氨基柱使用注意事项

1．柱子所使用的PH范围是2~8，且最好不好在极端条件下使用2．柱子能承受最大40mpa（6000psi）的压力，但是过高的压力应该是被避免的，过高的压力会造成柱床的结构的破坏，而且可能会导致分析过程中峰分叉

3．柱子能够使用所有有机溶剂（PH范围在2~8），试剂最好是HPLC级别（色谱纯），且使用前用0.45um滤膜过滤。不纯试剂（非HPLC级别）的使用会造成色谱柱柱头不可逆的吸附，这些杂志会阻碍吸附位点、改变色谱柱的选择性甚至会造成峰分叉。在梯度洗脱中会造成所谓的“鬼峰”，鬼峰在梯度洗脱中总是会出现在相同的位置，他们的源头不是样品，而是溶剂或者溶剂中添加的物质，因此建议在每个方法开始的时候要不进样品走一针梯度程序以确定鬼峰是否存在。为了防止柱头不可逆的吸附，建议经常用一个预柱，预柱可以延长色谱柱的使用寿命，此外它可以过滤从泵头还有进样阀中颗粒性的物质。在线过滤器对于预柱来说是个代替，它安装在进样阀和色谱柱之间，新型的在线过滤器可以直接接在柱子上。在线过滤器可以极大的吸附溶剂中的颗粒性物质，但是它不能代替像预柱那样阻止溶剂杂志对柱子造成不可逆的吸附。

4．柱子的保存：

对于反相柱子（.NH2和苯基）来说最佳的保存体系是乙腈/水，且水的比例绝不能低于50%.

注意：哪怕是短时间的保存，也要将缓冲溶液从色谱柱中冲洗干净以

防止海藻的生长。缓冲盐和乙腈是不互溶的，而且它会阻塞管路和柱子。

5.平衡时间：色谱柱的平衡时间取决于色谱柱死体积，一般需要20个柱体积。而250*4.6mm柱子的死体积是2.91ml，如果用1ml/min 的话大概需要58min

6.色谱柱的再生

对于反相填料来说（和苯基）过程如下

先用20倍柱体积的水（一般要加5%的乙腈），再用20倍柱体积的乙腈，再用5倍柱体积的异丙醇，再用20倍柱体积的正己烷，再用5倍柱体积的异丙醇，再用20倍柱体积的乙腈