培养基灵敏度检验记录

无菌培养基灵敏度试验验证

××公司无菌检查用培养基适用性验证资料文件编号：YZ-GC -0041.验证目的：为证明硫乙醇酸盐流体培养基、营养肉汤、改良马丁培养基适合于细菌，真菌的无菌检查，特制定本验证方案。

2.参照标准：2005版中国药典二部附录XI H无菌检查法。

3.验证项目：硫乙醇酸盐流体培养基、营养肉汤、改良马丁培养基灵敏度检查。

4.验证小组4.试验材料：4.1. 被验证培养基：品名：硫乙醇酸盐流体培养基规格：批号：生产厂家：品名：营养肉汤培养基规格：批号：生产厂家：品名：改良马丁培养基规格：批号：生产厂家：4.2. 仪器设备：4.2.1. YM50立式压力蒸汽灭菌器4.2.2. SW-CJ-2F双人净化工作台4.2.3. JC101型电热鼓风干燥箱4.2.4.JY-B型生化培养箱(23～28℃)4.2.5.PHX-DHS-40x50恒温培养箱(35～37℃)4.3. 稀释剂：0.9%无菌氯化钠溶液4.4. 验证用培养基：4.5. 验证用菌株：5.菌液制备：5.1.取经培养18~24小时的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的营养肉汤新鲜培养物1ml加入到9ml 0.9%无菌氯化钠溶液中，10倍稀释至小于100cfu∕ml的菌悬液备用。

5.2.取经培养24~48小时的白色念珠菌的改良马丁培养物1ml加入到9ml 0.9%无菌氯化钠溶液中，10倍稀释至小于100cfu∕ml的菌悬液备用。

6.菌液计数：（每种菌液接种2个平皿）分别取上述制备的金黄色葡萄糖球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌各1ml加入培养皿，每种菌液平行做2皿，注入不超过45℃营养琼脂培养基15~20ml，置30～35℃培养箱培养二天，取上项制备的白色念珠菌菌液1ml加入培养皿，平行做2皿，注入不超过45℃的玫瑰红钠琼脂培养基约15~20ml，置23～28℃培养箱培养三天。

7.无菌培养基的无菌性检查7.1培养基的配制硫乙醇酸盐流体培养基的配制：取硫乙醇酸盐流体培养基29.25g，加1L蒸馏水，加热煮沸使其完全溶解，摇匀分装到试管中，每只试管装量12ml。

硫乙醇酸盐流体培养基灵敏度检查记录

硫乙醇酸盐流体培养基灵敏度检查记录
硫乙醇酸盐流体培养基灵敏度检查记录 R-
培养基批号生产厂家检验起止日期规格检验依据：《中国药典》（20xx 年版二部附录“无菌检查法”）。

2.
3.将各菌株的上述培养物以0.9%无菌氯化钠溶液倍比稀释后,取不同稀释级的菌悬液1ml 注皿，再加入营养琼脂培养基,在30~35℃倒置培养48小时后,计数。

注: 1ml含菌数小于100cfu的稀释级即为检验用稀释级.
4.制备培养基:
称取供试用培养基g，加入纯化水ml，加热搅拌至完全溶解。

分装至9支具塞试管中，每管12ml。

在℃湿热灭菌min。

5.分别向各支培养基中接种各菌株检验用稀释级的菌悬液（小于100cfu/ml）1ml，在30~35℃培养3天、观察：
[合格标准：空白管培养基无菌生长，加菌的培养基管均生长良好。

]
结论：
本批硫乙醇酸盐流体培养基灵敏度检查。

检验人复核人。

培养基灵敏度检查记录

培养基灵敏度检查记录
一、仪器、菌种、培养基
1、仪器高压蒸汽灭菌器恒温水浴箱培养箱
2、菌种金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌枯草芽孢杆菌生孢梭菌白色念珠菌黑曲霉
3、培养基营养琼脂培养基批号：配制日期:
硫乙醇酸盐流体培养基批号：配制日期：
改良马丁琼脂培养基批号：配制日期：
改良马丁培养基批号: 配制日期：
4、其它0.9%无菌氯化钠溶液无菌试管
二、菌液制备
1、接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养琼脂培养基中，
接种生孢梭菌至硫乙醇酸盐流体培养基中,放入培养箱30－35℃培养24小时。

用0。

9％无菌氯化钠溶液制成每1ml含量小于100cfu的菌悬液。

2、接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁琼脂培养基中，放入培养箱23－28℃培养48
小时。

用0.9％无菌氯化钠溶液制成每1ml含量小于100cfu的菌悬液。

3、接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂培养基中，放入培养箱23－28℃培养5天，加
入5ml0.9％无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱，吸出孢子悬液至无菌试管内，用0.9％无菌氯化钠溶液制成每1ml含量小于100cfu的孢子悬液。

三、培养基接种
1、取装量为12ml的硫乙醇酸盐流体培养基9管，分别接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌的菌悬液各管，另一管不接种作空白对照,放入培养箱30－35℃培养天。

2、取装量为9ml的改良马丁培养基5管，分别接种白色念珠菌、黑曲霉各管，另一管不接种作空白对照,培养天。

3、仪器状态：
4、逐日观察结果，并记录于下表。

检验员: 复核: 报告日期：。

培养基灵敏度验证

注意：注意：
1. 培养基配置应使用洁净的玻璃容不能使用金属容器。器，不能使用金属容器。配置好的培养基应尽快进行灭菌处理，培养基应尽快进行灭菌处理，以免长菌。长菌。 2. 灵敏度检查是基于培养基的灭菌程序已经经过验证。程序已经经过验证。
3. 如果实验室使用的是购买的成品培养基，培养基，供应商应随培养基提供相应批次的培养基质量检测报告，应批次的培养基质量检测报告，报告包括培养基的PH值告包括培养基的PH值、无菌检查结果和促菌生长（灵敏度）结果和促菌生长（灵敏度）试验结果等项目。果等项目。同时应注意培养基有效期。
6. 配制好的培养基应保存在2～25 配制好的培养基应保存在2 避光的环境， ℃、避光的环境，一般在三周内使生化鉴别用培养基，用。生化鉴别用培养基，应在一周内使用；内使用；选择性分离鉴别培养基最好当日使用，好当日使用，必要时于冷暗避光处保存，最多不得超过三天。保存，最多不得超过三天。
3. 如对实验结果有怀疑，可将新、老如对实验结果有怀疑，将新、批号培养基在相同的条件下同时进行试验。设立对照培养基（试验。或设立对照培养基（如进口培养基）。养基）。 4. 标准菌株（如 ATCC 或NCTC标准标准菌株（ NCTC标准菌株或CMCC）菌株或CMCC）及经过准确鉴定的临床分离菌。试验前对菌种进行传代培床分离菌。对照菌株必须使用新鲜培养物。养，对照菌株必须使用新鲜培养物。一旦发现对照菌株污染或存在问题，一旦发现对照菌株污染或存在问题，则应立即更换。则应立即更换。
培养基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得超过5 数不得超过5代（从菌种保存中心获得的冷冻干燥菌种为第0 ），并采用适的冷冻干燥菌种为第0代），并采用适宜的菌种保藏技术，宜的菌种保藏技术，以保证试验菌株的生物学特征。的生物学特征。实验用菌应是生命活力旺盛的新鲜培养物，力旺盛的新鲜培养物，至少应是第三代的培养物。代的培养物。

061-00 R2A琼脂培养基培养基适用性检查记录

对照培养基名称
培养基来源
批号
配制编号
报告日期
R2A琼脂对照培养基
检验依据
《中国药典》2015年版四部通则1105
pH检查
pH检查
检测温度：25℃
pH精密试纸（测量范围：），检测结果为（标准规定：±）
结论：□符合规定 □不符合规定
菌液制备
试验菌株
培养
铜绿假单胞菌[CMCC(B)10104]（菌种编号：）、枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501]（菌种编号：）接种于胰酪大豆胨琼脂培养基（配制编号：），
培养条件：培养箱（型号：，编号：），℃小时（标准：温度30～35℃，培养时间18～24小时）。
菌液
制备
□0.9%无菌NaCl溶液（配制编号：）
取铜绿假单胞菌的新鲜培养物，用9ml0.9%无菌NaCl溶液以10倍系列稀释，稀释
倍数为
使含菌量为≤
100CFU/ml
□取枯草芽孢杆菌的新鲜培养物，用9ml0.9%无菌NaCl溶液以10倍系列稀释，稀释
□一致□不一致
标准判定
被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在0.5～2范围内，且菌落形大小应与对照培养基上一致。判该培养基的适用性检查符合规定。
结论
□符合规定□不符合规定
检验人：复核人：
倍数为
菌液
期限
□菌液制备后在室温下放置，在2小时内使用；
□保存在2～8℃，可在24小时内使用。
适用性检查
适用性检查
方法
1.分别取铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌此2种悬试验菌悬液各1ml（不大于100cfu∕ml），分别注入平皿中，立刻倾注15-20mL温度不超过45℃的胰酪大豆胨琼脂培养基，每株实验菌平行制备2个平皿。培养条件：培养箱（型号：，编号：），℃小时（标准：温度30～35℃，培养时间不超过3天），计数。

培养基灵敏度试验

计数培养基适用性检查记录
环境温度
C 湿度
%
仪器型号及编号：立式灭菌器
型号：LMQ.R 3260B 编号：H085
霉菌培养箱型号：MJ-160B-Z 编号:
电热恒温干燥箱型号：202-3AB 编号：H001 菌液制备：接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，
置30~35C 培养24~48小时后，用0.9%无菌氯化
钠溶液制成每1ml 含菌数为50~100cfu 的菌悬液。

接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养
若被检培养基上的平均菌落数与对照培养基上的平均菌落数相比大于
70%,且菌落形态大小应与
对照培养基上的菌落一致，判该培养基适用性检查符合规定。

结论：
复核人:
基上，置 20~25 C 培养5~7天加入3~5ml 含0.05% 孢子洗脱。

然后，吸出孢子悬液至无菌试管中，用含溶液制成每
1ml 含孢子数50~100cfu 的孢子悬液。

阳性对照菌液：
白色念珠菌[CMCC (F ) 98 001] 编号：检查方法：
取5个无菌平皿，吸取白色念珠菌、黑曲霉菌各种菌作为空白对照，立即倾注对照玫瑰红钠琼脂培养基同时，用被检培养基同法操作。

(ml/ml )聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液，将 0.05% ( ml/ml )聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠黑
曲霉[CMCC(F)98 003] 编号：
检验人:。

无菌检查方法验证表和检查记录表

无菌方法验证品名：规格：批号：检查时间：1.培养基：硫乙醇酸盐流体培养基，批号：由：提供；营养肉汤，批号：由：提供；改良马丁培养基批号：由：提供。

2.验证试验用菌种：(1) 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)[CMCC(B) 26003]；(2) 枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）[CMCC(B) 63501]；(3) 大肠埃希菌（Escherichia coli）[CMCC(B) 44102]；(4) 铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) [CMCC(B) 10104](5) 生孢梭菌(Clostridium sporogenes)[CMCC(B) 64941]；(6) 白色念珠菌(Candida albicans)[CMCC(F) 98001]；(7) 黑曲霉菌(Aspergillus niger) [CMCC(F)98003]。

3. 仪器和滤器：HTY-2000A集菌仪，STV3封闭式/开放式无菌检查薄膜过滤器，浙江宁海白石药检仪器厂。

4.方法：中国药典2005版二部附录。

5.操作方法：5.1 菌液制备：取金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物少许接种至营养肉汤培养基中, 生孢梭菌的新鲜培养物少许接种至硫乙醇酸盐流体培养基中, ℃培养小时。

取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单孢菌、生孢梭菌肉汤培养物，加生理盐水，10倍递增稀释至约10-5~10-8之间，其中金黄色葡萄球菌取稀释级，铜绿假单孢菌取稀释级，大肠埃希菌取稀释级，枯草芽孢杆菌取稀释级，生孢梭菌取稀释级。

白色念珠菌的新鲜培养物接种至改良马丁培养基中, ℃培养小时。

再取白色念珠菌真菌斜面培养物，加入生理盐水洗下孢子，吸出转移至空试管作为原液，取加生理盐水，10倍递增稀释至，取加生理盐水，混匀备用。

将黑曲霉菌斜面的新鲜培养物接种至改良马丁培养基上，℃培养，使大量的孢子成熟。

培养基使用性检查操作规程

培养基适用性检查操作规程编制人：日期：部门：微生物室审核人：日期：替代：批准人：日期：执行日期：1、目的建立一个培养基适用性检查操作规程。

2、适用范围微生物限度及无菌检查的成品培养基，由脱水培养基或按处方配置的培养基均应进行培养基适用性检查。

3、检验依据按2010年版《中国药典（一、二部）》附录无菌方法进行测试检查。

4、试验所需菌种大肠埃希菌；金黄色葡萄球菌；枯草芽孢杆菌；生孢梭菌；白色念珠菌；黑曲霉。

5、标准规定5.1 无菌培养基使用性检查5.1.1 无菌性：每批培养基随机取不少于5支（瓶），经培养14天应无菌生长。

5.1.2 灵敏度：经培养对照管应无菌生长，试验管接菌小于100cfu均应生长良好。

5.2 微生物限度使用性检查5.2.1 细菌、霉菌和酵母菌计数检查取标准菌株大肠、金葡、枯草、白念、黑曲霉菌50～100cfu,分别接入于测试与对照培养基，经规定温度、时间培养，测试结果测试与对照培养基平均菌落数比不应小于70%。

5.2.2 金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌检查取新鲜标准菌株大肠、金葡、铜绿假单胞菌制备使成10～100cfu菌悬液，分别对测试与对照培养基进行促生长能力、抑制能力及指示能力测试，结果被测培养试验菌的生长反应情况与对照培养基一致。

（液体培养基应记录为生长良好/生长微弱/未生长；固体培养基应记录为符合xx菌特征/不符合xx菌特征）。

5.2.3 大肠埃希菌、大肠菌群检查取新鲜标准菌株大肠、金葡球菌制备使成10～100cfu菌悬液，分别对测试与对照培养基进行促生长能力、抑制能力即指示能力测试，结果被测培养基试验菌的的生长反应情况应与对照培养基一致。

（液体培养基应记录为生长良好/生长微弱/未生长；固体培养基应记录为符合xx菌特征/不符合xx菌特征）。

5.2.4白色念珠菌、梭菌检查取新鲜标准菌株大肠、白念、生孢梭制备使成10～100cfu菌悬液，分别对测试与对照培养进行促生长能力、抑制能力及指示能力测试，结果被测培养基试验菌的生长反应情况应与对照培养基一致。

麦康凯琼脂培养基指示特性检查记录

培养基促生长能力、指示特性、抑制能力检查记录
被检培养基名称
麦康凯琼脂培养基
生产厂家：
批号：
对照培养基名称
麦康凯琼脂对照培养基
生产厂家：中国食品药品检定研究院
通则 1106
菌液制备
将大肠埃希菌([CMCC（B）44 102]第代）接种于胰酪大豆胨液体培养基中，35℃培养24小时。
1
2
1
2
大肠埃希菌
结论：
按《中国药典》2015年版四部通则1106检查，被检培养基与对照培养基上生长的菌落大小、形态特征、指示剂反应情况等（应一致）。
指示特性结果观察（35℃培养，18h）
阳性菌（不大于100cfu的菌液）
麦康凯琼脂培养基（cfu）
麦康凯琼脂对照培养基（cfu）
1
2
1
2
大肠埃希菌
结论：
按《中国药典》2015年版四部通则1106检查，被检培养基与对照培养基上生长的菌落大小、形态特征、指示剂反应情况等（应一致）。
备注：无菌落生长用“—”表示，有菌落生长用“+”表示。
检验者：复核者：
共页第页
检查方法
取上述新鲜培养物，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数小于1000cfu 的菌悬液。接种0.1ml的菌液涂布至麦康凯琼脂培养基和麦康凯琼脂对照培养基平板上。
促生长能力结果观察（35℃培养，18h）
阳性菌
（不大于100cfu的菌液）
麦康凯琼脂培养基（cfu）
麦康凯琼脂对照培养基（cfu）

无菌检验方法验证报告

文件制修订记录1. 概述：无菌检查法系用于检查药典要求无菌的药品、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。

本公司的无菌检查只是针对于灭菌注射用水的无菌检查。

灭菌注射用水灭菌工艺采用121℃30min过度杀菌法，按照2005年版《中国药典》的规定，注射剂的无菌检查应采用薄膜过滤法。

制定的《无菌检查法标准操作规程》（SOP4.14.038-B）应经过验证后，才能批准使用。

2. 验证目的：验证所采用的方法和条件是否适合于供试品的无菌检查。

即确认供试品在该检验量、该检验条件下无抑菌活性或其抑菌活性以被充分消除到可以忽略不计。

3. 验证范围：适用于灭菌注射用水无菌检查法的验证。

4. 验证人员及职责质量部负责该验证方案的起草及组织实施；验证小组负责验证方案的审批；质量部参与验证的实施及监督。

5. 文件准备和培训检查验证所需的各类文件资料，应齐全；相关的文件草案是否已具备。

6.1. 无菌检查室空气净化系统已经过验证并合格，仪器安装完成；仪表量器经过校验合格，且在有效期内。

6.2. 供试品：3批，批号：批号：批号：6.3. 培养基及试剂：6.3.1. 试剂试液：氯化钠:临用前配成0.9%浓度的溶液，配制记录见附件1。

冲洗液：0.1%蛋白胨水溶液，配制记录见附件2。

6.3.2. 培养基硫乙醇酸盐流体培养基生产厂家：批号：改良马丁培养基生产厂家：批号：营养肉汤培养基生产厂家：批号：改良马丁琼脂培养基生产厂家：批号：蛋白胨生产厂家：批号：培养基配制记录见附件3。

6.4. 验证用菌株：金黄色葡萄球菌【CMCC（B）26003】铜绿假单胞菌【CMCC（B）10104】枯草芽孢杆菌【CMCC（B）63501】生孢梭菌【CMCC（B）64941】白色念珠菌【CMCC（F）98001】黑曲霉【CMCC（F）98003】购自：各验证用菌种传代记录见附件4。

6.5. 无菌检验仪器及相关设备：压力蒸汽灭菌器型号：生产厂家：校验日期：有效期：生化培养箱（细菌培养）型号：生产厂家：校验日期：有效期：生化培养箱（霉菌培养）型号：生产厂家：校验日期：有效期：7. 验证内容：7.1. 培养基无菌性检查：每批培养基随机取不少于5支，培养14天，应无菌生长。

培养基管理规程

1.目的建立培养基的管理规程，确保产品的无菌及微生物限度检查结果真实可靠。

2.范围适用于实验室使用的培养基的管理。

3.职责3.1.实验员及实验室管理员负责对本制度实施。

3.2.QA负责监测本规程的执行。

4.规程4.1.种类和要求：本实验室无菌检查和微生物限度检查所使用的培养基均为脱水、干燥的商品培养基，商品培养基应有处方、使用说明和质量报告书。

培养基包括硫乙醇酸盐流体培养基、胰酪大豆胨液体培养基、胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基等培养基，要求来源于正规的生产厂家。

4.2.培养基的购买:岗位实验员要根据培养基使用情况及剩余量及时向部门领导提出申购，经部门领导审批后方可购买。

应当从可靠的供应商处采购，生产厂家应尽量稳定，必要时应当对供应商进行评估；一次购入量不宜过多。

4.3.培养基的接收：培养基购进后，由岗位实验员负责接收，并及时填写《培养基接收登记表》（附件1），如培养基标签未标注效期，则应当在培养基的容器上标注接收日期。

4.4.培养基的保管4.4.1.培养基性状均为粉末，有特殊气味，容易受潮。

岗位实验员负责核对品名、数量后，按标签的要求于阴凉干燥处贮存，防止光照，潮湿。

4.4.2.储存期限:新购进未开瓶的干粉培养基按厂家说明书上的储存期限储存。

开口后的干粉培养基的储存条件和效期均按说明书上的规定执行。

4.4.3.开封后的干粉培养基使用后用3M封口膜缠绕密封。

4.5.培养基的使用4.5.1.在制备培养基时，应按使用说明上的要求操作配制，每次配制前应检查脱水培养基是否变质，如结块、变色、变味等，不得使用结块或颜色发生改变的脱水培养基。

每次使用需在需登记《培养基领用记录》（附件2）。

4.5.2.培养基配制时应准确称量脱水培养基，并做好记录，配制培养基所用容器和配套器具应洁净，配制培养基的溶剂为去离子水或纯化水。

脱水培养基应完全溶解于水中，再进行分装与灭菌。

配制时若需要加热助溶，应注意不要过度加热，以避免培养基炭化颜色变深。

无菌检查用培养基灵敏度检查标准操作规程

黑曲霉( Aspergillus niger)〔CMCC(F) 98 003〕
4.4菌液制备
接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中或营养琼脂培养基上，接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，30℃～35℃培养18小时～24小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中或改良马丁琼脂培养基上，23～28℃培养24～48小时，上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数小于100cfu（菌落形成单位）的菌悬液。接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基上，23～28℃培养5～7天，加入3～5ml含0.05％（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05％（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含孢子数小于100cfu的孢子悬液。
菌悬液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在2～8℃可在24小时内使用。黑曲霉孢子悬液可保存在2～8℃，在验证过的贮存期内使用。
4.5培养基接种
取每管装量为12ml的硫乙醇酸盐流体培养基9支，分别接种小于100cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌各2支，另1支不接种作为空白对照，培养3天；取每管装量为9ml的改良马丁培养基5支,分别接种小于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉各2支，另1支不接种作为空白对照，培养5天。逐日观察结果。
4.2培养基
硫乙醇酸盐流体培养基、改良马丁培养基、营养琼脂培养基、营养肉汤培养基、改良马丁琼脂斜面培养基。
4.3菌种
培养基灵敏度检查所用代），试验用菌种应采用适宜的菌种保存技术进行保存，以保证试验菌株的生物学特性。
金黄色葡萄球菌( Staphylococcus aureus)〔CMCC(B) 26 003〕

检验科临床微生物实验室培养基接收及验证记录

水分适宜
无污染
颜色
厚度
无菌试验：
生长
未生长
生长试验菌株：
生长试验结果：
生长抑制试验菌株：
生长抑制试验：
验证结果：
验证人：
接收时间：
品名：
数量：
批号：
失效期：
培养基外观：
平滑
水分适宜
无污染
颜色
厚度
无菌试验：
生长
未生长
生长试验菌株：
生长试验结果：
生长抑制试验菌株：
生长抑制试验：
验证结果：
验证人：
临床微生物实验室培养基接收及验证记录
部门：年表格编号：JYK-JSBG-001
接收时间：
品名：
数量：
批号：
失效期：
培养基外观：
平滑
水分适宜
无污染
颜色
厚度
无菌试验：
生长
未生长
生长试验菌株：
生长试验结果：
生长抑制试验菌株：
生长抑制试验：
验证结果：
验证人：
接收时间：
品名：
数量：
批号：
失效期：
பைடு நூலகம்培养基外观：
平滑

培养基灵敏度检查记录

培养基灵敏度检查记录摘要该文档描述了在实验室中对于培养基的灵敏度检查过程的记录，其中包括了实验的目的、方法、结果和。

该检查可以帮助实验室监测和评估培养基的质量，以便提高实验结果的准确性和可靠性。

目的培养基灵敏度检查的目的在于确定你所使用的培养基的效力和纯度，以便将其用于实验。

检查可以帮助我们确定培养基中是否存在污染物和其他的不良物质。

此外，该检查还可以提供有关细菌对不同抗菌药物的反应的重要信息。

方法实验室中使用了标准的方法来进行培养基灵敏度检查。

在本次实验中，我们使用了以下设备和试剂：•培养基测试板•细菌株（常见的细菌株）•抗生素（几种常见的抗生素）实验分为以下几个步骤：1.准备培养基测试板：在培养基测试板中制造一个0.5麦芽糖浓度的菌液2.加入细菌株：加入细菌株到培养基测试板上，以包含菌液3.添加抗生素：将各种抗生素添加到测试板上，量为MIC（最小抑菌浓度）4.实验过程的记录：记录在培养基测试板上出现的菌落数量并测定其直径结果实验室的培养基灵敏度检查显示我们的培养基十分纯净，并且没有污染，同时抗生素的剂量适中。

检测到的微生物株菌落数量为零，代表我们培养基中不存在细菌或细胞污染。

不同种类的抗生素对于不同的细菌株的反应不同，在检测的过程中，我们发现一些菌株对于某些抗生素具有更高的抵抗力，而对于其他抗生素则没有。

本次实验中，我们成功检测了培养基的纯度，并且也测试了抗生素在不同细菌株中的反应。

这种测试有助于实验室在保证实验准确性以及细胞健康的同时，还可以避免不必要的费用开支。

为了更好地保证培养基的品质，我们应该定期地对培养基进行检查，并且采用多种数据来进行评估。

这样，可以更好地保证实验结果的重现性和可靠性，并且避免浪费时间和资源。

培养基灵敏度试验

计数培养基适用性检查记录
环境温度℃湿度%
培养基名称
玫瑰红钠琼脂培养基
批号
配制日期
2011年月日
对照培养基批号
生产厂家
实验日期
2011年月日
仪器型号及编号：
立式灭菌器型号：LMQ.R 3260B编号：H085霉菌培养箱型号：MJ-160B-Z编号：
电热恒温干燥箱型号：202-3AB编号：H001
菌液制备：
接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，置30~35℃培养24~48小时后，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为50~100cfu的菌悬液。接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基上，置20~25℃培养5~7天加入3~5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后，吸出孢子悬液至无菌试管中，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含孢子数50~100cfu的孢子悬液。
检查果：
阳性菌
被检培养基
对照培养基
回收率（A/B）%
被检培养基菌与对照培养基上菌落形态、大小
皿1
皿2
平均A
皿1
皿2
平均B
白色念珠菌
黑曲霉菌
结果判断：
若被检培养基上的平均菌落数与对照培养基上的平均菌落数相比大于70%，且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落一致，判该培养基适用性检查符合规定。
结论：
复核人：检验人：年月日
阳性对照菌液：
白色念珠菌[CMCC（F）98 001]编号：黑曲霉[CMCC(F)98 003]编号：
检查方法：
取5个无菌平皿，吸取白色念珠菌、黑曲霉菌各1ml，分别注入2个无菌平皿中，另一平皿不接种菌作为空白对照，立即倾注对照玫瑰红钠琼脂培养基，混匀，凝固，置23~28℃培养72小时，计数。同时，用被检培养基同法操作。

ISO13485体系计数培养基适用性检查记录(固体培养基)表

1．检查方法：《中国药典2020版》四部非无菌药品微生物限度检查法：微生物计数法（通则1105）。

2．验证用仪器型号及编号：立式高压蒸汽灭菌柜：型号编号：恒温培养箱：型号编号：生化培养箱：型号编号：3．菌液制备：3.1接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基上，于30～35℃培养18～24h；上述培养物用PH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液10倍递增稀释至1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液备用。

3.2接种白色念珠菌的新鲜培养物至沙氏葡萄糖液体培养基上，于20～25℃培养2～3天上述培养物用PH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液10倍递增稀释至1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液备用。

3.3将黑曲霉菌菌悬液用PH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液10倍递增稀释至1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液备用。

4.培养基配制按相应培养基产品说明分别配制胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基、营A琼脂培养基、胰酪大豆胨琼脂对照培养基、沙氏葡萄糖琼脂对照培养养琼脂培养基、R2A琼脂对照培养基，并按照相应的灭菌方式灭菌备用。

基、营养琼脂对照培养基、R25、培养基计数适用性检查5.1胰酪大豆胨琼脂培养基适用性检查分别接种不大于100cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌的菌悬液置直径90mm的无菌平皿中各2皿，另一个皿不接种菌作为空白对照。

倾注20ml温度不超过45℃熔化的胰酪大豆胨琼脂对照培养基，混匀，凝固。

将接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的平皿倒置于30-35℃的生化培养箱培养不超过3天，计数；将接种白色念珠菌、黑曲霉菌的平皿倒置于20-25℃的生化培养箱培养不超过5天，计数。

被检培养基同法操作。

结果见表1。

表1 培养基适用性检查结果之间，且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致。

判该培养基的适用性检查符合规定。

5.1.2结果判定：____________________________________5.1.3结论：________________________________________5.2沙氏葡萄糖琼脂培养基适用性检查分别接种不大于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉菌的菌悬液置直径90mm的无菌平皿中各2皿，另一个皿不接种菌作为空白对照。

方法适用性试验SOP

1.目的确认所采用的方法是否适合血清产品的无菌检查。

2.范围血清产品的无菌检查。

3.职责4. 1. 质量管理部：负责本规程的起草。

5. 2. 质量管理部检验人员：负责本规程的操作。

6. 3. 总经理：负责本规程的审批。

7.定义无8.引用标准《中华人民共和国药典》四部2015版。

9.材料10. 1. 材料准备：6.1.1. 菌种及菌液制备：除大肠杆菌(Escherichiaco1i)［CMCC(B)44102］外，金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、生胞梭菌、白色念珠菌、黑曲霉菌的菌种及菌液制备同培养基灵敏度检查。

大肠埃氏菌的菌液制备同金黄色葡萄球菌。

6.1.2 硫乙醇酸盐流体培养基、胰酪大豆陈液体培养基。

6.1.3 pH7.0无菌氯化钠-蛋白月东缓冲液或0.9%氯化钠溶液6.2 仪器设备20〜25℃培养箱，30〜35℃培养箱，集菌仪。

6. 3. 器械、用具6.3. 1.灭菌2m1移液管6. 3.2 灭菌中试管7.流程图无8.内容9. 1. 采用薄膜过滤法8.1.1 取每种培养基规定接种的供试品总量按薄膜过滤法过滤，冲洗，在最后一次的冲洗液中加入小于IOoCfU的试验菌，过滤。

8.1.2 加硫乙醇酸盐流体培养基或胰酪大豆陈液体培养基至筒内。

另取一装有同体积培养基的容器，加入等量试验菌，作为对照。

8.1.3 置规定温度培养，培养时间不超过5天，各试验菌同法操作。

8.2 结果判定1. 2.1 与对照管比较，如含供试品各容器中的试验菌均生长良好，说明供试品的该检验量在该检验条件下无抑菌作用或其抑菌作用可以忽略不计，照此检查方法和检查条件进行供试品的无菌检查。

2. 2.2 如含供试品的任一容器中的试验菌生长微弱、缓慢或不生长，则说明该供试品的该检验量在该检验条件下有抑菌作用，应采用增加冲洗量、增加培养基的用量、使用中和剂或灭活剂、更换滤膜品种等方法，消除供试品的抑菌作用，并重新进行适用性试验。

8. 2.3 方法适用性试验也可与供试品的无菌检查同时进行。