实验无菌技术和培养基的配制

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液体培养基; 固体培养基; 半固体培养基;
工 业 微 生 物 与 育 种 学 实 验
宜 宾 学 院
——
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固体培养基; 半固体培养基;
琼脂
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实验室常用培养基
工 • 肉膏蛋白胨培养基:


牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl5g,琼脂15-20g,水
宜 • 《伯杰士细菌系统发育手册》、《真菌鉴定手册》、
宾 学
《酵母鉴定手册》、《放线菌鉴定手册》等工具书

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成绩评定
工 业
• 单独设课,作为一门独立课程严格进行成绩考核。本门

课程成绩评定由平时成绩(80%)+实验理论考试


(20%)组成。

育 • 平时成绩包括下列项目:


微 生
• 调配 过滤 矫正pH
物 与
• 分装过滤

种 学
• 灭菌(一般121.3℃,20-30min)

验 • 鉴定是否有菌
——
宜 宾

放入冰箱冷藏备用


•鉴定是否有菌可将培养基置于37 ℃培养24小时,然
后观察
工 业 微 生 物 与 育 种 学 实 验
宜 宾 学 院
——
培养基:
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分离培养在特定环境中能生长的微生物;
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生 物
二元培养物

蛭弧
育 种




——
宜 宾
病毒和宿主细胞;


纤毛虫、变形虫和粘细菌捕食细菌等;

包扎灭菌,在培养基上进行分离接种操作等;


– (2)设计一个大型综合实验的具体实验方案。
学 实
• 相对应的考核方法为:

– (1)由学生从题库中随机抽取5道题,现场口头回答,每题2分
——

力,教师根据其回答情况评分,一共10分;
宾 学
– (2)开卷,在大型综合实验,即实验四进行之前完成,占10分。
宜 宾 学 院
——
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工 业 微 生 物 与 育 种 学 实 验
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——
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工 业 微 生 物 与 育 种 学 实 验
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——
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(2)培养基制备的一般程序

业 微
(1)微生物培养的常用器具及其灭菌
生 物
(2)培养基配置的一般过程

育 种
(3)选择培养基



——
宜 宾 学 院
1、
(1)微生物培养的常用器具及其灭菌 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。




Petri dish







——
宜 宾 学 院
工 业 微 生 物 与 育 种 学 实 验

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实验安排
工 业 微 生 物 与 育 种 学 实 验
宜 宾 学 院
——
模块 实验项目
学时 备注
培养基的制备 I 微生物的分离纯化
6
必做
8
必做
微生物显微技术
6
必做
曲药中高温芽孢菌的分离及初步鉴定 酿酒微生物生产特性的检测 II 窖(曲)房空气微生物的检测
12 选做 12 选做 12 选做
院 水1000ml;
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•因高压之后pH值会下降0.1左右,所以矫正pH时应比所需的pH高
——
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工 e.加棉塞,包装。
业 微 生 物 与 育 种 学 实 验
宜 宾 学 院
——




育 种
仅适应于该条件的微生物旺盛生长



——

待分离微生物在群落中的数量大大增加



从自然界中分离到所需的特定微生物
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——
宜 营养和生理条件几乎可无穷尽组合

学 院
根据微生物的特殊要求,分离特定已知微生物种类;


– ①实验纪律及准备(20%)
实 验
– ②平时实验操作和技能(25%)
——
– ③实验报告(20%)
宜 宾
– ④实验设计创新能力及其它能力(15%)


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• 实验考试为理论与实践结合的考试,随机从题库中抽取
工 业
题目,分为:
微 生 物
– (1)微生物学实验的基本操作技能,包括根据菌落形态鉴别所属 菌类,制片镜检,选择相应的配方,配制斜面、平板培养基,
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主要参考资料

• 微生物学实验指导:黄秀梨 ,高等教育出版社 ,
业 微
2002
生 物
• 微生物学实验教程:杨革 ,科学出版社
与 育
• 微生物学教程(第2版):周德庆 ,高等教育出版社,

2000


• 《工业微生物实验操作手册》,诸葛健,轻工出版社,

1997。
——
酿酒酵母的诱变及高乙醇耐受性菌株的筛选 12
四大类型菌DNA的提取及PCR扩增
12
选做 选做
百度文库
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实验报告内容

业 微
• 目的要求

物 与
• 实验原理

种 学
• 实验材料
实 验
• 实验步骤
——
宜 宾
• 结果与讨论


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1.1 无菌技术与培养基的制备


1000ml,pH7.0-7.2;

育 • 淀粉琼脂培养基(高氏1号培养基):

学 实 验
可溶性淀粉20g,KNO31g,NaCl0.5g,K2HPO40.5g, FeSO40.01g,琼脂20g,水1000ml,pH7.0-7.2;
——
宜 • PDA培养基:
宾 学
马铃薯(去皮)200g,蔗糖或葡萄糖15g,琼脂15-20g,
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——
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——
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(3)选择培养基
高温下培养:分离嗜热细菌; 培养基中不含N:分离固氮菌; 培养基加抗生素:分离抗性菌;
待分离的微生物生长,其它微生物的生长被抑制
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富集培养
工 业
特定的环境条件
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