亚硝酸盐氮的测定(N-(1-萘基)-乙二胺分光光度法)

亚硝酸盐氮的测定（N-（1-萘基）-乙二胺分光光度法）：

亚硝酸盐是氮循环的中间产物，不稳定，根据水环境条件，可被氧化成硝酸盐，也可被还原成氨。亚硝酸盐可使人体正常的血红蛋白（地铁血红蛋白）氧化成为高铁血红蛋白，发生高铁血红蛋白症，失去血红蛋白在体内输送氧的能力，出现组织缺氧的症状。亚硝酸盐可与仲胺类反应生成具致癌性的亚硝胺类物质，在PH值较低的酸性条件下，有利于亚硝胺类的形成。

水中亚硝酸盐的测定方法通常采用重氮-偶联反应，使生成红紫色染料。方法灵敏、选择性强。所用重氮和偶联试剂种类较多，最常用，前者为对氨基苯磺酰胺和对氨基苯磺酸，后者为N-（1-萘基）-乙二胺和a-萘胺。此外，还有目前国内外普遍使用的离子色谱法和新开发的气相分子吸收法。这两种方法虽然须使用专用仪器，但方法简便、快速，干扰较少。

亚硝酸盐在水中可受微生物等作用而很不稳定，在采集后应尽快进行分析，必要时冷藏以抑制微生物的影响。

1、实验原理

在磷酸介质中，pH1.8±0.3时，亚硝酸盐与对-氨基苯磺酰胺反应，生成重氮盐，再与N-（1-萘基）-乙二胺偶联生成红色染料。在540nm波长处有最大吸收。

2.干扰及消除

氯胺、氯、硫代硫酸盐、聚磷酸钠和高铁离子有明显干扰。水样呈碱性（PH>11）时，可加酚酞溶液为指示剂，滴加磷酸溶液至红色消失。水样有颜色或悬浮物，可加氢氧化铝悬浮液并过滤。

3.方法的适用范围

本方法适用于饮用水、地表水、地下水、生活污水、和工业废水中亚硝酸盐的测定。最低检出浓度为0.003mg/L;测定上限为0.20mg/L亚硝酸盐氮.

4.仪器

分光光度计

5.试剂

实验用水均为不含亚硝酸盐的水

1）无亚硝酸盐的水：于蒸馏水中加入少许高锰酸钾晶体，使呈红色，再加氢氧化钡（或氢氧化钙）使呈碱性。置于全玻璃蒸馏器中蒸馏，弃去50ml初馏液，收集中间约70%不含锰的馏出液。亦可于每升蒸馏水中加1ml浓硫酸和0.2ml

硫酸锰溶液（每100ml水中含36.4gMnSO

4.H

2

O）,JIARU 1~3ml0.04%高锰酸钾溶

液至呈红色，重蒸馏。

2）磷酸密度=1.70g/ml。

3）显色剂：于500ml烧杯中，加入250ml水和50ml磷酸，加入20.0对-氨基苯磺酰胺，再将1.00gN-（1-萘基）-乙二胺二盐酸盐溶于上述溶液中，转移至500ml容量瓶中，用水稀释至标线，混匀。

此溶液贮于棕色瓶中，保存在2~5度，至少可稳定一个月。

注意：本试剂有毒性，避免与皮肤接触或摄入体内。

4）贮备液：称取 1.232g 亚硝酸钠（Na2NO2），溶于 150ml 水中，转移至1000ml 容量瓶中，用水稀释至标线。每毫升含约 0.25mg 亚硝酸盐氮。此溶液贮于棕色瓶中，加入 1ml 三氯甲烷，保存在 2-5℃，至少稳定一个月。贮备液的标定如下：在 300ml 具塞锥形瓶中，移入 50.00ml 0.050mol/L 高锰酸钾溶液，5ml 浓硫酸，用 50ml 无分度吸管，使下端插入高锰酸钾溶液液面下，加入 50.00ml 亚硝酸钠标准贮备液，轻轻摇匀，置于水浴水加热至 70-80℃，按每次 10.00ml 的量加入足够的草酸钠标准溶液，使红色褪去并过量，记录草酸钠标准溶液用量（V2 ）。然后用高锰酸钾标准溶液滴定过量草酸钠至溶液呈微红色，记录高锰酸钾标准溶液总用量（V1）。再以 50ml 水代替亚硝酸盐氮标准贮备液，如上操作，用草酸钠标准溶液标定高锰酸钾溶液的浓度（c1）。按下式计算高锰酸钾标准溶液浓度：亚硝酸盐

c1(1/5KMnO4)=0.0500 × V4 /V3

按下式计算亚硝酸盐氮标准贮备液的浓度：

亚硝酸盐氮(N, mg/L)=(V1c1 − 0.0500 × V2 ) × 7.00 × 1000/50.00

=140 V1 c1 –7.00×V2

式中:c1--经标定的高锰酸钾标准溶液的浓度(mol/L)；

V1—滴定亚硝酸盐氮标准贮备液时，加入高锰酸钾标准溶液总量（ml）；

V2--滴定亚硝酸盐氮标准贮备液时，加入草酸钠标准溶液总量（ml）；

V3—滴定水时，加入高锰酸钾标准溶液总量（ml）；

V4—滴定空白时，加入草酸钠标准溶液总量（ml）；

7.00—亚硝酸盐氮（1/2N）的摩尔质量（g/mol）；

50.00—亚硝酸盐标准贮备液取用量（ml）；

0.0500—草酸钠标准溶液浓度（1/2Na2C2O4，mol/L）。

4) 亚硝酸盐氮标准中间液:分取适量亚硝酸盐标准贮备液（使含 12.5mg 亚硝酸盐氮），置于 250ml 容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液每毫升含50.0µg 亚硝酸盐氮。中间液贮于棕色瓶内，保存在 2-5℃，可稳定一周。

6) 亚硝酸盐标准使用液:取 10.00ml 亚硝酸盐标准中间液，置于 500ml 容量瓶中，用水稀释至标线。每毫升含 1.00µg 亚硝酸盐氮。此溶液使用时，当天配制。

7)氢氧化铝悬浮液：溶解 125g 硫酸铝钾[KAl (SO4)2·12H2O]或硫酸铝[NH4Al(SO4)2·12H2O]于 1000ml 水中，加热至 60℃，在不断搅拌下，徐徐加入 55ml 氨水，放置约 1h 后，移入 1000ml 量筒内，用水反复洗涤沉淀，最后至洗涤液中不含亚硝酸盐为止。澄清后，把上清液尽量全部倾出，只留稠的悬浮物，最后加入 300ml 水，使用前应振荡均匀.

8)高锰酸钾标准溶液（1/5KMnO4，0.050 mol/L）：溶解1.6g 高锰酸钾于1200ml 水中，煮沸 0.5-1h，使体积减少到 1000ml 左右，放置过夜。用 G-3 号玻璃砂芯滤器过滤后，滤液贮存于棕色试剂瓶中避光保存，按上述方法标定。

9)草酸钠标准溶液（1/2Na2C2O4，0.0500mol/L）：溶解经 105℃烘干 2h 的优级纯无水草酸钠 3.350g 于 750ml 水中，移入 1000ml 容量瓶中，稀释至标线.

6、实验步骤

（1）校准曲线的绘制依次吸取亚硝酸盐氮标准使用液0ml、1.00ml、

3.00ml、5.00ml、 7.00ml及10.00ml ，至50ml比色管中，用水稀释至标线，然后加入1.0 ml显色剂密塞，混匀。显色剂，至标线，然后加入1.0 ml显色剂，密塞，混匀。静置20 min， 1cm比色皿于波长540 nm处比色皿，静置20 min， 1cm比色皿，于波长540 nm处，以水为参比，测量吸光度。水为参比，测量吸光度。从测得的吸光度，从测得的吸光度，减去零浓度空白管的吸光度后，获得校正吸光度绘制曲线。

（2）水样的测定• 当水样pH≥11时，可加入1滴酚酞指示液，边搅拌边逐滴加入（1+9）磷酸溶液，至红刚消失。（水样如有颜色和悬浮物，加入2 ml 氢氧化铝悬浮液，搅拌、静置、过滤，弃去25 ml初滤液初滤液。弃去25 ml 初滤液。• 分取经预处理的水样入50 ml比色管中（分取经预处理的水样入50 ml比色管中比色管中（如含量高，则分取适量，用水稀释至标线），），加量高，则分取适量，用水稀释至标线），加1.0 ml显色剂，然后按校准曲线绘制的相同的步骤操作，测量吸光度。经空白校正后，步骤操作，测量吸光度。经空白校正后，从校准曲线上查得亚硝酸盐氮含量。准曲线上查得亚硝酸盐氮含量。

（3）空白试验用实验用水代替水样，用实验用水代替水样，按相同步骤进行全程测定。

7、计算

亚硝酸盐氮（mg/L）亚硝酸盐氮（N，mg/L）= m/V