螺旋体属
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医学微生物学螺旋体
01
密螺旋体抗原试验
02
Nichols株螺旋体（抗原）→螺旋体特异抗体
03
优点：特异性强，可用作梅毒确诊试验
04
常用方法：
05
梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）
06
荧光密螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）、
07
梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）、
08
梅毒螺旋体微量血凝试验（MHA-TP）
09
ELISA
苍白亚种：人类梅毒(syphilis) 地方亚种：地方性梅毒 极细亚种：雅司病
苍白密螺旋体 品他密螺旋体
品他病
分为致病与非致病两大类，对人致病的有：
梅毒螺旋体 （Treponema pallidum，TP)
生物学性状
形态与染色 螺旋体细长，形似细密的弹簧，螺旋弯曲而规则，8~14个，两端尖直，运动活泼 G-，因其透明，不易着色，故又称苍白螺旋体 Fontana镀银染色法→染成棕褐色
微生物学检查法
标本: 发病一周内取血液; 第二周后取尿液; 有脑膜刺激者取脑脊液
Байду номын сангаас
分离培养与鉴定:Korthof培养基培养，MAT和AAT
分子生物学方法：PCR
1.病原体检测
直接镜检：暗视野或镀银染色
动物接种：幼龄豚鼠或金地鼠腹腔
2.血清学检测
病初和发病后2~3周各采血清一次
不耐热，60℃10分钟即死亡
对常用消毒剂敏感
对青霉素敏感
夏季在湿土或中性水中可存活数月
4.抵抗力－弱
内毒素样物质(ELS)：毒性低，引起发热， 炎症与组织坏死
黏附素：
溶血毒素：鞘磷脂酶C，引起红细胞破坏
胶原酶： 致病物质---类似细菌内毒素与外毒素
螺旋体
螺旋体的科和属
螺旋体 引起人类疾病 病原体 螺旋体科 脊膜螺旋体属(Cristispira) 脊膜螺旋体属 不 － 蛇形螺旋体属(Serpulina) 蛇形螺旋体属 不 － 螺旋体属(Spirochaeta) 螺旋体属 不 － 密螺旋体属(Treponema) 密螺旋体属 梅毒 苍白密螺旋体苍白亚 种 地方性梅毒 苍白密螺旋体地方亚种 雅司 苍白密螺旋体极细亚种 品他病 品他密螺旋体 疏螺旋体属(Borrelia) 疏螺旋体属 流行性回归热 回归热疏螺旋体 地方性回归热 许多种 伯氏疏螺旋体， 莱姆病 伯氏疏螺旋体，伽氏疏 螺旋体， 螺旋体，埃氏疏螺旋体 钩端螺旋体科 细丝体属(Leptonema) 细丝体属 不 － 钩端螺旋体属(Leptospira) 钩端螺旋体病 钩端螺旋体属 问号状钩端螺旋体
•临床表现 临床表现
•疾病特点 疾病特点
•免疫性 免疫性
疾病后可获得抗同型钩体的持久免疫力， 疾病后可获得抗同型钩体的持久免疫力，
细胞免疫为主 细胞免疫为主
三、微生物学检查法
1.病原体检测 病原体检测
发病10天内取血液 周后取尿液 发病 天内取血液;1周后取尿液 有脑膜刺激者取脑脊液 天内取血液 周后取尿液;有脑膜刺激者取脑脊液 • 直接镜检 • 分离与鉴定 接种至Korthof培养基，置28℃孵育。 接种至Korthof培养基， 28℃孵育。 Korthof培养基 阳性标本在2周内可见培养液呈轻度混浊→ 阳性标本在2周内可见培养液呈轻度混浊→暗视野显微 镜检查→有→则用已知诊断血清鉴定其血清群和血清型。 镜检查→ 则用已知诊断血清鉴定其血清群和血清型。 阴性标本:分离培养应连续观察4个月，仍无生长者。 阴性标本:分离培养应连续观察4个月，仍无生长者。 •动物接种 敏感方法，尤适于有杂菌污染的标本。 动物接种 敏感方法，尤适于有杂菌污染的标本。 将标本接种于幼龄豚鼠或金地鼠腹腔, 5 将标本接种于幼龄豚鼠或金地鼠腹腔,3~5d后，用暗视 野显微镜检查腹腔液； 野显微镜检查腹腔液；或3~6d取心血检查并作分离培养。 6 取心血检查并作分离培养。 •分子生物学方法 分子生物学方法
螺旋体详细介绍
螺旋体螺旋体（spirochete）是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物。
在生物学位置上介于细菌与原虫之间。
螺旋体在自然界中分布广泛，常见于水、土壤及腐败的有机物上，亦有的存在人体口腔或动物体内。
对人致病的主要有3个属：①钩端螺旋体属：对人致病的主要是钩端螺旋体；②密螺旋体属：对人致病的主要有梅毒螺旋体等；③疏螺旋体属：对人致病的主要有回归热螺旋体等。
其中钩端螺旋体和梅毒螺旋体在临床上的影响较大。
生物学形状1.形态与结构螺旋体较细，由螺旋形的柱形原生质体、内鞭毛和外膜构成。
直径一般为0.1～0.3微米，长短不一，呈螺旋状，但钩端螺旋体呈C或S形。
螺旋体革兰染色阴性，但不易着色，故常用Fontana镀银染色法。
2.培养特性各种螺旋体在生理上的需求不一样，能量来源于糖类、氨基酸和长链脂肪酸类等。
3.抗原成分大部分螺旋体的抗原成分主要有外膜蛋白和内鞭毛抗原，其他抗原成分因菌而异。
4.抵抗力螺旋体的抵抗力较弱，但钩端螺旋体的抵抗力强于梅毒螺旋体。
致病性螺旋体的致病机制尚不明了。
不同的螺旋体通过不同的致病物质和机制而致病。
钩端螺旋体致病可能与其具有溶解红细胞的溶血素、细胞毒因子及内毒素样物质有关。
梅毒螺旋体的致病机制与其表面夹膜样物质的黏附作用及其分泌的黏多糖酶作用有关。
免疫性螺旋体的免疫性质多以体液免疫为主。
钩端螺旋体病痊愈后可获得对同型钩体的持久体液免疫。
梅毒螺旋体的免疫是传染性免疫，受染机体产生的特异性抗体可介导杀死或溶解梅毒螺旋体。
防治原则螺旋体的治疗原则是选用敏感的抗生素治疗。
预防可注射疫苗进行特异性预防，同时加强教育和管理。
微生物学总结11四体
殊；革兰染色阴性，Giemsa染色，呈淡紫色无细胞壁，三层膜结构，脂膜含固醇部分支原体有顶端结构4 生长慢，菌落小菌落稍大
5 液体培养混浊度极低液体培养有一定混浊度
BY通站路20班
顶端结构部分支原体的特殊结构，形似烧瓶状，具有粘附呼吸道或泌尿生殖道上皮细胞表面神经氨酸受体的作用，称为粘附素，与支原体的致病性有关。
中间的脂膜含胆固醇，故作用于固醇的两性霉素、皂素及洋地黄苷对其有显著杀灭作用；对青霉素等耐药；对干扰蛋白质合成的抗生素如四环素、红霉素等敏感。
欢迎下载 3。
第二十章 螺旋体
第二十章螺旋体螺旋体是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、运动活泼的单细胞型微生物。
在生物学上的位置介于细菌与原虫之间。
它与细菌的相似之处是：具有与细菌相似的细胞壁，内含脂多糖和胞壁酸，以二分裂方式繁殖，无定型核（属原核型细胞），对抗生素敏感；与原虫的相似之处有：体态柔软，胞壁与胞膜之间绕有弹性轴丝，借助它的屈曲和收缩能活泼运动，易被胆汁或胆盐溶解。
在分类学上由于更接近于细菌而归属在细菌的范畴。
螺旋体广泛分布在自然界和动物体内，种类很多，有的有致病性，有的无致病性。
根据螺旋的数目、大小和规则程度及两螺旋间的距离分为三科五属，其中对人有致病性的有三个属。
1．疏螺旋体属（Borrelia）：有5～10个稀疏而不规则的螺旋，其中对人致病的有回归热螺旋体及奋森氏螺旋体，前者引起回归热，后者常与棱形杆菌共生，共同引起咽峡炎，溃疡性口腔炎等。
2．密螺旋体属(Treponema)：有8～14个较细密而规则的螺旋，对人有致病的主要是梅毒螺旋体、雅司螺旋体、品他螺旋体，后二亦通过接触传播但不是性病。
3．钩端螺旋体属(Leptospira)：螺旋数目较多，螺旋较密，比密螺旋体更细密而规则，菌体一端或两端弯曲呈钩状，本属中有一部分能引起人及动物的钩端螺旋体病。
第一节密螺旋体属一、苍白密螺旋体苍白亚种俗称梅毒螺旋体（Treponema Pallidun）是梅毒的病原体。
梅毒是一种广泛流行的性病，近几年在我国发病率又有所回升。
（一）生物学特性1、形态与染色梅毒螺旋体细长，5～15×0.1～0.2um，形似细密的弹簧，螺旋弯曲规则，平均8～14个，两端尖直。
电镜下显示梅毒螺旋体结构复杂，从外向内分为：外膜（主要由蛋白质、糖及类脂组成）、轴丝（主要由蛋白质组成）、圆柱形菌体（包括细胞壁、细胞膜及胞浆内容物）。
革兰染色阴性，但不易着色。
Fontana镀银染色法可将螺旋体染成棕褐色，在光镜下易查见。
2、培养梅毒螺旋体不能在无活细胞的人工培养基中生长繁殖。
螺旋体
Fontana镀银染色法
（一）生物学性状
2、培养特性
不能再无生命培养基培养；棉尾兔单层细胞培养（33℃） 主要:Nichols株（有毒株）和Reiter株（无毒株）
Nichols株
转种
在家兔睾丸和眼 前房内繁殖并保 持毒力，30～ 33h/次
含多种氨基酸 的兔睾丸组织 碎片中
厌氧 Reiter株
能生长， 但失去致病力
5 ～ 7d 半透明云雾状生长 （液面1cm的部位最丰富）
固体培养基：2周左右，透明、 不规则、扁平细小的菌落。
抵 抗 力
• 在中性湿土或水中可存活数月，在传播上有
重要意义。
• 耐冷：
• 不耐热： 56℃10min， 60℃1min即可杀死
• 常用消毒剂敏感：0.5%来苏、0.1%石碳酸、 1%漂白粉，10 ～ 30min即可杀死 • 对青霉素、四环素类抗生素敏感
（二）致病性
1、致病物质
内毒素样物质（ELS）
溶血素：类似磷脂酶作用。 细胞毒性因子（cytoxicity factor，CTF）
（二）致病性
2、所致疾病
钩端螺旋体病一种人畜共患传染病
•储存宿主：鼠和猪
•传播途径：人与污染水或土壤接触,经粘膜或皮肤进入 （主要途径） 尿 损伤的皮肤或粘膜 带菌动物 污染环境（水、土壤） 消化道 钩体血症
（一）生物学性状
形态与染色：
6~20×0.1~0.2m，螺旋细 密、规则，形似细小珍珠排列的 细链。
镀银染色：
螺旋体棕褐色，细长 ，弯曲， 一端或两端呈钩状，常呈C、S 形等。
暗视野镜检观察动力：
运动活泼、呈卷曲、翻筋斗
培养特性
为唯一能在人工培养基上培养的致病性螺旋体 需氧或微需氧,Korthof （柯索夫） 培养基，28℃， Ph7.2 ～ 7.4 ，
螺旋体
切 断 动物尿液污染水源和土壤 传 播 途 径
流感伤寒型 黄疸出血型
肺出血型
青霉素治疗病人
人接触疫水和疫土， 钩体经皮肤或粘膜进入人体致病
对易感人群接种死疫苗
Treponema pallidum:梅毒螺旋体
1. 引起梅毒syphilis（STD之一） 2. 人是惟一传染源，在人与人之间有效传播
水平传播（性接触、血液），垂直传播（母婴传播）
柯氏（Korthof）培养基 在水或湿土中能存活数月
体外培养困难，兔睾丸接种 可保持其繁殖与毒力
极弱！ 对冷、热和干燥敏感
暗视野显微镜下
钩端螺旋体
苍白密螺旋体
钩端螺旋体病(钩体病)是人畜共患病
鼠类和家猪是传染源， 多呈带菌状态
消灭传染源 对同型钩体有较持久免疫力
包柔螺旋体属：5~10个稀疏不规则螺纹 回归热和莱姆病
Comparison of leptospira and treponema pallidum
生物学性状 钩端螺旋体
苍白密螺旋体
分类
钩端螺旋体属
密螺旋体属
形态 染色 运动器官 培养特性 抵抗力
Hale Waihona Puke 密螺纹，一端或两端呈钩状 螺旋致密，细长，两端尖细
Fontana镀银染色 内鞭毛（轴丝）
物
梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)
学
检
荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA–ABS)
查
3. PCR检测病原体基因
法
防治原则
✓ 尚无疫苗！ ✓ 加强卫生宣传和社会管理 ✓ 避免经性接触而感染 ✓ 病人应早诊断及彻底治疗 ✓ 治疗多用青霉素且剂量要足
Summary
• 螺旋体(spirochaetes)的概念与分类 • 钩端螺旋体(leptospira )所致疾病 • 梅毒螺旋体(treponema pallidum)致病特征 • 梅毒螺旋体的初筛与确证试验 • 梅毒的预防与治疗
螺旋体
CD C/N CID/Rob W eyant rsw2@ cdc.go v
[培养特性] 培养特性]
易人工培养，但生长缓慢，需氧， 易人工培养，但生长缓慢，需氧，营养要求 严格。 28oC7.2严格。温度 28oC-30oC , PH 7.2-7.4 常用Korthof液体培养基（ 10%兔血清或牛 Korthof液体培养基 常用Korthof液体培养基（含10%兔血清或牛 血清） 血清） （1～2周）半透明、云雾状混浊 周 半透明、 固体培养基（ 扁平、透明、 固体培养基（1～3周）：扁平、透明、细小 周 圆形菌落 半固体培养基（ 半固体培养基（3～10天） ：针尖样大小的 天 半圆形菌落
Ⅱ期梅毒：感染性强，破坏性小 期梅毒：感染性强，
发生于硬下疳出现后2 8 苍白亚种螺旋体血症 螺旋体血症， 发生于硬下疳出现后2~8周。苍白亚种螺旋体血症，全身 皮肤、粘膜常有梅毒疹，全身淋巴结肿大，有时亦累及骨、 皮肤、粘膜常有梅毒疹，全身淋巴结肿大，有时亦累及骨、 关节、眼及其他脏器。 关节、眼及其他脏器。
Ⅱ期梅毒
Ⅱ期梅毒
晚期)梅毒 Ⅲ期(晚期 梅毒 晚期
先天性梅毒（胎传梅毒） •多发生于妊娠4个月之后。 •引起胎儿的全身性感染，导致流产、早产 或死胎； •出生梅毒儿，呈现马鞍鼻、锯齿形牙、间 质性角膜炎、先天性耳聋等特殊体征。
（三）、微生物学检查法
1.标本
•Ⅰ期梅毒----硬下疳渗出液 •Ⅱ期梅毒----梅毒疹渗出液或局部淋巴结抽出液
•
[形态与染色]
体态细长，呈圆柱形，螺旋细密（55 15um 长，0.1-0.2um宽）、规则、数量多，在光 长，0.1-0.2um宽） 学显微镜下很难看清螺旋。在暗视野显微镜下， 似细小珍珠排列的细链，运动活泼。 一端/两端钩状，菌体成8、S或C形 G-, Fontana镀银染色,染成棕褐色
[培养特性] 培养特性]
易人工培养，但生长缓慢，需氧， 易人工培养，但生长缓慢，需氧，营养要求 严格。 28oC7.2严格。温度 28oC-30oC , PH 7.2-7.4 常用Korthof液体培养基（ 10%兔血清或牛 Korthof液体培养基 常用Korthof液体培养基（含10%兔血清或牛 血清） 血清） （1～2周）半透明、云雾状混浊 周 半透明、 固体培养基（ 扁平、透明、 固体培养基（1～3周）：扁平、透明、细小 周 圆形菌落 半固体培养基（ 半固体培养基（3～10天） ：针尖样大小的 天 半圆形菌落
Ⅱ期梅毒：感染性强，破坏性小 期梅毒：感染性强，
发生于硬下疳出现后2 8 苍白亚种螺旋体血症 螺旋体血症， 发生于硬下疳出现后2~8周。苍白亚种螺旋体血症，全身 皮肤、粘膜常有梅毒疹，全身淋巴结肿大，有时亦累及骨、 皮肤、粘膜常有梅毒疹，全身淋巴结肿大，有时亦累及骨、 关节、眼及其他脏器。 关节、眼及其他脏器。
Ⅱ期梅毒
Ⅱ期梅毒
晚期)梅毒 Ⅲ期(晚期 梅毒 晚期
先天性梅毒（胎传梅毒） •多发生于妊娠4个月之后。 •引起胎儿的全身性感染，导致流产、早产 或死胎； •出生梅毒儿，呈现马鞍鼻、锯齿形牙、间 质性角膜炎、先天性耳聋等特殊体征。
（三）、微生物学检查法
1.标本
•Ⅰ期梅毒----硬下疳渗出液 •Ⅱ期梅毒----梅毒疹渗出液或局部淋巴结抽出液
•
[形态与染色]
体态细长，呈圆柱形，螺旋细密（55 15um 长，0.1-0.2um宽）、规则、数量多，在光 长，0.1-0.2um宽） 学显微镜下很难看清螺旋。在暗视野显微镜下， 似细小珍珠排列的细链，运动活泼。 一端/两端钩状，菌体成8、S或C形 G-, Fontana镀银染色,染成棕褐色
螺旋体
先形成钩体血症，损伤全身毛细血管内皮 细胞及肝、肾、肺心及中枢神经，出现休
克、 DIC 、黄疸、出血、心肾功能不全、
脑膜炎等。
免疫性
体液免疫为主，病后获得对同型钩体的持久免疫
力。
五、防治原则
防鼠、灭鼠，加强对带菌家畜的管理 接种多价钩体疫苗： 在常年流行地区，对易感人群和与疫水接触者 宜接种包含当地流行株在内的多价钩端螺旋体 疫苗。 治疗： 青霉素首选，注意赫氏反应。
致病螺旋体的分类
属和代表菌 引起人类疾病 传播方式或媒介
密螺旋体属（Treponema） 苍白密螺旋体苍白亚种 梅毒 苍白密螺旋体地方亚种 地方性梅毒 苍白密螺旋体极细亚种 雅司病 品他密螺旋体 品他病 疏螺旋体属（Borrelia） 伯氏疏螺旋体 莱姆病 回归热疏螺旋体 流行性回归热 杜通疏螺旋体 地方性回归热 奋森疏螺旋体 咽峡炎、牙龈炎 钩端螺旋体属（Leptospira） 问号状钩端螺旋体 钩端螺旋体病
钩 端 螺 旋 体 镀 银 染 色
一、生物学性状
（二）培养特性
♣营养要求复杂，常用柯索夫培养基 ♣需氧或微需氧；
♣ 在人工培养基中生长缓慢。
一、生物学性状
（五）抵抗力
♣对热抵抗力弱，60℃ 1min即死亡。0.2% 甲酚皂、1%苯酚经10～30min被杀灭
♣ 对青霉素敏感。
♣ 在湿土或水中可存活数月。
二、流行环节
钩体病——人兽共患病 储存宿主——黑线姬鼠、猪、牛 主要传播方式——接触疫水 流行季节——夏秋季 地区性：三多－鼠、猪、水 职业性：农民、矿工、饲养员
三、致病性与免疫性
（一）致病物质
1.粘附素——帮助定植
2.内毒素——主要致病物质
3.溶血素——溶解人等的红细胞
医学微生物学：螺旋体
致病性与免疫性
荚膜样物质
唾液酸或黏多 糖，抗吞噬， 阻碍抗体穿透
致病物质
黏附因子
黏附
透明质酸酶
免疫病理损伤
分解透明质酸， 利于扩散并造成 病理损伤
坏死、溃疡
“膜 酸 黏 免”
传染源及传播途径
人是梅毒唯一传染源
先天梅毒
孕妇借血行通过胎盘传染胎儿 流产、死胎
早期先天性梅毒：肝脾肿大、皮疹、黄疸、慢性鼻炎、 脑膜炎、间质性肺炎、肺脓肿、白内障、脑积水
血清学 显微镜凝集实验：标准株抗原＋待检血清
孵育 暗视野显微镜观察 玻片凝集实验：灭活双曲钩端螺旋体
间接凝集实验：抗原吸附于载体上
防治方法
防鼠、灭鼠 保护水源，加强带菌家畜管理 多价死疫苗
青霉素 赫氏反应 庆大霉素 多西环素
送瘟神
读六月三十日人民日报，余江县消灭了血吸虫。浮想联翩， 夜不能寐。微 风拂煦，旭日临窗。遥望南天，欣然命笔。---毛泽东 1958年7月1日
绿水青山枉自多，华佗无奈小虫何！ 千村薜荔人遗矢，万户萧疏鬼唱歌。 坐地日行八万里，巡天遥看一千河。 牛郎欲问瘟神事，一样悲欢逐逝波。
春风杨柳万千条，六亿神州尽舜尧。 红雨随心翻作浪，青山着意化为桥。 天连五岭银锄落，地动三河铁臂摇。 借问瘟君欲何往，纸船明烛照天烧。
2500000
1955～1993年全国钩体病疫情
营养要求高，培养 基含兔血清、脂肪 酸、氨基酸等；
微需氧，生长缓慢， 代时18h。
致病性与免疫性 储存宿主
鼠、兔、狼、蜥蜴、麝、鹿、鸟类 狗、马、牛 黑线姬鼠 华南兔
传播媒介： 蜱（tick）
美国：肩突硬蜱、太平洋硬蜱 欧洲：蓖子硬蜱 我国：全沟硬蜱、粒形硬蜱
医学微生物学课件-第17章螺旋体
病原学检查
下疳渗出液 梅疹液 淋巴结抽取液 暗视野观察 镀银染色 免疫荧光
第三节 疏螺旋体
பைடு நூலகம்
有 3-10个稀疏而不规则的螺旋，呈波浪状
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伯氏疏螺旋体
G—（不易着色），常用Giemsa染色，螺旋疏松，运动活泼 可进行人工培养，但营养要求较高，生长缓慢
莱姆病的传播媒介
三、微生物学检查和防治
血清学检查及分子生物学诊断技术
加强防护，防止硬蜱叮咬
人用疫苗仍在研制中。
回归热螺旋体
回归热是多种疏螺旋体引起的疾病 虱传回归热（流行性回归热）—回归热疏螺旋体 蜱传回归热（地方性回归热）—其他15种疏螺旋体 急起急退的高热，反复发作，肌肉酸痛， 黄疸、肝脾肿大、出血倾向等 体液免疫为主 高热期涂血片查螺旋体
生物学性状
第一节 钩端螺旋体
二、致病性与免疫性
致病物质 内毒素样物质 溶血素 细胞毒性因子 致细胞病变物质
所致疾病 ——钩端螺旋体病（钩体病）
尿排菌
传播方式
鼠、猪（储存宿主）——传染源 肾脏繁殖（隐性感染） 污染水源、土壤 人接触感染（皮肤、黏膜、眼结膜、垂直）——途径
病程 血管损伤期 4-10天
7-10天
受损器官不同
菌血症
轻：类似上感，自限 重：黄疸、出血、休克、死亡
恢复期
肺出血期 流感伤寒型 黄疸出血型 肾功衰竭型
潜伏期
轻重不一
第二节 密螺旋体属——梅毒螺旋体
又称苍白密螺旋体——梅毒的病原体（STD之一） 生物学性状 菌体细长，螺旋致密规则，两端尖直，8-14个螺旋，镀银染色褐色，运动活泼（暗视野） 人工培氧不成功 抵抗力极弱（温度、干燥），抗生素敏感
螺旋体
三、微生物检验
（一）检验程序
（二）标本采集 1.标本： 10天内取血液；1周后取尿液。
（三）标本直接检查
直接镜检：暗视野观察；Fontana镀银染色：
棕褐色
核酸检测：特异DNA探针法、PCR
（四）分离培养分离与鉴定： 血液尿液培养 接种于Korthof培养基中，培养后 作暗视野检查。 （五）抗体检测
3、G-，但不易着色。Fontana镀银染色呈棕褐色。
4、在无活细胞的人工培养基中难培养，生长慢。
5、抵抗力极弱，对温度和干燥特别敏感；对青霉 素、四环素、红霉素等抗生素敏感。
梅毒螺旋体 （密螺旋）
菌体柔软，用于运动的类似鞭毛的轴丝位于细胞外鞘内
梅毒密螺旋体
Histology: Treponema pallidum- testis infected rabbit
二、生物学特性
螺旋细密、规则，一端或两端呈钩状； 有两根周浆鞭毛，运动活泼；
G-，但不易着色，Fontana镀银染色成棕褐色。
营养要求高，需氧或微需氧，常用Korthof培养 基，生长缓慢；最适温度28~30℃。
在水及土壤中可存活数天至数月；对青霉素敏感
基因组
抗原构造
根据属特异性抗原、群特异性抗原、型特异性抗原分类
第十八章
汪正清
螺旋体
螺旋体（spirochete)：是一种细长、柔软、 螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物。在 分类学上的地位介于细菌与原虫之间。
第一节 分类与命名
致病性螺旋体主要有下述3个属：
1．钩端螺旋体属（leptospira）
2．疏螺旋体属（Borrelia）
3．密螺旋体属（Treponema）
第二节 钩端螺旋体
微生物学 螺旋体(口腔)
30h才分裂一代，在含3%~4%氧时生长最佳。
Nichols株: 在家兔睾丸或眼前房内接种可获得,有毒力。 Reiter株: 转种于含有多种氨基酸的兔睾丸碎片，厌氧培养,失去致病 力。 用作多种梅毒血清诊断的抗原
3.抵抗力 抵抗力极弱。对温度和干燥特别敏感。对常用化学消毒剂 敏感，对青霉素、四环素、红霉素敏感。
阳性率：一期：53％～82.9％ 二期：100％ 三期：较低
假阳性（因抗原为非特异），作为筛选
（2）密螺旋体抗原试验： 检测血清中的螺旋体特异性抗体。有FTA-ABS试验和MHATP试验。 FTA-ABS试验（荧光密螺旋体抗体吸附） 荧光素标记的抗人IgG抗体与血清中的密螺旋体抗体结合。 MHA-TP试验（梅毒螺旋体血凝试验） 间接血凝试验，效价在1:80以上为阳性。 ＴＰＩ(梅毒螺旋体制动试验):
• 钩端螺旋体属可分为问号钩端螺旋体和双曲钩端螺旋体两个 种, 前者引起人或动物的钩端螺旋体病, 后者一般为无致病性 的腐生性微生物。
（一）、生物学性状
1、形态与染色 大小0.1~0.2×6~12um。螺旋细密、规则， 细链状。一端或两端呈钩状。运动活泼，常使菌体呈C、S 或8字形。
钩端螺旋体的基本结构由外至内分别 为外膜、内鞭毛和原生质体。 内鞭毛 缠绕在原生质体表面, 具有与细菌鞭毛 相似的功能。
(四) 微生物学检查 由于伯氏疏螺旋体在莱姆病的整个病程中数量 较少, 主要依靠血清学和分子生物学来诊断。
移行性红斑
回归热疏螺旋体
回归热是多种螺旋体引起的疾病. 其临床 特点是急起急退的高热, 全身肌肉酸痛, 一次或多次复发, 肝﹑脾肿大, 重症可出 现黄疸和出血倾向.
致病性 回归热 免疫性 特异性抗体是清除回归热疏螺旋 体的主要机制
Nichols株: 在家兔睾丸或眼前房内接种可获得,有毒力。 Reiter株: 转种于含有多种氨基酸的兔睾丸碎片，厌氧培养,失去致病 力。 用作多种梅毒血清诊断的抗原
3.抵抗力 抵抗力极弱。对温度和干燥特别敏感。对常用化学消毒剂 敏感，对青霉素、四环素、红霉素敏感。
阳性率：一期：53％～82.9％ 二期：100％ 三期：较低
假阳性（因抗原为非特异），作为筛选
（2）密螺旋体抗原试验： 检测血清中的螺旋体特异性抗体。有FTA-ABS试验和MHATP试验。 FTA-ABS试验（荧光密螺旋体抗体吸附） 荧光素标记的抗人IgG抗体与血清中的密螺旋体抗体结合。 MHA-TP试验（梅毒螺旋体血凝试验） 间接血凝试验，效价在1:80以上为阳性。 ＴＰＩ(梅毒螺旋体制动试验):
• 钩端螺旋体属可分为问号钩端螺旋体和双曲钩端螺旋体两个 种, 前者引起人或动物的钩端螺旋体病, 后者一般为无致病性 的腐生性微生物。
（一）、生物学性状
1、形态与染色 大小0.1~0.2×6~12um。螺旋细密、规则， 细链状。一端或两端呈钩状。运动活泼，常使菌体呈C、S 或8字形。
钩端螺旋体的基本结构由外至内分别 为外膜、内鞭毛和原生质体。 内鞭毛 缠绕在原生质体表面, 具有与细菌鞭毛 相似的功能。
(四) 微生物学检查 由于伯氏疏螺旋体在莱姆病的整个病程中数量 较少, 主要依靠血清学和分子生物学来诊断。
移行性红斑
回归热疏螺旋体
回归热是多种螺旋体引起的疾病. 其临床 特点是急起急退的高热, 全身肌肉酸痛, 一次或多次复发, 肝﹑脾肿大, 重症可出 现黄疸和出血倾向.
致病性 回归热 免疫性 特异性抗体是清除回归热疏螺旋 体的主要机制
螺旋体
2).核酸检测: 用PCR技术直接检测临床标本中梅毒
螺旋体的特异性DNA片段，用于检测的引物和探针
是编码外膜蛋白4．7kD的基因，其扩增产物经斑
点印迹，或电泳以Southern 印迹法鉴定。
密螺旋体属
3) 抗体检测:
a.非密螺旋体抗原试验
多用牛心肌的心脂质作为抗原，测定病人血
清中的反应素。初期梅毒病灶出现后1-2周 时， 阳性率为53％～83％，二期梅毒的阳性率可达100 ％，晚期梅毒的阳性率58％-85％，胎传梅毒的阳 性率为80％- 100％。
②细胞屈曲伸缩前进；
③螺旋状或蛇状前进。
5. 抵抗力
螺旋体的抵抗力弱，干燥， 日光，煮沸，低浓度的化学 消毒剂均可很快使其死亡。
6. 分类
螺旋体目: 下分为两个科，即螺旋体科和细螺旋体科。
细螺旋体科: 只有一个属，即细螺旋体属（钩端螺旋 体属）。
螺旋体科: 由螺旋体属、脊螺旋体属、密螺旋体属、 疏螺旋体属和蛇形螺旋体属五个属组成。 与兽医有关的主要有疏螺旋体属、密螺旋体属、蛇形 螺旋体属和细螺旋体属。
革兰氏染色阴性。镀银染色法和刚果红负染较好。用 暗视野显微镜较易观察其形态和运动力。
细螺旋体属
2. 培养及生化特性
需氧，对营养要求不高，较易人工培养。 在含血清和蛋白胨的培养基上生长良好。 钩体某些菌株能产生溶血素。
细螺旋体属
3. 抵抗力
钩体pH中性湿土和水中可存活数月，该病主 要经水源传播。对热和酸碱环境抵抗弱， 45℃30min，50℃10min，60℃10s即可致死。 4℃冰箱中可存活1-2周，-70℃可保存2年多。 对各种化学消毒剂和青霉素、金霉素、四环素 等抗生素敏感性。
螺旋体
二. 致病性：仅感染人类 先天性梅毒
（垂直传播）
Байду номын сангаас
早期梅毒，传 染性强但破坏 性小
获得性梅毒
（性传播）
I期，II期 III期
晚期梅毒，传染 性小但破坏性大
三.免疫性
传染性免疫，CMI为主
四.微生物学检查 1.梅毒螺旋体检测(暗视野显微镜） ------------适用于一、二期梅毒
硬下疳或梅毒疹渗出液 淋巴结抽出液
螺旋体 （spirochete）
分类： 疏螺旋体属：回归热螺旋体、伯氏疏螺旋体、
体 奋森氏螺旋
密螺旋体属： 梅毒螺旋体、雅司螺旋体 钩端螺旋体属：钩端螺旋体
钩端螺旋体
一. 生物学性状 （一）形态结构 一、 观察钩体常用的方法 １. 暗视野显微镜检查 ２. 镀银染色法 ３. 电镜观察：外膜+内鞭毛+菌体
（二）培养特性 1. 柯氏(Korthof)培养基: 兔血清 2. 液体培养基:生长慢，1-2周出现云雾浑浊 。
（三）抗原结构与分类
表面抗原：型特异性蛋白抗原 内部抗原：属与群特异性抗原
（四）抵抗力: 非常弱
二. 致病性和免疫性 （一）流行病学：人兽共患病 传染源 传播途径 易感人群
野外工作者
感染的动物 接触传播 （幼猪、鼠） （水、土壤） （二）所致疾病 钩端螺旋体病
确证实验
Ⅲ期(晚期)梅毒:发生于感染2年以后，多个器官、
组织病变。动脉瘤、脊髓痨。
2. 血清学诊断
用凝集反应检测梅毒患者体内两种抗体：
非特异性抗体 （反应素）
用非TP-Ag (牛心肌脂质)
抗梅毒螺旋体特异性抗体
TP-Ag 间接荧光法
VDRL，RPR
环境微生物之螺旋体
（五）钩端螺旋体
• 基本结构：由外向内为外膜、两根内鞭毛 （六种不同蛋白组成）和柱形原生质体 • 革兰染色阴性，不易着色；常用镀银染色， 呈棕褐色 基因组：有大小 两条染色体 抵抗力：较弱， 耐冷不耐热， 对消毒剂和 抗生素素敏感
（六）梅毒螺旋体
• 1、形态：菌体纤细，螺旋细而规则，两端 尖直，有3~4根内鞭毛，运动活泼。镀银染 色呈棕褐色。
（四）分类
• 螺旋体广泛分布在自 然界和动物体内，分5 个属：包柔氏螺旋体 属（又名疏螺旋体 属），密螺旋体属， 钩端螺旋体属，脊螺 旋体属，螺旋体属。 前三属中有引起人患 回归热、梅毒、钩端 螺旋体病的致病菌， 后二属不致病。
• 1、疏螺旋体属：有3~10 个稀疏而不规则螺旋，如 伯氏S、回归热S、奋森氏 S(正常菌群)等。前者引起 回归热，后者常与棱形杆 菌共生，共同引起咽峡炎， 溃疡性口腔炎等。 • 2、密螺旋体属：有8~14 个细、密、规则的螺旋， 如梅毒S、雅司S、品他S， 后二亦通过接触传播但不 是性病。 • 3、钩端螺旋体属：螺旋 数目较多，螺旋较密，比 密螺旋体更细密而规则。 菌体一端或两端弯曲成钩 状，如问号钩端S。
四、螺旋体
螺旋体隶属于螺旋体门（BXⅦ门）螺旋体纲螺旋 体目，有3科13属，是形态运动机理独特的细菌。菌体 宽度0.1~0.5μ m，长度有3~20μ m，有的长达500μ m。 螺旋体(Spirochaeta)是细长、柔软、弯曲呈螺旋 状的运动活泼的单细胞原核生物。全长3 ～500 微米， 具有细菌细胞的所有内部结构。在生物学上的位置介 于细菌与原虫之间，螺旋体广泛分布在自然界和动物 体内。
• 用暗视野显微镜观察含活菌的新鲜标本， 可看到运动活泼的螺旋体。 • 运动类型有三种：绕螺旋体的长轴迅速转 动、细胞屈曲运动以及沿着螺旋形或盘旋 的线路移动。 • 繁殖方式：纵裂。 • 化能异养；好氧、兼性厌氧或厌氧；自由 生活、共栖或寄生，有些种是致病菌。
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临床特点
起病急，高热、乏力、全身酸痛、结膜充血、 腓肠肌压痛、表浅淋巴结肿大；
三大症状：寒热、身痛、一身乏； 三大体征：眼红、腿疼、淋巴大。
免疫性
可获得持久免疫力(对同型)，体液免疫为主。 特异性抗体( 1～2周)：调理，吞噬增强
血流中：被清除 肾脏内：不易被清除 尿中排菌：数周、数月、数年
三、微生物学检查
季节性（夏秋）：雨水型——家畜 稻田型——鼠 洪水型——家畜、鼠
地区性：三多——鼠、猪、水 职业性：农民、矿工、饲养员
致病物质
1.黏附素 2.溶血素 3.细胞毒因子 4.内毒素样物质
传播途径
人与污染水或土壤接触 ♦黏膜或皮肤侵入 ♦消化道黏膜（污染食物/饮水）
所致疾病
钩端螺旋体病： 先形成钩体血症，损伤全身毛细血管内皮细胞及 肝、肾、肺、心及中枢神经，出现休克、DIC、黄疸、 出血、心肾功能不全、脑膜炎等。
(主动脉瘤、主动脉炎、脊髓结核等) * 不易检出螺旋体，传染性小；
病程长，破坏性大，可危及生命。
先天性梅毒：易致流产、早产或死胎；也可致先天畸形。 常呈锯齿形牙、间质性角膜炎、神经性耳聋 等症状。
输血后梅毒：第二期梅毒症状。
免疫性
传染免疫(有感染时才有免疫力)： 细胞免疫：主要 体液免疫：抗体 (1)抗梅毒螺旋体抗体： (2)抗心肌磷脂抗体：反应素(reagin)，能与生物 组织中的类脂抗原（如牛心肌）发生非特异性结合反 应，无防御作用，用于血清学诊断。
轴丝：运动器官 染色：Giemsa法:红色；镀银染色法:棕褐色 观察：暗视野法(形态,运动)
培养
Nichols株(Nichols strain)： 有毒力； 在家兔睾丸或眼前房内接种可获得。
Reiter株(Reiter strain)： 失去致病力。 转种于含有多种氨基酸的兔睾丸碎片组织中。 厌氧培养。
课程目标
2.熟悉
钩端螺旋体 的致病性与 免疫性；梅 毒螺旋体生 物学特性、 微生物学检 查。
1.掌握
钩端螺旋体 生物学性状、 微生物学检 查。
3.了解
回归热螺旋 体生物学性 状、微生物 学检查；伯 氏疏螺旋体 致病性。
概述
螺旋体特点： 细长、柔软、螺旋状、运动活泼； 轴丝是运动器官； 原核细胞型微生物； 基本结构与细菌相似，如有细胞壁、原始核质； 以二分裂方式繁殖； 对抗生素等药物敏感。
2.特异性试验：检测特异性抗体 （1）梅毒螺旋体血凝试验(TPHA) （2）梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA) （3）荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS) （4）梅毒螺旋体制动试验(TPl)
四、防治原则
预防：加强性安全教育； 严格社会管理。
治疗：尽早足量使用青霉素、多西环素、盐酸 四环素、红霉素；检查病人血清中抗体动态变 化。
检查螺旋体 取材：1周内：血
2周后：尿 脑膜刺激症状：脑脊液 检查方法： 1．直接镜检：暗视野法,镀银染色法； 2．分离培养与鉴定：Korthof培养基； 3．动物试验(接种) 豚鼠，金地鼠。
血清学诊断 病初和发病后第3～4周各采血清一次。 有脑膜刺激症状者采取脑脊液。 检测特异性抗体：
显微镜凝集试验（microscopic agglutination test, MAT） 间接凝集试验
*用作多种梅毒血清诊断的抗原。
抵抗力
* 抵抗力：极弱 * 湿热,干燥：特别敏感； * 体外迅速死亡； * 血液中的梅毒螺旋体4℃放置3天后失去感染性； * 砷、汞制剂和青霉素、红霉素、庆大霉素:敏感； * –78℃保存一年,有感染力。
二、致病性与免疫性
梅毒螺旋体：梅毒(syphilis)(STD) 传播途径：性接触——梅毒
第一节 钩端螺旋体属
-问号钩端螺旋体
引起钩端螺旋体病 -双曲钩端螺旋体 无致病性
一、生物学性状
形态与染色
*形态：细长、弯曲。 *螺旋细密、规则，一端或两端弯曲成钩状。 *染色：G—，但着色难，常用
镀银染色，棕褐色。
培养和化反应
*营养要求较高，常用Korthof培养基； 适宜温度：28～30℃。最适pH：7.2～7.6。
第二期(早期梅毒)： * 传染性强,损伤性较小； * 全身皮肤黏膜出现梅毒疹； * 淋巴结肿大； * 可侵犯骨、眼及中枢神经系统； * 产生抗体→不治疗→症状可在3周～3个月后消退。
早期梅毒：从硬性下疳至梅毒疹消失后一年之内。
二期梅毒（斑丘疹）
第三期(晚期梅毒)： * 二期3～4年后：慢性炎性损伤，即梅毒肉芽肿。 * 重者：10～15年后：心血管系统与中枢神经系统损害。
*需氧或微需氧； *生化反应不活泼。
抵抗力
*热，酸：抵抗力弱，60 ℃ 1min； *湿土或水中：存活6周以上（传播上有意义）。
分类
*按抗原结构分类：根据群和型特异性抗原分 血清群和血清型。
问号钩端螺旋体：25个血清群、200多个 血清型。
*按基因分类
二、致病性与免疫性
传播方式
人畜共患病； 传染源和储存宿主：啮齿类动物和家畜。
垂直传播——先天性梅毒 输血——输血后梅毒 梅毒：分为3期 (1)第一期：溃疡或无痛性硬下疳 (2)第二期：(早期梅毒) (3)第三期：(晚期梅毒)
第一期：传染性极强 侵入→3周左右→局部溃疡或无痛性硬性下疳→ 1个月后→自然愈合。
血中螺旋体经2 ～ 3个月潜伏期→第二期
包皮硬下疳
外阴硬下疳
上唇硬下疳
三、微生物学检查
病原学检查： Ⅰ期梅毒：硬性下疳 Ⅱ期梅毒：梅毒疹渗出液，局部淋巴结抽出液 方法：暗视野显微镜
直接免疫荧光 ELISA法 组织切片：镀银染色→镜检
血清学检查： 1.非特异性试验:检测反应素
抗原：正常牛心肌脂质（梅毒螺旋体不能人工培养，但和 正常牛心肌脂质有交叉抗原）
方法：（1）快速血浆反应素试验(RPR) （2）不加热血清反应素fan'ying's试验（USR） （3）简易玻片沉淀试验(VDRL)
四、防治原则
预防：防鼠、灭鼠 家畜管理 保护水源 预防接种：多价死疫苗
治疗：青霉素（首选）、庆大霉素、多西环素等
第二节 密螺旋体属
致病性螺旋体：
梅毒螺旋体(T．pallidum，亦称苍白密螺旋体) 雅司螺旋体(T．pertenue) 品他螺旋体(T．carateum)
一、生物学性状
形态与染色
形态：细长卷曲，两端尖直，8～14个 致密而规则的螺旋，运动活泼；