHb外各血红 蛋白均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白，再 与CN-结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白，
实验诊断Laboratorydiagnosis
成熟池：晚—杆
贮备池：杆—分
外周血
循环：血循环 边缘池：血管壁
2. 各种白细胞增多或降低的临床意义
中性粒细胞 Neutrophil N↑ P271
Physiologcal：下午比早晨高，激烈运动，寒冷， 高湿，新生儿，月经期，妊娠5月以上（一过性的）。 Pathological：
①急性感染：尤其是化脓性感染，程度与病 原体种类，感染部位，程度，机体反应性有关
概念 White blood count, WBC ：测定外周血中各 种白细胞的总数。
different count， DC：血液涂片wright，在
油镜下分类，求得各种白细胞的比值（百分数） 各种白细胞绝对值（例EO# ）：即每升血液内某种 白细胞所占的数=WBC×分类计数的百分数
测定方法
手工法：DC更可靠
第三节 血细胞形态检查
一、红细胞形态改变及临床意义√ 二、白细胞形态变化及临床意义√ 三、中性粒细胞核象变化及临床意义 四、中性粒细胞核象变化及形态改变的临床意义
二、白细胞形态变化及临床意义 P273 morphologic of leucocyte
床意义
一、红细胞形态改变及临床意义 morphologic P269
观察染色涂片 ➢ 大小、 形态、 胞质着色、 结构 ➢ 推断贫血病因
（1）大小异常
巨幼贫 Macrocyte
microcyte megalocyte
① 小细胞低色素多 （缺铁、地贫）
② 单纯小红细胞
溶贫、急性失血、 巨幼贫
anisocytosis
③ 其它 口型，镰型，泪滴型棘细胞等
遗传性口型红 棘细胞增多症 细胞增多症
DIC
（3）染色反应异常
白细胞计数与分类
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9
二. 白细胞分类计数
成人白细胞分类 百分比 (%) 绝对值（×109/L ）
中性杆状 中性分叶 嗜酸 嗜碱 淋巴 单核
1~5 50~70 0.5~5 0~1 20~40 3~8
单核细胞→组织→巨噬细胞 功能：
（一） 单核细胞增多(monocytosis)
生理性增多：儿童 某些感染 血液病
（二）单核细胞减少(monocytopenia)
无意义
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27
七 类白血病反应(leukemoid reaction)
机体对某些刺激因素产生的 类似白血病表现的血象反应， 周围血白细胞大多明显增多，甚或伴随外周血幼稚白细胞出现。 常见于感染、恶性肿瘤； 急性中毒、以及外伤、休克等应急状况。
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6
血细胞分析仪 与手工法血细胞计数的差异（1）
巨大血小板误认为红细胞或白细胞
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7
血细胞分析仪 与手工法血细胞计数的差异（2）
WBC 14.1 ×109/L, N 37.1%, L 6.4%, B 2.1%, E 53.5%, M 0.2%
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8
一. 白细胞计数
白细胞总数
Байду номын сангаас
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31
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32
不明显
早期病例轻至中度贫血，血小 板数可增高，晚期均减少 极度增生，粒系细胞占0.90以 上，以晚幼及中幼粒为主，早 幼粒+原粒不超过0.10 积分显著减低，甚至为0
可见于90%以上病例 30
手工法及自动血细胞分析仪法进行红细胞白细胞血小板检查护理课件
白细胞形态观察
通过观察白细胞的大小、形态、 染色深浅等特征，判断是否存在
感染、白血病等疾病。
血小板检查
血小板计数
通过显微镜计数一定体积血液中血小板的数目， 以了解血小板数量是否正常。
血小板功能检测
通过观察血小板粘附、聚集、释放等功能，判断 是否存在血小板减少症、血栓等疾病。
血小板形态观察
准备试剂和样本
确保试剂新鲜、无污染，样本 采集规范，无溶血、凝血等现
象。
开机与校准
按照仪器说明书进行开机和校 准，确保仪器处于正常工作状
态。
加样与检测
将样本加入仪器指定的加样பைடு நூலகம் 域，启动检测程序，等待结果
。
结果输出与记录
仪器自动输出检测结果，护理 人员需及时记录并报告医生。
结果解读
1 2
红细胞计数
血红蛋白测定
通过比色法测定血液中血红蛋白的 含量，以了解贫血或红细胞携氧能 力的状况。
红细胞形态观察
通过观察红细胞的大小、形态、染 色深浅等特征，判断是否存在贫血 、红细胞增多症等疾病。
白细胞检查
白细胞计数
通过显微镜计数一定体积血液中 白细胞的数目，以了解白细胞的
数量是否正常。
白细胞分类计数
通过显微镜观察白细胞形态，将 白细胞分为淋巴细胞、中性粒细 胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细 胞等，以了解各种白细胞的比例
手工法及自动血细胞分析仪法进行红细胞白细胞血小板 检查护理课件
目录 CONTENTS
• 引言 • 基础知识 • 手工法进行红细胞白细胞血小板检查 • 自动血细胞分析仪法进行红细胞白细胞血小
板检查 • 对比与讨论 • 护理注意事项
01
手工显微镜法在结核病患者白细胞分类计数中的应用
住 院治疗 的结核患者 ３ ６ ０例 ，其中男 １ ８ ５例 ，女 １ ７ ５例 ；年龄 ２ ０～ ７ １ 岁 ，平均 （ ４ ８ ． ７ ５± ２ ． ２ １ ）岁 ；Ｉ Ｉ 型结核 （ 血行播散性
为差异有统计学意义。
２ 结 果
单核细胞分类结果的比较 ［ Ｊ ］．中外 医学研 究 ， ２ ０ １ １ ，９ （ １ ７ ） ：
５ Ｏ．
３ 贺妹慧 ． 血涂片细胞形态检查在初诊患者临床诊断中的应用 ８ Ｏ例 分析 ［ Ｊ ］．中国误诊学杂志 ， ２ ０ １ １ ，１ １（ １ ６ ） ： ３ ９ ６ ０— ３ ９ ６ １ ．
较 ，差异均无 统计学 意义 （ Ｐ＞ ０ ． ０ ５ ） ；两组 中间细胞 比率 比 较 ，差异有统计学意义 （ Ｐ＜ Ｏ ． ０ ５ ，见表 １ ） 。
表ｌ 两组患者 白细胞分类情况比较 （ ｉ±ｓ ）
结核病是一 种危 害人体健 康 的慢性传 染疾病 。有 数据显 示 ，目前全世界大约有 １ ／ ３的人 口感染了结核分枝杆菌 ，平均
全 自动血细胞分 析仪具有快速、高效和重复性较好的特点 。但
工显微镜法 与仪器法进行 白细胞分类计数 ，现报道如下。
１ 资 料 与 方 法
１ ． １ 一般资料
随机选取 ２ ０ １ ０年 １月—２ ０ １ ２年 １ ２月来我 院
是他不 具有 识 别 白细胞 、红 细胞 以及 血小 板形 态 的功 能口 】 。
再采用微量吸管提取 １ ０ 的血液 ，将 其制成血 涂片进行 瑞氏 染色 ，并进行显微镜检测 ，数据由细胞计数器进行记录 。对照
白细胞计数白细胞计数--- 讲义
骨髓异常增生
n 白血病时，可有一种或几种白细胞
增加，伴有原始、幼稚细胞、形态 异常或出现异常结构。 n 有时也会因细胞成熟及释放障碍使 周围血白细胞减少和形态异常。
（3）应激
n 如大出血、大面积组织损伤（烧伤、心
肌梗死、挤压伤等）、中毒、大量血细 胞破坏等，由于应激，多导致中性粒细 胞增加甚至核象改变。而应激又经常导 致嗜酸性粒细胞减少。
（2）异型淋巴细胞
n 严重感染或其他因素刺激时，部分成熟淋
巴细胞演变为形态不典型的淋巴细胞，称 为异型淋巴（atypical lymphocyte）。 n Ⅰ型（泡沫型） n Ⅱ型（不规则型） n Ⅲ型（幼稚型）
空泡型异型淋巴
不 规 则 型 异 型 淋 巴
幼 稚 型 异 型 淋 巴
2.白细胞形态学改变
n 当感染比较严重，由于应激或相关白细
胞的大量消耗，常导致某些白细胞提前 释放，或形态异常，甚至出现类白血病 反应。而白血病或其他先天异常也引起 相应白细胞的形态学改变。
（1）中性粒细胞
核象改变 正常血液中，中性粒细胞核多分为2-4 叶。
核左移（karyo-gram shift to left）
n （1）该血象是否异常？可能原因是什么？ n （2）若明确诊断，还需与哪些疾病鉴别？ n （3）是否有必要进行白细胞手工分类？预
期结果如何？ n （4）对该病人的情况应如何处置？
n 3.某男，16岁，因“感冒、发烧”静脉点
滴青霉素和病毒唑，3天后不见好转。 n 手工法白细胞检查结果为：WBC6.2×109／ L ，中性分叶核粒细胞52%，单核细胞4%， 淋巴细胞44%。改用“菌必治”5天后症状 无 缓 解 ， 且 出 现 咽 部 疼 痛 、 乏 力 等 症 状， 查体咽部充血、扁桃腺Ⅰ度肿大。 n （1）试分析病情变化
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(5)核棘突：胞核有各种形态的芽状突出，临床意义尚不明确，可能与中毒、癌转移、严重放射损伤等有关。
3．退行性变：表现为胞体肿大，结构模糊，边缘不清。胞核可呈固缩、肿胀、破碎、溶解等变化，退行变可以是细胞衰老死亡的表现。
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白细胞分类计数（手工法）
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页码：第3页，共5页
（2）．快速染色液染色
把干燥血片浸入快速染色液的I液中30s，水洗，再浸入Ⅱ液30s，水洗待干。
注：本染色法除了能快速用于急症外，对玻片质量要求也不高。随着染液多次使用，可适当延长染色时间或更换新液。
[试剂及仪器]
（一）染色液
1.瑞氏—姬姆萨复合染色液
I液取瑞氏染粉lg、姬姆萨染粉0.3g，置洁净研钵中，加2 ML丙三醇和少量甲醇(分析纯)，研磨片刻，吸出上层染液。再加少量甲醇，继续研磨，再吸出上清液。如此连续几次，共用甲醇500ml。收集于棕色玻璃瓶中，每天早、晚各振摇3min，共5天，以后存放一周即能使用。
b．组织损伤：大手术后、心肌梗塞、肺梗塞等。
c．恶性肿瘤：急、慢性白血病、淋巴瘤等。
d．各种中毒：尿毒症、糖尿病酸中毒等。
减少见于：a．某些传染病：流感、伤寒、付伤寒、麻疹。
b．某些血液病：再障、粒细胞缺乏症、白细胞减少症。
c．化疗或放疗后，抗癌药物，X线及镭照射。
d．其它：脾功能亢进，自身免疫性疾病，高度恶病质。
中性杆状核粒细胞（N）：1-5%
中性分叶核粒细胞（N）：50-70%
嗜酸性粒细胞（E）：0．5-5%
嗜碱性粒细胞（B）：0-1%
淋巴细胞（L）：20-40%
单核细胞（M）：3-8%
[临床意义]
（1）中性粒细胞（N）中性粒细胞具有游走性和吞噬作用。
增高见于：a．急性感染和化脓性感染：肺炎、败血症、脓肿等。
蒸馏水1000m1
蒸馏水1000m1
高锰酸钾2.4g
煮沸，待冷备用。
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3．30s快速单一染色液
贮存液
瑞氏染粉2.0g
姬姆萨染粉0.6g
天青E 0.6g
甘油10.0ml
聚乙烯D比咯烷酮(PVP) 20.0g
Ⅱ液pH6.4—6.8磷酸盐缓冲液
磷酸二氢钾(无水)6.64g
磷酸氢二钠(无水)2.56g
加少量蒸馏水溶解，用磷酸盐调整pH，加水至1000ml。
2．快速染色液
I液:
磷酸二氢钾6.64g
磷酸氢二钠2.56g
水溶性伊红Y 4g(或伊红B2.5g)
蒸馏水1000ml
石炭酸
煮沸，待冷备用。
Ⅱ液
亚甲蓝4g
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(2)核右移：是指不仅分叶核粒细胞增多，且分叶过多，常见4叶、5叶(正常时多分3叶)，这是造血功能衰退或造血物质缺乏的表现。常见于营养性巨幼细胞性贫血和使用抗代谢药物后。此外，在疾病进行期突然出现核象右移，表示预后不良。
b．某些血液病：单核细胞性白血病、淋巴瘤、骨髓异常增殖综合症、恶性组织细胞病。
减少一般无临床意义。
[常见的异常白细胞形态的变化]
在外周血象中，除了各类白血病幼稚细胞外，通常能见到一些细胞形态上的异常变化。
(一)中性粒细胞
1．核象变化：反映中性粒细胞的成熟程度。正常血象中有少量杆状核细胞出现，它与分叶核细胞之间的比值约占1：13。
（2）嗜酸粒细胞（E）：嗜酸粒细胞与变态反应有关，并有吞噬抗原抗体复合物的作用。
增多见于：a．变态反应性疾病：支气管哮喘、药物过敏、荨麻疹、血管神经性水肿、过敏紫癜。
b．寄生虫病：蛔虫病、钩虫病、血吸虫病。
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[操作步骤]
1．采血后推制厚薄适宜的血膜片，血膜应呈舌状，头.体.尾清晰可分。
2．推好的血膜在空气中晃动，以促使快干。天气寒冷或潮湿时，应于37 C温箱中保温促干，以免细胞变形缩小。
3．染色：
（1）.瑞氏—姬姆萨复合染色液染色
置玻片于染色架上，滴加染液3—5滴，使其迅速盖满血膜，约1min后，滴加缓冲液5一10滴，轻轻摇动玻片或对准血片吹气，与染液充分混和，5一10min后用水冲去染液，待干。
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c．某些皮肤病：湿疹、牛皮癣、剥脱性皮炎等。
d．某些血液病：慢粒、恶性淋巴瘤、嗜酸性粒细胞性白血症、多发性骨髓瘤、何杰金氏病等。
减少见于：a．应用糖皮质激素、促肾上腺皮质激素。
b．伤寒、副伤寒等病患者。
（3）嗜碱性粒细胞（B）嗜碱性粒细胞主要参与特殊的免疫反应。
(二)淋巴细胞
淋巴细胞形态变异在多种疾病如各种病毒感染、传染性单核细胞增多症最为常见。此外，疟疾、过敏性疾病、淋巴结炎等亦可见，统称为异型淋巴细胞。传染性单核细胞增多症患者血液中常可出现3种异型淋巴细胞，即空泡型、不规则型和幼稚型。
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白细胞分类计数（手工法）
版序：2005-1
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[测定原理]
把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片，用复合染料构成的染色液染色，血片中的细胞由于内容物不同，而被染成不同的颜色，根据各类白细胞形态特征予以分类计数，得相对比值（百分率），以观察数量﹑形态和质量的变化，对疾病有辅助诊断意义。
(或曲拉通X-100 3ml)
甲醇1000ml
磷酸盐缓冲液(pH6.2-6.8)
磷酸二氢钾6.64g
磷酸氢二钠0.26g
石炭酸4.0ml
蒸馏水加至1000ml
应用液
l液、2液按3：1比例混合放置14天后备用。
（二）显微镜。
（三）计数器。
[标本的采集]
取手指血或静脉血1.0ml，置于抗凝管中（2%EDTAK2）摇匀待检。或直接未梢取血涂成血片。
2．毒性变化：严重感染、恶性肿瘤、各种重金属或药物中毒、大面积烧伤等症时，中性粒细胞可出现形态变异。
(l)细胞大小不均：为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。
(2)毒性颗粒：胞浆中部分或全部颗粒变粗，着色深，颗粒的分布及大小不等。可能为中性颗粒成熟过程中发生变性所致。
(3)空泡：可在胞浆或核中出现，常为多个，被认为是细胞脂肪变性后未能着色所致。
(1)核左移：是指杆状核细胞增多，常见于感染。如晚幼粒、中幼粒等细胞增多为核象极度左移，多见于类白血病反应或白血病。
①伴白细胞总数增高的核左移：称再生性左移，常见于急性化脓性感染，如大叶性肺炎等。
②白细胞总数不增加或减低的核左移：称退行性左移，常见于严重感染、机体抵抗力低下时，如伤寒、伴感染中毒性休克的败血症等。
（3）．30s快速单一染色液染色
将染液铺满血膜或将血片浸入染色缸内，30s后用自来水冲洗。
注：加表面活性剂PVP可增加染料的溶解度并起稳定作用，加入天青E可缩短染色时间。
4．选择涂片的体尾交界处染色良好的区域，在油镜下计数100个白细胞，按其形态特征进行分类计数，求出各类细胞所占比值（百分率）。
[参考范围]
增多见于：a．慢性粒细胞白血病、嗜碱性粒细胞白血病。
b．某些转移癌及骨髓纤维化。
嗜碱粒细胞减少无临床意义。
（4）淋巴细胞（L）：淋巴细胞能产生和运载抗体，在防御病毒感染方面有重要作用。
增多见于：a．某些病毒或细菌所致的传染病：传染性淋巴细胞增多症、传染性单核细胞增多症、传染病恢复期、结核病、百日咳。
b．淋巴细胞性白血病、白血性淋巴肉瘤。
减少见于：a．应用肾上腺皮质激素、接触放射线。
b．细胞免疫缺陷病、某些传染病的急性期。
（5）单核细胞（M）：单核细胞具有游走性和吞噬作用，除吞噬细胞和异物外，又能吞噬原虫及具有类脂质包膜的结核杆菌及麻风杆菌。
增多见于：a．某些感染：伤寒、结核、疟疾、黑热病、亚急性细菌性心内膜炎。