出凝血191蛋白C(PC)活性测定(发色底物法)(第四版)(精)

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出凝血19.1蛋白C(PC)活性测定(发色底物法)(第四版)

出凝血19.2 原理:

标本中的PC在特异的激活剂作用下被激活,PCa作用于特异的发色底物释放出产色基团,在405nm波长下比色,其显色深浅与其活性呈线性关系。

出凝血19.3标本处理:

患者处于休息状态下,采空腹静脉血(急诊病人除外)。采血者应技术熟练,“一针见血”,以防止组织损伤,使外源性凝血因子进入标本。最好不与其它实验一起采集而使血液停留在针管的时间延长。采完血后,将血液沿管壁缓缓注入试管,避免产生气泡;然后迅速将血液和抗凝剂轻轻颠倒混匀,避免用力震荡。

全血要在1小时内分离血浆。分离乏血小板血浆时,要在室温下3000rpm离心10分钟,室温下可存放4小时。全部试验不能在4小时内完成,应将乏血小板血浆分装在0.5~1.0ml的小试管中快速冷冻,储存于-20℃冰箱中。-20℃可保存30天。冷冻过的标本不能再次冷冻,否则结果会不准确。冷冻血浆融化时,应将盛冷冻血浆的容器置于37℃水浴中,并轻轻摇动,使其迅速融化。

出凝血19.4 试剂:

蛋白C试剂盒购于天津威士达公司,试剂盒代号OUVV 15。试剂包括3×10ml蛋白C激活剂;3×3ml底物试剂;1×30ml缓冲液。蛋白C激活剂每瓶用10ml缓冲液复溶,37℃平衡30分钟。底物试剂每瓶用3ml蒸馏水复溶,37℃平衡30分钟。

出凝血19.5仪器:使用Sysmex公司的CA-7000型全自动血液凝固仪。出凝血19.6 操作:按仪器操作步骤执行标准操作。

出凝血19.6.1开机:按下机器侧面的POWER 按钮。开机后机器进行自检,当屏幕上边显示“Ready:”时可以进行试验。

出凝血19.6.2检查消耗品:

1、准备反应杯:打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量,不足时,需及时添加。(一次性最多可放1000 个杯子)

2、准备试剂:按照仪器对试剂的要求,把试剂准备好,放到仪器内相应位置,注意查看试剂的量和有效期。如还不熟悉试剂位置时,可在主屏幕上选Reagent Setting,按屏幕显示放置试剂。

3、查看仪器的洗液瓶和废液瓶

出凝血19.6.3准备标本:将样本放入样本架,再将样本架放到仪器进样器上。

出凝血19.6.4输入检测项目:主菜单上按下Work List 键,进入工作菜单,输入PC项目。

出凝血19.6.5输入样本号:按屏幕下菜单的ID No.键,按顺序输入样本的序号。

出凝血19.6.6开始检测:录入完所有测试信息,按下屏幕右上角START 键,开始检测。

出凝血19.7 计算:仪器自动计算出结果。

出凝血19.8 参考值:70~140%(0.7~1.4)

出凝血19.9 临床意义:

先天性PC缺陷:患者表现为反复的无明显原因的血栓形成。I 型患者PC含量和活性均降低;II型患者PC含量正常而活性降低。

获得性PC缺陷:弥散性血管内凝血、呼吸窘迫综合征、肝功能障碍、手术后及口服双香豆素类抗凝药物均可导致PC含量减少。

PC含量及活性增加:冠心病、糖尿病、肾病综合征、妊娠后期等常呈代偿性增加。

出凝血19.10 参考文献:

1)主编王鸿利.止血与血栓检验技术.(第一版1992.6)上海科学技术出版社.

2)主编李家增王鸿利韩忠朝.血液实验学.(第一版1997.10)上海科学技术出版社.

3)主编邓家栋杨崇礼杨天楹.临床血液学.(第一版1985)上海科学技术出版社.

4)主编邓家栋杨天楹杨崇礼.血液学实验诊断.(第一版1985)天津出版社.

5)中华人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第一版 1991).东南大学出版社.

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