水迷宫(Ethovision XT)的使用与维护-陈杰-王汉蓉

标 准 操 作 规 程

Standard Operating Procedure

1 目的

本规程用于生殖毒性试验中F1代大鼠学习记忆能力的测定。

2 适用范围

本SOP适用于从事Morris水迷宫（Ethovision XT）管理与使用的人员，以上人员应当阅读、理解、掌握并遵守本SOP。

3 用语说明

无。

4 正文

4.1 Morris水迷宫组成

水迷宫测试软件1套，大鼠圆形测试桶1套，视频采集卡1块，CCD摄像头1个，变焦镜头1组，万向支架1个，12V电源1个，支架1套，排水机1台，配套电缆1套，跳台1个，电脑1台（如下图）。

4.2 安装

按照Morris水迷宫（Ethovision XT）说明书安装调试。将水放入测试桶，水的深度超过跳台约1.5 cm。

4.3 使用方法

4.3.1 启动Ethovision XT

点击file菜单的new experiment。

命名新建的试验并选择保存位置。

4.3.2试验基本设定

4.3.2.1设定试验的跟踪方法（建议选择center-point detection）和视频源

对于实时采集的数据设定为live tracking，选择好相应的视频信号输入口，如果需要存储录像文件的话，点击settings按钮，在source下拉菜单里面选择Euresys PICOLO

DILIGENT sn/2541-VID4选项即可。其他选项建议保持默认设置。

4.3.2.2设定实验列表和独立变量

点击setup菜单的trial list

点击add trials按钮并输入实验动物的数量

4.3.2.3图像采集区域设定

点击setup 的arena settings，按照提示会进入到如下图像抓取界面。

点击grab按钮。

根据所用水迷宫的形状选择相应的画图工具，点击3点画圆工具，在不超出迷宫边界的内部尽量画一个大的圆。

点击zone group1，根据需要分析的区域类型用直线工具将圆均分为4个区域，再用圆形根据将平台标记出来。

点击label zone按钮给各个区域命名。各个区域的箭头一定要指在相应的区域内部。

点击calibration按钮，点击确定关闭软件弹出的提示。点击尺子工具，选择水面所

在的位置画两条正交的线，线长等于动物活动平面的直径。最后点击Validate Arena Setting结束图像采集区域设定。

4.3.2.4试验条件控制

根据实验的情况增加时间控制条件，位置控制条件等，如果需要用与或逻辑，可以加入operator并进行相应的设定。

例如下图，点击setup的trial control settings，点击condition/In zone(1) 中的settings，选择Duration>=3.00s，点击condition/Time(1) 中的settings，选择After a delay of 120.0secs，添加condition/In zone(2)，选择When center-point is in platform Duration>=4.00s，再添加operator(1)选择Any input True，将Action/Start track分别用箭头指向condition/Time(1)和condition/In zone(2)，将condition/Time(1)和condition/In zone(2)共同用箭头指向operator(1)，最后将operator(1)用箭头指向Action/Stop track，其余均保持默认设置。

4.3.2.5检测参数的设定

点击setup的detection settings。放入一只动物，如果软件能够识别动物的话，动物会被黄色区域覆盖，动物的中点会有一个红色的点，动物的运动轨迹会有一条红色的线。如果上述3个没有出现，需要调节其他的设置选项。比如动物比背景亮或者暗，对比度的数值（一般设置为“20”to“255”），当前帧所占的比重等。一般对于大动物的采样频率设置为5即可，小动物设置为8即可。

采样频率

4.3.3 采集数据

取出动物。点击show independent variables按钮输入实验动物编号。点击绿色圆点的记录按钮开始采集数据，与此同时放入该实验动物（放入动物后，试验人员迅速将手臂退出圆形迷宫区域），软件开始记录。检测完毕后，放入下一只动物重复以上采集动作直至所有动物数据采集完毕。

4.3.4 筛选数据

4.3.4.1轨迹筛选

点击select的data profile，根据需要分析的数据进行条件筛选，选择Nesting中的In zone放在箭头中间，并在In zone中选择arena1、zone1、zone2、zone3、zone4和platform。

4.3.4.2分析参数选择

点击select的analysis profile，根据需要分析的数据进行选择，常用的有distance moved, velocity, in zone等。

对于各个参数，都可以选择不同的统计参数。

4.3.5 分析及导出数据

4.3.

5.1分析数据

点击analysis的calculate statistics，软件自动计算我们需要的数据结果，如果需要更

改表格内容及属性，点击右上的show/hide按钮选择相应的选项即可。

4.3.

5.2导出数据

点击export的analysis output，选择相应地数据保存格式及位置，点击ok按钮即可导出。

4.4 维护保养

仪器的维护保养应由仪器责任人或其指定人员完成。