液体活检
液体活检
组织个体化用药标志物 ctDNA用药检测标志物 CTC预后评估
ctDNA的研究进展和临床应用
ctDNA的来源
ctDNA的研究进展和临床应用 ctDNA的特征
• 标志组合（panel）
每种肿瘤都有数百基因，数千位点的不同ctDNA，包含不同的突变。
• 不断演变及变化
每个人、每个肿瘤、不同阶段、不同时间、不同治疗，其突变基因、位点、种类及含量都在动态变化。 • 高度碎片化 碎片大小范围分布在从30b-250bp，多数在140bp-160bp。 • 含量少且变化大 cfDNA中多数野生背景，不同ctDNA片段的含量从0.01%到10%； • 超早期、高肿瘤特异性，但缺少组织和器官特异性
捕获建库+单分子标签
目前主流，技术相对成熟，>90%研究者采用该方案，代表公司如Guardant Health、Foundation、Roche、
吉因加、燃石等
主要特点：DNA探针或RNA探针杂交捕获，一次捕获多个目标区域，成本相对较高，无法随时增位点，无
法检测断裂点附近的突变位点
单链成环＋单分子标签
ctDNA的研究进展和临床应用 ctDNA的临床应用
无创、全面、实时、便捷
ctDNA的研究进展和临床应用 ctDNA指导用药
CAPP-Seq NGS用于血浆ALK&ROS1融合检测
1. 8例患者在血浆中均检测出ALK或ROS1融合
2. 接受克唑替尼治疗后，肿瘤缩小 -- AM. Newman,et al.Nat Med 2014
CTC、ctDNA 和外泌体在肿瘤各阶段的应用
血浆甲基化标志物 血清蛋白标志物 血清外泌体miRNA标志物 血清/尿液外泌体蛋白 尿液外泌体RNA标志物 标志物 （早癌诊断、鉴别及疗效判断）（中晚期诊断及疗效判断）
1.1液体活检与组织活检常识
什么是液体活检？液体活检是与传统的组织活检相对应的概念，是以血液等非固态生物组织为标本进行取样和分析的体外诊断技术。
液体活检中的“液体”以血液为主，也包括粪便、尿液、唾液以及其他体液样品。
液体活检最主要的应用场景是肿瘤的早期筛查、诊断、用药指导、监测、预后管理，以及无创产前检测，除此之外还包括肌肉骨骼系统和结缔组织疾病、传染病和寄生虫病等其他疾病。
与传统的组织活检相比，液体活检的优势之一在于能够反映病灶的综合信息，精准治疗的前提是对肿瘤等病灶组织取样进行基因分析，传统方法为手术活检和穿刺活检，由于肿瘤细胞存在很强的异质性，传统方法只能获得取样位置的基因信息，不能反映肿瘤整体上的综合信息。
优势之二在于可以进行高频率监测，肿瘤细胞的基因变化可能导致抗药性等情况，必须高频监测才能做到准确用药，液体活检通过简单的静脉抽血即可实现，可以满足高频监测的需求。
优势之三在于可以显著降低成本、降低患者风险，肺穿刺活检的成本数倍于液体活检，且有更大几率导致并发症。
三、液体活检的发展情况如何？根据检测物的不同，液体活检技术已发展出以下分支：（1）CTC技术：循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cell，CTC）是游离于血液循环系统中的肿瘤细胞，来源于原发肿瘤组织，是肿瘤细胞转移的重要方式，是复发和激发癌症致死机制的重要因素。
CTC作为肿瘤细胞，不仅包含肿瘤的DNA信息，同时还包含基因组、蛋白质组等信息，是研究肿瘤组织信息的丰富来源。
（2）cfDNA/ctDNA技术：游离DNA（Cell-free DNA，cfDNA）是游离于血液循环系统中的来自细胞的DNA片段，主要来自于细胞凋亡进程中片段化的DNA、坏死细胞的DNA碎片、细胞分泌的外泌体。
cfDNA中最重要的一类是循环肿瘤DNA（Circulating Tumor DNA，ctDNA），ctDNA是进入血液循环系统中的来自肿瘤基因组的DNA片段，携带了突变、插入、缺失、重排、拷贝数异常和/或甲基化等基因信息。
全球知名的十大新兴科技介绍
全球知名的十大新兴科技介绍十大新兴科技1. 液体活检液体活检技术的出现，标志着人类在攻克癌症的道路上又前进了一大步。
与传统的组织活检相比，液体活检具备多项优势：首先，对于组织活检无法企及的部位，液体活检可以成为替代品。
其次，组织活检只能反映出样品中的信息，而液体活检可以检测出患者的整体情况。
此外，液体活检主要检测的是循环肿瘤DNA(ctDNA)，它们通常会从肿瘤组织进入血管中。
因此，与依靠症状和图像进行诊断相比，液体活检对癌细胞的定位更加迅速。
2. 从空气中收集净水此前，科学家已经能够从空气中收集净水，但现有的技术需要耗费大量电力，并且只有在湿度较高时才能实现。
而现在，情况正在发生改变。
来自MIT和加州大学伯克利分校的研究团队通过一类新型多孔晶体——金属有机骨架(metal-organic frameworks)，在空气湿度低至20%的环境下成功收集净水，且这一过程完全不需消耗能量。
此外，一家位于亚利桑那州的初创企业Zero Mass Water，通过离网型太阳能系统，每天可以生产2.5升水。
3. 深度学习与机器视觉在深度学习的帮助下(尤其是随着卷积神经网络的发展)，计算机的图像识别能力开始超越人类。
目前，机器视觉技术在自动驾驶、医学诊断、保险索赔的破损评估、水位监测、农业生产等领域具有广泛的应用前景。
4. 从阳光中收集液态燃料我们能否模仿树叶的光合作用，让“仿生树叶”生成、储存能量?现在，这个问题的答案正呼之欲出。
哈佛大学的科学家找出一款新型钴-磷催化剂，利用太阳能，其将水分子分解成氢气和氧气，随后这些氢将二氧化碳转化成有机物。
在这样一个封闭系统中，燃烧释放的二氧化碳将重新被转化成燃料，而不是被排放至大气中。
这项技术可能会给太阳能和风能行业带来革命性的影响。
5. 人类细胞图谱计划人类细胞图谱计划于2016年10月正式启动，这个国际合作项目旨在破译人类身体的秘密，由陈-扎克伯格倡议支持。
此项目希望确定所有组织的.不同细胞类型、各类细胞分别由哪些基因、蛋白和其他分子来控制细胞活动、细胞的准确位置，以及细胞是如何与其他细胞交流，在细胞发生改变后又是如何影响身体机能的……该计划最终将为个性化医疗提供有力的帮助。
肿瘤标志物检测常用方法
肿瘤标志物检测常用方法引言：肿瘤标志物是一种用于早期癌症诊断、疾病监测和治疗反应评价的生物分子。
随着科技的不断进步，肿瘤标志物检测方法也在不断发展。
本文将介绍常用的肿瘤标志物检测方法，包括血清标志物检测、组织标志物检测、基因标志物检测和液体活检。
一、血清标志物检测血清标志物检测是目前最常用的肿瘤标志物检测方法之一。
通过检测血液中特定蛋白质、酶、激素等生物标志物的水平，可以帮助医生判断肿瘤的存在和发展程度。
1. 酶联免疫吸附检测（ELISA）ELISA是一种基于酶的免疫学原理进行的血清标志物检测方法。
它可以通过特异性抗体与待检测标志物结合来实现检测，常用于癌胚抗原（CEA）、前列腺特异性抗原（PSA）等肿瘤标志物的检测。
2. 化学发光免疫分析（CLIA）CLIA是一种利用化学发光原理进行的血清标志物检测方法。
它通过将标志物与酶标记物结合，通过化学反应释放能量，从而实现检测。
CLIA方法的敏感性和特异性相对较高，适用于许多肿瘤标志物的检测。
二、组织标志物检测组织标志物检测是通过取得肿瘤组织样本，对其中的蛋白质、基因等进行分析，以揭示肿瘤发生和发展的机制。
1. 免疫组织化学染色免疫组织化学染色是一种常用的组织标志物检测方法。
它利用特异性抗体与待检测标志物结合，并通过染色反应使标志物在组织切片上显示出颜色，从而实现检测。
免疫组织化学染色可以用于检测HER2、ER、PR等肿瘤相关标志物。
2. 原位杂交原位杂交是一种检测肿瘤细胞中基因异常的方法。
它通过标记探针与待检测基因序列结合，通过显色反应或荧光反应来检测特定基因的存在和表达水平。
原位杂交方法可以用于检测荧光原位杂交（FISH）和银染原位杂交（SISH）等。
三、基因标志物检测基因标志物检测是一种通过检测肿瘤细胞中特定基因的状态来进行预测、诊断和治疗评估的方法。
1. 聚合酶链式反应（PCR）PCR是一种常用的基因标志物检测方法，它可以通过扩增待测基因的DNA片段，从而使其在实验中能够被检测到。
液体活检简介演示
液体活检可以分析多种生物体液，包 括血液、尿液、唾液、脑脊液等，以 获取关于疾病的信息。
液体活检发展历程
01
初始阶段
早期的液体活检主要基于传统的生物化学分析方法，如血液生化检测，
用于评估患者的代谢和生理功能。
02 03
技术进步
随着基因组学、蛋白质组学和代谢组学等技术的发展，液体活检逐渐演 变为更复杂、更精确的分析方法，能够检测生物体液中的核酸、蛋白质 和代谢物。
体活检技术的发展趋势
个性化医疗
随着精准医疗的发展，液体活检技术将成为实现个性化医疗的关 键工具，为每位患者提供定制化的治疗方案。
多组学整合
液体活检技术将逐渐整合基因组学、蛋白质组学、代谢组学等多组 学信息，更全面地揭示疾病的发生发展机制。
早期诊断与预后评估
液体活检技术在肿瘤等疾病的早期诊断、疗效监测和预后评估方面 的应用将进一步加强。
者权益和数据安全。
液体活检技术的未来展望
创新技术不断涌现
随着科学技术的进步，未 来将有更多创新技术应用 于液体活检领域，提高检 测精度和效率。
临床应用拓展
液体活检技术将在更多疾 病领域得到应用，为临床 诊断和治疗提供更有力的 支持。
全球合作与共享
国际间的合作与资源共享 将推动液体活检技术的快 速发展，造福全球患者。
02
液体活检技术原理
液体活检技术基础
01
02
03
定义
液体活检是一种通过分析 生物体液中的生物标志物 来检测、诊断和监测疾病 的技术。
应用范围
液体活检可用于多种疾病 ，包括癌症、心血管疾病 、神经系统疾病等。
生物体液类型
常用的生物体液包括血液 、尿液、唾液、组织液等 。
液体活检行业分析报告
液体活检行业分析报告液体活检行业分析报告一、定义液体活检，亦称液体活体检测，是利用人体液体中的细胞、DNA、RNA等来诊断疾病的一种新型诊断技术，通常通过抽取血液、尿液、脑脊液等检测样本获取。
这种技术的出现，不仅可以帮助医生准确诊断患者的疾病，提高治疗效果，更有助于早期筛查、疾病预防，是目前医学领域的重要发展方向。
二、分类特点根据样本来源的不同，液体活检主要分为血液液体活检和尿液液体活检两种。
血液液体活检是指通过血液中的DNA、RNA等来诊断患者的疾病，主要用于肿瘤等方面的检测。
相比于传统的肿瘤诊断方法，血液液体活检具有非侵入性、方便快捷、高效、准确等优点。
尿液液体活检主要通过检测尿中是否有癌细胞，来诊断肾、膀胱等方面的疾病，是目前临床上最常见、最简单、最安全的液体活检检测方式。
相比于传统的尿液检测方法，尿液液体活检具有敏感性高、特异性强等优点。
三、产业链液体活检行业的产业链主要包括采样、检测、分析、诊断及数据处理等环节。
采样：液体活检采样主要包括血液、尿液等样本采集及处理。
目前液体活检市场上已经出现了一批专业的取样机器和设备，可以快速、准确地采集样本。
检测：液体活检的检测主要是利用一些先进的生物技术对样本进行基因检测，例如PCR、NGS等检测手段，从而找出存在的异常体细胞。
分析：目前液体活检技术的分析主要有两种，即传统的Cp 值及CNV (拷贝数变异)等生物信息学分析。
这些技术需要专业的软件支持，最终生成医学报告。
诊断及数据处理：在液体活检的诊断及数据处理中，医生需要结合患者病症、家族遗传信息、病理切片检查等综合考虑，综合判断出患者的疾病状态。
同时，由于液体活检数据的复杂性和多样性，数据处理也成为制约行业发展的瓶颈。
四、发展历程液体活检技术是随着基因检测技术的发展而逐渐发展起来的。
20世纪80年代，PCR技术的发明及用于检测HIV感染，成为基因检测技术发展的重要契机。
90年代，随着人类基因组计划的启动，基因分析技术的研究逐渐加深。
液体活检定义
液体活检定义1. 引言液体活检是一种非侵入性的诊断方法，通过分析体液样本中的细胞、DNA、蛋白质等生物标志物，以实现对疾病的早期诊断、治疗效果监测和预后评估。
相比传统的组织活检，液体活检具有操作简便、无创伤、可重复采样等优点，因此被广泛应用于临床实践中。
2. 液体活检的类型液体活检主要包括以下几种类型：2.1 血液液体活检血液液体活检是最常见的一种液体活检方法，通过采集患者的血液样本，分离出其中的细胞、DNA、蛋白质等，进行相关分析和检测。
血液液体活检可以用于早期筛查、疾病诊断、疗效监测等多个方面。
2.2 尿液液体活检尿液液体活检是通过采集患者的尿液样本，分离出其中的细胞、DNA、蛋白质等，进行相关分析和检测。
尿液液体活检主要应用于泌尿系统疾病的早期筛查和监测。
2.3 唾液液体活检唾液液体活检是通过采集患者的唾液样本，分离出其中的细胞、DNA、蛋白质等，进行相关分析和检测。
唾液液体活检可以用于口腔疾病的早期诊断和监测。
2.4 精液液体活检精液液体活检是通过采集患者的精液样本，分离出其中的细胞、DNA、蛋白质等，进行相关分析和检测。
精液液体活检主要应用于男性生殖系统疾病的早期筛查和监测。
3. 液体活检的应用液体活检在临床实践中有广泛的应用，主要包括以下几个方面：3.1 早期筛查液体活检可以通过分析体液样本中的生物标志物，实现对疾病的早期筛查。
例如，通过血液液体活检可以检测肿瘤标志物，帮助早期发现肿瘤。
早期筛查可以提高疾病的检出率，有助于早期治疗和提高患者的生存率。
3.2 疾病诊断液体活检可以通过分析体液样本中的生物标志物，实现对疾病的诊断。
例如，通过血液液体活检可以检测病毒感染、肿瘤等疾病。
疾病诊断是指导治疗的重要环节，液体活检可以提供及时准确的诊断结果，为患者的治疗方案选择提供依据。
3.3 疗效监测液体活检可以通过分析体液样本中的生物标志物，实现对治疗效果的监测。
例如，通过血液液体活检可以监测肿瘤治疗的效果，判断治疗是否有效。
新兴科技即兴评述
新兴科技即兴评述1、液体活检液体活检技术的出现，标志着人类在攻克癌症的道路上又前进了一大步。
与传统的组织活检相比，液体活检具备多项优势：首先，对于组织活检无法企及的部位，液体活检可以成为替代品。
其次，组织活检只能反映出样品中的信息，而液体活检可以检测出患者的整体情况。
此外，液体活检主要检测的是循环肿瘤DNA(ctDNA)，它们通常会从肿瘤组织进入血管中。
因此，与依靠症状和图像进行诊断相比，液体活检对癌细胞的定位更加迅速。
2、从空气中收集净水此前，科学家已经能够从空气中收集净水，但现有的技术需要耗费大量电力，并且只有在湿度较高时才能实现。
而现在，情况正在发生改变。
来自MIT和加州大学伯克利分校的研究团队通过一类新型多孔晶体——金属有机骨架，在空气湿度低至20%的环境下成功收集净水，且这一过程完全不需消耗能量。
此外，一家位于亚利桑那州的初创企业，通过离网型太阳能系统，每天可以生产2.5升水。
3、深度学习与机器视觉在深度学习的帮助下(尤其是随着卷积神经网络的发展)，计算机的图像识别能力开始超越人类。
目前，机器视觉技术在自动驾驶、医学诊断、保险索赔的破损评估、水位监测、农业生产等领域具有广泛的应用前景。
与其他深度学习结构相比，卷积神经网络在图像和语音识别方面能够给出更优的结果。
这一模型也可以使用反向传播算法进行训练。
相比较其他深度、前馈神经网络，卷积神经网络需要估计的参数更少，使之成为一种颇具吸引力的深度学习结构。
4、从阳光中收集液态燃料我们能否模仿树叶的光合作用，让“仿生树叶”生成、储存能量?现在，这个问题的答案正呼之欲出。
哈佛大学的科学家找出一款新型钴-磷催化剂，利用太阳能，将水分子分解成氢气和氧气，随后这些氢将二氧化碳转化成有机物。
在这样一个封闭系统中，燃烧释放的二氧化碳将重新被转化成燃料，而不是被排放到大气中。
这项技术可能会给太阳能和风能行业带来革命性的影响。
5、人类细胞图谱计划人类细胞图谱计划于2016年10月正式启动，这个国际合作项目旨在破译人类身体的密码，由陈-扎克伯格倡议支持。
液体活检在肿瘤监测管理中的应用
液体活检在肿瘤监测管理中的应用1. 引言1.1 液体活检在肿瘤监测管理中的应用液体活检在肿瘤监测管理中的应用是一种快速、无创、准确的诊断技术，通过检测体液中的肿瘤相关标志物，可以帮助医师及时了解肿瘤的发展情况，指导临床治疗方案的调整。
随着科技的进步和研究的深入，液体活检在肿瘤监测管理中的应用越来越受到重视。
传统的肿瘤诊断方法需要进行组织活检或影像检查，而液体活检则能通过简单的血液、尿液或唾液样本，实现对肿瘤的监测和管理。
这种无创的方式让患者更加舒适，也使得监测更加连续与频繁。
液体活检的应用范围涵盖了肿瘤的早期筛查、治疗效果监测、复发与转移的监测，以及个性化治疗方案的制定。
其高灵敏度和特异性让其成为肿瘤监测管理中的重要辅助工具。
未来，随着技术的不断革新和研究的不断深入，液体活检在肿瘤监测管理中的应用将会更加广泛，更加精准，为患者提供更好的医疗服务。
在这个信息爆炸的时代，液体活检的应用将成为肿瘤监测管理中不可或缺的重要组成部分。
液体活检的未来发展前景值得期待，对于提升肿瘤治疗水平将具有重要意义。
2. 正文2.1 液体活检的原理和方法液体活检是一种通过分析血液、尿液或其他生理液体中的肿瘤标记物来诊断和监测肿瘤的方法。
其原理是基于肿瘤细胞在体内释放的DNA、RNA、蛋白质等物质会进入循环系统，成为体液中的特定标记物。
通过对这些标记物的检测和分析，可以了解肿瘤的遗传特征、变异情况等信息。
液体活检的方法主要包括血清标志物检测、循环肿瘤细胞检测和循环肿瘤DNA检测等。
血清标志物检测是最常用的方法之一，通过检测血液中的特定蛋白质或其他分子来判断肿瘤的存在和发展情况。
循环肿瘤细胞检测则是通过分离和鉴定循环系统中的肿瘤细胞来诊断和监测肿瘤。
而循环肿瘤DNA检测则是通过分析血液中的肿瘤DNA片段来了解肿瘤的遗传变异情况。
液体活检是一种非侵入性的检测方法，具有较高的准确性和灵敏度，在肿瘤监测管理中发挥着重要作用。
随着技术的不断进步和研究的深入，液体活检将在肿瘤诊断、治疗和监测方面发挥越来越重要的作用。
液体活检定义-理解液体检测的含义
液体活检定义-理解液体检测的含义液体活检是一种诊断技术，通过分析体内液体样本来检测和识别疾病的存在和发展。
它在很大程度上改变了传统活检的方式，不再需要采集组织样本，而是通过采集血液、尿液、唾液、脑脊液等体液来获取疾病相关的分子标志物。
液体活检具有许多优势，如非侵入性、无痛苦、易于采样和监测等，极大地方便了病人和医生。
1. 液体活检的原理液体活检的原理是基于人体内液体中包含了与疾病相关的分子标志物的假设。
当身体发生疾病时，病理过程会导致细胞或组织释放出特定的DNA片段、RNA、蛋白质等生物标志物，这些标志物可以通过血液、尿液等体液传输到全身，从而被液体活检技术检测到。
通过对这些标志物的定量分析和特定变化的观察，可以诊断出潜在的疾病。
2. 液体活检的应用领域液体活检技术在许多临床领域都有着广泛的应用。
在肿瘤学领域，液体活检已成为一种常用的辅助诊断方法，可以通过血液或尿液检测肿瘤相关的标志物，帮助医生评估肿瘤的类型、分期和预后。
在感染性疾病的诊断中，液体活检可以检测病原体的DNA或RNA，快速确定感染的类型和病原体的耐药性。
液体活检还可以用于监测器官移植的排斥反应、分析胎儿遗传异常以及评估神经系统疾病等。
3. 液体活检的优势和局限性液体活检相比传统活检方法具有许多明显的优势。
液体活检不需要手术或创伤性采样过程，避免了组织活检的痛苦和并发症风险。
液体活检具有较高的灵敏度和特异性，能够在早期发现疾病，并且可以通过监测疾病相关标志物的变化来评估治疗效果。
液体活检还能够提供动态的疾病信息，因为它可以在疾病发展过程中进行多次采样和检测。
然而，液体活检也存在一些局限性。
由于活检样品是体液，其中的标志物含量相对较低，需要特殊的分析方法和仪器来进行检测。
液体活检技术的标准化和临床验证仍然面临挑战，需要更多的研究和实践来证明其在不同疾病中的准确性和可靠性。
液体活检对操作人员的技术要求较高，需要具备良好的实验技能和解读能力。
caca指南液体活检_概述说明以及解释
caca指南液体活检概述说明以及解释1. 引言1.1 概述本篇文章旨在介绍caca指南液体活检的概念、原理、方法以及其在医学领域中的应用。
液体活检作为一种新兴的无创诊断技术，通过分析人体液体中的生物标志物来诊断疾病并提供治疗方案。
caca指南液体活检是其中一种被广泛研究和应用的方法。
1.2 文章结构本文将按照以下顺序展开：首先介绍caca指南液体活检的定义，包括其起源和基本概念；接着阐述液体活检的原理和常用方法，解释其背后的科学机制；然后探讨caca指南液体活检在医学领域中的应用领域，以实际案例说明它在临床实践中的价值；最后总结caca指南液体活检的重要性和优势，并提出对未来研究方向的展望和建议。
1.3 目的本文旨在使读者对caca指南液体活检有一个全面而清晰的了解。
通过阐述其定义、原理、实践应用以及未来发展方向，读者将能够了解液体活检作为一种非侵入性的诊断方法所具备的优势和潜力。
除此之外，本文还旨在引发对caca指南液体活检进一步研究和应用的兴趣，促进医学科学领域的持续发展。
2. 正文:2.1 caca指南液体活检的定义caca指南液体活检是一种基于血液或其他生物体内液体样本进行分析和诊断的新兴技术。
它可以通过分析这些样本中包含的循环肿瘤DNA（ctDNA）、细胞外囊泡（EVs）及蛋白质等生物标志物，帮助医生了解患者身体内发生的变化和疾病情况。
相比传统组织活检或细胞活检方法，caca指南液体活检具有非侵入性、快速、方便等优点。
2.2 液体活检的原理和方法液体活检技术主要通过采集患者血浆、尿液或其他生物体内液体样本，并利用高灵敏度的实验技术来分离和分析这些样本中微量的肿瘤标记物。
常用的技术包括多重PCR扩增、下一代测序（NGS）、质谱分析以及流式细胞术等。
在分析过程中，科学家可以根据特定基因突变、异常甲基化模式或蛋白质表达水平等来评估患者是否存在肿瘤细胞或其他异常情况。
2.3 caca指南液体活检的应用领域caca指南液体活检技术在临床医学中有广泛的应用领域。
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CTC应用和意义
乳腺癌、前列腺癌 结肠癌、肺癌、胃癌、 肝癌、胰腺癌多种肿瘤
肿瘤转移 预测
监测早期转移
CTCs
CTCs数量改变反映了肿瘤细胞对各种治 疗方案的敏感性和有效性，为个体化治疗 提供依据。
肿瘤治疗
监测CTCs基因表达／突变，找到药物敏 感的靶点，指导个体化治疗
CTC优化治疗方案
2014年GoldKorn，接受多西他赛联合阿曲生坦治疗的转移性去势 抵抗性前列腺癌患者，基线循环肿瘤细胞CTC数量可预测预后，3周时 CTC升高提示总生存较差，有望作为重新指导和优化治疗的较好指标。
Matthew W. Snyder, Martin Kircher,Andrew J. Hillet al. Cell-free DNA Comprises an In Vivo Nucleosome Footprint that Informs Its Tissues-Of-Origin.Cell. 2016 Jan 14;164(1-2):57-68.
CTC异质性
Brouwer A, De Laere B, Peeters D, et al.consequences of heterogeneity in the circulating tumor cell compartment. Oncotarget. 2016 Mar 9. doi: 10.18632/oncotarget.8015.
2012年Bian,乳癌患者在接受化疗（白蛋白结合型紫杉醇+卡培 他滨+曲妥珠单抗）前后CTC变化。 治疗前：CTC 3，HER-2+； 1疗程： CTC 0。 6疗程：病理学 CR。 证实CTC值在乳腺癌治疗早期发生显著变化，能够准确预示疗效， 能够科学指导选择治疗方案。
Goldkorn A，Ely B，Quinn DI，et al．Circulating Tumo cell counts are Prognostic of overall survival in SWOG S0421：a Phase III Trial of docetaxel with or without atrasentan For Metastatic castration resistant prostate cancer.J Clin Oncol2014 32(11)：1136-1142． Bian L，Wang T，Liu Y，et al．Evaluation of treatment response for breast cancer：are we Entering the era of ”biological Complete remission”?．Chin J Cancer Res．2012，24：403-407．
液体活检优势及前景
• 液态活检无侵入性、可频繁多次检测及快速反应能力均体现出发展潜 力巨大应用价值。将削减无效肿瘤医疗开支、降低医疗成本。 • 适应症广泛，如乳腺癌、结直肠癌、肺癌、胃癌、食管癌等常见肿瘤 均可用液态活检技术进行诊断与监测。 • 2015年美国发布的肿瘤治疗计划的四大举措之一：“液态活检”血浆 开发新方法来评估治疗反应以及抵抗可能的耐药性。 • 根据中国国家癌症中心发布的数据，我国5年内诊断为癌症且仍存活的
Newman AM , Lovejoy A F , Klass DM, et al. Integrated digital error suppression for improved detection of circulating tumor DNA. Nature Biotechnology(2016) doi:10.1038/nbt.3520
CTCs的研究方法
Ramdane Harouaka , Zhigang Kang , Si-Yang Zheng , Liang Cao. Circulating tumor cells: Advances in isolation and analysis, and challenges for clinical applications. Pharmacology & Therapeutics.2014; 141:209–221.
1 ： CAPP-Seq （ cancer personalized profiling by deep sequencing ） 癌 症 个 体化深度测序分析方法:利用定制化的 NimbleGen SeqCap EZ Choice Library 作 为”筛选器“对样本靶向捕获后再深度测 序，灵敏度高，特异性强且经济可行。 2 ： 利 用数 字错 误 抑 制（ IDES ）的 方法和 CAPP-seq （ ctDNA 测序方法），能够检测到 频率低至0.004％的突变等位基因
cfDNA－片段谱系分析
Deep sequencing of circulating cell-free DNA yields a dense, genome-wide map of nucleosome occupancy that enables identification of its cell-types of origin, potentially enabling the noninvasive monitoring of a broader set of clinical conditions
CTCs的研究方法（2）-基因芯片
CTCs的研究方法（3）-测序
Xiaohui Nia, Minglei Zhuo, Zhe Sua，et al. Reproducible copy number variation patterns among single circulating tumor cells of lung cancer patients. PNA,2013,52(110) 21083-21088.
CTC与肿瘤转移
Simon A Joosse, Tobias M Gorges, and Klaus Pantel. Biology, detection, and clinical implications of circulating tumor cells. EMBO Mol Med. 2015 ; 7(1): 1–11.
（
cfDNA & ctDNA
Ellen Heitzer,Peter Ulz,and Jochen B.Geig.Circulating Tumor DNA as a Liquid Biopsy for Cancer. Clinical Chemistry . 2015,112–123
ctDNA-高通量测序
Min Yu , Aditya Bardia , Nicola Aceto, et al. Ex vivo culture of circulating breast tumor cells for individualized testing of drug susceptibility. Science. 2014 ; 345(6193): 216–220.
Ellen Heitzer,Peter Ulz,and Jochen B.Geig.Circulatingபைடு நூலகம்Tumor DNA as a Liquid Biopsy for Cancer. Clinical Chemistry . 2015,112–123
液体活检应用价值（分析耐药株的遗传变异）
Ellen Heitzer,Peter Ulz,and Jochen B.Geig.Circulating Tumor DNA as a Liquid Biopsy for Cancer. Clinical Chemistry . 2015,112–123
Xiaohui Nia, Minglei Zhuo, Zhe Sua，et al. Reproducible copy number variation patterns among single circulating tumor cells of lung cancer patients. PNA,2013,52(110) 21083-21088.
CTCs的分离方法（2）-体外培养
Representative images of nonadherent CTC
immunofluorescent staining ：CK： red； Ki67：yellow； CD45 ：green； DAPI： blue.
Papanicolaou staining for uncultured primary
液体活检在肿瘤精准治疗中的研究进展
郑秋红
福建省肿瘤医院，福建省肿瘤研究所
福建省肿瘤生物治疗重点实验室 2016.4.21
内容摘要
一. 液体活检
1）cfDNA&ctDNA & CTC概念和最新研究进展
2）液体活检应用和意义
二. CTC/CTSC研究方法和进展 三. 我们的研究
液态活检
• 来源于肿瘤组织，存在 于血液中：
研究方法（1）-Cell Search
CellSearch系统是唯一经FDA批准进入临床应用的CTCs检 测方案。
原理：EpCAM抗体标识的微磁珠从全血中捕获细胞，用免 疫荧光识EpCAM+CK+CD45−进行磁性分离。
CK EpCAM DAPI
CD45
CTC
Cell Search
数据解读:
1. 7.5ML外周血 2. 判断阈值： 转移性乳腺癌 CTCs ≥5 细胞 前列腺癌 CTCs ≥5细胞 结肠癌：CTCs ≥3细胞 表明预后不良 3. 目前FDA只批准用于以上三种肿瘤
• 循环肿瘤细胞 （CTC） • 循环肿瘤DNA（ctDNA） • 肿瘤外泌体 exosome
• 提示肿瘤发展进程及抗 药性等信息，指导个体 化精准治疗